Determinación de Nitrógeno Amínico
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Determinación de Nitrógeno amínico: Método de Sorensen Aplicación: Sirve para determinar N amínico en muestras líquidas o extractos. La fina concentración de amoníaco o grupos amino libres de aminoácidos, péptidos y aminoácidos libres en jugos de fruta, el grado de hidrólisis de una proteína, o amonio de materia orgánica en el método de Kjeldahl, etc. Determinación: Neutralizar 10 ml de muestra con NaOH 0,1 N usando fenolftaleína como i no excederse en el agregado de NaOH, detenerse en el punto en que aparece una débil co persiste por 30 seg. Otra posibilidad es utilizar un pHmetro y llegar a pH 8. Agregar 10 ml de formol neutralizado recientemente con fenolftaleína y titula liberada con NaOH 0,1 N hasta ver el punto final. Tomar este último valor para el cálc primero para el cálculo de la acidez. Cálculo: g %N = V NaOH N NaOH 0,014 x 100/peso de muestra DETERMINACION DEL CONTENIDO EN PROTEINAS (Método Sorensen-Walker) Fundamento Está técnica determina el contenido en proteínas de la leche mediante una valo ácido-base, ya que tras la adición de formol a la muestra, el formaldehido se une a los gr amino de los aminoácidos de las proteínas dejando los grupos carboxilos libres. Este hecho la acidez titulable de la leche siendo valorada con hidróxido sódico. La cant utilizado en la neutralización es utilizado para calcular la cantidad de proteínas presente en muestra. Material • Bureta graduada en 0.1 mL. • Matraz erlenmeyer de 100 mL. • Pipetas de 10 mL y 5 mL. Reactivos • Solución de hidróxido sódi co (0.1N). • Solución comercial de formol (40%). • Indicador: solución de fenoltaleína al 1 % Procedimiento • Tomar 10 mL de leche problema en un matraz erlenmeyer. • Añadir 20 mL de agua destilada y adicionar unas gotas de fenoltaleína. • Neutralizar la ácidez titulable natural de la leche con la solución de hidró hasta la aparición de un color rosa. • Añadir posteriormente a la leche neutralizada 2 o 3 mL de formol para dejar grupos carboxilos de los aminoácidos. Tras la adición del formol la muestra se a acidificar y se muestra nuevamente de color blanco. • Añadir unas gotas de fenoltaleína y valorar la acidez con hidóxido sódico, h aparición nuevamente del color rosa.
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Bioquimica
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1. Determinacin de Nitrgeno amnico: Mtodo de SorensenAplicacin: Sirve para determinar N amnico en muestras lquidas o extractos. La finalidad es poder determinar la concentracin de amonaco o grupos amino libres de aminocidos, pptidos y protenas. Es til para dosar aminocidos libres en jugos de fruta, el grado de hidrlisis de una protena, o amonio despus de la destruccin de materia orgnica en el mtodo de Kjeldahl, etc.
Determinacin: Neutralizar 10 ml de muestra con NaOH 0,1 N usando fenolftalena como indicador. Es importante no excederse en el agregado de NaOH, detenerse en el punto en que aparece una dbil coloracin rosada que persiste por 30 seg. Otra posibilidad es utilizar un pHmetro y llegar a pH 8.Agregar 10 ml de formol neutralizado recientemente con fenolftalena y titular de inmediato la acidez liberada con NaOH 0,1 N hasta ver el punto final. Tomar este ltimo valor para el clculo de N amnico y el primero para el clculo de la acidez.
Clculo: g %N = VNaOH NNaOH 0,014 x 100/peso de muestra
DETERMINACION DEL CONTENIDO EN PROTEINAS (Mtodo Sorensen-Walker) Fundamento Est tcnica determina el contenido en protenas de la leche mediante una valoracin cido-base, ya que tras la adicin de formol a la muestra, el formaldehido se une a los grupos amino de los aminocidos de las protenas dejando los grupos carboxilos libres. Este hecho produce cambios en la acidez titulable de la leche siendo valorada con hidrxido sdico. La cantidad de hidrxido sdico utilizado en la neutralizacin es utilizado para calcular la cantidad de protenas presente en la muestra. Material Bureta graduada en 0.1 mL. Matraz erlenmeyer de 100 mL. Pipetas de 10 mL y 5 mL.
Reactivos Solucin de hidrxido sdico (0.1N). Solucin comercial de formol (40%). Indicador: solucin de fenoltalena al 1 %
Procedimiento Tomar 10 mL de leche problema en un matraz erlenmeyer. Aadir 20 mL de agua destilada y adicionar unas gotas de fenoltalena. Neutralizar la cidez titulable natural de la leche con la solucin de hidrxido sdico hasta la aparicin de un color rosa. Aadir posteriormente a la leche neutralizada 2 o 3 mL de formol para dejar libres los grupos carboxilos de los aminocidos. Tras la adicin del formol la muestra se vuelve a acidificar y se muestra nuevamente de color blanco. Aadir unas gotas de fenoltalena y valorar la acidez con hidxido sdico, hasta la aparicin nuevamente del color rosa.
