Erradicación de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 con un prototipo de microondas

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Erradicación de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 con un prototipo de microondas

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Erradicación de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 con un prototipo de microondas. Erradicación de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 con un prototipo de microondas. I.- Justificación. II.- Antecedentes. III.- Objetivos. IV.- Material y métodos. - PowerPoint PPT Presentation

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Erradicación de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza

1.2 con un prototipo de microondas

Erradicación de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza

1.2 con un prototipo de microondas

Page 2: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Erradicación de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2con un prototipo de microondas

Erradicación de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2con un prototipo de microondas

I.- JustificaciónI.- Justificación

II.- AntecedentesII.- Antecedentes

III.- ObjetivosIII.- Objetivos

IV.- Material y métodosIV.- Material y métodos

V.- Resultados y discusiónV.- Resultados y discusión

VI.- ConclusionesVI.- Conclusiones

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I.- JustificaciónI.- Justificación

Índice

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FusariosisVasculardel melón

FusariosisVasculardel melón

Enfermedad muy destructivaEnfermedad muy destructiva

Reducción de la producciónhasta en un 90%

Reducción de la producciónhasta en un 90%

Rápida propagaciónRápida propagación

ÍndiceFuente: Soriano Martín, M. L., et al. 2001

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Dificultad de control de Fusarium oxysporum f. sp. melonis Dificultad de control de Fusarium oxysporum f. sp. melonis

Mejor método de luchaMejor método de lucha

Índice

Estructuras de resistencia muy persistentesEstructuras de resistencia muy persistentes

Métodos de control en campo costososy difíciles de manejar

Métodos de control en campo costososy difíciles de manejar

Prevención del establecimiento del patógeno en el terreno de cultivoPrevención del establecimiento del patógeno en el terreno de cultivo

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Índice

Zonas de mayor producción de melón(Castilla la Mancha)

Zonas de mayor producción de melón(Castilla la Mancha)

Implantación del cultivo mediante plántulas producidas ensemilleros industriales

Implantación del cultivo mediante plántulas producidas ensemilleros industriales

Fuente: Páginas Agrarias de Ruralnet, 2004Fuente: Páginas Agrarias de Ruralnet, 2004

Fuente: Conic System S. L., 2004Fuente: Conic System S. L., 2004

Fuente: Conic System S. L., 2004Fuente: Conic System S. L., 2004

Reutilización debandejas

de propagación

Reutilización debandejas

de propagación

Page 7: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Esterilizaciónmuy

complicada

Esterilizaciónmuy

complicada

Fuente: Conic System S. L., 2004Fuente: Conic System S. L., 2004

Reutilización debandejas

de propagación

Reutilización debandejas

de propagación

Índice

• Naturaleza del material (Poliestireno Expandido)

• Problemas de fitotoxicidad y manejo con los desinfestantes químicos (Formol e Hipoclorito de Sodio)

• Lentitud de los hornos convencionales de desinfestación

• Naturaleza del material (Poliestireno Expandido)

• Problemas de fitotoxicidad y manejo con los desinfestantes químicos (Formol e Hipoclorito de Sodio)

• Lentitud de los hornos convencionales de desinfestación

Principal fuentede dispersión

de la enfermedad

Principal fuentede dispersión

de la enfermedad

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Índice

Energía microondasEnergía microondas

Grandes posibilidadesde aplicación

Grandes posibilidadesde aplicación

Desinfestación de bandejas de propagaciónDesinfestación de bandejas de propagación

Control de la Fusariosis antesde su establecimiento en el campo

Control de la Fusariosis antesde su establecimiento en el campo

Material vegetal exento del patógenoMaterial vegetal exento del patógeno

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Índice

II.- AntecedentesII.- Antecedentes

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ÍndiceFuente: Zapata, M. et al., 1989Fuente: Zapata, M. et al., 1989

Fuente: Namesny, A., 1997Fuente: Namesny, A., 1997

Fuente: MELYSOL, 2004 (melysol.com)Fuente: MELYSOL, 2004 (melysol.com)

El melónEl melón

Familia: CucurbitaceaeEspecie Cucumis melo L.Familia: Cucurbitaceae

Especie Cucumis melo L.

Hortaliza muy cultivadaHortaliza muy cultivada

Fruto muy demandadoFruto muy demandado

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Índice

0

2.000

4.000

6.000

8.000

10.000

12.000

China Egipto España EstadosUnidos deAmérica

India Irán, Rep.Islámica de

Italia México Rumania Turquía Resto delMundo

País

Pro

du

cc

ión

(m

ile

s d

e t

)

1.998 1.999 2.000 2.001 2.002 2.003

El melón en el mundo. Serie histórica de los principales países productores en los últimos años.

(FAOSTAT, marzo de 2004).

China, Turquía, EE.UU., España e Irán China, Turquía, EE.UU., España e Irán

Cerca del 60% de la producción mundial de melónCerca del 60% de la producción mundial de melón

España produce alrededor del 5% del melón mundialy exporta casi la quinta parte

España produce alrededor del 5% del melón mundialy exporta casi la quinta parte

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Índice

España, Italia, Francia, Grecia y Portugal España, Italia, Francia, Grecia y Portugal

Principales países productores de melón en la UEPrincipales países productores de melón en la UE

España produce prácticamente la mitaddel total en la UE y exporta casi el 80%

España produce prácticamente la mitaddel total en la UE y exporta casi el 80%

1020,0 1006,5 984,1 991,3

296,6 299,0 292,8 297,5 285,8

161,2 160,0 164,1 169,0

517,2 506,2

570,3536,3

506,1478,7

76,2 83,7 64,5 71,8 85,1

1149,8

-

281,5

-

176,7

-0

200

400

600

800

1000

1200

1998 1999 2000 2001 2002 2003

Año

Pro

du

cció

n (

mile

s d

e t)

España Francia Grecia Italia Portugal

El melón en La Unión Europea. Serie histórica de la producción obtenida en los principales países productores de los últimos años.

(EUROSTAT, 2004).

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Índice

Castilla-La Mancha, Andalucía, Murcia, Extremadura y ValenciaCastilla-La Mancha, Andalucía, Murcia, Extremadura y Valencia

0

50.000

100.000

150.000

200.000

250.000

300.000

350.000

400.000

Andalucia C. Valenciana Castilla-La Mancha Extremadura R. de Murcia

CC.AA.

Pro

du

cció

n (

t)

1997 1998 1999 2000 2001

El melón en España. Serie histórica de producción en las CC.AA. más representativas de este cultivo.

(MAPA, 2004).

Principales regiones productoras de melón en EspañaPrincipales regiones productoras de melón en España

Castilla-La Mancha produce el 34% del total español,destacando Ciudad Real, con el 28,6%

Castilla-La Mancha produce el 34% del total español,destacando Ciudad Real, con el 28,6%

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Índice

Fusariosis Vascular del melónFusariosis Vascular del melón

SintomatologíaSintomatología

Las hojas amarilleanprogresivamente

de forma acrópeta

Las hojas amarilleanprogresivamente

de forma acrópeta

Marchitamientosúbito de la planta

desde la base haciael ápice

Marchitamientosúbito de la planta

desde la base haciael ápice

Amarilleamiento(Yellows)

Amarilleamiento(Yellows)

Marchitamiento(Wilts)

Marchitamiento(Wilts)

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Índice

Fusariosis Vascular del melónFusariosis Vascular del melón

Agente causalAgente causal

Fusarium oxysporum Schlecht f. sp. melonis (Snayder y Hansen) Fusarium oxysporum Schlecht f. sp. melonis (Snayder y Hansen)

Patógeno específico del melónPatógeno específico del melón

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Índice

Fusariosis Vascular del melónFusariosis Vascular del melón

Control de la enfermedadControl de la enfermedad

Métodos culturales Métodos biológicosMétodos químicos

Métodos físicos

Métodos culturales Métodos biológicosMétodos químicos

Métodos físicos

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Tratamiento físico de Fusarium oxysporum f. sp. melonisTratamiento físico de Fusarium oxysporum f. sp. melonis

Trabajos previos aplicandocalor y energía microondas

Trabajos previos aplicandocalor y energía microondas

Reducción de la viabilidad del inóculoReducción de la viabilidad del inóculo

Reducción de la patogenicidad (incidencia y severidad de la enfermedad)Reducción de la patogenicidad (incidencia y severidad de la enfermedad)

Erradicación del patógenoErradicación del patógeno

Índice

Page 18: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

III.- ObjetivosIII.- Objetivos

Page 19: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Objetivos

1.- Obtención de la potencia calorífica real del prototipo de hornomicroondas utilizado en este trabajo

Obtener datos de energías aplicadas conlos diferentes tiempos de exposición

a las microondas

Índice

2.- Estudio de la influencia que producen las radiaciones delprototipo de microondas sobre la suspensión de inóculo de Fom

raza 1.2 tanto en la viabilidad de conidias como en la patogenicidaddel inóculo sobre plántulas de melón Amarillo Canario.

3.- Estudio de la influencia que producen las radiaciones delprototipo de horno microondas utilizado sobre la viabilidad del

inóculo en un substrato infestado con Fom raza 1.2

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IV.- Material y métodosIV.- Material y métodos

Índice

Page 21: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Material y métodosMaterial y métodos

Obtención de la potencia calorífica real de un horno microondascomercial y del prototipo de horno microondas utilizado en este

trabajo

Obtención de la potencia calorífica real de un horno microondascomercial y del prototipo de horno microondas utilizado en este

trabajo

Influencia del tratamiento con microondas sobre la viabilidad deconidias de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en

suspensión acuosa

Influencia del tratamiento con microondas sobre la viabilidad deconidias de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en

suspensión acuosa

Influencia del tratamiento con microondas sobre la viabilidad deconidias de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en

un substrato artificialmente infestado

Influencia del tratamiento con microondas sobre la viabilidad deconidias de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en

un substrato artificialmente infestado

Influencia del tratamiento con microondas sobre la patogenicidadde Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en plántulas

de melón Amarillo Canario

Influencia del tratamiento con microondas sobre la patogenicidadde Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en plántulas

de melón Amarillo Canario

Índice

Page 22: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Obtención de la potencia calorífica real de un horno microondas comercialy del prototipo de horno microondas utilizado en este trabajo

Obtención de la potencia calorífica real de un horno microondas comercialy del prototipo de horno microondas utilizado en este trabajo

Horno microondas prototipoHorno microondas prototipo

Determinación de la potencia caloríficaDeterminación de la potencia calorífica

Índice

ResultadosResultados

Page 23: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

Horno microondas prototipoHorno microondas prototipo

- Conformación en chapagalvanizada de 2 y 3 mm

- Unión mediante remachesde aluminio

- Conformación en chapagalvanizada de 2 y 3 mm

- Unión mediante remachesde aluminio

Diseñado y fabricado por las Cátedras de Motores y Fitopatologíade la EUITA de Ciudad Real

Diseñado y fabricado por las Cátedras de Motores y Fitopatologíade la EUITA de Ciudad Real

- Dos puertas (frontal y trasera)- Apertura y cierre accionado

mediante sistema detransmisión hidrostática

- Dos puertas (frontal y trasera)- Apertura y cierre accionado

mediante sistema detransmisión hidrostática- Potencia de salida teórica:

4000 W- Alimentación: 220 V CA

- Frecuencia de microondas: 2,45 Ghz

- 4 magnetrones (1000 W cada uno)

- Accionamiento manual

- Potencia de salida teórica:4000 W

- Alimentación: 220 V CA- Frecuencia de microondas:

2,45 Ghz- 4 magnetrones (1000 W cada uno)

- Accionamiento manual

- Volumen de la cavidad:122,3 litros (72,5 cm x 67,5 cm x 25 cm)

- Capaz de contener 3 bandejasde propagación

- Volumen de la cavidad:122,3 litros (72,5 cm x 67,5 cm x 25 cm)

- Capaz de contener 3 bandejasde propagación

- 4 aberturas de salida de lasmicroondas situadas dos ados en caras opuestas de la

cavidad interior

- 4 aberturas de salida de lasmicroondas situadas dos ados en caras opuestas de la

cavidad interior

Page 24: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Determinación de la potencia caloríficaDeterminación de la potencia calorífica

Índice

Recipientes dePoliestireno Expandido

Recipientes dePoliestireno Expandido

Volumen fijo de agua(800 ml)

Volumen fijo de agua(800 ml)

Irradiación con microondas durante30, 60, 120, 180, 240, 300, 360

y 420 segundos, hasta temperaturapróxima a ebullición

Irradiación con microondas durante30, 60, 120, 180, 240, 300, 360

y 420 segundos, hasta temperaturapróxima a ebullición

Medida de la temperaturaantes y después de la

irradiación

Medida de la temperaturaantes y después de la

irradiación

Page 25: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

Determinación de la potencia caloríficaDeterminación de la potencia calorífica

Recipiente centrado en el interiordel horno

Recipiente centrado en el interiordel horno

- Un ensayo con un solomagnetrón (1000 W)- Un ensayo con dos

magnetrones (2000 W)- Un ensayo con tres

magnetrones (3000 W)- Un ensayo con cuatromagnetrones (4000 W)

- Un ensayo con un solomagnetrón (1000 W)- Un ensayo con dos

magnetrones (2000 W)- Un ensayo con tres

magnetrones (3000 W)- Un ensayo con cuatromagnetrones (4000 W)

Page 26: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Determinación de la potencia caloríficaDeterminación de la potencia calorífica

ΔT = Tf - TiΔT = Tf - Ti Ce = 1 Cal/grºCCe = 1 Cal/grºCm = 800 grm = 800 gr 1 Jul = 0,24 Cal1 Jul = 0,24 Cal

Energía (Jul) = m · Ce / 0,24 · ΔTEnergía (Jul) = m · Ce / 0,24 · ΔT

Potencia real (W) = energía / tiempo de exposiciónPotencia real (W) = energía / tiempo de exposición

Índice

Page 27: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

1175,93

766,34

658,37

464,32

645,74

0

200

400

600

800

1000

1200

Comercial Prototipo, 1 mag. Prototipo, 2 mag. Prototipo, 3 mag. Prototipo, 4 mag.

Microondas

Po

ten

cia

(W)

Potencia media obtenida al someter 800 ml de agua a la radiación microondas durante distintos tiempos utilizando tanto el horno microondas comercial marca Daewoo,modelo KOC-970T, como el prototipo de horno microondas conectando de 1 a 4

magnetrones.

ResultadosResultados

Page 28: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Incremento del inóculoIncremento del inóculo

Tratamiento térmico con microondasTratamiento térmico con microondas

Viabilidad del inóculoViabilidad del inóculo

ResultadosResultados

Influencia del tratamiento con microondas sobre la viabilidad de conidiasde Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en suspensión acuosa

Influencia del tratamiento con microondas sobre la viabilidad de conidiasde Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en suspensión acuosa

Índice

Page 29: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Patog.

Subs.

M.liq.

Incremento del inóculoIncremento del inóculo

Repicado y cultivo de Fom en PDARepicado y cultivo de Fom en PDA

Repicado y cultivo de Fom en CPDRepicado y cultivo de Fom en CPD

Filtrado de la suspensión líquida del hongoFiltrado de la suspensión líquida del hongo

Cuantificación de la densidad del inóculoCuantificación de la densidad del inóculo

Ajuste de la concentración del inóculoAjuste de la concentración del inóculo

Page 30: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

Repicado y cultivo de Fom en PDARepicado y cultivo de Fom en PDA

Explante de Fom raza 1.2(raza más frecuente en

Ciudad Real), aislado CR-6801

Explante de Fom raza 1.2(raza más frecuente en

Ciudad Real), aislado CR-6801

Fuente: Soriano Martín, M. L., et al. 2001Fuente: Soriano Martín, M. L., et al. 2001

Placas de petri con PDAPlacas de petri con PDA

Incubación en estufa(25-27 ºC) durante

10 días

Incubación en estufa(25-27 ºC) durante

10 días

• Conservación en frigorífico• Repicado en medio líquido (CPD)

• Conservación en frigorífico• Repicado en medio líquido (CPD)

Page 31: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

Repicado y cultivo de Fom en CPDRepicado y cultivo de Fom en CPD

5 explantes de Fom raza 1.2(raza más frecuente en

Ciudad Real), aislado CR-6801

5 explantes de Fom raza 1.2(raza más frecuente en

Ciudad Real), aislado CR-6801

Fuente: Soriano Martín, M. L., et al. 2001Fuente: Soriano Martín, M. L., et al. 2001

Matraces con 150 ml de CPDMatraces con 150 ml de CPD

Incubación en cámara de ambientecontrolado (16h/día de fotoperíodo,

27 ± 3 ºC, 70 ± 20% HR) durante 6 días

Incubación en cámara de ambientecontrolado (16h/día de fotoperíodo,

27 ± 3 ºC, 70 ± 20% HR) durante 6 días

Agitador orbital(120 rpm)

Agitador orbital(120 rpm)

Page 32: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

Filtrado de la suspensión líquida del hongoFiltrado de la suspensión líquida del hongo

Transcurridos 6 días deincubación en CPD

Transcurridos 6 días deincubación en CPD

Filtrado a través de dosgasas estériles

Filtrado a través de dosgasas estériles

Page 33: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

Cuantificación de la densidad del inóculoCuantificación de la densidad del inóculo

Dilución a la décima partede la suspensión filtrada

Dilución a la décima partede la suspensión filtrada

Conteo de conidias medianteun hematocitómetro colocado

en un microscopio

Conteo de conidias medianteun hematocitómetro colocado

en un microscopio

C = Conidias / mlC = Conidias / ml

Page 34: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

Ajuste de la concentración del inóculoAjuste de la concentración del inóculo

Adición del volumenresultante de agua

destilada estéril

Adición del volumenresultante de agua

destilada estéril

V ∙ C = V’ ∙ C’(V: volumen, C: concentrac.)

V ∙ C = V’ ∙ C’(V: volumen, C: concentrac.)

Concentración deseada:5∙106 conidias/ml

Concentración deseada:5∙106 conidias/ml

Page 35: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Tratamiento térmico con microondasTratamiento térmico con microondas

Patog.

M.liq.

10 ml de inóculo(5∙106 conidias/ml) por tubo

10 ml de inóculo(5∙106 conidias/ml) por tubo

6 tubos de ensayo6 tubos de ensayo

Colocados equidistantes enel interior del prototipo

Colocados equidistantes enel interior del prototipo

Page 36: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Viabilidad del inóculoViabilidad del inóculo

Índice

Método de las dilucionesMétodo de las diluciones

En cada uno de losviales se diluye el

inóculo diez veces

En cada uno de losviales se diluye el

inóculo diez veces

Page 37: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Viabilidad del inóculoViabilidad del inóculo

Cultivo de las dilucionesCultivo de las diluciones

Diluciones 10-2 y 10-4

de cada tubo

Diluciones 10-2 y 10-4

de cada tubo

100 μl100 μl

Placas de petri conAgar-Jugo V6

Placas de petri conAgar-Jugo V6

Incubación en oscuridada 25-27 ºC

Incubación en oscuridada 25-27 ºC

Índice

Page 38: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Subst.

M.liq.

Viabilidad del inóculoViabilidad del inóculo

Conteo de UFCConteo de UFC

• 3er y 6º día de incubación• Incontable si UFC > 300

• Viabilidad expresada en UFC/ml ó UFC/gr

• 3er y 6º día de incubación• Incontable si UFC > 300

• Viabilidad expresada en UFC/ml ó UFC/gr

Page 39: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

Número medio de Unidades Formadoras de Colonias por mililitro (UFC/ml) que se han desarrollado después de irradiar con microondas 10 ml de

suspensiones acuosas (6 tubos de 10 ml cada uno) de conidias de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 (de concentración 5×106 conidias/ml)

durante distintos tiempos (niveles de energía).

Tiempo (energía)Media de UFC/ml (1)

Dilución 10-2 Dilución 10-4

0 seg (0 jul) Inc. (2) 126,67104 a

5 seg (5879,6 jul) Inc. 111,67104 a

10 seg (11759,3 jul) 493,33102 a 6,67104 b

15 seg (17638,9 jul) 33,33102 b 0,00

20 seg (23518,5 jul) 30,00102 b 0,00

25 seg (29398,1 jul) 1,67102 b 0,00

30 seg (35277,8 jul) 0,00 0,00 (1) Valores en columnas seguidos de letras diferentes indican diferencias significativas al nivel 95% (p ≤ 0,05).

(2) inc. = número incontable de UFC (más de 300 colonias).

ResultadosResultados

Page 40: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Incremento del inóculoIncremento del inóculo

Infestación del substrato y tratamientotérmico con microondas

Infestación del substrato y tratamientotérmico con microondas

Viabilidad del inóculoViabilidad del inóculo

ResultadosResultados

Índice

Influencia del tratamiento con microondas sobre la viabilidad de conidiasde Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en un substrato

artificialmente infestado

Influencia del tratamiento con microondas sobre la viabilidad de conidiasde Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en un substrato

artificialmente infestado

Page 41: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Infestación del substrato y tratamientotérmico con microondas

Infestación del substrato y tratamientotérmico con microondas

Infestación de 10 alvéoloscon 3 ml de inóculo

Infestación de 10 alvéoloscon 3 ml de inóculo

Llenado de las bandejascon substrato estéril

Llenado de las bandejascon substrato estéril

Los alvéolos siempreson los mismos

Los alvéolos siempreson los mismos

Colocación centrada de la bandeja en el interior delprototipo

Colocación centrada de la bandeja en el interior delprototipo

IrradiaciónIrradiación

Índice

Page 42: Erradicación de  Fusarium oxysporum  f. sp.  melonis  raza 1.2 con un prototipo de microondas

Índice

Viabilidad del inóculoViabilidad del inóculo

Método de las dilucionesMétodo de las diluciones

En los tubos de ensayoy cada uno de los vialesse diluye el inóculo diez

veces

En los tubos de ensayoy cada uno de los vialesse diluye el inóculo diez

veces

Cultivo de las dilucionesCultivo de las diluciones

Conteo de UFCConteo de UFC

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Número medio de Unidades Formadoras de Colonias por gramo de substrato (UFC/g) que se han desarrollado después de irradiar, con diferentes cantidades

de energía, substrato infestado con 3 ml de suspensión de conidias de Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 de concentración 5×106 conidias/ml.

Tiempo (energía)UFC/g (1) (2)

Dilución 10-2 Dilución 10-4

0 seg (0 jul) Inc.(3) 6,70104 a

20 seg (23518,5 jul) Inc. 6,30104 ab

40 seg (47037,0 jul) Inc. 4,20104 ab

60 seg (70555,6 jul) Inc. 4,00104 b

80 seg (94074,1 jul) 64,40102 a 0,70104 c

100 seg (117592,6 jul) 39,80102 a 0,60104 c

120 seg (141111,1 jul) 0,00 0,00(1) Cada valor es la media de diez repeticiones.

(2) Valores en columnas seguidos de letras diferentes indican diferencias significativas al nivel 95% (p ≤ 0,05).

(3) inc. = número incontable de UFC (más de 300 colonias).

ResultadosResultados

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Incremento del inóculoIncremento del inóculo

Tratamiento térmico con microondasTratamiento térmico con microondas

Inoculación de plántulasInoculación de plántulas

Preparación de las macetas para las plántulasPreparación de las macetas para las plántulas

Germinación de las semillasGerminación de las semillas

Siembra de las semillasSiembra de las semillas

Evaluación de la incidencia y severidad de la enfermedadEvaluación de la incidencia y severidad de la enfermedad

ResultadosResultados

Índice

Influencia del tratamiento con microondas sobre patogenicidadde Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en plántulas de

melón Amarillo Canario

Influencia del tratamiento con microondas sobre patogenicidadde Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 en plántulas de

melón Amarillo Canario

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Índice

Preparación de las macetas para las plántulasPreparación de las macetas para las plántulas

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Índice

Germinación de las semillas de melón Amarillo CanarioGerminación de las semillas de melón Amarillo Canario

Se ha utilizado melón Amarillo Canario por sersensible a las cuatro razas de Fom (0, 1, 2 y 1.2)

Se ha utilizado melón Amarillo Canario por sersensible a las cuatro razas de Fom (0, 1, 2 y 1.2)

Se mantienen en la cámara de ambiente controladodurante 5 días

Se mantienen en la cámara de ambiente controladodurante 5 días

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Siembra de las semillasSiembra de las semillas

En vasos con substrato estérilEn vasos con substrato estéril

50 vasos por bandeja50 vasos por bandeja

Riego cada 48 horasRiego cada 48 horas

13 días en cámara de ambiente controlado13 días en cámara de ambiente controlado

1ª hoja verdadera1ª hoja verdadera

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Inoculación de plántulasInoculación de plántulas

• 40 plántulas por tratamiento del inóculo (4 repeticiones)• 40 plántulas testigo (inóculo sin tratar)

• 40 plántulas sin inocular (agua destilada estéril)

• 40 plántulas por tratamiento del inóculo (4 repeticiones)• 40 plántulas testigo (inóculo sin tratar)

• 40 plántulas sin inocular (agua destilada estéril)

Se mantienen las raíces sumergidas en el inóculodurante 2 minutos

Se mantienen las raíces sumergidas en el inóculodurante 2 minutos

• En la cámara de ambiente controlado durante 22 días• Riego cada 48 horas

• En la cámara de ambiente controlado durante 22 días• Riego cada 48 horas

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Evaluación de la incidencia y severidad de la enfermedadEvaluación de la incidencia y severidad de la enfermedad

Cada 48 horas se evalúan los síntomas de severidad de FusariosisCada 48 horas se evalúan los síntomas de severidad de Fusariosis

Índice de severidad (%)Índice de severidad (%)

Curvas de progreso dela enfermedad

Curvas de progreso dela enfermedad

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Curvas de progreso de la Fusariosis Vascular en plántulas de melón Amarillo Canarioinoculadas con Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 irradiado con microondas

durante distintos tiempos (niveles de energía).

ResultadosResultados

0

20

40

60

80

100

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22

Días transcurridos desde la inoculación

Índ

ice

de

seve

rid

ad (

%)

0" (0 jul) 5" (5879,6 jul) 10" (11759,3 jul) 15" (17638,9 jul)

20" (23518,5 jul) 25" (29398,1 jul) 30" (35277,8 jul) Testigo

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Media del Área Bajo la Curva de Progreso de la Enfermedad (ABCPE)Fusariosis Vascular en plántulas de melón Amarillo Canario, inoculadas con

Fusarium oxysporum f. sp. melonis raza 1.2 irradiado con microondas durantedistintos tiempos (niveles de energía).

Tiempo de exposición a las microondas y energía aplicada

ABCPE (unidades2) (1) (2)

0 seg (0 jul) 1465,00 a

5 seg (5879,6 jul) 1426,25 a

10 seg (11759,3 jul) 1261,25 b

15 seg (17638,9 jul) 262,50 c

20 seg (23518,5 jul) 77,50 d

25 seg (29398,1 jul) 15,63 d

30 seg (35277,8 jul) 0,00

Testigo (control -) 0,00(1) Cada valor es la media de 4 repeticiones.

(2) Valores en columnas seguidos de letras diferentes indican diferencias significativas al nivel 95% (p ≤ 0,05).

ResultadosResultados

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VI.- ConclusionesVI.- Conclusiones

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ConclusionesConclusiones

• El prototipo de horno microondas desarrolla, a pleno rendimiento, unapotencia calorífica real que es un 45,1% superior a la producida por un microondas comercial.

• Las UFC se reducen, y por ello la viabilidad del inóculo, a medida que aumenta la energía que se aplica a éste.

• Se ha conseguido la erradicación del patógeno, tanto en suspensiones acuosas como en substrato al alcanzar las energías de 35.277,8 y 141.111,1 julios respectivamente. Determinándose que cuando se aplican 63,18 julios/gramo de substrato se erradica el patógeno.

• Cuanto mayor es la energía aplicada mayor es el retraso en la aparición de la enfermedad y mayor es la disminución de los índices de severidad.

• Este sistema de microondas resulta una técnica carente de riesgos y capaz de incorporarse en la cadena de siembra automática de plántulas de melón para erradicar eficazmente el patógeno en las bandejas de propagación antes de su siembra.

• Se deduce la posibilidad de aplicar este mismo sistema a todo un conjunto de cultivos producidos industrialmente por el mismo método y que son atacados por patógenos sensibles a la radiación microondas.

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Artículos publicadosArtículos publicados

• Soriano Martín, M. L., Porras Piedra, A., Perez Bencecry, C., Martín Sánchez, O., Porras Soriano, A. y Martín Sánchez, D., “Eliminación con microondas de la Fusariosis del melón durante la propagación

comercial de plántulas”, revista Phytoma-España.

• Soriano Martín, M. L., Porras Piedra, A., Martín Sánchez, O., Porras Soriano, A., Martín Sánchez, D. y Aragón, L. N., “Aplicación de microondas para la erradicación de la Fusariosis del melón”, revista

Agricultura.

Trabajo pendiente de publicaciónTrabajo pendiente de publicación

• Actualmente, se encuentra pendiente de publicación un trabajo que

ha sido enviado a la revista Spanish Journal of Agricultural Research

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Gracias por su atención

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