CRPLatex Test KitCat # 310-100-31USO PREVISTOLa prueba de ltex CRP Cortez Diagnostics, Inc. est destinado a ser utilizado para la deteccin cualitativa y la determinacin semicuantitativa de la protena C reactiva anticuerpos (CRP) en suero.PRINCIPIO DE PRUEBACRP suele aparecer en el suero de los pacientes en las fases agudas de una serie de condiciones inflamatorias como la mayora de bacterias y algunas infecciones virales;agudo fiebre reumatoide con o sin carditis;artritis reumatoide y la mayora de los dems enfermedades del colgeno;y en un nmero de otras condiciones caracterizadas por inflamacin.CRP se considera que es un indicador sensible de la inflamacin.Los cambios en el nivel en suero de CRP con el tiempo desde el mismo paciente pueden ser utilizados como un ndice de recuperacin.El uso de la prueba de PCR para medir la eficacia de la terapia es de gran importancia clnica en casos tales como la fiebre reumtica aguda. Desde el descubrimiento de que los conejos se forman anticuerpos precipitantes contra CRP1, diversas tcnicas de inmunoprecipitacin se han aplicado para su deteccin.El TEST Cortez CRP se basa en el mtodo de aglutinacin de ltex introducido por Cantante et al en 19572.El principio de este ensayo se basa en la inmunolgica reaccin entre CRP como un antgeno y el anticuerpo correspondiente revestida en la superficie de las partculas de ltex biolgicamente inertes.TOMA Y PREPARACINLa prueba debe realizarse slo en muestras de suero fresco.Si la prueba es retraso, las muestras deben ser refrigeradas (o congelados en su caso). La contaminacin bacteriana puede causar la desnaturalizacin de protenas y falso positivo aglutinacin.MATERIALES Y COMPONENTESMateriales proporcionados con los kits de pruebaCRP Ltex Reactivo:Contiene partculas de ltex de poliestireno recubiertas con CRP anti-humano en un tampn estabilizado con menos del 0,1% azida sdica como conservante.CRP Control positivo:Suero humano que contiene ms de 6 mg / L CRP y menos de 0,1% de azida de sodio como conservante.CRP Control negativo:Suero humano que se ha diluido y estabilizado con tampn y contener menos de 0,1% de azida sdica como conservante.Glicina-solucin salina Amortiguador:Para diluir 1:20 con agua destilada.(20X) ConcentradoPipetas y portaobjetos desechableMateriales necesarios pero no suministradosSolucin salina fisiolgica, pipetas serolgicas, tubos de ensayo de 12 x 75 mm y el calendario dispositivo.PROCEDIMIENTO DE ENSAYOA. Mtodo I (cualitativa)1. Llevar todos reactivos y muestras de suero a temperatura ambiente.2. Agite suavemente el vial de ltex PCR para dispersar y suspender partculas de ltex.3. Los controles positivos y negativos se deben probar con cada serie de pruebas.4. Uso de la pipeta desechable proporcionado, coloque una gota de suero de ensayo en un crculo en la diapositiva.Utilice una pipeta desechable separada para cada suero problema. Importante: El Cortez CRP Ltex Reactivo debe agitar bien durante 10 segundos antes de utilizar en las pruebas de cada day s.No utilice un mezclador de vrtice. Entregar una gota de CRP Ltex a cada crculo que contiene especmenes en la diapositiva.Extender la mezcla resultante mediante el uso de la paleta extremo de la pipeta. No utilice el mismo fin paleta para mezclar cada suero de ensayo o de control, ya que esto causar la contaminacin cruzada.5. Incline suavemente y gire la diapositiva con la mano por dos (2) minutos.6. Observe por aglutinacin macroscpica utilizando la fuente de luz oblicua indirecta.7. Comparacin de la reaccin del suero de prueba a la CRP positivo y negativo sueros de control.B. Mtodo II (Semi-cuantitativa)1. Para cada suero problema a ser titulada, configure una menos tubos de ensayo 6 (12 x 75 mm) y la etiqueta de 1: 2, 1: 4, 1: 8, 01:16, 1:32 1:64, etc.2. Para cada tubo de aadir 0,2 ml de solucin salina diluida Glicina-Buffer.3. Tubo No. 1 aadir 0,2 ml de suero de ensayo sin diluir.4. en serie hacen diluciones de dos veces mediante la mezcla de los contenidos del tubo No. 1 con pipeta y transferir 0,2 ml al tubo N 2. Repetir las transferencias de serie para cada tubo.Para los 6 tubos, las diluciones varan desde 1: 2 a 1:64.Si es requerido, Pueden aadirse diluciones de suero adicionales.5. Repita los pasos 3 a 7 que figura en el Mtodo I (cualitativa).RESULTADOSCualitativaResultado positivo: La aglutinacinResultado negativo:suspensin lechosa SmoothDado que los resultados negativos pueden ser causados por el exceso de antgeno, la prueba debe ser repiti utilizando se sospecha de una muestra de suero diluido en efecto prozona caso.Semi-cuantitativa: Sera que son positivos en la prueba de deteccin debe ser analizado de nuevo en la prueba de titulacin para proporcionar la verificacin de interpretaciones borderline.La mayor dilucin de muestra de prueba que muestra aglutinacin se considera el punto final.Multiplicacin del factor de dilucin por 6 mg / L producir el nivel aproximado de CRP presente. La siguiente tabla slo se muestra como un ejemplo para la determinacin de CRP la concentracin en la muestra.Espcimen reales tendrn concentraciones de PCR superiores o inferiores a los niveles indicados en esta tabla.

DILUCINCONCENTRACIN (mg / L)

1: 1 (espcimen puro)

6

1: 212

1:424

1:848

DAI CODIGO # 31Pgina 2 de 2CARACTERSTICAS DE RENDIMIENTOHay que subrayar que la tcnica de aglutinacin de ltex es ms sensible que precipitacin en tubos capilares o en los mtodos de gel de agar, dando as positivo resultados en los niveles de PCR inferiores.Los niveles de PCR en pacientes con muy positivo.Las reacciones de PCR se haban detectado tan alto como 330 mg / L5 mientras que el contenido CRP de suero normal es inferior a 12 mg / L6.El TEST Cortez CRP se compar con otro comercial ltex de prueba PCR.La nefelometra y la PCR Test, producido tanto por Behring.Un total de 42 especmenes fueron evaluados con los siguientes resultados.Los ttulos de las muestras se determinaron por los tres mtodos y mostr resultados comparables.Resultado esperado

Cortez prueba PCR

Behring prueba PCR

Positivo

14/14

12 * / 14

Negativo27 + / 28

27/28

* Se encontr que las dos muestras que contienen 7,8 y 6,5 mg / L CRP usando el Mtodo de nefelometra Behring.+ La una muestra negativa se encontr que contena 6,6 mg / l de CRP por el Mtodo de nefelometra BehringPROCEDIMIENTO DE CONTROL DE CALIDADLos controles positivos y negativos deben incluirse en cada serie de ensayos.Los Control positivo debe producir aglutinacin visible;y el control negativo debe producir ninguna aglutinacin.LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO1. Los resultados de esta prueba no debe ser usado como una nica herramienta de diagnstico para hacer un diagnstico clnico.En cambio, los resultados de la prueba deben ser evaluados en conjunto con otros hallazgos clnicos y sntomas observados para ayudar en la final diagnstico.2. Esta prueba est diseada para ser realizada por la rotacin de la mano.El uso de una rotador mecnico podra producir resultados falsos positivos / negativos.3. La fuerza de la reaccin de aglutinacin no es indicativa de la CRP la concentracin.4. reacciones dbiles pueden ocurrir con poco elevada o marcadamente elevada concentraciones.5. Un fenmeno prozona (exceso de antgeno) pueden causar falsos negativos.Es recomienda, por lo tanto, para comprobar todos los sueros negativos por volver a probar a una y diez minutos dilucin.Los tiempos de reaccin ms largo que el especificado puede producir aparente falsa reacciones debidas a un efecto de secado.6. sueros fuertemente lipmicos o contaminados puede causar reacciones positivas falsas.7. Slo el suero se debe utilizar en esta prueba.8. Las muestras que contienen el factor reumatoide (RF) no se deben utilizar.Los presencia de RF se puede confirmar mediante el uso de pruebas de RF disponibles en el mercado (por ejemplo, pruebas de ltex).La presencia de RF (generalmente> 20 UI / ml) puede dar lugar a falsos resultados positivos.VALORES ESPERADOSNiveles adultos normales de la PCR son reportados a ser inferior a 12 mg / L.Niveles de trazas de la PCR se haba informado en el suero de adultos aparentemente sanos 3 y normal nios 4.El nivel de PCR puede aumentar de forma significativa (> 10 veces) por encima de lo normal valores con la aparicin de un estmulo inflamatorio sustancial.PRECAUCIONESEste producto es para uso diagnstico in vitro solamente. Cada unidad de donante utilizada en la preparacin de este producto ha sido probado por una FDA aprob mtodo y encontr no reactiva la presencia de HBsAg y anticuerpos contra el virus VIH.Debido a que ningn mtodo de prueba puede ofrecer completa la garanta de que el virus de la hepatitis B, el virus VIH, o de otros agentes infecciosos, todos los productos a base de sangre humana ausentes deben ser manejados de acuerdo con buenas prcticas de laboratorio.La azida de sodio conservante puede reaccionar con el metal tuberas para formar xidos metlicos explosivos.En eliminacin, lavar con un volumen grande de agua para evitar la acumulacin de azida de metal.ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDADCuando no est en uso, almacene los reactivos y los controles a 2 - 8 grados centgrados.NO FREEZE.Antes de su uso, permitir que los reactivos y controles para calentar a la habitacin la temperatura.Fecha de caducidad se especifica en la etiqueta del kit y en cada vial. Biolgica indicacin de inestabilidad del producto se evidencia por inapropiado reaccin del reactivo de ltex con el correspondiente positivo y negativo sueros de control.REFERENCIA1 MacCleod, CM, y OTAvery: J. Exper.Med.73, 191, 1950.2. Cantante, JM, y CM Plotz:. Am.J.Med, 21, 888, 1956.3. Scherffarth, F .: M. Prez-Miranda & H. Goetz: Blut 20, 296, 1970.4. Saxtad, J., LA Nilsson & LA Hanson: Acta Paediat.Scand.59, 25, 1970.5. Madera, HF y M.McCarty: J. Clin.30, 616, 1 951.6. Nilsson, LA, Acta Path.Microbiol.Scand.73, 129, 1.968.