QUIMIORRESITENCIA EN GARRAPATAS Rhipicephalus (Boophilus) microplus.

LILIAN PAOLA GUEVARA MUÑETON010100172010

JUAN CAMILO VASQUEZ BOLAÑOS010100072010

CRISTHIAN EDUARDO LOZANO HERNÁNDEZ010100052010

EDGAR DÍAZ RIVERA

UNIVERSIDAD DEL TOLIMA

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

IBAGUE, 17 DE MARZO DE 2011.

OBJETIVOS

General:

• Aplicar y analizar pruebas de resistencia en garrapatas Rhipicephalus (Boophilus)

microplus a través de una prueba basada en el test de Drummond, para reconocer la sensibilidad

a diferentes principios activos de compuestos ixodicidas en el corregimiento del totumo en la

finca “las margaritas”.

Específicos:

• Analizar la eficacia reproductiva de las hembras ingurgitadas después de la exposición a

ixodicidas tales como: Carbamatos, Piretroides, Organofosforados y Amidinas.

• Evaluar el porcentaje de control de la eficacia reproductiva para cada ixodicida usado,

tomando como referencia un grupo control.

MARCO TEORICO

El problema de la quimio resistencia de garrapatas marca a gran escala la economía

ganadera en Colombia, especialmente con la especie Rhipicephalus (Boophilus) microplus,

debido a su amplia distribución en la región y a su carácter parasitario. “Para identificar la

Boophilus es necesario tener en cuenta sus palpos son muy cortos, la base de su capítulo es

hexagonal, no posee festones, los peritremos son redondos y el macho tiene cuatro placas

perianales” (Quiroz Romero, 2005, p. 773). El ciclo de vida de la B. microplus comprende, según

Santos y Furlong (2002), dos fases: La fase no parasitaria, que es cuando la teleogina cae al suelo

y allí ocurre la ovoposición y posterior eclosión; y la fase parasitaria, cuando la larva sube y se

alimenta de su hospedador hasta que madura a teleogina o ganandro.

“En Colombia se han identificado 68 especies, correspondiendo al 9% de todas las especies

del mundo” (Barreto V, Prada S, 1990, p. 18). Según Barreto V, Prada S, se ha estimado que en

Colombia la garrapata B. microplus, es la que más se presenta en el territorio seguida por la

especie Anocentor nitens, Amblyoma cajennense y Rhipicephalus sanguineus. “En Colombia

Boophilus, tiene una distribución muy amplia, encontrándose desde el nivel del mar hasta los

2700 de altitud y temperaturas que oscilan entre los 15 y 35 grados centígrados” (Parra T, Peláez

S, Segura C, Arcos D, Londoño A, Díaz Rivera, Vanegas R). De acuerdo a Barreto V, Prada S,

un estudio realizado sobre bovinos de 33 municipios del Tolima en donde se colectaron 15.809

garrapatas estableció que la B. microplus es la especie de garrapata más abundante en el

territorio tolimense. Del anterior número de garrapatas recolectadas, un 96.4% pertenecían a B.

microplus, un 3.2% a Anocentor nitens y un 0.4% a Amblyoma cajennense.

“El impacto negativo de B. microplus a la ganadería se debe a efectos directos, daño a las

pieles por acción de las picaduras, pérdida de sangre y disminución de parámetros productivos; e

indirectos dado por los agentes etiológicos que transmiten” (Díaz, Vivas, Sánchez, Cruz, 2006, p.

105). A su vez Díaz et al. (2006) plantean que la resistencia es uno de los mayores problemas,

debido a que la disponibilidad de nuevos antiparasitarios es cada vez más escasa.

Díaz et al. (2006), definen la resistencia como la capacidad adquirida por individuos de una

población parásita que les permite sobrevivir a dosis de químicos que generalmente son letales

para una población normal. También mencionan dos tipos de resistencia: la resistencia cruzada

(RC) que es el mecanismo que utilizan especies de insectos resistentes para sobrevivir a la

exposición de insecticidas relacionados químicamente, usando un patrón de destoxificación

genérico; y la resistencia múltiple (RM) que es la utilización de varios mecanismos hacia la

acción de varias clases de insecticidas no relacionados químicamente. De igual forma cabe

resaltar los factores que influyen directamente en el desarrollo de la evolución de la resistencia,

los cuales se clasifican en: genéticos, biológicos y operacionales del químico. Finalmente se

indican los mecanismos de resistencia a los ixodicidas, en cuatro categorías. La primera,

resistencia del comportamiento, es cuando el organismo modifica su conducta para evitar el

contacto con el ixodicida. La segunda, resistencia de la penetración, es una modificación del

exoesqueleto del organismo para inhibir o retardar la penetración del químico. La tercera,

resistencia metabólica, es la destoxificación del ixodicida por procesos enzimáticos que radica en

la modificación de las vías metabólicas. Finalmente, insensibilidad del sitio de acción, es la

modificación del sitio de acción del ixodicida para disminuir la sensibilidad del químico. Para

finalizar cabe resaltar que para el diagnostico de resistencia existen en general tres métodos:

Bioensayos (Prueba de paquete de larvas, Prueba de inmersión de adultas), Pruebas bioquímicas

y Pruebas moleculares. Entre los principales compuestos a los que se ha presentado quimio

resistencia por parte de las garrapatas, es pertinente resaltar los siguientes:

Organofosforados: Según Barreto V, Prada S, su blanco principal, es inhibir la acción de la

colinesterasa irreversiblemente; afectando así al sistema nervioso de la garrapata. Este se

manifiesta, a través de la sobre estimulación colinérgica de tipo muscarínico, nicótico y central,

interrumpiendo el proceso normal entre colinesterasa y acetilcolina a nivel del espacio sináptico.

Carbamatos: “Su acción es similar a la de los organofosforados. Los carbamatos, presentan

el acido carbámico y producen una acción parasimpático-mimética al inhibir reversiblemente la

acetilcolinesterasa permitiendo el acumulo de acetilcolina” (Barreto V, Prada S, 1990, p. 56).

Esto genera un incesante estimulo nervioso, a consecuencia de la dilatación de los canales para el

ingreso del sodio; conllevando a la inestabilidad del sistema nervioso.

Piretroides: “Su efecto va dirigido al sistema nervioso afectando la permeabilidad del

Sodio. Dicho bloqueo, afecta la actividad motriz del parasito manifestándose en la incoordinación

de los movimientos, letargo, parálisis y muerte de este” (Barreto V, Prada S, 1990, p. 57)

Amidinas: De acuerdo a Díaz R, estos compuestos tienen como fundamento inhibir la

función de la monoaminooxidasa en el sistema nervioso. Este efecto, genera parálisis muscular,

incapacidad en la ingesta de proteínas sangre y problemas en el desarrollo de los ovarios. La

sustancia de este tipo más reconocida es el Amitraz.

Teniendo en cuenta todo lo anterior se han desarrollado diferentes pruebas de laboratorio

para determinar la resistencia a ixodicidas por parte de B. microplus. “En la selección de una

prueba de laboratorio adecuada para la resistencia a los acaricidas, los siguientes requisitos deben

cumplirse. El ensayo deberá ser lo suficientemente sensible para identificar la resistencia al

principio de su aparición. También debe abarcar toda la gama de grupos químicos que están en

uso, incluyendo los ingredientes activos de más reciente desarrollo. La prueba de diagnóstico

debe ser simple y de bajo costo. También debe crear un resultado rápido y fiable, y ser apta para

la estandarización entre los laboratorios en muchos países. Las más ampliamente utilizadas

pruebas in vitro son los bioensayos aplicados a las larvas y las garrapatas hembras llenas de

sangre. Ninguno de ellos cumple con todos los requisitos anteriores, y la mejora de los protocolos

para el diagnóstico de la resistencia a los acaricidas debe ser un objetivo permanente” (FAO,

2004, p. 47 – 48).

Las cepas resistentes de las garrapatas se pueden diagnosticar sin tener protocolos de

pruebas estandarizados y reconocidos internacionalmente, como la técnica de inmersión de larvas

de Shaw, la cual determina el porcentaje de mortalidad de larvas con concentraciones

terapéuticas del acaricida (Bravo, Coronado y Henríquez, 2008, p. 41). Entonces, según la FAO

en 2004, para facilitar la vigilancia mundial y proporcionar una base para la comparación de los

resultados de las pruebas, la FAO promueve distintas pruebas de laboratorio in vitro como lo son:

Prueba del paquete larval (LPT): “Se considera como la más repetible, aunque está limitada

por la longitud del tiempo que toma (6 semanas). Por lo tanto, sigue siendo la prueba de elección

para los estudios y para la confirmación definitiva de un diagnóstico de la resistencia. En esta

prueba, las larvas de garrapatas están expuestas a papel de filtro impregnado con el compuesto

químico y su mortalidad posterior se cuantifica después de 24 horas. El kit contiene los

materiales y procedimientos estandarizados permitiendo que los datos obtenidos de diferentes

partes del mundo sean directamente comparados y discutidos.” (FAO, 2004, p. 54).

Prueba de inmersión de adultos (AIT): Se desarrollo según la técnica descrita por

Drummond et al. (1971) y publicada por el ICA; donde la efectividad del acaricida se mide en

términos de su capacidad de controlar la eficacia reproductiva. Esta se calcula dividiendo el peso

(mg) de los huevos producidos entre el peso de las teleoginas (mg) y el resultado es multiplicado

por el porcentaje de eclosión y por 20.000 (es una constante que representa el numero de larvas

contenidas en un gramo de huevo).

A su vez, a través de esta prueba, se busca obtener, el porcentaje de control de eficacia

reproductiva (PCONER), el cual se determina mediante la comparación de la eficacia

reproductiva de cada tratamiento contra la eficacia reproductiva del grupo control, recopilando

los datos para cada tratamiento.

Finalmente, según la FAO citada por Bravo, Coronado y Henríquez en 2008, es importante

medir el factor de resistencia el cual es un indicativo de resistencia al acaricida empleado, así:

METODOLOGIA

Recolección de garrapatas

Se realizo la búsqueda por zonas del Norte y Centro del Tolima, y finalmente en el

corregimiento del totumo se selecciono la finca “las margaritas”, propiedad del Señor Isaías

Barón. Allí, se inicio el trabajo de recolección de teleoginas hacia las 7:00 am el día 13 de de

marzo, con un grupo total de 15 bovinos doble propósito de los cuales se eligieron 8 individuos

que se encontraban altamente parasitados. Cabe resaltar que de este grupo muestra habían dos

terneros. (Imagen 1).

La utilización de compuestos ixodicidas por el propietario consiste en la aplicación de

ivermectina cada 3 meses y en el momento de recolección la última aplicación se había ejecutado

hace más de dos meses.

Se recolectaron alrededor de 70 hembras de las cuales el 40% no estaban totalmente

ingurgitadas. Enseguida se transportaron en una caja de cartón con papel periódico y se

refrigeraron a una temperatura de 4°C durante 1 día. Esto con la finalidad de bajar el

metabolismo de la muestra, evitando la ovoposición, y dando así el tiempo suficiente para llevar a

cabo la prueba.

Posteriormente la muestra fue transportada al laboratorio donde se llevo a cabo su

identificación y clasificación de acuerdo a su tamaño, separándolas en 2 grupos: 30 hembras

ingurgitadas (> 7mm), con sus estructuras completas y de la especie B. microplus; 9 hembras

ingurgitadas con su aparato bucal incompleto; 3 hembras ingurgitadas de la especie

Rhipicephalus sanguineus; y 28 hembras que no se encontraban ingurgitadas. (Imagen 2).

Test de Drummond

Es una prueba, desarrollada en 1973 por Drummond, diseñada para medir la eficacia

reproductiva de un grupo de garrapatas ante una exposición previa a un químico. Es de aclarar,

que el test utilizado estuvo sujeto a modificaciones, por lo tanto, la prueba aplicada no es la

original. Para llevarla a cabo se utilizaron los siguientes compuestos ixodicidas: Amitraz,

Cipermetina, Dravafos y Ficam los cuales se disolvieron en 50ml de agua destilada por medio de

una micropipeta en las siguientes cantidades 0.08 ml, 0.05 ml, 0.03 ml y 0,15 gr respectivamente.

(Imagen 3).

Tipo Concentración Nombre Comercial Laboratorio

1 Amidina AmitrazConcentrado emulsionable

12,50% Amitrax Vicar 1:600

2 ControlAgua

destilada

3 Piretroide CipermetrinaConcentrado emulsionable

15% Cipermetrina Genfar 1:1000

4 Organofosforado EthiónConcentrado emulsionable

83% Dravafos Genfar 1:1300

5 Carbamato Bendiocarb Polvo Soluble 80% Ficam Bayer 200 gr/Kg

Presentación Comercial Dilución Recomendada

Grupo Compuesto Activo Producto

Tabla 1. Generalidades Compuestos.

A continuación se procedió con el lavado de las garrapatas con agua destilada y su posterior

secado, luego se dividieron por pesos separando 5 grupos de 5 garrapatas cada uno. Con un peso

promedio por garrapata de 120 mg y unos pesos por grupo así: Grupo 1 Amitraz (599mg), Grupo

2 Control (582mg), Grupo 3 Cipermetina (607mg), Grupo 4 Dravafos (615mg) y Grupo Ficam

(600mg).

Antes de continuar con el procedimiento metodológico cabe resaltar que el principio activo

de cada compuesto de acuerdo a su nombre comercial es: Amitraz (Amidina), Cipermetina

(Piretroide), Dravafos (Organofosforado) y Ficam (Carbamato).

Se prosiguió con la inmersión de las garrapatas en las disoluciones durante 30 segundos, se

filtraron por medio de una toalla absorbente y luego se secaron, así se procedió a enumerar las

cajas de Petri de 1 a 5 y se colocaron las garrapatas por medio de cinta adhesiva doble cara en

posición dorsal ubicando el aparato bucal hacia el centro de la caja. Se almacenaron durante 10

minutos en un recipiente térmico junto con papel periódico y las cajas totalmente cerradas, esto

para conservar la temperatura antes de ubicarlas dentro de la incubadora. (Imagen 4).

Es de resaltar que la incubadora en donde se realizo el proceso de incubación, fue de

fabricación casera, usando una cava de icopor, un termómetro de pared, un bombillo tradicional

de 60 W y un octavo de cartulina negra. Esta se adapto para conservar una temperatura entre

27ºC y 28ºC. Se aislaron de la luz por medio de la cartulina y las cajas de Petri se conservaron

abiertas para permitir la circulación de oxigeno y entrada de la humedad que se favoreció con la

incorporación de dos recipientes con agua. (Imagen 5).

Luego de esto se realizó una observación detallada de los posibles cambios que pudiesen

llegar a ocurrir durante la incubación durante 20 días. Cabe resaltar que ningún individuo del

Grupo 4 ovoposito durante este periodo de tiempo. (Imagen 6).

Al cumplirse el periodo de tiempo establecido por la prueba, se procedió a desechar las

garrapatas y a realizar el pesaje de los huevos por su respectivo grupo. Luego de esto los huevos

se depositaron en tubos de ensayo identificados de acuerdo al grupo y al compuesto químico

utilizado. Estos se llevaron nuevamente a la incubadora con las mismas condiciones a las que se

incubaron las garrapatas, durante un periodo de 30 días a la espera de la eclosión de estos.

(Imagen 7).

Al cabo de este tiempo, se procedió al contar 200 huevos identificando los que eclosionaron

y los que no, desechando las larvas. Este proceso se repitió 3 veces por cada grupo. Para evaluar

el porcentaje de eclosión se realizaron los siguientes formatos, en los que se especifica el grupo y

el nombre comercial del compuesto utilizado. En estos formatos las letras S representan huevos

eclosionados y la letra N representa huevos sin eclosionar. (Imagen 8).

De acuerdo a los datos obtenidos durante toda la prueba se realizaran lo respectivos

análisis.

RESULTADOS Y ANALISIS

La recolección de las teleoginas, se realizo en época de lluvias, lo que dificulto dicha labor.

Según los resultados obtenidos por Hocayen y Furlong en 2002, durante épocas de invierno, el

porcentaje de teleoginas es alrededor del 35% de la carga parasitaria del animal, en relación con

la época de verano donde el porcentaje de teleoginas es alrededor del 42%. Esto podría ser una

explicación al bajo número de población de garrapatas durante la época de invierno en regiones

tropicales. Por ende la recolección mostro el siguiente comportamiento:

30

93

28 B. microplus completasB. microplus incompletasR. sanquineusNo ingurgitadas

Gráfica 1. Relación de garrapatas recolectadas.

En el laboratorio, al momento de procesar la muestra se establecieron 5 grupos de

garrapatas con los siguientes pesos:

  Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3 Grupo 4 Grupo 5Peso Hembras (mg) 599 582 607 615 600

Peso promedio muestra 120mg x individuo 600,6mg x grupoTabla 2. Peso de hembras por grupo.

Durante el trabajo realizado por Barreto y Prada en 1990, en donde se aplico el test de

Drummond a 8 haciendas diferentes del Departamento del Tolima, se reporta que el peso

promedio de las garrapatas muestreadas en 5 de las haciendas coinciden cercanamente con el

promedio del peso de las garrapatas obtenidas para este trabajo. Esto podría indicar que este

trabajo tuvo un desarrollo correcto con respecto a otras pruebas similares.

Durante la incubación el proceso de ovoposición inicio a partir del cuarto día con los

grupos 2 (control), grupo 3 (Cipermetrina) y grupo 5 (Ficam). La siguiente ovoposición ocurrió

hacia el día 7 por parte del grupo 1 (Amitraz). Finalmente, transcurrido los 20 días de incubación

el grupo 4 (Dravafos) no presenta ovoposición.

Los resultados obtenidos por los grupos 3 y 5 podrían indicar que los compuestos a los que

estuvieron expuestos no afectan el desarrollo de esta etapa del ciclo biológico, pues estos tuvieron

el mismo comportamiento que el grupo control. Se podría decir que el retraso en la ovoposición

del grupo 1 en relación al grupo control se debe a los daños ocasionados por el Amitraz, por ende

la muestra empieza a mostrar ciertos signos de sensibilidad a las Amidinas. En relación al grupo

4, organofosforado, se puede indicar que aun no se ha desarrollado resistencia por parte de las

garrapatas hacia este compuesto. Según Soberanes, Rosario, Santamaría y García en 2005, la

resistencia a organofosforados y a piretroides se da por la sobreproducción de esterasas que

hidrolizan el compuesto ixodicida. De acuerdo con los resultados obtenidos se puede decir que

este factor de resistencia no se ha expresado en la población estudiada.

Pasado el periodo de incubación se procedió a pesar los huevos por grupo, obteniendo así

los siguientes resultados:

Tabla 3. Peso de huevos por grupo.

Según los resultados obtenidos para el grupo 1 se reafirma la sensibilidad de las garrapatas

a las Amidinas, reflejado en los daños reproductivos que el compuesto genera. Cabe destacar que

el grupo 3 en relación al grupo control mostro cierta sensibilidad ante los Piretroides al finalizar

esta etapa de la prueba, pues la diferencia de pesos con respecto a control fue considerable. Así

mismo, no se ha mostrado sensibilidad por parte del grupo 5 hacia el Carbamato, dado a que los

resultados obtenidos en el pesaje de los huevos muestran un comportamiento acorde al grupo

control.

Por tanto, según lo planteado por Alves en 2006, se puede concluir que hasta el momento

que la población de garrapatas es sensible al organofosforado (Ethión) debido a que hubo muerte

de las hembras y no hubo ovoposición. De igual forma el tratamiento con Amidinas (Amitraz) y

con piretroides (Cipermetrina) ha mostrado tolerancia debido a que hubo ovoposición incompleta

en relación al grupo control. Por último, el Carbamato (Bendiocarb) ha mostrado resistencia

debido a que tuvo una ovoposición normal con respecto a control.

En la siguiente tabla se plasman los porcentajes de eclosión, la eficacia reproductiva, los

porcentajes de control de la eficacia reproductiva (PCONER), y el factor de resistencia estimados

para cada grupo luego de finalizar la incubación de estos:

  Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3 Grupo 4 Grupo 5Peso Huevos (mg) 58,8 204 148,4 0 221,4

Nombre Comercial Peso Hembras mg Peso Huevos mg Eclosión Eficacia Reproductiva PCONER Factor de ResistenciaGrupo 1 Amitraz 599 58,8 0,83% 16,37 99,62 1,004

Grupo 2 Control 582 204 62% 4346,39 0

Grupo 3 Cipermetrina 607 148,4 26,83% 1312,08 69,81 1,43

Grupo 4 Dravafos 615 0 0% 0 100 1

Grupo 5 Ficam 600 221,4 10,5% 774,9 82,17 1,22

Tabla 4. Resumen Resultados.

El comportamiento del grupo control muestra un porcentaje de eclosión del 62% lo cual

podría indicar que hubo ciertos problemas de anaerobiosis y de falta de humedad que ocasionaron

que dicho porcentaje no haya sido más alto. Según Barreto y Prada en 1990, los tubos de ensayo

utilizados inicialmente fueron la causa de deshidratación y de larvas atrapadas en los cascarones

de los huevos, lo que se manifestó en porcentajes bajos de eclosión. Esto podría ser la explicación

a lo sucedido con el grupo control, y por ende con el resto de grupos.

Para establecer la sensibilidad en los grupos tratados se debe tener en cuenta que el

PCONER debe ser mayor o igual al 90%, y por ende el factor de resistencia no debe ser mayor a

1.1, según la FAO citado por Bravo, Coronado y Henríquez en 2008. Entonces, el PCONER

obtenido para el grupo 1 evidencia una sensibilidad muy alta ante la exposición a Amidinas, lo

cual corrobora lo planteado anteriormente, respecto a los posibles daños ocasionados.

Respecto a los resultados finales obtenidos en el grupo 3 se concluye que la eficacia de los

piretroides tienen mayor incidencia sobre la ovoposición, como se planteo anteriormente, pues a

diferencia de lo que se esperaba el porcentaje de eclosión fue el más alto del resto de grupos

problema, por ende, el PCONER más bajo (69,81%), lo cual según Junquera en 2010, muestra

tolerancia hacia este compuesto. También cabe resaltar que con respecto al grupo control, los

piretroides pueden causar daños sobre alrededor de 2/3 de la población de huevos ovopositados,

teniendo en cuenta que le porcentaje de eclosión para control es del 62% y para grupo 3 del

26,83%. Por otra parte, los resultados también indican que existen individuos que expresan

resistencia ante la Cipermetrina que, según Alves en 2006, por la expresión de las esterasas EST-

1 y EST-2 las cuales hidrolizan las moléculas del piretroide; y según Haiqui en 1999, hay

mutación en el gen que codifica los canales del sodio.

Con relación a grupo 5, el comportamiento que tuvo el Carbamato sobre este fue contrario a

lo observado para grupo 3. En este, la acción del compuesto se ve reflejada en el porcentaje de

eclosión, más que en la tasa de ovoposición, pero a diferencia del grupo 3 presenta una mayor

efectividad, de acuerdo al comportamiento del PCONER que para este caso fue del 82,67%. Con

respecto al grupo control, se deduce que existe una sensibilidad moderada hacia los Carbamatos,

debido a la diferencia considerable en el porcentaje de eclosión. Sin embargo, al identificar el

factor de resistencia se establece que la cepa estudiada es tolerante a Carbamatos. Lo anterior

indica, la existencia de individuos que empiezan a expresar resistencia frente a Bendiocarb, que

según Alves en 2006, posiblemente se debe a la mutación del gen que codifica la

acetilcolinesterasa. También cabe resaltar que la mínima resistencia que se mostro es un

indicador del desarrollo a futuro de resistencia a organofosforados, ya que según Junquera en

2010, los Carbamatos y los organofosforados tienen resistencia cruzada.

Los comportamientos de los grupos anteriormente mencionados se ilustran en las siguientes

gráficas.

Grafica 2. Relación de Resultados.

CONCLUSIONES

La carga parasitaria del ganado esta mediada principalmente por condiciones

medioambientales tales como el clima (temperatura, humedad, luz, etc.) hora del día y presencia

de animales predadores tales como las garzas, puesto que esto dificulta la recolección de

muestras. También cabe resaltar la importancia de las razas, debido a que el ganado cebú blanco

expresa una resistencia natural a las garrapatas ya que suelen tener menor carga parasitaria

respecto al ganado de razas Bos taurus.

Los animales jóvenes presentan mayor carga parasitaria, puesto que durante la recolección

de teleoginas se encontraron un número mayor de garrapatas ingurgitadas respecto a las

encontradas en animales adultos. Esto indica que la resistencia a garrapatas por parte del ganado

bovino se adquiere con el transcurso del tiempo y la exposición a estas mismas. Cabe aclarar que

no es raro encontrar otras especies de garrapatas diferentes a la B. microplus, como es el caso de

Rhipicephalus sanguineus, esto debido a la interacción de animales portadores de este tipo de

garrapatas con el ganado.

Al ejecutar la inmersión es necesaria la preparación de los compuestos de soluto y solvente

en las cantidades indicadas por la casa comercial ya que cualquier variación puede ocasionar

efectos adversos sobre los resultados obtenidos, tanto en la ovoposición como en la eclosión de

los huevos. Los resultados del test pueden ser más verídicos dado el caso en que se pueda

controlar la humedad ya que es un factor importante para el desarrollo de la incubación. En este

punto, se recomienda la utilización de cajas de Petri en remplazo de los tubos de ensayo ya que

esto permitirá mayor flujo de la humedad y del aire sobre los huevos.

En relación con el comportamiento de los ixodicidas utilizados se concluye, que el

compuesto de mayor eficacia es el organofosforado Ethión, pues mostro un 100% de inhibición

de la ovoposición, y por tanto un factor de resistencia de 1, es decir, una total sensibilidad. Por

tanto, para la finca “Las Margaritas” se recomienda el uso de este producto para el control de

garrapatas. Sin embargo el Amitraz mostro una alta efectividad frente al control de la eficacia

reproductiva y del factor de resistencia, por lo cual también es recomendable su uso.

Como última medida se recomienda evitar el uso excesivo de un único compuesto

ixodicida, esto para evitar el desarrollo de resistencias en la finca por parte de B. microplus a

estos garrapaticida. Así mismo, es importante evitar las fallas humanas en el momento de los

baños en lo que se refiere a las dosis recomendadas y a la cantidad de solución por animal, del

mismo modo que es aconsejable el uso de un sistema de manejo integrado de plagas, para

disminuir la frecuencia de baños.

El uso del Carbamato Bendiocarb no es aconsejable ya que también presento un PCONER

menor al 90% y un factor de resistencia mayor a 1.1, de lo cual presenta una tolerancia leve por

parte de las garrapatas. De igual forma el uso del Piretroide Cipermetrina como medida para

controlar la población de esta garrapata en dicha finca no es recomendable, puesto que los

resultados obtenidos no evidencian una eficacia confiable del producto, pues muestran una

tolerancia marcada.

BIBIOGRAFÍA

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microplus (Acari, Ixodidae). Tesis de grado. Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia,

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(002), pp. 239 – 246.

ANEXOS

Imagen 1. Recolección.

Imagen 2. Selección.

Imagen 3. Diluciones.

Imagen 4. Pesaje, Clasificación e Inmersión.

Imagen 5. Construcción Incubadora.

Imagen 6. Incubación Día 20.

Imagen 7. Pesaje de Huevos.

Imagen 8. Conteo de Huevos.