ESTUDIO FITOOUIMICO.DE UNAPtANrA …unbolón de 250 mi. de copa'( idod con 100 'cc. deáódo...
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ClfNc.1A y I'IftTu~'ALt'l:A10 (1): 1b~(91.-(~61' .
ESTUDIO FITOOUIMICO.DE UNAPtANrA PSICOTOMIMETICA'
¡ALgunas' es.pe·cies de 110 'fomi Ilio IE'ricá-,ce>CJIS' han sido est'ud iodas ·quími'comenteI . . I
conprobándose en ,ellos lo presenciO' de.principi'os fa rma'codiná:h1IÍC-osde ,importan-óa; O'Sí, :en 1-0- GO'uI,the-riO procun:dJen s, "Tédel Canadá"; en lo· Vaccinum. mortiniaBenth, "morriño"I; como :también en laArbutus uva-ursi, ",mondroño"2.
Pernettya pervifolia Be:nt:h, es l'un'(¡Cpe_-queño pl'anta: 'qu,e' C-r,ece ,abundantementee·nalgunas zonas dejos póromosde nues-tro pd-ís. ,Su If.ruto es de color 'rojo vinoso; se1-0 conc-eé V:ü':-Q'or:ment'ecemo: "t'O'rugo","ijoya:po':, "ti,mg", en 1-0 rprovinC'Í'a de'lA "t 1'1'" "t 11'" . I d'Z'UiQIY, 'y ccm'O "a::' 1, . 09 'l. , en G' ,ePpchincho,en donde s'e di'st.ribuye en una_rronjo o:'ti-tu-dinol qU'2 vo desd:e les 3.OCO al:os 4.000 me'tres. S'e sODe QU'2 1'0 ingestióndie' 'frult-os prc:citu·cegrGvesefect'Os tóx'Íf::;esen1'05 ¡pe·rsor.os:l, IQsí ·como 'Iomüe:r'te· en ani-
... , m.o·lesque com-en sus Incljas of'rutos. Parla. tant'o :resu·l-toba de 'int€lrés e,f'e'ctuor e'n. 'esto
espe'ci'e hctóni'co una 'investigoc-ión de co-ráct'N Iqu:fmk:'O"'yfar.h1Gcodinám;c'O.
IEI :rodl-j pe-rt1e-neceQi 1'0 espe::i,e botáni-e-a Pernettya parvifolia, 'óe la S.ubfami ¡'¡'aIE'ri'C'oideO's'fami'! ¡la lEricá-ce'o's Orden Eri:c<].-._ I I
¡·es; Sub-da'se Me·todomideo; dos.e IDico't'i-ledóne'O'; Subdivisión ,A-ng'iospermo y Divi-sión :Embri!()fi,to S,¡,fonógomo.
('-') l!a iP~eseJ')te ·investi'g'ación ge efect,uó bajo :105alu'lpid05 de ,la A,ilr Force OHice of Sci'e'f1ltirl'ic
- Rie5ea¡roh Gront AF - AFOSR - 845 - 65.
Es una herbácea 'que no sobrepaS'o unedtu'ra de 50 -cm. HabitO' en los p-QIjonolll€'~del-os d-ecl'ives -dedos cordi'lI<e:msQindin(]~
.q-U'2otrovi·eson el Ecuador, de Sur a Norte.Lo plo:nta: ,presento rámul·os espo:rcida·
ment'2 cerdc~c'S. Hojas brevemente peciolo ..
Flg. 1.- RAMA DE PERNETTYA PARVIFOLIJ(T AGLLI). Pueden observarse numerosas hojas pe·queñas (de 1 cm. de largo por 5 mm. de ancho ella zona más ampl!a) ovoide-acuminadas.
iD. Otras extracciones. ¡Por 1'0 fadl!idaddecbten,er ¡los ¡hojas de ifadli, dumnit~: to-""'¿'oel oño, ry ccmo en 'los ensayos 'inFóo'l,e,sse enicontró .que los 'extra dos ,c;lie hojas tam~'bién 'eran Iformocodinómi'comente aictivos,'se decidió continuor 'el es'tudio fi,to:quím,ko: 'con este moterial. '
Se cbtuvie.rcn entonce's extra'c'ros o¿uo- ', ,sos de m'ayor concent'<r-oción qU1e:Ios prim.e-'ros. IniciGlmente se ,e;mpleOiron lo't'e'sde 1ap
. ,A. Maceración en agua. eón el obje- gm. por 4112, pma 'luego S'urbi'riha's-ta:J{)Oto de ¡rea'¡¡'zar pruebes Ifmmocodinámi·cesgm., POOl'prepmadón. 'Se precedió (] ,I'a,·'I,jfxi-.que or:i'en<11ensobr;ela: presunción d~ subs- via'Ción y ex'kocci'cnes súcesivois cadb 2:4 'tondas aotiíV!os, '1'0 invesNgadón s€ inidó hOf1O's.;Ei·€X't.rocto obtenido se evaporó'o' ~con :10 e,xtroccián ,por simpl'e mpce,ración 609 c., utilliz'anoo ,ra,yos inf'ro'f1rojosrhosto, .en agua', 'Uitil·j,zandbpma €'Iefecto el, ma- ¡lO sequedad. Quedó así un :res+óuo,..tO'Coró-'t,eriol 'Verge'ta,1'recol'ect'ado len páramos cer- melod'O de ~olor cofé-:negruzco, eliri}i'Srno':-canosa:1 iC'OtOlpaxi,y consistent.e 'enhutos que mdlido hasta el estado de' poliVpsiNiómaduros ry hojos, o(]'1'05 mi'S'm'os que s,e ,¡reos por;a preparm soluciones. Cuondo se ,€:mpleósomeNó. se'Püradament e, 01 secodo (] Tem- /"",el okohol éstefu'e de 93,0 y se- dejó mQ'C'e'-'pera1turo ambie,nt€ 'Y poster:¡'oment,e, C' su {aff por lell·ti,empo de 24 hOrlQ's.IEIeX;f'lracito
Fig. 2.:'-VARIAS FLORES DE PERNETTYA PARVI-fOLIA. El frul'" , ,,'S'CLlnabaja de color rojo vinagre in-tenso de 1 centímetro y medio de diámetro, cuandomaduro.
dos, pequeños, l-onceolodras, de bordes ose-'rr'C'dos, :Iompiñas, tenue'mente ,reticulo(]do-,venosals. Sus flor,es son pequ:eñ'a's de C'o-'. 'lior blonco, ihef1m(]lfmodi,tas,corol'C' uniJlor:a.. :Ánte'ro's orist:adbs, oVGrio súpero: Elfnuiflole's'unal baya' :gJiidbos:o,peque1ñ'CIde co-lor' N'erde :cuando Nern'a ry dea'cuelrdo cone·l; '9'r;odo de 'r"n'adurez su coloración va,ríodel !rosodo all Il'iojo<vinosory neglro Irojizo. Losse'mi'l·/'asIson 'nume-roSGS,-en cada f'rüto y de·forma ovai dear.
fra,ccionami,ent,o, si'n ,1iIe-ga'r'a pOliVO,iíino~0:,¡La. maceraciónse hizo O' ,tempe1r'art'U1ra
ambi·ente, durante 24 horas, uti¡'¡'zando,sepa mdo(]mente el ¡fruto trjituredo ry el 'p01;-vo de hojas. [PaTO 'lo primera 'ext'mcción seuti'l'izmon pequeñas mueskas de 10 gm.Después de 1'Clmace'ra'CÍón cc'n o'gua' desti-Io-da se procedió o Ifj:lt,rm y 'elexha'Cto a'~íobrenkio sirvió pm-c' los en~yos preiJimina-'re's en animales de 'l'aboratori'O. '
('cmo 'I{]ospruebas ,farmocodinármicCÍ's'revefaron ,lo e-xislenc-ia de prinópiüS odi-'vcs,es1te procedim,jento ·extmc!fiivo 's'e' 'repi-tió u,tiI'izando muestros ma'yores de 20 g'm. .,30 gm., .y 5:0 gm. de ¡frutos maduros, se'cosy fracC'i'Onados.
B. Lixiviación. ¡Por lo dilficuhO'd 'queofreció el ¡fiItrado, el método de mm:€.ra-ci'ón '€'n og'UG, :fue 'cambi'C'do 'por el de lixíj,-via'ción, medi'ante e,1-que se obtuvi:e'ron ex-t.ractcs acuosos en las mismas .ccndidonesde temperatura, concent,radón 'Yut:Hi'zondo'e'l C'gua 'com'O soliv€n'te', en cantidad nece-smiC' ;hasta que· sobre'P'C>s-e'en dos o cuaJtrocentímetros e'l n!i'vel del pdvo consMuíd'Opo'r '¡'os frutos tri'turados. tEstas extrddost:Jmbi'én fuercn ensayados 'en ,los animol1esde ¡'abomtori-o.
C. Extracció~ de las hojas, por lixivia-ción. IEIextracto acuoso de hO'jCl's'se' hizo e'n'form'a semejonte 01 'obt,enido por i j¡ixivio'-dón e'n €'I caso de Ilos fruit'c1S y Olsí ¡mismos,eensayóen on'im:a+es de '!-abómtor,iQ,' .
-, akohól>icc 'O'sí ebrenido se· puso en unl'ix,i-
'Vi'Cldoren el qu:€' .s'€, :Ie añadió benc,eno¡ seJI'Oogiltó 'sUG'Y'2lmente :y ~e lo dejó 'reposm 24haros. Al ,fina-l de ese tiempo se oibse'r'Vóqu'e Sie prod!ucíG lo se-porarción de un'CÍ:subs-
. rroncia ace'itcs,a, 'Y de color 'calfé obscuro ryotro :'qu2 no t'eri,í,o lo -Gipaáencia 'O,::ei,tosa.Los .óos pont'es dbit,enidas de q'a mane'ra dres-cr'it'G' 's,St 'ai-ski,rcn y fue-ren seporlQdam,ent'ee'Va!p'Gr'a-dosn bO'ño'mmia. Les re's.iduos ,ca-
, rente's 'Y'Q.óe benceno se disolvieron en agu'Oy,si:r.vi·eron pmo les ensol'Y'es fa-rmacodiná-m·ices ..
. ¡Con res,pes dos ,extractos! pos-t'eriormen-te¡ ~5'e :e:f.e'ctumon pruebas cene:1 reoctivode Dragendol1fif poraakaloides.
2 .. Separación cromatogrófica.
Con l'Os ex:tr-O'ctos obtenidos¡ s'e pra-cticó'lo crcmorcgra!Bila ascendent·e de capo del-gado¡ 'U'tlid'izando ·como 'adsorbente- sí,l'i'cage!G. y 'como S'oitventel'O me·zclü de clor-ofor-mo.-meit'anol 'en p-roporción 7 :3 . .En 'I'as pl-a-¿a-s de si1Ik'O'g'el,'s'e hi'c1ieroncopre,r solucio-nes bencénicas de los dos e-xt-roc'tlOs. iAl decolor 'coM obscuro y aspecto ocei,toso se ;¡'edenomiln'Ó rex:t·mctlo q y alctrofl. .
. Con 'el e'xrtroctol apO'reóó una moncha-d¡ífusa 'qu,e se 'tom¡ó comoindi'ca-c'ión de I'aex!i'5't-enóa de: 'YlO'riossu'bs.tanc i·as. Con el ex-t'~ci;6t-o Id "y,istüs J,ós plocas hoijo I·a'acci6n deh5s :ra.Y9's·lJ¡litna;Y¡de ta-s presentaron dos mon-chO:s',fluo.re-sC'en'te:s¡,q'uese temo c6mo indi-
'c-á¿ ión de' ,que di.choex-t·radt'O tenío des com-pu'€'stos ;qu,·ímlicos.
3':.,' Ai~lamiento de los alcaloides.
,'.,. )A ¡pe·sa'r-cie que con eil ,reactirvo de Ora-gendonff los ,extractos I Iy 1'1 no pres,enta-ron' 'rea-cci'Ón posi,tTi'Yo bosodbs enl'Os;re-su.Jtados del'acrcmotogrofío¡ So€" inic ioronnueva's, €'x,tracóones¡ a -pa-r-ti'rde las hojos¡tendi'enites 'Ü' ·sibtene-r los ül,cal-oides qU'ími-comente puros. PO-rG talfi'n se si'gu:ió e.J si-9Lúente método. Se t'Omó una,conl1idad dema1te'rj'ail, 'Veg'€'tal~ (1'0 ·gm.) y $le colocó ~'nunbolón de 250 mi. de copa'( idod con 100'cc. deáódo 'su.J¡fúrico 01 5% y s-e lo S'ome-t'e o ·ebui¡I\'PcilÓnpor 'el ,tj·empo die· 3 minut'Os.'Lue.go se ,f:il1'ró/yesta- operación se v-uel,vl€a' :l'Iepeti-r por 't,pes veces¡ empleando cadavez 'lOa mI. del Ó'cido., ",La,s-okK:i1ón ácida s<e agitó' por t're's ve-
[les con 5\0 mi,. de cloroformo¡ hasta lo die-cdoróc:ión, totoh de lo misma¡ con 'e,1obje-to de exN·O'e,r lo dorofila que 'hubiere:!co-
mo S'ubprcd-ucto de ·1-0extra-cci'Ón óc ida. lA19 s0':u'ción c!ordórmi'ca quóe' pudi,e·r'Q1orras-trm al'ca-!oi<:le-ss,e le agitó también con áci-do suHúri,co al 5 % .
Se precedió entonc;es 'O neutro-lizm la'SC,luc::ón ór::,i¿ocon omon-í 0':-0 'conc'en:t.radocen 110 que deberían qu·e¿'or ,los <C:lkaloide'SC'iesrado libre y para 'S€'r sepmcidos¡utili-zand-o nue-vament'e ·dGrofc-r:m-o. De· estaman.e-ra ksalca:JC'i'óes deber.ían pasar 'en la5c-!udón ccle-mfó,mi'ca al estO'dio I'ibre (t're-sv·ec,es cc-n dc-rofcrmo) .
Pe-r último se a-ñ'adió 50 mI. de oguo'pa'ral'avO'r y lueg'O -die decantado. Despru'2ssel·e oñodi ó (sol. c lorctf-6rmko +ak:a-!ci-d2') su!fato de sodio 'a-nhidr'O¡ -se ·de'jÓe.n r€-pc,s'O por olg'u'r.'os horas 'Y luego s'erea:j,i·zó10' 'ccncentroción por destiloción¡ ha-st-a- las,equ-e·dod¡ ·qu·edO'ndo los 'dlcabides en el'fon:J,o de·1 recipi-ente. ¡
,Aplicando ·eSlte mércdo¡ ·e'n una prim,e-,ra e'xtmcción de 10 gm. -de hoj-a.s de todl,i¡0-1 ·final· s'eo!btuvounas pequeñÍS'i-mO's o:gu-Ijos :que se disolvi:eron s'C'!oment,e' en claro-.formo. 'Con esta- sorJuc i'Ón se pnacticólo c r'O-imCi~'CgrG'r¡a ascendiente de capa dell-goda¡ut-i:Hzando como adsorbente síli-caige'¡ G. ycomó sC'¡vente +0 mezda de: cloroformo 50·cc.¡ oce't'Ona 40 cc. y di'el1'i,l:amida 1O cc.,M-ediant·e 'myos U11-travioleta se 'hizo vis·ibleuna mO'nc'ha 'fluorescente de forma. 'olorg-o--
. do simi,lm al:a 'que se o-bt·u'Y'ocon 'el €,~troc-to be-ncéni'co desc ri,to ·ant·eriorment€'.
La 'P·1'oca se re,vel ó con el ,readiyo deDro;g'endonf{ ,result'andoJ:a 'reocóónneg:o-tí<va. IPosteriurmenre
1'a' lo pl'Oica: -sé,ll€, sume-
tió ,ala <1cóón de 'g,ases de,:y;odo :con·I-o que'la m'ancihO' se Ihiz'O ¡y.isiibl-ey 'tomó 'UnO' co-lora'ci6n ,amarillo ·¡'ntensa. .
Se real·izó¡ lue·go otpa. €,x't'mcci6n¡ a- pOir-ti r -die 20 gm. de hoj'O's de 't"a'C'I-I'i¡ ut ii'izandtoel .hl,ismo procedim:ento¡ hasta erlmQlmentode neu'tra-hzor ·con omonÍ:O'co 'conoentrodalo soluc'ión óc·da ctbt:enido. Se '1,le'Yóel'piHa 7 ylo 'solución sol'ino obltenida se uti'l,¡zópara- ,en5a'Y'0s fo:rmO'codinómicos.
:En prueha's 'O'd'ióonoI1e5 de 'ext,rocciónc'U'nqu'C' se siguió 'el mismo método 'y¡ en'O'~OTi'enc:io¡ 'se observoron .idé-ntkas 'condi-ciones¡ no SB' -obtuvieron ,los 'ogujO's produc-,to de Ila primera extracC'iÓn. '
:Lu;ego se introduj'Non 'a'¡ígunos .cambiosen el método: se ut-i,lli,zóácido do~h.í-dricoe'nIluglOr de' I suhfúri eo 'Y porosa cáustico e,n lu.-
,,'
Vol. X, N9 1" DICI,EMBRiE . .1967
.-90r del amcn;oco. Al final de la ,extracción$>2obtuvi,e,rcn Icscristales enformG :J'2a:gu-,
. Í'GS C'ur.'qU'8''en pe'que'ñísima 'ca'r.,ri'::o,d.Con le obt'2'nido se practi<:ó 1'0 cromato-
g'rofí'O. enidénti-cas condiciones qu'e la on-Ite~¡cnn'ente ,in::hcada 'cht€niér"~cs2 ccmo re-su!'rc'¿'o die ,1'0 misma des manchas Humes-cent'e5 a :'0 luz ult.ravideta úna mu'Y ce-r~C'a ,d'2'¡ pun to ¿,e 'P'O'¡.rida,.eJef~.rma c i·r:u I'c'ry p2'qu'eñ'O y 1'0 otr'a-, grande, ailargoda yce¡c:a de 1'0 señal terminal. .'
- AdiemtÓs, paro les enso>yos ,2,nanimol.es,b" I . I ., ., l' ...1s:e com' ¡lO. -a SOI'u-cl'onnEu','ro IZG~'C'r'ay en
h':lg.O'rde patosa se util:i'zó 'sosa coústicacone,1 objlEto de~ cbt,ener una soluóón sdina(cl::;'ru'ro ¿'2 sodiol que en las pruebes del'Obcrotor'io no 'alf.ectase a losan ima ¡>es..
Les ,ensoyosfonmocodinámicos, que se-rán ebjeto de uno pub+i'cación más amplio,,r,ev-e'loron, en pr.i1mer lugor qu-e, pa-re unaim,isma -dosi-s,lcse1fectos proV'ocodos por los€'Xlt,ra:::tosoefrUitos ¡f.ueron más intensos qu'e"'os de ¡hojos. ,En s,egundtolugor, sehr'e el sis-t'e1ma ner.V'iosJOcen'tra'I, 1105 '€xka-ores die
, t-ogl,j:i:producen 'i'rite'ns'Os,efectos depresivos,conlt'racC'ión de l'OsmiÚsc't:.:'v;:><Jors·a.J.ese im-potencia del tren post'erior. Sobre las 'fu'n-ción~s ,vegeta:tivQls, ¡esto droga produce e!fec-tos ,éle ,tipo col!inér9'ico, con controcóón deint€'stino 'Ü'i·slado, Ihipotens'ión orte-ri'al, bm-dipnea, ci'anosis y paro. respi'rart''Orio.
:La espe'cie Pernettya pCi7Yifol1a/ conoci-óo como "t'adl,i" 'Ü "toglW' y cu'yos frutosy 'hojas son capa:::es de producir 'es,todes deintcx'ica:::ión ogudcl', ccn olu::naóone's ycoma, se sC'metió :: 'un estu.:J:io fi,toquímico.
Se hióercn extractos de fmtos y espe-cidment,e de 'hojas uti'l,izando el :mé-todo deimoceración yel de J;ixivia'Ción. 1iail'es 'ex!tmc-tcsresU'!tO'~on' rbo!óg.i:::Q1merlte a:::hvO's. Delos ,re'sidues que quedo rcn de'spué s dé lo
, evapcraóón ·de l'Osextractos G:'UosOS,$·e ob- '.tu,vioe'rG'n extractos alcd-ló¡'¡ccs, -que tmto-dos con ber.ceno se sepa.ra:ron en dos par-te's: I y I¡I resú:,tO'r.do amiba'sfraC'ci'Ones ,far~moccdi'r.ómicÜimente adrivos.
f)1 -e'xtra-cto' 11 mediante seporO'ción cro-moreg.rófico, 'encapÜ' delgada, pres€ntó dosmonc-has fluorescente5- O' lo acción de 'Ialuz ul,trOtviol,etn.
A pesar die que los ext-ractüs obtenidosno dieron reacción positiva con el ,reoohvodeiDragendcdf, S2 hk:'i,eron ensoyos de ex--trO'cción de alcak-ides. .
Se obtuvi,eron/. en dos 'Oportunidades,cristoles en for;mo de 'aguijas, en pequeñacO::-.1tj.dod,los mismos qU'2 al exhmen cro-ma-tegráfi.co· dieron como 'resul:rado 1'0 pre-s·enóa de dos mtO'nc,hos ,fluorescen1tes.
Les extractos de ta:gl[i p roduj €'rón i,n-tensos efectos depresi-vos del sistem,a ne'r-vi'oso centra" y ef.e·ctes pe,ri+é-ricos de ,hpocolinérgico.
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SUMMARY,A. :phytocihe:mj¡catl study wa's cmried
out wi'tih Ithe ibotani:ca'l spe,cie'S Pernettyaparvifolia,/ en er'y1caceoe kn.ownin Ecua-dor0'5 ·I/todli" or l/\togiHi" and wihose frui:tsWihen' e'rror1le1oulSlI,y,inQiested by cihi:ldr'en con-'fUlSoin!gwiltih on edibl!e berry produce Qtcul€i'r1Ito:x:it(Xlltion witihhoilliU'CÍonot i'Üns and orhe rph'ycihoti,c ¡monilresta'fhons.
Sevelf"1Ctl'"eXltroot,ior1lswere done by m'O-
oC€lrelti'Onond ¡J ixiMilQltiranutid'¡'zi ng sepO'rarte,lyfruits ,and II,ealV€is.Grude €xtracrs were tes-t'ed ,in ,miJOe ¡fOir biolioQ!i'oal O'ohvi'ty confitr-miingiotls ,t'Oxióty. Tihen extrocts were ,eva-
, pOirort€d ond 't'r'€'at<edwiitih 'Ollcdhol ond ben-
• zene, cbtaining two fmctic,n (1 and I1 l·.B,ctih re's'ulle:J p'hGl1mocodynomicO:l'ly 'Od,ive.
Ftrcm ,f,racricn 11 by 1'hin-'lolyer cihromO-,teg'mph'y two sP:J,t's'f Iu'C!reoscenrby uíltrQIvio~let li'g::¡t wer1e s'EpO'roted. T,r'eatrment wiltihDra:g2'r;,dopff';s r,e'a,ct'ant and of'he'rs Ita iden- .tify alka.lcids relsu-lt.e:]-C'onsistenf'ily negarti-•.ve. Ne'edllle cris~'a,Js cbt'ained fróm the ex-l'mct ond su:bmi,t'ted to' chromotClgtra,pihic'eXc.m:rnOiti:on gove o.lso t1n,e t\NO f':'ulClrSiC'enrt's,pot,s but not positive re'O'c,t,ions for eilká-'Ioids. llhen it ,is ccncluóed tho,t t'hearctiv€suibs,tonces of Pernettya parvifolia O'r:e notGtlkoloids. A new c:hemi-cal s,tudr¡ is iin p'rü'- .gness.
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