Ana María Camacho Simarro - Google Sites · Tesis Doctoral Memoria que para optar al grado de...

UNIVERSIDAD DE JAÉN

Departamento de Ciencias de ¡a Salud

Area de Microbiología

Estudio de la Actividad Antimicrobiana y Composición Química en Plantas Vasculares del Suroeste de la Provincia

de Jaén (Península Ibérica)

2003

Tesis Doctoral

Memoria que para optar al grado de Doctor en Ciencias Biológicas presenta

Ana María Camacho Simarro

Trabajo realizado bajo ta dirección de:

Dr, Carlos Fernández Dr. Joaquín Altarejos Dra. Elena Ortega

Carcabuey

Cuadro de texto

Índice General

Carcabuey

Cuadro de texto

Bl. I. Medio físico y humano

Carcabuey

Cuadro de texto

Bl. II. Estudio etnobotánico

Carcabuey

Cuadro de texto

Bl. III. Análisis fitoquímico

Carcabuey

Cuadro de texto

Bl. IV. Actividad biológica

Carcabuey

Nota

Camacho Simarro AM. 2003. Estudio de la actividad antimicrobiana y composición química en plantas vasculares del suroeste de la provincia de Jaén (Península Ibérica). Tesis doctoral, Universidad de Jaén

RESUMEN:

CAMACHO SIMARRO, Ana Ma (2003). ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA Y

COMPOSICIÓN QUÍMICA EN PLANTAS VASCULARES DEL SUROESTE DE LA

PROVINCIA DE JAÉN (PENÍNSULA IBÉRICA). Tesis Doctoral. Universidad de Jaén.

• Nuestra zona de estudio (Campiña Norte) se encuentra ubicada al suroeste de

la provincia de Jaén, en la actual Depresión del Guadalquivir, con una

extensión aproximada de 1.277,38 km2 de terreno y una altitud que oscila

entre 300-400 m.

• En relación al catálogo etnobotánico elaborado, se recogen un total de 337

taxones entre plantas silvestres y cultivadas, aportando 474 denominaciones

que no figuran en la bibliografía consultada. Se lian registrado, además, 427

utilidades aparentemente novedosas según nuestras fuentes bibliográficas.

• Del conjunto de plantas analizadas a nivel fitoquímico pertenecientes a 30

familias botánicas, se detectaron la presencia de flavonoides, laninos

pirogálicos y catéquicos, saponinas esteroídicas y triterpénieas, alcaloides y

antraquinonas, resultando éste último grupo el menos abundante en las plantas

estudiadas.

• A nivel de aceites esenciales, se analizó la composición química de las

esencias de Juniperus oxycedrus sttbsp. oxycedrus, J, oxycedrus subsp.

macrocarpa, J. oxycedrus subsp. hadia, Dittríchia viscosa, Cistus clusii y C.

albidus, destacando los componentes mayoritarios identificados en cada caso.

• Con respecto a la actividad antimicrobiana presente en plantas, se estudió

dicha actividad en un grupo de plantas seleccionadas, partiendo de los

extractos alcohólicos y de los aceites esenciales. Los microorganismos frente

a los que se ensayó dicha actividad fueron Staphylococcus aureus. Bacillus

subíilis, Mycobacterium phlei, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coll. y

Candida albicans. Se pudo observar cómo los aceites esenciales resultaron ser

más activos y a concentraciones más bajas que los extractos.

AGRADECIMIENTOS:

Quiero expresar mis agradecimientos a todas aquellas personas que han contribuido al

desarrollo y feliz término de este trabajo, y muy especialmente a:

Mis Directores de Tesis, Dr. D. Carlos Fernández, Dr. Dña. Elena Ortega y Dr. D.

Joaquín Altarejos, por su orientación y apoyo incondicional.

Dra. Ana M" Fernández Ocaña, por su ayuda y por compartir todas las dificultades a lo

largo del desarrollo de este trabajo.

Dr. Gerardo Alvarez de Cienfuegos, que puso a nuestra disposición los medios

necesarios del Departamento en la realización de la parte experimenta!.

Matilde Carazo Montijano, por su inestimable contribución de los modelos de

distribución y tipos biológicos, y Trinidad Parras Padilla por su aportación en el apartado de

diagramas bioclimátícos.

Enrique Triano, por poder contar con sus ilustraciones de especies vegetales para

incluirlas en este trabajo.

Servicio de Información Geográfica de la Diputación de Jaén y a Andrés Payer, que nos

proporcionó los mapas de términos municipales y de usos de suelos de la provincia.

Los informantes y alumnos de Biología, por la información aportada para la elaboración

del catálogo etnobotánico.

Y en especial, a mi familia por su paciencia y su ánimo en los momentos más difíciles.

Gracias por estar a mi lado en todo momento.

MUCHAS GRACIAS a todos.

ILUSTRACIONES de Mapas Geológicos e H" Geológica de la Provincia de Jaén (BLOQUE I): Pedro Ruíz

Ortiz.

ILUSTRACIONES de Espacios Productivos y Datos de Producción de la Provincia de Jaén (BLOQUE I):

Emilio Arroyo López.

INTRODUCCIÓN, Pág. 1

I. INTRODUCCIÓN

1.1. JUSTIFICACIÓN DE DICHO ESTUDIO

El uso tradicional de determinadas especies vegetales ha constituido una práctica muy

antigua que, aún hoy, persiste en ciertas zonas de nuestra Comunidad. La diversidad de estos

usos ha estado condicionada a la región geográfica, al tipo de flora del lugar y,

fundamentalmente, a las necesidades comestibles, medicinales, industriales, de construcción o

ceremoniales de los habitantes de esa zona. Concretamente el tratamiento de afecciones

hepáticas, renales, respiratorias, estomacales, urinarias,... aprovechando el potencial de algunas

de estas plantas explica su importancia como parte de la cultura tradicional popular. Luego, es

indudable que las plantas han jugado un papel importante en la vida del hombre.

El presente trabajo se inicia con el estudio de la información etnobotánica obtenida a

partir de las entrevistas que se realizaron en la comarca de la Campiña Norte. La importancia de

la recopilación de dicha información se pudo comprobar claramente en los usos medicínales

populares de algunas de estas plantas. Así, a fin de identificar aquellas especies que pudieran

presentar principios activos frente a procesos infecciosos de naturaleza diversa, se procedió a la

obtención de los extractos alcohólicos y aceites esenciales sobre los que realizar análisis

fitoquímicos y de actividad antimicrobíana.

La existencia de diferentes principios químicos en las plantas tales como alcaloides,

flavonoides, azúcares, terpcnoides,... concede a las mismas un cierto potencial tóxico y/o de

resistencia a agentes infecciosos que, en muchos casos, ño ha sido aún comprobado. En el

campo de los aceites esenciales o esencias, dada su volatilidad y aromas característicos, en sí

mismos constituyen los elementos de comunicación química en las plantas, actuando a menudo

como sistema de defensa frente a agentes perjudiciales propios, como bacterias y hongos. Su

composición química, compleja y en algunos casos escasamente estudiada, responde a

combinaciones de monoterpenos y sesquiterpenes de origen biogenéíieo diverso.

Los trabajos en esta área de estudio se han ido sucediendo de manera continuada a nivel

mundial, encontrando artículos que hacen referencia a actividad antimicrobiana tanto en

extractos vegetales (RÍOS et al, 1987; ELEGAM1 et al., 2001) como en aceites esenciales

(JANSSEN et al., 1987). En el ámbito nacional la producción científica es mucho menor, aunque

se pueden destacar trabajos de "screening aníimicrobiano" llevados a cabo por grupos de

investigación de las Universidades de Granada y Valencia (MIRÓ, M., Tesis Doctoral, 1981; RÍOS

et al., 1987; RECIO et al, 1989). Concretamente nuestra Universidad desarrolló un trabajo de

Ana M" Carracho Si marro


colaboración con el Departamento de Biología Vegetal de la Universidad Complutense de

Madrid en el que se realizó un estudio sobre la composición química del aceite esencial de

Bupleurum gibrallaricum Lam. (Umbelliferae), descrito detalladamente en la Memoria Doctoral

"Estudio Etnobotánico en el Parque Natural de las Sierras de Cazorla, Segura y Las Villas,

Investigación química de un grupo de especies interesantes" de Fernández - Ocaña, A.M.

(2000).

Í.2. OBJETIVOS

A la hora de plantear este trabajo de investigación, establecimos los siguientes objetivos:

Recuperar el conocimiento popular acerca de los principales usos de especies vegetales

silvestres y cultivadas en la comarca de la Campiña Norte.

Elaborar un catálogo etnobotánico partiendo de la información obtenida de las

entrevistas llevadas a cabo en la zona de estudio.

•Jjj- Reflejar sobre dicho catálogo usos etnobotánicos nuevos o especies no mencionadas en

la bibliografía consultada.

Utilizar y desarrollar la metodología propia de la investigación etnobotánica,

perfeccionándola en la medida en que sea posible.

•jH. Realizar un estudio fítoquímico cualitativo sobre algunas de la especies de uso

etnobotánico en la zona y algunas otras no mencionadas en esas entrevistas pero que pudieran

resultar novedosas desde el punto de vista farmacológico.

Contrastar los resultados fitoquímicos obtenidos sobre las especies ensayadas con el uso

etnobotánico atribuido por los informantes a dichas especies.

Llevar a cabo una revisión bibliográfica completa sobre la composición química de las

especies etnobotánicas citadas, a fin de obtener el máximo de información sobre los principios

activos presentes responsables de sus virtudes farmacológicas.

& Completar el estudio desde el punto de vista químico de las especies Ditirichia viscosa,

Jumperus oxycedrus subsp. oxycedms, subsp. badia y subsp. macrocarpa, Cistus aíbidus y

Ana M* Carracho Simarro


Cistus clusii, a través del análisis de su aceite esencial y empleando la técnica combinada de

cromatografía de gases - espectrometría de masas. Las especies vegetales mencionadas han sido

seleccionadas en base a la nula o escasa información sobre la composición química de sus

esencias.

Seleccionar de entre especies etnobotánicas citadas en las entrevistas y no citadas,

aquellas plantas sobre las que se haya realizado previamente estudios fitoquímicos y de

composición química de sus esencias, para detemiinar su potencial biológico frente a procesos

infecciosos.

Utilizar en los ensayos de actividad antimicrobiana algunos microorganismos

representativos de los grupos Gram positivo y Gram negativo, fúngico y otros que pudieran

resultar de interés clínico.

Llevar a cabo la determinación cualitativa de la actividad biológica de las plantas

seleccionadas partiendo de sus extractos y aceites esenciales.

Determinar la concentración mínima inhibitoria de aquellos extractos y aceites

esenciales que hayan resultado ser activos en los ensayos cualitativos previos, poniendo a punto

la metodología específica y modificándola en el caso de que fuera necesario.

Intentar correlacionar los resultados obtenidos de actividad biológica cualitativa y

cuantitativa con los datos aportados sobre usos etnobotánicos y/o composición química de las

especies vegetales seleccionadas.

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Ana M" ('"amacho Símarfo

CONCLUSIONES, Pág. 1

MIL CONCLUSIONES

Teniendo en cuenta los resultados obtenidos a lo largo de este trabajo de investigación,

se han extraído las siguientes conclusiones:

1 • La comarca de la Campiña Norte (suroeste de la provincia de Jaén), se sitúa

en la actual Depresión del Guadalquivir y cuenta con una extensión

aproximada de 1.277,38 km de terreno de escasa altitud (300-400 m), y con

una sucesión escalonada de terrazas fluviales cuaternarias. Desde el punto de

vista climatológico, esta comarca quedaría encuadrada dentro de la

Superprovincia Mediterráneo-Iberoatlántica,

2. Las precipitaciones medias anuales se sitúan, en términos generales, en torno

a los 300-600 mm.

3. Según la correlación entre clima y vegetación establecida por MONTERO

BURGOS y GONZÁLEZ REBOLLAR (1974), en la Comarca de la Campiña

Norte la actividad vegetativa quedaría interrumpida por las altas

temperaturas, entre los meses de Junio y Septiembre, variando la

compensación de sequía estival entre Octubre y Diciembre. Así mismo, se ha

observado que no existe parada vegetativa debida a bajas temperaturas.

4. El espacio productivo de la Campiña Norte es eminentemente agrícola, con

más de la tercera parte de la superficie dedicada a olivar. La actividad

industrial se relaciona principalmente con la obtención del aceite de oliva,

dado el considerable número de almazaras y cooperativas existentes.

5. En relación al catálogo etnobotánico elaborado, en él se recogen un total de

337 taxones entre plantas silvestres y cultivadas, con y sin utilidad aparente.

6. De los 684 nombres populares asignados a las distintas especies, se aportan

474 denominaciones, que no aparecen en las fuentes bibliográficas

consultadas.

7. Dentro del catálogo etnobotánico se han registrado 427 utilidades de carácter

aparentemente novedoso, además de las contrastadas bibliográficamente.

Ana M* Camacho Simarro


8. Con respecto al perfil del informante, la proporción de hombres fue muy

superior (74%) a la de las mujeres (26%). En relación a la edad, la medía más

frecuente se situaba en tomo a los 60-70 años. En cuanto a la actividad

mayoritaria ejercida por los informantes, se centró en la agrícola (59%),

seguida en orden de importancia por la de ama de casa ( 18%).

9. Las familias botánicas más representativas incluidas en el catálogo fueron

Compositae (13,65%), Labíatae (7,42%), Gramineae (6,82%), Leguminosae

(6,23%), Ltliaceae (7,45%) y Cruciferae (4,15%).

10. Como uso etnobotánico mayoritario destacó el de usos medicinales (31%)

con 53 aplicaciones diferentes. Los siguientes en importancia fueron el grupo

de otros usos etnobotánicos (29%), el de alimentación en veterinaria (19%) y

el grupo de alimentación para el hombre, presente en un 12%. La proporción

de especies sin usos etnobotánicos aparentes representó sólo un 4%.

11. Con respecto a las formas de preparación o administración de las plantas

destacan, entre las 15 formas diferentes aportadas por los informantes, la de

infusión o tisana (37, 64%) junto a la de cocción (20,79%).

12. En cuanto a la presencia de los grupos fítoquímicos analizados en las 91

plantas seleccionadas y pertenecientes a 30 familias diferentes, los

flavonoides presentaron un porcentaje alto de ausencia (53%), aunque las

familias botánicas en las que mostraron mayor presencia fueron Compositae,

cuyas especies más representativas fueron Dittrichia viscosa, Klasea

ptntiatifida y Slaehelina dubia, Labiatae, con las especies Siderítis hirsuta.

Teitcrium fhiticaris subsp. fiíiticans y Thymus mastichina subsp. mastichina

y Cistaceae, destacando Ci s tus monspeliensis y C. salviifolius.

13. En el caso de los tamnos, los pirogálicos tuvieron un mayor porcentaje de

presencia en las plantas analizadas que los catéquicos, destacando la familia

Labiatae y, dentro de ella, las especies Origanum vulgare subsp. virens y

Siderítis hirsuta.

14. Se detectaron saponinas con una intensidad ligera en el 4 1 % de las plantas

analizadas. Las saponinas esteroídicas predominaron frente a las

Arta M" Camaetio Simarro

CONCLUSIONES, Páa:. 3

triterpénicas, constituyendo las familias Leguminosae (Cytísits scoparius

subsp. reverchonii y Ononis repens subsp. australi var. australi) y

Myrtaceae {Eucalyptus camaldulensis) los grupos en los que se detectaron

mayoritariamente las primeras, y la familia Labiatae, con las especies

Marrubium supinum, M. vulgare, Micromeria graeca, Tencrium fruücans

subsp. fruücans, T. pseudochamaepitys, Thymus masüchina subsp.

mastichina, T. orospedanus y T. zygis, la que se caracterizó por la presencia

de saponinas triterpénicas.

15. El 3 % de las plantas estudiadas contenían alcaloides en cantidad apreciable,

siendo la familia Leguminosae la más destacada, y dentro de ella las especies

Cytisus scoparius subsp. reverchonii y Retama sphaerocarpa. El 44% de las

plantas contenían alcaloides en cantidades pequeñas, representando ausencia

e intensidad media con porcentajes muy similares.

16. Finalmente, las antraquinonas constituyeron el grupo fitoquímico con el

mayor porcentaje de ausencias entre las plantas analizadas. Las familias

Labiatae, con la especie Thymus zygis subsp. gracilis, Leguminosae, con

Retama sphaerocarpa, y Myrtaceae, con Eucalyptus camaldulensis,

destacaron por sus altos contenidos en antraquinonas.

17. Con respecto a los resultados fítoquímicos obtenidos en diferentes años de

recolección, se ha podido comprobar cómo existen diferencias tanto en los

grupos detectados cómo en sus intensidades. Así, flavonoides, saponinas

esteroídicas y alcaloides fueron los principios activos que más

frecuentemente variaron entre las especies botánicas analizadas. Dichas

variaciones podrían ser atribuidas a diferentes condiciones

medioambientales.

18. En el caso de la especie Cistus laurifolius subsp. laurifolius, las diferencias

más notables tuvieron lugar a nivel del grupo de las antraquinonas que

variaron entre los períodos de recolección de 1994 y 1996, desde ausencia

hasta una intensidad de 2. Para la especie Juniperus oxycedrus subsp.

oxycedrus, los principios fítoquímicos que vanaron de forma más apreciable

fueron saponinas esteroídicas y saponinas triterpénicas. Phlomis purpurea

subsp. purpurea mostró diferencias a nivel de flavonoides, saponinas, taninos

y alcaloides, con mayor porcentaje de ausencias durante el período de 1994.

Ana M3 Camacho Si marro


Con respecto a la especie Thymus zygis subsp, gracilis, las diferencias entre

ambos períodos de recolección no fueron muy acusadas, excepto a nivel de

saponinas esteroídicas y antraquinonas. En la especie Sanguisorba verrucosa

las diferencias más acusadas surgieron con respecto a flavonoídes y

saponinas triterpénicas; para la especie Verbascum giganteum subsp.

giganteum se encontraron diferencias a nivel de flavonoides, saponinas y

alcaloides. En ambos casos, las muestras pertenecían a diferentes estados

fonológicos (floración y fructificación). Por último, la especie Bupleurum

gibraltarícum mostró diferencias patentes a nivel de flavonoides y saponinas

esteroídicas.

19. En los análisis por CG-EM de los aceites esenciales de hoja de Juniperus

oxycedrus subsp. oxycedrus, J. oxycedrus subsp. badia y J. oxycedrus subsp.

macrocarpa, el número total de compuestos presentes resultaron ser más de

111, identificándose 102, lo que representaba el 93,9-98,6%) del total del

aceite,

20. Como componentes mayoritarios en la subespecie oxycedrus se identificaron

a-pineno (41,3%) y a-felandreno (8,2%), detectando concentraciones

menores de mirceno, p-cimeno, limoneno, p-felandreno, oc-terpineol y óxido

de manoílo; en el caso de la subespecie badia estos componentes fueron oc-

pineno (5,1-28,1%) y germacreno D (3,4-24,5%), destacando también la

presencia de óxido de manoílo en dos ejemplares (21,0%, 11,2%). Con un

menor porcentaje de presencia se detectaron (Ej-cariofileno, (3-bourbeneno y

varios sesquiterpenes no identificados. Para la subespecie macrocarpa, los

compuestos principales fueron sabineno (26,5%) y a-pineno (22,5%), así

como concentraciones más bajas de p-cimeno (3,4%), y-terpineno (3,0%),

terpinen-4-ol (7,3%) y óxido de manoílo (2,6%).

21. La separación taxonómica entre la subespecie badia y las restantes la

marcaron los compuestos n-nonanal, c/s-sabinot, bomeol y una serie de

sesquiterpenes no identificados, entre otros. En el caso de la subespecie

macrocarpa, cabe citar como ejemplos de compuestos que representaron

dicha separación (Ej-P-ocimeno, a-tuyeno, sabineno y a-terpineno, entre

otros. Del estudio comparado de las muestras de las tres subespecies de J.

oxycedrus puede concluirse que existen suficientes diferencias en


CONCLUSIONES, Pàg, 5

composición que apoyan la subclasificación taxonómica existente,

debilitando la opinión de quienes consideran que los individuos de porte

arbóreo de la subespecie badia son sólo ejemplares más desarrollados de la

subespecie oxycedrus.

22. En el análisis por CG-EM del aceite esencial de parte aérea de Dittrichia

viscosa se han identificado 63 componentes que representan el 55,8-59,0%

del total de los aceites estudiados. Se han caracterizado los aceites de dos

poblaciones en plena época de floración. Los componentes mayoritarios de

una de ellas fueron fokienol (38,8%), (£j-nerolidol (7,1%), a-cadinol ( l ,9%),

S-cadineno (1,7%) y T-cadinol más T-muurolol (1,1%). En cuanto a los

componentes mayoritarios de la segunda población, éstos fueron (E)-

nerolidol (24,5%), seguido en orden de importancia por fokienol (14,4%),

cubebol (2,2%), 1,8-cmeol (2,1%), T-cadinol más T-muurolol (1,8%) y a-

cadinol (1,8%). Por consiguiente, una de las muestras se caractenzo

principalmente por la presencia de fokienol, mientras que otra por la

presencia de (%)-nerolidol.

23.

24.

Como resultado del estudio de los dos componentes mayoritarios de los

aceites esenciales de ambas poblaciones de DUtrichia viscosa a lo largo de

las épocas de prefloración, floración temprana, plena floración y

fructificación, se observó: (a) que los niveles de fokienol aumentaban hasta

un 41,5% durante el período de floración, para descender posteriormente en

plena fructificación, en el caso de la población rica en tal componente, y (b)

que los niveles de f£>nerol,dol aumentaron hasta un 61,2% a lo largo del

período de prefloración, para disminuir hasta un 24,5% en el de floracôn.

para la otra población. Los rendimientos más altos en ambas poblactone* se

registraron durante el período de floración.

En el análisis por CG-EM del aceite esencial de la parte aérea de Gsius

clusii se identificaron 51 componentes que representaban el 46,7% del tota

del aceite. Entre estos componentes destacaron como mayoritanos borneo!

(7 8%), canfeno (4,3%), calameneno (3.5%) Y óxido de P-canofüeno (3,4%),

junto a otros desconocidos, entre los que se encuentran los picos a tR 31,35

(7 7%) y tR 33,53 (7,1%). Cabe destacar que los compuestos de naturaleza


monoterpénica predominaron sobre los de naturaleza sesquiterpénica,

representando el 32% del total del aceite.

25. En el caso de Cislus albidus, el análisis por CG-EM del aceite esencial de su

parte aérea permitió identificar un total de 26 componentes que

representaban el 6,01% del total del aceite. Entre los compuestos

mayoritarios identificados destacaron (3-bourbeneno (1,7%), ar-curcumeno

(0,6%)), aromadendreno (0,6%) y germacreno D (0,5%), junto a otros de

naturaleza desconocida con picos a tR 37,17 (5,3%), tR 38,82 (3,5%), tR 35,31

(3,4%) y tR 33,66 (2,3%)- Tanto en el caso de Cistus clusii como en el de C.

albidus, la presencia de una importante fracción de compuestos no

identificados nos permite concluir la conveniencia de continuar con el

estudio del aceite esencial de ambas especies.

26. Tras medir la actividad antimicrobiana cualitativa y cuantitativa, a nivel de

extractos y aceites esenciales, podemos afirmar que los aceites esenciales han

resultado ser mucho más activos y a concentraciones más bajas que los

extractos.

27. Con respecto a la actividad antimicrobiana cualitativa de los extractos

metabólicos ensayados en un total de 60 especies pertenecientes a 23 familias

botánicas, 7 mostraron dicha actividad frente a Pseudomonas aeruginosa, 11

frente a Staphylococcus aureus, 4 frente a Escherichia coli, 10 frente a

Bacillus subtilis, 14 frente a Candida albicans y, finalmente, 29 extractos

resultaron ser activos frente a Mycobacterium phlei.

28. El mayor número de actividades bacteriostaticas y bactericidas se registró

frente a Mycobacterium phlei y, sobre todo, en la familia de las cistáceas

(Cistus monspeliensis). Por orden de importancia, destacaron también las

anacardiáceas en las que se detectaron una considerable actividad

antimicrobiana.

29. En el caso de los aceites esenciales, se realizaron ensayos cualitativos previos

en 26 especies pertenecientes a 8 familias botánicas. De los resultados

obtenidos, 2 muestras presentaron actividad frente a Pseudomonas

aeruginosa, 19 frente a Staphylococcus aureus, 9 frente a Escherichia coli,


CONCLUSIONES, Pás, 7

22 frente a Bacillus subtilis, 12 frente a Candida albicans y 23 lo hicieron

frente a Mycobacterium phlei.

30. Los microorganismos Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis y

Mycobacterium phlei mostraron mayor susceptibilidad frente a la actividad

antimicrobiana de extractos y aceites esenciales, mientras que Pseudomonas

aeruginosa, Escherichia col i y Candida albicans resultaron ser más

resistentes. Mycobacterium phlei fue el microorganismo frente al que mayor

número de actividades bacteriostáticas y bactericidas se detectaron.

31. Tanto en los aceites esenciales como en los extractos se observaron

diferentes resultados para los distintos períodos de recolección y para las

distintas fracciones de una misma planta ensayada.

32. En cuanto a la actividad antimicrobiana cuantitativa en los extractos

alcohólicos analizados, sólo 2 de ellos presentaron una MIC a las

concentraciones de 0,0125 y 0,031 g/1; a la concentración de 0,25 g/1 se

registraron 14 extractos; 25 extractos mostraron actividad para la

concentración de 0,5 g/1 y, 87 extractos exhibieron dicha actividad para una

concentración de 1 g/1.

33. Con relación a la actividad antimicrobiana en los aceites esenciales

ensayados, 6 mostraron tal actividad para una concentración de 2 x 10 g/1,

3 para la concentración de 7,8 x 10"3 g/1, 45 para la concentración de 0,0156

g/1, 8 aceites para la concentración de 0,0313 g/1, 18 para una concentración

de 0,0625 g/1, 35 para una concentración de 0,125 g/1, 34 para la

concentración de 0,25 g/1, 30 para la concentración de 0,5 g/1 y, finalmente,

51 aceites para la concentración de 1 g/1.

34. Las familias Anacardiaceae, Cistaceae y Umbelliferae fueron los grupos que

mayor actividad antimicrobiana mostraron, destacando ésta última a nivel de

aceites esenciales.

35. Con respecto a la correlación entre resultados antimicrobianos, composición

química y usos etnobotánicos, se ha podido observar cómo aquellas especies

entre las que se detectaron flavonoides, sapomnas o antraquinonas,

mostraron tal actividad principalmente frente a Staphylococcus aureus.

Ana M* Carracho Si marro


Bacillus subtilis, Candida albicans y Mycobacterium phlei. Los usos

etnobotánicos asociados más frecuentes fueron afecciones de diversa

naturaleza (digestivas, respiratorias, de garganta, dermatológicas) y

aplicaciones de carácter vulnerario.

Ana M" Camacho Simarro

BIBLIOGRAFÍA, Pég. i

IX. BIBLIOGRAFÍA

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Ans M* Camacho Simarro

ÍNDICE. Pág. 4

XI. INDICE

I. INTRODUCCIÓN

LI. JUSTIFICACIÓN DE DICHO ESTUDIO 1

1.2. OBJETIVOS.... ........2

BLOQUE I

II. MEDIO FÍSICO

ILL SITUACIÓN Y LÍMITES 1

11.2. HISTORIA GEOLÓGICA 3

11.3. LITOLOGÍA Y EDAFOLOGÍA 6

11.3.1. LITOLOGÍA 7

¡1.3.2. EDAFOLOGÍA 8

I1.4.GEOMORFOLOGÍA. 17

ILS. CLIMATOLOGÍA 19

11.5.1. ÍNDICES CLIMÁTICOS 19

11.5.2. PRECIPITACIONES Y TEMPERATURAS 28

11.5.3. DIAGRAMAS BiOCLJMÁTICOS DE MONTERO DE BURGOS Y GONZÁLEZ

REBOLLAR 31

11.6. VEGETACIÓN Y FLORA 34

III. MEDIO HUMANO

III.L ANTECEDENTES ARQUEOLÓGICOS E HISTÓRICOS 36

HI.2. LA POBLACIÓN. EVOLUCIÓN DEMOGRÁFICA 38

IIIJ. UTILIZACIÓN DEL TERRITORIO 40

111.3.t. AGRICULTURA 40

ill.3.2. GANADERÍA 42

tll.3.3. ACTIVIDAD INDUSTRIAL 42


tHMCRHfrS

BLOQUEO

IV. ESTUDIO ETNOBOTÁNICO EN LA COMARCA HE LA CAMPIÑA NORTE

IV.I. OMGEN BE LA ETNOSOTÁN1CA. Slí SITUACIÓN ACTUAL „.™™™TO,„,rai,,„_ 1

IV.2. METODOLOGÍA ETNOBOTÁN1CA iW..,™.,„m.i.,..„...,.,..„,.,„,_..„,„„.,.™„„„„_i^,.., 2

ÍV.2.Í- ELECCIÓN DE LA ZONA DE ESTUDIO . ,...,....-........,„,.,,.,.,„.,. 2

1V.2-2. RECOGIDA DE DATOS 3

IV.2.3. HERBORIZACIÓN DEL MATERIAL VEGETAL ..,..„,,„.,„.. 8

IV.2.4. ELABORACIÓN DEL CATÁLOGO 9

IV.2.S-BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA Î2

ÍV.2.6. ÍNDICES ETNOBOTANÏCOS „..,..,.„ !3

IV3. R E S U L T A D O S Y D I S C U S I Ó N ....™„„„„..,...„««.,.«„....„.„»........... í««».......™»»...,..» M

IV.3.I. CONSIDERACIONES SOBRE EL CATÁLOGO.. ....... - i*

ÍV.3.2.CATÁLQGO ETNOBOTÁNICO M

IV.3.3. fNDICE PLANTA UTILIZADA-PLANTA REFERIDA (PUPR) 332

IV.3.4. ESPECTRO DE USOS „,...,„,, , ,.,....„ 333

IV.3.5. ÍNDICE DE FITOETNOENDEMICIDAD (IFEO), 335

IV.3.6. ÍNDICE DE FITOETNOALOCTONEIDAD (IFEA) ,„,.„.„„„ 336

IV.3.7. ÍNDICE DE ETNOFITONIMIA ,..„.... 336

1V.3.8. OTROS RESULTADOS DE INTERÉS 336

BLOQUE III

V. ANÁLISIS FITOQUÍMICO

V.l. ANTECEDENTES ..................... .„.........„....„...„......„.„„,................„„«.„...„„ 1

V.2. MATERIAL Y MÉTODOS FITOQUÍMICOS „.....„....„„..„.....„.„„....„....-....„.«. 3

V.2.I. PREPARACIÓN DEL MATERIAL VEGETAI ,,.. 3

V.2.2. TÉCNICAS DE DETERMINACIÓN CUALITATIVAS EMPLEADAS ..„ 3

V .3 . R E S U L T A D O S Y DISCUSIÓN .........,..,..„.,.,.......„„......„...„„.„,.,.,...„,...,„,„„,........„.,«,„„.,. 7

V.3.1. PROPIEDADES QUÍMICAS Y FARMA< OLOOJCAS PRI Sf-Nf !A i \ Af ULNAS FAMILIAS BOTÁNICAS 7

Atu M" ! "miî;ii.hu '-.<rniiFiv

INDICE. Pág. 6

V.3.2. RESULTADOS FITOQUÍMICOS Y DISCUSIÓN 15

V.3.3. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN AÑOS DIFERENTES 29

V.3.4. CORRELACIÓN CON USOS ETNOBOTÁNICOS 32

VI . D E T E R M I N A C I Ó N D E L-A C O M P O S I C I Ó N Q U Í M I C A D E A C E I T E S

E S E N C I A L E S

VI. l . A N T E C E D E N T E S DEL G É N E R O Juníperas 43

VI. 1.1. COMPOSICIÓN QUÍMICA DE Juniperus oxycedrus L. subsp. oxycedrus 43

VI. 1.2. COMPOSICIÓN QUÍMICA DE Jumpems oxycedrus L. subsp. macrocarpa (Sibth. &

Sm.)Bal.I 58

VI. 1.3. COMPOSICIÓN QUÍMICA DE Juniperus oxycedrus L. subsp. badia H. Gay 61

VI.1.4. COMPOSICIÓN QUÍMICA DE OTRAS ESPECIES DEL GÉNERO Juniperus 61

VI.2. A N T E C E D E N T E S D E L G É N E R O Dittrichia 80

VI.2.I. COMPOSICIÓN QUÍMICA DE Dittrichia viscosa (L.) Greuter 80

Vl.2.2. COMPOSICIÓN QUÍMICA DE OTRAS ESPECIES DEL GÉNERO Dittrichia 85

V U , A N T E C E D E N T E S DEL G É N E R O Cistus 86

Vl.3.1. COMPOSICIÓN QUÍMICA DE Cistus albidus L 86

VI.3.2. COMPOSICIÓN QUÍMICA DE Cistus clusiiL. 86

Vl.3.3. COMPOSICIÓN QUÍMICA DE OTRAS ESPECIES DEL GÉNERO Cistus 88

VI.4. M A T E R I A L Y M É T O D O S 94

Vl.4.1. PREPARACIÓN DÉLAS MUESTRAS 94

Vi.4.2. TÉCNICA DE OBTENCIÓN Y CONSERVACIÓN DE LOS ACEITES ESENCIALES

94

VI.4.3. CROMATOGRAFÍA DE GASES 95

Vl.4.4. CROMATOGRAFÍA DE GASES-ESPECTROMETRÍA DE MASAS 95

VI.5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 98

Vl.5.1. ANÁLISIS DE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LOS ACEITES ESENCIALES DE Juniperus oxycedrus subsp. oxycedrus, J. oxycedrus subsp. badia y J. oxycedrus subsp. macrocarpa 98

Ana M* Carracho S imano

INIMCE. Kg. ?

Ví.5.2. ANÁLISIS DE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL ACEITE ESENCIAL DE Dittrichia viscosa , ! 12

V1.53. ANÁLISIS DE LA COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LOS ACEITES ESENCIALES DE Cistus clusiiyC. alhidus ,. 120

BLOQUE IV

Vil . ACTIVIDAD BIOLÓGICA EN EXTRACTOS Y ACEITES ESENCIALES

VTÍ.l. ANTECEDENTES ANTIMICROBIANOS EN PLANTAS ..,...........«„..,..«.....,.,......,.„. í

VII.2. MATERIAL Y MÉTODOS ......................................................... 4

VÜ.2.L SELECCIÓN Y PREPARACIÓN DEL MATERIAL VEGETAL , 4

VIl.2,2. MICROORGANISMOS SELECCIONADOS !)

VII.2.J. MEDIOS DE CULTIVO 9

Vií.2.4. ACTIVIDAD ANTÏ MICROBIANA CUALITATIVA: TEST DE DIFUSIÓN EN AGAR

10

Vü.2.5. ENSAYOS CUANTITATIVOS: MÉTODO DE DILUCIÓN EN AGAR 11

VII.3. .RESULTADOS Y D I S C U S I Ó N 12

VII.3.1. ENSAYOS CUALITATIVOS 30

VII.3.2. ENSAYOS CUANTITATIVOS 3?

VI1.3.3. CORRELACIÓN DE LOS RESULTADOS ANTIMICROBIANOS CON USOS ETNOBOTÁNICOS Y COMPOSICIÓN QUÍMICA .., 39

VIII. CONCLUSIONES

IX. BIBLIOGRAFÍA

X. ÍNDICE ETNOBOTÁNICO

XI. ÍNDICE

Ana M" Catracho Si marro

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