BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Laboratorio de Microbiología: área

convenientemente habilitada donde se

pueden manejar y examinar

microorganismos.

Es esencial familiarizarse con la organización

y las normas de seguridad del laboratorio.

Las Normas de Bioseguridad garantizan la

seguridad de los usuarios y el uso eficaz del

tiempo y de los recursos.

Técnica aséptica

ambiente limpio y ordenado

condiciones de esterilidad

cámaras de seguridad biológica

(cámaras de flujo laminar),

proximidad de la llama de un

mechero de alcohol o de gas

Requisitos básicos que se debe

cumplir:

•Restringir la presencia de los

microorganismos en estudio a sus

recipientes y medios de cultivo para evitar el riesgo de contaminación.

•Evitar que los microorganismos

ambientales presentes en la piel, pelo, aire,

ropa, etc., contaminen las muestras.

Bioseguridad

Conjunto de normas y actitudes que tienen como objetivo prevenir los accidentes con material biológico en el área de trabajo. Las Normas de Bioseguridad pretenden reducir a un nivel aceptable el riesgo inherente a la manipulación de material biológico peligroso. La peligrosidad de un agente está directamente relacionada con el tipo de microorganismo y la manipulación a la que es sometido. Por ello es básico: •Conocer los agentes, sustancias y productos peligrosos que existen en el laboratorio. •Conocer la metodología de trabajo del laboratorio. •Conocer el equipamiento del laboratorio. •Conocer las medidas a tomar en caso de emergencia. •Conocer las leyes relacionadas con la seguridad biológica. •Respetar y hacer cumplir todo lo anterior.

Para que se produzca un accidente por agente biológico deben concurrir cuatro elementos: 1.Un huésped susceptible 2.Un agente infeccioso 3.Una concentración suficiente de éste 4.Una ruta de transmisión apropiada. El que mejor se puede controlar en el laboratorio es la ruta de transmisión; las más comunes en el laboratorio son la aérea y la inoculación directa, aunque la oral, la percutánea y el contacto directo con la piel o las mucosas también son posibles.

Clasificación de los agentes biológicos por grupo de riesgo

Grupo de

riesgo Riesgo infeccioso

Riesgo de propagación a la colectividad

Profilaxis o tratamiento eficaz

Ejemplos

1 Microorganismos que tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o a animales.

No Innecesario B. subtilis, Naegleria,

E. coli, Saccharomyces sp.

2

Agentes patógenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales pero que tienen pocas probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de laboratorio, la población, animales o el medio ambiente. La exposición en el laboratorio puede provocar infección, pero existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces y el riesgo de propagación es limitado.

Poco probable Generalmente

posible

Actinomyces sp., Enterobacterias,

Candida sp., Cryptococcus neoformans.

3

Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades humanas o animales graves, pero que de ordinario no se propagan de un individuo a otro. Existen medidas preventivas y eficaces.

Probable Generalmente

posible

Mycobacterium tuberculosis, Histoplasma

capsulatum, Neisseria meningitidis,

Chlamydia trachomatis.

4

Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o los animales y que se transmiten con facilidad de un individuo a otro, directa o indirectamente. Por lo regular no existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces.

Elevado No conocido en la

actualidad Algunos virus

Niveles de Bioseguridad Nivel de Bioseguridad 1 En este nivel se trabaja con agentes del grupo 1. El acceso al laboratorio no es restringido y el trabajo se realiza por lo regular en mesas estándar de laboratorio. Nivel de Bioseguridad 2 Es similar al nivel 1 y en él se manejan agentes de peligro moderado hacia el personal y el ambiente, pero difiere del nivel 1 en que el personal de laboratorio tiene entrenamiento específico en el manejo de agentes patógenos, y el acceso al laboratorio es restringido cuando se está realizando algún trabajo. Nivel de Bioseguridad 3 Este nivel es el que se encuentra en los laboratorios clínicos, de diagnóstico, algunos laboratorios universitarios y también de investigación, en el cual se realiza trabajo con agentes exóticos o que pueden causar un daño serio y potencialmente mortal como resultado de la inhalación o exposición a los mismos (por ejemplo, el Ántrax). Nivel de Bioseguridad 4 Se utiliza para trabajar con agentes biológicos que representan un alto riesgo individual de contagio y que además son un riesgo para la vida.

Contención

Técnicas de laboratorio: El elemento más importante para contener los riesgos biológicos es el seguimiento estricto de las prácticas y técnicas microbiológicas. Equipos de seguridad (barreras primarias): Son la primera línea de defensa cuando se manipula material biológico que puede contener agentes patógenos. Ejemplo: cabinas de seguridad biológica y mecheros; elementos de protección personal (guantes, mascarillas, batas, calzado, etc.).

MECHERO DE GAS: • La zona de esterilidad es de 30 cm a la redonda del mechero. • Los mecheros de Bunsen tienen un regulador de entrada de la

cantidad de aire con el que hay que obtener una mezcla aire-gas, de forma que la llama tenga la temperatura suficiente.

• Las llamas <<frías>> son anaranjadas y se ven bien pero no esterilizan; las llamas muy <<calientes>> son de un azul prácticamente invisible, lo cual supone un riesgo si no se trabaja con cuidado, pero esterilizan.

CABINAS DE SEGURIDAD: • Barrera primaria cuando se trabaja con agentes peligrosos o infecciosos,

sin embargo ellas no proveen un completo aislamiento, por ejemplo en el control de aerosoles.

• Campana de gases (o vitrina extractora de gases): recinto ventilado que captura los humos y vapores procedentes de la manipulación de productos químicos. No ofrece protección frente al riesgo biológico.

• Cabinas de flujo laminar: emplean un ventilador para forzar el paso del aire a través de un filtro HEPA barriendo la superficie de trabajo. El flujo de aire puede ser vertical u horizontal. Estas cabinas ofrecen protección al material que se maneja en su interior, pero no al operador.

• Cabinas de Seguridad Biológica (CSB): recintos ventilados diseñados para limitar al máximo el riesgo del personal de laboratorio expuesto a agentes infecciosos. Proporcionan una zona de trabajo que minimiza la probabilidad que una partícula transportada por el aire tienda a escapar hacia el exterior de la cabina y contaminar al operario y a la zona que le rodea. Algunas también ofrecen protección al material que se manipula.

AEROSOLES BIOLÓGICOS:

•Son la causa más frecuente e importante de accidente biológico y su origen es muy variado. Muchas veces pasan inadvertidos, por lo que siempre hay que dar por hecho que existen cuando se producen derrames o salpicaduras. • La mala práctica es la fuente más común de los aerosoles: enfriar asas calientes hundiéndolas en el agar, utilizar centrífugas no herméticas, centrifugar con tubos abiertos o mal cerrados, agitar cultivos con el asa dentro del tubo, pipetear con demasiada fuerza, oler las placas, etc.

NORMAS DE TRABAJO EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

•El acceso al laboratorio estará limitado a

estudiantes con la presentación del carnet

estudiantil.

•Los estudiantes y personal que trabaje en el

laboratorio debe cumplir las normas de seguridad.

•Las mochilas, gorras, chompas, libros y demás

objetos deben ser colocados en los casilleros para

evitar un posible accidente y NUNCA sobre los

bancos o mesones.

•L@s estudiantes con cabello largo deber recogerlo

para trabajar dentro del laboratorio; así como usar

todos los implementos necesarios para la

protección según el nivel de riesgo biológico

(mandil, cofia, mascarilla).

•No se debe aplicar rímel u otro tipo de maquillaje

porque deteriora los oculares del microscopio.

•Se debe colocar un calzado cerrado para las

prácticas en el laboratorio, así como mantener las

uñas cortas, limpias y sin esmalte.

•Está prohibido comer, beber, fumar y maquillarse,

dentro de las instalaciones del laboratorio.

•Es obligatorio el uso de mandil cerrado, y limpio

con el nombre, sello de la Universidad Tecnológica

Equinoccial UTE y el logotipo de Ingeniería de

Alimentos o Ingeniería Ambiental; además de usar

guantes quirúrgicos y mascarilla para la realización

de prácticas, revisión de resultados y lavado de

material sucio. Estos implementos personales

serán destinados exclusivamente para el trabajo

en el Laboratorio de Microbiología. Podrán

retirarse el mandil al terminar la práctica, para el

respectivo aseo y protegiéndolo con una bolsa de

plástico, se recomienda lavar individualmente con

jabón estas prendas.

•Las puertas y ventanas deben permanecer

cerradas durante la práctica de laboratorio para

evitar la contaminación por corrientes de aire.

•Nunca comience el trabajo en el laboratorio sin el

permiso previo del instructor o supervisor.

•Al iniciar y finalizar la práctica el estudiante lavará

sus manos escrupulosamente con agua y jabón.

•El lugar de trabajo debe estar siempre limpio y

ordenado; para iniciar las siembras

microbiológicas es conveniente desinfectar la

superficie de trabajo con alcohol antiséptico de

70° o 95°.

•Se deben evitar los desplazamientos innecesarios

por el Laboratorio, debido a que los

microorganismos deben manejarse cerca de la

llama del mechero.

•Cuando se manipulen microorganismos evite

hablar sin necesidad o llevarse las manos a la

nariz, boca, ojos etc.

•Utilice los basureros con la funda de color rojo para

depositar los residuos biológicos infecciosos que se

generen en la realización de la práctica.

• Incubar los cultivos el tiempo que se indique y

luego de leer los resultados, desecharlos.

•No almacenar material en el refrigerador, solo en el

caso de que se requiera un mayor espacio en las

incubadoras, y no por mucho tiempo.

•Está prohibido retirar del Laboratorio cultivos o

cepas a menos que así lo indique el profesor.

•Emplear los equipos según las instrucciones o

procedimientos operativos.

•Apagar los instrumentos eléctricos antes de

manipular las conexiones, y desconectarlos

después de su uso.

•Operar un instrumento solo cuando se sabe

hacerlo, o solicitar ayuda al profesor o ayudante.

•Por seguridad del personal y protección del

ambiente, nunca se usará la fregadera, papelera o

basura para deshacerse del material contaminado.

Los desechos contaminados deberán ser

esterilizados en el laboratorio antes de procesarlos

como residuos.

•Cuando se trabaje con luz ultravioleta debe

tenerse en cuenta que la exposición a este tipo de

radiación es peligrosa.

•Al finalizar la práctica entregar el material

empleado debidamente limpio, ordenado y

completo en las bandejas dadas para cada grupo.

En el caso de derrame de cultivos o ruptura de

recipientes con cultivos activos, tratar de conservar

la calma e inmediatamente informar al encargado

del laboratorio o al profesor, y /o realizar el

siguiente procedimiento:

•Colocar toallas de papel sobre el material

derramado para evitar su dispersión

•Agregar abundante solución desinfectante sobre

las toallas

•Dejar transcurrir al menos 15 minutos, retirar las

toallas y tirarlas en el tacho de color rojo

(materiales contaminados)