HISTOLOGA GENERAL Y BUCODENTAL

HISTOLOGA La palabra histologa significa el estudio del tejido y se refiere al anlisis de la composicin microscpica y la respectiva funcin del material biolgico. Marcello Malpighi es el fundador de la histologa. El Tejido se forma por la agrupacin de clulas con la misma funcin.

HISTOLOGA La anatoma que es el estudio de la forma y la estructura de los organismos vivos, comienza a dividirse de manera gradual en anatoma MACROSCOPICA, que comprende las estructuras observables a simple vista; y la anatoma MICROSCOPICA, que requiere el uso de los auxiliares pticos.

METODOS HISTOLGICOS son aquellos procedimientos o tcnicas utilizados para conocer y estudiar las diferentes estructuras microscpicas de los tejidos biolgicos.

CLASIFICACIN:A- Mtodo de observacin de clulas y tejidos vivos.B- Tcnicas de aislamiento de componentes celulares por mtodos de centrifugacin.C- Mtodos de observacin de tejidos muertos o inanimados.

METODOLOGA

* El tipo de microscopio usado.* La preparacin del tejido u rgano para que pueda ser visto con el microscopio.

MICROSCOPIOMIKROS=pequeo SKOPEO= mirar, ver Es un instrumento ptico que sirve para ver y examinar de cerca objetos muy diminutos. Es utilizado en todos los mtodos histolgicos. Para el estudio del material biolgico se dispone de varios tipos de microscopios, su clasificacin depende del tipo de fuente luminoso que utilizan: * Microscopios que utilizan fuente de luz Visible e invisible.

TIPOS DE MICROSCOPIOA-Microscopio de luz u ptico.

B- Microscopio Electrnico.

TIPOS DE MICROSCOPIO PTICO * Comn. * Campo Oscuro. * Contraste de fases. * Interferencia. * Luz Polarizada. * Fluorescencia. * Luz Ultravioleta.

Microscopio pticoEs aquel que utiliza la luz.Est compuesto por partes mecnicas y pticas.Los componente pticos: CONDENSADOR OBJETIVO OCULAR Longitud de onda = aprox. 500n

Microscopio pticoCondensador: produce un haz de luz que ilumina el objeto estudiado.Objetivo: aumenta el objeto y proyecta la imagen sobre el ocular.Ocular: aumenta aun ms la imagen y la proyecta sobre la retina del ojo del observador.

RESOLUCIN

La distancia mnima que debe existir entre dos puntos del objeto para que se visualicen separados. La calidad de una imagen depende del poder de resolucin de un microscopio.

AUMENTO La relacin entre el tamao de la imagen y del objeto, en valores lineales.

Microscopio Electrnico Se utiliza un haz de electrones con longitud de onda de 0,005n. Tipos : * Microscopio electrnico de transmisin (MET). * Microscopio electrnico de barrido (MEB). * Microscopio de tnel de barrido (MTB). * Difraccin de rayos X.

Unidades Histolgicas Son las unidades de medidas utilizadas en histologa. = micra m = micrmetro nm = nanmetro = Angstrom

1 m 10-mm 1 nm 10-6 mm 0,001mm(10-mm) 10-7mm 1 mm 10m=106mm=107 1 m 10nm=104 1 nm 10 1 1 m

Cortes Histolgicos Son secciones muy finas, de tejidos muertos frecuentemente transparentes a ser atravesados por la luz y ser observados al microscopio previa coloracin.

Microtomo Es un dispositivo mecnico que permite la elaboracin de cortes finos de muestras para su observacin al microscopio.

Preparacin de tejidos 1- Muestra de tejido. 2- Fijacin. 3- Inclusin. 4- Corte. 5- Tincin y Montaje

Muestra de tejido

Se toma el tejido que se desea estudiar, debe estar muerto.

Fijacin Es el proceso que tiene como finalidad preservar la morfologa y composicin qumica de los componentes del tejido, de tal modo de que lo observado al microscopio corresponda a lo que exista en el tejido vivo.

FIJADORES FUNCIN: Insolubilizar las protenas de los tejidos. Evitan la auto lisis y la degeneracin post-mortem. Son bactericidas. Los ms utilizados : *FORMALDEHIDO *GLUTALDEHIDO *TETROXIDO DE OSMIO

TIPOS DE FIJACIN

* Fijacin por inmersin * Fijacin por perfusin Previo a la Inclusin: - La deshidratacin. Alcohol. - Aclaramiento. Xilol.

INCLUSIN Los tejidos quedan muy blandos para ser cortados en trozos muy delgados, estos deben ser incluidos y envueltos por una sustancia de consistencia firme y serosa como: * Parafina * Celoidina * Gelatina * Resina epoxi Calentamiento 60 = Taco

CORTES - Los tacos son cortados por el microtomo. - Los cortes se extienden en agua caliente. - Espesor de 5 nanmetros. - Luego son adheridos a las lminas portaobjetos. - A veces es necesario usar el criostato.

Congelacin-Desecacin * Con este mtodo la variacin estructural y la extraccin qumica sea la misma. * Para conservar la actividad enzimtica. * Se congela rpidamente el trozo de tejido y se coloca en una cmara de vaco a baja temperatura. * Se deshidrata por evaporacin lenta del agua.

Congelacin-Sustitucin 1- Fijacin moderada y tratamiento con sacarosa. 2- Congelacin rpida del tejido. 3- Una deshidratacin a 85C en metanol puro. 4- Se transfiere el tejido a un medio de inclusin plstico. 5- Este se infiltra mientras se incrementa la temperatura hasta -20C. 6- Se polimeriza por irradiacin con luz ultravioleta el medio de inclusin, que se seca, y se puede cortar el taco terminado.

COLORACIN Es el procedimiento de teir o colorear un tejido. La mayora de los colorantes se comportan como cidos y bases. Los componentes que se tien con colorantes cidos se le llaman acidfilo y los que se tien con colorantes bsicos se llaman basfilos.

COLORACINACIDOFILIA: Es la capacidad que tiene un componente tisular o celular de teirse con colorantes cidos llamados aninicos. BASOFILIA: Es la capacidad que tiene un componente tisular o celular de teirse con colorantes bsicos llamados catinicos.

COLORACIN El mtodo de coloracin histolgico ms usado es de la hematoxilina-eosina(H.E.) HEMATOXILINA: Colorante bsico (catinico).EOSINA: Colorante cido (aninico).El ncleo (cido) se colorea violeta-azul(H)El citoplasma(bsico) se colorea rosado(E)

EJEMPLOS DE COLORANTES HISTOLGICOSColoracin con tricrmico de Mallory.Colorantes de Tiazina=azul de toluidina y tionina.El reactivo de Schiff.PAS (Mtodo del cido perydico-schiff.Mtodo de Feulgen.Colorantes Sudan: rojo y negro.Giensa.Gram.Van Gieson.Impregnacin ArgnticaHematoxilina FrricaEtc.

PREGUNTAS ? Bibliografa Histologa . Finn Geneser 3. Edicin

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