clinical case report-2 - WordPress.commás confianza en las características morfológicas...

INDICE

Introducción 3

Casos de células linfoides anormales 5

Casos de células inmaduras de tipo mieloide 25

Casos de células de apariencia específica 45

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INTRODUCCION

Como parte de los proyectos de colaboración internacional, frecuentemente visito laboratorios clínicos enciudades del sudeste de Asia. En cada visita me he quedado impresionado por el conocimiento que tienensobre las más recientes pruebas clínicas, su gran deseo por aprender y la atmósfera energética que existe enel lugar de trabajo. Algunos de estos laboratorios han introducido pruebas con métodos de punta, incluyendola tecnología de PCR, mientras que otros están tratando de alcanzar la sistematización. No obstante, eldesarrollo es lento debido a las inadecuadas condiciones sociales y financieras, aunque esto mejorará tantocomo la economía crezca en el futuro.

En los laboratorios de hematología de instituciones médicas de estas ciudades del sudeste de Asia, lasmediciones automatizadas de sangre se están incrementando e incluyen los más recientes parámetros enhematíes y plaquetas, como por ejemplo, el cambio del diferencial de tres partes al de cinco partes en la cuentade leucocitos.

Además, está aumentando el reconocimiento a la importancia que debe tener la calidad de los análisis. Pesea ello, con la actual difusión de modernos analizadores multiparamétricos totalmente automatizados, algunossectores tienen temor a que las técnicas de microscopio se pierdan. Este es un tema que debe recibir atenciónen los entrenamientos técnicos y médicos, mientras tanto, no se debe concluir que la automatización deldiferencial es algo malo.

Los analizadores automatizados del diferencial de leucocitos pueden proveer cuentas exactas y precisas de lascélulas presentes con alto nivel de veracidad. Esto permite al personal del laboratorio tener tiempo suficientepara la examinación microscópica de las pocas muestras que no pueden ser manejadas por los equipos. Estose debe aplicar no sólo en el sudeste de Asia, sino también en todo el mundo.

Sin embargo, para usar los analizadores automatizados del diferencial de leucocitos eficiente y efectivamente,los laboratorios deben establecer estrategias para reconocer anormalidades en los histogramas y disper-sogramas. También se deben establecer estrategias para el manejo de avisos y mensajes de interpretaciónproveídos por el instrumento.

Métodos eléctricos, ópticos _y ahora sistemas híbridos_ son ampliamente aceptados para la diferenciación deleucocitos debido a la superioridad que tienen en cuanto a precisión, exactitud y rapidez. No obstante, con elimpresionante aumento en la velocidad del proceso de cómputo, en esta etapa de información en tecnologíapuede ser que esta actitud requiera de una reevaluación en un futuro cercano. Muchos hematólogos tienenmás confianza en las características morfológicas encontradas en una tinción o coloración Giemsa par-ticularmente para células raras . Por esta razón, es previsible que para un futuro cercano los técnicos y doctoresdeban mantener sus habilidades en la identificación de células por microscopio mientras aprecian el valor delos analizadores automatizados en la rutina práctica.

Espero que la presente literatura les sea útil en el trabajo diario.

Diciembre, 2000

Noriyuki TatsumiProfesor,Departamento de Clínica y Laboratorio Médico,Escuela de Medicina de la Universidad de Osaka, Osaka (Japón)

3

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5

CASOS DE CELULAS LINFOIDES ANORMALES

Leucemia de adultos célula tipo T (LAT) (1) 6

Leucemia de adultos célula tipo T (LAT) (2) 8

Leucemia de células peludas (LCP) (tipo japonés) 10

Caso de leucomogénesis a partir de un linfoma 12

Linfoma maligno (LM) 14

Linfoma linfocítico granular grande (LLGG) 16

Leucemia prolinfocítica-T (LPL-T) 18

Reincidencia de leucemia linfocítica aguda tipo T (LLA-T) 20

Leucemia linfocítica aguda tipo B (LLA-B) 22

´

Diferencial manual

Banda 5.0 [%]Segmentados 65.5 [%]Linfocitos 17.0 [%]Monocitos 5.0 [%]Eosinófilos 3.0 [%]Basófilos 0.5 [%]Mielocitos 1.0 [%]Células atípicas 3.0 [%]

6

Información medida por el XE-2100

Información del XE-2100

Casos de células linfoides anormales

WBC & 6.56 [109/L]RBC 3.74 [1012/L]HGB 141 [g/L]HCT 38.8 [%]MCV 103.7 [fL]MCH 37.7 [pg]MCHC 363 [g/L]PLT 63 * [109/L]RDW-SD 56.2 + [fL]RDW-CV 14.8 [%]PDW ---- [fL]MPV ---- [fL]P-LCR ---- [%]PCT ---- [%]NEUT 3.31 * [109/L] 50.4 * [%]LYMPH & 2.53 * [109/L] 38.6 * [%]MONO 0.55 * [109/L] 8.4 * [%]EO 0.07 * [109/L] 1.1 * [%]BASO 0.10 [109/L] 1.5 + [%]NRBC 0.06 [109/L] 0.9 [/100WBC]RET 1.49 [%] 55.7 [109/L]IRF 10.3 [%]LFR 89.7 [%]MFR 9.3 [%]HFR 1.0 [%]

Leucemia de adultos célula tipo T (LAT) (1)

ObservacionesEl límite confuso entre las áreas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por )sugiere la presencia de células linfoides anormales en este lugar. Estos puntos corresponden a loslinfocitos atípicos de LAT (de los cuales se encontraron 3% en la sangre periférica). La aparición delaviso “Abn Lympho/L_Blasts?” demuestra la excelente sensibilidad del canal DIFF para detectar célulaslinfocíticas anormales.

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

WBC IP Messages

Abn Lympho/L_Blasts

RBC/RET IP Messages PLT IP Messages

PLT Abn Distribution

PLT Clumps (S)?

7

Datos (sangre periférica)

Células T Células B Otros

CD2 86.1 CD20 7.9 CD25 51.4CD3 75.4 HLA-DR 31.4CD4 54.8CD7 72.9CD8 24.6

ObservacionesResultados positivos para marcadores CD7y CD25. El valor de CD4 no aumentó signi-ficativamente, lo que sugiere que las célu-las LAT no se incrementaron.

ObservacionesSe encontraron células segmentadas, enclavadas yonduladas (también conocidas como “células en flor”)entre linfocitos maduros.

Información obtenida por el método de citometría de flujo

Información obtenida del análisis del frotis

(x 1000)

Tinción May-Giemsa Tinción May-Giemsa Tinción May-Giemsa

(x 1000) (x 1000)

8




Leucemia de adultos célula tipo T (LAT) (2)

WBC 24.58 + [109/L]RBC 4.77 [1012/L]HGB 165 [g/L]HCT 48.0 [%]MCV 100.6 [fL]MCH 34.6 [pg]MCHC 344 [g/L]PLT 145 [109/L]RDW-SD 50.1 [fL]RDW-CV 13.6 [%]PDW 16.4 [fL]MPV 12.8 [fL]P-LCR 49.1 + [%]PCT 0.18 [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH ---- [109/L] ---- [%]MONO ---- [109/L] ---- [%]EO 0.22 [109/L] 0.9 [%]BASO 0.09 [109/L] 0.4 [%]NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC]RET 1.17 [%] 55.8 [109/L]IRF 4.5 [%]LFR 95.5 [%]MFR 3.8 [%]HFR 0.7 [%]

ObservacionesEl límite confuso entre las áreas de monocitos y linfocitos en el dispersograma DIFF (indicado por )sugiere la presencia de células linfoides anormales. Fueron consideradas como células LAT (encontra-das en un 60% en la sangre periférica).

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 4.0 [%]Segmentados 19.0 [%]Linfocitos 13.0 [%]Monocitos 4.0 [%]Eosinófilos 0.5 [%]Basófilos 0.5 [%]Células atípicas 59.5 [%]

WBC IP Messages

WBC Abn ScattergramLeukocytosis

Atypical Lympho?Abn Lympho/L_Blasts?


9


Células T Células B Otros

CD2 91.6 CD10 7.7 CD25 82.3CD3 91.5 CD19 6.2CD4 84.1 CD20 6.7CD5 94.5 CD23 4.6CD7 19.5CD8 7.6

ObservacionesEl alto índice de positividad para CD4 y CD25sugiere células T tumorales, mientras que elbajo índice de positividad para CD7 sugiereleucemia T crónica o aguda en adulto. Estecaso fue diagnosticado como LAT aguda.

ObservacionesSe encontró un signi-ficativo número delinfocitos con formade flor segmentada.



(x 1000)

Tinción May-Giemsa Tinción May-Giemsa

(x 1000)

10




Leucemia de células peludas (LCP) (tipo japonés)

WBC 25.43 + [109/L]RBC 4.24 [1012/L]HGB 147 [g/L]HCT 42.5 [%]MCV 100.2 [fL]MCH 34.7 [pg]MCHC 346 [g/L]PLT 211 [109/L]RDW-SD 57.1 + [fL]RDW-CV 15.5 [%]PDW 10.4 [fL]MPV 10.1 [fL]P-LCR 23.0 [%]PCT 0.21 [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH ---- [109/L] ---- [%]MONO ---- [109/L] ---- [%]EO 0.30 [109/L] 1.2 [%]BASO 0.07 [109/L] 0.3 [%]NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC]RET 0.78 [%] 33.1 [109/L]IRF 9.4 [%]LFR 90.6 [%]MFR 8.3 [%]HFR 1.1 [%]

ObservacionesEste es un caso de leucemia de células peludas (LCP). En el dispersograma DIFF se formó un grupode puntos en la región del área de linfocitos hacia el área de monocitos (indicado por ), lo quesugiere la presencia de células peludas.

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 0.5 [%]Segmentados 8.5 [%]Linfocitos 23.5 [%]Monocitos 0.0 [%]Eosinófilos 0.0 [%]Basófilos 2.0 [%]Células peludas 65.5 [%]

WBC IP Messages


Atypical Lympho?Abn Lympho/L_Blasts?


11


Células T Células B Moléculas de

adhesión celular

CD2 32.6 CD19 69.3 CD11a 69.0CD3 40.6 CD20 63.9 CD11c 97.3 CD4 18.6 CD24 3.7CD5 29.4 CD38 14.9 Otros

CD8 17.0 FMC7 80.4 CD25 20.0SM-IgD 1.5SM-IgM 37.7SM-IgA 7.7SM-IgG 78.2 SM-IgT 75.4SM-IgK 4.5SM-IgL 2.4

ObservacionesResultados positivos para marcadoresCD19 y CD20, lo que sugiere un tumorde tipo célula B. CD11c-positivo, CD24-negativo y FMC7-positivo indican leu-cemia de células peludas. El valor bajopara CD25 sugiere que la leucemia esde tipo japonés.

ObservacionesSe observan células en forma de huevo frito. En el frotis están presentes células peludas connumerosas proyecciones. En la tinción de fosfatasa ácida se encontraron células granularesgrandes que contienen una o dos células débilmente positivas, las cuales fueron resistentesal tartrato. Se sabe que la leucemia de células peludas de tipo japonés muestra positividaddébil en la tinción de fosfatasa ácida.


(x 1000)


Prueba resistente al tartrato

*La mayoría de laboratorios japoneses usan un ventilador para secar sus tinciones o coloraciones de sangre periférica.

Tinción May-Giemsa (*secado con un ventilador)

Tinción May-Giemsa(*secado con un ventilador)

Tinción May-Giemsa(aire seco)

Tinción de fosfatasa ácida

(x 1000) (x 1000)

(x 1000)

(x 1000)

Diferencial manual

Banda 3.5 [%]Segmentados 2.5 [%]Linfocitos 8.5 [%]Monocitos 0.5 [%]Eosinófilos 1.5 [%]Basófilos 0.0 [%]Mielocitos 1.0 [%]Células anormales 82.5 [%](Blastos +)Hematíes nucleados 2.5/100 leucocitos

12




Caso de leucomogénesis a partir de un linfoma

WBC & 14.25 [109/L]RBC 4.00 [1012/L]HGB 113 [g/L]HCT 34.0 [%]MCV 85.0 - [fL]MCH 28.3 [pg]MCHC 332 [g/L]PLT & 20 - [109/L]RDW-SD 46.5 [fL]RDW-CV 15.0 [%]PDW 8.7 - [fL]MPV 10.7 [fL]P-LCR 29.6 [%]PCT 0.02 - [%]NEUT 2.19 * [109/L] 15.3 * [%]LYMPH & 10.64 * [109/L] 74.7 * [%]MONO 0.98 * [109/L] 6.9 * [%]EO 0.19 * [109/L] 1.3 * [%]BASO 0.25 * [109/L] 1.8 * [%]NRBC 0.57 [109/L] 4.0 [/100WBC]RET 0.36 [%] 14.4 [109/L]IRF 20.2 [%]LFR 79.8 [%]MFR 15.0 [%]HFR 5.2 [%]

ObservacionesEl límite confuso entre las áreas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por )sugiere la presencia de células linfoides anormales, ya que representan la mayoría en el frotis.

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

WBC IP Messages

LymphocytosisBasophiliaNRBC Present

Blasts?Immature Gran?


Thrombocytopenia

Células T Células B Granulocitos/ Moléculas de Monocitos adhesión celular

CD2 94.0 CD10 69.0 CD13 4.6 CD11a 95.7CD3 41.8 CD19 2.2 CD14 1.8 CD11b 5.5 CD4 78.3 CD20 2.2 CD15 1.9 CD11c 4.2CD5 92.9 CD23 4.9 CD16 3.9 CD18 96.8CD7 95.6 CD38 89.6 CD33 5.5 CD41 1.7CD8 79.3 HLA-DR 6.7 CD34 1.8Plaquetas Células NK Otros

CD36 1.8 CD56 68.8 CD25 12.0CD42 1.8

13

ObservacionesLos datos sugieren queexiste una proliferaciónneoplásica de célulaspre-T, las cuales son CD3negativas; y CD4, CD8,CD10 y CD56 fueronpositivas.



Tinción May-Giemsa

ObservacionesPredominan pequeñas células con particiones celulares, las cualesse consideran como células de linfoma (82.5% del total). También seobserva un pequeño número de células grandes y blastos.

(x 1000) (x 1000) (x 1000)

Tinción May-Giemsa Tinción May-Giemsa


14




Linfoma maligno (LM)

WBC 14.12 [109/L]RBC 4.24 [1012/L]HGB 116 [g/L]HCT 35.9 [%]MCV 84.7 - [fL]MCH 27.4 [pg]MCHC 323 [g/L]PLT 217 [109/L]RDW-SD 40.3 [fL]RDW-CV 13.4 [%]PDW 13.8 [fL]MPV 12.1 [fL]P-LCR 40.6 [%]PCT 0.26 [%]NEUT 10.80 * [109/L] 76.5 * [%]LYMPH 1.77 * [109/L] 12.5 * [%]MONO 1.34 * [109/L] 9.5 * [%]EO 0.15 [109/L] 1.1 [%]BASO 0.06 [109/L] 0.4 [%]NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC]RET 2.74 [%] 116.2 [109/L]IRF 25.0 [%]LFR 75.0 [%]MFR 19.9 [%]HFR 5.1 [%]

ObservacionesEl límite confuso entre las áreas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por )sugiere la presencia de células linfoides anormales, las cuales fueron clasificadas como células de lin-foma maligno (3.5% del total del frotis). Aparece la alarma “Abn Lympho/L_Blasts?”.

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 8.5 [%]Segmentados 74.0 [%]Linfocitos 6.5 [%]Monocitos 7.0 [%]Eosinófilos 0.5 [%]Basófilos 0.0 [%]Células linfomamaligno 3.5 [%]

WBC IP Messages

Monocytosis

Abn Lympho/L_Blasts?


15


Tinción May-Giemsa

Observaciones Se encontraron célulasgrandes de linfoma pro-pensas a la segmen-tación y blastos (3.5%del total) en el frotis.

(x 1000)

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

16




Linfoma linfocítico granular grande (LLGG)

WBC 30.65 + [109/L]RBC 3.56 [1012/L]HGB 100 [g/L]HCT 30.6 [%]MCV 86.0 [fL]MCH 28.1 [pg]MCHC 327 [g/L]PLT 125 [109/L]RDW-SD 46.5 [fL]RDW-CV 14.8 [%]PDW 13.1 [fL]MPV 10.7 [fL]P-LCR 31.8 [%]PCT 0.13 - [%]NEUT 1.45 * [109/L] 4.7 * [%]LYMPH 28.75 * [109/L]93.8 * [%]MONO 0.37 * [109/L] 1.2 * [%]EO 0.03 [109/L] 0.1 [%]BASO 0.05 [109/L] 0.2 [%]NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC]RET 1.11 [%] 39.5 [109/L]IRF 6.8 [%]LFR 93.2 [%]MFR 5.9 [%]HFR 0.9 [%]

ObservacionesLinfocitos granulares grandes (90% en el frotis) aparecen en el área de linfocitos del dispersogramaDIFF, los cuales mostraban mayor dispersión lateral que los linfocitos normales debido a su gran con-tenido granular (indicado por ).

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 0.0 [%]Segmentados 11.0 [%]Linfocitos 1.5 [%]Monocitos 1.5 [%]Eosinófilos 0.0 [%]Basófilos 0.0 [%]Linfocitos granulares grandes 86.0 [%]

WBC IP Messages

LymphocytosisLeukocytosis



17

ObservacionesLa mayoría de linfocitos songrandes y contienen gránulos.

Tinción May-Giemsa


(x 1000)

Células T Células B Granulocitos/ Células NK

Monocitos

CD2 99.7 CD10 1.1 CD16 98.5 CD56 98.9CD3 99.6 CD19 0.9CD4 99.0 CD20 0.8CD5 99.5 HLA-DR 9.2CD7 82.9 Otros

CD8 87.4 apagado CD25 18.5

ObservacionesLos datos sugieren una proli-feración neoplásica de célu-las positivas para CD3, CD4,CD8 apagado, CD16 y CD56.El linfoma linfocítico granulargrande es clasificado en célu-las tipo T o células nulas. Esraro aun para células tipo T elexpresar CD4.



Tinción May-Giemsa

(x 1000)

18



WBC 14.20 [109/L]RBC 5.53 + [1012/L]HGB 178 + [g/L]HCT 53.8 + [%]MCV 97.3 [fL]MCH 32.2 [pg]MCHC 331 [g/L]PLT 185 [109/L]RDW-SD 47.6 [fL]RDW-CV 13.3 [%]PDW 12.7 [fL]MPV 11.0 [fL]P-LCR 33.2 [%]PCT 0.20 [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH 9.84 * [109/L] 69.3 * [%]MONO 0.51 * [109/L] 3.6 * [%]EO 0.09 [109/L] 0.6 [%]BASO ---- [109/L] ---- [%]NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC]RET 1.16 [%] 64.1 [109/L]IRF 7.1 [%]LFR 92.9 [%]MFR 6.0 [%]HFR 1.1 [%]


Leucemia prolinfocítica-T (LPL-T)

Observaciones

El límite confuso entre las áreas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por )sugiere la aparición de células linfoides anormales segmentadas, las cuales fueron encontradas en elfrotis.

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 3.0 [%]Segmentados 30.5 [%]Linfocitos 41.5 [%]Monocitos 1.0 [%]Eosinófilos 0.5 [%]Basófilos 2.0 [%]Células anormales 21.5 [%](células segmentadas +)

WBC IP Messages

WBC Abn ScattergramLymphocytosis



19

ObservacionesSe encontró un importante número de células anormales linfocíticas con cúmulos burdosen la cromatina y nucléolos claros y poco claros. Los hallazgos por los cuales este paciente fue diagnosticado con leucemia prolinfocíticafueron leucocitosis, nódulos linfáticos y bazo inflamados, así como por los resultados dela citometría de flujo y el análisis del frotis de la sangre periférica.

Tinción May-Giemsa


(x 1000)

Células T Células B Granulocitos/ Células NK Monocitos

CD2 95.4 CD10 < 1.0 CD16 7.8 CD56 8.1CD3 95.2 CD19 1.8CD4 95.2 CD20 1.9CD5 90.9 HLA-DR 5.9CD7 97.5CD8 1.4

ObservacionesEl alto índice de positividad(por encima del 90%) paraCD2, CD3, CD4, CD5 y CD7sugiere un incremento signifi-cativo en células T.


Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)


20



WBC & 3.16 [109/L]RBC 2.82 [1012/L]HGB 86 [g/L]HCT 25.3 - [%]MCV 89.7 [fL]MCH 30.5 [pg]MCHC 340 [g/L]PLT & 21 - [109/L]RDW-SD 51.3 [fL]RDW-CV 15.9 [%]PDW ---- [fL]MPV ---- [fL]P-LCR ---- [%]PCT ---- [%]NEUT 1.44* [109/L] 45.6 * [%]LYMPH & 0.77* [109/L] 24.4 * [%]MONO 0.94* [109/L] 29.7 * [%]EO 0.00* [109/L] 0.0 * [%]BASO 0.01* [109/L] 0.3 * [%]NRBC 0.16 [109/L] 5.0 [/100WBC]RET 0.50 [%] 14.1 [109/L]IRF 16.2 [%]LFR 83.8 [%]MFR 13.7 [%]HFR 2.5 [%]

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

ObservacionesEl espacio ocupado por los monocitos es más grande de lo normal en el dispersograma DIFF y seextiende al área de fluorescencia lateral alta. Se puede concluir que los blastos grandes y segmen-tados se encuentran localizados en esta área (indicado por ). Los blastos constituyeron el 21% enel diferencial manual.


Reincidencia de leucemia linfocítica aguda tipo T (LLA-T)

Diferencial manual

Banda 9.0 [%]Segmentados 30.5 [%]Linfocitos 9.0 [%]Monocitos 26.0 [%]Eosinófilos 0.0 [%]Basófilos 0.0 [%]Mielocitos 2.5 [%]Metamielocitos 1.5 [%]Linfocitos atípicos 0.5 [%]Blastos 21.0 [%](Células segmentadas grandes)monocitos grandes +Hematíes nucleados 4/100 leucocitos

WBC IP Messages

LymphopeniaNRBC present


RBC/RET IP Messages

Anemia

PLT IP Messages

PLT Abn DistributionThrombocytopenia

Células T Células B Granulocitos/ Moléculas de adhesión celularMonocitos

CD2 99.7 CD10 0.6 CD13 3.5 CD11b 61.7CD3 97.0 CD19 0.2 CD15 2.2 CD41 0.5CD4 1.7 CD20 0.5 CD33 0.7CD7 79.9 HLA-DR 1.8 CD34 0.6CD8 6.9

Células NK Otros

CD56 43.2 CD25 0.6

21



ObservacionesSe concluyó que estecaso era una leucemiaaguda tipo T. Fue posi-tiva para CD3 y nega-tiva para CD4 y CD8.


Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

ObservacionesEsta es una leucemia aguda tipo T recurrente. Los blastos (21% enel frotis) tienen una elevada relación núcleo/citoplasma (N/C), unsolo núcleo por célula y cromatina burda.

22



WBC & 152.26@ [109/L]RBC 2.02 - [1012/L]HGB 58 - [g/L]HCT 17.8 - [%]MCV 88.1 [fL]MCH 28.7 [pg]MCHC 326 [g/L]PLT & 45 * [109/L]RDW-SD 51.2 [fL]RDW-CV 17.9 + [%]PDW ---- [fL]MPV ---- [fL]P-LCR ---- [%]PCT ---- [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH ---- [109/L] ---- [%]MONO ---- [109/L] ---- [%]EO 0.03 * [109/L] 0.0 * [%]BASO 0.29 * [109/L] 0.2 * [%]NRBC 0.13 * [109/L] 0.1 * [/100WBC]RET 0.86 [%] 17.4 [109/L]IRF 21.4 [%]LFR 78.6 [%]MFR 14.8 [%]HFR 6.6 [%]

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

ObservacionesLos blastos (90% en el frotis) aparecen en el área de linfocitos y monocitos del dispersograma DIFF(indicado por ), pero muestran menos fluorescencia lateral que en el caso de LLA-T ilustrado enlas páginas 20 y 21.


Leucemia linfocítica aguda tipo B (LLA-B)

Diferencial manual

Banda 0.0 [%]Segmentados 0.5 [%]Linfocitos 6.0 [%]Monocitos 0.0 [%]Eosinófilos 0.5 [%]Basófilos 0.0 [%]Blastos 93.0 [%](pocas células hendidas ycélulas segmentadas)

WBC IP Messages

WBC Abn ScattergramBasophiliaLeukocytosis


RBC/RET IP Messages

Anemia

PLT IP Messages

PLT Abn DistributionTrombocytopenia

PLT Clumps?

23




CD2 5.6 CD10 94.5 CD13 56.3 CD11a 81.5CD3 3.5 CD19 92.7 CD14 0.6 CD11b 72.0CD4 3.6 CD20 0.2 CD15 0.8 CD18 90.9 CD5 4.2 CD23 1.4 CD16 2.7 CD41 0.5 CD7 5.3 CD38 53.4 CD33 44.8CD8 3.6 HLA-DR 93.9 CD34 92.7

Plaquetas Células NK Otros

CD36 66.0 CD56 2.3 CD25 80.4CD42 2.7

ObservacionesCD10 y CD19 positivos,así como CD20 negativo,sugieren una prolifera-ción neoplásica de célu-las pre-B. A estas célulasse les ha considerado bi-fenotípicas, ya que fue-ron positivas para CD13y CD33.

ObservacionesPredominan blastos pequeños con una elevada relaciónnúcleo/citoplasma (N/C). Se observó la presencia de algunascélulas segmentadas o con cisuras.

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción peroxidasa

(x 1000)


24

Por: Ken-ichi Anami, MT, Gerente del laboratorio clínico del Hospital Nacional Miyakonojo, Japón.

25

CASOS DE CELULAS INMADURAS DE TIPO MIELOIDE

Síndrome mielodisplásico (SMD)-AR 26

LMC crisis blástica-1 28

LMC crisis blástica-2 30

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M2 32

Leucemia mieloide aguda (LMA) variante forma-M3 34

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M4(1) 36

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M4(2) 40

Leucemia mieloide aguda (LMA)-M5b 42

´

ObservacionesEste caso es una variante del síndrome mielodisplásico con anemia refractoria. La agrupación deneutrófilos en el dispersograma DIFF es anormal y se extiende desde el área de los fantasmas (indicadopor ), lo que sugiere una dispersión lateral reducida y por lo tanto un menor contenido de gránulos.Esto fue confirmado en el examen de sangre periférica. Las plaquetas gigantes encontradas en el frotisfueron identificadas con una fluorescencia alta en el dispersograma PLT-O (indicado por ) y aparecenpor encima de los 20fL en el histograma PLT (indicado por ). Debido a ello, la información obtenidaen el dispersograma PLT-O fue usada para el reporte.

26



WBC & 4.29 [109/L]RBC 3.62 [1012/L]HGB 122 [g/L]HCT 38.0 [%]MCV 105.0 [fL]MCH 33.7 [pg]MCHC 321 [g/L]PLT & 27 - [109/L] (PLT-I : 13) RDW-SD 66.2 + [fL]RDW-CV 17.3 + [%]PDW ---- [fL]MPV ---- [fL]P-LCR ---- [%]PCT ---- [%]NEUT 2.92 * [109/L] 68.0 * [%]LYMPH & 0.66 * [109/L] 15.4 * [%]MONO 0.17 * [109/L] 4.0 * [%]EO 0.44 * [109/L] 10.3 * [%]BASO 0.10 * [109/L] 2.3 * [%]NRBC 0.14 [109/L] 3.2 [/100WBC]RET 2.75 [%] 99.6 [109/L]IRF 20.8 [%]LFR 79.2 [%]MFR 14.8 [%]HFR 6.0 [%]

Casos de células inmaduras de tipo mieloide

Síndrome mielodisplásico (SMD)-AR

WBC IP MessagesLymphopeniaNRBC Present

RBC/RET IP MessagesAnisocytosis

PLT IP MessagesPLT Abn DistributionTrombocytopenia

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

PLT PLT-O

RF

FSC

SFL

Diferencial manual

Banda 2.5 [%]Segmentados 66.5 [%]Linfocitos 15.0 [%]Monocitos 3.5 [%]Eosinófilos 6.5 [%]Basófilos 5.0 [%]Blastos 1.0 [%]Hematíes nucleados 2.5/100 leucocitos

27


ObservacionesEstán presentes neutrófilos hiperseg-mentados, plaquetas gigantes y eri-troblastos con nucléolos bilobula-dos, todos característicos del síndro-me mielodisplásico. Se encontraronblastos en una proporción del 1%.

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

28



WBC & 26.87 *[109/L]RBC 2.72 [1012/L]HGB 84 [g/L]HCT 25.2 - [%]MCV 92.6 [fL]MCH 30.9 [pg]MCHC 333 [g/L]PLT & 31 *[109/L]RDW-SD 51.2 [fL]RDW-CV 17.8 +[%]PDW ---- [fL]MPV ---- [fL]P-LCR ---- [%]PCT ---- [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH ---- [109/L] ---- [%]MONO ---- [109/L] ---- [%]EO 0.18 *[109/L] 0.7 * [%]BASO 0.13 *[109/L] 0.5 * [%]NRBC 0.29 *[109/L] 1.1 * [/100WBC]RET 3.67 [%] 99.8 [109/L]IRF 22.6 [%]LFR 77.4 [%]MFR 17.8 [%]HFR 4.8 [%]

ObservacionesEn el dispersograma DIFF se puede observar en el área de monocitos una agrupación grande depuntos, la cual se extiende en la dirección de mayor fluorescencia lateral (indicado por ). Estoconcuerda con la presencia de blastos encontrados en la sangre periférica.


LMC crisis blástica-1

* Estos datos han sido obtenidos de una pantalla de investigación.

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 14.0 [%]Segmentados 22.5 [%]Linfocitos 2.5 [%]Monocitos 5.0 [%]Eosinófilos 1.0 [%]Basófilos 1.0 [%]Blastos 38.5 [%]Mielocitos 9.5 [%]Metamielocitos 6.0 [%]Hematíes nucleados 1.0 /100 leucocitos

WBC IP Messages


Blasts?Immature Gran?Left Shift?

RBC/RET IP Messages

Anemia

PLT IP Messages

PLT Abn DistributionThombocytopenia

PLT Clumps?

* Parámetros de investigaciónOtros 9.71 [109/L] 36.1 [%]


CD2 2.0 CD10 6.1 CD13 99.8 CD11a 97.7CD3 5.2 CD19 1.2 CD14 76.2 CD11b 92.2CD4 88.0 CD20 1.2 CD15 81.8 CD18 98.0CD5 1.9 CD38 96.0 CD16 67.8 CD41 6.1CD7 3.4 HLA-DR 15.3 CD33 99.3CD8 4.0 CD34 0.7

Plaquetas Células NK Otros

CD36 94.2 CD56 93.2 CD25 16.2

29

Prueba de inhibición de NaF



ObservacionesA la izquierda se muestranlos marcadores de superficieen el examen inicial. CD4,CD11b, CD14 y CD36, mar-cadores conocidos de la se-rie monocítica, son todospositivos.

ObservacionesEste es un paciente con LMC en crisisblástica. Se identificó en el frotis ungran número de blastos con núcleoshendidos y citoplasma altamentebasofílico. También fueron identifica-das células inmaduras de la serie mo-nocítica. Se encontró una reacción débilmentepositiva a la esterasa α-naftol butiratosensitiva al fluoruro de sodio (NaF).

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción esterasa

(x 1000)

Datos examen inicial (sangre periférica)

(x 400)

30



WBC & 10.03 *[109/L]RBC 2.26 - [1012/L]HGB 69 - [g/L]HCT 20.2 - [%]MCV 89.4 [fL]MCH 30.5 [pg]MCHC 342 [g/L]PLT & 12 *[109/L]RDW-SD 57.6 +[fL]RDW-CV 18.1 +[%]PDW ---- [fL]MPV ---- [fL]P-LCR ---- [%]PCT ---- [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH ---- [109/L] ---- [%]MONO 1.02 *[109/L] 10.2 * [%]EO 0.01 *[109/L] 0.1 * [%]BASO 0.26 *[109/L] 2.6 * [%]NRBC 0.17 *[109/L] 1.7 * [/100WBC]RET 0.35 [%] 7.9 [109/L]IRF 22.8 [%]LFR 77.2 [%]MFR 17.4 [%]HFR 5.4 [%]

ObservacionesEste es el mismo paciente mencionado en las páginas 28 y 29 después de tres semanas de tratamiento.Aun cuando el mismo grupo de puntos en el área de fluorescencia lateral fuerte todavía está presenteen el dispersograma DIFF (indicado por ), otro grupo pequeño aparece en el área de monocitos(indicado por ). Esto sugiere una reducción en las células con alto contenido de ácido nucleico encomparación con los exámenes previos.


LMC crisis blástica (2)


DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 2.0 [%]Segmentados 4.5 [%]Linfocitos 15.5 [%]Monocitos 5.0 [%]Eosinófilos 0.5 [%]Basófilos 0.0 [%]Blastos 68.0 [%]Promielocitos 0.5 [%]Mielocitos 2.0 [%]Metamielocitos 2.0 [%]Hematíes nucleados 2.0/100 leucocitos

WBC IP Messages

WBC Abn ScattergramMonocytosisBasophilia


RBC/RET IP Messages

Anemia

PLT IP Messages


PLT Clumps?


31


ObservacionesApariencia del frotis de sangre periférica después de tres semanasde tratamiento. Los blastos eran grandes con vacuolas numerosas yde citoplasma profundamente basofílicos. Se encontraron célulascon apotosis por todo el frotis.

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

32



WBC 45.57 * [109/L]RBC 2.76 [1012/L]HGB 90 [g/L]HCT 26.1 [%]MCV 94.6 [fL]MCH 32.6 [pg]MCHC 345 [g/L]PLT & 11 * [109/L]RDW-SD 56.3 + [fL]RDW-CV 16.4 + [%]PDW ---- [fL]MPV ---- [fL]P-LCR ---- [%]PCT ---- [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH ---- [109/L] ---- [%]MONO ---- [109/L] ---- [%]EO 0.00 * [109/L] 0.0 * [%]BASO 0.02 * [109/L] 0.0 * [%]NRBC 0.00 * [109/L] 0.0 * [/100WBC]RET 0.25 [%] 6.9 [109/L]IRF 10.2 [%]LFR 89.8 [%]MFR 8.9 [%]HFR 1.3 [%]

ObservacionesEste caso es una leucemia mieloide aguda ( (LMA)-M2 ) en recaída. Se pensó que los blastos (97.5% enel frotis) estaban localizados en el área de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicadopor ). Los puntos rojos que aparecen en el dispersograma IMI (indicado por ) sugieren la presenciade células inmaduras de la serie neutrofílica.


Leucemia mieloide aguda (LMA)-M2

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 0.0 [%]Segmentados 0.0 [%]Linfocitos 2.5 [%]Monocitos 0.0 [%]Eosinófilos 0.0 [%]Basófilos 0.0 [%]Blastos 97.5 [%]Cuerpos de Auer+

WBC IP Messages



RBC/RET IP Messages

Anemia

PLT IP Messages


PLT Clumps?

33




CD2 4.2 CD10 1.2 CD13 64.7 CD11a 17.8CD3 0.3 CD19 39.9 CD14 0.5 CD11b 7.4CD4 4.4 CD20 0.7 CD15 8.2 CD18 27.3 CD5 4.3 CD23 1.9 CD16 2.0 CD41 1.6 CD7 6.0 CD38 79.0 CD34 75.0CD8 2.1 HLA-DR 75.8

Plaquetas Células NK

CD36 10.9 CD56 75.9CD42 0.4

ObservacionesEl marcador CD13 fue posi-tivo, mientras que CD14 yCD36 fueron negativos, loque sugiere la presencia deblastos de tipo mieloide.

ObservacionesSe observan blastos con nu-cléolos bastante evidentes y ci-toplasmas ligeramente turbios,algunos de los cuales contie-nen cuerpos de Auer. La tinciónde peroxidasa es fuertementepositiva.

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción peroxidasa

(x 1000)

Datos (médula ósea)

(x 1000)

Tinción May-Giemsa


34


WBC & 66.08 * [109/L]RBC 2.18 * [1012/L]HGB 55 - [g/L]HCT 17.5 * [%]MCV 80.3 * [fL]MCH 25.2 * [pg]MCHC 314 * [g/L]PLT & 30 * [109/L]RDW-SD ---- [fL]RDW-CV ---- [%]PDW ---- [fL]MPV ---- [fL]P-LCR ---- [%]PCT ---- [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH ---- [109/L] ---- [%]MONO ---- [109/L] ---- [%]EO 0.03 * [109/L] 0.0 * [%]BASO 0.08 * [109/L] 0.1 * [%]NRBC 0.09 * [109/L] 0.1 * [/100WBC]RET 1.71 * [%] 37.3 * [109/L]IRF 51.4 * [%]LFR 48.6 * [%]MFR 31.4 * [%]HFR 20.2 * [%]

ObservacionesUn grupo de puntos localizado en el área de linfocitos y monocitos que se extiende en dirección delsitio de mayor fluorescencia (indicado por ), sugiere que los promielocitos (91.5% en el frotis desangre periférica) aparecen aquí. También se observan pequeños puntos en áreas usualmenteocupadas por neutrófilos y eosinófilos, lo que concuerda con las observaciones del recuento micros-cópico. La gran cantidad de puntos rojos que aparecen en el dispersograma IMI sugieren célulasinmaduras de la serie mieloide (indicado por ).


Leucemia mieloide aguda (LMA) variante forma-M3

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 0.0 [%]Segmentados 0.5 [%]Linfocitos 1.0 [%]Monocitos 0.0 [%]Eosinófilos 0.0 [%]Basófilos 0.0 [%]Blastos 3.0 [%]Promielocitos 91.5 [%]Mielocitos 3.5 [%]Metamielocitos 0.5 [%]

WBC IP Messages



RBC/RET IP Messages

RBC Abn DistributionDimorphic PopulationRET Abn ScattergramAnemia

Fragments?

PLT IP Messages


PLT Clumps?

35



Células T Células B Granulocitos/ Moléculas de

Monocitos adhesión celular

CD2 24.5 CD10 0.2 CD13 98.3 CD41 0.3CD3 0.5 CD19 0.1 CD14 0.9CD4 0.7 CD20 0.0 CD15 0.3CD5 0.4 CD38 71.0 CD16 0.4CD7 3.1 HLA-DR 1.1 CD33 98.9CD8 0.1 CD34 7.9

Plaquetas Células NK

CD36 13.9 CD56 0.5

ObservacionesLos marcadores mieloidesCD13 y CD33 fueron positi-vos, mientras que los mar-cadores CD14 y CD36, a loscuales se conoce comoreacción de células mono-cíticas, fueron negativos.Esto sugiere leucemia mie-loide.

ObservacionesSe observan muchas células bilobuladas, otras exhiben clivaje o núcleos hendidos. Elcitoplasma presentó variaciones de color, que fueron de azul profundo a gris con algunasvacuolas y pequeña cantidad de gránulos azurófilos y fardos de cuerpos de Auer (célulasde Faggot). Se observó una reacción fuertemente positiva a la tinción de peroxidasa enla mayoría de las células. Todos estos datos indican variante forma-M3. En la mayoría decasos de esta variante el recuento periférico de leucocitos es bajo, pero en el presentecaso es elevado.

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción peroxidasa

(x 1000)

Datos examen inicial (sangre periférica)

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

36



WBC 256.74 @ [109/L]RBC 3.47 [1012/L]HGB 106 [g/L]HCT 31.2 [%]MCV 89.9 [fL]MCH 30.5 [pg]MCHC 340 [g/L]PLT & 48 * [109/L]RDW-SD 50.2 [fL]RDW-CV 15.4 [%]PDW ---- [fL]MPV ---- [fL]P-LCR ---- [%]PCT ---- [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH ---- [109/L] ---- [%]MONO ---- [109/L] ---- [%]EO 0.69 * [109/L] 0.3 * [%]BASO ---- [109/L] ---- [%]NRBC 0.00 * [109/L] 0.0 * [/100WBC]RET 0.44 * [%] 15.3 * [109/L]IRF 47.8 * [%]LFR 52.2 * [%]MFR 21.1 * [%]HFR 26.7 * [%]

ObservacionesPresentación de un caso de LMA-M4. Aparecen muchos puntos rojos en el dispersograma IMI, lo quesugiere la presencia de granulocitos precursores. En el dispersograma DIFF, la fusión de puntos en elárea de linfocitos y monocitos y su extensión dentro del área de alta fluorescencia (indicado por ),sugiere la presencia de blastos (52.5% de la preparación). Los datos de los parámetros de investiga-ción del XE-2100 indican 15% de blastos, nivel ligeramente diferente del diferencial manual (promieloci-tos: 4.0% + mielocitos: 15.5% + metamielocitos: 3.5% = 23%). Sin embargo, el recuento original deleucocitos rebasó el límite de linearidad, se repitió el análisis en una dilución de 1 a 10 (indicado por laflecha ) dando como resultado un recuento de granulocitos inmaduros (IG) del 20%, el cual fue máscercano al conseguido por el método visual. La proporción de IMI obtenida de los datos de la pantallade servicio fue de 73.6% (indicado por ), lo que se acerca al 75.5% obtenido por el método visual.


Leucemia mieloide aguda (LMA)-M4 (1)

DIFF IMI

DIFF IMI

SFL RF

SFL R

F

SSC DC

SSC DC


x 10

Diferencial manual

Banda 0.5 [%]Segmentados 0.0 [%]Linfocitos 3.5 [%]Monocitos 20.0 [%]Eosinófilos 0.5 [%]Basófilos 0.0 [%]Promielocitos 4.0 [%]Mielocitos 15.5 [%]Metamielocitos 3.5 [%]Blastos 52.5 [%]

WBC IP Messages



RBC/RET IP Messages

RET Abn Scattergram

PLT IP Messages


PLT Clumps?

* Parámetros de investigaciónIG 38.46 [109/L] 15.0 [%]

* Parámetros de investigación

IG 5.07 [109/L] 20.2 [%]

37


Información obtenida del análisis del frotis (1)

Células T Células B Granulocitos/ Moléculas deMonocitos adhesión celular

CD2 2.8 CD19 9.0 CD13 73.0 CD11b 49.8CD7 4.6 HLA-DR 76.2 CD14 41.6 CD 41 14.7

CD15 59.9CD33 99.2CD34 3.4

Células NK

CD56 25.7

ObservacionesLos marcadores CD11b,CD13, CD14, CD15, CD33 yHLA-DR fueron positivos,mientras que CD14 estuvocercano al 40%. Esto su-giere hiperplasia de las doslíneas celulares: mielocíti-ca y monocítica.

ObservacionesSe aprecia un incremento de células mieloides inmaduras (en el rango de promie-locitos y metamielocitos) y también de monocitos (incluyendo promonocitos).La tinción de peroxidasa va desde positiva o débilmente positiva a negativa.

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción peroxidasa

(x 1000)


Tinción May-Giemsa

(x 1000)

38


ObservacionesEn la tinción de esterasa se encontraron células positivas para α-naftilbutirato y células positivas para naftol-AS-D-cloroacetato.

Tinción esterasa

(x 1000)

Prueba de inhibición de Naf

(x 400)

39

αα

αα

αα

αα

α

α

α

8 21

µ

Por: Ken-ichi Anami, MT, gerente del laboratorio clínico del Hospital Nacional Miyakonojo, Japón.

40



WBC & 4.08 * [109/L]RBC 2.55 [1012/L]HGB 78 - [g/L]HCT 23.8 - [%]MCV 93.3 [fL]MCH 30.6 [pg]MCHC 328 [g/L]PLT & 25 * [109/L]RDW-SD 48.0 [fL]RDW-CV 15.7 [%]PDW ---- [fL]MPV ---- [fL]P-LCR ---- [%]PCT ---- [%]NEUT 1.00 * [109/L] 24.6 * [%]LYMPH & 1.22 * [109/L] 29.9 * [%]MONO 1.82 * [109/L] 44.6 * [%]EO 0.01 * [109/L] 0.2 * [%]BASO 0.03 * [109/L] 0.7 * [%]NRBC 0.05 * [109/L] 1.2 * [/100WBC]RET 1.31 [%] 33.4 [109/L]IRF 12.5 [%]LFR 87.5 [%]MFR 10.9 [%]HFR 1.6 [%]

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC


Leucemia mieloide aguda (LMA)-M4 (2)


ObservacionesLos monocitos se extienden verticalmente en el área del dispersograma DIFF (indicado por ), loque sugiere la presencia de blastos (10% de la preparación de sangre periférica). La lectura de “Otros”(“Other”), los cuales proveen información acerca de células con alto contenido de ácido nucleico, fue1.5% (indicado por ). Esta área corresponde a los linfocitos atípicos. El recuento obtenido por elmétodo visual concuerda con el de linfocitos atípicos del 1%. La nube de neutrófilos está anormal-mente localizada, contigua al área de células fantasmas (indicado por ). Esto sugiere que los neu-trófilos son hipogranulares y bajos en contenido de ácido nucleico.

Diferencial manual

Banda 14.0 [%]Segmentados 17.5 [%]Linfocitos 24.0 [%]Monocitos 33.0 [%]Eosinófilos 0.0 [%]Basófilos 0.0 [%]Linfocitos atípicos 1.0 [%]Blastos 10.0 [%]Mielocitos 0.5 [%]Hematíes nucleados 1/100 leucocitos

WBC IP Messages

Monocytosis


RBC/RET IP Messages

Anemia

PLT IP Messages


PLT Clumps?


41





CD2 1.0 CD10 29.0 CD13 43.0 CD41 8.0CD3 1.0 CD19 0.0 CD14 43.0CD4 0.0 CD20 2.0 CD33 96.0CD5 2.0 HLA-DR 63.0 CD34 5.0CD7 1.0

CD8 0.0 Células NK

CD56 1.0

ObservacionesLos resultados iniciales delos marcadores. CD13, CD14,CD33 y HLA-DR fueron posi-tivos, lo que indica la pre-sencia de blastos de líneamieloide y monocítica.

ObservacionesEste caso fue diagnosticado como LMA-M4 a partir del análisis de la médula ósea.En sangre periférica se observó incremento de células inmaduras de las líneas mie-loide y monocítica.La mayoría de los monocitos mostraron una reacción negativa a la peroxidasa. Lascélulas mieloides mostraron reacción positiva con las tinciones de esterasa, α-naftolbutirato o naftol-AS-D-cloroacetato.

(x 1000)

Datos examen inicial (médula ósea)

(x 1000)

Tinción May-Giemsa(sangre periférica)

(x 1000)

Tinción peroxidasa(sangre periférica)

Tinción esterasa (médula ósea)

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

42



WBC 66.90 * [109/L]RBC 3.09 [1012/L]HGB 113 [g/L]HCT 33.6 [%]MCV 108.7 [fL]MCH 36.6 [pg]MCHC 336 [g/L]PLT 60 * [109/L]RDW-SD 50.7 [fL]RDW-CV 12.9 [%]PDW 11.0 * [fL]MPV 11.3 * [fL]P-LCR 31.4 * [%]PCT 0.07 * [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH ---- [109/L] ---- [%]MONO ---- [109/L] ---- [%]EO 0.11 * [109/L] 0.2 * [%]BASO 0.20 * [109/L] 0.3 * [%]NRBC 0.00 * [109/L] 0.0 * [/100WBC]RET 1.15 [%] 35.5 [109/L]IRF 14.6 [%]LFR 85.4 [%]MFR 12.3 [%]HFR 2.3 [%]

ObservacionesEste caso fue diagnosticado como LMA-M5b. Aparecen muchos puntos rojos en el dispersograma IMI,lo que sugiere la presencia de células mieloides inmaduras. La fusión de linfocitos y monocitos en elárea del dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la localización de los blastos encontrados en elfrotis de sangre periférica (59%).


Leucemia mieloide aguda (LMA)-M5b

Diferencial manual

Banda 1.5 [%]Segmentados 1.5 [%]Linfocitos 12.5 [%]Monocitos 24.5 [%]Eosinófilos 0.5 [%]Basófilos 0.0 [%]Promielocitos 0.5 [%]Blastos 59.0 [%]Hematíes nucleados 0.5/100 leucocitos

WBC IP Messages




PLT Clumps?

43





CD2 28.9 CD10 10.6 CD13 63.5 CD11b 82.4CD3 0.6 CD19 1.2 CD14 31.3CD4 84.5 CD20 0.2 CD15 82.9CD5 0.6 HLA-DR 87.9 CD33 99.6CD7 1.5 CD34 64.7CD8 0.4 Células NK Otros

CD56 1.5 CD25 1.5CD95 58.8

Observaciones

El marcador CD14 fue po-sitivo, lo que indica la pre-sencia de células monocí-ticas. El alto índice de posi-tividad para CD4 sugierehiperplasia de blastos, ensu mayoría monocitos.

ObservacionesSe observó en el frotis un gran número de blastos hendidos con una relaciónnúcleo/citoplasma (N/C) elevada y con citoplasma basófilo. Los monocitos, inclu-yendo los promonocitos, están elevados. La tinción de peroxidasa varió de débil-mente positiva a negativa, mientras que se hallaron células positivas para α-naftolbutirato esterasa inhibidas por el NaF (ver página siguiente).


(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción peroxidasa

44


(x 1000)

Tinción esterasa

(x 1000)

Prueba de inhibición de Naf

(x 1000)

Tinción PAS

45

Caso de cuerpos de Howell-Jolly 46

Caso de linfocitos segmentados 48

Caso de células linfoides anormales 50

Caso de granulocitos inmaduros 52

Caso de esquizocitos 54

Neutrófilos sin granulación 56

CASOS DE CELULAS DE APARIENCIA ESPECIFICA´´

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

46



WBC & 4.26 * [109/L]RBC 2.57 [1012/L]HGB 67 - [g/L]HCT 22.9 - [%]MCV 89.1 [fL]MCH 26.1 [pg]MCHC 293 - [g/L]PLT 435 * [109/L]RDW-SD 68.9 + [fL]RDW-CV 22.3 + [%]PDW 12.9 * [fL]MPV 11.5 * [fL]P-LCR 36.9 * [%]PCT 0.50 * [%]NEUT 2.25 * [109/L] 52.8 * [%]LYMPH & 0.92 * [109/L] 21.6 * [%]MONO 0.89 * [109/L] 20.9 * [%]EO 0.13 * [109/L] 3.1 * [%]BASO 0.07 * [109/L] 1.6 * [%]NRBC 1.15 * [109/L] 27.0 * [/100WBC]RET 1.52 [%] 39.1 [109/L]IRF 22.1 [%]LFR 77.9 [%]MFR 16.6 [%]HFR 5.5 [%]

ObservacionesEn el dispersograma NRBC aparecen muchos puntos azules entre el área normal de células fantasmasy el área de normoblastos (indicado por ), lo que sugiere la presencia de cuerpos de Howell-Jolly.Estos puntos fueron incluidos en la fracción de células fantasmas sin tener influencia en los datos dehematíes nucleados. Los puntos rosados (indicado por ) representan hematíes nucleados, cuyorecuento concuerda muy cercanamente con el diferencial manual. En el dispersograma WBC/BASO,esos normoblastos aparecen en el eje de alta dispersión (indicado por ). Esto demuestra que el XE-2100 provee información verdadera después de descontar los hematíes nucleados que aparecen en elárea de leucocitos (indicado por “WBC &”).

Casos de células de apariencia específica

Caso de cuerpos de Howell-Jolly

Diferencial manual

Banda 2.0 [%]Segmentados 27.5 [%]Linfocitos 42.0 [%]Monocitos 23.0 [%]Eosinófilos 4.0 [%]Basófilos 1.0 [%]Mielocitos 0.5 [%]Hematíes nucleados 26/100 leucocitos

WBC IP Messages

NRBC Present

RBC/RET IP Messages

AnisocytosisAnemia

Fragments?

PLT IP Messages

PLT Clumps?

47


ObservacionesLos cuerpos de Howell-Jolly son normalmente de 2 µm o menores y sepueden diferenciar fácilmente de los hematíes nucleados. Sin embargo, estecaso presenta gran cantidad de normoblastos con núcleos pequeños y eri-trocitos con cuerpos de Howell-Jolly de gran tamaño.

Tinción May-Giemsa(hematíes nucleados)



(x 1000)

Tinción May-Giemsa(cuerpo Howell-Jolly)

(x 1000) (x 1000)



(x 1000) (x 1000) (x 1000)

48



WBC 1.87 - [109/L]RBC 2.16 - [1012/L]HGB 91 * [g/L]HCT 24.6 - [%]MCV 113.9 + [fL]MCH 42.1 * [pg]MCHC 370 * [g/L]PLT & 20 - [109/L]RDW-SD 54.3 + [fL]RDW-CV 13.2 [%]PDW 13.8 [fL]MPV 12.6 [fL]P-LCR 43.2 + [%]PCT 0.02 - [%]NEUT 0.07 * [109/L] 3.8 * [%]LYMPH 1.62 * [109/L] 86.6 * [%]MONO 0.17 * [109/L] 9.1 * [%]EO 0.00 [109/L] 0.0 [%]BASO 0.01 [109/L] 0.5 [%]NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC]RET 0.29 [%] 6.3 [109/L]IRF 0.0 [%]LFR 100.0 [%]MFR 0.0 [%]HFR 0.0 [%]

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

ObservacionesEste es un caso de LMA-M2 bajo tratamiento. Únicamente se hallaron linfocitos en el frotis de sangreperiférica y la mayoría estaban segmentados. Se cree que estas células se detectaron en el área de lin-focitos/monocitos del dispersograma DIFF (indicado por ). Debido al muy bajo recuento de leuco-citos, aparece la alarma de “Abn Lympho/L_Blasts?”, lo que sugiere un problema con los linfocitos.


Caso de linfocitos segmentados

Diferencial manual


WBC IP Messages

NeutropeniaLeukocytopenia


RBC/RET IP Messages

MacrocytosisAnemia

Turbidity/HGB Interf?

PLT IP Messages

Thrombocytopenia

49



Células T Células B Granulocitos/ Otros

Monocitos

CD2 100.0 CD10 0.7 CD13 3.4 CD25 66.8CD3 99.7 CD19 0.7 CD33 4.1CD4 95.4 CD23 1.5 CD34 1.9CD5 99.6 HLA-DR 86.1CD7 80.9CD8 6.2

ObservacionesLos marcadores CD2, CD3 yCD4 fueron positivos, lo que in-dica un incremento en la rela-ción cooperador/supresor delas células T. Como el CD25 y elHLA-DR también fueron positi-vos, se consideró que estas cé-lulas estaban activadas.


ObservacionesEste caso es una M2 en tra-tamiento. Se encontró unbajo recuento de leucoci-tos. La mayoría de las cé-lulas eran linfocitos. Cercadel 50% de ellos fueron pe-queños linfocitos anorma-les segmentados.

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

50



ObservacionesEl límite confuso entre las áreas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por )sugiere la presencia de células linfoides anormales. En el frotis se observaron células linfoides seg-mentadas anormales.


Caso de células linfoides anormales

WBC 10.93 [109/L]RBC 3.26 [1012/L]HGB 103 [g/L]HCT 31.6 [%]MCV 96.9 [fL]MCH 31.6 [pg]MCHC 326 [g/L]PLT 161 [109/L]RDW-SD 47.3 [fL]RDW-CV 13.7 [%]PDW 10.4 [fL]MPV 9.8 [fL]P-LCR 22.9 [%]PCT 0.16 - [%]NEUT 5.03* [109/L] 45.9 * [%]LYMPH 5.31* [109/L] 48.6 * [%]MONO 0.50* [109/L] 4.6 * [%]EO 0.05 [109/L] 0.5 [%]BASO 0.04 [109/L] 0.4 [%]NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC]RET 1.60 [%] 52.2 [109/L]IRF 13.0 [%]LFR 87.0 [%]MFR 11.4 [%]HFR 1.6 [%]

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual


WBC IP Messages

Lymphocytosis



51


ObservacionesSe encontraron pequeñas células linfoides seg-mentadas anormales con alta relación núcleo/citoplasma (N/C) en sangre periférica (7%).

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

WBC 8.69 [109/L]RBC 4.05 [1012/L]HGB 128 [g/L]HCT 38.4 [%]MCV 94.8 [fL]MCH 31.6 [pg]MCHC 333 [g/L]PLT 105 [109/L]RDW-SD 47.9 [fL]RDW-CV 14.0 [%]PDW 11.2 [fL]MPV 10.1 [fL]P-LCR 26.5 [%]PCT 0.11 - [%]NEUT &5.25 *[109/L] 60.4 * [%]LYMPH 0.91 - [109/L] 10.5 - [%]MONO 0.63 [109/L] 7.2 [%]EO 0.13 *[109/L] 1.5 * [%]BASO 0.11 *[109/L] 1.3 * [%]NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC]RET 2.14 [%] 86.7 [109/L]IRF 24.0 [%]LFR 76.0 [%]MFR 20.5 [%]HFR 3.5 [%]

52



ObservacionesEn el dispersograma DIFF, un grupo de puntos se extiende desde el área de neutrófilos hacia el área defluorescencia alta (indicado por ), lo que sugiere la presencia de granulocitos inmaduros. El XE-2100ofrece un parámetro de investigación, el IG o granulocitos inmaduros, que reportó un valor de 19.1%,el cual corresponde cercanamente al 17% de mielocitos obtenidos por el diferencial manual. Lapresencia de granulocitos inmaduros también fue sugerida por la gran cantidad de puntos rojos en eldispersograma IMI (indicado por ). Además, la determinación del porcentaje de células mieloidesinmaduras desde el menú de datos de servicio fue del 28.0%, lo que corresponde a la suma de losmielocitos (17%) + metamielocitos (8.5%) = 25.5%, obtenido en el frotis.


Caso de granulocitos inmaduros


DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 17.0 [%]Segmentados 38.5 [%]Linfocitos 6.0 [%]Monocitos 10.0 [%]Eosinófilos 2.0 [%]Basófilos 0.5 [%]Mielocitos 17.0 [%]Metamielocitos 8.5 [%]Linfocitos atípicos 0.5 [%]

WBC IP Messages

Immature Gran?Left Shift?


* Parámetros de investigaciónIG 1.66 [109/L] 19.1 [%]

53


ObservacionesSe aprecia un gran nú-mero de células mieloi-des en sangre periférica(incluyendo mielocitosinmaduros y metamie-locitos).

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

54



ObservacionesEl frotis de sangre periférica muestra muchos esquizocitos. Sin embargo, aun cuando en el disper-sograma RET los esquizocitos se extienden desde el área de hematíes hacia las plaquetas (indicadopor ), en el dispersograma PLT-O se observa una clara distinción entre las dos poblaciones (indicadopor ). Ello indica que no hubo influencia de los esquizocitos en el recuento óptico de plaquetas. Laalarma “PLT Abn Distribution” se generó debido a que los esquizocitos están presentes en el umbralde 30 fL en el histograma PLT (indicado por ), por lo que los datos del dispersograma PLT-O fueronusados para el recuento. Este resultado concuerda con los resultados obtenidos en el diferencialmanual (344 vs. 342 x 109/L).


Caso de esquizocitos

Diferencial manual

(Método Fonio)

PLT 344 [109/L]

WBC 5.82 [109/L]RBC 4.44 [1012/L]HGB 86 [g/L]HCT 31.3 [%]MCV 70.5 - [fL]MCH 19.4 - [pg]MCHC 275 - [g/L]PLT & 342 [109/L]RDW-SD 49.7 [fL]RDW-CV 19.3 + [%]PDW 11.9 * [fL]MPV 9.7 * [fL]P-LCR 23.5 * [%]PCT 0.37 * [%]NEUT 3.88 [109/L] 66.7 [%]LYMPH 1.51 [109/L] 25.9 [%]MONO 0.33 [109/L] 5.7 [%]EO 0.08 [109/L] 1.4 [%]BASO 0.02 [109/L] 0.3 [%]NRBC 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC]RET 0.93 [%] 41.3 [109/L]IRF 14.9 [%]LFR 85.1 [%]MFR 13.5 [%]HFR 1.4 [%]

(PLT-I : 379)

RET PLT-O

RBC PLT

FSC

FSC

SFL SFL

WBC IP Messages RBC/RET IP Messages

HypochromiaAnemia

Iron Deficiency?Fragments?

PLT IP Messages

PLT Abn Distribution

55


ObservacionesSe observó un gran númerode esquizocitos, tal como loindican las flechas.

Tinción May-Giemsa

(x 400)

56



ObservacionesEste paciente tiene SMD (AREB). En el dispersograma DIFF aparece sólo un pequeño número de pun-tos en el área normal de neutrófilos (indicado por ). Sin embargo, aparece un grupo grande entreel área de linfocitos y células fantasmas (indicado por ). Se considera que este grupo de puntos co-rresponde a los neutrófilos con ausencia o reducción en la granulación. El eje de las X del disper-sograma DIFF corresponde a la intensidad de dispersión que indica el contenido celular.


Neutrófilos sin granulación

WBC & 8.17 [109/L]RBC 2.85 [1012/L]HGB 102 [g/L]HCT 29.7 [%]MCV 104.2 [fL]MCH 35.8 [pg]MCHC 343 [g/L]PLT 200 [109/L]RDW-SD 49.1 [fL]RDW-CV 12.9 [%]PDW 10.2 [fL]MPV 10.3 [fL]P-LCR 24.8 [%]PCT 0.21 [%]NEUT ---- [109/L] ---- [%]LYMPH ---- [109/L] ---- [%]MONO 0.09 [109/L] 1.1 [%]EO 0.00 [109/L] 0.0 [%]BASO 0.01 [109/L] 0.1 [%]NRBC 0.04 [109/L] 0.5 [/100WBC]RET 1.39 [%] 39.6 [109/L]IRF 13.4 [%]LFR 86.6 [%]MFR 12.1 [%]HFR 1.3 [%]

DIFF WBC/BASO

IMI NRBC

SFL

FSC

RF

FSC

DC SFL

SSC SSC

Diferencial manual

Banda 1.0 [%]Segmentados 57.5 [%]Linfocitos 19.0 [%]Monocitos 1.5 [%]Eosinófilos 1.5 [%]Basófilos 0.0 [%]Promielocitos 0.5 [%]Mielocitos 0.5 [%]Células sin clasificación 18.5 [%](sospecha de basófilos)

WBC IP Messages

WBC Abn Scattergram


57


ObservacionesEn el frotis se encontro un gran número de neutrófilos con reducción o ausencia de gránulossecundarios. La tinción de peroxidasa estuvo ausente en más del 90% de los neutrófilosmaduros. Los gránulos de los eosinófilos fueron muy finos y en los basófilos no se pudierondistinguir. Además, en el 18.5% de las células fue difícil la diferenciación porque tienennúcleos semejantes a los basófilos, pero con ausencia de gránulos.

Tinción May-Giemsa

(x 1000)

Tinción May-Giemsa(¿Basófilo?)

(x 1000)

Tinción May-Giemsa(Eosinófilo)

(x 1000)

Tinción peroxidasa

(x 1000)

Tinción peroxidasa

(x 1000)

¿Basófilo?

Tinción peroxidasa(Eosinófilo)

(x 1000)

Tinción peroxidasa

(x 1000)

58

ObservacionesLos neutrófilos se clasificaron como clase III ó IV en la coloración de fosfatasaalcalina. Algunas células mostraron reacción PAS difusa. En tinción de esterasa,naftol-AS-D-cloroacetato fue negativa o débilmente positiva en la mayoría de losneutrófilos; sólo muy pocos mostraron reacción fuertemente positiva.

Tinción fosfatasa alcalina

(x 1000)

Tinción esterasa

(x 1000)

Tinción esterasa

(x 1000)

Tinción PAS

(x 1000)

Tinción PAS

(x 1000)


La intención de los mensajes generados por este instrumento se limitaa la identificación de muestras que contengan células anormales,sujetas a revisión por personal de laboratorio calificado.

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Publicado por: Sysmex Latinoamérica. Oficina representativa en Miami.Página web: http://www.sysmex.com © Derechos de autor Sysmex Corporation.Esta es una traducción del texto original en inglés.Este libro no puede ser reproducido ni parcial ni totalmente sin permiso previo de la compañía.

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