Campilobacter Jejune GIOVANNI

7/18/2019 Campilobacter Jejune GIOVANNI

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Campilobacter jejune

Docente: blog. wilbert Zúñiga Quispe

Integrantes: Alexandra carbajal Amonez io!anni Quispe Quispe



INTRODUCCION "a #amilia Camp$lobacteraceae comprende %& especies $ subespecies en el g'nero camp$lobacter. Camp$lobacter

(camp$lo)cur!ada* bacter )!ara+ son organismos cur!ados oespiralados, son bacilos ram negati!os no #ormadores de esporas,m-!iles por estar pro!istos de agelo en un extremo generalmenteson microaero/las.

0l camp$lobacter puede !i!ir solo pocas 1oras a 234C pero su

super!i!encia se incrementa a bajas temperaturas en !arios d5as a64C incluso !arias semanas en congelaci-n, la ma$or5a de estasespecies colonizan en el intestino $ por ese moti!o la transmisi-nson m7s #recuentes es por !5a oral por medio de, alimentos o aguacontaminado.

Campylobacter jejuni son las especies de Camp$lobacter aisladascon ma$or #recuencia en en#ermos 1umanos in#ectados $ se puedentransmitir directamente de los animales a los 1umanos por contactoo por consumo $ manipulaci-n de alimentos de origen animal.



Campylobacter 0l t'rmino Camp$lobacteriosis se re/ere a un grupo de in#eccionescausadas por bacterias del g'nero Camp$lobacter 9ue a#ectan tanto

a seres 1umanos como a animales dom'sticos uc1as especies delg'nero son capaces de causar en#ermedad transmitida poralimentos (0;A+ en seres 1umanos, destac7ndose Camp$lobacter

jejuni subespecie jejuni (C.jejuni+ $ Camp$lobacter coli (C.coli+. Características microbiológicas.

Taxonomía "as primeras especies de este g'nero #ueron identi/cadas 1ace m7sde <= años en animales, pero no #ue sino 1asta %<3= cuando sereconoci- como pat-geno 1umano. Inicialmente incluidos dentro delg'nero >ibrio,en %<?2 se encontr- 9ue presentaban notorias

di#erencias bio9u5micas $ serol-gicas con el agente del c-lera $ otros!ibrios 1alo#5licos, constitu$'ndose entonces el g'neroCamp$lobacter. Aun9ue la clasi/caci-n de estas bacterias est7 encontinua re!isi-n $ modi/caci-n, actualmente se consideran dosg'neros dentro del rupo Camp$lobacter



Morfología y características siológicas@e trata de bacterias gram negati!as, pe9ueñas (=.2=.? Bm de

di7metro, =. Bm de anc1o+, noesporuladas, con una #orma distinti!a cur!a o en espiral, con

aspecto de !ibrio, cuando se obser!an a partir de culti!os j-!enes* con m7s de 6& 1oras de incubaci-n o tras prolongadaexposici-n al aire adoptan una #orma cocoide.0l Campilobacter jejuni tiene una temperatura -ptima decrecimiento de 6EC, por lo 9ue es pr7ctica 1abitual en ellaboratorio la incubaci-n a esta temperatura con el /n de #acilitar

el aislamiento selecti!o del principal pat-geno 1umano delg'nero. @u !elocidad de desarrollo es m7s lenta 9ue la de lasbacterias de la ora normal ent'rica, por lo 9ue para suaislamiento a partir de materias #ecales se re9uieren medios deculti!o selecti!os 9ue in1iban esta ora.



!"M!C#N!MI#NTO $ %ID! UTI" Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro a una temperaturade F & 4C, en su en!ase original 1asta momentos antes de su utilizaci-n.0!itar la congelaci-n $ el sobrecalentamiento. "as placas puedeninocularse 1asta la #ec1a de caducidad (!'ase la eti9ueta del pa9uete+ eincubarse durante los per5odos de incubaci-n recomendados. "as placas depilas abiertas de %= unidades pueden utilizarse durante una semanacuando se almacenan en un 7rea limpia a una temperatura de F & 4C.

M!T#RI!"#& $ M'TODO&

(.) Materiales• Ge#rigeradora• Incubadora• Autocla!e• Halanza•

Cajas de etri• Jrascos de !idrio• ec1ero de Hunsen• Asas para siembras bacteriol-gicas de punta circular• arcador para !idrio• Kisopos

• edios $ soluciones:• lacas con agar @Lirrow



(.* Meto+ologíaI+enticación +el agente"as muestras 9ue se recolectan son las muestras

#ecales o intestinales de a!es de corral $ demam5#eros productores de carne (ganado !acuno,o!ejas $ cerdos+."os campilobacter son organismos bastante di#5cilesde culti!ar. @u recuperaci-n del material #ecal o de losintestinos se puede lle!ar a cabo:Apro!ec1ando la r7pida mo!ilidad $ el pe9ueñotamaño de campilobacter en relaci-n con otra oraintestinal, permitiendo 9ue estos organismos pasen atra!'s de los /ltros de membrana sobre medio decrecimiento en agar, o usando agar 9ue contengaantibi-ticos selecti!os . $ la recuperaci-n de C. jejuni$ C. coli term-/lo utilizando los medios anteriores sepuede mejorar por crecimiento selecti!o a latemperatura -ptima de crecimiento de 64C, lo 9uepuede in1ibir el crecimiento de bacteriascontaminantes.



Recogi+a +e m,estras-ana+o ac,no/ oe0as y cer+os"os campilobacters son colonizadores #recuentes del intestino deganado !acuno, o!ejas $ cerdos (, 23, 2&+. 0l ganado !acuno $ las

o!ejas son colonizados #undamentalmente por C. jejuni, C. coli Transporte y tratamiento +e m,estras

edios de transporte"a #unci-n del medio no es el crecimiento de Camp$lobacter sinoproteger a las muestras de la se9uedad $ de los e#ectos t-xicos delox5geno.Cuando solamente se puedan recoger cantidades pe9ueñas demuestras #ecalesMdel ciego $ no 1a$a tubos de transporte disponibles,se recomienda el en!5o del esp'cimen en medios de transporte. @e 1an

descrito !arios medios de transporte: Car$Hlair, Car$Hlair modi/cado,medio @tuart modi/cado, medio Camp$tioglicolato, agua con peptonaalcalina $ medio de prueba de mo!ilidad semis-lida. @e 1an descritobuenos resultados de recuperaci-n utilizando Car$Hlair (%&, &+.



;ratamiento de las muestraslas muestras deber5an re#rigerarse únicamente cuando no se puedanprocesar el mismo d5a* de otra #orma, se deben mantener a

temperatura ambiente. Cuando las muestras se en!5an o semantienen en el laboratorio a 64C, debe dejarse 9ue se e9uilibren atemperatura ambiente antes de su procesado, para e!itar c1o9uest'rmicos.ara muestras #ecales o intestinales, no se necesita ningúntratamiento, $ se pueden poner directamente sobre medios selecti!os.

Cuando se utiliza el m'todo de /ltraci-n, se lle!a a cabo unasuspensi-n de las 1eces (generalmente % en %=+ en soluci-n salinatamponada con #os#ato (H@+ $ diluida de #orma 9ue se puedan ponergotas de la suspensi-n sobre el /ltro.

!islamiento +e Campylobacter

0l aislamiento de Campylobacter de muestras #ecales o intestinales selle!a cabo, generalmente, mediante colocaci-n directa sobre el medioselecti!o o utilizando el m'todo de /ltraci-n sobre agar no selecti!o.@e recomienda el enri9uecimiento para aumentar la sensibilidad delculti!o de microorganismos potencialmente estresado por lascondiciones ambientales o en caso de bajos ni!eles de organismos en

las 1eces ,por ejemplo, ganado !acuno, o!ejas $ cerdos.



i1Me+ios selectios para aislamiento2"os medios selecti!os se pueden di!idir en dos grupos #undamentales:medios 9ue contienen sangre $ medios 9ue contienen carb-n. "oscomponentes de la sangre $ del carb-n sir!en para eliminar losderi!ados t-xicos del ox5geno. "a ma$or parte de los medios est7n

disponibles comercialmente. "a selecti!idad de los medios !ienedeterminada por los antibi-ticos utilizados. 0jemplos de caldos de enri9uecimiento selecti!os:Caldo HoltonCaldo restonCaldo 0xeterCaldo arL $ @andersCCDH (caldo con deoxicolato, ce#operazona $ carb-n+

0jemplos de medios s-lidos selecti!os con sangre:Agar restonAgar @LirrowAgar HutzlerCamp$ce#ex 0jemplos de medios s-lidos con base de carb-nmCCDA (agar modi/cado con deoxicolate, ce#operazona $ carb-n+,!ersi-n ligeramente modi/cada de la CCDA descrita originalmente+.

Agar Narmali o C@ (medio de carb-n selecti!o+.Agar CA; (ce#operazona, an#otericina $ teicoplanina+, #acilitador del



ii+ Inoculación de mediosara muestras 9ue no necesiten enri9uecimiento, se extiendedirectamente una pe9ueña cantidad (alrededor de =.% g utilizando unasa+ sobre un medio selecti!o s-lido para #acilitar el aislamiento decolonias aisladas.

ara muestras 9ue necesiten enri9uecimiento (por ejemplo muestras depiel $ carne+, se dilu$en g del material a %M%= en medio deenri9uecimiento. "as muestras de carne o las canales completas de pollose pueden la!ar con soluci-n salina o H@, despu's de lo cual se añadeun !olumen de este l59uido de la!ado a nue!e !olúmenes de medio deenri9uecimiento. @e pueden añadir !olúmenes m7s grandes de l59uido dela!ado a un !olumen igual de caldo de enri9uecimiento de dobleconcentraci-n. Cuando se usan muestras de carne m7s pe9ueñas para elan7lisis, se pueden la!ar con l59uido de enri9uecimiento, 9ue se incubaposteriormente.

iii.+ Incubación Atmósfera@e necesitan atm-s#eras microaer-bicas de %=O de ox5geno, %=O dedi-xido de carbono ($ pre#eriblemente <O de 1idr-geno+ para uncrecimiento -ptimo . @e pueden producir condiciones atmos#'ricasmicroaer-bicas adecuadas mediante di#erentes m'todos.



P Temperatura de incubación"os medios se pueden incubar a 234C o 64C, pero es una pr7cticacomún incubar a 64C para minimizar el crecimiento decontaminantes $ para seleccionar el crecimiento -ptimo de

C.jejuni/C.coli. @e añaden los agentes #ungost7ticos: ciclo1eximida oan#otericina para impedir el crecimiento de le!aduras $ 1ongos a234C.

Tiempo de incubación0l caldo de enri9uecimiento se incuba durante 66& 1oras $ sesiembra por extensi-n sobre un medio selecti!o s-lido.eneralmente Campylobacter jejuni $ C. coli mani/estan crecimientosobre medios s-lidos en 6F6& 1oras a 64C. @e recomiendan 6& 1orasde incubaci-n para el diagn-stico rutinario.

i!+ Identicación sobre medio sólido0n agar @Lirrow u otros medios s-lidos 9ue contengan sangre, lascolonias caracter5sticas de Campylobacter son ligeramente rosadas,redondas, con!exas, sua!es $ brillantes, con un borde regular.



+1 Conrmación@e necesita un culti!o puro para pruebas con/rmati!as, pero se puedeobtener una con/rmaci-n preliminar mediante examen microsc-picodirecto del material con colonias sospec1osas.

"as pruebas con/rmati!as de la presencia de campilobacters term-/los $su interpretaci-n se proporcionan en el Cuadro %.



ii+ Detección de oxidasa: btener material de una colonia sospec1osa$ colocarlo en papel de /ltro mojado con reacti!o de oxidasa. "aaparici-n en %= segundos de color !ioleta o azul intenso signi/ca 9uela reacci-n es positi!a

iii+ Fermentación de a!cares y producción de sulf"#drico: 0l medio deagar con 1ierro $ triple azúcar (;@I+ se inocula por extensi-nlongitudinal sobre la super/cie del agar inclinado $ por picadura en labase (el extremo del medio ;@I en el tubo+. Incubarmicroaer-bicamente a 64C durante 66& 1oras.



e1 I+enticación +e Campylobacter a niel +e especie0ntre las especies de Campylobacter spp. 9ue crecen a 64C, las9ue se encuentran m7s #recuentemente en muestras de origenanimal son C. jejuni $ C. coli. @in embargo, se 1an descrito#recuencias bajas de otras especies. eneralmente, C. jejuni sepuede di#erenciar de otras especies de Campylobacter sobre la basede la 1idr-lisis de 1ipurato, $a 9ue es la única especie 9ue dapositi!a a 1ipurato. @e 1a descrito la presencia de cepas de C. jejuninegati!as a 1ipurato . 0l cuadro 2 proporciona algunas

caracter5sticas #enot5picas cl7sicas b7sicas de las especies m7simportantes de Campylobacter term-/los.



R#&U"T!DO& "os resultados obtenidos luego de realizar las siembras de los

1isopados rectales en agar selecti!o para Camp$lobacter jejuni $1acer las lecturas 6& 1oras despu's, mostraron crecimiento

caracter5stico en algunas de las muestras. 0n el primer muestreorealizado se obser!aron placas con crecimiento caracter5stico,

0n las muestras con crecimiento caracter5stico de Camp$lobacter jejuni, se obser!aron colonias con una apariencia plana $ colorgris7ceo.

De estas colonias se realizaron pruebas complementarias para

con/rmar 9ue el crecimiento t5pico obser!ado era debido aCamp$lobacter jejuni (AnexosCuadro Ro. +.



g r a

c i a s

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