INTRODUCCIÓN

BACTERIOLOGÍA

Bacterias juegan un papel fundamental en la naturaleza y en el hombre: la presencia de una flora bacteriana normal es indispensable, aunque algunos son patógenos. Tienen un papel importante en la industria y permiten desarrollar importantes progresos en la investigación.

Se estudian bacterias y enfermedades que éstas provocan. Incluyendo la cadena epidemiológica (reservorio, mecanismos de transmisión, inmunidad, factores que hacen que existan más o menos defensas contra ellas). Las bacterias son seres microscópicos estudiadas mediante microscopios ópticos en preparaciones teñidas o sin teñir (en fresco) para estudiar su estructura o morfología, pero para estudiar su estructura interna se necesita un microscopio electrónico.

La especificidad del diagnostico, generalmente es el microbiólogo (bacteriólogo) quien determina con la precisión.

Por lo que es necesario contar con el profesional con los conocimientos para manejar eficientemente y eficazmente el diagnostico.

Identificar el extenso y variado número de microorganismos resulta complicado y difícil si no se cuenta con las técnicas y métodos específicos y accesibles.

Se espera que el material sirva de apoyo a los jóvenes en formación.

GENERALIDADES

Bacteriología: ciencia cuyo objeto es investigar las particularidades morfológicas y biológicas de las bacterias, la cual requiere para su estudio colonias de bacterias viviendo artificialmente en medios de cultivo.

Se ha considerado a la bacteriología como ciencia, ya que cumple con los pasos del método científico:

ObservaciónExperimentaciónHipótesisComprobaciónTeoría y Ley

Se le ha considerado ciencia también porque tiene sus propias técnicas:

EsterilizaciónPasteurizaciónMedios de cultivoTinción

Pasos importantes para poder estudiar a un microorganismo de nuestra importancia en particular.

Es por eso que se hace recordar que ciencia es: conjunto sistemático de conocimientos, métodos y conceptos con que el hombre describe y explica los fenómenos que observa para establecer principios generales que permitan predecir las relaciones entre estos y otros fenómenos.

Las bacterias son microorganismos unicelulares y procariontes, clasificados en el reino mónera. Comprende bacilos, cocos y vibriones.

Composición celular bacteriana .

PARED CELULAR: está constituida por tres capas 1.- lipoproteína, 2.- lipopolisacarida, 3.- mucopolimero, rodea la membrana citoplasmática y tiene un espesor de 100 a 800 A° la función que tiene es darle forma a la bacteria, no permite el paso de grandes moléculas y divide a las bacterias en dos grupos Gram (+) y Gram (-).

MEMBRANA CITOPLASMÁTICA: esta membrana se encuentra inmediatamente después de la pared celular y envolviendo al citoplasma, está constituida químicamente por lípidos (dos capas) y proteínas (una capa). Sus funciones son las de servir como barrera osmótica, ser semipermeable y producir energía por medio de la fosforilacion oxidativa, tiene un grosor de 50 a 70 A°.

NÚCLEO: este se encuentra vinculado al cuerpo de la bacteria presentándose como una zona difusa, no tiene membrana limitante. Químicamente está formada por ácidos nucleicos, ADN Y ARN y su función es mantener con vida a la célula bacteriana.

CITOPLASMA: se encuentra inmediatamente después de la membrana citoplasmática, es liquido-viscoso formado químicamente por enzimas, proteínas y metabolitos. Su función es transportar moléculas de un lugar a otro.

CAPSULA: es una capa viscosa externa a la pared celular que está formada químicamente por polisacáridos, poli péptidos y a veces de proteínas. Su función es amortiguar y proteger a la célula del medio externo, también contra la fagocitosis.

FLAGELO: órgano de locomoción, son apéndices que tienen un extremo libre y el otro atraviesa la pared celular insertándose a la membrana citoplasmática, están compuestos por proteínas.

De acurdo a esto las bacterias por sus órganos de locomoción se han clasificado en:

ATRICAS: no tienen flagelos

MORFOLOGIA

Se divide en macroscópica (cuando se observa a simple vista la colonia) y microscópica cuando se observa en un frotis por medio de un microscopio.

MACROSCÓPICA: estudia las colonias bacterianas con respecto a sus dimensiones, textura, color, forma, consistencia, superficie, borde y tamaño, Etc.

MICROSCÓPICA: estudia lo que se refiere a forma y agrupamiento, basándose en la constancia de la forma, tanto en los individuos como en las agrupaciones de las bacterias, se conocen 3 formas fundamentales:

a) Esferoidal (cocos): por su forma se clasifican en redondos, ovalados y lanceolados. Por su agrupamiento se clasifican en :

1. Único micrococos2. Pares diplococos3. Cadenas estreptococos4. Cúmulos estafilococos (racimos) sarcinas.

b) Cilíndricas o de bastón ( bacilos): por su agrupamiento se clasifican en:1. Único monobacilos2. Pares diplobacilos, tetrabacilos3. Cadenas estreptobacilos

c) Helicoidal o espiral (espirilos): los espirilos presentan también variedades según la forma y proporción entre el espesor y la longitud, así como el número de vueltas de la espiral.

1. Vibriones: son aquellos microorganismos ligeramente encorvados (como una coma) semejante a una fracción de espiral.

2. Espirilos: se componen de una o varias vueltas de espiral.

FACTORES AMBIENTALES DE CRECIMIENTO

Nutrientes: son las sustancias que un organismo requiere de su medio ambiente para la realización de las funciones vitales. Entre los elementos indispensables tenemos al carbono (C), hidrogeno (H) y oxigeno (O), los cuales el organismo no puede sintetizar.

pH: la mayoría de las bacterias crecen mejor a un pH de 6.8 a 7.4.

Temperatura: todo microorganismo tiene una temperatura mínima, una máxima y optima la cual hay que controlar.

Psicrofilicos 10-20 °C (+/-)

Mesofilicos 30-40 °C (+/-)

Termofilicos 50-60 °C (+/-)

Aireación: de acuerdo a sus necesidades de oxigeno las bacterias se clasifican en:

Aerobias obligadas: aquellas bacterias que requieren oxigeno molecular como aceptor terminal de electrones y no pueden crecer sin él.

Microaerofilicas: bacterias que requieren oxigeno como aceptor terminal de electrones para crecer pero no crecen bien en la superficie aerobia de un medio de cultivo, tampoco crecen en condiciones de anaerobiosis porque no son capaces de generar suficiente energía en ausencia absoluta de oxigeno.

Anaerobias: son aquellas que no requieren de oxigeno como aceptor terminal de electrones para crecer o realizar funciones metabólicas. Dentro de esta clase se distinguen varios tipos:

Anaerobias facultativas: bacterias capaces de obtener energía y crecer oxidativamente utilizando el oxigeno como aceptor final de electrones, o bien pueden crecer en ausencia de oxigeno obteniendo energía por vías fermentativas usando compuestos orgánicos como aceptores finales de electrones.

Anaerobias aerotolerantes: son bacterias que crecen mejor en ausencia de oxigeno, ya que no lo utilizan, pero en presencia de pequeñas cantidades de O2 y muy bajos potenciales redox pueden crecer.

Anaerobias obligadas: son bacterias no utilizadoras de O2 y crecen solamente en un rango de 3 a 4 % de O2 presentes en la atmosfera como máximo.

Anaerobias estrictas: son bacterias extremadamente sensibles al oxigeno y no son capaces de crecer con más de O2 presente.

CURVA DE CRECIMIENTO

Cada bacteria tiene su propia curva de crecimiento, esta nos permite saber el desarrollo que tiene las bacterias, esta consta de 4 etapas.

Fase de adaptación: el m.o. se adapta al medio

Fase logarítmica: máxima velocidad de reproducción de los m.o.

Fase estacionaria: ya no pueden desarrollarse más m.o.

Fase de decaimiento: disminuyen los m.o. porque mueren.

REPRODUCCIÓN DE LAS BACTERIAS

Las bacterias verdaderas se dividen por fisión binaria (los nutrientes que toma la célula del medio son convertidos en sustancias celulares, aumentando el tamaño y masa celular, de ahí empieza el proceso de fisión que es un estrechamiento en la parte media que divide a la bacteria en dos.

FENÓMENOS POR LOS CUALES LAS BACTERIAS REAFIRMAN O MODIFICA SU DISPOSICIÓN GENÉTICA

Esporulación: de una bacteria se forma una espora, y de una espora surge una sola bacteria, ocurre un reacomodo del material genético y se reproduce normalmente.

Reproducción sexual: una bacteria receptora y una donadora mezclan su material genético e inician la fisión binaria. Son de la misma especie. Característica que requiere la unión de dos.

Hibridación: una bacteria receptora y una donadora de especie diferente mezclan su material e inician la fisión, obteniéndose un híbrido. El producto tiene características de los dos, ocurre para bacterias patógenas o virulentas.

Recombinación: ocurre cuando dos células que no presentan diferencias sexuales recombinan su material par a iniciar la división. La unión de dos patógenas da como resultado otra más patógena.

Transformación: ocurre cuando el ADN separado de una célula entra en contacto con el núcleo de otra, de esta manera introduce a esta alguna propiedad de la primera.

Transducción: cuando un bacteriófago que parasita a una bacteria puede pasar a la otra y transferirle una propiedad genética de la primera.

Lisogenia: hay bacterias que pueden portar un bacteriófago sin ser destruidas por el cuándo una de estas cepas bacterianas se pone en contacto con otra cepa susceptible contamina a la última y la mayor parte de las bacterias mueren, pero quedan algunos que acomodan al bacteriófago en su interior y quedan en la situación de las primeras. A estas bacterias que tienen la propiedad de lisar a las otras cepas se les llama cepas liso génicas y al bacteriófago que portan se le conoce como fago temperante.

VARIACIÒN BACTERIANA

Fenómenos mediante los cuales las bacterias sufren cambios en sus características morfológicas, de cultivo y fisiológicas, en la formación de las colonias en la virulencia. Los organismos que se desvían de las características normales son llamados variantes.

FACTORES QUE INFLUYEN O SEÑALAN EL INICIO DE LA VARIACIÒN

Mutación o variaciones transmisibles: tienden a ser permanentes, parecen surgir súbdita y espontáneamente. Las variaciones de los tipos de colonias lisa y rugosa son las de mayor interés.

Variaciones-fluctuantes: con frecuencia ocurren cambios temporales en la morfología o la fisiología que por lo general se debe a las condiciones ambientales.

Formas de involución o células degeneradas: a parecen con frecuencia cuando las colonias envejecen en medios artificiales. Selección artificial: cuando las bacterias son cultivadas en condiciones constantes en cuanto a la composición de los medios, la temperatura y la humedad los organismos no tienden a variar, pero cuando varían los factores ambientales las bacterias sufren variaciones dentro de amplios límites, en su forma, su estructura, sus reacciones, sus actividades fisiológicas, etc.

Adaptaciones: las bacterias varían para adaptarse a nuevas condiciones, hay bacterias patógenas que pierden su virulencia cuando se cultivan en medios artificiales, pero vuelven a adquirirla a su paso por el organismo.

DIFERENCIAS GENERALES ENTRE LAS FORMAS S Y R

FORMA S (COLONIA LISA)

FORMA R (COLONIA RUGOSA)

Colonia con borde redondo regular, superficie lisa, convexa, brillante.

Colonia de borde irregular, superficie aplanada, desigual, granulosa.

Las células tienen una morfología normal y tienden a presentarse aisladas.

Las células tienden a tomar formas anormales y a quedar adheridas después de la fisión.

Los cultivos en caldo son uniformemente turbios.

Líquido claro con sedimento granuloso en el caldo.

Suspensión homogénea en solución salina.

La suspensión en solución salina aglutina espontáneamente y se sedimenta.

Por lo general las especies flagelares son móviles.

La movilidad es escasa o ausente.

Tienen capsula. Carece de capsula. Son buenos agentes

inmunizantes, conservan los antígenos somáticos (Ag O) y flagelares (Ag H); la aglutinación es en forma de flòculos.

Son agentes inmunizantes pobres, sólo tienen antígenos somáticos, la aglutinación es en gránulos.

Las especies patógenas son generalmente virulentas.

La virulencia está muy reducida.

Químicamente activas. Actividad química reducida.

Más común en condiciones de enfermedad activa.

Más común en convalecientes.

Sensibles al bacteriófago. Menos sensible al bacteriófago.

Resistente a la fagocitosis.

Susceptibles a la fagocitosis.

CLASIFICACIÓN DE LAS BACTERIAS TAXONOMICAMENTE

En la clasificación de un organismo, de modo que tengamos un medio de referirnos a él y diferenciarlo de otros organismos, se determinan los puntos generales empleados en la taxonomía:

1. Especie: grupo de organismos que poseen determinadas características individuales definidas que los distinguen de otros grupos de organismos.

2. Género: un grupo de especies relacionadas.3. Familia: un grupo de géneros relacionados.4. Orden: un grupo de familias relacionadas.5. Clase: un grupo de órdenes relacionados.

Las bacterias no pueden ser clasificadas únicamente sobre una base morfológica ya que muchas bacterias son morfológicamente semejantes, difieren ampliamente en otras propiedades. Las bacterias se clasifican sobre la base de sus propiedades bioquímicas, serológicas y patogénicas, por su morfología fisiología su metabolismo, su composición química y otras características distintivas que pueden servir como un medio de diferenciación.

LAS BACTERIAS EN BACTERIOLOGÍA MÉDICA

La bacteriología médica es la encargada de estudiar las bacterias capaces de causar enfermedades.

Nuestro objetivo es estudiar a las bacterias que causan daño en el humano. Es de importancia conocer que, todas las bacterias son capaces de causar daño dependiendo de las condiciones imperantes en el organismo, por ejemplo en personas inmunodeprimidas, las bacterias que de ordinario no causan daño son capaces de hacerlo en este tipo de personas.

Clasificación de las bacterias en virtud de nuestro objetivo

Clasificación de las bacterias en virtud de nuestro objetivo

SaprofitasSaprofitas

ParásitasParásitas

Son aquellas bacterias que viven normalmente en el organismo, a expensas de las materias en descomposición, pero ocasionalmente pueden causar enfermedades no producen daño estando en el medio ambiente.

Son aquellas bacterias que viven normalmente en el organismo, a expensas de las materias en descomposición, pero ocasionalmente pueden causar enfermedades no producen daño estando en el medio ambiente.

Son aquellas que viven a expensas del organismo; pueden distinguirse dos tipos: los comensales que se nutren de las sustancias alimenticias o de excreción y las patógenas cuya actuación sobre el organismo es de forma directa, nutriéndose de los tejidos.

Son aquellas que viven a expensas del organismo; pueden distinguirse dos tipos: los comensales que se nutren de las sustancias alimenticias o de excreción y las patógenas cuya actuación sobre el organismo es de forma directa, nutriéndose de los tejidos.

Es de vital importancia entonces definir que es patogenicidad y su acompañante, la virulencia.

Patogenicidad: capacidad de una bacteria para producir una determinada enfermedad.

Virulencia: es el grado de patogenicidad de una bacteria.

Hasta ahora cabe señalar que una bacteria puede provocar enfermedad en virtud de su diseminación en el organismo o bien por la producción de sustancias tóxicas para el organismo.

Para nuestro curso se perseguirán los siguientes objetivos:

Aprender las generalidades de las bacterias capaces de causarnos daño.

Conocer las partes del organismo de donde se pueden aislar las bacterias de importancia, ya sea en caso de enfermedad o como saprofitos.

Conocer las características de cultivo de los microorganismos de interés médico.

Conocer y aplicar las técnicas y los medios de cultivo óptimos para el aislamiento y estudio de las bacterias de importancia médica.

Aislar colonias de los m.o objetos de nuestro estudio.

Conocer y observar la morfología colonias macroscópicas de las colonias bacterianas de nuestro interés en los medios apropiados y mediante ello aprender a diferenciarlas entre sí y con otros m.o.

Realizar frotis y teñirlos para observar características tintoriales y morfología microscópica de los m.o de nuestro interés y comprobar la teoría, así como adquirir destreza en las observaciones en el laboratorio de las características mencionada.

“SON TODOS AQUELLOS QUE PRODUCEN PUS, PERO SE CONSIDERA EN ESTA CATEGORIA AQUEL QUE PRODUCE DAÑO PORQUE PRODUCE PUS”

INTRODUCCION

Bajo la denominación de cocos piógenos se agrupan las especies bacterianas con morfología cocácea (forma redondeada) y que producen pus. Dentro de este grupo se encuentran las especies patógenas de los géneros: Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus y Neisserias.

Diagnóstico de cocos piógenos grampositivos: Para el diagnóstico de las infecciones ocasionadas por estafilococos, estreptococos y enterococos las muestras pueden ser variadas y dependerán de la localización del proceso infeccioso. Entre las más comunes se encuentran:

Secreción de heridas y/o abscesos

Secreción nasal y/o faríngea

Sangre

Esputo

Secreción ótica

Líquido cefalorraquídeo

Orina

El primer paso del diagnóstico consiste en la realización de un examen directo de la muestra (frotis y coloración por Gram) para determinar las características morfológicas y tintoriales del agente causal. Paralelamente también se realiza una siembra en placas con Agar Sangre (primocultivo) para observar las características culturales del microorganismo y realizar posteriormente las pruebas fisiológicas específicas para la determinación de las especie.

ESQUEMA PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LOS COCOS PIÓGENES GRAM POSITIVOS

ESTAFILOCOCOS

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Cocos Gram(+) No esporulados pH 6-8 Catalasa (+) Fermentan manitol Anaerobios facultativos Al envejecer se vuelven Gram (-) Se agrupan en cúmulos de 6 racimos Temperatura optima de crecimiento 37 C Los patógenos producen hemolisinas, dermatocresina y enterotoxina

CLASIFICACION (no taxonómica)

Pigmentación S. aureus (amarillo dorado)de colonias S.albus (blanco)S. citreus (verde-amarillo)

Patogenicidad Incondicionalmente patógenosCondicionalmente patógenoNo patógeno

Enzimáticas Coagulasa (+) S. aureus (patógeno) Coaugulasa (-) S. epidermidis (flora normal)

MEDIOS DE CULTIVO:

Enriquecidos: agar gelosa sangre, agar gelosa chocolate.

Selectivos: agra staph 110, agar s y m.

Morfología colonial macroscópica:

Agar sangre:

Colonias circulares, convexa, opaca grisácea, chicas a medianas, los estafilococos patógenos con o sin hemolisis.Agar chocolate:

Colonias redondas, convexas, grisáceas, chicas a medianas.

Staph 110 o s y m:

Colonias redondas, agrupamiento en racimo, gram (+); imposible distinguir entre patógenas y saprofitos.

DIAGNOSTICO DEL LABORATORIO

Exudado faríngeo Exudado nasal Exudado otico Exudado conjuntival Exudado vaginal Exudado uretral Expectoración , lesiones y LCR

Estreptococcus

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Cocos gran (+)No esporuladosAnaerobios facultativosCatalasa (-)No capsuladosInmóvilesSe agrupan en cadenasLos patógenos tienen estreptolisinas, nucleasas, etc.

CLASIFICACIONES:

1.- de BROWN: basada en la acción que tienen los estreptococos sobre los glóbulos rojos (hemolisis)

Alfa hemolíticos o viridas: Str. salivarus Str. PneumoniaeEstreptococcus Beta hemolítico: Str. Piogenes, str. Agalactiae

Gama no hemolítico

La alfa hemolisis: se observa como la producción de un halo verdoso, pequeño alrededor de colonia; es resultado de hemolisis incompleta o ruptura, parcial de los eritrocitos.

La beta hemolisis se observa como la producción de un halo grande alrededor de la colonia; es resultado de hemolisis completa o destrucción total de los

eritrocitos.

La gamma hemolisis: es la no producción de hemolisis el medio no se altera.

De Lancefield: Es en base a los antígenos de superficie. (A, B, C, D, O). Los más patógenos son los del grupo A-D:

Streptococos pyogenes grupo AStreptococos agalactiae grupo BEnterococos grupo DClasificación académica:

Piogenes: desarrollo a 37.5 °C

Estreptococos Viridans: desarrolla a 37 y 45 °C

Lácticos Enterococos: desarrolla a 10, 37 y 45 °C

MEDIOS DE CULTIVOS

Crecen en medios enriquecidos: Agar gelosa sangre y Agar gelosa chocolate.

STREPTOCOCOS PYOGENES

Streptococcus pyogenes es una bacteria Gram-positiva que crece en largas cadenas. S. pyogenes muestra el Antígeno grupo A de la clasificación de Lancefield en sus paredes celulares y hace hemólisis del tipo beta-hemólisis cuando se cultiva en agar sangre, típicamente produce grandes zonas (halo) de beta-hemólisis, con completa rotura de eritrocitos y la recuperación de hemoglobina Por todo ello se le conoce también por estreptococo beta-hemolítico del grupo A. Puede ser encapsulado por lo que es resistente a la fagocitosis. Posee numerosas exotoxinas. Se trata de un microorganismo no esporulado (no produce esporas).

Forman pares o cadenas Producen grandes zonas de hemolisis (1 cm de diámetro) No solubles en bilis Producen estreptolisisna O y estreptolisina S

MORFOLOGÍA MACROSCÓPICA

Colonias pequeñas y medianas, redondas, convexas, color blanco grisáceo con hemolisis en agar sangre.

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO

Exudado faríngeo Exudado nasal Exudado conjuntival Exudado otico

Estreptococos viridansEs un término pseudotaxonómico para referirse un gran grupo de bacterias estreptococo comensales que pueden ser o bien del tipo α-hemolítico, que producen una coloración verde (de ahí el nombre viridans) en las placas de agar sangre, o bien del tipo no hemolítico.

Son los miembros más abundantes de la flora normal de vías respiratorias superiores.

Tienen importancia en la conservación de la salud de las mucosas. No se lisan.

Estreptococos del grupo B Se encuentran en la flora vaginal normal en 5-25 de res.

Estreptococos pneumoniae

Es un microorganismo patógeno capaz de causar en humanos diversas infecciones y procesos invasivos severos.

o Diplococos Gram (+)o Frecuentemente lanceoladoso Agrupados en pares o en cadenas cortaso Anaerobios facultativoso Se observan en esputos o puso Tienden a autolisarce espontáneamenteo La autolisis es acelerado por la bilis o desoxicolato sódico al 2 %.o Son solubles en bilis.

MORFOLOGÍA COLONIAL MACROSCÓPICA

Colonias pequeñas, aplanadas, lisas, producen alfa hemolisis al principio cupuliformes que desarrollan más tarde una meseta central con bordes elevados (elevación umbilicada).

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO

Expectoración Exudado nasal Exudado faríngeo Exudado otico

Neisserias

Neisseria es un género de bacterias, perteneciente a las proteobacterias, un gran grupo de bacterias Gram-negativas.

Las Neisseria son diplococos, que asemejan granos de café al ser observados con el microscopio óptico.1 El género incluye las especies Neisseria gonorrhoeae (llamada también gonococcus), causante de la gonorrea, y Neisseria meningitidis (llamada también meningococcus), una de las más comunes causas de meningitis bacteriana y agente causal de sepsis meningocóccica.

CARACTERÍSTICAS GENERALES:

Diplococos Gram (-) Forma de grano de café Aerobios que crecen en CO2 al 15 % Capsulados No esporulados Inmóviles Citocromooxidasa

CLASIFICACIÓN:

N. meningitides Patógenas N. Gonorrhoeae Intracelulares

NEISSERIAS N. lactamica N. xicca No patógenas N. subflavaExtracelulares N. mucosa N.flavescens N. cinérea N. flava N. perflava

MEDIOS DE CULTIVOS

Medios enriquecidos: Agar sangre, agar chocolate

Medios selectivos: Agar Thayer Martin, Martin Lewis y NYC

NEISSERIA MENINGITIDIS

La Neisseria meningitidis, también conocida por su nombre más simple de meningococo, es una bacteria diplocóccica heterótrofa gram negativa, de importancia en salud pública por su papel en la meningitis y otras formas de enfermedad meningocóccica. Sólo afecta a seres humanos ya que no existe ningún reservorio. Es la única forma conocida de meningitis bacteriana en causar epidemias.

Residen en vías respiratorias: orofaringe y nasofaringe. Crecen en ambiente anaeróbicos

Forman autolisinas

Temperatura optima 35 – 37 °C

Oxidasa y catalasa (+)

MORFOLOGÍA COLONIAL MACROSCÓPICA

Medios enriquecidos:

Colonias redondas, lisas, convexas.

Transparentes o ligeramente grises, pequeñas, sin hemolisis.

Medios selectivos:

Redondas, convexas, gris-azuladas, con superficie lisa y brillante de 1 mm de diámetro.

Frotis directo (tinción de Gram)

Se observan Neisserias típicas dentro de leucocitos PMN o extracelulares.

MUESTRAS

Sangre – LCR(Liquido cefalorraquídeo) Exudado nasofaríngeo

La neisseria gonorrhoeae se tratara más adelante, las Neisserias saprofitas son parte de la flora normal del tracto respiratorio humano.

CORINEBACTERIAS

Las corinebacterias están ampliamente distribuidas en la naturaleza encontrándose en el suelo, el agua, productos alimenticios y también en la mucosa y piel del hombre y animales.

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Bacilos rectos y curvos Gram (-)PleomorficosNo esporuladosBAAR (-)Aeróbicos y anaeróbicos facultativosInmóvilespH optimo 7.6 – 7.8Temperatura optima 33 – 37 °CHabitan en piel, mucosas, aparato respiratorio y urinario.

Clasificación

Variedad gravis Patógenas C. diphtheriae Variedad mitis Variedad intermedius

CORINEBACTERIAS C. renale No patógeno C. ulcerans Oportunista C. aquaticum Difteroides C. hofmannii C. xerosis C. pseudotuberculosis

MEDIOS DE CULTIVO

Enriquecidos: Agar sangre, agar chocolate.

Selectivos: Agar inclinado de Loeffler, agar de Tinsdale o Agar sangre telurito-cistina (CT)

Corinebacterium difhtheriae

El Corynebacterium diphtheriae, también conocido como bacilo de Klebs-Löffler es el bacilo causante de la difteria.

El C. diphtheriae es una bacteria Gram positiva, aerobia, catalasa positiva y quimioorganotrofa.

Este bacilo (con forma de bastón recto o ligeramente curvado), no esporulado, no capsulado y carente de movilidad, mide de 1 a 8 µm de largo y de 0,3 a 0,8 µm de diámetro y forman en cultivos agrupaciones ramificadas con la apariencia de ideogramas chinos.

MORFOLOGÍA COLONIAL MACROSCÓPICA

Agar sangre: Colonias gris-negro, pequeñas, bordes irregulares y secas.

Agar de loeffler: Colonias blanco-grisaceas, convexas, brillantes y pequeñas.

Medio con telurito: Colonias de gris-obscuro a negras, brillantes, convexas y bordes continuos.

MORFOLOGÍA MICROSCÓPICA

Bastoncillos rectos o ligeramente curvos, con polos engrosados, que tienden a juntarse paralelamente, que formando ángulos rectos entre si dan la apariencia de empalizada o letras chinas.

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO

Exudado faríngeo Secreciones de la pseudomembrana.

TINCIONES

Azul de metileno Método de Neisseria La tinción de Gram no se realiza, no es muy efectiva.

MICOBACTERIUM

Es el único género de la familia de las bacterias Mycobacteriaceae.

CARACTERÍSTICAS GENERALES

Bacilos débilmente Gram (+)BAAR (+)No esporuladosMicroerofilicosNo capsuladospH optimo de 7.4 – 7.8No producen toxinasCrecimiento lento ( 2-4 semanas)Contienen pared celular cerosa; con ácidos micólicosTemperatura optima de acuerdo al habitad.Residen en vías urinarias y respiratorias, pueden encontrarse en piel y animales.

CLASIFICACIÓN

M. leprae

Patógenas M. tuberculosis Micobacterium

Atípicas Grupo II: Escotocromogenas De Runyon Grupo III: No fotocromogenas Oportunistas Grupo IV: Crecimiento rápido

Las fotocromogenas que se cultivan en la obscuridad, al exponerlas a la luz intensa producen un pigmento caroteno amarillo. Este grupo comprende las especies de M. kansaii, M. marinum, M. simiae y M. szulgai cuando se incuba a 24 °C.Las escotocromogenas producen colonias pigmentadas de amarillo brillante; en algunas especies esta pigmentación puede aumentar ante la exposición a la luz. Este grupo comprende las especies de M. scrofulanceum, M. gordonae, M. flavescens y M. xenopi.

Las no fotocromogenas pueden producir pequeñas cantidades de pigmento amarillo pálido, pero este no se intensifica cuando la colonia se expone a la luz. Este grupo comprende las especies siguientes: complejo M. intracellullare-avium, M. malmoense, M. haemophilum, M.terrae, M. gastri complejo, M chromogenicum-triviale.

Las de crecimiento rápido muestran un crecimiento de colonias maduras al cabo de 3-5 días; algunos pueden producir un pigmento amarillo intenso; este grupo comprende estas y otras especies; M. fortuitum, M. chelonei, M.fallax, M. scrofulaceum.

MEDIOS DE CULTIVOMedio de Ltlwenstein-Jensen con verde de malaquita y otros medios selectivos a base de huevos enteros coagulados, sales definidas y harina de papas. M. fortuitum-chelonei crece en agar McConkey sin cristal violeta.

MORFOLOGÍA COLONIAL MACROSCÓPICA de M. tuberculosis colonias elevadas, enjustas, secas y duras, de color blanco a rosa pálido.

TINCIONES

Ziehl-Neelsen Kinyoun

Fluorocromo: Auramina o con ramina o sin él.

La más utilizada por tener mayor sensibilidad es la de Ziehl-Neelsen.

Frotis en fresco (Diagnostico presuntivo)

Se observan bastoncillos finos, rectos y delgados; el frotis debe ser grueso y se realiza el conteo de 100 campos.

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO

Esputo Raspado faríngeo Orina Biopsias LCR Heces

TOMA DE MUESTRA

Expectoración: el prime esputo de la mañana, sin saliva (3-5 muestras).Orina: La primera de la mañana y la ultima de la noche. (Mínimo 10 muestras).Sangre menstrual: Tomar muestras de sangre todos los días que dure la menstruación.

BORDETELLA

Bordetella es el género de pequeñas (0.2 - 0.7 µm) bacterias gram negativas del filo proteobacteria. Son organismos cocobacilos de difícil cultivo y, con la excepción de B. petrii, son aeróbicos obligados. Tres especies son patógenos humanos, B. pertussis, B. parapertussis y B. bronchiseptica; uno de los cuales (B. bronchiseptica) es también móvil.1 El género Bordetella recibe su nombre de Jules Bordet.

Las Bordetella son bacterias obligadas y sobreviven poco tiempo en el medio exterior, teniendo un tropismo peculiar por las vías respiratorias, aunque son flora saprófita de ciertos animales. Son bacterias cocobacilares, es decir son microorganismos que combinan una forma morfológica de bacilo (bastón), y de coco (esférica).

CARACTERISTICAS GENERALES

Cocobacilos gran (-)

Capsulados

Aerobios y anaerobios facultativos

No esporulados

No fermentadores

No produce indol

Temperatura optima 35-37 ºC

Ph de crecimiento 7.6

Catalasa (+)

Oxidasa (+)

No reduce nitratos

Se agrupan solo en pares

CLASIFICACION