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  • 7/25/2019 Indice hepatosomatico

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    Revista de nvestigacin

    y esarrollo Pesquero

    NI?

    6 Diciembre 98

  • 7/25/2019 Indice hepatosomatico

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    R ev. Invest. D es. P esq. N Q

    6: 117 - 129 (1986)

    11 7

    ESTUDIO DE LAS CONCENTRACIONES DE LOS ACIDOS

    NUCLEICOS (RNA, DNA) EN MUSCULO BLANCO

    E HIGADO DE LA LISA

    lvlugil brasiliensis

    A LO LARGO DE SUS PERIODOS DE REPOSO

    Y M ADURACION GONADAL

    por

    A NfsA L R . O OR OZZI

    *

    y GLOR IA DUHALDE DE INTR 07 ZI *

    P ala bra s c la ve s: R N A

    -

    DNA

    -

    hgado

    -

    msculo

    -

    Mugil b ra si li en si s

    Key words: RNA

    -

    DNA

    -

    liver

    -

    muscle

    -

    M ug il b ra silie ns is

    SUMMARY

    The concentration of nucleic acids (R NA and D NA ) w as review ed, as w elll:. as

    the RNA/DNA coefficient, in white muscle and liver of

    Mugil b ra s il ien si s

    adult

    remales caught at the M ar Chiquita Coastal Laggon (37.30' S, 57. W W ) between

    S ::p te mb er a nd M arc h.'

    Salinity varied betw een 1.1 and 5 % .. M inim um tem perature w as recorded in

    Septem ber (8. C) and the m axim un ocurred in February (26,5. C). The correlations

    between RNA, DNA and RNA/DNA and the IGS and IHS were duly established.

    IGS was below 1 in a11 of theindividuals corresponding to the September-

    February period, whilst in that lor M a.rch-A pril, it varied between 0.39 and 9. IH S

    had its m axim un values'from Septem ber to N ovem ber (1.85

    -

    2 .1 8), w ith a 'd ec re ase

    d ur in g De cem1:e r- Fe br ua ry ( 0.8 9

    -

    1.04) te register, in M arch-A pril, a SO D1l~w hat

    higher value (1.24 - 1.33). N o significant variations w ere found in RN A; D NA

    concentrations, Dor in the RNA/DNA in musc1::, tbroughout al1 of the reviewed

    periodo

    C on tra ry to w ha t o bse rv atio ns in o th er s pe cie s

    Lepomis macroch iru s

    an d

    Clarias

    batrachus

    have show n, L e., a decrea~~ in m uscle R NA /D NA during gonadal m atura-

    tion,

    Mugi l bras i liens i s

    w ould seem to m aintain a p roteic b alan ce in eq uilib riu m d urin g

    the said periodo Non-utilization o muscular proteic reserves could be due to an

    increased ingesta, both prior and during part of gonadal maturation and to a

    preferential u tilizatio n of lipids accu mulated for satisfy in g b asal an d m otion e nerg y

    demands.

    No significant correlation was found between IGS and the RNA, DNA and

    R NA /D N A m us cu la r v aria ble s.

    Low w ater tem peratures from S~ptem ber to N ovem ber (8.4

    - 14.2 C) could be

    the cause for a reduced ingesta and for a negative m uscuIa.r proteic balance, w hich

    '

    L ab or ato rio d e F isio lo ga

    -

    In stitu to N ac io na l d e In ve stig ac i n y ~ sarrollo P esq uero

    (INlDEP) - C asilla de C orreo 175 - 7600 M ar del Plata -

    Repb li ca Argen ti na

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    11 8

    AN BAL R. INTROZZI

    y

    OLO RIA D UH ALD E DE IN TRO ZZI

    m a y b e c o v e r e d u p b y t h e a c c u m u la t io n o f nucleolar R NA and the corresponding

    m erease in R NA /D NA that w ould oceur at the above m entioned tem p:ratures.

    In individuals w ith an lO S

    1 and as a eonsequenee of the intense liver

    s yn th es is o f p ro te ie e le me nts n ee de d fo r g on ad al m atu ra tio n, a p ote ntia l-ty pe in ere ase

    of RNA and RNA/DNA occurs in that organ in respect to the increase of lOS. No

    significant relation ship has been found to exist between IHS and lOS, Le., the

    merease in hepatic synthesis does not modify its size; this may be due to the faet

    that the liver does not aet as a depository organ of proteie reserves beeause its

    synthesis velocity w ould be equival> ent to the speed under w hich proteins pass on to

    th e b lo od .

    P ossibly , d urin g the m igration . to spa.w n effeeted b y Mugil b ras i/ iens is toward

    the open sea, a m arked reduetion of m uscular R NA /D NA oceurs, due to the fastening,

    to the exten sive m uscu lar effort an d the m aintenan ce o f th e hy dro-salin e eq uilib riu m.

    the en erg y so urce of w hich are p roteins.

    INTRODUCCION

    L os m uglidos son peces de gran im portancia

    p ..nla acuicu ltur a de reas t rop ica les y sub trop ica -

    l( ;'s (Ba rd ach, ( 1972 ). E llo e s d eb ido a l b ajo cos to

    de su rgim en alim entario (detritvoro y/o her-

    vboro), su am plio rango de tolerancia a la sali-

    nidad (O a 60 % 0) (Lee y M enu, 1981) y tem pe-

    aturas (7 a 30 C ) (M oore, 1976), rpida adap-

    tacin m etablica (H ochachka y Clayton H o-

    chachka, 1973, M oore, 1976) y alta tasa de in-

    c orp ora ci n p ro te ic a e n msc ulo (H asc hemeye r

    y Sm ith, 1979).

    En A mrica del Sur se han llevado a cabo cul-

    tiv os y e stu dio s b io l gic os d el Mugil bras il iensis

    e n Colombia (Ouz erd a

    e t a l.,

    1977) (O uzerda y

    :\1 erc ad o, 1 97 7) y B ra sil (E sk in az i-L ec a

    et al.,

    1980, Paiva M aia y Paiva Rocha, 1980, Paiva

    R ocha y O kada, 1980), en los cuales se dem ues-

    tra q ue d ic ha e sp ec ie p re se nta ta sa s d e so bre vid a

    y crec im ien to m s eleva da s q ue o tro s mug ilid os

    naturales de la zona.

    L a m adu rac:n g on ad al d e los muglido s oc u-

    rre en ag ua s d ulce s o sa lo bres (T ho mpso n, 1 96 3;

    D indo y M c O regor, 1981). U na vez alcanzado

    un grado de m aduracin variable segn la espe-

    c ie , m igr an hac ia aguas ma rin as c erc an as a l bor de

    de la plataform a continental donde se produce

    el desove y a los 45 a 90 das ingresan a aguas

    dulces o salobres los juveniles de 20 a 30 mm

    L. T. (Kesteven, 1953, Arnold y Thompson,

    1958).

    En la costa atlntica de C olom bia se encuen-

    tran n um eroso s c ard men es de juv en iles de M.

    brasiliensis en salinidades del 28 a 34 %0 (Ou-

    zerda y M ercado, 1977). En nuestro n1edio he-

    mos v erificad o e l in gre so d esd e ag uas m arina s a

    la albfera de M ar Chiquita de juveniles de 18

    a 25 m m L.T ., por lo cual suponem os que la lisa

    llevara a cabo una, m igracin sem ejante a la de

    otros m uglidos, efectuando el desove en reas

    marin as a n n o d ete rm in ad as.

    N o habiendo sido posible la captura de ejem -

    plares m ad uros d ura nte la m igra ci n an ted ic ha ,

    e l p re se nte stu dio q ue da lim ita do a lo s p ero do s

    de ' r ep oso y m ad ura ci n go na da l qu e o cu rre n e n

    .1guasdulces o salob res.

    .

    E l objetivo de este trabajo es el anlisis de las

    'v aria cio ne s d e la c on ce ntra ci n d e lo s cid os n u-

    cleicos en hgado y m sculo blanco de hem bras

    de

    M. brasi li ensi s

    a lo largo del perodo de re-

    pos o y madu ra cin ganada .

    A p artir d e la c ua ntific acin de l c id o rib on u-

    cle:co (RNA) en distintos tejidos en estadios

    d e sn tesis y d eg ra da ci n pro teica, se h a d emos-

    trado que el incremento del RNA revela un

    au men to en la sn tesis pro teica y su d ism in uci n'un fenm eno inverso (Brachet, 1955, LesUe,

    1955) .

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    o

    o

    0,8

    S

    o N

    D F

    M A

    C ON CEN TRA CIO NES D E CID OS N UCLEIC OS EN LIS A

    11 9

    A diferencia de lo que ocurre con el RNA,

    la cantidad de cido desoxirribonucleico (D NA )

    es igual para cualquier c:ula diploide de una

    ~ ~term inada especie e indepen diente de su estado

    metablico. Por lo tanto la concentracin de

    DNA por unidad de peso de tejido expresa el

    n m ero d e clu las q ue lo co nstitu yen , au men tan do

    al disminuir el tamao celular por prdida de

    reservas (B ulow , 1970).

    Puede entonces establecerse un coeficiente

    RNA/DNA cuyo aumento o dism inucin ex-

    presa resp ectivam ente increm ento o decrem ento

    de la sntesis proteica. La concentracin de RN A

    y DNA y el coeficiente RNA/DNA han si-

    do utilizados para evaluar las variaciones de la

    sntesis proteica del m sculo de peces producidas

    p or diferentes aportes alim entarios, com probn-

    dose la correlacin existente entre dicha sntesis

    y el RNA/DNA (Bulow , 1970; Haines, 1973;

    W ilder y Stanley, 1983).

    D urante el ciclo reproductivo de ciertos teles-

    teos

    L epon is macrochir us

    y

    e la ri as bat rachus

    a.

    m ed ida que increm en ta el ndice gonadosom tico

    (IGS), desciende el RNA/DNA muscular lo

    cual se debera al ayuno que ocurre en estas es-

    pecies durante la maduracin gonadal que lleva

    a la reabsorcin de protenas m usculares que son

    utilizadas para la sntesis de vitelo (M ustaf,

    197 7a; B ulow

    et al.,

    1981).

    En el hgado, a medida que se eleva el IGS,

    se incrementa el RNA/DNA como consecuen-

    cia del aumento de la sntesis heptica de pro-

    tenas plasmticas y vitelogenina, que son los

    p recu rso re s p ro te ico s d el v itelo . D ich a s n tesis se-

    ra inducida e increm entada por el niv el creciente

    de gonadotrofinas y estrgenos circulantes (Em -

    mersen y Emmersen, 1977; Emmersen

    et al.,

    1 97 9; W h iteh ead , 1 98 3).

    El ndice hepatosomtico (IHS) es otro de

    los parm etros utilizados a los efectos de evaluar

    las m odificaciones de las reservas energticas a

    lo largo del ciclo gonadal (Love, 1970; Chris-

    tiansen y C ousseau, 1971, H eid inger y C raw ford~

    1 97 7; B ulo w

    et al.,

    1978).

    M TERI LES Y M ETODO~

    D urante los m eses de septiem bre a diciem bre

    de 1982 y febrero a marzo de 1983 se captura-

    ton h embra s a du ltas d e lisa e n la d esembo cad ura

    de arroyos afluentes a la albfera de Mar Chi-

    quita

    3 70

    30 ' S ,

    57 0

    20' W ). La salinidad en di-

    chos puntos vari de 1,1 a 5 %0 y la profundidad

    de 45 a 80 cm .

    El prom edio de 3 registros trm icos m ensuales

    fue el siguiente:

    s

    =

    8,6 C O =

    1 1,2 C

    N

    =

    14,2 C D = 1 9 C

    F =

    25,4 C M =

    21,6 C

    A

    =

    17,4

    e

    IH S

    2, 2

    o

    2,0

    o

    o

    1,8

    1,6

    1,'

    o

    1,2

    o

    FIG . 1: Valores medios de IHS en funcin de meses

    d e mu es tr eo .

    Se utiliz una red tipo agallera de nylon m ono-

    filam ento incoloro especialm ente diseado a tal

    efecto.

    El peso de los ejemplares estudiados vari d

    930 a 1.720 g. Una vez retirados de la red fue,.

    ron sacrificados en form a inm ediata tom ndose

    lo m s rpidam ente posible m uestra > de hgado

    y msculo blanco lateral a la altura de la aleta

    dorsal, las que una vez envas3das fueron coloca-

    das en nitrgeno lquido (-

    1800

    e) y conser-

    vadas a esa temperatura hasta el momento de

    efectu ar las d eterm in acio nes q tlm ica s. L os eje m-

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    12 0

    A NB AL R . lN TR OZZI

    y

    GLO RIA D uH ALD E D E lNTROZZI

    plares fueron pesados y m edidos (LT). M edian-

    te disecc::1 se aislaron tubo d:g~ sti.vo, h g.ldo ,

    g onadas y tejido g raso retrop eritoneal.

    Se establecieron los ndices hepatosom tico

    (IHS) gonadosomtico (IGS) y peso del tejido

    graso re troper itoneal .

    IH S =

    P eso hgado

    X

    10 0

    reso total

    -

    P eso h g ad o

    IG S =

    P eso g on ad as

    X

    10 0

    P eso total -

    Pes o gonadas

    M ediante apertura del estm ago e intestino se

    verific la existencia de contenido alim entario y

    su asp ecto m acro sc pico .

    RN A

    '%

    1]

    12

    11

    10

    9

    .

    O

    FIG. 2: Hgado: Curva de regre5n entre RNA (mg/g)

    e ndice gonadosom tico (lOS).

    La hom ogenizacin de las muestras se efectu

    en agua destilada m ediante hom ogeneizador tipo

    Potter de vidrio-tefln no superndose los 40 e

    durante el procedim iento. M ediante exam en m i-

    croscpico se verific la ruptura de las m em bra-

    nas c el ula re s.

    L a extraccin de los cidoc; nucleicos fue efec-

    m ada m ediante el m tod o de S ch midt- T hannhau-

    ser (1945) m odificado por M unro y Fleck (Fleck

    y M unro, 19fi2, M unro y Fleck, 1966).

    La cuar..tificacin fue llevada a cabo por su

    1%

    absorbancia

    a 6 nm

    (E-323). Se utiliz

    lcm

    un factor de correccin de 1,59 a 320 nm (Scor-

    n ik , 1 97 4).

    En 20 ejem plares se determ in adem s la con-

    centracin de RNA y DNA en msculo' rojo

    (datos no publicad os) encontrn dose concentra-

    ciones m ayores de R NA (1,4

    Y

    1,9 veces) y de

    DNA (1,5 a 2,5 veces) respecto las halladas en

    ms cu lo b la nc o.

    Estas m agnitudes son sem ejantes a las encon-

    tradas en tres especies de carpa tM ustaf, 19 77b).

    Todas las determ inaciones fuerol' efectuadas

    por dup lic ado.

    RESULTADOS

    CoDt2Didogastrointestinal

    E n la totalidad de los ejem plares con IG S < 6

    se e nc on tr c on te nid o a limen ta rio e n e stmago e

    intestino.

    .~

    En estm ag~ estu vo co nstitu id o po r un a m asa

    c ompa cta d e fa ng o. L as a sa s in te stin ale s p re se n-

    tan par ed es d el gada s y d is tend id as por abundan te

    f ango d iluido .

    E n tres ejem plares con IG S > 6 se encontr

    e stmago vac o y a sa s i nt es tin al es d ism inuida s d e

    d ime tro y d e p are de s e ng ro sa da s c on c on te nid o

    de ti po muco id e t rans l cido.

    In dice g on ad oso mtico (lGS)

    Durante el lapso com prendido entre septiem -

    bre y febrero el IG S present valores inferiores

    a 1 sin diferencias sig nificativas entre lo s valores

    medios mensuales. A lo largo de marzo y abril

    vari de 0,39 a valores cercanos a 9.

    Agrupados los m eses de septiem bre, octubre,

    n oviem bre, diciem bre y febr('fo y anlo gam ente

    los de marzo y abril, mediante anlisis de m edia5

    con v arianzas heterog neas se establecieron dife-

    r en cia s s ig nific ativ as ( P