DETRMINACIN DE ACIDO URICO INTEGRANTES DEL EQUIPO 4: CASTRO VALDIVIA ABIGAIL FLORES LAGUNAS URSULA MENDOZA CASANOVA JESSICA RAMIREZ VILLARREAL NANCY HERNANDEZ DE JESUS DIANA VALDEZ PEA ROSA MARIA DE LA ROSA HERNANDEZ ALEJANDRO

QUE ES? El acido rico es el producto final del catabolismo de las purinas (adennina y guanina) y de los cidos nucleicos; se produce por la descomposicin de las purinas, sustancias qumicas que entran al torrente sanguneo durante la digestin de los alimentos o debido a la descomposicin normal de algunas clulas del cuerpo.

En el suero se encuentra en forma de uratode sodio, pero la porcin mas importante de este urato se encuentra en los liquido corporales fuera del sistema vascular. Los riones filtran la mayor parte del cido rico en el glomrulo, reabsorbindose por el tbulo y lo eliminan del organismo a travs de la orina.

Su excrecin urinaria diaria esta influida por la ingesta diettica y por el ritmo del catabolismo endgeno.

El sexo y la edad influyen en la concentracin del acido. El urato circulante lo podemos encontrar de 2 formas: a) ENDOGENO. Proviene de la destruccin normal de los tejidos del organismo. b) EXOGENO. Que proviene de la destruccin normal del metabolismo alimenticio.

VA A AUMENTAR CUANDO:- Lisis tumoral (leucemias, linfomas, neoplasias)

- Ingesta de frmacos (citotxicos)

- Dietas ricas : carnes, leguminosas, mariscos - Obesidad: Hipertrigliceridemia

EEXCRECIN:

0,6 GR/24HSPurinas ingeridas

Proviene Recambio de nucletidos purnicos Eliminacin: - Va intestinal (10%) - Va renal(90%): FG-Reabsorcin TCPSecrecin TCD Y Reabsorcin postsecrecin.

BIOSNTESISENDO Y EXONUCLEASAS

cidos nucleicos

NUCLEOSIDASA

InosinaXANTINA OXIDASA

ADENOSINA DESAMINASA

Adenina

Xantina

Acido rico + O2- 0Radical Superxido

METABOLISMO DEL CIDO RICOLos uratos son la forma ionizadaypredominan en el plasma, lquido extracelular y lquido sinovial, donde el 98% delos mismos se encuentran en forma de urato mondico. El plasma se encuentra saturado para una concentracin de 6.8mg/dL a 37C,en concentraciones superiores se encuentra sobresaturado de uratos y existe la posibilidad de precipitacin de cristales de uratos

El cido rico es ms soluble en la orina que en el agua debido a la presencia de urea, protenas, y mucopolisacridos.

EL METABOLITO FINAL DEL CATABOLISMO DE LAS BASES PRICAS.Por la hidrlisis de los ac. nuclicos ingeridos (20% procede de la dieta)

2 fuentes de purinas

Por destruccin del tejido del propio organismo. (80% de reserva es endgeno).

La sntesis de uratos vara en funcin del contenido de purina en la dieta y de las velocidades de biosntesis ,degradacin y ahorro de purinas.

La eliminacin renal del cido rico se realiza mediante 4 mecanismos:

OBJETIVO DE LA PRACTICA Aplicar el manejo adecuado de la tcnica para la determinacin de cido rico en una muestra biolgica. Establecer los valores de referencia de cido rico y comparar con el valor de nuestra muestra problema a analizar. Definir cuales son las principales patologas que se presentan si tenemos valores altos o bajos de cido rico en una muestra biolgica.

FUNDAMENTO DEL MTODOEl cido rico es oxidado por la uricasa a alantona y perxido de hidrgeno (2H2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4-aminofenazona (4-AF) y 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma un compuesto rosceo:

La intensidad de quinonimina roja formada es proporcional a la concentracin de cido rico presente en la muestra.

TIPOS DE MUESTRA SUERO O PLASMAEstabilidad 3-5 das a 28C y 6 meses a 20 C.

ORINA (24 hrs)Estabilidad de 3 das a temperatura ambiente a PH-8.

MATERIAL

EQUIPO

REACTIVOSReactivo 1 Fosfatos pH 7.4, 50 mM Sol. Tampn 2-4 DCPS, 4 mM Reactivo 2 Uricasa 60U/L Vial Enzimas Peroxidasa 660 U/L Ascorbato-Oxidasa 200 U/L 4 - Aminofenazona 1Mm Standard Sol. c. rico 6.0 mg/ dL Suero o plasma del paciente

1 pipeta graduada de 1mL. Espectrofotmetro con filtro de lectura de: 520 nm. 1Micropipeta de 50 L. Centrfuga

Piseta con agua desionizada o destilada 2Celdas de plstico de 3 ml

Termobloock

5 Tubos de vidrio de 12 X 75Puntas para micropipeta. Gradilla.

PROCEDIMIENTO

C. NORMAL,C.PATOLOGICO,ESTNDAR, BLANCO Y PROBLEMA

TECNICALongitud de onda: . . . . . . . 520 nm (490-550) Temperatura : . . . . . . . . . . 25/30/37C Paso de luz : . . . . . . . . . 1 cm paso de luz Ajuste del cero con blanco de reactivo.BLANCO RT (mL) Patrn (L) Muestra (L) 1,0 --------PATRON 1,0 25 ----MUESTRA 1,0 ----25

Mezclar e incubar 5 minutos a 37C o 10 min. 15 25C Leer la absorbancia (A) del patrn y la muestra, frente al blanco de reactivo. El color es estable como mnimo 30 minutos.

CLCULOSConc. Muestra mg/dL = D.O. Muestra / D.O. Estndar X Conc. estndar Estndar= 6.0 mg/dL mg/dL x 59 485 = mol/L SUERO O PLASMA (A)MUESTRA (A) PATRON X 6 (Conc. Patrn)=mg/dL de acido rico en la muestra.

ORINA 24H (A) MUESTRA(A) PATRON X 6 X VOL. (dL) orina/24 H = mg/24 H acido rico.

FACTOR DE CONVERSIN: mg/dL X 59,5 = mol/L.

Valores de referenciaSuero o plasma Mujeres Hombres Orina 2,5 6,8 mg/dL 3,6 7,7 mg/dL 149 405 mol/L 214 458 mol/L

250 750 mg/24H 1,49 4,5 mmol/24H

PATOLOGIASHIPERURICEMIA:La hiperuricemia asintomtico es un dato de laboratorio y no una enfermedad. Representa una cifra elevada de cido rico en plasma en un individuo determinado y en ausencia de cualquier otra sintomatologa.

NEFROLITIASIS

NEFROPATA AGUDA

NEFROPATA CRNICA