CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA DE ALTO RENDIMIENTO (

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  • 8/13/2019 CROMATOGRAFA DE CAPA FINA DE ALTO RENDIMIENTO (

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    CROMATOGRAFA DE CAPA FINA DE

    ALTO RENDIMIENTO (HPTLC).

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    Cromatografa:

    Se define como laseparacin de dos o mscompuestos de una mezcla ,por distribucin entre dosfases.

    fase mvil es la quetransporta las sustanciasque se separan y queprogresa en relacin con laotra fase denominadaestacionaria.

    La fase mvil puede ser unlquido o un gas y laestacionaria puede ser unslido o un lquido.

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    Cromatografa en capa fina:

    En este caso se utiliza unaplaca recubierta con faseestacionaria.

    El adsorbente se coloca enforma de una capa delgadaadherida sobre un soportergido.

    El eluyente ascender, porcapilaridad, por la placa yarrastrar los componentes a

    lo largo produciendo"manchas" de loscomponentes.

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    Que es cromatografa de capa fina de

    alto rendimiento (HPTLC)? Es la forma mejorada de

    la cromatografa de capa fina.

    Normalmente es controlado porsoftware, para los pasos delanlisis.

    La fase estacionaria es unaplaca de vidrio de HPTLC, departculas porosas.

    La placa consiste tpicamenteen gel de slice y en ocasionesun indicador de fluorescenciallamada (F254). El tamaoestndar de la placa es de 20 10 cm.

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    El equipo para HPTLC consta de:

    Un dispositivo adecuado parala aplicacin de muestras enforma de bandas, queproporciona control delvolumen de la muestraaplicada.

    Una cmara cromatogrficaadecuada que proporcioneun control de la saturacin.

    Un dispositivo apto para UV254 nm, UV 366 nm, y la luz

    blanca para lasdeterminacionescuantitativas de undensitmetro o evaluacin dela imagen por software.

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    Eluyentes ms comunes:

    - ter de petrleo

    - cloruro de metileno

    - n-hexano

    - acetato de etilo

    - ciclohexano - acetona

    - tolueno

    - iso-propanol

    - dietil-ter - etanol

    - metanol

    - cloroformo

    - cido actico

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    Reveladores ms comunes:

    Las manchas de color son,

    por supuesto,

    inmediatamente visibles;

    las incoloras pueden

    revelarse mediante:

    Luz UV.

    La introduccin de la

    placa en vapores de yodo. El roco con una solucin

    de agua/H2SO4.

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    Adsorbentes ms comunes:

    Gel de slice.

    Oxido de Aluminio

    Almina.

    Celulosa.

    Poliamidas.

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    Factores que influyen en una

    separacin de los compuestos:

    A menor temperatura

    las sustancias se

    adsorben ms.

    La cromatografa debellevarse a cabo en un

    rea sin corrientes de

    aire.

    Limpieza de las placas.

    Pureza de los eluyentes.

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    Densitometra:

    Es la tcnica por la que sepuede determinarla densidad de una sustancia.

    El procedimiento ms habitualse basa en la proporcinde luz que deja pasar y retieneuna determinada masa.

    Se utiliza para medir lasaturacin de la impresinresultante.

    Estas mediciones le permiten alanalista, determinar el tipo deadsorbente y el tiempo deexposicin correcto para undeterminado anlisis.

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    La cromatografa de capa fina ofrece:

    Mtodo econmico deseparacin.

    Capacidad de anlisissimultneo de diversasmuestras bajo las mismascondiciones.

    Excepcional transparencia yevaluacin visualsimultnea de todas lasmuestras y suscomponentes.

    Cuenta con tiempossignificativamente mscortos, consumos ms bajosde disolvente y una mejorresolucin.