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I. INTRODUCCIN

Las enterobacterias, como su nombre lo indica, son un grupo de bacterias

Gram negativas. Entre los principales gneros tenemos a Escherichia sp.,

Shigella sp., Salmonella sp., Proteus sp., Enterobacter sp., Citrobacter sp.,

Klebsiella sp., Yersinia sp. y Serratia sp.

Por lo general, la mayora de bacterias entricas son microorganismos

patgenos tanto para animales, el ser humano y plantas. Es por ello que el

estudio detallado y el aislamiento de cada uno de los gneros de esta

familia son de vital importancia para el rea de la medicina. Existen tambin

enterobacterias con importancia industrial, de las cuales podemos destacar

a la bacteria ms estudiada y utilizada en muchos de los procesos:

Escherichia coli.

Dada la necesidad de identificar rpidamente a los distintos gneros de

esta familia de bacterias, sobre todo por su patogenicidad, es necesario

recurrir a las diferencias en el metabolismo de las bacterias. Para ello, se

cuentan con pruebas bioqumicas que nos permiten identificar, sin dejarlugar a dudas, el gnero de bacteria entrica con el cual uno se enfrenta.En la actualidad incluso existen kits de identificacinrpida para llevar a

cabo este proceso.

Las pruebas bioqumicas, generalmente determinan la actividad de una

va metablica, partir de un sustrato que se incorpora en el medio de cultivo

y que la bacteria al desarrollarse, la modifica o no.

En el presente informe se muestran los resultados de las pruebas querealizamos a una Enterobacteria para lograr identificarlo. Estas pruebas

fueron la de la capacidad de utilizar citrato, la capacidad de descarboxilar

lisina, la capacidad de fermentar lactato, la capacidad de producir H2S, la

capacidad de producir CO2y fermentar glucosa, la capacidad de degradar

triptfano, la capacidad de degradar urea y la capacidad de reducir nitratos.

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II. MARCO TERICO

III. PARTE EXPERIMENTAL

IV. OBSERVACIONES Y RESULTADOS

Luego de incubar la muestra nmero de Enterobacteria 04por 24 horas a

una temperatura de 37C se observaron los cultivos en diferentes medios.

A. DEGRADACIN DE CARBOHIDRATOS

A.1. Agar klingler

Se observ el pico de flauta de color rojo y la profundidad color

ligeramente negro.

Figura 1. Resultado de la Enterobacteria nmero 04 en

agar klingler luego de incubar por 24 horas a 37C.

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A.2.Agar citrato de Simmons

No se observ cambio de color, pero si crecimiento de color

amarillo.

B. DEGRADACIN DE AMINOCIDOS

B.1. Caldo Indol (degradacin de triptfano)

Se observ un anillo color rojo fucsia luego de agregar el reactivo

de Kovacs.

Figura 2. Resultado de la Enterobacteria nmero 04 luego deincubar en agar citrato de Simmons por 24horas a 37C.

Figura 3. Resultado de la Enterobacteria nmero 04 en CaldoIndol luego de incubar por 24 horas a 37C y luego de agregar elreactivo de Kovacs al tubo de ensayo.

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B.2. Agar lisina (descarboxilacin de lisina)

Si se observa cambio de color de amarillo a

purpura

C. DEGRADACIN DE UREA

Se observ un cambio de amarillo (color inicial) a

color grosella.

Figura 4. Resultado de la Enterobacteria nmero 04 en agarlisina luego de incubar por 24 horas a 37C.

Figura 5. Resultado de la Enterobacteria nmero 04 en agarUrea luego de incubar por 24 horas a 37C.

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D. CALDO NITRATO

No se observ cambio cuando se le agreg el zinc, luego de

aproximadamente 24 horas de incubacin.

E. AGAR MOVILIDAD

No se observ que la Enterobacteria se desplazara por el tubo

de ensayo, solo se observ un crecimiento en el punto inicial

de siembra.

Figura 6. Resultado de la Enterobacteria nmero 04 en caldo nitratoluego de incubar por 24 horas a 37C.

Figura 7. Resultado de la Enterobacteria nmero 04 enagar Urea luego de incubar por 24 horas a 37C.

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microorganismo: muestra numero 04

glucosa +

lactosa -

H2S +

gas -

Asimilacin de citrato -

Descarboxilacin de lisina -

Degradacin de triptfano +

Degradacin de la urea + (creo que cambio de

color )

Reduccin del nitrato +

Movilidad -

V. DISCUSIONES

Segn los resultados obtenidos en la prueba de identificacin bioqumica de

Enterobacterias, se hacen los siguientes anlisis para cada una:

A. Degradacin de Carbohidratos

a.1) Agar de Kligler.

Koneman (2006) nos dice que si no se presenta fermentacin de

hidratos de carbono tanto el pico de flauta como la profundidad

sern alcalinas, y que es caracterstico de bacterias no

fermentadoras como Pseudomonasaeruginosa

De igual manera, dice que si el pico es alcalino (color rojo) y la

profundidad cida (color amarillo), se tratar de bacterias que

slo fermentan la glucosa tales como algunas especies deShigella.

Cuadro 1. Resultados de las reacciones de la muestra deEnterobacteria nmero 04.

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Si el pico de flauta es alcalino (color rojo) y la profundidad cida

pero negra, se tratar de bacterias que fermentan glucosa, no

fermentan lactosa y producen sulfuro de hidrgeno. Caracterstico

de bacterias como algunas especies de Salmonella, de Citrobacter

y de Proteus.

El ltimo caso sera si tanto el pico de flauta como la profundidad

fueran cida-cida (todo vir color amarillo), con esto se puede

afirmar que la bacteria ferment glucosa y lactosa, lo cual es

caracterstico de coliformes comoEscher ichia co l i y las especies

del complejo Klebsiel la-Enterobacter .

Fermentacin de glucosa:Se determina observando el fondo delagar. De igual manera a Koneman, Prats (2005) nos dice que una

reaccin positiva ser cuando el fondo presente un color amarillo,

lo que se da debido a la acidificacin del medio.

Tambin dice que si el fondo es de color rojo, la fermentacin ser

considerada como negativa.

En los resultados de la figura N tenemos que nuestra muestra de

enterobacteria presenta un ligero fondo negro, por lo que no se

puede apreciar todo el fondo. Sin embargo, a los alrededores seve un color entre rojo y amarillo, lo que no permitira definir si es

glucosa (+) o glucosa (-).

Otra opcin sera aceptar la tercera alternativa expuesta por

Koneman, que dice tener pico de flauta alcalino, profundidad cida

y produccin de H2S; lo que nos llevara a pensar que nuestra

bacteria es posiblemente una Salmonella, Citrobacter o Proteus.

Las que seran de glucosa (+), lactosa (-) y H2S (+). Pero para esto

se debe continuar con los anlisis.

Fermentacin de lactosa: Esta se determina observando la

pendiente o pico de flauta del tubo. Prats afirma que una pendiente

amarilla significa que la lactosa ferment, y una pendiente roja

sera que no ferment.

En nuestros resultados se observa un color rojizo en la parte

superior, por lo que afirmaremos que es Lactosa (-). Es no

fermentadora, no coliforme.

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Produccin de H2S: debido al ennegrecimiento del medio, e la

parte del fondo como dbilmente a lo largo de la picadura, se

puede decir que la bacteria es una H2S (+). Algunos ejemplos de

estos que nos da Koneman son de los gneros: Edwardsiel la,

Salmonella, Citrobacter , Proteus.Agregar algo del marco terico, cuando lo tenga -.-

Fermentacin de gas: Segn Prats, si el medio presenta

formacin de burbujas o desprendimiento del agar de las paredes

del tubo, se considerar que hubo produccin de gas.

En los resultados se aprecia la ausencia tanto de las burbujas

como del desprendimiento de agar, entonces la bacterias tambin

es Gas (-).

Quizs, tambin agregue algo del marco terico e indicar las

figuras.

a.2) Agar Citrato de Simmons

Asimilacin de citrato:Segn Prats, si el microorganismo crece y

alcaliniza el medio, se observar que el color vira de verde a azul;

con esto se dir que es Citrato (+). De lo contrario, si no se

observa crecimiento y el medio permanece verde, se tratar de

una bacteria Citrato (-).

En los resultados se aprecia la permanencia del color verde, y

tambin la ausencia de crecimiento de microorganismos en ella.

Con esto, se puede afirmar que nuestra bacteria es una Citrato (-)

y que no usa citrato como fuente de carbono. Algunos ejemplosde estos Citrato (-), mencionados por Granados y co l (1997)

son Escher ichia col i , Shigellasp y Edwardsiel lasp.

Mencionar el nmero de la figura del resultado

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B. Degradacin de aminocidos

b.1) Caldo Indol

Degradacin del triptfano: bla blabl

Tras aadir el reactivo de kovacs, se dio lugar a una coloracin

roja. Se sabe que es un resultado positivo cuando se da el reactivo

color rojo cereza, y ser negativo si el reactivo permanece

amarillo. Entonces, la bacteria ser Indol (+).

Agregar algo del marco terico. Ejemplos de bacterias Indol (+)

b.2) Agar lisina

Descarboxilacin de la lisina: bla blabl

La presencia de una base y pendiente violeta indicar que se dio

la produccin de lisina descarboxilasa. Adems, la formacin de

un precipitado negro (fundamentalmente en la base) ser

evidencia de produccin de H2S (Prats).

En la figura N se observa la predominancia del color amarillo a lolargo del tubo, por lo que la bacteria se considera como una lisina

descarboxilasa (-).

C. Degradacin urea

Inicialmente se tuvo un color no adecuado para la muestra, ya que se

supone debi ser amarilla, pero se trabaj con un caldo urea color

prpura. Debido a esta variabilidad, se dio un da ms a la incubacin de

la muestras. Si presentara el color rosado grosella, se dir que es Ureasa

(`+).

Segn lo observado, el color permaneca constante.

Falta averiguar cmo qued al final, en el segundo da. Segn eso se

definir si es (+) o (-)

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D. Caldo nitrato

Entre los resultados se tiene que un color rosado grosella indicar que es

nitrato reductasa (+), mientas que si permanece de color amarillo, se

hablar de un nitrato reductasa (-).

Al momento de sacar las muestras para la identificacin se apreci que el

caldo segua amarillo, por lo que se descartar que sea totalmente una

reaccin negativa, debido a que no form el color rojo-grosella al agregar

el Zn.

Agregar del marco terico, y como el profe dijo que todas eran (+),

entonces se tendr eso como resultado a pesar de que no lo llegamos a

ver :S, o ya veremos que nos dice la tcnica.

E. Agar movilidad

Prats nos menciona que la movilidad se pone en manifiesto por el

crecimiento de la bacteria (enturbiamiento) desde la picadura donde se

sembr a travs de todo el agar blando.

De igual manera, nos dice que se tratar de una movilidad (+) si el

crecimiento es por todo el agar blando, y ser movilidad (-) si el

crecimiento es slo en la picadura de la inoculacin.

En las figura N, se observa que el cultivo no enturbia el medio, y que

adems slo crece en la picadura; con esto y lo acordado por Prats, se

identifica a la bacteria como una con movilidad (-).

Falta revisar con la tcnica si realmente no tuvo movilidad!

Entao, falta buscar una tabla (que ir en el marco) de la identificacin de

Enterobacterias y concluir cual es nuestra muestra a partir de los datos obtenidos:

Glucosa, tentativamente (+) pero el color negro no deja apreciar la formacin del

amarillo por lo que tambin podra ser glucosa (-)

Lactosa (-), es la que slo se mira en la pendiente

Citrato (-)

H2S (+)pero dbilmente

Indol (+)

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Lisina descarboxilasa (-)

Ureasa, lo ms probable que haya sido (-)

Nitrato reductasa (+), porque el profe dijo eso para todas XD

Movilidad (-),porque no hubo enturbiamiento ni desplazamiento!

VI. CONCLUSIONES

Segn los datos obtenidos y la tabla de identificacin, se

presume que la muestra de la bacteria, rotulada como

nmero 4, es unata tatatn . Shigellao Salmonellajaja XD

Algunos errores de los resultados, que no permitieron definir

completamente la bacteria seran aquellos errores aleatorios

o sistemticos hechos por el personal.

VII. CUESTIONARIO

VIII. BIBLIOGRAFA

KONEMAN. 2006

PRATS. 2005

GRANADOS P., R y Carmen V. P. 1997. Microbiologa,

Volumen 1. 1ra edicin. Editorial THOMSON. Madrid, Espaa.

*ORGANIZACIN DE ACTIVIDADES ( no estudiar a deshoras )

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*ESTUDIAR LA MATERIA DIA DIA

*IR A CLASES

*