diagnósticode procesos reproductivos en porcino

El diagnóstico de problemas reproductivos es dificultoso por diferentes factores:

Toma de muestras incorrecta o técnica diagnóstica no adecuada

El agente infeccioso no se encuentra presente en la muestra estudiada

Un gran porcentaje de abortos son por causas no infecciosas

Para hacer una primera aproximación a la causa del fallo reproductivo es importante realizar una anamnesis completa y tener en cuenta varios aspectos:

Tipo de proceso: el tipo de fallo reproductivo (repeticiones cíclicas o acíclicas, infertilidad con retorno a celo, metritis, abortos u orquitis en caso del macho) orienta a diferentes agentes etiológicos.

Momento del fallo reproductivo: en función del agente infeccioso se produce la pérdida de gestación en diferentes momentos. Si la muerte de los fetos se produce antes del día 34-35 (momento en el que se produce la osificación) se producirán reabsorciones y no se observarán los abortos.

Estado de los fetos: hay agentes infecciosos que producen fetos frescos como Brucella sp. o Influenza. Otros se caracterizan por causar momificaciones (PRRS, parvovirus), o malformaciones (alteraciones genéticas, intoxicación por plantas, peste porcina clásica).

Estado de la madre: hay abortos que se dan por afectación de la madre como la Influenza o el Mal Rojo (aborto indirecto). En otros procesos se produce el aborto sin apreciarse otra sintomatología en la madre como es el caso de parvovirosis.

Epidemiología: es importante valorar si afecta solamente a hembras de primer parto, que se suele deber a una mala adaptación de las primerizas a agentes infecciosos de la granja, o a hembras multíparas que indica problemas de manejo o patógenos recién introducidos en la explotación.

Infertilidad Muerte embrionaria Aborto Nacidos muertos

PRRS × ×

Parvovirus porcino × ×

Circovirus tipo 2 × × ×

Influenza porcina × × ×

Toxoplasma gondii × ×

Leptospira spp. × ×

Chlamydia × × ×

Brucella spp. × ×

Erysipelothrix rhusiopathiae ×

procesos no infecciosos

procesos infecciosos

causas tóxicasMicotoxinasMonóxido de cárbonoPlantas tóxicas o fármacos causantes de malformaciones

fertilidad estacional: relacionado con el fotoperiodo y el calor problemas de manejo

- alimentación- detección apropiada del celo- protocolo de inseminación- estrés

procesos dolorosos o inflamatorios cojerasquemaduras solares

problemas reproductivos por causas genéticas: asociado normalmente a malformaciones de los fetos

cuadro etiológico

enfermedades bacterianas

Leptospiras patógenas (Leptospira bratislava y Leptospira pomona)

Fase aguda: fiebre de la hembra, hemorragias, ictericia y fetos hemorrágicos.

Fase crónica: puede producir abortos con fetos sin apenas lesiones, pero la principal presentación son las repeticiones cíclicas o acíclicas sin otra sintomatología en las hembras.

Chlamydia spp(Chlamydia suis, Chlamydophila abortus)

Infertilidad, abortos tardíos, mortinatos y nacidos débiles; se observa alteración coriónica.

No hay afectación del estado general de las madres.

Su implicación en procesos reproductivos en porcino sigue en discusión.

Brucella spp. (principalmente por Brucella suis)

Abortos en cualquier fase, sobre todo al final de gestación con fetos frescos

Infertilidad por muertes embrionarias.

Orquitis en machos

En explotaciones endémicas se dan abortos por goteo.

Erysipelothrix rhusiopathiae (Mal Rojo)

Poco frecuente en cerdo blanco, controlable mediante vacunación.

Fiebre y procesos vasculares

Abortos indirectos

Abortos frescos con lesiones hemorrágicas

enfermedades parasitarias

Toxoplasma gondii

Partos prematuros, nacidos débiles o mortinatos si la infección se da durante el periodo de gestación

enfermedades víricas

PRRS

Abortos a partir de 90 días de gestación con fetos momificados, nacidos débiles y mortinatos

Fiebre en brotes o en hembras de primeros partos

Simultaneidad con procesos respiratorios en destete y engorde

Parvovirus porcino

Repetición de celos

Disminución del tamaño de la camada

Presencia de momificados en el momento del parto

No produce abortos

Circovirus tipo 2

Poco frecuente en explotaciones de cerdo blanco por intensa vacunación

Nacidos débiles, mortinatos y momificaciones

No se observa alteración en la madre

Influenza A

Abortos frescos en cualquier fase de gestación

Abortos por la liberación de citoquinas

Las hembras presentan fiebre y signos respiratorios

fetos y placentas

lavados y fluidos toallitas

hisopos vaginales

enviar fetos frescos evitando los momificados

analizar varios fetos por hembra, pues no todos los fetos de una camada están infectados

muestra idónea para comprobar la presencia de virus en caso de abortos

ubre: monitorización a nivel de camada

nasal: monitorización a nivel individual

de interés en caso de infertilidad o metritis

no enviar en caso de sospecha de etiología vírica

técnicas diagnósticas

cultivo microbiológicoqPCR

estudio histopatológico

técnicas diagnósticas

qPCR

técnicas diagnósticas

qPCR

técnicas diagnósticas

cultivo microbiológicoqPCR

agente infeccioso

PRRSCircovirus tipo 2

Leptospiras patógenasChlamydiasBrucella spp.

Toxoplasma gondii

agente infeccioso

PRRSInfluenza A

Circovirus tipo 2

agente infeccioso

PRRS

agente infeccioso

Leptospiras patógenasChlamydiasBrucella spp.

Escherichia coliStreptococcus sp.

toma de muestras

suero de las hembras

líquido de procesado toallitas

suero de lechones

enviar sueros pareados tomados en el momento del aborto y tras 15-21 días

valorar resultados en función del protocolo vacunal

monitorización con líquido de procesado del corte de colas y castraciones

monitorización de explotaciones con técnicas no invasivas

monitorización en nacimiento de animales positivos

tomar la muestra de la vena yugular, del cordón umbilical, de un corte en la oreja, etc.

técnicas diagnósticas

serología

técnicas diagnósticas

qPCR

técnicas diagnósticas

qPCR

técnicas diagnósticas

qPCR

agente infeccioso

PRRSParvovirusInfluenza A

Circovirus tipo 2Leptospira sp.Chlamydia sp. Brucella spp.

Erysipelothrix rhusiopathiae

agente infeccioso

PRRS

agente infeccioso

PRRSInfluenza A

Circovirus tipo 2

agente infeccioso

PRRSCircovirus tipo 2

técnicas de diagnóstico

cultivo microbiológico

de menos utilidad que en otro tipo de procesos ya que muy pocos agentes causantes de procesos reproductivos son cultivables. De especial interés en caso de metritis o endometritis por causas bacterianas.

real time PCR

es una técnica muy sensible y específica que permite evaluar la presencia de los agentes infecciosos causante de fallos reproductivos. El punto crítico es realizar una buena selección y conservación de la muestra a analizar.

serologíamuestra la concentración más pequeña de antibiótico que impide la multiplicación valora la presencia de anticuerpos como respuesta a la exposición a los agentes infecciosos o vacunaciones preventivas. Son interesantes los seroperfiles y también los estudios de seroconversión con sueros pareados.

secuenciacióntras obtener un resultado positivo se puede realizar la secuenciación de dicho agente. Muy extendido en caso de PRRS. Es de interés en explotaciones en las que se quiera realizar un seguimiento epidemiológico o diferenciar entre virus campo de virus vacunal (en caso de vacunas vivas atenuadas).

histopatología

de gran interés para valorar la importancia de cada uno de los agentes implicados

oferta de diagnóstico

panel infertilidad / metritis

cultivo microbiológico

panel reproductivo

qPCR: PRRS, Circovirus tipo 2, Parvovirus porcino, Leptospira sp., Chlamydias, Brucella sp.

panel serológico reproductivo

ELISA: Brucella spp. (Rosa Bengala), PRRS, Parvovirus porcino, Circovirus tipo 2 (IgG e IgM), Influenza tipo A, Mal Rojo (Erysipelothrix rhusiopathiae)

antibiograma de bacterias de interés

qPCR: Leptospira sp., Chlamydias, Brucella sp.

ELISA: Leptospira bratislava

casos clínicos

caso 1: abortos por leptospiras

caso 3: abortos a término por circovirosis porcina en cerdo ibérico

caso 2: brote de abortos por PRRS

caso 4: metritis (cerdas sucias)

muestras recibidas

dos fetos frescos y sin lesiones aparentes de dos abortos en el último tercio de gestación

siete sueros de hembras con fallos reproductivos

abortos por leptospiracaso1

diagnóstico solicitado: panel reproductivo

real time PCR

serología por microaglutinación (MAT)

determinaciones

PRRS cepas europeas

PRRS cepas americanas

Circovirus tipo 2

Parvovirus porcino

Leptospiras patógenas

Chlamydias

Brucella sp.

sueros

S1

S2

S3

S4

S5

S6

S7

muestras

PL 1 + P1 + H1 + H2 + C. E2

Neg.

Neg.

Neg.

Neg.

Positivo (34,58)

Neg.

Neg.

Leptospira pomona

Neg.

Neg.

Neg.

Neg.

Neg.

Neg.

Neg.

Leptospira bratislava

Neg.

Neg.

Positivo 1/100

Positivo 1/200

Neg.

Positivo 1/50

Positivo 1/100

comentario del caso

En este caso se confirma la presencia de leptospiras patógenas, descartándose la implicación de otros agentes.

Mediante el estudio serológico por la técnica de microaglutinación (MAT) se identificó el serovar implicado (Leptospira bratislava)

muestras recibidas

7 sueros de cerdas recién abortadas

30 sueros de lechones de tres semanas

Se dan abortos en el último tercio de gestación, además de varias cerdas que se adelantan a la fecha de parto incrementando así el número de lechones nacidos débiles.

Granja positiva a PRRS pero estable

abortos por Circovirus tipo 2caso2

diagnóstico solicitado: monitorización de PRRS

comentario del caso

La clínica presente en la granja, abortos en el último tercio de gestación acompañado del incremento de lechones nacidos débiles y los resultados obtenidos mediante qPCR confirmaron un brote de PRRS con lechones y hembras virémicas.

Mediante secuenciación del gen ORF 5 y el estudio filogenético con casos previos se confirmó que era la misma cepa detectada previamente en la explotación, lo que indica una recirculación del PRRS y queda descartado un fallo de bioseguridad externa.

real time PCR

PRRS cepas europeas

PRRS cepas europeas

S. Lechón 1-5

Positivo (21,72)

S. Lechón 21-25

Positivo (24,42)

S. Lechón 11-15

Positivo (21,35)

S. Adulta 1-4

Positivo (37,38)

S. Lechón 6-10

Positivo (25,91)

S. Lechón 26-30

Positivo (22,03)

S. Lechón 16-20

Positivo (21,58

S. Adulta 5-7

Positivo (31)

determinaciones muestras

muestras recibidas

feto con placenta

cerdo ibérico en extensivo con abortos a término

animales tratados con tetraciclina para cortar los abortos, pero en esta paridera no responden a tratamiento

abortos por Circovirus tipo 2caso3

diagnóstico solicitado: panel reproductivo

real time PCR

determinaciones

PRRS cepas europeas

PRRS cepas americanas

Circovirus tipo 2

Parvovirus porcino

Leptospiras patógenas

Chlamydias

Brucella sp.

muestras

PL

Neg.

Neg.

Positivo (27,2)

Neg.

Neg.

Neg.

Neg.

comentario del caso

El diagnóstico mediante qPCR confirmó la presencia de Circovirus porcino tipo 2 en las muestras analizadas. Eran animales sin vacunar de PCV2, tras diagnóstico se realizó vacunación en sábana de toda la granja con lo que se consiguió controlar los abortos.

muestras recibidas

cinco hisopos vaginales

metritis(cerdas sucias)caso4

diagnóstico solicitado: panel infertilidad / metritis

cultivo microbiológico

crotal

H1H2H3H4H5

identificación

Escherichia coli***Escherichia coli***Escherichia coli***Escherichia coli **Escherichia coli**

real time PCRdeterminaciones

Leptospiras patógenasChlamydiasBrucella sp.

muestrasH 1-5Neg.Neg.Neg.

serología por microaglutinación (MAT)

sueros

S1S2S3S4S5

Leptospira bratislava

Neg.Neg.Neg.Positivo 1/50Positivo 1/50

antibiograma: Bacteria y crotal: Escherichia coli aislada en H3

Antibiótico Resultado Diámetro (mm) Referencia (mm)

D-Amoxicilina Intermedia 20 14 21

D-Ampilicina Intermedia 15,2 13 17

D-Penicilina Resistente 0 29 29

D-Bacitracina Resistente 0 8 13

D- Trimetoprim/sulfametoxazol Resistente 0 10 16

D-Tetraciclina Resistente 0 18 23

C-Apramicina Resistente 16,1 19 23

C-Gentamicina Sensible 19,1 12 16

C-Neomicina Intermedia 16 12 17

C-Espectinomicina Resistente 0 10 14

C-Estreptomicina Intermedia 11 11 15

C-Amoxicilina + ácido clavulánico Sensible 20,5 13 18

C-Florfenicol Resistente 17,2 18 22

C-Tianfenicol Resistente 0 12 18

C-Cefalotina Intermedia 17 14 18

C-Clindamicina Resistente 0 14 21

C-Eritromicina Resistente 9,7 13 23

C-Gamitromicina Intermedia 14,5 11 15

C-Tilmicosina Resistente 0 11 11

C-Tiamulina Sensible 12,2 9 9

B-Cefquinoma Sensible 28 18 22

B-Ceftiofur Sensible 25,1 17 21

B-Colistina-sulfato Sensible 14,1 8 11

B-Enrofloxacina Sensible 28,2 18 23

B-Marbofloxacina Sensible 28,9 14 20

comentario del caso

En el caso actual se ha aislado Escherichia coli en las muestras lo que es indicativo de metritis por este agente.

Mediante qPCR se descarta la presencia de Lepstospiras, Chlamydias y Brucella en estas muestras. Serológicamente dos cerdas son positivas a L. bratislava en títulos bajos, lo que indica la circulación de este agente en la explotación, aunque los títulos bajos no permite valorar si la infección es reciente, sería interesante realizar estudios de seroconversión pasados 15 días o ampliar el muestreo realizando serología de más animales de la explotación.

Polígono Río Gállego D/850840, San Mateo de GállegoZaragoza, España

+34 976 69 45 25

+34 650 16 03 08

exopol@exopol.com