ASEPXIA EN LABORATORIO DE FITOPATOLOGIA

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INTRODUCCIÓN El primer médico que quiso poner freno a las infecciones nocosomiales ( infección contraída por pacientes ingresados en un recinto de atención a la salud ) fue el Dr. Semmelweis , quien, hace ya casi 140 años, insistió en que la causa de la expansión de la fiebre puerperal (un tipo de fiebre que afectaba a las parturientas debido a infecciones contraídas durante el alumbramiento, y que era mortal) que invadía su hospital de Viena, se debía a la falta de higiene de los médicos. Al parecer, éstos no se lavaban las manos entre cada práctica médica, como eran las autopsias y los partos. El Dr. Semmelweis implementa el lavado de manos en los estudiantes de medicina que atendían a parturientas, disminuyendo a un 1% la mortalidad en las mismas. Fue, precisamente, en el año de su muerte, 1865, cuando sus teorías fueron probadas y desde entonces la profesión sanitaria ha adoptado como medida higiénica y preventiva el lavado de manos. En el siglo XIX Pasteur demuestra la existencia de los microorganismos. A partir de ese momento se descubre que la causa de numerosas enfermedades son bacterias que se transmiten desde los enfermos a las personas sanas a través de distintos mecanismos. En los hospitales las condiciones de limpieza eran precarias, hasta que a partir de los trabajos de Lister, se comprobó que las heridas se infectaban en las operaciones quirúrgicas por la existencia de bacterias presentes en el aire, en los instrumentos quirúrgicos, y en la piel del operador. Se introdujo así la necesidad de utilizar sustancias que eliminaran las mismas durante la cura de heridas, en la limpieza del material quirúrgico y de los quirófanos. La primera sustancia utilizada con este fin, fue el fenol.

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RECOPILACIONES

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INTRODUCCIÓN

El primer médico que quiso poner freno a las infecciones nocosomiales ( infección contraída por pacientes ingresados en un recinto de atención a la salud ) fue el Dr. Semmelweis, quien, hace ya casi 140 años, insistió en que la causa de la expansión de la fiebre puerperal (un tipo de fiebre que afectaba a las parturientas debido a infecciones contraídas durante el alumbramiento, y que era mortal) que invadía su hospital de Viena, se debía a la falta de higiene de los médicos. 

Al parecer, éstos no se lavaban las manos entre cada práctica médica, como eran las autopsias y los partos. 

El Dr. Semmelweis implementa el lavado de manos en los estudiantes de medicina que atendían a parturientas, disminuyendo a un 1% la mortalidad en las mismas.Fue, precisamente, en el año de su muerte, 1865, cuando sus teorías fueron probadas y desde entonces la profesión sanitaria ha adoptado como medida higiénica y preventiva el lavado de manos.

En el siglo XIX Pasteur demuestra la existencia de los microorganismos. A partir de ese momento se descubre que la causa de numerosas enfermedades son bacterias que se transmiten desde los enfermos a las personas sanas a través de distintos mecanismos.

En los hospitales las condiciones de limpieza eran precarias, hasta que a partir de los trabajos de Lister, se comprobó que las heridas se infectaban en las operaciones quirúrgicas por la existencia de bacterias presentes en el aire, en los instrumentos quirúrgicos, y en la piel del operador.

Se introdujo así la necesidad de utilizar sustancias que eliminaran las mismas durante la cura de heridas, en la limpieza del material quirúrgico y de los quirófanos. La primera sustancia utilizada con este fin, fue el fenol.

La limpieza, desinfección y posterior esterilización, son procesos primordiales para el correcto funcionamiento de áreas de trabajo donde es necesario tener bajo control la carga microbiana presente, como por ejemplo la industria bioquímica y farmacéutica, la alimenticia y por supuesto los bioterios.

El lavado de los materiales y una posterior desinfección ejecutados correctamente garantizan un procedimiento que elimina el riesgo de agentes contaminantes.

Las mejoras se logran implementando normas estandarizadas, siendo además indispensable la adecuada preparación y formación del personal responsable del área.

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ALGUNOS CONCEPTOS BÁSICOS

LIMPIEZA: 

Es la remoción de todos los materiales extraños (detritus, sangre, proteínas, etc.) que se adhieren a los diferentes objetos.

Se realiza con agua, detergentes y productos enzimáticos.

Este proceso puede reducir la contaminación microbiana inicial y es el paso previo a cualquier proceso de desinfección y/o esterilización.

Si el instrumental no está limpio los procesos de desinfección y esterilización no serán totalmente eficaces, ya que la suciedad no permitirá el contacto del agente con la superficie y actuará protegiendo a las bacterias.

DESINFECCIÓN: 

Este proceso reduce la contaminación microbiana inicial.

Produce la destrucción de agentes infecciosos o contaminantes presentes en objetos y ambientes.

Asegura la eliminación de formas vegetativas pero no de esporas bacterianas. Posee una seguridad de 1 en 1000.

ESTERILIZACIÓN: 

Proceso validado usado para obtener un producto libre de todo microorganismo en estado latente o activo, causante de enfermedades o infecciones

. La esterilidad es una noción relativa, reduce 6 log. la contaminación microbiana inicial con probabilidad de encontrar 1 microrganismo en 1.000.000. Se debe mantener este estado hasta su utilización.

ASEPSIA: 

Método para prevenir infecciones por la destrucción de agentes patógenos, en especial por métodos físicos.

ANTISÉPTICO: 

Agente que controla y reduce la presencia de microorganismos potencialmente patógenos que se encuentran sobre piel y/o mucosas (sólo pueden aplicarse externamente sobre seres vivos).

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AGENTE ANTIMICROBIANO: 

Compuesto químico que inhibe el crecimiento o destruye a los microorganismos. En cuanto a su espectro de acción un agente puede ser: antibacteriano (elimina bacterias), antifúngico (elimina hongos) o antivírico (elimina virus). En cuanto a su actividad, puede ser:

-Estático: Inhibe el crecimiento del microorganismo, pero no los mata. Ej. Bacteriostáticos, fungiestáticos.

-Cida: Destruye los microorganismos. Ej. Bactericida

VALIDACIÓN: 

Procedimiento formal documentado para obtener, registrar e interpretar los resultados requeridos para demostrar que el proceso, físico o químico, garantice la obtención de un producto que cumpla con las especificaciones determinadas, en este caso esterilid

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DEFINICION DE ASEPSIA

Son los distintos procedimientos que buscan disminuir el número de microorganismos, especialmente los patógenos en áreas, instrumental y equipos.

Etapas de una asepsia:

ETAPA 1. RECOLECCIÓN DEL INSTRUMENTAL

Debe realizarse con guantes industriales y los demás elementos de protección personal teniendo especial cuidado con los elementos cortopunzantes.

ETAPA 2. DESGERMINACIÓN / DESINFECCIÓN

Es el proceso encaminado a disminuir el número de microorganismos, excepto las esporas, mediante el uso de un agente desinfectante. Este procedimiento se puede realizar de manera manual o por medio de un equipo ultrasónico.

Desinfectante: Es un agente que tiene capacidad de destruir o eliminar microorganismos causales de enfermedades.

NIVELES DE DESINFECCIÓN

Hay tres niveles de desgerminación de acuerdo al nivel de acción:

Desinfección de Alto Nivel:

Destruye todas las formas de vida de microorganismos excepto gran cantidad de esporas. Se utiliza en desinfección de elementos semicríticos.

Desinfección de Nivel Intermedio:

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Inactiva virus, bacterias en estado vegetativo,hongos, mycobacterium tuberculosis y no necesariamente esporas. Se utiliza para desinfección de elementos como termómetros. También es usado para la desinfección de superficies de áreas de alto, mediano y bajo riesgo dependiendo de la concentración de la solución.

Desinfección de Bajo Nivel: Destruye la mayoría de las bacterias, hongos algunos virus pero no microorganismos resistentes como el bacilo tuberculoso y las formas esporuladas de los microorganismos.

Se utiliza para desinfección de elementos no críticos como áreas, muebles y enseres del paciente.

MÉTODOS FÍSICOS

-CALORLa desinfección por calor recibe el nombre de Pasteurización. Este proceso, por calentamiento de líquidos se emplea generalmente a temperaturas por debajo del punto de ebullición. Destruye microorganismos patógenos (infecciosos); no incluye esporas.

La temperatura alcanzada es de 65°C durante 15 minutos.

Las condiciones para obtener óptimos resultados son:

-los elementos deben estar limpios-inmersión completa de los mismos en agua, alcanzando la temperatura adecuada, o usar Autoclave de vapor-los elementos deben ser secados posteriormente

-RADIACIÓN UVEstas radiaciones poseen un bajo poder de penetración, se emplea para disminuir la carga microbiana de superficies. No se considera un método esterilizante.Mecanismo de acción: máximo de absorción de los ácidos nucleicos es a 265

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nm. La luz UV provoca dímeros de pirimidina en el DNA y si no se reparan, la célula muere.

-LIMPIEZAReduce la contaminación y evita que se depositen sustancias pirógenas en los distintos materiales. Este proceso puede ser:

-Manual

Esta expulsa mecánicamente una alta proporción de microorganismos presentes en el material.El lavado y fregado con agua a temperatura adecuada y detergente permite que no se disemine el polvo que puede trasladarse a superficies críticas.

-Mecánica

Existen maquinas lavadoras especialmente diseñadas para el lavado de material. El proceso se realiza a través de una cinta transportadora, que incluye el lavado con agua fría, lavado con agua caliente, enjuague y secado. Estas maquinas forman chorros de agua y vapor que trabajan por fricción y generan turbulencias.

METODOS QUIMICOS

DETERGENTE ENZIMÁTICO

Son detergentes que contienen enzimas proteolíticas que disuelven la materia orgánica y están especialmente diseñados para el lavado del instrumental y equipo.

Se recomienda el uso de éste detergente ya que usar solo agentes germicidas sobre instrumental contaminado con materia orgánica, puede generar una falsa sensación de seguridad al operario.Ejemplo :  el cloruro de didecildimetil amonio cuaternario (DDAC). 

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RECOMENDACIONES

Todo el instrumental que ha tenido contacto con fluidos corporales debe ser inmediatamente descontaminado con detergentes enzimáticos.

El material debe ser sumergido en su totalidad, sin manipularlo en el detergente enzimático.

El tiempo de exposición en la solución depende del producto. Deben seguirse las recomendaciones del fabricante.

Después de retirado el instrumental del detergente enzimático la auxiliar lo cepilla bajo el agua retirando todos los residuos de detergente enzimático.

GLUTARALDEHIDO:

El tiempo requerido para desinfección de alto nivel con GLUTARALDEHIDO al 2% es de 20 minutos.

Recuerde siempre activar el producto con la sal antes de utilizarlo.

El sitio donde se utiliza debe ser ventilado. Los equipos a desinfectar deben estar completamente limpios. La

presencia de materia orgánica interfiere con la efectividad de los desinfectantes.

Los equipos a desinfectar deben estar completamente secos. La presencia de agua en los equipos diluye el desinfectante y baja su concentración mínima efectiva.

El recipiente a utilizar debe ser no metálico, tener tapa y rotularlo con la fecha en que se dispensa el producto y la fecha de vencimiento.

Debe garantizarse un excelente enjuague. Los estudios recomiendan enjuagar por lo menos durante tres minutos con agua: agua potable si es un elemento semicrítico; agua estéril, si es un elemento crítico o si el equipo va a serutilizado en un paciente inmunocomprometido.

HIPOCLORITO

Manipular con protección: guantes y tapabocas. El tiempo de duración de las soluciones cloradas varía según las

condiciones ambientales, de almacenamiento y empaque del producto y requieren de recipientes opacos no metálicos para su almacenamiento( entre 15° C y 29 °C)

Se inactiva por la luz y el calor, por materia orgánica y luego de seis horas de preparado.

No mezclar con detergentes pues esto inhibe su acción y produce vaporesirritantes para el tracto respiratorio.

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ETAPA .3 LAVADO

Procedimiento encaminado a disminuir el número de gérmenes de un área.

El personal que hace el lavado, debe utilizar el equipo de protección personal, tal como el gorro, tapabocas o mascarilla, protectores oculares y guantes.Asi como también la desinfección de los zapatos en un Pediluvio ( que puede

ser una alfombra mediana mojada con lejía , SYNPROLAM, etc.

Se realiza con:

Agua abundante Jabón Líquido Cepillo

ESTAPA 4 .PREPARACIÓN DEL PAQUETE

El instrumental debe quedar completamente libre de humedad para prevenir manchas, se recomienda secarlo con aire comprimido o con toallas desechables, el material mojado obstaculiza el proceso de esterilización.

Antes de empacar, revisar que no haya restos de material orgánico; si los hay, se debe devolver el elemento a desinfección y desgerminación.

Los materiales del empaque no deben tener efecto perjudicial sobre los elementos que contiene y deben brindar protección contra influencias externas y contaminaciones potenciales.

Las características que debe tener un material de empaque son las siguientes: Proveer una barrera adecuada contra microorganismos y sus vehículos Ser resistente al rasgado y corte

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Permitir la fácil presentación aséptica

Debe mantener la esterilidad hasta el momento del uso Se utilizará para el empaque los materiales aprobados por

investigaciones científicas y las entidades de vigilancia y control en salud Cada paquete debe estar marcado con fecha de preparación,

vencimiento de la esterilización, contenido del paquete, número de carga, nombre de quien lo empaca y sellado con cinta esterilómetro.

ETAPA.5 ESTERILIZACIÓN

Proceso químico o físico mediante el cual se eliminan todas las formas vivas demicroorganismos incluyendo las formas esporuladas, hasta un nivel aceptable de garantía de esterilidad.

Método:

Esterilización a vapor o calor Húmedo:

Proceso de esterilización que utiliza como agente esterilizante el vapor saturado a determinada temperatura bajo presión por un tiempo de exposición estipulado, estos parámetros se definen como críticos.

El Autoclave es el equipo utilizado para este proceso. Funciona por vapor de agua saturado (vapor que esta en contacto con el agua que lo genero), a presión superior a la normal.

Es el método usado por excelencia, el más eficaz y más económico. No tóxico. En la actualidad encontramos en el mercado una amplia disponibilidad de equipos. 

Posee alto poder de penetración; actúa sobre formas vegetativas y esporas.Depende de dos factores: 

- Temperatura- Tiempo de exposición 

A mayor temperatura menos tiempo de exposición necesitamos.Hay equipos de doble puerta, o de una puerta. Verticales u horizontales, automáticas o semiautomáticas. Construidas en acero inoxidable.

Autoclave

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Esterilización calor Seco:

Utilizamos para este método hornos o estufas, el agente esterilizante es el aire seco. Actúa por coagulación de proteínas y por oxidación de componentes celulares. Es económico, no toxico, no deja residuos.La actividad del calor depende de dos factores: - Temperatura- Tiempo de exposición

Y la efectividad depende de la difusión del calor. Se logra a:

-140°C por 3 horas.-160°C por 2 horas.-170°C por 1 hora.-180°C por 30 minutos.

La penetración del calor es lenta por lo que se requiere mayor tiempo de exposición. Se cuentan los minutos de esterilización a partir de que se alcanza la temperatura adecuada. Para enfriar se ventila con aire filtrado.AplicaciónSirve para sustancias oleosas o grasas, talco, vidrio, instrumental cromado, objetos que no pueden humedecerse.

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Limitaciones: Proceso lento con poco margen de seguridad. No se usa para textiles (peligro de incendio), ni para gomas, plásticos o agua.

Esterilizador a calor Seco

SEGUIMIENTO Y MEDICION DEL PROCESO DE ESTERILIZACIÓN

El correcto funcionamiento de los equipos y la efectividad del procedimiento deesterilización se rigen por las normas legales vigentes y se verifican mediante los siguientes controles:

Control del equipo:

Verifica el funcionamiento del autoclave por medio de la prueba Bowie Dick cada mes o cada vez que se repare el equipo.

Esta prueba debe hacerse sólo a las autoclaves que tengan bomba de vacío e indica si el esterilizador está funcionando correctamente. Primero se realiza un ciclo corto para calentar adecuadamente el esterilizador antes de realizar la prueba y posteriormente se coloca el paquete de Bowie Dick durante 4 minutos.La prueba es satisfactoria si la hoja de prueba desarrolla un color café oscuro o negro, lo que indica la penetración rápida de vapor, eliminación adecuada de aire y ausencia de filtración significativa del aire.

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Control de la carga:

Se deben utilizar indicadores que contengan esporas de Bacillus stearothermophilus.

Se utiliza un indicador biológico que contiene una cantidad determinada deesporas bacterianas inoculadas sobre papel de filtro y ubicadas dentro de uncultivo plástico con una ampolla de vidrio rompible que contiene el medio decultivo. El indicador es de color lila, la prueba es satisfactoria si conserva elmismo color, si se produce un cambio a color amarillo indica una falla que puede ser en el proceso de esterilización ó en el equipo.

Las pruebas con el Indicador Biológico deben ser efectuadas durante la instalación inicial del esterilizador a vapor y después de cualquier reparación mayor.

Esta prueba deberá realizarse cada 25 cargas o al menos una vez al mes y con cada carga que contenga un elemento implantable.

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