BIOLOGICAS CIENCIAS DE BIBLIOTECA

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i UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS “Efecto de la temperatura en el ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae).” TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO DE BIÓLOGO AUTOR: Br. Robert Anthony Marquina Bazan ASESORA: Dra. Aida Esther Carbajal De Wilson TRUJILLO – PERU 2016 Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis. BIBLIOTECA DE CIENCIAS BIOLOGICAS

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

“Efecto de la temperatura en el ciclo de desarrollo de

Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae).”

TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO

DE BIÓLOGO

AUTOR: Br. Robert Anthony Marquina Bazan

ASESORA: Dra. Aida Esther Carbajal De Wilson

TRUJILLO – PERU

2016

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DEDICATORIA

A mi padre Enrique, por su apoyo

incondicional, por su ejemplo de

constancia, perseverancia, y por

el valor mostrado para salir

adelante.

A mi hermana Katherin, por ser

una gran amiga para mí y una de

los seres más importantes en mi

vida.

A mi madre Delia, por haberme

apoyado en todo momento, por

sus consejos, sus valores, por la

motivación constante que me ha

permitido ser una persona de bien,

pero más que nada, por su amor.

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AGRADECIMIENTO

A Dios por la vida, por la salud, por ser el amigo por excelencia, por demostrarme

tantas veces su existencia y con ello darme fuerzas para salir delante de cada tropiezo.

A mi asesora, Ms. C. Aída Esther Carbajal de Wilson, por su paciencia, por la atención

prestada, por los conocimientos transmitidos y por su incondicional ayuda en la

realización de este trabajo de investigación.

A mi Jurado Dictaminador Ms. C. Roberto Rodríguez Rodríguez. Ms. C. José

Luis Polo Corro y Ms. C. Aída Esther Carbajal de Wilson, por sus aportes, comentarios

y sugerencias, que orientaron el perfeccionamiento de este informe de tesis.

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AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

Dr. Orlando Gonzáles Nieves

RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

Dr. Rubén Vera Véliz

VICE – RECTOR ACADÉMICO

Dr. Steban Ilich Zerba

SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE

TRUJILLO

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AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Dr. Freddy Rogger Mejía Coico

DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS:

Dr. Willian Zelada Estraver

PROFESOR SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS

BIOLÓGICAS

Dr. Freddy Peláez Peláez

DIRECTOR DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE

CIENCIAS BIOLÓGICAS

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PRESENTACIÓN

Señores miembros del jurado dictaminador.

En cumplimiento con las disposiciones emanadas del reglamento vigente para la

obtención de Grados y Títulos de la Escuela de Ciencias Biológicas de la Facultad de

Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, me es honroso someter a

vuestra consideración y criterio la presente tesis titulada: Efecto de la temperatura en

el ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L (Lepidoptera: Pyralidae), con el

propósito de obtener el Título Profesional de Biólogo.

Dejo a vuestro criterio la respectiva aprobación.

Trujillo, noviembre del 2016

________________________________

Robert Anthony Marquina Bazán

Br. en Ciencias Biológicas

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MIEMBROS DEL JURADO

Los que suscriben, miembros del Jurado Dictaminador, declaramos que el presente

informe de tesis reúne los requisitos fundamentales exigidos; por lo que ha sido

aprobada por UNANIMIDAD.

_____________________________

Ms. C. Roberto Rodríguez Rodríguez

Presidente del Jurado

_____________________________

Ms. C. José Luis Polo Corro

Secretario del Jurado

_____________________________

Ms. C. Aída Carbajal de Wilson

Vocal del Jurado

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DE LA ASESORA

La que suscribe, profesora asesora de la presente tesis.

CERTIFICA

Que la presente tesis ha sido desarrollada con conformidad con su respectivo proyecto

y con las orientaciones necesarias brindadas al tesista.

En lo referente al informe final, este ha sido revisado acogiendo las observaciones y

sugerencias alcanzadas, por lo que autorizo al Br. Robert Anthony Marquina Bazán

continuar con los trámites correspondientes.

________________________________________

Ms. C. Aída Carbajal de Wilson

Profesora Principal del Departamento de Ciencias Biológicas

Sección Zoología

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ÍNDICE

DEDICATORIA ii

AGRADECIMIENTO iii

AUTORIDADES iv

PRESENTACIÓN vi

MIEMBROS DEL JURADO vii

DE LA ASESORA viii

ÍNDICE ix

RESUMEN x

I. INTRODUCCIÓN 1

II. MATERIAL Y MÉTODOS 6

III. RESULTADOS 9

IV. DISCUSIÓN 23

V. CONCLUSIONES 28

VI. RECOMENDACIONES 29

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 30

ANEXOS 38

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RESUMEN

El objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto de la temperatura en el ciclo

de desarrollo de Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae), en condiciones de

laboratorio. El trabajo se realizó en el Laboratorio de Crianza de insectos de La

Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, de febrero a

agosto del 2016.Se utilizaron los adultos y huevos de G. mellonella, se acondicionaron

cámaras climatizadas para regular las temperaturas de 25° C, 29° C, 33° C y a

temperatura ambiente 21° C, con tres repeticiones por cada una de las temperaturas.

El registro de la temperatura se realizó por medio de un Termohigrómetro VWR, se

empleó el diseño experimental completamente al azar. Los resultados mostraron que la

duración del ciclo de desarrollo de G. mellonella fue de 87.8 días a temperatura

ambiente y de 45.85 días a 33° C, la duración del periodo de incubación, estado larval,

estado de pre-pupa y pupa a mayor temperatura fue de 6.91, 27.16, 1.21 y 10.57 días a

33° C y a menor temperatura fue de 12.85, 51.89, 2.53 y 20.53 días a temperatura

ambiente. La mortalidad de larvas de G. mellonela L fue mayor con 58.60 % a 33° C y

menor en el estado de pupa con 5.5 % a temperatura ambiente. Con respecto al análisis

de varianza y la prueba de Duncan al 95% de significación, se observó que existe

diferencia significativa entre cada una de las temperaturas.

Palabras Clave: Ciclo de desarrollo, Galleria mellonella L, temperatura, mortalidad

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SUMMARY

The aim of this study was to determine the effect of temperature on the development

cycle Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae) in laboratory conditions. The

work was performed at the Laboratory of Insect Breeding Faculty of Biological

Sciences of the National University of Trujillo, from February to August 2016.We used

adults and eggs of G. mellonella, they were conditioned air chambers to regulate

temperatures 25 ° C, 29 ° C, 33 ° C and environment 21 ° C, with three replicates for

each temperature temperatures. The temperature record was held by a hygrometer

VWR, the experimental design was used completely random. The results showed that

the cycle of development of G. mellonella was 87.8 days at room temperature and 45.85

days at 33 ° C, the duration of the incubation period, larval, pupal state of pre-higher

temperature and pupa was 6.91, 27.16, 1.21 and 10.57 days at 33 ° C and lower

temperature was 12.85, 51.89, 2.53 and 20.53 days at room temperature. The mortality

of larvae G. mellonela L was greater with 58.60% at 33 ° C and lower in the pupal

stage with 5.5% at room temperature. Regarding the analysis of variance and Duncan

test at 95% significance it was observed that there are significant differences between

each of the temperatures.

Keywords: Development cycle, Galleria mellonella L, temperature, mortality

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I. INTRODUCCIÓN

Galleria mellonella L. (Lep.: Pyralidae) “polilla mayor de la cera”, se distribuye

ampliamente en todo el mundo, excepto en climas muy fríos y en grandes altitudes

(Root, 1976). La actividad de los adultos comienza en primavera y continúa gran parte

del verano, aunque en países tropicales puede continuar desarrollándose durante todo

el año (Neira y Manquian, 2004). Las polillas ovipositan preferentemente en lugares

oscuros, con poca ventilación o en colmenas débiles, presentando preferencia por los

panales viejos y oscuros (Cornejo, 1993). Es considerada una de los mayores enemigos

de las colonias de abejas, ya que en su fase larvaria destruye, de forma significativa,

los panales y se encuentra distribuida en todas las regiones de mundo donde se practica

la apicultura (Llorente, 2004).

Las larvas de G. mellonella, son utilizadas como hospederos alternativos para

la producción de parasitoides y otros enemigos naturales de plagas perjudiciales para

los agroecosistemas (Gallo et al., 1988), debido a que tienen una alta calidad

nutricional, tal como lo indica Smith (1997), durante el estado larval, es un interesante

alimento debido a que el contenido de lípidos, es de 22.11%, el porcentaje de los ácidos

grasos saturados son mayores que los insaturados representando el 53.1 y 54.44 % del

total de ácidos grasos. La calidad de proteínas en los alimentos está determinada por su

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contenido de aminoácidos esenciales, las larvas de esta especie son ricas en

aminoácidos esenciales a excepción de la metionina e histidina.

A pesar de la importancia de la “polilla mayor de la cera” en la industria apícola,

también se investiga mucho más como un organismo modelo para estudios en

Fisiología de insectos, la Genómica, la Proteómica, entre otros. Williams (1990),

menciona que la “polilla mayor de la cera” es considerada un insecto útil, ya que sus

larvas son comercializadas en Estados Unidos y Europa para la alimentación de peces

y aves.

La exigencia cada vez mayor del uso racional y selectivo de pesticidas por parte

de los mercados internacionales ha impulsado el desarrollo de un programa de manejo

integrado en el que se emplea prácticas agronómicas, etológicas y biológicas en este

rubro la crianza de insectos (Rijo y Barrios, 1996).

Chávez et al. (2013), evaluaron el efecto sinérgico y septicémico entre Bacillus

thuringiensis Berliner y Photorhabdus luminescens (Thomas et Poinar) en larvas de G.

mellonella. Torrez et al. (2012), evaluaron la patogenicidad de aislamientos

monospóricos nativos de Metarhizium anisopliae sobre larvas de esta especie. Crisanto

(2016), utilizó las larvas del V estadio de G. mellonella para evaluar la capacidad de

propagación de Heterorhabditis bacteriophora Poinar. Harding et al. (2013),

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utilizaron las larvas de G. mellonella para caracterizar la patogénesis de Legionella

pneumophila, incluyendo la inoculación, la medición de la virulencia bacteriana y la

replicación, así como la extracción y el análisis de hemocitos infectados.

En Cuba, Hoffmann (1996), evaluó el desarrollo del parasitoide Lydella

minenese (Dip.: Tachinidae) en larvas del VI estadio. Y también en Brazil, Ravelo

(2015), utilizó larvas del V estadio para la producción artificial de Lixophaga diatraeae

(Towns).

El comportamiento y desarrollo de las poblaciones de insectos, tanto de

hospederos como parasitoides, están influenciados por varios factores abióticos entre

ellos la temperatura, humedad y luz y bióticos como los organismos herbívoros, la

calidad y las características de las plantas hospederas (Minkenberg y Helderman,

1990). Entre los factores abióticos, uno de los más importantes es la temperatura. Ésta

es la que determina los límites de las actividades biológicas de los insectos, de tal

manera que las temperaturas óptimas y los umbrales máximos y mínimos pueden ser

estimados para todos los procesos principales de la vida de los insectos. Sin embargo,

los requerimientos térmicos pueden ser diferentes según las especies y las etapas de

desarrollo (Minkenberg, 1990; Gilbert y Raworth, 1996; Roy et al., 2002). La

temperatura influye sobre el desarrollo de los insectos y ha sido estudiada para varias

especies (Ferreira y Parra 1985; Foerster, 1996; Chagas y Parra, 2000). Este factor

influye sobre la tasa de desarrollo de los insectos con límites inferior y superior, la

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mortalidad de los estados inmaduros, la fecundidad y longevidad de los adultos

(Tauber y Tauber, 1973).

Diversos trabajos han sido realizados para evaluar el efecto de la temperatura

en el ciclo de vida de muchos insectos. Álvarez-Amador et al. (1998), presenta el

ejemplo de la “polilla mayor de la cera”, evaluando el efecto de tres temperaturas 15°

C, 20° C y 25° C sobre sus estadios larvarios, fecundidad, longevidad y tasa de

oviposición. Estos datos sirvieron para estimar el potencial de reproducción de la

especie y proponer su uso como huésped alternativo de Billaea claripalpis Wulp. Por

otro lado, Cardoso et al. (2007), evaluaron el efecto de tres temperaturas 22° C, 27° C

y 32° C sobre el desarrollo de las larvas de G. mellonella L. Lo que sirvieron para

determinar el estadio larval y proponer el uso de Bacillus thuringiensis como agente de

control de larvas de la “polilla mayor de la cera”.

Ozer (1962), menciona que el ciclo de desarrollo de G. mellonella, a

temperatura de 26° C es de 68.25 días. Abid et al (1979), informa que a 22 °C, la

duración del estado larval según El-Sawaf (1950) a una temperatura de 22° C fue de

40,4 días y Mishra (1971) a 32°C fue de 23,4 días. Brar et al (1996), menciona que la

duración del estado de pupa a 22°C fue 18,2 días, a 27° C fue de 15 días y a 32°C fue

de 12,2 días.

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Neira (2006), registra que el ciclo biológico de G. mellonella varía de acuerdo

a las condiciones de temperatura, pudiendo ser de 30 a 60 días a 22° C. Realpe et al

(2007), afirma que la duración del ciclo de vida de G. mellonella disminuye a medida

que se incrementa la temperatura.

Se debe considerar que el conocimiento sobre los efectos de la temperatura

sobre los diferentes estados de desarrollo de los insectos es un elemento importante

para la definición de las estrategias de crianza y control. Este conocimiento, cuando se

aplica a G. mellonella, permitirá determinar el tiempo de desarrollo a diferentes

temperaturas. Por lo que el objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto de la

temperatura en el ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L., en condiciones de

laboratorio.

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II. MATERIAL Y MÉTODOS

1. Lugar de ejecución del trabajo

El trabajo se llevó a cabo, en el Laboratorio de Crianza de insectos.

Pabellón “Antonio Samanamud Romero” 304. Ciudad Universitaria – UNT.

Av. Juan Pablo II s/n., distrito de Trujillo, provincia de Trujillo, departamento

de La Libertad, entre los meses de febrero a agosto del 2016.

2. Obtención del material biológico

Los adultos y huevos de G. mellonella que se utilizaron en el trabajo de

investigación provienen de crianza masal del laboratorio de control biológico

del Servicio Nacional de Sanidad Agraria - SENASA.

3. Preparación de la dieta

En un recipiente se colocó el alimento de mascota “Mimaskot” molida

junto con el afrecho de trigo, al cual se le agregó miel de azúcar rubia agitando

constantemente hasta obtener una mezcla ligosa (Anexo 3).

4. Efecto de la temperatura

Los experimentos fueron realizados en laboratorio, donde se

acondicionó cámaras climatizadas para regular las temperaturas de 25° C, 29°

C y 33° C y a temperatura ambiente con tres repeticiones por cada una de las

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temperaturas. El registro de la temperatura se realizó por medio de un

Termohigrómetro VWR.

5. Ciclo de desarrollo

5.1. Colecta de posturas y acondicionamiento de huevos

Se colectó a diario huevos de G. mellonella y se acondicionaron en

recipientes de plástico de 500 mL, aproximadamente de 0,4 g de huevos con 4

g de polen por un período de 8 días, cumplido el tiempo se agregó 500 g de

dieta por un período de 7 días.

Para determinar el período de incubación de G. mellonella, se inició con

una unidad experimental constituida por 20 huevos recién ovipositados,

ubicados en una placa petri sobre un papel filtro húmedo. Éstos se incubaron a

las diferentes temperaturas 25° C, 29° C, 33° C y a temperatura ambiente, hasta

su eclosión, para cada temperatura o tratamiento se tuvo tres repeticiones.

5.2. Crianza de larvas

Para las observaciones sobre el estado de larva de G. mellonella, se

colocó una larva de un día de edad en un recipiente con la dieta preparada, lo

que constituye la unidad experimental. El experimento se inició con 20 larvas

para cada temperatura y diariamente se tomó la medida de la longitud de su

cuerpo, la cual se midió con la ayuda de una regla milimetrada, para este estado

se registró el tiempo que tomó la larva en cambiar de estadio.

5.3. Acondicionamiento de pre-pupa y pupa

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Se colocó una pupa en un recipiente de 4.5 x 4.6 x 2.3 cm sobre un papel

filtro, el experimento se inició con 20 pupas por cada temperatura o tratamiento

y se registró el tiempo de duración de este estado.

6. Análisis estadístico

El diseño experimental empleado fue completamente al azar, aplicándose el

análisis de varianza para evaluar el efecto de la temperatura en el ciclo de desarrollo

de G. mellonella, así como la prueba de Duncan para establecer las diferencias entre

cada tratamiento con un nivel de significancia del 95%.

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III. RESULTADOS

En la Tabla 1 y Fig. 1, se presentan la duración promedio del ciclo de desarrollo

de G. mellonella L. Se observó que el ciclo de desarrollo de G. mellonella es más corto

a medida que se incrementa la temperatura, siendo el mayor promedio de duración de

87.80 días a 21° C y el menor promedio de duración de 45.85 días a 33° C,

respectivamente.

En la Tabla 2 y Fig. 2, 3 y 4, se presenta la duración promedio de cada estado

de G. mellonella. Se observó que el periodo de incubación varia de 6.91 a 12.85 días a

33° C y temperatura ambiente. El menor tiempo de duración del estadio de pupa fue de

1.21 días a 33° C.

En la Tabla 3 y Fig. 5, se presenta la duración promedio de cada estadio larval

de G. mellonella. Se observó que 33° C el desarrollo de cada estadio fue en menor

tiempo a comparación a la de 21° C que tuvo mayor tiempo de desarrollo.

En la Tabla 4 y Fig. 6, se presentan el porcentaje de mortalidad de los diferentes

estados de G. mellonella. Se observó que la mayor mortalidad ocurre en estado larvario

a 33° C fue de 58.60% y la menor mortalidad ocurre a 21° C fue de 29.70%.

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En la Tabla 5, según el análisis de varianza existe diferencia significativa entre

la temperatura y los días de desarrollo de G. mellonella. En la Tabla 6, se muestra la

prueba de comparación de rangos múltiples de Duncan, con un nivel de significancia

del 95%, la cual muestra que existe diferencia significativa entre cada temperatura.

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Tabla 1. Duración promedio en días del ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L.

a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

Tratamiento Promedio ± DS

T. ambiente (21° C) 87.80 ± 2.92

25° C 70.36 ± 2.57

29° C 60.81 ± 2.38

33° C 45.85 ± 2.27

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Fig. 1. Duración promedio en días del ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L. a

temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

87.8

70.36

60.81

45.85

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

T. ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C

Días

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Tabla 2. Duración promedio en días de los estados de desarrollo de Galleria mellonella

L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

ESTADO T. ambiente

21° C

25° C 29° C 33° C

Huevo 12.85 ± 0.75 10.90 ± 0.54 8.93 ± 0.68 6.91 ± 0.37

Larva 51.89 ± 3.01 41.92± 2.94 37.01 ± 2.88 27.16 ± 2.80

Pre Pupa 2.53 ± 0.27 2.23± 0.21 1.85 ± 0.17 1.21 ± 0.11

Pupa 20.53 ±2.01 15.31 ± 1.88 13.02 ± 1.67 10.57 ± 1.51

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Fig. 2. Duración promedio en días del estado de huevo de Galleria mellonella L. a

temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

12.85

10.9

8.93

6.91

0

2

4

6

8

10

12

14

T. ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C

Días

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Fig. 3. Duración promedio en días del estado de larva de Galleria mellonella L. a

temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

51.89

41.92

37.01

27.16

0

10

20

30

40

50

60

T. ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C

Días

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Fig. 4. Duración promedio en días del estado de pre-pupa y pupa de Galleria

mellonella L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

2.53 2.23 1.85 1.21

20.53

15.31

13.02

10.57

0

5

10

15

20

25

T. ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C

Pre-pupa Pupa

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Tabla 3. Promedio de la duración en días de cada estadio larval de Galleria mellonella

L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

ESTADIO T. ambiente

21° C

25° C 29° C 33° C

Larva I 9.61 6.42 4.51 3.51

Larva II 8.65 8.14 7.27 5.28

Larva III 7.85 5.57 6.61 5.74

Larva IV 8.93 7.21 6.39 4.28

Larva V 7.20 6.74 6.40 4.41

Larva VI 9.65 7.84 5.83 3.94

Suma 51.89 41.92 37.01 27.16

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Fig. 5. Promedio de la duración en días de cada estadio larval de Galleria mellonella L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y

33°C.

9.61

8.65

7.85

8.93

7.2

9.65

6.42

8.14

5.57

7.216.74

7.84

4.51

7.27

6.61 6.39 6.45.83

3.51

5.285.74

4.28 4.413.94

0

2

4

6

8

10

12

Larva I Larva II Larva III Larva IV Larva V Larva VI

T. Ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C

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Tabla 4. Porcentaje de mortalidad de los diferentes estados de desarrollo de Galleria

mellonella L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

TEMPERATURA

(° C)

MORTALIDAD (%)

HUEVO LARVA PUPA

T. Ambiente (21° C) 17.10 29.70 5.50

25° C 24.61 36.70 6.87

29° C 27.10 41.30 8.89

33° C 29.87 58.60 12.51

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Fig. 6. Porcentaje de mortalidad de los diferentes estados de Galleria mellonella L. a

temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

17.1

24.6127.1

29.8729.7

36.741.3

58.6

5.5 6.87 8.8912.51

0

10

20

30

40

50

60

70

T. Ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C

HUEVO LARVA PUPA

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Tabla 5. ANOVA para el promedio en días del ciclo de desarrollo de Galleria

mellonella L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

Origen de las

variaciones

Suma de

cuadrados

Grados

de

libertad

Promedio

de los

cuadrados

F Probabilidad Valor

crítico

para F

Entre

grupos

33.93 3 11.31 10.93 0.001 3.49

Dentro de los

grupos

12.42 12 1.04

Total 46.36 15

P.E.: 0.05

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Tabla 5. Prueba de Duncan para el promedio en días del ciclo de desarrollo de Galleria

mellonella L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.

Tratamiento Casos Media Grupos Homogéneos

T. Ambiente (21° C) 4 *1.24 X

25° C 4 *1.63 X

29° C 4 *1.75 X

33° C 4 *2.18 X

* Indica diferencia significativa

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IV. DISCUSIÓN

En la Tabla 1 y Fig. 1, se observa, el tiempo total de duración de los estados

biológicos de G. mellonella a temperatura ambiente fue de 87.80 días, a 25° C fue

70.36 días, estos resultados se asemejan a los obtenidos en Cuba, donde se encontró

que el ciclo de desarrollo de G. mellonella a 20° C y 25° C y tuvo una duración total

de 89.10 y 71.25 días, respectivamente (Marston et al, 1985). A temperatura de 29° C

fue de 60.81 días muy cercano con Ozer (1962), que menciona que a 29° C el ciclo de

desarrollo fue de 59.67 días. A la temperatura de 33° C tuvo un promedio de duración

de 45.85 días. En los resultados obtenidos, se ha encontrado una relación inversamente

proporcional entre la temperatura y la duración del ciclo de desarrollo tal como lo

indica Bazzocchi et al. (2003).

En la Tabla 2 se observa, que el período de incubación de la polilla tuvo un

promedio de 12.85, 10.90, 8.93 y 6.91 días para temperatura ambiente, 25° C, 29° C y

33° C respectivamente, estos resultados son similares a los registrados por Abid et al.

(1979) quienes registraron que la duración del estado de huevo fue de 13.6 días a 22°

C. Ozer (1962) menciona que el período de incubación a 26° C fue de 10.01 días.

Asimismo, Cardoso et al. (2007) mencionan que el período de incubación fueron de

8.3 días a 29° C y de 6.8 a 32° C.

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El estado larval fue influenciado por la temperatura y tuvo un promedio de

54.42, 44.15, 38.86 y 28.37 días para temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33° C

respectivamente (Tabla 2), estos resultados son similares a los registrados por Marston

y Campbell (1973), quienes evaluaron el crecimiento larvario de G. mellonella en

dietas alternativas expuestos a diferentes temperaturas y registraron que la duración del

estado larvario es de 56.97, 41.07 y 30,4 días a temperatura ambiente, 21° C, 29° C y

33° C respectivamente. De igual manera, El-sawaf (1950) registró que la duración del

estado larvario a 24° C, fue de 40.4 días. Por lo contrario Mishra (1971), cuando evaluó

el ciclo biológico de G. mellonella en condiciones controladas de temperatura y

fotoperíodo de 16:8 horas de oscuridad: luz, demostró que la duración del estadio

larvario fue de 74.41, 50.27 y 23.4 días a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33° C

respectivamente, probablemente, en este estudio las larvas estaban expuestas a un

periodo de luz lo cual pudo afectar el desarrollo larvario, por ser G. mellonella un

insecto de hábitos nocturnos (Ceballos, 1974).

En la Tabla 3, se presenta la comparación en la duración de los diferentes

estadios larvales en las temperaturas evaluadas, se observó que las larvas de G.

mellonella pasaron por seis estadios, resultados semejantes a los obtenidos por Zenner

y Posada (1992) quienes en su investigación observaron que las larvas de esta especie

pasaron por seis estadios a 25° C, 29° C y 33° C; Realpe et al. (2007), cuando utilizaron

larvas para la producción de nematodos entomopatógenos observaron que esta especie

pasaron por seis estadios. Sin embargo este dato difiere con los datos obtenidos por

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Cardoso et al. (2007), en el cual las larvas fueron alimentadas con harina de trigo,

levadura, miel procesada y cera sólida; y observaron que a 20° C las larvas de G.

mellonella pasaron por siete estadios, mientras que a 25 y 30° C pasaron por ocho

estadios, probablemente esta dieta tendría un alto valor nutricional ya que se utilizaron

ingredientes que forman parte de la dieta natural de G. mellonella. Sin embargo, Lyon

(2007), evaluó el efecto de diferentes dietas en la producción de larvas, registro que G.

mellonella paso por siete estadios larvarios. Cabe anotar que el número de estadios en los

insectos puede variar como respuesta a factores como la disponibilidad, la cantidad y

calidad de alimento ya que de esto va a depender el estado nutricional y tendrían un

efecto directo sobre el rendimiento y la calidad de las larvas (Bustillo, 1976).

En el estado biológico de pre-pupa y pupa, la tendencia general de la duración

en estos estados es igual a la observada en el estado de huevo y larva, con una

disminución en días a medida que aumenta la temperatura. La duración del estado de

pre-pupa fue de 2.53, 2.23, 1.85 y 1.21 días para temperatura ambiente, 25° C, 29° C

y 33° C, y la duración del estado de pupa fue de 20.53, 15.31, 13.02 y 10.57 días para

temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33° C, respectivamente, estos resultados se

asemeja al obtenido por Brar et al. (1996) encontraron que la duración del estadio de

pupa es de 18.2 días a 22° C y 12.2 días a 31° C. No obstante, esos datos difieren de

los obtenidos por Molina y López, (2001) encontraron que la duración de este periodo

es de 6.5 a 7.8 días a una temperatura de 32° C.

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En la Tabla 4 se presenta el porcentaje de mortalidad de los diferentes estados

de G. mellonella. A temperatura ambiente, la mortalidad fue de 17.10%, 29.7% y

5.50% en los estados de huevo, larva y pupa; a 25° C fue de 24.61%, 36.7% y 6.87%;

a 29° C fue de 27.10%, 41.3% y 8.89% y a 33° C fue de 29.87%, 58.6% y 12.51%.

Estos resultados son similares a los registrados por Samsinakova et al, (1983), quienes

indican que en el estado larvario, la mortalidad fue de 25.51% y 48.94 % a 21° C y 30°

C. De igual manera, Realpe-Arana et al. (2007), indican que la mortalidad fue de

18.8%, 22.00% y 32.8% a 20° C, 25° C y 30° C para el estado de huevo; 24.8%, 38.4%

y 49.3% a 20° C, 25° C y 30° C para el estado de larva y 4.2%, 6.2% y 13.8% a 20°

C, 25° C y 30° C para el estado de pupa. Se observó que la mortalidad del estado larval

fue mayor que el estado de huevo y pupa en todas las temperaturas. Debido que, a

temperaturas superiores, todos los estados evolutivos de los insectos mueren,

principalmente las larvas, ya que los insectos no pueden reducir su temperatura

corporal usando la transpiración o la respiración, por esto, las enzimas se desnaturalizan

ocasionando la parada de los procesos metabólicos y la biosíntesis; y por consiguiente

los insectos mueren por coagulación de las proteínas en su cuerpo (Hartfelder et al.,

2013).

Con respecto al análisis de varianza y la prueba de Duncan al 95% de

significación en la Tabla 5 y 6, se observa que existe diferencia significativa en cada

uno de los tratamientos, la mayor diferencia significativa se observa entre la

temperatura ambiente y 33° C, debido que el ciclo de desarrollo de G. mellonella es

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menor a medida que se incrementa la temperatura, así lo indica Fabrina et al. (2012),

cuando evaluaron la influencia de la temperatura y la humedad en el ciclo biológico y

comportamiento en Phyllocnistis citrella Stainton y Galleria mellonella L, obtuvieron

como resultado que el ciclo se completó en 11.5 días a 19° C y 50.15 días a 33° C; y

178.8 días a 19 y 62.4 días a 33° C, respectivamente, por lo que los resultados se

asocian a la importancia de temperatura y su incidencia sobre los procesos

bioquímicos; y a la capacidad del hospedero para suplir los requerimientos

nutricionales.

Las diferencias encontradas en el ciclo de desarrollo de G. mellonella a

temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33° C, se deben a factores físicos y biológicos

principalmente como se ha mencionado la temperatura, lo que también coincide con

Kopácek et al. (1995), que este factor determinaría el tiempo de duración del ciclo de

desarrollo. De igual manera Smith (1965), indica que otro factor que influiría seria los

estímulos químicos generados por el insecto tales como gradientes de temperatura.

Estas diferencias en el ciclo de desarrollo de G. mellonella también se pueden atribuir

a los mecanismos de defensa de cada insecto al estar expuestos a diferentes

temperaturas (Schuhmann et al., 2003).

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V. CONCLUSIONES

La duración del ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L fue de 87.8 días a

temperatura ambiente a 21° C y de 45.85 días a 33° C.

La duración del periodo de incubación, a mayor temperatura fue de 6.91 días a

33° y a menor temperatura ambiente a 21° C fue de 12.85 días a temperatura

ambiente.

La duración del estado larval, a mayor temperatura fue de 27.16 días a 33° C y

a menor temperatura ambiente a 21° C fue de 51.89 días a temperatura

ambiente.

La duración del estado de pre-pupa y pupa, a mayor temperatura fue de 1.21 y

10.57 días a 33° C y a menor temperatura a 21° C fue de 2.53 y 20.53 días a

temperatura ambiente

La mortalidad de larvas de Galleria mellonela L fue mayor con 58.60 % a 33°

C y menor en el estado de pupa con 5.5 % a temperatura ambiente.

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VI. RECOMENDACIONES

Se debe buscar nuevas metodologías para producir larvas de Galleria

mellonella en condiciones de laboratorio.

Implementación de dietas artificiales para la crianza masiva de G. mellonella

considerando producirlas a nivel comercial.

Evaluación de los factores físicos como la humedad y el fotoperiodo que pueden

afectar la producción de Galleria mellonella.

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VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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ANEXOS

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Anexo 1. Huevos de Galleria mellonella colocados en polen

Anexo 2. Preparación de la dieta de Galleria mellonella

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INGREDIENTES CANTIDAD UNIDAD

Alimento para mascota “Mimaskot”

Afrecho de trigo

Miel de azúcar

500

300

2000

g

g

mL

Anexo 3. Composición de la dieta de Galleria mellonella

Anexo 4. Larvas de Galleria mellonella en dieta artificial

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Anexo 5. Crianza de Galleria mellonella a temperatura ambiente

Anexo 6. Crianza de Galleria mellonella a 25° C

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Anexo 7. Crianza de Galleria mellonella a 29° C

Anexo 8. Crianza de Galleria mellonella a 33° C

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Anexo 9. Estadios larvales de Galleria mellonella a diferentes temperaturas

I II IV III V VI

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Anexo 10. Pre pupa de Galleria mellonella

Anexo 11. Pupa de Galleria mellonella

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