Aislamiento de Bacterias de Salinas

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Aislamiento de Bacterias de Salinas Karen Cordova 988188043 [email protected]

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Diapositivas sobre bacterias halófilas

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  • Aislamiento de Bacterias de Salinas

    Karen Cordova988188043

    [email protected]

  • Hay algn ser capaz de vivir en

    el mar Muerto?

    microbios amantes de la sal

    280g por litro de agua

  • Las Salinas marinas

    Son ambientes de transicion, agua de

    mar estancadas, que se evaporan lentamente

    por la accion del sol

    Salinas de Tarquinia, Italia

  • Color rojo de las lagunas saladas

    A medida que la salinidad se aproxima a la concentracion de sales que permitan el crecimiento de microorganismos extremos, las aguas se vuelven de color rojizo,

    debido al aparecimiento masivo de arqueas halofilas (la coloracion rojiza proviene de los carotenoides y otros pigmentos.

    lago hillier australiaSalina de Huacho,Peru

  • Bacterias de las Salinas

    Son bacterias capaces de vivir en ambientes

    salinos, ofrecen una multitud de

    aplicaciones en varios campos de la

    biotecnologia.

    -tipos de bacterias salinas

    -Halotolerantes (5g/l)

    - Halofilos (extremos > 200g/l, debiles, 5 g/l moderados 100gl 200g/l)

    Halobacterium, un

    arquea halofilo que

    habita en las aguas del

    mas muerto.

  • Clasificacin

    A los microorganismos que soportan

    condiciones extremas, ya sea de

    temperatura, de presin o de salinidad se

    les suele llamar extremfilos.

    gneros microbios salinas como

    Halomonas, Volcaniella, Halovibrio

    http://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Halomonashttp://www.dsmz.de/microorganisms/bacterial_nomenclature_info.php?genus=VOLCANIELLA&show_genus_info=1http://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Halomonas

  • Bacterias cuadradas

    Haloarcula quadrata. da Kessel & Cohn, 1982).

    stas bacterias fueron observadas por primera vez por Walby en el 1980.

    En el 2004 cuando se identifico una sepa denominada HBSQ001 propuso el

    nombe Haloquadratum walsbyui (oren,1999 ;Walsby,2005)

    2 x 2 micras

  • arquea de Walsby

    Se dise un medio de cultivo que contena cloruro sdico y cloruro magnsico muy concentrado, tal y como ocurre en los cristalizadores.

    A ese medio se le aadieron nutrientes para que el microorganismo pudiera crecer. Pero esos nutrientes deban de estar presentes en muy baja concentracin, porque de lo contrario comenzaban a crecer otro tipo de microorganismos que, al modo de las malas hierbas, impedan el crecimiento de la Bacteria de Walsby.

    En el fondo, el proceso de cultivar un microorganismo en el laboratorio es muy parecido al de intentar cultivar una planta silvestre en un invernadero. Un largo proceso de ensayo y error hasta que uno encuentra las condiciones ideales en las que ese ser vivo crece.

  • para qu podran ser tiles estos

    microorganismos?

    Las bacterias halofilas moderadas han

    demostrado ser un grupo de extremofilos

    con un gran potencial biotecnologico,

    Producen: enzimas, biopolimeros o

    solutos compatibles

    . presentan propriedades fisiologicas que

    facilitan su explotacion comercial.

  • Enzimas

    Varias Hidrolasas (amilasas,proteasas,nucleasas,

    etc)

    Nucleasa H producida por micrococcus Varians.

    Amilasa producida por halomonas meridiana

    micrococcus varians

  • Polmeros

    De gran importancia en la industria petrolera.

    Gracias a sus propiedades surfactantes y emulsionantes pueden aumentar la eficacia de los procesos de extraccin de crudo del subsuelo, incrementando la viscosidad del agua que se inyecta alrededor de las bolsas, disminuyendo as su tensin superficial.

    Las bolsas de petrleo suelen presentar una elevada salinidad, lo que hace especialmente interesante la utilizacin directa de bacterias halfilas moderadas productoras de biopolmeros.

    H. Eurihalina produce Exopolisacarido,util en proceso de biorremediacion o en la industria petrolera.

  • Solutos compatibles

    Las bacterias halofilas moderadas acumulan en su citoplasma

    determinados compuestos organicos de bajo peso molecular,

    que no interfieren con el metabolismo celular solutos compatibles.

    Costituyen la base fundamental de la tolerancia a la sal de estos

    microorganismos.

    Compuestos osmoprotectores.

    Ectoina, hidroxiectoina _ efecto protector sobre las enzimas labiles como la lactato dehidrogenasa y la fructoquinasa.

    Cepas de marinococcus

    Cepa de H.elongata (bacterial milking)

  • Bacterial milking

    Consiste en someter a las bacterias a cambios

    bruscos en la salinidad del medio de cultivo.

    Con un primer shock hiperosmotico se

    induce la acumulacion citoplasmatica de los

    s.c, porsteriormente se elimina la sal del

    medio, de manera que la bacteria expulsa el

    contenido citoplasmatico, con los solutos

    compatibles para compensar el shock

    hipoosmotico.

  • Biodegradacin de residuos

    Degradacion de los residuos toxicos, las bacterias halofilas constituyen una importante

    alternativa a los tratamientos microbiologicos convencionales en aquellos casos en los

    que estos sean ineficaces, como son los procesos industriales que generan aguas

    residuales hipersalinas. Esto sucede, por ejemplo, en la produccion de diversas

    sustancias quimicas como los pesticidas, determinados productos farmaceuticos y herbicidas, y los

    procesos de extraccion de petroleo y gas.

    Oren y Col demostraron la degradacion de varios compuestos aromaticos nitro-sustituidos a

    concentraciones salinas de 13 a 14 ppm por las bacterias Halanaerobium praevalens y Orenia

    marismortui.

    En el 1992, Woolard e Irvine describieron la utilizacion de una biopelicula de bacterias halofilas

    moderadas aisladas del gran lago saldo, Utah (EE.UU) e identificada provisionalmente dentro del genero

    Alteromonas , es capaz de degradar varios compuestos toxicos organofosforados.

    Posteriormente se aislaron otras cinco de los mas importantes contaminantes industriales: Cadmio,

    cobre, cinc,cromo y mercurio.

    Estas cepas, resistentes a metales pesados, podrian emplearse en procesos de

    destoxificacion o como bioindicadores de ambientes hipersalinos contamidados

  • Alimentos Fermentados

    Elaboracion de la salsa de soya

    intervienen determinadas especies del

    genero Tetragenococcus, los granos de

    trigo y soya se resuspenden en agua con

    NaCl al 19ppm y se dejan durante 9

    meses a la oscuridad. T.halophilus se

    emplea como indicador de fermentacion,

    pudiendo alcanzar una densidad de (diez a

    la octava) UFC/ml en la salsa de soya,

    que contiene una concentracion

    aprocimadamente 3M de NaCl

    Tetragenococcus,

  • Otros usos potenciales

    Aun estan siendo objeto de estudio:

    ---La eliminacin de fosfatos de ambientes hipersalinos.

    ---procesamiento de residuos hipersalinos provenientes de la industria del aceite de oliva

    ---produccin de enzimas de interes en biologa molecular, antibioticos, o carotenoides de inters para la industria alimentaria,

    ----en la recuperacin de los suelos ridos o semiaridos, caracterizados por condiciones de estrs osmtico (por salinidad,desecacin o frio) mediante la obtencin de plantas transgenicas capaces de tolerar altas concentraciones de sal, gracias a los genes implicados en la osmotolerancia de las bacterias halofilas moderadas. (Transferencia de los genes de sintesis de ectoina de H elongata a cultivos de tejidos de Nicotiana tabacum que presentaron una significativa mayor tolerancia al estres osmotico)

  • Metodo de filtracion

  • Terreno de cultivo

    Frmula (en gramos por litro)

    Instrucciones

    Extracto de levadura

    2.5Suspender 23,5 g en un litro de agua destilada. Calentar a ebullicin con agitacin constante. Distribuir. Esterilizar durante 15 minutos a 121C.

    Triptena 5.0Glucosa 1.0

    Agar 15.0

    pH final: 7.0 0.2

  • Preparacin del terreno de coltura

    PCA , NaCl, agua destilada

    Sal

  • Tenemos que tener en

    consideracin

    Salinidad

    Temperatura

    pH

    Oxigeno disuelto

    Nutrientes

    mar

    400g/l

    35g/l

    40g/l

    80g/l

    200g/l

    cristalizador

  • Aislamiento de bacterias halofilas

  • Placas en crecimiento

  • Gracias por su atencin