INFORME Desnaturalizacion de Proteinas
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Informe de Laboratorio N°7 Desnaturalización de Proteínas
INFORME DE LABORATORIO N°7
DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS ___________________________________________________________________________________
INTRODUCCIÓN
Las proteínas son elementos fundamentales. Éstas biomoléculas formadas por C!"N seencuentran en un sin n#mero de estructuras
or$%nicas de nuestro diario &i&ir como el propiocuerpo ' diferentes alimentos (ue proporcionan alos metabolismos uno de los pilares elementales para su correcto funcionamiento. )s este por e*emplo un moti&o para buscarlas ' detectarlas.
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Los cambios ambientales o los tratamientos(uímicos pueden causar una desor$anización enla conformación natural de una proteína a esto sele llama desnaturalización. La ener$ía necesaria para causar este proceso es con frecuencia mu' pe(ue+a e(ui&alente a la desor$anización en treso cuatro puentes de ,idro$eno.
Pre&iamente en la e-periencia de laboratorio se
,an obser&ado los cambios &isibles de sustancias proteicas al ad,erirles sustancias (ue conlle&arona su desnaturalización.
)n el presente informe se ,a de analizar ladenominada /eacción de 0iuret1 en la (ue elcompuesto conocido como 2/eacti&o de 0iuret34sulfato de cobre en una base fuerte5 reacciona
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con los enlaces del péptido ' cambia el color
cuando entra en contacto con otra sustancia enotras palabras la reacción nos permite detectar los enlaces peptídicos ' así obser&ar a simple&ista las proteínas.
6 tra&és del desarrollo del presente informe presentamos información elemental sobre laestructura de la proteína ' su implicancia a ser
desnaturalizada por di&ersos factores mostrando
lo aprendido durante la pr%ctica así como también profundizamos in&esti$ando en otros mediossobre otras in(uietudes.
JUSTIFICACÓN
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La realización de esta pr%ctica es si$nificati&a 'a
(ue nos permite comprender teórica 'e-perimentalmente uno de los procedimientosm%s trascendentales como lo es ladesnaturalización de proteínas de compuestosconocidos cotidianamente. 6dem%s de recordar laimportancia de las proteínas para nuestroor$anismo.
OBJETIVO GENERAL:
"bser&ar el comportamiento de las proteínas desustancias conocidas como la $elatina la clara de,ue&o ' la alb#mina en diferentes medios4temperatura P! e-tremos ' sol&entes or$%nicos5' determinar los cambios en su estructura.
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OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
Comprender el concepto de Desnaturalización delas proteínas ' sus consecuencias.Conocer los a$entes (ue inter&ienen en ladesnaturalización de una proteína.Identificar al$unas de las pruebas paradesnaturalizar proteínas.6nalizar las reacciones de 0iuret suscomponentes ' efectos.
/ecordar la importancia de las proteínas paranuestro or$anismo.
MARCO TEORICO
Las proteínas son macromoléculas compuestas por carbono ,idró$eno o-í$eno ' nitró$eno. Lama'oría también contienen azufre ' fósforo. Lasmismas est%n formadas por la unión de &arios
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amino%cidos unidos mediante enlaces peptídicos
las cuales tienen una $ran importancia a ni&el bioló$ico pues permite muc,os procesos 'facilita muc,as reacciones &itales. )l monómero(ue forma a las proteínas se conoce comoamino%cido. Los amino%cidos son moléculas (ueen uno de sus e-tremos tienen un $rupo funcional6mino 48N!95 ' en el otro tienen un %cidoCarbo-ílico 4C""!85. 6dem%s los amino%cidos
tienen una cadena carbonatada 4/5 de lar$o '
componentes &ariables. )l proceso de polimerización de las proteínas es decondensación en el cual se libera a$ua. (Devlin,
20004)
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:omadade; Bioquímica (Devlin, 20004)
Estructur !" Pr#t"$%s
6 pesar de saber (ue las proteínas son la unión demuc,os amino%cidos el orden de estos ,ace (uelas propiedades de las proteínas también &aríen.
Estructur Pr&'r& !" Pr#t"$%s
Corresponde a su secuencia de amino%cidos. )staestructura se mantiene unida por los enlaces
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peptídicos entre las moléculas de amino%cidos.
)n otras palabras esta estructura indica la clase 'orden de los amino %cidos en la molécula
:omada de; Bioquímica (Devlin, 20004)
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Estructur S"cu%!r& !" Pr#t"$%s
<e refiere a la disposición de las cadenas. )stadisposición podría ser de l%mina ple$ada o de,élice. )sta estructura es la forma (ue ad(uiere lacadena debido a los puentes de ,idro$eno entre$rupos amídicos.
:omada de; Bioquímica (Devlin, 20004)
Estructur T"rc&r& !" Pr#t"$%s
<e refiere a las relaciones espaciales de lasunidades de amino%cido (ue est%n relati&amenteseparadas unas de otras en la cadena proteica.)sta es la forma (ue ad(uiere una proteína debido
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a las relaciones (ue se establecen entre
los $rupos /8libres de los diferentesamino%cidos.
:omada de; Bioquímica (Devlin,
20004)
Estructur Cut"r%r& !" Pr#t"$%s
<e presenta solo en las proteínas (ue presentam%s de una cadena polipeptídica. <e consideracomo la unión mediante enlaces débiles
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intermoleculares de &arias cadenas polipeptídicas
de estructura terciaria formando un comple*oestable. =n e*emplo es la estructura de la,emo$lobina. (Devlin, 20004)
:omada de; Bioquímica (Devlin, 20004)
D"s%tur(&)c&#% !" Pr#t"&%s:
)s una desnaturalización bio(uímica es decir un
cambio estructural de proteínas (ue lle&a a la perdida de la estructura nati&a de la molécula deestas sustancias. )n la desnaturalización la proteína comienza a ple$arse perdiendo su formaori$inal. La pérdida de esta conformaciónespacial ,ace (ue la proteína no pueda cumplir con su función bioló$ica en el or$anismo ' es lo(ue se conoce como desnaturalización de
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proteínas. Por e*emplo un enzima pierde su
función catalítica. :ambién pero no siempre &aacompa+ado de cambios en las propiedadesfísico8(uímicas siendo lo m%s com#n la pérdidade solubilidad. (Melo y Cuamatzi, 200)
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:omada de Bioquímica de los !rocesos
meta"ólicos (Melo y Cuamatzi, 200)
A*"%t"s !"s%tur(&)%t"s+ ,A*"%t"s -$s&c#s.
. C(#r: La sensibilidad de las proteínas a ladesnaturalización térmica depende de numerososfactores tales como la naturaleza ' concentraciónde proteínas la acti&idad de a$ua el p! la fuerzaiónica ' la naturaleza de los iones presentes.
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/. Fr$#: Las ba*as temperaturas pueden inducir ladesnaturalización de muc,as proteínas. 6sí
enzimas (ue son estables a una temperatura
ambiente pueden inacti&arse a > ?°C ' al$unas proteínas se a$re$an ' precipitan cuandoalcanzan temperaturas de con$elación.
c. Trt'&"%t#s '"c0%&c#s: Numerosostratamientos mec%nicos tales como amasado olaminado (ue se aplican al pan ' otras masas
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pueden desnaturalizar las proteínas por las
fuerzas de cizallamiento (ue ori$inan.A*"%t"s 1u$'&c#s
. 2c&!#s 3 /s"s: )l p! del medio en el cualest% la proteína tiene influencia considerable en el proceso de desnaturalización. La ma'oría de las proteínas son estables para una determinada zona
de p! ' frecuentemente se desnaturalizan cuando
se someten a&alores de p! mu' altos o mu' ba*os en al$unos casos la proteína recupera suacti&idad natural cuando el p! &uel&e al &alor enel cual la proteína es estable. 4Durst @ AoBel9>>75
/. M"t("s: Los iones met%licos alcalinos 4sodio potasio5 sólo reaccionan de una forma limitada
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con las proteínas mientras (ue los alcalino8
térreos como el calcio ' el ma$nesio son m%sreacti&os.
c. S#(uc&#%"s cu#ss !" c#'4u"st#s#r*0%&c#s: arios compuestos or$%nicos talescomo la urea ' las sales de $uanina contribu'enen soluciones concentradas 4 a E F5 a la rupturade enlaces ,idró$enos ' pro&ocan con intensidad
&ariable una desnaturalización de las proteínas.
(#$#$B, 20%%)
La desnaturalización de proteínas puede ser re&ersible o irre&ersible. )sto depende del $radode cambios estructurales (ue ,a'a sufrido la proteína durante el proceso de desnaturalización.<i una desnaturalización es re&ersible la proteína puede &ol&er a su conformación espacial
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funcional si el a$ente desnaturalizante desaparece
el medio o de*a de e*ercer su efecto. )n el caso de(ue la desnaturalización de una proteína seare&ersible la reestructuración de la proteína de&uelta a su conformación espacial funcional puede ser lenta puede durar desde ,oras ,astadías. (Melo y Cuamatzi, 200)
)l proceso opuesto a la desnaturalización recibe
el nombre de re8naturalización.
MATERIALES 5 REACTICVOS
MATERIALES
:ubos de ensa'oAradilla para tubos de ensa'o
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0eacBerPlaca calefactora6$itador de &idrioPipetaPipeteador )spectrofotómetroPapel indicador
REACTIVOS
Patrones de alb#mina 4>9m$Gml ' Hm$Gml5<olución salina de $elatinaClara de ,ue&o!N")tanol6cetona/eacti&o de 0iuret
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CONCLUSIONES:
Fediante este laboratorio se identificó elcomportamiento de las diferentes proteínassometidas a pruebas de desnaturalización por sol&entes or$%nicos calor ' p! e-tremosutilizando reacti&os como; acetona ' %cidonítrico entre otros ' muestras problema como;alb#mina $elatina ' clara de ,ue&o.
Por medio de este laboratorio de aprendió a
determinar la presencia de proteínas a tra&és de la&aloración cualitati&a con el reacti&o 0iuret prueba (ue se basa en la formación de uncompuesto de color &ioleta debido a laformación de un comple*o de coordinación entrelos iones Cu9J ' los pares de electrones nocompartidos del nitró$eno (ue forma parte de losenlaces peptídicos de las proteínas.
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La absorbancia es directamente proporcional a la
concentración por tanto siempre (ue laconcentración de colorante o muestra se aumentela absorbancia aumenta también por lo tanto presentan una relación lineal.
6 ma'or cantidad de proteína ma'or cantidad de producto de reacción ' por lo tanto ma'or intensidad de color.
Fediante la ecuación de re$resión lineal es
posible calcular la concentración de una soluciónde una sustancia conocida.
BIBLIOGRAFÍA
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Durst !. @ AoBel A. 49>>75. &uímica
or'nica e!erimental. 0arcelona;/e&erté <.6.
Felo . @ Cuamatzi ". 49>>75. Bioquímica de los !rocesos meta"ólicos.
0arcelona; /e&erté <.6.
<I<I0. 49>KK5. 0iblioteca Di$ital de la
=ni&ersidad de C,ile. 6$entes físicos '(uímicos. en líneaM. ec,a de consulta;K7 de "ctubre del 9>KHM. Disponible en;,ttp;GGmazin$er.sisib.uc,ile.clGrepositorioGlbGcienciasO(uimicasO'OfarmaceuticasGpenacc,iottii>KGcapitulo>KG>7a.,tml
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De&lin :. 49>>5. 0io(uímica. 0arcelona
)spa+a. en líneaM. )d. /e&erté <.6/oca P. ' /odrí$uez 6. 49>>5. Bioquímica t*cnicas y m*todos. Fé-ico.)ditorial !élice.