LABORATORIOS KRASNY DEL PERU S.R.L.

NITROGENO UREICO (BUN) BIALEXBQP07-50, BQP07-100, BQP07-125, BQP07-250.Esta prueba es utilizada para la determinacin cuantitativa In Vitro de Nitrogeno Ureico (BUN) Bialex en suero humano.

SIGNIFICADO CLNICO:La determinacin de Urea Nitrogeno en suero es ampliamente usada como una prueba de investigacin para funciones renales. Cuando es usada en conjunto a la determinacin de creatinina en suero, ayuda en diferencial diagnstico de los tres tipos de azotemia; prerenales, renales y post renales.

COLECCIN Y ALMACENAJE DE LA MUESTRA:1. 2. 3. 4. Se recomienda el uso de suero para este ensayo. No deben usarse plasma con anticoagulantes. Todo material en contacto con la muestra debe ser libre de . amonio y metales pesados Muestras de suero almacenadas de 2 a 8C, son estables por 72 horas, o 6 meses congelados.

FUNDAMENTO DEL MTODO:La metodologa empleada en este reactivo est basada en la reaccin descrita por primera vez por Talke y Schubert . La urea es hidrolizada por ureasa para producir amonio y dixido de carbono. El Amonio liberado reacciona con aKetoglutarato en la presencia de NADH para producir glutamato. Una cantidad equimolar de NADH, pasa por oxidacin durante la reaccin resultando en una disminucin en absorbancia, la cual es directamente proporcional a la concentracin de nitrgeno de urea en la muestra.

INTERFERENCIA:1.- SUSTANCIAS: Estudios para determinar el nivel de interferencia por hemoglobina, bilirrubina, y lipemia obtuvieron los siguientes resultados: Hemoglobina: No interferencia significativa (+10%) de hemoglobina hasta 1000 mg/dL. Bilirrubina: No interferencia significativa (+10%) de bilirrubina hasta 24.3mg/dL. Lipemia: No interferencia significativa por lipemia (+10%) hasta 1020mg/dL medido como triglicridos. Plasma: con anticoagulante contenido sales de amonio o fluoruros no puede ser utilizado. 2.DROGAS: Alopurinol, aminoglicsidos, cefalosporinas, cisplatina, furosemida, indometacina, metotrexato, metildopa, anfotericina B, carbamazepina, gentamicina, meticilina, vancomicina, rifampicina, espironolactona, tetraciclinas, diurticos tiazdicos y triamtereno.

PRINCIPIO:

COMPOSICIN DEL REACTIVO:Ingredientes Activos a-Ketoglutarato NADH Ureasa GLDH (Microbial) Concentracin 7.5 Mm/L >0.20 mM/L >8700 U/L >580 U/L

EQUIPO ADICIONAL REQUERIDO PERO NO INCLUIDO:1. Analizador de qumica clnica capaz de mantener una temperatura constante de 37C. y medir la absorbancia a 340 nm. Material adicional requerido: Agua desionizada, pipetas y/o micropipetas, puntas descartables y cronometro.

PRECAUCIONES:1. Este reactivo es solo para uso de diagnostico in vitro. 2. Evite ingerir este reactivo. La toxicidad no ha sido determinada. 3. Reactivo contiene azida de sodio (0.05%) como conservador. El azida de sodio puede reaccionar con tubera de plomo o cobre. Enjuague el drenaje con abundante agua.

2.

PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO:Procedimiento para uso manual. 1) El reactivo debe estar a temperatura ambiente antes de su uso. 2) Identificar perfectamente los tubos de prueba, tanto para estndar, controles y/o Muestras desconocidas. MUESTRA y/o CONTROL 1000 L

PREPARACION DEL REACTIVOS:El reactivo esta listo para usar.

ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO:1. El reactivo es estable hasta la fecha indicada en la etiqueta (18 meses) cuando se almacena de 2 a 8C. ESTANDAR 1000 L

DETERIORO DEL REACTIVO:No debe utilizar el reactivo si: 1. El reactivo tiene una absorbancia de blanco menor de 1.4 a 340 nm. 2. El reactivo no cumple con las especificaciones establecidas. 3. Laboratorios Krasny del Per S.R.L. se compromete a comunicarle inmediatamente, si algn lote de reactivos es retirado del mercado para su cambio respectivo.

REACTIVO

Incubar todos los tubos a 37 C, por 5 minutos. Luego agregar. ESTANDAR MUESTRA y/o CONTROL 10 L 10 L

3) Calibrar el espectrofotmetro con un blanco de agua desionizada a 340 nm. 4) Despus de 30 segundos leer y registrar la absorbancia (A1). 5) 60 segundos despus de la primera lectura, leer y registrar la segunda lectura (A2). 6) Calcule el cambio en absorbancia entre las dos lecturas (A1-A2). 7) Repetir el mismo procedimiento para cada muestra.

PRECISION:Entre Corridas Promedio (mg/dL) S.D. (mg/dL) C.V. (%) Entre Series: S.D. (mg/dL) C.V. (%) Nivel 1 14.2 0.4 3.1 Nivel 2 49.8 0.5 1.1 Nivel 3 90.8 1.0 1.2

CLCULOS:(A1-A2) Muestra x Concentracin Estndar = Urea Nitrgeno (mg/dL) (A1-A2) Estndar

Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3 0.5 0.7 1.3 3.3 1.4 1.5

PROCEDIMIENTO AUTOMATIZADO:Estas instrucciones son para ser utilizadas como gua general para la adaptacin al instrumento automatizado. Se encuentran disponibles a peticin las aplicaciones de los reactivos Bialex para los analizadores ms comunes.

Sensitividad: Un factor de calibracin aproximado a -1186.22 fue obtenido, lo cual es equivalente a una sensibilidad de -0.843 mAbs por mg/dL. Nota: Datos obtenidos mediante pruebas realizadas en el Synchron.

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA:1. Tietz, N.W. Fundamentals of Clinical Chemistry, Philadelphia W.B. Saunders, p 991 (1976). 2. Fearon, W.R. Biochem J. 331:902 (1939) 3. Marshall, E.K., Jr. J.Biol.Chem. 15:487 (1913) 4. Gentzkow, C.J., J. Biol.Chem. 143:531 (1952) 5. Fawcett, J.K,. Scott, J. E., J. Clin. Path. 13:156 (1960) 6. Talke, H., Schubert, G.E., Klin, wschr. 43:174 (1965) 7. Tietz, N.W. Fundamentals of Clinical Chemistry, Philadelphia W.B. Saunders, p 991 (1976) 8. Young, D.S. et al, Clin. Chem 21:1D (1975)

PARMETROS:Urea Nitrgeno (BUN) Temperatura: Longitud de Onda: Tipo de Ensayo: Direccin: Proporcin: muestra/ reactivo Volumen de Muestra: Volumen de Reactivo: Primera lectura: Fase de retardo: ltima lectura: 37C 340 nm Ratio fijo Decreciente 1:100 10 uL 1.0 mL 30 Segundos 60 Segundos 90 Segundos

Nota: Los volmenes de muestra y reactivo pueden ser modificados proporcionalmente para adaptarlos a los requisitos de varios instrumentos. Limitaciones: Muestra con valor mayor de 115 mg/dL debe ser diluida 1:1 con solucin salina y reensayada. El resultado final debe ser multiplicado por 2.

CALIBRACION:Esta prueba debe ser calibrada utilizando un calibrador adecuado como los proporcionados por Laboratorios Krasny del Per.

CONTROL DE CALIDAD:La integridad de la reaccin debe ser evaluada usando un control de dos niveles con valores conocidos.

Laboratorios Krasny del Per S.R.L. Av. Jorge Chvez 450 Barranco, Lima 04 Per Telfono: 051-2474682 / 2476565 Web site: http://www.bialex.pe / laboratorios@krasnydelperu.com E-mail: info@bialex.pe

VALORES ESPERADOS:7-18 mg/dL. Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango normal, para su poblacin.

DESEMPEO:Linealidad: Cuando el ensayo se trabaja bajo las condiciones recomendadas la prueba es lineal de 0.4 hasta 115 mg/dL

COMPARACIN DEL MTODO:Los siguientes resultados fueron obtenidos mediante estudios realizados entre ste procedimiento y uno similar: Numero de pares: Rango: Coeficiente de Correlacin: Pendiente: Intercepcin: 50 5.0 129.0 (mg/dL) 0.9988 1.009 -0.6 mg/dL