Extracción e Id. De carbohidratos de Reserva.

Carbohidratos: C,H y OFotosíntesis

Origen animal: Lactosa y glucógeno.

F(x):-aportar energía, -reserva energética, -fibra necesaria.

Enlace O-glucosidico: Enlaces de los gpos –OH

Polisacáridos: Mediante hidrolisis acida se desdoblan en monosacáridos.

Celulosa, glucógeno y almidón.

Glucogeno: Se almacena en el hígado 10% peso húmedo, es soluble en agua y con I2 da una coloración rojo ladrillo, Prop. de ext. Su solubilidad, inmisibilidad e hidrolisis.

Amilosa: soluble en agua, forma lineal, retiene I2 y da un color azul,(el lugol se atrapa en la ramificación de amilosa.)

Amilopectina: Insoluble en agua, no retiene I2, da color rojo, ramificado.

Polisacaridos de almacenamiento: Glucogeno(insoluble en etanol, soluble en agua), Almidón

Polisacaridos estructurales: Celulosa ,quitina.

Azucares no reductores: Sacarosa y Trehalosa.

Benedict: Prueba para azucares reductores, su fundamento radica que en medio alcalino, el ion cúprico es capaz de reducirse por efecto del grupo aldehído (CHO) del azúcar (carbón anomerico)a su forma Cu++

Lugol Antes

despues

Benedict

Antes despues

Almidon + azul fte

-Café-naranj

a

--

ama

+Rojo-

ladrillo

Glucogeno

- - - +

Exp1. Colocar homogenizado en agua, dejar hervir, acidif con ACOOH a pH 4-5. Filtrar en caliente(opalescencia del filtrado), colocar etanol frio,reposar 24hrs. Decantar en liq y centrifugar a 200rpm,5mins,dejar secar tamb. Disolver glucog en 4mL de agua en 2tubos de ensaye hacer pruebas de lugol y benedict con testigos.

Obj: analizar la imp biológica de los carbohidratos, ext polisac de muestras dif, Id. Con prueba d elugol y benedict antes y desp de su hidrolisis.

Ext. Y análisis de lip, de la yema de huevo.

Obj:Analizar las prop de los lip, ext lip d ela yema de huevo, cuantificar fosfatos de lip, P y noP.

Lípidos: 4gpos principales de macromoléculas presentes en toda cel. F(x): almacenamiento-deposito de energía, trans, estructura(comp escenciales de membrana biolog.), permeabilidad selectiva, señalización inter-intra celular.

Naturaleza hidrófoba.,insol en agua, solubles en éter, cloroformo, acetona, benceno, etc.su solubilidad en alcoholes dep. del tamaño y ramificación del mismo.

Método de Kjeldahl: método para separar N,cont. En proteínas y cuantificarlas en forma indirecta.La determin de P total debe contemplar una oxidación de mat. Organica.el H2O2 acelera la Rx. Los comp organicos se carbonizan con H2SO4 a CO2,CO, H2O,P2O7-4 Y SO2.

Metodo Fiske&Subbarow: Los iones fosfato Rx con molibdato de amonio en med. Acido para prod el complejo fosfomolibdato de amonio, en presencia de un agente reductor, prod un complejo heteropolimerico color azul, su Abs se mide a 615nm.

Analisis e Id. De lípidos de la yema d ehuevo por CCF.

Obj: Id. Lípidos de huevo, por la técnica CCF.

Reveladores: Molibdato-fosfolipidos, Bismuto-Colina, Ninhidrina-aminofosfolipidos,amina1 y 2, terciarias no revela(fosfatidilcolina), Yodo-insaturacion.

Hidroxiquinona: sin ella la muestra se conv. En aldehído y se oxida hasta ac carboxílico,agente antiOx. Mezcla :ac acético:CHCL3:MeOH, H2Oeluyente.Sol. Stock-sol. Std., Abs:615nm

CHCL3 Lip.P ; MeOH Lip. NoP

Titulación de Aa.

Obj:Determinar los pKa`s de Aa problema, Determinar de que Aa se trata, Determinar por medio de la Rx de Sorenden que los Aa se comp como dipolares.

Pto Isoeléctrico: Valos de Ph, donde la carga eléctrica neta del a.a es cero.

Zwitterion: Ion dipolar en solución, carga d ela especie, cero.

Sus pka`s son sus puntos de inflexión.

Cerca de cda Pka se encuentra una zona de

amortiguación.

Ac. Glutámico:3 ptos de inflexion.

Los A.a actúan como anfolitos a pH fisiológico, los A.a cargados polares son sol. En agua y tienen ptos de fusión altos.

Rx con formaldehido: Rx el gpo amino libre del Aa ,el a.a pierde un proton y este es posible valorar con NaOH o una base fuerte, el amino secundario pasa a terciario,con formol la curva se acorta.

Cromatografia de A.a

Obj: Aplicar la tec. De Cromat para la separación de una mezcla de a.a, Explicar los fundamentos de la sep. En la CCF, Analizar los factores qmodifican la resol de la tec.

Pueden ser clasificados deacuerdo a su caract ac, o básico: a. Neutros: alifáticos, aromáticos, azufrados, secundarios. b. Ácidos y c. Básicos.

CCF Reparto donde los comp de una mezcla se separa por diferencias de solubilidad., el resultado es el eq entre las fzas de transm y arrastre.

Se mide desde el pto. De aplicación hasta donde llego el eluyente(ctro. D ela mancha)

C.Bidimensional. Una vez separados los comp. Se someten a etapas adicionales de separación bajo dif. Cond., en dirección perpendicular

Ninhidrina: Caract. De a.a en general.

Complejos de Cu: distingue alfa-Aa de los demás

Alfa-Nitro-beta-naftol: Caract. De Torisina.

Rvo. De Ehrlich:triptofano

Nitroprusiato:A.a sulfurados

Azida-Yodo: A.a sulfurados también.

Vainillina-Ornitina, prolina eh hidroxipolina.

Rvo. Pauly: diversos A.a

Isatina: Iminoacidos.

Separación y Cuantif. De Proteínas plasmáticas.

Obj:Separar albumina y glubulina a partir de una mtra. De sangre., Determinan cuantitativamente por curva std la (Co) de Prot.totales, albuminay globulinas presentes en el plasma por método de Biuret.

Sangre:Fluido corporal ma sutilizado fines analíticos, tipos de puncion: Cutanea, venosa y arterial.

Requisitos para dif. A las proteínas plasmáticas: ser secretadas act. De la sangre, ejercer F(X) fundamental sist. Vascular, presentar mayor (Co) en plasma que cualquier otro tejido.

F(x) d elas proteínas en Plasma:

Albumina: control de la Posmotica

Globulinas: Defensa, anticuerpos

Fibrinogeno, Plasma ,coagulación.

Plasma y suero.El suero sanguíneo principalmente es agua, de color amarillento, se disuelve con proteínas, hormonas, minerales y dióxido de C, el plasma cont. Suero y factores de coagulación, una vez eliminados coagulantes como fibrina, el liquido se conv, en suero.

Anticoagulantes: Hacen la sangre mas fluida disminuyendo el poder coagulante de la sangre., Su función es inhibir la coag. De la sangre.