Determinación de Ácido Úrico 2015

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Q.F Luz Kathia Hernández Calderón DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO MÉTODOS

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Determinación de Ácido Úrico 2015 instrucciones para la practica de laboratorio

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Q.F Luz Kathia Hernández Calderón

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO

MÉTODOS

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DE DONDE PROVIENE EL ÁCIDO ÚRICO

• Degradación de ADN y ARN.

• Se convierte en nucleótidos genera un proceso

metabólico (catabolismo).

• Un adulto normal puede producir alrededor de 500 mg por día.

• 80 % es excretado por orina y el resto se degrada en nuestro

organismo.

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CARACTERÍSTICAS

• Compuesto nitrogenado cuya fórmula es C5H4N4O3 .

• Producto final del metabolismo del nitrógeno en el cuerpo humano

cuando este descompone sustancias llamadas purinas.

• La mayor parte del ácido úrico se disuelve en la sangre donde viaja a

los riñones y es excretada en la orina.

• Si el cuerpo produce demasiado ácido úrico o no lo elimina lo

suficiente, la persona se puede enfermar con afecciones renales o

artríticas.

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• Los nucleótidos puricos son degradados 1ero.

a xantinas e hipoxantinas como productos

intermedios, oxidándose finalmente ác. úrico

por la acción de la enzima xantinaoxidasa.

• La formación del ác. úrico tiene lugar

mayormente en el hígado.

• La vía renal es el principal mecanismo de

regularización de la uricemia.

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Contenido de purinas de los alimentos:

Grupo 1: alto en purinas:

Anchoas, arenque sardinas, caballa, mejillones, sardinas,

vísceras, embutidos, caldos de carne.

Grupo 2: moderado contenido de purinas: Carnes en

general, pescados, aves.

Hortalizas: espárragos, porotos secos, lentejas, espinaca,

hongos

Grupo 3: bajo contenido de purinas:

Frutas y verduras, cereales y subproductos, lácteos y

subproductos, nueces, aceites, azúcar, condimentos, chocolate.

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MÉTODOS DE CUANTIFICACIÓN

1.- Método químico :

Ác. Úrico + H3PW12O40

Alantoína +

CO2 + Azul de Tungsteno

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MÉTODOS DE CUANTIFICACIÓNMétodo Químico

Fundamento:

El ácido úrico de la muestra, previa desproteinización con ácido

fosfotúngstico preformado, reacciona en medio alcalino de

carbonato de sodio con el reactivo fosfo – litio – túngstico,

produciéndose un color azul (Azul de Tungsteno) que es

proporcional a la concentración de ácido úrico de la muestra, y se

mide colorimétricamente a 660 nm.

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2.- Métodos enzimáticos:

Acido Úrico UOD Alantoína + H2O2

H2O2 + DCBS + 4-AAP POD H2O + Comp.

ColoreadoLeyenda:Ac. 3,5- Dicloro-2-HidroxiBencensulfónico (DCBS)

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MÉTODO ENZIMÁTICO• Fundamento:

• El ácido úrico es oxidado por la enzima específica uricasa generándose Alantoína

y H2O2, el cual en una reacción mediada por la enzima POD

• (Peroxidasa), reacciona con el Ac. 3,5- Dicloro-2-HidroxiBencensulfónico y 4 AAP

(4-aminoantipirina) produciéndose un compuesto coloreado con un máximo de

absorción a 520 nm, en cantidad proporcional a la cantidad de ácido úrico

presente en la muestra.

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PROCEDIMIENTO DEL MÉTODO COLORIMÉTRICO

Técnica para suero

1.- Desproteinización: en un tubo de centrífuga colocar 2 mL de

agua destilada, 250 µL de Ácido Túngstico y 250 µL de suero. Agitar

vigorosamente, esperar 5 minutos y centrifugar.

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PROCEDIMIENTO DEL MÉTODO COLORIMÉTRICO

2.- Colorimetría:B S D

Desproteinizado 1.250 mL

Agua destilada 1.250 mL 2.5 mL

Standard 25 µL

Reactivo 1 250 µL 500 µL 250 µL

Reactivo 2 250 µL 500 µL 250 µL

Mezclar por inversión y colocar en B.M entre 22 a 28 °C. Entre 30 y 45 minutos después, leer al Espectro a 660 nm, llevando el aparato a cero con el Blanco.

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CÁLCULOS:

Factor = 100 mg/ L Absorbancia St

Ácido Úrico (mg/L) = Factor x Abs. Muestra

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VALORES NORMALES

Suero o plasma

Mujeres Hombres

Adultos 2,5 - 6,8 mg/dL 3,6 - 7,7 mg/dL 

1-4 años 1,7-5,1 mg/dL 2,2-5,7 mg/dL

5-11 años 2,0-6,4 mg/dL 3,0-6,4 mg/dL

12-14 años 2,2-6,1 mg/dL  3,2-6,9 mg/dL

15-17 años 2,2-6,4 mg/dL 3,5-7,1 mg/dL

Orina: 250-750 mg/24 h

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LOS NIVELES POR ENCIMA DE LO NORMAL (HIPERURICEMIA) PUEDEN DEBERSE A:

- Acidosis

- Alcoholismo

- Diabetes

- Gota

- Hipoparatiroidismo

- Intoxicación por plomo

- Leucemia

- Nefrolitiasis

- Policitemia vera

- Insuficiencia renal

- Toxemia de embarazo

- Dieta rica en purinas

- Ejercicio excesivo

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IMPORTANCIA CLÍNICA• Es un análisis de laboratorio que se realiza por separado o en una

orden general bioquímica sanguínea.

• Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de desorden

en el metabolismo de las sustancias que lo originan o de defectos

de eliminación.

• La cantidad total de ácido úrico en el plasma circulante depende

de la síntesis, catabolismo endógeno, así como también de la

ingesta y del aclaramiento renal de las purinas.

Artritis gotosa > 90 mg/L

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• El ácido úrico aumentado en plasma se asocia

epidemiológicamente a enfermedades cardiovasculares

como el infarto de miocardio, accidente

cerebrovascular, hipertensión e insuficiencia cardiaca.

• Se ha propuesto tomar la concentración en plasma de

ácido úrico >4 mg/dL como un signo de alerta.

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GRACIAS