DESARROLLO DEL CULTIVO DE LENGUADO, Paralichthys...
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DESARROLLO DEL CULTIVO DE DESARROLLO DEL CULTIVO DE LENGUADO, LENGUADO, Paralichthys Paralichthys californicus californicus : : AVANCES SOBRE LA FISIOLOGIA AVANCES SOBRE LA FISIOLOGIA DIGESTIVA Y NUTRCION DE LARVAS DIGESTIVA Y NUTRCION DE LARVAS Y JUVENILES Y JUVENILES Juan Pablo Lazo Juan Pablo Lazo Laboratorio de Nutrici Laboratorio de Nutrici ó ó n de Peces n de Peces Departamento de Acuicultura Departamento de Acuicultura CICESE CICESE
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DESARROLLO DEL CULTIVO DE DESARROLLO DEL CULTIVO DE LENGUADO, LENGUADO, ParalichthysParalichthys californicuscalifornicus::
AVANCES SOBRE LA FISIOLOGIA AVANCES SOBRE LA FISIOLOGIA DIGESTIVA Y NUTRCION DE LARVAS DIGESTIVA Y NUTRCION DE LARVAS
Y JUVENILESY JUVENILES
Juan Pablo LazoJuan Pablo LazoLaboratorio de NutriciLaboratorio de Nutricióón de Pecesn de Peces
Departamento de AcuiculturaDepartamento de AcuiculturaCICESECICESE
Esquema de la platicaEsquema de la platica
�� IntroducciIntroduccióónn�� Cultivo larvarioCultivo larvario
�� Ontogenia del sistema digestivo y capacidad Ontogenia del sistema digestivo y capacidad digestivadigestiva
�� Digestibilidad Digestibilidad in in vitrovitro�� Microdietas y protocolos de desteteMicrodietas y protocolos de destete�� PigmentaciPigmentacióónn
�� Cultivo de JuvenilesCultivo de Juveniles�� Temperatura Temperatura óóptimaptima�� Efecto de la relaciEfecto de la relacióón E/P n E/P �� Tasas de alimentaciTasas de alimentacióónn
Laboratorio de NutriciLaboratorio de Nutricióón de Peces Marinosn de Peces Marinos
�� Participantes:Participantes:�� BenjamBenjamíín Barn Baróónn--SevillaSevilla
�� Emmanuel MartEmmanuel Martííneznez
�� VerVeróónica Vizcainonica Vizcaino
�� Mario GalavizMario Galaviz
�� Magali ZacariasMagali Zacarias
�� Jean Jean BenoitBenoit MuguetMuguet
�� SharonSharon HerzkaHerzka
�� Armando GarcArmando Garcííaa--OrtegaOrtega
�� MarkMark DrawbridgeDrawbridge
�� NathanielNathaniel SchmitSchmit
�� JesJesúús Mariscals Mariscal
�� Daniel VargasDaniel Vargas
�� HHééctor Cansecoctor Canseco
�� Luz LLuz Lóópezpez
¿¿Por quPor quéé cultivar Peces Marinos?cultivar Peces Marinos?
�� La pesca mundial ha llegado a un tope de La pesca mundial ha llegado a un tope de cosecha (aprox. 90cosecha (aprox. 90--100 millones de toneladas)100 millones de toneladas)
�� La mayorLa mayoríía de las poblaciones naturales esta de las poblaciones naturales estáán n sobreexplotadas y disminuyendosobreexplotadas y disminuyendo
�� A travA travéés del cultivo de peces marinos se puede:s del cultivo de peces marinos se puede:�� Disminuir la presiDisminuir la presióón pesquera sobre las poblaciones naturalesn pesquera sobre las poblaciones naturales�� Repoblar especies nativas en vRepoblar especies nativas en víía de extincia de extincióónn�� Estudiar la biologEstudiar la biologíía ba báásica en el laboratorio (sica en el laboratorio (ecofisiolgecofisiolgííaa y y
ontogenontogenííaa))
�� Excelente fuente alternativa de proteExcelente fuente alternativa de proteíína y lna y líípidospidos�� Alternativa para la acuacultura en Latino Alternativa para la acuacultura en Latino
AmAméérica rica
Lenguado, Lenguado, ParalichthysParalichthys californicuscalifornicus
�� El lenguado es un recurso pesquero El lenguado es un recurso pesquero nativonativo de gran de gran importancia en las costas del Pacimportancia en las costas del Pacíífico Mexicano y del fico Mexicano y del sur de California de los Estados Unidos Americanossur de California de los Estados Unidos Americanos
�� Se distribuye desde CanadSe distribuye desde Canadáá hasta Bahhasta Bahíía Magdalena a Magdalena Baja California, MBaja California, Mééxico xico
�� Es la especie que alcanza mayores tallas de toda la Es la especie que alcanza mayores tallas de toda la familia familia ParalichthidaeParalichthidae, alcanzando tallas de , alcanzando tallas de 1.5 m1.5 m de de longitud total y un peso de longitud total y un peso de 32 32 KgKg
�� Tiene gran aceptaciTiene gran aceptacióón comercial por la textura y sabor n comercial por la textura y sabor de su carnede su carne
�� Se comercializa a precios del orden de $10 a $20 USD, Se comercializa a precios del orden de $10 a $20 USD, dependiendo de su presentacidependiendo de su presentacióón n
DistribuciDistribucióón naturaln natural
Río Quillayute
Bahía MagdalenaO
céano Pacifico
SituaciSituacióón actual pesquern actual pesquerííasas
�� Se han reportado reducciones de mSe han reportado reducciones de máás del s del 80% en la capturas totales 80% en la capturas totales multiespecificas de lenguados en las multiespecificas de lenguados en las costas de la Baja California costas de la Baja California
�� A nivel nacional, se puede generalizar que A nivel nacional, se puede generalizar que las capturas de lenguado han disminuido las capturas de lenguado han disminuido en un 33% en los en un 33% en los úúltimos veinte altimos veinte añños os
Estado actual del cultivoEstado actual del cultivo
�� ReproducciReproduccióón controlada en cautiverio n controlada en cautiverio �� Cultivo larvario con alta supervivencia (hasta un Cultivo larvario con alta supervivencia (hasta un
80%)80%)�� ProducciProduccióón comercial de semilla por el CICESE n comercial de semilla por el CICESE
�� Capacidad actual 50,000 a 70,000 juvenilesCapacidad actual 50,000 a 70,000 juveniles�� Nuevo Laboratorio con capacidad de 250,000Nuevo Laboratorio con capacidad de 250,000
�� Varias granjas comerciales cultivando juveniles Varias granjas comerciales cultivando juveniles en Baja Californiaen Baja California
�� Comercializado en Baja California con precios Comercializado en Baja California con precios de $10 dde $10 dóólares el kilo pez enterolares el kilo pez entero
Nuevo Laboratorio ComercialNuevo Laboratorio Comercial
�� Instalaciones de 1000 mInstalaciones de 1000 m2 2 en el CICESEen el CICESE
�� Capacidad de producir 250,000 juveniles Capacidad de producir 250,000 juveniles de lenguado y/o jurel aleta amarillade lenguado y/o jurel aleta amarilla
�� Primer laboratorio comercial de peces Primer laboratorio comercial de peces marinos en el pamarinos en el paííss
Laboratorio de Cultivo Laboratorio de Cultivo Laboratorio de Cultivo Laboratorio de Cultivo
de Peces Marinosde Peces Marinosde Peces Marinosde Peces Marinos
ReproducciReproduccióón en cautiverion en cautiverio
Desoves naturales Desoves inducidos
ARTEMIA 5-10 naup mL -1
DIETA COMPUESTA
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51
DIAS DESPUES DE LA ECLOSION (DDE)
TIP
O D
E A
LIM
EN
TO
ROTIFEROS
5 Rot mL -1 15 Rot mL-1
Cultivo LarvarioCultivo Larvario
Protocolo de AlimentaciProtocolo de Alimentacióónn
Engorda en Granja ComercialEngorda en Granja Comercial
PezcoPezco S.A. de S.A. de C.VC.V..
Problemas Problemas
�� Altos costo de producciAltos costo de produccióón de alimento vivo y n de alimento vivo y mortalidad en el destete (transicimortalidad en el destete (transicióón de alimento n de alimento vivo a microdietas)vivo a microdietas)
�� ProducciProduccióón de juveniles con pigmentacin de juveniles con pigmentacióón n anormalanormal
�� Temperatura altas durante la engorda en Temperatura altas durante la engorda en B.CB.C..
�� Crecimiento moderado (500 a 600 g en 12 Crecimiento moderado (500 a 600 g en 12 meses) meses)
�� Canibalismo en juveniles tempranosCanibalismo en juveniles tempranos
Cultivo de Peces MarinosCultivo de Peces Marinos
�� La etapa larvaria es considerada la mLa etapa larvaria es considerada la máás crs crííticatica
�� La mayorLa mayoríía de los problemas esta de los problemas estáán asociados con la n asociados con la nutricinutricióón y alimentacin y alimentacióónn
�� Para satisfacer sus requerimientos nutricionales las Para satisfacer sus requerimientos nutricionales las larvas deben: larvas deben:
�� Ingerir alimentoIngerir alimento
�� Digerirlo a travDigerirlo a travéés de procesos enzims de procesos enzimááticosticos
�� Absorber y metabolizar los nutrientes necesariosAbsorber y metabolizar los nutrientes necesarios
�� Se considera que las larvas poseen un sistema digestivo Se considera que las larvas poseen un sistema digestivo poco desarrollado:poco desarrollado:
�� carecen de estcarecen de estóómago funcional que secrete mago funcional que secrete HClHCl y y pepsinapepsina
AlimentaciAlimentacióón de larvasn de larvas
Dos alternativas:Dos alternativas:
�� 1) La utilizaci1) La utilizacióón de presas vivas como n de presas vivas como rotrotííferos o feros o ArtemiaArtemia�� DifDif íícil de mantenercil de mantener�� Laborioso y costoso (70Laborioso y costoso (70 --80 % del costo 80 % del costo
producciproducci óón)n)�� Valor nutricional Valor nutricional subsub óóptimoptimo
�� 2) Microdietas formuladas2) Microdietas formuladas�� Buen perfil nutricionalBuen perfil nutricional
�� TamaTamañño adecuadoo adecuado
�� Poco Poco ééxito con estas dietas xito con estas dietas
0
1
2
3
4
5
6
Long
itud
(mm
)
Zooplancton Microdietas
Tipo de alimento
05
1015202530354045
Sob
revi
venc
ia (
%)
Zooplancton Microdietas
Tipo de Alimento
Crecimiento SupervivenciaDietas formuladasDietas formuladas
PROBLEMAS CON LA PIGMENTACION
Larvas: Estudios de Larvas: Estudios de FisiologFisiologíía Digestiva a Digestiva
Estrategias de investigaciEstrategias de investigacióónn
•• MorfologMorfologíía e histologa e histologíía durante la ontogenia a durante la ontogenia del sistema digestivodel sistema digestivo
•• Estudios de actividad enzimEstudios de actividad enzimáática: tica: ¿¿cual es la cual es la capacidad digestiva?capacidad digestiva?
•• Digestibilidad Digestibilidad in in vitrovitro: selecci: seleccióón de n de ingredientes adecuadosingredientes adecuados
•• Aplicaciones practicas de la fisiologAplicaciones practicas de la fisiologíía a digestiva:digestiva:•• Desarrollo de microdietasDesarrollo de microdietas•• Protocolos de desteteProtocolos de destete
Ontogenia del sistema Ontogenia del sistema digestivodigestivo
2 DDE. Zona prevalvular (pr),gota de aceite (∗), ángulo de constricción (→).
2 DDE. Intestino tubular (it), saco vitelino (s), ojo (o). H-E (10X).
2 DDE. Epitelio cilíndrico con microvellosidades eosinófilas formando el borde en cepillo (ep), serosa (→). H-E (63X).
3 DDE. Gránulos de zimógeno (z), hígado (h), intestino (i). H-E (40X).
PPááncreasncreas
13 DDE. Asa intestinal (→). 14 DDE. Asa intestinal (*), páncreas (p), hígado (h), intestino (i). H-E (10X).
26 DDE; primeros esbozos de las glándulas digestivas H-E, 400X
44 DDE. Región cardiaca (rc), región fúndica(rf), región pilórica (rp), hígado (h), páncreas (p), intestino (i), H-E (5X).
↓↓↓↓
Glándulasgástricas
Capacidad digestivaCapacidad digestiva
Enzimas DigestivasEnzimas Digestivas
�� ProteasasProteasas (digesti(digestióón de proten de proteíínas)nas)�� ProteasasProteasas áácidas (cidas (pHpH 2)2)�� ProteasasProteasas alcalinas (alcalinas (pHpH 77--10)10)�� Tripsina y Tripsina y QuimiotripsinaQuimiotripsina ((proteasasproteasas pancrepancreááticas tticas tíípicas)picas)�� AminopeptidasaAminopeptidasa, , fosfatasafosfatasa alcalina (epitelio intestinal)alcalina (epitelio intestinal)�� PeptidasasPeptidasas, , catepsinascatepsinas, (intracelulares), (intracelulares)
�� Lipasas (digestiLipasas (digestióón de ln de líípidos)pidos)�� Lipasas generalesLipasas generales�� Lipasas dependiente de sales biliares,Lipasas dependiente de sales biliares,�� FosfolipsasFosfolipsas
�� Amilasas (digestiAmilasas (digestióón de n de C.HC.H.).)�� AmilasasAmilasas�� Maltasas Maltasas
Muestreo y preparaciMuestreo y preparacióón de los extractos:n de los extractos:
larvaslarvas
•• ProteProteíína disueltana disuelta
•• Actividad enzimActividad enzimááticatica
•• Digestibilidad Digestibilidad in in vitrovitro
HomogenizadoHomogenizado
CentrifugadoCentrifugado
SobrenadanteSobrenadante
•• 2 h2 h (limpieza del intestino)(limpieza del intestino)
•• LELElarvaslarvas
LeuLeu--AminopeptidasaAminopeptidasa
MetodologMetodologíía para estudiar enzimas a para estudiar enzimas digestivasdigestivas
Sistema digestivoSistema digestivo
11
22
33
44
55
DisecciDiseccióónn
ProteasasProteasas
Days post hatch
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44
Tot
al a
ctiv
ity (
U/la
rvae
)
0
10
20
30
40
50
60
70
Days post hatch
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44
Tot
al a
ctiv
ity (
U/la
rvae
)
0
10
20
30
40
50
Days post hatch
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44
Tot
al a
ctiv
ity (
U/la
rvae
)
0
5
10
15
20
25
30
Days post hatch
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44T
otal
act
ivity
(U
/larv
ae)
0
1
2
3
4
5
6
Tripsina
Proteasas alcalinas Protesas acidas
Aminopeptidasas
Destete?
HistoquHistoquíímicamica
�� Enzimas digestivas:Enzimas digestivas:�� Tripsina (Tripsina (endoproteasaendoproteasa alcalina por excelencia)alcalina por excelencia)�� Lipasas (digestiLipasas (digestióón de ln de líípidos)pidos)�� Amilasas (digestiAmilasas (digestióón carbohidratos)n carbohidratos)�� AminopeptidasasAminopeptidasas ((exoproteasaexoproteasa de la membrana de la membrana
intestinal, indicador de maduraciintestinal, indicador de maduracióón del intestino)n del intestino)�� FosfatasaFosfatasa áácida (digesticida (digestióón intracelular)n intracelular)�� FosfatasaFosfatasa alcalinaalcalina (enzima de la membrana (enzima de la membrana
intestinal)intestinal)
HistoquHistoquíímicamica
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 500
40
50
60
70
80
90
100
ababa
a
c
a
a
b
ab
DE
E
D
ACAB
A
CBB
ABC
Niv
el d
e gr
is (%
)
Días después de la eclosión (DDE)
I.A I.P.
Actividad de la fosfatasa alcalina en el intestino de P. californicus, durante su desarrollo larvario. Media ± D.E. (n=3).
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 500
30
40
50
60
70
80
90
100
b
bc
bcd
b
bcd
ad
ac
bc
a
BC
CF
BDEF
CE
C
CD
AC
B
A
Niv
el d
e gr
is (%
)
Días después de la eclosión (DDE)
I.A. I.P.
Actividad de la fosfatasa acida en el intestino de P. californicus, durantesu desarrollo larvario. Media ± D.E. (n=3).
Sistema digestivoprematuro
Estómago incipiente
Intestino proximal (Digestión de lípidos y proteínas)Intestino distal (Absorción intracelular de proteínas)
EsófagoEstómagoIntestino anterior
Intestino posterior
Embrión Etapa larvaria Juvenil d 0 d 2-5 d 30-40
Eclosión Inicio de alimentación Metamorfosis
• Tripsina
•Aminopeptidasa•Fosfatasa
•Lisosomas
• Quimotripsina
•Amilasa•Lipasa
Digestión proteica
Digestión de péptidos
Carbohidratos
Lípidos
Intracelular
Extracelular
Pepsina Mod
elo
onto
géni
co
Digestibilidad Digestibilidad in in vitrovitro
Digestibilidad Digestibilidad in vivoin vivo�� La digestibilidad integra los procesos digestivos La digestibilidad integra los procesos digestivos
con los de absorcicon los de absorcióón de los nutrientesn de los nutrientes�� Permite inferir el grado de aprovechamiento del Permite inferir el grado de aprovechamiento del
alimentoalimento�� Limitantes en el estudio de larvas de peces Limitantes en el estudio de larvas de peces
marinosmarinos�� Muy difMuy difíícil recolectar hecescil recolectar heces�� DifDifíícil cuantificar alimento consumidocil cuantificar alimento consumido�� Muchas especies no aceptan microdietas formuladas Muchas especies no aceptan microdietas formuladas
al inicio de la alimentacial inicio de la alimentacióón exn exóógenagena
�� Algunos estudios de digestibilidad en larvas Algunos estudios de digestibilidad en larvas pecespeces�� Aun no se consideran los cambios ontogAun no se consideran los cambios ontogéénicosnicos
Digestibilidad Digestibilidad in in vitrovitro
�� TTéécnicas alternativascnicas alternativas�� Ensayos sencillos y de bajo costoEnsayos sencillos y de bajo costo�� EvaluaciEvaluacióón rn ráápida de la calidad de los pida de la calidad de los
ingredientesingredientes�� Uso de extractos enzimUso de extractos enzimááticos de larvas o ticos de larvas o
enzimas comercialesenzimas comerciales�� EvaluaciEvaluacióón de la digestibilidad de:n de la digestibilidad de:
�� proteproteíínas (por amino nas (por amino áácidos)cidos)�� llíípidos (por pidos (por áácidos grasos)cidos grasos)
ParParáámetros: tmetros: téécnica cnica pHpH--STAT STAT
�� Extracto de enzimas de larvas de lenguadoExtracto de enzimas de larvas de lenguado
�� ProporciProporcióón de [E]:[S] n de [E]:[S] �� 30 Unidades de enzima por ensayo30 Unidades de enzima por ensayo
�� 8 8 mgmg//mlml proteproteíína por ingredientena por ingrediente
�� RxRx: : pHpH 8.08.0
�� Base: 0.1 N Base: 0.1 N NaOHNaOH
�� TempTemp: 25 : 25 ººCC
�� Tiempo de Tiempo de RxRx: 1h: 1h
15 DDE
0.000
1.000
2.000
3.000
4.000
5.000
6.000
7.000
CASEINA
SILVER C
UPOMEGA P
ROT
KRILL
CALAM
ARRO
TIFEROS
ARTEMIA
SOYA
GLUTE
N
TRATAMIENTOS
DH
(%
)
26 DDE
0.000
0.500
1.000
1.500
2.000
2.500
CASEINA
SILVER C
UPOM
EGA PROT
KRILL
CALAMAR
ROTIFEROS
ARTEMIA
SOYA
GLUTE
N
INGREDIENTES
DH
(%
)
39 DDE
0.000
0.200
0.400
0.600
0.800
1.000
1.200
1.400
1.600
1.800
CASEINA
SILVER C
UPOM
EGA PROT
KRILL
CALAM
ARRO
TIFEROS
ARTEMIA
SOYA
GLUTEN
INGREDIENTES
DH
(%
)
9 DDE
0.000
0.500
1.000
1.500
2.000
2.500
3.000
Casein
a
Silver
cup
Omeg
a Pro
t
H. de
krill
H. de
calamar
H. de
rotife
ros
Artem
ia
H. de
soya
Gluten
de tr
igo
TRATAMIENTOS
DH
(%
)
Ontogenia de la digestibilidadOntogenia de la digestibilidad
51 DDE
0.000
0.200
0.400
0.600
0.800
1.000
1.200
1.400
1.600
1.800
CASEINA
SILVER C
UPOMEGA
PROT
KRILL
CALAMAR
ROTIFEROS
ARTEMIA
SOYA
GLUTE
N
INGREDIENTES
DH
(%
)
0
0.5
1
1.5
2
2.5
CASEINA
SILVER C
UPOM
EGA P
ROT
KRILL
CALAM
ARROTI
FEROS
ARTEM
IA
SOYA
GLUTEN
INGREDIENTES
DH
(%)
9
15
26
39
51
MicrodietasMicrodietas
DiseDiseñño experimentalo experimental
�� Se formularon 2 dietas, 1 Se formularon 2 dietas, 1 comercial y 1 control comercial y 1 control
�� BioensayoBioensayo por 42 dpor 42 dííasas�� Larvas alimentadas con Larvas alimentadas con
alimento vivo enriquecido con alimento vivo enriquecido con HUFA nHUFA n--33�� RotRotííferos @ 5 por feros @ 5 por mlml iniciando 3 iniciando 3
DDEDDE�� Artemia @ 5Artemia @ 5--7/7/mlml iniciado 16 DDEiniciado 16 DDE
�� CoCo--alimentacialimentacióón al dn al díía 20 DDEa 20 DDE�� Completamente destetados para Completamente destetados para
el del díía 26a 26�� Se alimento en exceso (> 30Se alimento en exceso (> 30--
20% peso)20% peso)
Diets (g/100 g dry weight) Ingredient QA MC AL
Artemia decapsulated cysts 74 Sardine fishmeal 15.7 Menhaden fish meal 49.4 CPS90 (Prot hydrolysate) Skipjack muscle 9.8 Cod liver oil 2.6 Skipjack orbit oil 14.8 Vitamin premix 1.7 2 Mineral premix 1 1 Mesquite gum 3.1 Carrageen 0.6 CMC 5 Whey protein concentrate 0.6 Sodium alginate 0.6 Proximate composition (% dw)
Protein 49.5 67 56 Lipid 18.3 21 15 Ash 9.7 10 12 Dry matter 92.4 93 93
Composition of experimental diets
Peso Humedo
0.0000
0.0100
0.0200
0.0300
0.0400
0.0500
0.0600
AL CT MC QA
Trt
peso
(g)
Longitud
0.02.04.06.08.0
10.012.014.016.0
AL CT MC QA
Trt
SL
(mm
)
Mortalidad
0
200
400
600
800
1000
AL CT MC QA
Trt
No.
org
Albinismo
0
20
40
60
80
100
AL CT MC QA
Trt
% A
lbin
os
ResultadosResultados
AL= alimt comercial, CT = alimento vivo, MC = Microcapsulas, QA = dieta quistes
DesteteDestete
Tiempo del desteteTiempo del destete
�� DiseDiseñño experimental Io experimental I�� Determinar la fecha mas temprana para Determinar la fecha mas temprana para
realizar el desteterealizar el destete
�� Larvas alimentadas inicialmente con rotLarvas alimentadas inicialmente con rotííferos feros y artemia (tratamiento control)y artemia (tratamiento control)
�� 4 fechas de destete: 16, 26, 36 y 46 DDE4 fechas de destete: 16, 26, 36 y 46 DDE
�� 3 d3 díías de periodo de as de periodo de coco--alimentacialimentacióón n
�� 3 replicas por tratamiento3 replicas por tratamiento
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
16 21 26 31 36 41 46 51 56
dph
Surv
ival
(%
)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
26 31 36 41 46 51 56dph
Su
rviv
al (
%)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
36 39 42 45 48 51 54 57 60dph
Sur
viva
l (%
)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
46 48 50 52 54 56 58 60dph
Sur
viva
l (%
)
EvaluaciEvaluacióón de edad para el destete n de edad para el destete
Muguet et al., 2004
a b
dc
Figure 1. Survival rate (n=3) of larvae weaned at 16 (a), 26 (b), 36 (c) and 46 (d) dph.
Actividad enzimActividad enzimáática: tripsinatica: tripsinaA: total activity
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
16W 16C
A: total activity
0
5
10
15
20
25
30
35
40
26W 26C
A: total activity
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
36W 36C
A: total activity
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
46W 46C
Muguet et al., 2004
LeucinoLeucino--aminopeptidasaaminopeptidasaA: total activity
*
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
16W 16C
A: total activity*
0
50
100
150
200
250
26W 26C
A: total activity*
0
100
200
300
400
500
600
700
800
36W 36C
A: total activity
0
200
400
600
800
1000
1200
46W 46C
Efecto del nivel de DHA en el desteteEfecto del nivel de DHA en el destete
�� DHA nutrientes esencialDHA nutrientes esencial�� DiseDiseñño experimental IIo experimental II
�� Antecedentes en JapAntecedentes en Japóón (n (KanazawaKanazawa, 90, 90’’s)s)�� Cuatro niveles de DHA en el enriquecimiento Cuatro niveles de DHA en el enriquecimiento
con Artemiacon Artemia�� DHA 0, 5, 10 y 15 % del total de los DHA 0, 5, 10 y 15 % del total de los áácidos cidos
grasos en la emulsigrasos en la emulsióón enriquecedora n enriquecedora �� Destete total en el dDestete total en el díía 36a 36�� BioensayoBioensayo 78 d78 dííasas
Efecto del DHA en el Efecto del DHA en el ééxito del destetexito del destetePeso final
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
0.45
0 5 10 15
DHA Level (% of Total Fatty acids)
(g)
Talla Final
0
5
10
15
20
25
30
35
0 5 10 15
DHA Level (% of Total Fatty acids)
(mm
)
No.final
0
100
200
300
400
500
0 5 10 15
DHA Level (%of total fatty acids)
0
5
10
15
PigmentaciPigmentacióónn
Causas de la Causas de la malpigmentacimalpigmentacióónn
�� NutricionalesNutricionales�� ÁÁcidos grasos: DHA, EPA y ARAcidos grasos: DHA, EPA y ARA
�� Vitamina AVitamina A
�� Yodo: hormonas Yodo: hormonas tiroedianastiroedianas
�� AmbientalesAmbientales�� Calidad de la LuzCalidad de la Luz
�� Intensidad de la luzIntensidad de la luz
�� UVUV
Efecto del DHA en la pigmentaciEfecto del DHA en la pigmentacióónn
Pigmentacion
020406080
100120140160180
0 5 10 15
Nivel de DHA (% acidos grasos totales)
Albino
Machas
Pigmentado
NIVEL ADECUADO DE DHA ENTRE 10-15 % AGT
Modelo del efecto del UVModelo del efecto del UV
Efecto de la luz UVEfecto de la luz UV
0.00
20.00
40.00
60.00
80.00
100.00
120.00
140.00
160.00
0% UV 33% UV 66% UV 100% UV
PIGMENT
ALBINO
Las larvas requieren niveles de UV normales para una pigmentación adecuada
NutriciNutricióón y Cultivo de n y Cultivo de JuvenilesJuveniles
Requerimientos nutricionalesRequerimientos nutricionales
�� AproximaciAproximacióón utilizando informacin utilizando informacióón de n de otras especies similares como el otras especies similares como el P. P. olivaciusolivacius, P. , P. dentatusdentatus y P. y P. lethostigmalethostigma..�� ProteProteíína (45na (45--55%)55%)�� LLíípidos (10pidos (10--16%)16%)�� EnergEnergíía (18a (18--20 20 kjkj/100 g)/100 g)�� Cenizas (10%)Cenizas (10%)�� Carbohidratos (<15%)Carbohidratos (<15%)�� Vitaminas y minerales (3Vitaminas y minerales (3--5%)5%)
Efecto de la temperaturaEfecto de la temperatura
�� Que pasa con los organismos a Que pasa con los organismos a temperaturas mayores a 20 temperaturas mayores a 20 ººC?C?�� i.e., durante el verano y en el Centro y Sur de i.e., durante el verano y en el Centro y Sur de
MMééxicoxico
�� DiseDiseñño experimentalo experimental�� Cuatro temperaturas: 20, 22.5, 25 y 27.5 Cuatro temperaturas: 20, 22.5, 25 y 27.5 ººCC
�� Juveniles de 0.5 gJuveniles de 0.5 g
�� Tres replicas por tratamientoTres replicas por tratamiento
Efecto de la temperatura (Efecto de la temperatura (lablab))Talla final
0.00
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00
7.00
8.00
9.00
20 22.5 25 27
Temperatura
(mm
)
Peso
0.00
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
6.00
7.00
8.00
20 22.5 25 27
Temperatura
(g)
Biomasa
0.00
50.00
100.00
150.00
200.00
250.00
300.00
20 22.5 25 27
Temperatura
(g)
Supervivencia
0.00
20.00
40.00
60.00
80.00
100.00
120.00
20 22.5 25 27
Tem peratura
(%)
**
TCA y TEP menores a mayores temperaturas
Efecto de la temperatura Efecto de la temperatura Cultivo en granjaCultivo en granja
Tasa de Crecimiento Especifico
y = -0.2685x + 6.9389R2 = 0.8048
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
15 17 19 21 23 25
Temperatura
RelaciRelacióón E/P y la Temperaturan E/P y la Temperatura
�� Al incrementar la temperatura se Al incrementar la temperatura se incrementa el metabolismoincrementa el metabolismo
�� Mayor costo energMayor costo energééticotico
�� Se podrSe podríía mejorar el crecimiento y la a mejorar el crecimiento y la supervivencia incrementado la energsupervivencia incrementado la energíía en a en la dieta?la dieta?
Efecto de E/P vs. TemperaturaEfecto de E/P vs. Temperatura
�� DiseDiseñño experimentalo experimental�� Incremento de la relaciIncremento de la relacióón E/P incrementa n E/P incrementa
TCA y TEP a mayores temperaturas?TCA y TEP a mayores temperaturas?
�� 3 dietas (50% P) experimentales 3 dietas (50% P) experimentales �� (19, 20, 21 (19, 20, 21 kjkj/100g) /100g)
�� evaluadas a 2 temperaturas (20 y 25 evaluadas a 2 temperaturas (20 y 25 ººC)C)
�� Juveniles de 3.9 gJuveniles de 3.9 g
�� Tres replicas por tratamiento (3X2 factorial)Tres replicas por tratamiento (3X2 factorial)
Efecto de E/P vs. TemperaturaEfecto de E/P vs. Temperatura
Efecto de E/P vs. TemperaturaEfecto de E/P vs. Temperatura
Días
0 10 20 30 40 50 60
Cre
cim
ient
o (g
)
4
6
8
10
12
14
16
T 1T 2T 3T 4T 5T 6
(19kj,20C)(19kj,25C)(20kj,20C)(20kj,25C)(21kj,20C)(21kj,25C)
63.1±2.20b62.4±0.26c64.7±1.1b60.2±1.43d67.1±0.84a66.4±0.50aDigestibilidad (CDA %)
1.01±0.07c1.32±0.05a1.10±0.14c1.28±0.08a1.20±0.05b1.33±0.04aTEP
1.6±0a1.3±0c1.4±0b1.4±0b1.4±0b1.3±0cTCA
1.14±0.091.53±0.141.27±0.131.35±0.201.30±0.101.19±0.05IHS
95±1.4dabc99.2±.83ba88.3±8.2f98.3±.83cab92.5±2.5e100±0aSobrevivencia
4.6±0.09 b5.0±0.07 a4.9±0.10 a4.9±0.08 a4.9±0.02 a5.0±0.05 aTCE (% peso corporal/d)
8.7±0.52 b11.0±0.4 a10.3±0.67 a10.8±0.57 a10.8±0.16 a11.0±0.37 aAumento en peso (gr)
12.7±0.51 b15.1±0.5 a14.2±0.66 a14.7±0.58 a14.7±0.17 a15.0±0.38 aPeso final (gr)
3.9±0.023.9±0.033.9±0.043.8±0.053.9±0.033.9±0.02Peso inicial (gr)
2.5±0.04b3.4±0.29 a3.1±0.31 a3.2±0.08 a2.9±0.15 a3.3±0.19 aAumento en longitud (cm)
9.1±0.09b10.1±0.25a9.7±0.37 a9.8±0.09 a9.5±0.11 a9.9±0.18 aLongitud final (cm)
6.5±0.056.7±0.066.5±0.066.5±0.056.6±0.046.6±0.05Longitud inicial (cm)
25°°°°C, 21kJ20°°°°C, 21k25°°°°C, 20kJ20°°°°C, 20kJ25°°°°C, 19kJ20°°°°C,19 kJ
T6T5T4T3T2T1Parámetros
Efecto de E/P vs. TemperaturaEfecto de E/P vs. Temperatura
Mayor aprovechamiento del alimento a 20 C comparado con 25 C¿¿Porque??
Efecto de la temperatura en la Efecto de la temperatura en la digestibilidaddigestibilidad
Actividad Proteolitica Alcalina
0
100
200
300
400
500
600
E19T20 E19T25 E20T20 E20T25 E21T20 E21T25
Tratamiento
Act
ivid
ad a
calin
a to
tal (
U/o
rg)
Digestibilidad In vitro
c
a
c
a
b,c
a,b
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
1.6
1.8
E19T20 E19T25 E20T20 E20T25 E21T20 E21T25
TRATAMIENTO
DH
(%)
Efecto de la tasa y frecuencia de alimentaciEfecto de la tasa y frecuencia de alimentacióón n
�� Antecedentes en JapAntecedentes en Japóón (optimo 3n (optimo 3--5 % 5 % p.cp.c) ) �� InformaciInformacióón n anecdotalanecdotal de alta TCA si no se de alta TCA si no se
alimenta diariamentealimenta diariamente�� DiseDiseñño experimentalo experimental
�� Estudios de condiciEstudios de condicióón nutricional y tasas de n nutricional y tasas de crecimiento juveniles silvestrescrecimiento juveniles silvestres
�� Cuatro tasas de alimentaciCuatro tasas de alimentacióón: 1.5% diario, 3% cada n: 1.5% diario, 3% cada dos ddos díías, 3% diario y 6% cada dos das, 3% diario y 6% cada dos dííasas
�� Alimentados 2 veces por dAlimentados 2 veces por dííaa�� 3 replicas por tratamiento3 replicas por tratamiento�� Se evaluSe evaluóó el consumo real cada semanael consumo real cada semana
Efecto de la tasa y frecuencia de Efecto de la tasa y frecuencia de alimentacialimentacióónn
0.00
10.00
20.00
30.00
40.00
50.00
60.00
70.00
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
1.5%Daily
3%EOD
3%Daily
6%EOD
0.00
5.00
10.00
15.00
20.00
25.00
30.00
35.00
40.00
45.00
1.5%Daily 3%EOD 3%Daily 6%EOD
RESULTADOS
Crecimiento
Peso Final
Semanas
1.742.202.182.28TEP de C.P.R.
12.3716.709.0914.72Consumo Proteína real
0.730.971.401.92TEP de C.P.T.
29.7137.9114.1117.47Consumo Proteína teórica
1.070.850.860.82TCA real
2.581.921.340.97TCA teórico
22.9030.9316.8327.26Consumo real
55.0270.2026.1332.35Consumo teórico
1.061.341.031.28Tasa de Crec. Esp.
100.00100.00100.00100.00Supervivencia %
44.3759.7641.3857.39Peso final (g)
21.5936.6319.6633.58Ganancia en peso g
6% C2D3% diario3% C2D1.5% diario
Efecto de la tasa y frecuencia de alimentaciEfecto de la tasa y frecuencia de alimentacióónn
ConclusionesConclusiones
�� Se puede realizar el destete temprano Se puede realizar el destete temprano premetamorfosispremetamorfosis (36 DDE)(36 DDE)
�� Muy importante considerar cambios en la Muy importante considerar cambios en la capacidad digestiva de las larvas en la capacidad digestiva de las larvas en la formulaciformulacióón de microdietas para el desteten de microdietas para el destete�� Elaborar dietas estadio especificasElaborar dietas estadio especificas
�� Se requiere 15% DHA en el enriquecedor Se requiere 15% DHA en el enriquecedor de alimento vivo para un buen de alimento vivo para un buen ééxito en el xito en el destetedestete
ConclusionesConclusiones
�� No cultivar juveniles a temperaturas No cultivar juveniles a temperaturas superiores 22 Csuperiores 22 C
�� Tasa de alimentaciTasa de alimentacióón del 1.5 a 2% peso n del 1.5 a 2% peso corporal y alimentados diariamente en por corporal y alimentados diariamente en por lo menos 2 racioneslo menos 2 raciones
PerspectivasPerspectivas
�� Incrementar tasas de ingestiIncrementar tasas de ingestióón de microdietasn de microdietas�� Evaluar efecto la relaciEvaluar efecto la relacióón DHA/EPA en el n DHA/EPA en el
proceso de pigmentaciproceso de pigmentacióónn�� Incrementar las tasas de crecimiento con Incrementar las tasas de crecimiento con
cultivos cultivos mosexualesmosexuales (hembras crecen hasta 3 (hembras crecen hasta 3 veces mas)veces mas)
�� Densidad de siembra (500, 750, 1000 o 1500 Densidad de siembra (500, 750, 1000 o 1500 orgorg/m/m22))
�� Densidad de cultivo (15, 30 o 45 Densidad de cultivo (15, 30 o 45 kgkg/m/m22)?)?�� InterInteréés actual de producir 500 TM en los s actual de producir 500 TM en los
siguientes 2 asiguientes 2 añños os
Gracias por su atenciGracias por su atencióón n
Nota: Aquellos interesados en aspectos prácticos del cultivo del lenguado mañana habrá un taller sobre su cultivo de las 9 a las 12 am
