Guia de Actividad Practica, Hematología e Inmunidad

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1 Universidad Católica de Salta Facultad de Ciencias Agrarias y Veterinarias Asignatura: FISIOLOGIA Guía de Actividad Práctica de laboratorio HEMATOLOGÍA E INMUNIDAD 

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Universidad Católica de Salta

Facultad de Ciencias Agrarias y Veterinarias

Asignatura: FISIOLOGIA

Guía de Actividad Práctica de laboratorio

HEMATOLOGÍA E INMUNIDAD 

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INTRODUCCIÓN:Esta guía ha sido elaborada para que el alumno pueda reproducir la prácticademostrativa realizada por el docente en la introducción teórica del trabajo prácticopertinente y en una secuencia lógica de la actividad propuesta.En la presente figuran las consignas de trabajo (generales o específicas) y los

materiales que se usaran. Las técnicas están limitadas en cuanto contenidoteórico para simplificar la compresión de las secuencias a ejecutar, por ello elalumno dispone al final de la misma de un listado de material bibliográfico deconsulta para ampliar los conceptos; asimismo cuenta con la tutela del docente acargo que verificara, y corregirá, cuando sea necesario, el correctodesenvolvimiento de la actividad propuesta.

OBJETIVOS:- Iniciarse en el aprendizaje de los aspectos fundamentales de las técnicasde recolección de muestras sanguíneas para remitir al laboratorio de análisisclínicos.

- Conocer los aspectos básicos de las técnicas hematológicas comúnmenteusadas en un laboratorio de análisis clínicos.- Familiarizarse con una secuencia de ejecución de trabajo respecto a laspruebas hematológicas comúnmente usadas en un laboratorio de hematología.  - Adquirir las nociones elementales de una confección de protocolo deremisión de muestra al laboratorio y el informe respectivo emitido por el mismopara familiarizarse con los valores hematológicos normales de las especiesanimales a estudiar. 

CONSIGNAS GENERALES: - Los alumnos deberán organizarse en pequeños grupos de trabajo en los

cuales se distribuirán los roles y actividades que realizará cada uno, establecidosde común acuerdo.- Los alumnos deberán conocer, previamente a iniciarse la actividad práctica,las Normas de Bioseguridad (generales o específicas para la actividad delpráctico), para recién entonces realizar la actividad de laboratorio. Es pertinenteque ante cualquier duda al respecto, los alumnos la expresen ante el docente acargo de la actividad.

ACTIVIDADES:

1) TÉCNICA DE RECOLECCIÓN DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA: 

Consigna de trabajo:Los alumnos trabajaran en pequeños grupos. Deberán estar provistos de lacorrespondiente Autorización para la Extracción de Muestra (se adjunta modelo deautorización). Se trabajará con un animal por grupo como mínimo, de especiecanina (salvo excepción, que se informará previamente). Luego de extraída lamuestra y acondicionada correctamente, se confeccionará el correspondiente

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Protocolo de Remisión de Muestra al Laboratorio (se adjunta modelo deprotocolo).Materiales:- Jeringas descartables de 5 mL.- Agujas descartables 25/8 (21G).

- Algodón.- Alcohol etílico o Yodopovidona en solución al 10%.- Maquina peladora o rasuradora.- Pinza hemostática o broche.- Lazo elástico (goma elástica o elástico común).- Guantes de látex para examinar.- Descartador de agujas.- Bozales de distintos tamaños.Técnica:Localizar anatómicamente la vena a usar para la punción. Se puede emplear lavenipuntura yugular (gatos y perros pequeños), cefálica (uso más frecuente), o las

venas femoral o safena. Previa tricotomía (es recomendable informar alpropietario) y antisepsia de la piel, se constriñe la zona dorsal del miembrotorácico a nivel del codo, lo que permite aminorar la corriente sanguínea, que sedilate la vena y que, en este caso, la vena cefálica se eleve. La constricción sepuede realizar con la ayuda de un asistente que sujeta al paciente o bien con elauxilio de un torniquete. Con la jeringa seleccionada y la aguja acoplada a lamisma, se penetra la piel en lateral a la vena, teniendo en cuenta que el bisel de laaguja debe ir hacia arriba. Se recorre unos milímetros el subcutáneo hasta que sepunza la vena y se logra canalizarla, de manera que la sangre ingreseespontáneamente a la jeringa. La succión con el émbolo debe ser suave y lentapara evitar que se forme espuma. Llene la jeringa con la cantidad de sangre que

necesita. Retire el torniquete, o bien que el asistente deje de comprimir la zona deoclusión de la vena. Aplique un pedazo algodón seco o embebido con soluciónantiséptica sobre la zona en que ingresó la aguja en la piel; luego retire la aguja enun solo movimiento manteniendo la presión en la zona con el algodón duranteunos minutos.

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Separe con cuidado la aguja de la jeringa y descártela en un recipiente apropiado.Llene los tubos con la muestra de sangre vertiendo lentamente por las paredes deltubo, tápelo correctamente, e invierta varias veces los tubos que contengananticoagulante CON CUIDADO, para que este se mezcle con la sangre. Rotule eidentifique la muestra con los datos que considere necesario. No olvide colocar

una gota en la lámina portaobjeto para realizar el frotis (ver “frotis sanguíneo” ).

a) La sangre que se recoge en un tubo sin anticoagulante se separa en doscomponentes:- Suero sanguíneo (el fibrinógeno se transforma en fibrina, sustancia insoluble que junto 

a los GR forma el coagulo ).- Coagulo.

b) La sangre tratada con anticoagulante (nosotros usaremos EDTA) sesepara en dos componentes:- Plasma (contiene el fibrinógeno, una proteína soluble ).- Células sanguíneas que sedimentan (delgada capa de leucocitos, y un precipitado 

de GR  ).

2) PRUEBAS DE COAGULACIÓN:Tiempo de hemorragia o sangría (Dukes):Se evalúa el tiempo necesario para que se realice la hemostasia espontanea, osea, la capacidad de retracción de los vasos lesionados, la capacidad deagregación plaquetaria y la velocidad de coagulación.

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Realice la antisepsia, suavemente, de la zona a punzar con la lanceta. Dejesecar. Realizar una punción pequeña y profunda en la piel del pabellón auricular(con una lanceta) o en el pulpejo (también puede realizarse en la mucosa del labiosuperior), registre el tiempo en que aparece por primera vez la sangre, estadeberá fluir libremente. No comprima la zona para forzar su salida. Limpiar con

papel de filtro o secante, cada 30 segundos, teniendo cuidado de no tocar la pielcon el papel. Las gotas serán cada vez más pequeñas. No usar pañuelosdescartables o similares ya que prolonga este parámetro. Registrar el tiempo queha transcurrido hasta que la sangre deje de fluir. Valores normales: 1 a 5 minutos.Este parámetro es variable según la profundidad y extensión de la punción por loque es difícil de estandarizar el método.

Tiempo de coagulación (Lee-White):Se evalúa el tiempo en que la sangre entera coagula. Valora la vía intrínseca ycomún. Extraer con jeringa 3 mL. de sangre, registrar el tiempo a partir delmomento en que la sangre entra a la jeringa. Tener la precaución realizar la

punción de la vena con cuidado. Colocar 1 mL. en cada uno de tres tubos,haciendo resbalar la sangre por las paredes del tubo, colocar los tubos en bañoMaría a 37º C. Cada minuto se inclina suavemente el primer tubo y observarcuando se produce el coagulo (al inclinar el tubo persiste el coagulo), se realiza lamisma observación del segundo y tercer tubo inmediatamente después de quehaya coagulado la sangre del primer tubo. Registre el tiempo en que se produjo lacoagulación del tercer tubo. Interpretación: el tiempo de coagulación es el tiempoque transcurre entre la entrada de la sangre a la jeringa y la coagulación en eltercer tubo. Valores normales: 3 a 12 minutos.

Tiempo de protrombina (Quick):

Evalúa la vía extrínseca y común. Esta prueba se usa en la detección deintoxicación con antagonistas de la vitamina K y además valora la funcionalidadhepática. Mide el tiempo que tarda en coagular una muestra de plasma,desprovisto de plaquetas y anticoagulado con citrato sódico (precipita el calcio), alponerlo en contacto con una suspensión de tromboplastina cálcica (sustituto de latromboplastina tisular fisiológica). A la sangre del paciente se le agrega unanticoagulante a base de citrato de sodio al 3,8% (9 partes de sangre entera y unaparte de citrato). Centrifugar a 1.000 rpm por 5 minutos y separar el plasmasobrenadante de la parte celular. Trasvasar 0,1 mL. del plasma a un tubo de Kahne incubar a 37º C por 1 o 2 minutos. Al tubo conteniendo el plasma se añade0,2mL. de tromboplastina cálcica (incubada previamente a 37º C por 5 a 10minutos); de manera simultánea se comienza a cronometrar el tiempo. Se agitasuavemente para mezclar los reactivos. Dejar reposar en baño María a 37º C unos8 segundos a partir de lo cual se remueve el tubo del baño María y se inclina hastaobservar que se forme el coagulo. Registrar el tiempo. Valores normales:Canino: 7 a 18 segundos.Felino: 7 a 16 segundos.Bovino: 18 a 28 segundos.Equino: 9 a 12 segundos.

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3) FROTIS SANGUÍNEO (extendido sanguíneo): 

Materiales:- Portaobjetos de vidrios limpios y desgrasados (25 x 75 mm). - Alcohol etílico.

- Paño limpio.Técnica (método para la extensión):Usar preferentemente portaobjetos nuevos, se puede sumergir en alcohol etílico yluego secar con un paño limpio.

La extensión de sangre se realiza sobre un portaobjeto con otro extensor debordes quebrados*, de manera tal de obtener 2 bordes útiles; es recomendabledepositar sobre el portaobjetos una pequeña gota de sangre fresca antes devaciar la muestra en el tubo con anticoagulante, desde la jeringa que usamos paraextraer la muestra a nuestro paciente. El motivo es que algunos anticoagulantespueden distorsionar la morfología de las células sanguíneas. Se coloca una gotade este tamaño aproximadamente (3 mm de diámetro) sobre una de losextremos del portaobjetos. Se coloca el canto del portaobjetos extensor delante dela gota de sangre desplazándolo hacia atrás hasta que toca la gota.

Ahora deslice suavemente hacia adelante y a velocidad moderada para extenderla gota en un ángulo** aproximado de 30º.

* Como hacer un portaobjetos de bordes quebrados: marcar con una sierra en forma diagonal en las dos esquinas de un extremo del portaobjetos y luego cortar estas dos esquinas.

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**Si el ángulo es mayor a los 30º la extensión que obtenga será corta y gruesa, caso contrario, si la angulación es menor a 30º será larga y fina.

Se deja secar el extendido a temperatura ambiente, y una vez seco identificar elextendido. Es recomendable realizar la tinción dentro de la hora de preparado elfrotis (para solidificar las células y evitar la degeneración autolítica ). Si se va a demorar más

tiempo hasta realizar la tinción, realizar la fijación con alcohol metílico duranteunos 3 a 5 minutos.

Tinción de los extendidos de sangre:

Una vez seco el frotis, se procede a la tinción hematológica tipo Romanowsky,constituido por la mezcla de eosina y azul de metileno. Entre las de uso másdifundidas figuran: Tinción de de Wright. Tinción de Leishman. Tinción de Giemsa. Tinción de May-Grünwald. a) Materiales:- Colorantes hematológicos (May-Grünwald y Giemsa).- Tubo de ensayo o probeta graduada para preparar la solución colorante deGiemsa (según cantidad de frotis a colorear).

- Frasco lavador o piseta.- Gradilla para secar los portaobjetos coloreados.- Cubeta y bastidores para tinción.- Pipetas Pasteur o frascos goteros con el colorante.- Cronometro.

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b) Técnica (Tinción de May-Grünwald-Giemsa):En esta técnica de tinción se combina el colorante de Giemsa con el de May-Grünwald; también se conoce a este de tinción como “tinción panóptica ”. Con estacoloración se resalta especialmente las granulaciones de los neutrófilos,eosinófilos y basófilos.b1) Preparar la solución de Giemsa de uso agregando 15 gotas de solución stock

cada 10mL. de agua estabilizada.b2) Cubrir los frotis con 30 gotas de la coloración May-Grünwald durante 3 a 5minutos. Cuando se usa este colorante no se requiere fijación previa ya que estasolución contiene alcohol metílico.b3) Agregar igual número de gotas de agua estabilizada, mezclar por vaivén. Dejar1 minuto.

b4) Sin lavar, agregar 10 mL. de solución de Giemsa de uso. Dejar 15 a 18minutos.b5) Transcurrido el tiempo escurrir el colorante del portaobjetos.

b6) Lavar con agua corriente.b7) Dejar secar por escurrimiento.b8) Observar con microscopio óptico.

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Examen del frotis:La observación se va a realizar con microscopio óptico, y se ejecutará de unamanera sistemática para facilitar la recolección de datos sobre los elementosfigurados de la sangre. Recomiendan los autores seguir la siguiente secuencia:

GB►GR►PLAQUETAS.a) Materiales:- Aceite de inmersión .- Microscopio óptico.b) Técnica:Se observa con objetivo de poco aumento de manera tal de poder seleccionar elsector donde las células no estén superpuestas.

Cambiar al objetivo de inmersión para continuar con el examen del frotis. Losneutrófilos y monocitos se sitúan en los bordes y en la cola de extensión, mientrasque en el cuerpo hay mas presencia de linfocitos. Una zona conveniente a elegirse sitúa en la zona límite entre el cuerpo y la cola, allí los GB se encuentran enuna buena proporción y se distribuyen de manera uniforme. La trayectoria deobservación recomendada es en guarda friega o zigzag.

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Para confeccionar la formula leucocitaria se cuentan los GB que aparezcan en loscampos que recorremos y los clasificamos en sus distintos tipos. Registramos untotal de 100 GB en un papel o en algún aparato registrador para tal fin.

Además de contar a los GB se observa su tamaño, citoplasma, núcleo y

registrando cualquier anomalía que observemos.

Respecto a los GR se observa su tamaño, forma, color también se registracualquier anomalía o estado anormal que se observe.

En cuanto a las plaquetas se considera normal 4 o más por campo de inmersión.Así se estima adecuado informar como normal, aumentado, disminuido o ninguna.También se registra las variaciones en cuanto a su morfología o tamaño.

4) HEMATOCRITO (volumen celular aglomerado, volumen globular,volumen de sedimentación globular):

Se mide el volumen relativo de GR y plasma expresándose su resultado comoporcentaje de GR en 100 mL. de sangre incoagulable centrifugada.Al centrifugarse se separa la sangre en los siguientes elementos, desde la parte

superior hasta el fondo en el siguiente orden:- Plasma- Capa flogística:  Trombocitos.  Leucocitos (GB).  GR nucleados.- Eritrocitos (GR)

 

Zona donde mejor 

se observan los GR

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Método de Wintrobe (macroescala):a) Materiales:- Centrifuga.- Tubos de Wintrobe.

- Pipetas Pasteur con chupete (perilla de goma) y punta capilar larga ydelgada.

b) Técnica:b1) La muestra a usar será la sangre que contenga el anticoagulante en lacantidad correspondiente a la cantidad de sangre. Se mezcla la muestra demanera tal que sea uniforme la suspensión de células sanguíneas. Con ayudade la pipeta Pasteur se va llenando el tubo de Wintrobe teniendo laprecaución de insertar la punta de la pipeta en el fondo del tubo e ir retirandolentamente mientras se expulsa la sangre. Hay que evitar la formación deburbujas ya que estas dificultan una correcta lectura. Se llena hasta la marcasuperior derecha en donde está el 10 (que no supere esta marca ).b2) Centrifugar a 2500-3000 rpm durante 30 (canino, equino) a 60 (bovino, ovino,

caprino, porcino) minutos.b3) Se lee la escala a la altura en que la columna de GR se encuentra con lacapa flogística.

Método del microhematocrito (microescala)

a) Materiales:- Tubos capilares con anticoagulante (heparinizados) o sin anticoagulante. - Centrifuga para microhematocrito.- Plastilina o mechero.- Ábaco o escala para lectura del microhematocrito.

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b) Técnica:Se llenan los tubos capilares heparinizados (rojos) con sangre capilar o bien seusan los tubos capilares sin anticoagulante (azules) en caso de que se dispongade sangre con EDTA. Se deben llenar hasta las ¾ del tubo; la sangre entra al tubopor capilaridad. Secar la sangre que queda por fuera del tubo capilar.Sellar el extremo libre del capilar (extremo que no ha entrado en contacto con la sangre )con plastilina y que llegue a unos 2 mm de profundidad aproximadamente o biensellar acercándolo a la llama de un mechero dejándolo enfriar en posiciónhorizontal.

Se colocan los tubos en las ranuras numeradas del cabezal de la centrifuga con elextremo abierto hacia el centro y el extremo sellado hacia afuera, cerca delmargen del cabezal. Centrifugar a alta velocidad (10.000 a 12.000 rpm) durante 4a 5 minutos.

Nota: Recuerde tener identificado los tubos de acuerdo al número que figura en el cabezal, ya que los tubos capilares, debido a su tamaño, no pueden ser marcados para identificarlos.  

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Al finalizar la centrifugación se obtendrá la separación en sus tres componentescomo se muestra en la siguiente figura:

La lectura se realizara con el auxilio de un ábaco o utilizando una escala en papelmilimetrado.

5) RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCOS:

La muestra de sangre se deposita en un líquido que produce una hemolisis de losGR y deja intactos los GB poniéndolos en evidencia. El recuento se expresa en

GB x mm³.a) Materiales:- Cámara de recuento de Neubauer con cubre-cámara.- Pipeta para sangre de 50 µL. con tubo de goma y boquilla o propipeta, otambién se puede usar una pipeta automática de 0 a 100 µL. (la pipeta de Thoma para GB también está disponible pero la técnica abajo descripta se modifica).

- Pipeta graduada de 1 mL. - Liquido diluyente para recuento en cámara de GB.- Frasco pequeño de vidrio (limpio y seco).- Pipeta Pasteur.- Gasa o papel absorbente.

- Microscopio óptico.

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b) Técnica:b1) Se carga 0,95 de líquido diluyente para GB con la pipeta de 1 mL. yposteriormente se descarga en un frasco pequeño de vidrio.b2) Aspirar sangre (previamente mezclar suavemente la muestra durante 1 minuto ) hasta lamarca 0,05 que figura en la pipeta (50 µL.). Evitar que ingresen burbujas.

b3) Se limpia el exterior de la pipeta con papel absorbente o un trozo de gasateniendo la precaución de no extraer sangre del interior de la misma yasegurándonos de que se mantiene la sangre en el mismo nivel de la marca(0,05).

b4) Se vierte la sangre de la pipeta en el frasco de vidrio en el que habíamosdepositado, primeramente, la solución diluyente de GB. Se enjuaga la pipetaaspirando y expulsando por lo menos unas tres veces (dilución1/20). Identifiqueadecuadamente el frasco.b5) Montar el cubre-cámara sobre la cámara de Neubauer, el cubre-cámara semaneja solo de los extremos largos.b6) Mezclar por agitación suavemente la sangre diluida con el diluyente para GB.Una vez homogenizada la muestra se carga en una pipeta Pasteur y se comienzael llenado de la cámara de Neubauer. Para ello se toca con la punta de la pipeta elborde de la plataforma de la cámara fluyendo por capilaridad el líquido debajo delcubre-cámara. En caso de que el líquido derrame por los surcos laterales de lacámara deberá repetirse la operación. Una vez llenada la cámara se deja reposardurante unos tres minutos para que las células se sedimenten, debe evitarse laevaporación para no introducir un factor de error en la lectura.b7) Montada la cámara en la platina del microscopio se enfoca con objetivo 10xun cuadrado primario de las esquinas de la cámara. Reducir la iluminación queingresa por el condensador del microscopio lo más que se pueda ajustando eldiafragma del mismo de manera tal de apreciar las líneas de la cámara y los GB.

Efectuar el contaje en los campos (cuadrados primarios) 1, 3, 7 y 9 tal como semuestra en la figura siguiente.

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El contaje debe realizarse de una manera ordenada para no cometer elerror de dejar de contar algunas células o hacerlo más de una vez.Se deben contar los GB que están dentro de cada uno de los cuadradossecundarios y solo aquellos que contacten con las líneas superior y derecha(“regla de L”) o bien la línea inferior e izquierda (“regla de la L invertida”).

Luego de contar las células de todos los cuadrados de la fila superior (deizquierda a derecha) se continúa con la fila inferior (de derecha a izquierda) y asíhasta completar cada uno de los cuadrados primarios.

Finalmente el total de leucocitos contados en cada uno de los cuatrocuadrados secundarios se multiplica por 50 y el resultado se expresa en…..GB/mm³ 

Nota: se recomienda consultar la bibliografía recomendada al final de la guía para profundizar en la explicación de los cálculos y variaciones en loa métodos usados. Consulte con el equipo docente las dudas que se generen luego de la lectura bibliográfica.

6) RECUENTO DE GLÓBULOS ROJOS:

La muestra de sangre se diluye en un líquido para GR que nos permite observarlos GR, a esta solución liquida la depositamos en la cámara de recuento

(Neubauer o la de Thoma) y realizamos el conteo con el auxilio de un microscopioóptico, expresando el resultado en GR x mm³.Es difícil realizar determinaciones precisas con este método.a) Materiales:- Cámara de recuento de Neubauer con cubre-cámara.- Pipeta para sangre de 0,02 µL. (pipeta de Sahli) con tubo de goma yboquilla o propipeta, o también se puede usar una pipeta automática de 0 a 100

Cuadrado

primario

Cuadrado

secundario

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µL. (la pipeta de Thoma para GR también está disponible pero la técnica abajo descripta se modifica).

- Pipeta graduada de 5 mL. - Liquido diluyente para recuento en cámara de GR (Cloruro de Sodio al0,9%).- Frasco pequeño de vidrio (limpio y seco).- Pipeta Pasteur.- Gasa o papel absorbente.- Microscopio óptico.

b) Técnica:b1) Se carga 4 mL. de líquido diluyente para GR con la pipeta de 5 mL. y

posteriormente se descarga en un frasco pequeño de vidrio.b2) Aspirar sangre (previamente mezclar suavemente la muestra durante 1 minuto ) hasta lamarca 0,02 que figura en la pipeta (20 µL.). Evitar que ingresen burbujas.b3) Se limpia el exterior de la pipeta con papel absorbente o un trozo de gasateniendo la precaución de no extraer sangre del interior de la misma yasegurándonos de que se mantiene la sangre en el mismo nivel de la marca(0,02).

b4) Se vierte la sangre de la pipeta en el frasco de vidrio en el que habíamosdepositado, primeramente, la solución diluyente de GR. Se enjuaga la pipetaaspirando y expulsando por lo menos unas tres veces (dilución1/200). Identifiqueadecuadamente el frasco.b5) Montar el cubre-cámara sobre la cámara de Neubauer, el cubre-cámara semaneja solo de los extremos largos.b6) Mezclar por agitación suavemente la sangre diluida con el diluyente para GR.Una vez homogenizada la muestra se carga en una pipeta Pasteur y se comienza

el llenado de la cámara de Neubauer. Para ello se toca con la punta de la pipeta elborde de la plataforma de la cámara fluyendo por capilaridad el líquido debajo delcubre-cámara. En caso de que el líquido derrame por los surcos laterales de lacámara deberá repetirse la operación. Una vez llenada la cámara se deja reposardurante unos tres minutos para que las células se sedimenten, debe evitarse laevaporación para no introducir un factor de error en la lectura.

ClNa 0,9%

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b7) Montada la cámara en la platina del microscopio se enfoca con objetivo 10x elcuadrado primario central de la cámara. Reducir la iluminación que ingresa por elcondensador del microscopio lo más que se pueda ajustando el diafragma delmismo de manera tal de apreciar las líneas de la cámara y los GR. cambiar a 40xpara efectuar el recuento.

  Efectuar el contaje en los campos (cuadrados secundarios) A, B, C, D y E talcomo se muestra en la figura de abajo. El método de conteo se efectuara de igualmanera que en lo citado en el apartado de Recuento de GB.

  Finalmente el total de GR contados en cada uno de los cinco cuadradossecundarios se multiplica por 10.000 y el resultado se expresa en …..GR/mm³.

7) DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES EN SUERO O PLASMACON REFRACTOMETRO:

La mayoría de los refractómetros poseen una escala interna para proteínasplasmáticas totales y otra para la densidad urinaria. En caso de que solo poseaíndice de refracción se requiere una tabla de conversión para transformar el valor

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del índice a concentración de proteínas. Se requieren solo una gotas de lamuestra problema. Antes se debe ajustar la escala del refractómetro con unasgotas de agua destilada y ajustando, si es necesario, con el mando de ajuste delaparato. Se coloca unas gotas de la muestra problema en la placa de lectura yobservamos la escala a través del ocular del aparato. Al finalizar la lectura

anotamos el resultado y limpiamos la placa o prima de lectura.

BIBLIOGRAFÍA DE LECTURA RECOMENDADA:

Coppo J.A. Interpretación de análisis clínicos en perros y gatos. 1ªEd. EUCASA, 2010.Kirk R.W., Bistner S.I., Ford R.B. Manual de procedimientos ytratamientos de urgencia en animales pequeños. 5ª Ed. Inter-Medica,1994.Ministerio de Salud del Perú - Instituto Nacional de Salud. Manual

de procedimientos de laboratorio en técnicas básicas de hematología.Perú, marzo 2005. Ed. CEPREDIM. Serie de Normas Técnicas Nº 40Organización Panamericana de la Salud. Manual de técnicasbásicas para un laboratorio de salud. Washington: OPS, 1983.Publicación Científica Nº 439.

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ANEXOS:

1- Modelo de protocolo de remisión de muestra al laboratorio.

PROTOCOLO PARA REMISIÓN DE MUESTRA DE SANGRE

Protocolo Nº:DATOS DEL PROFESIONAL:Nombre y apellido:Dirección:Teléfono:Correo electrónico:

DATOS DEL PROPIETARIO:Nombre y apellido:Dirección:Teléfono:

Correo electrónico:DATOS DEL PACIENTE:Nombre: Especie:Raza: Sexo:Edad: Tamaño:Fecha:

Horario de extracción:Ayuno previo: SI NO

TIPO DE MUESTRA:SANGRE VENOSA:SANGRE ARTERIAL:

TIPOS DE ANALISIS HEMATOLOGICOS SOLICITADOS:RECUENTO DE GB:RECUENTO DE GR:HEMATOCRITO:FORMULA LEUCOCITARIA (absoluta y relativa):PRUEBAS DE COAGULACION SANGUINEA:

- Tiempo de coagulación:- Tiempo de sangría:- Tiempo parcial de protrombina:- Tiempo de protrombina:- Recuento de plaquetas:

OTROS:

TRATAMIENTOS REALIZADOS PREVIAMENTE:

OBSERVACIONES:

/ /

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2- Modelo de informe de laboratorio de hematología.

INFORME HEMATOLOGICO 

INFORME Nº:

PROTOCOLO DE REMISION DE MUESTRA DE SANGRE Nº:DATOS DEL PACIENTE:

DATOS DEL PROPIETARIO:

DATOS DEL PROFESIONAL SOLICITANTE:

RECUENTO DE GB: ………………GB x mm³ RECUENTO DE GR: ……………….GR x mm³ HEMATOCRITO: ……………………% FORMULA LEUCOCITARIA (absoluta y relativa):

Neutrófilos en cayado %Neutrófilos segmentados %

Eosinófilos %

Basófilos %Linfocitos %

Monocitos %

PROTEÍNAS TOTALES (con refractómetro):

OBSERVACIONES:

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3- Modelo de autorización para extracción de muestra.

AUTORIZACIÓN PARA EXTRACCIÓN DE MUESTRA

A través de la presente autorizo a la extracción de la muestra

de , del animal de mi propiedad, también expreso que

se me informa de los riesgos de la maniobra a realizar aceptando que se practique la

maniobra de extracción.

Firma del propietario:

Aclaración:

D.N.I:

DATOS DEL PACIENTE

Nombre:

Especie:

Raza:

Sexo:

Edad:

Tamaño: 

Salta, / /