ACIDO URICO-4

LABORATORIO CLÍNICO – HOSPITAL OBRERO N°6 “Dr. JAIME MENDOZA”

C.N.S.

ACIDO URICO POE AcU-00-04

POE 00-04

Área: Química Sanguínea. Pág. 1 de 4

1. ObjetivoEstablecer el procedimiento que debe seguirse para la determinación de Ácido Úrico.

2. Alcance A todas las solicitudes médicas que así lo requieran.3. Responsable Bioquímica (o) del área y Técnicos de turno.

4. DefinicionesMétodo Enzimático para la determinación de Ácido Úrico por reacción de punto final en muestras de suero y orina.

5. Desarrollodel procedimiento

5.1 Fundamento: El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno. En presencia de la peroxidasa, el peróxido de hidrógeno reacciona con el 3,5-dicloro-2-hidroxibenceno sulfonato (DHBS) y la 4-aminoantipirina, formando el cromógeno antipirilquinonimina. La intensidad del color rojo formado es directamente proporcional a la concentración del ácido úrico en la muestra. El esquema de reacción es el siguiente:

UricasaÁcido úrico+O2+H2O ---------- Alantoína + CO2 + H2O2

Peroxidasa2H2O2+ DHBS + 4-aminoantipirina----------- Antipirilquinonimina +4H2O 5.2 Incertidumbre de la medición.

- Tiempo: 15 minutos.- Interferencias:

Uso de plasma: producen resultados falsamente disminuidos. Hemólisis. Lipemia: Triglicéridos >1800 mg/dL. Bilirrubina >19 mg/dL.

5.3 Muestra requerida. Suero y orina. Muestra obtenida en ayuno de 8 a 12 horas de ayuno. Volumen aceptable: 1 - 3 mL.

5.4 Reactivos. Reactivo de trabajo. Estándar: 6 mg/dL.

5.5 Materiales. Pipetas de Pasteur. Gradilla. Tubos de hemólisis para espectrofotómetro. Marcador indeleble, bolígrafo rojo y azul. Pipeta automática (20 uL). Tips/puntas nuevas.

Redactado por: Dr.

Revisado por: Dr.

Aprobado por:Dr.

Fecha de redacción: Fecha de inicio: Fecha de aprobación:

VERSIÓN ORIGINAL: ACTUALIZACIÓN Nº: FECHA DE VIGENCIA: FECHA DE VIGENCIA:


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Pipetas graduadas de vidrio / pipeta automática (1 mL) Guantes. Reloj o timer. Contenedores para material de desecho. Jabón líquido para asepsia de manos.

5.6 Equipos. Centrifuga. Baño maría a 37°C. Espectrofotómetro. Vórtex.

5.7 Instrucciones detalladas.a. Preparación de reactivos. Reactivo listo para su uso. La preparación de los reactivos se realizará de acuerdo a instrucciones

del fabricante (inserto del reactivo).

b. Procedimiento. En cinco tubos de hemólisis para espectrofotómetro marcados como B

(Blanco), S (Estándar), C1 (Control 1), C2 (Control 2) y D (Desconocido) colocar: 20 uL de St, C y D respectivamente.

Llevar los tubos al Baño maría y añadir 1 mL de reactivo de trabajo a cada tubo.

Incubar durante 5 minutos a 37°C. Leer en espectrofotómetro a 505 nm, llevando a cero con el blanco de

reactivo. Registrar los resultados en los registros respectivos. El color de la reacción final es estable durante 15 minutos. Para la determinación de Ácido úrico en orina, se debe homogeneizar y

separar 10 mL, ajustar el pH entre 7.0 y 9.0 con NaOH al 5% y calentar 10 minutos a 56°C para disolver los cristales de urato y ácido úrico. Luego se debe diluir la orina 1:10 con agua destilada. Multiplicar el resultado obtenido por 10.

c. Valor de referencia.Valor normal: Hombre: 2,5 – 7,0 mg/dL.

Mujer: 1,5 – 6,0 mg/dL.

d. Validación de los resultados. Emplear controles comerciales (Normal y Patológico). Determinación por duplicado.

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Elaboración de Gráficas de Levey-Jennings. Análisis e interpretación de las Reglas de Westgard.

e. Interpretación de los resultados.Resultados posibles:

El aumento de la concentración sérica del ácido úrico es mucho más frecuente y clínicamente más significativo que su disminución. Entre las etiologías más comunes de la hiperuricemia se cuentan la falla renal, cetoacidosis, exceso de lactato y el uso de diuréticos. La ingesta dietética de alimentos ricos en purinas (carnes, vísceras, vegetales leguminosos), provocan una leve hiperuricemia, así como una excreción urinaria de ácido úrico significativamente incrementada.La gota es un trastorno del metabolismo de las purinas o de la excreción renal del ácido úrico caracterizado por: hiperuricemia, precipitación de urato monosódico en forma de depósitos (tofos), ataques clínicos recurrentes de artritis y nefropatía y a menudo nefrolitiasis.

f. Bioseguridad. Uso correcto de la indumentaria de trabajo (Mandil, guantes, gafas, gorro,

barbijo, etc.) necesarias para realizar el procedimiento o análisis) de acuerdo a instrucciones del Manual de Bioseguridad.

Eliminar los reactivos y envases de reactivos de acuerdo a Normas y Manual de Bioseguridad.

Eliminar el material biológico de acuerdo a Normas de Bioseguridad.

g. Informe.Se informará de acuerdo a formato del Laboratorio (Número designado a la Solicitud Médica, N° de Asegurado, Código de Beneficiario, Médico Solicitante, Unidad Sanitaria, Nombre y Apellido del Paciente, Servicio, Cama y fecha del análisis).El resultado se informará en cifras enteras con un decimal seguido de la unidad de análisis.

6. Formulario y registro

El registro se realizará en Registros secundarios, luego éstos se registrarán en el Registro General de Química Sanguínea para su posterior informe.

7. Referencia Todd, Sanford, Davidsohn. Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el Laboratorio.Norma Boliviana de Bioseguridad. 2012.Manual de Bioseguridad de Área de Química Sanguínea.Insertos de Kits (LabTest, Wienner, Stambio).

8. Anexos Instrucciones para la Toma de Muestra.9. Lista de - Jefatura (original).

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distribución - Responsable de área (copia controlada).- Operador técnico (copia controlada).

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