7/25/2019 CORRECCIÓN CROMATOGRAFÍA

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RESULTADOS

Cromatografía de capa fina

Tabla 2. Resultados de la cromatografía.

Muestra Centímetros recorridos (A) Punto de euci!n(")

#icina 0,5 5,3

$cido Asp%rtico 0,3 5,3

&soeucina 2,3 5,5

Muestra pro'ema 0,5 - 2,4 5,5

Calculo del factor de retención Rf:

 Rf = A

B

Donde A es la distancia desde el punto de aplicación al centro de la manchadejada por el aminocido ! " es distancia desde el punto de aplicación al frentede elución#

 Rf Glicina=0,5

5,3=0,094

 Rf Á cido aspá rtico=

0,3

5,3=0,057

 Rf Isoleucina=2,3

5,5=0,42

 Rf  1 Muestra problema=0,5

5,5=0,091

 Rf  2 Muestra problema=2,4

5,5=0,44

Tabla 3: Escala de hidropatía para residuos de aminoácidos [5] .

Amino%cido Cam'io de energía i'repara transferencia ( mo*+)

&soeucina 3,$

#icina 0,%&

$cido Asp%rtico -3,0

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&magen ,- Representaci!n de as pacas cromatogr%ficas.

A/$L&S&S DE RESULTADOS

Cromatografía de capa fina

 Antes 'ue nada ca(e aclarar 'ue los resultados 'ue a continuación se

anali)aran fueron o(tenidos por otro *rupo de la(oratorio, !a 'ue de(ido a

errores en el se*uimiento del m+todo estipulado los resultados o(tenidos por 

nuestro *rupo fueron (astante incorrectos#

a t+cnica utili)ada en esta prctica permite separar las mol+culas de una

sustancia, en a'uellas 'ue son a(sor(idas por el *el de slice ! las 'ue son

arrastradas por la columna de la me)cla de sol.entes, distin*ui+ndose as entre

la fase estacionaria 'ue la constitu!e la celulosa ! la mó.il 'ue la constitu!en

los disol.entes, dependiendo de la solu(ilidad 'ue tiene cada aminocidos con

respecto am(as fases, as se o(ser.a su mo.ilidad so(re la placa#

a forma en 'ue se reparten los aminocidos respeta la re*la de 'ue los ms

apolares son los 'ue mejor interaccionan con el sol.ente# De esta manera se

pueden relacionar el factor de retención o(tenido /Rf con la polaridad del

aminocido ! su apariencia so(re a placa /ima*en $# 1eniendo en cuenta la

premisa de 'ue entre ma!or sea el .alor de Rf para el aminocido ma!or es su

afinidad por el disol.ente: l 'ue o(tu.o un ma!or factor de retención fue la

isoleucina 'ue arrojó un .alor de 0#42, por lo 'ue se puede decir 'ue tiene

ma!or afinidad por el disol.ente, como se o(ser.a en la en la ima*en 2 la

sustancia en su totalidad se .io arrastrada por la columna del disol.ente, por 

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todo lo anterior se puede afirmar 'ue la isoleucina fue el aminocido mas

apolar o hidrofó(ico, lo 'ue concuerda con la información de la ta(la 3 en la

cual aparece con un ndice de hidropata de 3,$ ma!or al de los otros 2

aminocidos tra(ajados, el se*undo aminocido con ma!or factor de retención

fue la *licina con un .alor de 0#04, en la ima*en 2 se .e como una mancha

color pardo solo un poco alejada del punto de siem(ra, de manera 'ue esta

constituira la se*unda sustancia en orden de apolaridad o hidropata, esto

se*n la literatura es correcto ! en la ta(la 3 se asocia a un ndice de

hidropata de 0#%&, menor 'ue el de la isoleucina, pero ma!or al del cido

asprtico, as pues el aminocido con un menor Rf fue el cido asprtico

/0#0$ 'ue en la ima*en 2 se muestra como una mancha de color a)ul oscuro

li*eramente ms cercana al punto de siem(ra 'ue la *licina, de manera 'ue

esta se clasificara como la sustancia menos afn al disol.ente ! por lo tanto la

ms polar de las 3 tra(ajadas, lo 'ue concuerda con la literatura !a 'ue se la

re*istra con un ndice de hidropata de -3#0 /1a(la 3, mucho menor al de losotros dos aminocidos# e*n los ndices de retención ! las manchas

o(tenidas se conclu!e 'ue la muestra pro(lema contena dos de los

aminocidos tra(ajados, uno era la isoleucina !a 'ue una de las manchas

o(tenas tena un factor de retención de 0,44 mu! similar al 0,42 o(tenido para

este aminocido ! tam(i+n de(ido a 'ue las dos manchas eran similares en

forma, tama6o ! color, el otro aminocido identificado para la muestra pro(lema

fue el cido asprtico, ! aun'ue el factor de retención o(tenido para la mancha

fue de 0,0, ms similar al de la *licina 'ue al del cido asprtico pudo ser 

identificado por la similaridad en la forma ! los colores de am(as manchas ! ladiferencia en los factores de retención se atri(u!e a al*n error mnimo en el

se*uimiento del protocolo estipulado#

CO/CLUS&O/ES

n el p7, prcticamente el $008 del aminocido se encuentra como ion dipolar 

o )9itterión, de forma tal 'ue el aminocido presenta una car*a neta nula /el

aminocido es el+ctricamente neutro#

 A p mu! ele.ados, el $008 de las mol+culas de aminocido se encuentran en

forma de ion ne*ati.o o anión

 a t+cnica de cromato*rafa de capa fina constitu!e una de las ms sencillas,

cuando se trata de la identificación de aminocidos ! nos permitió anali)ar 

satisfactoriamente los aminocidos su*eridos en la prctica de la(oratorio#

De(ido a 'ue el factor de retención Rf depende de la afinidad de los

aminocidos con el disol.ente utili)ado, al i*ual 'ue de la polaridad del

aminocido respecti.o /apolar, neutro, polar, etc#, se puede decir 'ue es mu!

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til !a 'ue podemos o(tener caractersticas cla.es para identificar un

aminocido pro(lema#