86976772 CC Reactivos
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CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y
SUERO DE COOMBS
Q.B.P. MA. LUISA TAVIRA MENDOZA
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
Las pruebas de control de calidad se realizan para determinar las especificaciones mínimas que deben tener los sueros hemoclasificadores ABO y Rh así como para la antiglobulina humana ( suero de Coombs ).
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
¿Quiénes establecen estos criterios?Existen normas que establecen cuales son las
especificaciones que deben cumplirse en estos reactivos.* NOM-003-SSA2-93* NOM-017-SSA1-93 (ABO)* NOM-018-SSA1-93 (Rh)* NOM-019-SSA1-93 (Suero de Coombs)
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
* Anti-A* Anti-B* Anti-AB* Anti-D* Antiglobulina Humana
¿ Lectinas ?- Potenciadores:
¿ Albúmina ?¿ LISS ?¿ Bromelina ?
Reactivos a evaluar:
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
¿Cuales son los criterios para valorar y aceptar estos reactivos?
Se revisarán los siguientes aspectos:
FisicoquímicosTécnicos
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
Aspectos Fisicoquímicos:* Nombre del producto* Lote y fecha de caducidad* Temperatura de almacenaje* Volumen* pH* Olor y color del suero * Color de la etiqueta, rosca y bulbo* Instructivo
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
Suero Color del suero
Color de la etiqueta
Color del bulbo
Anti-A Azul Azul Azul
Anti-B Amarillo Amarillo Amarillo
Anti-AB Ámbar Blanco Blanco
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
Aspectos Técnicos:
* Avidez
* Especificidad
* Título ( potencia )
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
Avidez:
- Es la fuerza global de la interacción entre dos moléculas.
- Es el tiempo en que se inicia la aglutinación.
- La avidez depende tanto de la afinidad como de la valencia de las interacciones.
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
IgM tiene 10 sitios de unión idénticos que podrían unirse a 10 determinantes antigénicos en una superficie celular dando lugara una interacción polivalente con una mayor avidez.
Tiempo promedio de avidez
Anti-AA1A2
A1BA2B|
2212
15201530
Anti-BB
A1BA2B
A1A2B
R1rR2r
D débil
311
151515
ANTI-AB223
152015
Anti-D331
303030
Antisuero Grupo sanguíneo Tiempo de inicio de aglutinación (seg)
Número muestras a probar
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
Especificidad:Capacidad de un Ac para reconocer un Ag distinguiendo pequeñas diferencias en la estructura química.Cada antisuero se hace reaccionar con las diferentes células y no debe existir aglutinación inespecífica.
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
REATIVO
CEL. A1
CEL. A2
CEL. B
CEL. O R1r rr
Anti-A POS POS NEG NEG
Anti-B NEG NEG POS NEG
Anti-AB POS POS POS NEG
Anti-D POS NEG
Control Rh
NEG NEG
Lectina A1
POS NEG NEG NEG
Lectina H ? ? ? POS
Coombs
E+ E-
POS NEG
ESPECIFICIDAD
Antígenos Eritrocitarios
Ag A
Tipo 2
Ag A
Tipo 3
Ag A
Tipo 4
Ag H
Grupo A1
Ag A
Tipo 2
Ag H
Grupo A2 Grupo B
Ag H
Ag B
Ag H
Grupo O
Ag A
Tipo 4
Ag A
Tipo 3Ag H
Ag A
Tipo 2
Ag B
Ag A
Tipo 2Ag B
Ag H
Grupo A1B Grupo A2B
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORESABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
TÍTULO:La concentración de un Ac específico en el
suero para un Ag en particular se calcula determinando cuántas diluciones seriadas del suero se pueden realizar antes de que se dejen de observar uniones.Mide la capacidad del antisuero para
reaccionar con sus respectivas células (Ag).
TÍTULOS MÍNIMOS QUE DEBEN TENER LOS DIFERNTES ANTISUEROS
Antisuero Grupo sanguíneo Título mínimo
Anti-AA1A2
A1BA2B
256128128
8
Anti-BB
A1BA2B
25664
128
Anti-ABA1A2B
25664
256
Anti-A1 Lectina A1A1B
6464
Anti-H LectinaA2 8
CoombsE+ 32
Anti-Rh R1R2 64
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
Potencia:Mide la fuerza del antisuero con la que es
capaz de reaccionar con los Ags respectivos.
A partir del resultado de las aglutinaciones en la titulación, se anota lectura por grado de aglutinación de 0 a 4+, a cada uno de estos se les asigna un valor numérico (computo).
CONTROL DE CALIDAD DE SUEROS HEMOCLASIFICADORES ABO, Rh Y SUERO DE COOMBS
Lectura
Aglutinación Puntos
4+ Total en un solo cúmulo grande 12
3+ Grandes aglomerados con pocos eritrocitos libres10
2+ Gran cantidad de conglomerados pequeños con número moderado de eritrocitos libres 08
1+ Conglomerados definidos pero finos (cúmulos de 20 eritrocitos o menos) 05
+/- Eritrocitos dispersos que pueden contener ocasionalmente algún conglomerado pequeño 02
- Los eritrocitos se mueven libremente. No hay conglomerados visibles 0
LA CALIDAD EMPIEZA DESDE QUE AMANECE Y YO AUN SE EN QUE
MOMENTO SE TERMINA
¿USTEDES SI?
RECORDEMOS QUE SOMOS
LO QUE HACEMOS
TÉCNICAS PARA EL CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS DE INMUNHEMATOLOGIA
* Avidez:Se determina usando la técnica en placa y a
temperatura ambiente. La aglutinación se debe iniciar en el tiempo máximo que se especifica para cada subgrupo, contando a partir del momento en que se pone en contacto suero y eritrocitos.
Las pruebas de avidez se realizarán de rutina a los antisueros en uso diariamente antes de empezar a trabajar y a una muestra de antisuero de cada nuevo lote.
TÉCNICAS PARA EL CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS DE INMUNOHEMATOLOGIA
Eritrocitos al
10% ( ABO )
40% ( Rh ) calentar previamente la placa a 37-45°C
1 gota eritrocitos+
1 gota de antisuero
Mezclar en un área de ≈ 25mm diam.
Rotar la placa de lado a lado
Nota: Tomar el tiempo con un cronometro desde el momento de la mezcla hasta
el momento de inicio de la aglutinación.
AVIDEZ
TÉCNICAS PARA EL CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS DE INMUNHEMATOLOGIA
El producto debe estar libre de aglutininas diferentes a las especificadas en la etiqueta y libre de partículas, de efectos o sustancias indeseables.Se debe realizar diariamente a los antisueros de rutina, antes de empezar a trabajar y a una muestra de cada nuevo lote.
ESPECIFICIDAD
A1 A2 B O R1r rr
Eritrocitos 2-5%
ReactivoAnti-A
Anti-AB
Anti-B
Anti-DControl RhSuero de Coombs
E+ E-
- Colocar igual volumen de la suspensión de eritrocitos y del reactivo.
- Centrifugar 30 seg a 3400 rpm.
- Leer. Los reactivos deberán contener únicamente las aglutininas especificadas en la etiqueta.
- El Rh se llevará hasta Coombs.
+ +
+ + +
- -
- - + -
-+ -
- -+ -
Especificidad
Título (Potencia):
La titulación se hará a una muestra de antisuero de cada nuevo lote.
La titulación se realiza siempre por duplicado y los resultados deberán ser reproducibles. Si existen diferencias en las lecturas de 2 tubos con la misma dilución, deberá repetirse la prueba.
TÉCNICAS PARA EL CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS DE INMUNHEMATOLOGIA
TÉCNICAS PARA EL CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS DE INMUNHEMATOLOGIA
1:1 1:2 1:641:4 1:321:161:8 1:128 1:256
Realizar diluciones seriadas del Antisuero con SS
50μl del reactivo diluido+
50μl de eritrocitos ( 2 – 5 % )
Mezclar y
30 seg 3400 rpm
Títulación( ABO Y Rh )
1:512
TÉCNICAS PARA EL CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS DE INMUNHEMATOLOGIA
Título ( Potencia )Resuspender suavemente las células y bajo iluminación apropiada, leer macroscópicamente y sin demora ( los negativos se llevaran hasta Coombs )
El título es el recíproco de la mayor dilución del suero que da una lectura de 1+.
Ej. Si la dilución es 1:512 el título es de 512.•• •
DILUCIONES
Ej. 1
Eritrocitos al 5%5 ml E + 95 ml SS
5 ml E --------- 95 ml SSX --------- 3 ml SS
3 x 5 95
X = 0.15 ml E
Ej. 2
Eritrocitos al 10 %10 ml E + 90 ml SS
10 ml E --------- 90 ml SSX --------- 2 ml SS
2 x 10 90
X = 0.22 ml E
Ej. 3
Eritrocitos al 40 %40 ml E + 60 ml SS
40 ml E --------- 60 ml SSX --------- 3 ml SS
3 x 40 60
X = 2.0 ml E
Ej. 4
Eritrocitos al 0.8 %0.8 ml E + 99.2 ml SS
0.8 ml E --------- 99.2 ml SSX --------- 3 ml SS
3 x 0.8 99.2
X = 0.02 ml E
DILUCIONES