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InmunologaPublicacin oficial de la Sociedad Espaola de Inmunologawww.inmunologia.org Copyright 2008 ERGON CREACIN S.A. Reservados todos los derechos. Ninguna parte de esta publicacin puede ser reproducida, transmitida en ninguna forma o medio alguno, electrnico o mecnico, incluyendo fotocopias, grabaciones o cualquier sistema de recuperacin de almacenaje de informacin, sin la autorizacin por escrito del titular del Copyright. Publicacin trimestral.

COMIT DIRECTORJ.M. Rojo (Madrid), Director Ejecutivo, . Corb (Madrid), A. Ferreira (Santiago de Chile), M. Fresno (Madrid), M. Lpez-Botet (Barcelona), F. Lozano (Barcelona), I. Melero (Pamplona), A. Nieto (Montevideo), F. Snchez-Madrid (Madrid).

COMIT EDITORIALJ. Alberola-Ila (Pasadena), P. Aparicio (Murcia), J. Aramburu (Barcelona), C. Ardavn (Madrid), A. Arnaiz-Villena (Madrid), J.A. Brieva (Cdiz), E. Carosella (Paris), E. Cuadrado (San Sebastin), M. de la Fuente (Madrid), M. del Val (Madrid), G. Dighiero (Paris), P. Engel (Barcelona), G. Ercilla (Barcelona), E. Fernndez-Cruz (Madrid), G. Fontn (Madrid), T. Gallart (Barcelona), F. GarcaCozar (Cdiz), F. Garrido (Granada), M.L. Gaspar (Madrid), A. Gay (Palma de Mallorca), C. Gelp (Barcelona), R.F. Gonzlez-Amaro (Mxico), . Gonzlez (Vigo), D. Jaraquemada (Barcelona), C. Lpez-Larrea (Oviedo), M. Lpez-Trascasa (Madrid), J. Madrenas (New London), A. Madrigal (Londres), R.A. Margni (Buenos Aires), E. Martnez-Naves (Madrid), N. Matamoros (Palma de Mallorca), F. Merino (Bilbao), F. Mollinedo (Salamanca), E. Osinaga (Montevideo), P. Patio (Medelln), J. Pea-Martnez (Crdoba), G. Rabinovich (Buenos Aires), J.R. Regueiro (Madrid), M. Rincn (Burlington), J.L. Rodrguez-Snchez (Barcelona), J. Sancho (Granada), M. Santamara (Crdoba), L. Santos-Argumedo (Mxico), R. Solana (Crdoba), J.L. Subiza (Madrid), M.L. Toribio (Madrid), C. Vilches (Madrid), R. Vilella (Barcelona), J. Yage (Barcelona).

ERGON CREACIN S.A. Arboleda 1, 28221 Majadahonda (Madrid) Publicacin autorizada por el Ministerio de Sanidad como Soporte Vlido: Ref. N 288 ISSN: 0213-9626 Depsito legal: M-53681-2002

SECRETARA EDITORIALMaria Luisa del Pozo, Departamento de Inmunologa, Centro de Investigaciones Biolgicas, CSIC, Ramiro de Maeztu, 9, E-28040 Madrid, Espaa. Tel: +34 91 837 3112; Fax: +34 91 536 0432; E-mail: [email protected]

Arboleda 1, 28221 Majadahonda (Madrid) Telf: 91 636 29 30 Fax: 91 636 29 31 e-mail: [email protected] DE SUSCRIPCIONES Miembro SEI: Gratuitos Mdicos: 42,07 euros MIR y Estudiantes: 30,05 euros Organismos y empresas: 66,11 euros Ejemplar suelto atrasado: 17 euros Precio extranjero: 200 $ Incluida en las base de datos EMBASE, ndice Mdico Espaol e IBECS.

SECRETARA DE REDACCINMaria Rosa Sarrias i Forns

InmunologaPublicacin oficial de la Sociedad Espaola de Inmunologawww.inmunologia.org

SUMARIOPROGRAMA CIENTFICO . . . . . . . . . . . . . . . . 6 COMUNICACIONES ORALES . . . . . . . . . . . 15 Sesin 1: Autoinmunidad - I . . . . . . . . . . . . . . . 15

Vol. 27, Supl. 1, Mayo 2008

Sesin 7: Inmunologia tumoral - II . . . . . . . . . 37 Moderadores: Federico Garrido, Luis lvarez Vallina Sesin 8: Inmunidad e infeccin . . . . . . . . . . . 40

Moderadores: Joana Ferrer, Julia Sequ Moderadores: Francisco Lozano, Margarita Bofill Sesin 2: Inmunogentica . . . . . . . . . . . . . . . . 19 Sesin 9: Clulas dendrticas . . . . . . . . . . . . . . 43 Moderadores: Estela Paz Artal, Jordi Yage Moderadores: ngel Corb, Francisco Borrs Sesin 3: Inmunologa y trasplante . . . . . . . . . 21 Sesin 10: Clulas T . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46 Moderadores: Joan Mil, Alfredo Minguela Moderadores: Manel Juan, M Luisa Toribio Sesin 4: Inmunologa tumoral - I . . . . . . . . . 25 Moderadores: Francisco Ruiz-Cabello, Ignacio Melero Sesin 5: Inmunodeficiencias: alergia y complemento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29 Moderadores: Margarita Lpez-Trascasa, Nria Matamoros Sesin 6: Clulas B y NK . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34 Moderadores: frica Gonzlez, Miguel Lpez-Botet Sesin 2: Inmunogentica . . . . . . . . . . . . . . . . . 62 Moderadores: Estela Paz Artal, Jordi Yage Sesin 11: Autoinmunidad - II . . . . . . . . . . . . . 48 Moderadores: Carmen Gelp, M Rosa Juli

POSTERS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55 Sesin 1: Autoinmunidad - I . . . . . . . . . . . . . . . 55 Moderadores: Joana Ferrer, Jlia Sequ


SUMARIOSesin 3: Inmunologa y trasplante . . . . . . . . . 66 Moderadores: Joan Mil, Alfredo Minguela Sesin 4: Inmunologa tumoral - I . . . . . . . . . 72 Moderadores: Francisco Ruiz-Cabello, Ignacio Melero Sesin 5: Inmunodeficiencias: alergia y complemento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 75 Moderadores: Nria Matamoros, Margarita Lpez-Trascasa Sesin 6: Clulas B y NK . . . . . . . . . . . . . . . . . 85 Moderadores: frica Gonzlez, Miguel Lpez-Botet Sesin 7: Inmunologa tumoral - II . . . . . . . . . 90 Moderadores: Luis lvarez Vallina, Federico Garrido

Vol. 27, Supl. 1, Mayo 2008

Sesin 8: Inmunidad e infeccin . . . . . . . . . . . 96 Moderadores: Francisco Lozano, Margarita Bofill Sesin 9: Clulas dendrticas . . . . . . . . . . . . . 104 Moderadores: ngel Corb, Francisco Borrs Sesin 10: Clulas T . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107 Moderadores: Manel Juan, M Luisa Toribio Sesin 11: Autoinmunidad - II . . . . . . . . . . . . 114 Moderadores: M Rosa Juli, Carmen Gelp

ndice de Autores . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 121


PROGRAMA CIENTFICOMIRCOLES, 21 DE MAYO 10.00-14.00 ENTREGA DE DOCUMENTACIN COLOCACIN DE PSTERS (Sala Termas) 1. Autoinmunidad I 2. Inmunogentica REUNIN DE LA JUNTA DIRECTIVA TALLER DE INMUNOQUMICA (Sala Ramn Llull) Coordinadores: Cndido Jurez, Hospital Sant Pau (Barcelona). Juan Jos Rodrguez Molina, Hospital G. Universitario Gregorio Maran (Madrid). Julia Sequi Navarro, Hospital Carlos III (Madrid). Luisa M Villar, Hospital Ramn y Cajal (Madrid) TALLER DE AUTOINMUNIDAD (Sala Luis de Molina A) Coordinadores: Rita lvarez, Hospital Universitario La Paz (Madrid). Marcos Lpez Hoyos, Hospital Universitario Marqus de Valdecilla (Santander) SIMPOSIUM DIASORIN: ENFERMEDAD CELACA (Sala Magna) Inmunopatogenia de la enfermedad celaca Eduardo Arranz, Universidad de Valladolid, Presidente de la Sociedad Espaola de Enfermedad Celaca. La deteccin de la enfermedad celaca, una labor multidisciplinar Carme Farr, Hospital Sant Joan de Deu (Barcelona) CONFERENCIA INAUGURAL (Sala Magna) Complexity and complementarity of cellular and humoral innate immunity Alberto Mantovani. Instituto Clinico Humanitas (Miln) BIENVENIDA E INAUGURACIN OFICIAL (Sala Magna) Cctel de bienvenida JUEVES, 22 DE MAYO 08.30-10.00 COLOCACIN DE PSTERS (Sala Termas) 1. Autoinmunidad I 2. Inmunogentica

13.00-14.00 15.00-16.15

16.15-17.30

17.30-19.00

19.00-20.00

20.00

PROGRAMA CIENTFICO09.00-11.00 SIMPOSIUM PLENARIO: INMUNODEFICIENCIAS PRIMARIAS (Sala Magna) Patrocinador: BAXTER Emilio Gmez de la Concha. Hospital Clnico San Carlos (Madrid) Common Variable Immunodeficiency-genetic dissection of a complex disorder Ulric Salzer. University Hospital Friburgo Sndromes de hiper-IgM Mari Cruz Garca. Hospital Universitario la Paz (Madrid) Mecanismos etiopatognicos de un nuevo grupo de inmunodeficiencias primarias. Enfermedades autoinflamatorias sistmicas Jordi Yage. Hospital Clnico (Barcelona) Up to date: REDIP: Registro Espaol de inmunodeficiencias primarias Natalia Martnez Pomar. Hospital Universitario Son Dureta (Palma de Mallorca) CAF Y VISITA A PSTERS 1. Autoinmunidad I 2. Inmunogentica COMUNICACIONES ORALES 1. AUTOINMUNIDAD I (Sala Luis de Molina A) Moderadores: Joana Ferrer (Palma de Mallorca). Julia Sequi (Madrid) COMUNICACIONES ORALES 2. INMUNOGENTICA (Sala Ramon Llull) Moderadores: Estela Paz Artal (Madrid). Jordi Yage (Barcelona) TALLER HLA (Sala Luis de Molina B) Coordinadores: M Rosario De Pablo y Carlos Vilches, Hospital Puerta de Hierro (Madrid). Jos Luis Vicario, Centro Regional de Transfusiones (Madrid) SIMPOSIUM BECTON DICKINSON (Sala Magna) ALGO MS EN HIV? Actualizacin en los aspectos patognicos de la infeccin por HIV Rosa Garca Delgado, Servicio de Inmunologa. Fundacin Jimnez Daz (Madrid) Vacunas teraputicas en HIV. Perspectivas actuales y futuras Montse Plana. Grupo de Investigacin de Enfermedades Infecciosas. Hospital Clnic/ IDIBAPS (Barcelona) INMUNIDAD Y ADHESIN Dianas y Terapias anti-adhesin en enfermedades autoinmunes y neurodegenerativas Francisco Snchez Madrid, Servicio de Inmunologa. Hospital La Princesa (Madrid) 13.30-15.00 15.00-16.30 ALMUERZO DE TRABAJO SIMPOSIUM PLENARIO CONJUNTO: INMUNIDAD INNATA (1 PARTE) (Sala Magna) Societ Italiana Immunologia, Immunologia Clinica e Allergologia y Sociedad Espaola de Inmunologa. Moderadores: Miguel Lpez-Botet, IMIM-Hospital del Mar (Barcelona). Francisco Lozano, Hospital Clnic (Barcelona) Epithelial cell-dendritic cell cross-talk in bacterial handling Mara Rescigno. Department of Experimental Oncology. European Institute of Oncology (Milan) Gene expression profiling on human macrophages: identification of LSECtin as a novel pathogen-attachement factor in alternatively activated macrophages Angel Corb. Centro de Investigaciones Biolgicas. CSIC (Madrid) Advances in neutrophil-derived cytokines Marco Cassatella, Department of Pathology. University of Verona (Italy) CAF Y VISITA A PSTERS

11.00-12.00

12.00-13.30

16.30-17.00

PROGRAMA CIENTFICO17.00 -19.00 SIMPOSIUM PLENARIO CONJUNTO: INMUNIDAD INNATA (2 PARTE) (Sala Magna) Societ Italiana Immunologia, Immunologia clinica e Allergologia y Sociedad Espaola de Inmunologa NK cells at the interface between innate and adaptative immunity Alessandro Moretta, Molecular Immunology Laboratories. University of Genova (Italy) Negative regulation of macrophage activation Lisardo Bosc. Instituto de Investigaciones Biomdicas Alberto Sols (Madrid) Matricellular protein SPARC at the interface of macrophage-tumor cell interaction Mario Colombo. Fondazione IRCCS. Istituto Nazionale Tumori (Italy) ACTIVIDAD LDICO-CULTURAL Visita guiada a la Catedral de Palma de Mallorca. VIERNES, 23 DE MAYO 08.30-10.00 COLOCACIN DE PSTERS (Sala Termas) 3. Inmunologa y trasplante 4. Inmunologa tumoral I 5. Inmunodeficiencias, alergia y complemento 6. Clulas B y NK 7. Inmunologa tumoral II VOTACIONES SEI SIMPOSIUM PLENARIO: HOMENAJE AL PROFESOR JEAN DAUSSET (Sala Magna) Moderadora: Roco lvarez. Hospital Universitario Virgen de la Arrixaca (Murcia) Jean Dausset. Un visionario del siglo XX Edgardo Carosella, Hospital Saint Louis (Paris) La serologa HLA como fundamento del trasplante Guadalupe Ercilla. Hospital Clnic (Barcelona) Papel de los sistemas menores de histocompatibilidad en los trasplantes de rganos slidos Antonio Nez. Hospital Virgen del Roco (Sevilla) De la supresin de la respuesta alognica in vitro al estudio del proceso de tolerancia en trasplantes Roco Alvarez. Hospital Virgen de la Arrixaca (Murcia) Functional characterization of killer cell Ig-like receptors expressed by normal and malignant human CD4+ T lymphocytes Armand Bensussan. Directeur de Dpartement. INSERM U841. Facult de Mdecine de Crteil. Prsident de la Socit Franaise dImmunologie (Pars) SIMPOSIUM IZASA (Sala Luis de Molina A) La tecnologa de los tetrmeros de CMH: herramientas para el estudio de la respuesta T especfica Flix A. Montero-Julian. Directeur du Departement Analyse Cellulaire. Beckman Coulter Immunotech (Marseille) Flow Cytometric Analysis of Signal Transduction Pathways T. Vincent Shankey. Advanced Technology Center. Beckman Coulter, Inc. (Miami) Clulas Madre Hematopoyticas: algo ms que hematopoyesis Jos Carlos Segovia Sanz. Jefe de la Unidad de Diferenciacin y Citometra. Divisin de Hematopoyesis. CIEMAT (Madrid)

19.00

12.00-13.30 15.00-17.00 09.00-11.00

09.00-10.30

PROGRAMA CIENTFICO11.00-12.00 CAF Y VISITA PSTERS (Sala Termas) 3. Inmunologa y trasplante 4. Inmunologa tumoral I 5. Inmunodeficiencias, alergia y complemento SIMPOSIUM ANLISIS Y GENTICA (Sala Ramon Llull) Designers antigens as diagnostic targets for autoantibody determination W. Schlumberguer. Member of Board of Directors. Division Immunobiochemical Diagnostics. Euroimmun (Lbeck) COMUNICACIONES ORALES 3. INMUNOLOGA Y TRASPLANTE (Sala Luis de Molina B) Moderadores: Joan Mil (Palma de Mallorca). A. Minguela (Murcia) COMUNICACIONES ORALES 4. INMUNOLOGA TUMORAL I (Sala Ramon Llull) Moderadores: I. Melero (Navarra). Francisco Ruiz-Cabello (Granada) COMUNICACIONES ORALES 5. INMUNODEFICIENCIAS, ALERGIA Y COMPLEMENTO (Sala Luis de Molina A) Moderadores: Margarita Lpez Trascasa (Madrid). Nria Matamoros (Palma de Mallorca) MESA REDONDA: PROTOCOLOS CLNICOS EN AUTOINMUNIDAD Consenso europeo. Experiencias espaolas (Sala Magna) Moderadora: Mara Rosa Juli (Palma de Mallorca) Comits de enfermedades autoinmunes en los hospitales: una utopa que puede ser realidad Lucio Pallars, Servicio Medicina Interna. Hospital Universitario Son Dureta (Palma de Mallorca) Grupo de trabajo en autoinmunidad: Propuestas y posibilidades Aresio Plaza. Servicio Inmunologa. Hospital Puerta de Hierro (Madrid) Protocolos clnicos en autoinmunidad: nuestra experiencia M Rosa Juli. Servicio Inmunologa. Hospital Universitario Son Dureta (Palma de Mallorca) 13.30- 15.00 15.00-16.30 ALMUERZO DE TRABAJO COMUNICACIONES ORALES 6. CLULAS B Y NK (Sala Luis de Molina B) Moderadores: frica Gonzlez (Vigo), Miguel Lpez-Botet (Barcelona) COMUNICACIONES ORALES 7. INMUNOLOGA TUMORAL II (Sala Ramon Llull) Moderadores: Luis lvarez-Vallina (Madrid), Federico Garrido (Granada) SIMPOSIUM MENARINI: INMUNOLOGA OCULAR (Sala Magna) Moderadores: Jos M Garca Ruiz de Morales (Len). Autoimmunity in the eye: pathogenic and regulatory T cells Rachel Caspi. Laboratory Immunology. NEI. NIH (Bethesda) Protocolos clnicos en uveitis Jos Luis Olea. Servicio Oftalmologa. Hospital. Universitario Son Dureta (Palma de Mallorca) Uveitis autoinmune: avances en el diagnstico e inmunoterapia Jos M Garca Ruiz de Morales. Servicio Inmunologa Hospital de Len / Laboratory Immunology. NEI. NIH (Bethesda) TALLER DE CITOMETRA (Sala Luis de Molina A) Coordinadores: Natalia Maruri, Hospital de Cruces (Bilbao). Francisco Ruiz-Cabello (Granada) 16.30-17.00 17.00-18.30 21.00 CAF Y VISITA A PSTERS ASAMBLEA DE LA SEI (Sala Magna) CENA DE CLAUSURA Autobuses hoteles

11.15-12.00

12.00-13.30

PROGRAMA CIENTFICOSBADO, 24 DE MAYO 08.30-10.00 COLOCACIN DE PSTERS (Sala Termas) 8. Inmunidad e infeccin 9. Clulas dendrticas 10. Clulas T 11. Autoinmunidad II COMUNICACIONES ORALES 8. INMUNIDAD E INFECCIN (Sala Luis de Molina A) Moderadores: Margarita Bofill (Barcelona). Francisco Lozano (Barcelona) COMUNICACIONES ORALES 9. CLULAS DENDRTICAS (Sala Ramon Llull) Moderadores: Francisco Borrs (Barcelona). Angel Corb (Madrid) COMUNICACIONES ORALES 10. CLULAS T (Sala Luis de Molina B) Moderadores: Manel Juan (Barcelona). M Luisa Toribio (Madrid) COMUNICACIONES ORALES 11. AUTOINMUNIDAD II (Sala Magna) Moderadores: Carmen Gelp (Barcelona). M Rosa Juli (Palma de Mallorca) MESA REDONDA: PRESENTE Y FUTURO DE LA INMUNOLOGA (Sala Magna) Moderadores: Eduardo Fernndez-Cruz. Presidente de la Comisin Nacional de Inmunologa. Miguel Lpez-Botet. Presidente de la Sociedad Espaola de Inmunologa Inmunologa en los Hospitales: situacin actual y nuevos modelos Margarita Lpez-Trascasa. Vocal de la Junta Directiva de la Sociedad Espaola de Inmunologa Formacin Especializada: Mapa de Unidades docentes y Plan de futuro Mara Jos Herrero. Representante de la Sociedad Espaola de Inmunologa en la Comisin Nacional de Inmunologa La Troncalidad en las Especialidades de Laboratorio Adolfo Campos. Vicepresidente de la Comisin Nacional de Inmunologa CAF Y VISITA A POSTERS (Sala Termas) 8. Inmunidad e infeccin 9. Clulas dendrticas 10. Clulas T 11. Autoinmunidad II CONFERENCIA DE CLAUSURA (Sala Magna) State of the art: class switch recombination and DNA repair activity Q. Pan-Hammarstrom. Karolinska Institute (Estocolmo) PRESENTACIN DE LOS PRXIMOS CONGRESOS (Sala Magna) CCTEL DE DESPEDIDA

09.00-10.30

10.30-11.45

11.45-12.15

12.15-13.15

13.15

Comunicaciones OralesInmunologa Vol. 27 / Supl. 1/ Mayo 2008: 15-53

SESIN 1: AUTOINMUNIDAD - I Moderadores: Dra. Joana Ferrer (Palma de Mallorca), Julia Sequ (Madrid) TLRs EN EL SISTEMA INMUNE INTESTINAL. De Andrs A, Marn N, Mirete S, Camarero C, Roy G. Hospital Ramn y Cajal de Madrid. En la enteropata celaca (EC) tiene lugar una respuesta inmune innata a nivel del epitelio intestinal, cuyo estmulo y mecanismos patognicos son prcticamente desconocidos. Dentro de los receptores del sistema inmune innato intestinal, se hallan los PRRs (pattern recognition receptors), amplios sensores de componentes microbianos filogenticamente conservados. Actualmente se especula que una disfuncin de los toll-like receptors (TLRs) reconoce a los pptidos del gluten como no propios/txicos, generando una respuesta inflamatoria inicial innata. Ningn estudio ha examinado el papel de los TLRs y de sus ligandos especficos en el fenotipo de la EC. Objetivo. Analizar la expresin de los TLRs, tanto en el epitelio como en las distintas subpoblaciones de linfocitos intraepiteliales (LIEs), en mucosa intestinal control, para conocer los niveles de expresin normales, o en celacos, con objeto de definir un estado inicial en la patogenia de la enfermedad celaca. Metodologa. Se han analizado un total de 34 biopsias de duodeno: 14 celacos activos y 19 controles. Expresin y cuantificacin por citometra de flujo, de los TLR2 y TLR4 en superficie y de los TLR3 y TLR9 intracelulares, en los distintos subtipos celulares. ResultadosCelacos activos (n = 14) LIEs Media ES TLR2 TLR4 TLR3 TLR9 13 1.5 34.5 5.1 66 9.1 61.4 6.1 Epitelio Media ES 1.5 0.5 22 3.9 51.8 6.1 48.4 5.5 No celacos (n = 19) LIEs Media ES 11.3 2.3 29.5 2.5 56.7 8 45.6 7.1 Epitelio Media ES 1.5 0.5 16.8 2.7 70.2 3.4 48.3 4.0

nes histolgicas en la mucosa intestinal, principalmente atrofia vellositaria y aumento de linfocitos intraepiteliales (LIEs). Objetivo. Estudio del perfil de LIEs en pacientes con sospecha clnica de EC en nuestro medio. Mtodos. De 97 biopsias remitidas de junio del 2006 a febrero del 2008 para el estudio del linfograma por citometria, seleccionamos 70 con datos valorables, para realizar una revisin prospectiva de las historias clnicas de los sujetos (40 mujeres, 25 hombres). Resultados. EC activa: 66%, EC. Silente: 6%, EC potencial: 15%, EC latente: 1% . EC activaClnica Distensin abdominal Diarrea Retraso del crecimiento Anemia Hipertransaminemia Trombocitosis Biopsia Atrofia total Atrofia subtotal Atrofia parcial Cambios mnimos Marcadores serolgicos y genticos (HLA-II) Ac antigliadina + Ac antitransglutaminasa + DQ2 DQ8 Linfograma 1.LIEs totales 10% 2.LIEs 10% 3.LIEs CD3- 10% 1+2+3 LIEs en pacientes 3 aos LIE totales LIE LIE CD3LIEs en pacientes > 3 aos LIE totales LIE LIE CD3Frecuencia 78% 72% 59% 54% 50% 46% Frecuencia 9% 67% 20% 2% Frecuencia 79% 88% 90% 7% Porcentaje de pacientes 92% 89% 60% 54% Xm DE % 27 14% 29 15% 13 8% Xm DE % 22 13% 29 19% 10 5%

Conclusiones: No parece que una diferencia en la expresin de los sensores TLRs analizados est implicada en el inicio de una respuesta inflamatoria innata en el compartimento epitelial del intestino.

PERFIL DE LINFOCITOS INTRAEPITELIALES EN EL DIAGNSTICO DE LA ENFERMEDAD CELIACA. Snchez M, Gutierrez EI, Toca M, Gonzalo Ocejo-Vinyals J, Leyva-Cobin F, Lpez-Hoyos M. Servicio de Inmunologa, Hospital Universitario Marqus de Valdecilla, Servicio Cntabro de Salud. Santander. Introduccin. La enfermedad celiaca (EC) es una enteropata crnica mediada por el sistema inmunitario caracterizada por alteracio-

EC silente. Hipertransaminemia 75%. Marcadores serolgicos Ac antigliadina +: 33% Ac antitransglutaminasa + 75%. Linfograma, 1+2+3: 100%. EC latente y potencial. 1+2+3: 20%. Conclusiones. En la poblacin estudiada el perfil: LIEs totales 10% - LIEs LIE 10% -LIEs CD3- 10% constituye un marcador til tanto para el diagnostico de la EC activa como silente. En este ltimo caso, podra ser el mejor marcador de esta forma de presentacin.

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COMUNICACIONES ORALES

VOL. 27 SUPL. 1/ 2008

Para la EC latente y potencial, el infiltrado linfocitario suele ser < 10% pero los LIEs se mantienen elevados y los LIE CD3- disminuidos.

PAPEL DEL GEN PXR EN ENFERMEDAD INFLAMATORIA INTESTINAL. Mrquez Ortiz AM1, Martnez Doncel A1, Mendoza JL2, Taxonera C2, Fernndez-Arquero M1, Daz-Rubio M2, Gmez de la Concha E1, Urcelay E1. 1Servicio de Inmunologa Clnica, Hospital Clnico San Carlos. 2Servicio de Gastroenterologa, Hospital Clnico San Carlos. Recientemente, se ha descrito una asociacin del gen del receptor de pregnano (PXR/NR1I2) con la susceptibilidad a padecer enfermedad inflamatoria intestinal (EII). PXR es un receptor nuclear que regula genes involucrados en procesos de detoxificacin, entre ellos MDR1. Nuestro objetivo es investigar el impacto de este locus en la predisposicin a padecer EII en poblacin espaola. Para el estudio caso-control se utilizaron 365 enfermos de CU, 331 pacientes de EC y 550 controles. Se analizaron mediante sondas TaqMan tres polimorfismos en el gen PXR as como los seis haplotipos conformados por ellos. Incluimos el marcador -25385C/T (rs3814055) por ser el ms fuertemente correlacionado con la enfermedad en el estudio inicial y otros dos polimorfismos (rs6784598 y rs2276707) con el fin de cubrir toda la variabilidad. Al comparar las frecuencias genotpicas y allicas entre enfermos y controles no encontramos diferencias significativas. Sin embargo, al estratificar los enfermos de colitis por extensin observamos que el alelo -25385T era ms frecuente en pacientes con la forma extensa que en los pacientes con colitis izquierda (p=0.049), y que en los controles (p=0.009). Este efecto se debe principalmente al haplotipo de riesgo TCC significativamente aumentado en colitis extensa con respecto a colitis izquierda [p=0.032; odds ratio (95% IC)=1.51 (1.02-2.24)] y controles [p=0.001; odds ratio (95% IC)= 1.66 (1.20-2.30)]. Posteriormente, analizamos la posible interaccin entre los genes PXR y MDR1 encontrando que un polimorfismo del gen MDR1 (rs3789243), localizado en el intrn 3 y previamente asociado a colitis ulcerosa, presentaba una distribucin genotpica significativamente diferente al comparar portadores y no portadores del alelo de riesgo -25385T (p=0.005). Nuestro estudio confirma la asociacin del gen PXR con la enfermedad inflamatoria intestinal, concretamente con colitis extensa, y encontramos evidencias de interaccin entre este gen y MDR1.

en la regin 5'UTR y tres variantes en los codones 52, 54 y 57 (exn 1) conocidas como alelos D, B y C, respectivamente, mediante PCR-SSO inversa (Innogenetics). A todos los pacientes se les realiz adems determinacin de acs anti-S cerevisiae (ASCA) mediante tcnica de ELISA (Aeskulisa) El anlisis estadstico se realiz mediante los programas SPSS (v.11.0) y EpiInfo (v.6.0); se analizaron tanto los SNPs como los haplotipos comunes en los que stos se organizan. Resultados. Las caractersticas clnicas estudiadas fueron sexo, tabaquismo, edad al dco, localizacin, patrn evolutivo, manifestaciones extradigestivas, necesidad de ciruga, tratamiento con inmunosupresores y presencia de ASCA. En el anlisis por SNPs se ha observado una mayor tendencia a desarrollar un patrn fistulizante (B3 de clasif. de Viena) en los pacientes portadores del alelo 550L (p=0.027; OR=4.97, IC95% 1.02-47.31). Asimismo, dicho alelo se asocia con una mayor necesidad de ciruga (p=0.009; OR=9.97, IC95% 1.38-432). En el anlisis por haplotipos encontramos que en portadores del haplotipo secretor HYPA la enfermedad se limita al colon (L2 de clasif. de Viena) con menor frecuencia (p=0.02; OR=0.31, IC95% 0.08-0.99). Conclusin. El polimorfismo en el gen MBL2 puede influenciar la forma de presentacin de la EC.

GENES IL12B E IL23R: ANLISIS DE SUSCEPTIBILIDAD E INTERACCIN EN ARTRITIS REUMATOIDE. Varad Lpez J1, Perdigones N1, Fernndes-Arquero M1, Jover JA2, Gmez de la Concha E1, MartnezDoncel A1, Fernndez Gutirrez B2, Urcelay E1. 1Inmunologa Clnica Hospital Clnico San Carlos. 2Reumatologa Hospital Clnico San Carlos. La artritis reumatoide (AR) es una patologa de gentica compleja que afecta aproximadamente al 1% de la poblacin. Se ha postulado que existen genes comunes a distintas enfermedades autoinmunes. Recientemente se han descrito polimorfismos de un solo nucletido (SNP) en los genes IL12B e IL23R asociados a la enfermedad de Crohn. La IL23 es un heterodmero compuesto por las cadenas p19 y p40, codificadas por IL23 e IL12B respectivamente; su receptor es tambin un heterodmero compuesto por los productos de dos genes diferentes IL23R e IL12RB. Nuestro objetivo es dilucidar si dichos polimorfismos de IL12B e IL23R estn asociados al desarrollo de AR, tanto de forma individual como combinada. Analizamos 550 pacientes de AR y 546 individuos control. Todos ellos se genotiparon para 4 SNPs con sondas TaqMan. Dos SNPs estn localizados en el gen IL2B (rs688765 y rs3212227) y los otros dos en el gen IL23R (rs7517847 y rs11209026). Las frecuencias genotpicas y allicas de los cuatro SNPs se compararon por el test de c2 o el test exacto de Fisher. La Odds ratio (OR) y los valores de p se calcularon con el paquete estadstico Epi Info v. 6.02. Los alelos minoritarios de los dos polimorfismos de IL23R son ms frecuentes en AR que en controles (rs7517847, p=0.019; rs11209026, p= 0.026), contrariamente a los descrito en Crohn. Por el contrario no encontramos ninguna asociacin de los dos polimorfismos IL12B con AR. Tambin observamos una interaccin entre los marcadores rs7517847 (IL23R) y el rs3212227 (IL12B) [GG/CC vs (TT+TG)/(AA+AC) p=0.004]. Esto se ve reflejado en que un 13% de los enfermos rs7517847-GG son a su vez rs312227-CC siendo la frecuencia de este ltimo genotipo en controles del 5%, lo que supone un incremento del 8% (p=0.006). Nuestros datos sugieren que los alelos minoritarios de los polimorfismos estudiados en IL23R (rs7517847 y rs11209026) incrementan

ANLISIS DEL POLIMORFISMO DEL GEN MBL2 EN ENFERMEDAD DE CROHN. Rodrguez Gutirrez JF1, Rodrguez Bayona B1, Piero A2, Rodrguez C1, Correro F2, Brieva JA1, Nieto A1. 1Hospital Puerta del Mar. 2Servicio de Digestivo, Hospital Puerta del Mar. Introduccin. Genes de la inmunidad innata intervienen en la susceptibilidad y forma de presentacin de la enfermedad de Crohn (EC). La lectina de unin a manosa (MBL) codificada por el gen MBL2 es un importante componente de la inmunidad innata que se une a un amplio rango de microorganismos y activa complemento por la va de las lectinas. Los niveles sricos de MBL y su actividad funcional estn parcialmente regulados por variaciones genticas, las cuales se han asociado a otros procesos relacionados como la enf. de Behet. Objetivo. Analizar la posible influencia del polimorfismo en la regin 5 del gen MBL2 en la forma de presentacin de EC. Pacientes y Mtodos. Se han determinado en 120 pacientes los siguientes SNPs: -550 H/L y -221 Y/X en la regin promotora; +4 P/Q

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INMUNOLOGA


la susceptibilidad a AR. Tambin apuntan a la existencia de una interaccin entre los genes IL12B e IL23R.

INTERACCIONES GENTICAS: MIF COMO FACTOR DE SUSCEPTIBILIDAD EN ENFERMOS DE ARTRTITIS REUMATOIDE. Perdigones Borderas MN1, Varade J1, Nez C1, Fernndez-Gutirrez B2, Jover JA2, Urcelay E1, Martnez A1. 1Unidad de Inmunologa Clnica, Hospital Clnico San Carlos, Madrid. 2Departamento de Reumatologa, Hospital Clnico San Carlos, Madrid. La Artritis Reumatoide (AR) es una enfermedad crnica e inflamatoria de etiologa desconocida que afecta al 1% de la poblacin mundial. El carcter polignico de esta inmunopata ha suscitado en el ltimo ao varios estudios de asociacin genmica (GWA, genome wide association). Mientras, investigaciones en otros mbitos como son las interacciones intergnicas o gentico-ambientales se encuentran an en sus comienzos. En este trabajo analizamos polimorfismos de un solo nucletido (SNPs) potencialmente implicados en enfermedades inflamatorias, en busca de interacciones genticas involucradas en la susceptibilidad a AR. Se genotiparon 45 SNPs correspondientes a 17 regiones cromosmicas en 528 pacientes con AR y 518 controles sanos espaoles. Para detectar interacciones genticas evaluamos el desequilibrio de ligamiento (LD) entre loci no ligados con el programa Haploview. Se observaron tres interacciones estadsticamente significativas (p MIF se perfila como un potente factor de susceptibilidad en un determinado grupo de enfermos de AR. Este hecho implica que el efecto de proteccin o susceptibilidad de una mutacin depende del contexto o background gentico de cada individuo.

sentaban una distribucin de frecuencias del alelo minoritario que oscilaba entre el 14 y el 49% en controles. Varios SNPs resultaron asociados en una o ambas patologas. Se detect un haplotipo asociado con ambas patologas con frecuencias del 24.7% en RA, 28.2% en SLE y 18.4% en controles (OR 1.45, 95%CI 1.15-1.83 para RA y OR 1.74, 95% CI 1.38-2.20 para SLE). La regin de asociacin se localiza en las primeras 33 Kb rastreadas y se detect un SNP marcador que slo se encuentra en el haplotipo de riesgo. Conclusin. El presente estudio confirma asociacin entre la regin 3' UTR del gen CTLA y la susceptibilidad a padecer RA y SLE.

MAPEO DEL GEN TIM1 EN ARTRITIS REUMATOIDE Y LUPUS ERITEMATOSO SISTMICO. Abad C1, Torres B1, Garca-Lozano JR1, Escalera A1, Fernndez O1, Snchez E2, Orozco G2, Nez-Roldn A1, Martn J2, Gonzlez-Escribano MF1. 1Servicio de Inmunologa. HU Virgen del Roco. Sevilla. 2Instituto de Parasitologa y Biomedicina "Lpez-Neyra". Granada. Introduccin. La respuesta inmunolgica mediada por clulas T est regulada por una serie de molculas coestimuladoras y coinhibidoras que intervienen en la sinapsis inmunolgica. TIM1 es una molcula coestimuladora que influencia la diferenciacin de las clulas T y la activacin dependiente de TCR y puede estar involucrada en diferentes fases del desarrollo de las enfermedades autoinmunes. Objetivo. Mapear el gen TIM1 para determinar la existencia de posibles regiones de susceptibilidad en artritis reumatoide (RA) y lupus eritematoso sistmico (SLE). Material y mtodos. Se incluyeron 289 pacientes con RA y 398 con SLE que cumplan los criterios de la ACR para ambas enfermedades. El grupo control inclua 371 donantes voluntarios de mdula sea. Se genotiparon 6 SNPs que abarcaban una regin de 22.000 bp. El genotipado se realiz utilizando sondas Taqman. La comparacin de la distribucin de frecuencias genotpicas y allicas se realiz mediante ?2. Resultados. Los 6 SNPs incluidos resultaron polimrficos con una distribucin de frecuencias del alelo minoritario que oscilaba entre el 2 y el 37% en controles. Se detect un SNP (A/T) asociado a ambas patologas, si bien, el sentido de la asociacin sera contrario en RA y SLE. En RA la asociacin se ajustara a un modelo recesivo, en el que los homocigotos AA fueron mas frecuentes en RA (14.9%) que en SLE (5.6%) y controles (9.2%, p=0.02, OR=1.73 95%CI 1.05-2.82); mientras que en SLE se encontr elevada la frecuencia del alelo T (73%) comparado con RA (67%) y controles (68%, p=0.03, OR=1.27, 95%CI 1.01-1.59). Conclusin. El presente estudio sugiere asociacin entre el gen TIM1 y la susceptibilidad a padecer RA y SLE.

MAPEO DE LA REGIN 3 ' UTR DEL GEN CTLA4 EN ARTRITIS REUMATOIDE Y LUPUS ERITEMATOSO SISTMICO. Escalera A1, Torres B1, Garca-Lozano JR1, Abad C1, Fernndez O1, Orozco G2, Snchez E2, Nez-Roldn A1, Martn J2, Gonzlez-Escribano MF1. 1Servicio de Inmunologa. HU Virgen del Roco. Sevilla. 2Instituto de Parasitologa y Biomedicina "Lopez Neyra". Granada. Introduccin. La respuesta inmunolgica mediada por clulas T est regulada por una serie de molculas coestimuladoras y coinhibidoras que intervienen en la sinapsis inmunolgica. Entre los coinhibidores de la respuesta T se encuentra la molcula de CTLA4. El gen CTLA4 es un candidato para determinar la susceptibilidad a enfermedades autoinmunes y aunque no se ha determinado completamente la regin del gen responsable de la asociacin, estudios anteriores de nuestro grupo y otros la han situado en la regin 3' UTR del mismo. Objetivo. Acotar la regin de susceptibilidad encontrada en la regin 3' UTR del gen CTLA4 en artritis reumatoide (RA) y lupus eritematoso sistmico (SLE). Material y mtodos. Se incluyeron 455 pacientes con RA y 459 con SLE que cumplan los criterios de la ACR para ambas enfermedades. El grupo control inclua 463 donantes voluntarios de mdula sea. Se genotiparon 12 SNPs localizados en la regin 3' UTR del gen CTLA4 que abarcaban una regin de 86.367 bp. El genotipado se realiz utilizando sondas Taqman. Para el clculo de haplotipos se utiliz el programa Haploview. La comparacin de la distribucin de frecuencias genotpicas, allicas y haplotpicas se realiz mediante ?2. Resultados. Se analizaron 11 de los 12 SNPs incluidos en un principio, ya que uno de ellos result no polimrfico. Estos 11 SNPs pre-

ASOCIACIN ENTRE EL HLA Y LOS NIVELES DE ANTICUERPOS ANTI PPTIDOS CITRULINADOS CCLICOS Y DE FACTOR REUMATOIDE EN PACIENTES CON ARTRITIS DE RECIENTE COMIENZO. Cabezn Snchez A1, Ramiro Latienda S1, Cobo Ibez T1, Orozco G2, Balsa Criado A1, San Jos Valiente B1, Martn Ibez J2, Lpez-Nevot MA3, Pascual-Salcedo Pascual D1. 1Hospital Universitario La Paz de Madrid. 2Hospital Virgen de las Nieves de Granada. 3Instituto de Parasitologa y Biomedicina Lpez Neyra, CSIC, Granada. Introduccin. La produccin de anticuerpos anti pptidos citrulinados (ac anti-CCP) se asocia con la presencia de los alelos HLA DRB1

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con el eptopo compartido (EC) y con la artritis reumatoide (AR). El HLA DR3 se asocia con la AR seronegativa para Factor Reumatoide (FR) y los alelos HLA DRB1 que codifican la secuencia DERAA protegen del desarrollo de AR. Pacientes y Mtodos. En pacientes de una consulta de artritis de reciente comienzo se estudi la presencia de alelos HLA DRB1 con el EC, el HLA DR3 y alelos que codifican la secuencia DERAA. En el suero de estos pacientes se cuantificaron los ac anti-CCP y FR. Las comparaciones estadsticas se realizaron mediante los test de Kruskal-Wallis y U de Mann-Whitney con la correccin de Bonferroni. Resultados. De los 322 pacientes incluidos en el estudio, un 71,4% fueron diagnosticados de AR y un 28,6% de otras artropatas. El FR y los ac anti-CCP fueron positivos respectivamente en el 72,6% y 62,3% de los pacientes con AR y en el 9,2% y 3,5% de pacientes con otras artropatas. Se encontraron diferencias en el ttulo de ac anti-CCP y de FR segn el nmero de alelos con el EC, obteniendo los niveles ms bajos en los pacientes que no tenan ningn alelo con el EC (p No observamos diferencias en la produccin de ac anti-CCP y FR segn el alelo HLA DRB1 con el EC aunque s se encontr un efecto de inhibicin de la produccin de ac anti CCP de los alelos que codifican la secuencia DERAA o del HLA DR3, sobre el efecto producido por el EC (p Conclusin. La presencia del EC est asociada con la produccin de ac anti-CCP y con la magnitud de esta produccin. Observamos un efecto inhibitorio de la produccin de ac anti-CCP cuando el alelo HLA DR3 o los alelos que codifican la secuencia DERAA estn presentes junto a otro alelo con el EC.

Results. Treated and untreated non active RA patients showed a significant decrease in the percentage of classical CD14+highCD16monocytes respect to healthy controls without relationship with disease activity. On the other hand we found a significant increase in the inflammatory CD14+lowCD16+ monocytes in active RA patients treated with anti-TNFa agents with respect to healthy controls and untreated and treated with methotrexate RA patients. We did not find differences in non active disease RA patients. Inflammatory monocytes showed a significant decrease in the expression of CX3CR1 (Fractalkine) in non active untreated patients compared with healthy controls. The Treatment with anti-TNFa agents normalized this altered fractalkine expression. Conclusions: There is an altered distribution of the different monocytic cell subsets in peripheral blood of RA patients that is characterized by a decrease in the classical monocytes and an increase of inflammatory monocytes, as well as changes in their migratory properties. This phenomenon is related with the disease activity and the patient treatment.

POLIMORFISMOS DE Fc RIIA (CD32A) Y Fc RIII A (CD16A) EN LA RESPUESTA A LA TERAPIA CON INFLIXIMAB EN PACIENTES CON ARTRITIS REUMATOIDE. Surez B 1, Caete JD2, Hernndez MV, Rego I3, Sanmart R2, Pinto JA3, Blanco FJ3, Lozano F1. 1Servicio de Inmunologa, Hospital Clnico de Barcelona. IDIBAPS, Facultad de Medicina, Univ. de Barcelona. 2Servicio de Reumatologa, Hospital Clnico de Barcelona. IDIBAPS, Facultad de Medicina, Univ. de Barcelona. 3Servicio de Reumatologa, Hospital Juan Canalejo. A Corua. El polimorfismo de los receptores of Fc gamma (Fc R) influye en su afinidad por las inmunoglobulinas (Ig) y ello puede afectar la eficacia de las terapias basadas en Ig. En el presente trabajo analizamos la relacin entre polimorfismos funcionales de los genes Fc R IIA (CD32A) y IIIA (CD16A) y la respuesta a la terapia con infliximab (antiTNF ) en pacientes con artritis reumatoide (RA). Para ello se analizaron 91 pacientes (89% mujeres; 76.7% Factor Reumatoide positivo). Los pacientes fueron evaluados a las semanas 0, 6 y 30 usando los criterios de respuesta ACR y EULAR. El genotipado de los polimorfismos de CD16A (F158V) y CD32A (R131H) se realiz por PCR-SSP y secuenciacin, respectivamente. Se aplicaron los test Chi-square and Fisher's exact test para mostrar diferencias en las variables analizadas. Los individuos homo y heterocigotos para las variantes de alta afinidad de los dos Fc R analizados se agruparon en una sola categora para realizar comparaciones ms robustas con los individuos homocigotos para alelos de baja afinidad. Se encontraron diferencias estadsticamente significativas a las 6 semanas en el ACR50 en funcin del genotipo CD16A (baja afinidad o F/F: 24.1%; alta afinidad o F/V-V/V:2.2%; p =0.003) y a las 30 semanas en el ACR20 en funcin del genotipo CD32A (baja afinidad o RR: 60 %; alta afinidad o R/H-H/H: 33.3%;p= 0.035). La reduccin de los niveles de protena C reactiva durante la terapia fue siempre mayor en los portadores de variantes de baja afinidad (CD16A-F/F; CD32A-R/R). En conclusin, la respuesta al tratamiento anti-TNF (infliximab) en pacientes con RA est influenciada por los genotipos tanto de CD16A como de CD32A y este efecto se observa a diferentes tiempos del seguimiento (6 y 30 semanas, respectivamente) reflejando la naturaleza dinmica de la interacin Fc R versus Ig.

EFFECTS OF DISEASE MODIFYING DRUGS IN THE DISTRIBUTION AND MIGRATORY PROPERTIES OF PERIPHERAL BLOOD MONOCYTES IN RHEUMATOID ARTHRITIS PATIENTS. Chara L1, Chevarra J1, Daz D1, Snchez A2, Monserrat J1, Mur S1, Prieto A1, Turrin A2, Len MJ2, lvarez-Mon M1,2. 1Unidad I+D asociada UAH/CNB-CSIC, IMMPA, Departamento de Medicina, Universidad de Alcal, Alcal de Henares, Madrid, Espaa. 2Servicio de Enfermedades del Sistema Inmune, Hospital Universidario Prncipe de Asturias, Alcal de Henares, Madrid, Espaa. Background. Rheumatoid arthritis (RA) is a systemic inflammatory disease characterized by a massive synovial infiltration of lymphocytes and macrophages. Functionally altered blood monocytes are associated with joint inflammation and higher disease activity. Disease-modifying anti-rheumatic drugs (DMARDs) have been shown to reduce disease activity with excellent clinical results. OBJECTIVES: To determine the effect of traditional DMARDS and anti-TNFa agents in the distribution of the different peripheral blood monocytes from RA patients compared with healthy controls, and to relate that subset distribution with their migratory properties and disease activity. Methods. Peripheral blood mononuclear cells from 46 rheumatoid arthritis patients and 15 healthy controls were purified and characterized in a FACSCalibur cytometer using fluorochrome-labeled monoclonal antibodies to label CD14, CD16, CD62L and CX3CR1 antigens. The DAS28 score was calculated in each patient in order to determine the disease activity (active disease was considered when DAS28> 3.2). Comparisons between patients and healthy controls were carried out using the Student`s T test and considered significant when pGCC 265GGT>GTT 192CAC>CAA 265GTT>GGT 268AAG>GAG 102GAG>TAC 62CGG>CCG Delecin ocho nucleotidos en el intron 2 76GTG>GAG 77GAG>AAG 79GGG>CGG 80ACC>ATC 81CTG>GCG 82CGC>CTC 83GGC>CGC 82CGC>CAC 211GCG>GAG 116TAC>TTC 131AGC>CGC 147TTG>TGG 167TGG>TCG 152GAG>GTG 169CGC>CAC 271ACC>ACT 17CGC>CAC 113TAT>TTT Cambios aminoacid. Gly>Val His>Gln Val>Gly Lys>Glu Asp>Tyr Arg>Pro Raza Cau.Espaol Cauc.Aleman Cauc.Espaol Cauc.Espaol Cauc.Espaol Haplotipo/Tipaje HLA I

El alelo A*68020103 presenta variabilidad intrnica debido a una delecin de ocho nucletidos en el inicio del intron 2. Esta variacin no afecta, sin embargo, a su expresin en superficie.

ESTUDIO DE ALGUNOS ALELOS HLA EN ENFERMOS DE ALZHEIMER. Leon Moya V1, Cacho Gutierrez J2, Chong Espino Y2. 1Serv Analisis Clinicos. Hospital Universitario de Salamanca. 2Serv. Neurologia. Hospital Universitario de Salamanca. Introduccin. Los alelos HLA relacionados con la susceptibilidad resistencia a ciertas enfermedades, hacen que su presencia module la presentacin antignica, inhibiendo activando la respuesta inmune frente a exo auto antgenos. Hemos aplicado el anlisis individualizado de los alelo HLA A3, B7, DR2 y DR4, mediante PCR, habiendo selecionado estos alelos por su relacin con ciertas enfermedades autoinmunes. Material y Mtodos. 62 pacientes de Alzheimer,EA, de acuerdo con los criterios de NINCDS-ADRDA, y 84 sujetos sanos como grupo control, GC, fueron estudiados. El ADN fue extrado mediante el kit DNA Direct II (Dynal), fundamentado en una resina con ncleo metlico que permite separar el complejo ADN-resina mediante un imn. Los primers para el estudio del gen HLA A3 : For 5 AgC gAC gCC gCg AgC CA 3, Rev 5 CAC TCC Acg CAC gTg CCA 3 ; para HLA B7: For 5` ggA gTA TTg ggA CCg gAA C 3`, Rev 5 TAC Cag CgC gCT CCA gCT 3; para DR2 : For 5 TCC TgT ggC AgC CTA AgA g 3, Rev 5 CgC TgC ACT gTg AAg CTC TC 3 y DR4: For 5gTT TCT Tgg AgC Agg TTA AAC A 3, Rev 5 CgC TgC ACT gTg AAG CTC TC 3. Las condiciones de PCR fueron: 95, 5 min, 1 ciclo; 95 30 seg, 53 30 s, 72 30s 34 ciclos, y 72 10 min. Los amplicones fueron visualizados en electroforesis de agarosa al 2% Resultados. La frecuencia gnica de alelo HLA A3 fue 21,3 EA ( 13,6% en GC), el alelo HLA B7 se un 18,3 EA ( 12,5 % en GC) el alelo DR 2 17,6 %EA (15,5 % en el GC), El DR4 32,4% EA ( 15,6% GC). Las diferencian estatisticas entre las frecuencias gnicas , Chi Cuadrado, entre enfermos y controles fueron significativas , p> 0.001, en todos los alelos. Poniendose de manifiesto la posbilidad de emplearl como marcadoes genicos los alelos HLA estudiados en enfermos de Alzheimer.

A*0339 A*03010101 A*2631 A*260101 A*68020103 A*68020101

A*020115-B*5002-Cw*060201 A*0281-B*440201-Cw*050101 A*0289-B*3701-Cw*0602 A*9224,*23 ; B*40,*56 A*0326,*24020101;B*3701, B*400201; Cw*04010101,*06020101 Cauc.Espaol A*0339-Cw*070101-B*080101 Cauc.Espaol A*2631-B*440201-Cw*050101 Cauc.Espaol A*01,*68020103;B*530101,*5601 Cw*010201,*04010101 Ecuatoriano A*02,*6836; B*40,*51; Cw*06,*15

A*6836

A*680101

Val>Glu Asp>Asn Gly>Arg Leu>Ala Arg>Leu Gly>Arg Arg>His Ala>Gly Tyr>Phe Arg>Ser W>Leu Ser>Trp Glu>Val Arg>His Arg>His Tyr>Phe

B*0829 B*3579 B*4077

B*080101 B*3543 B*401401

Desconocida A*01,A*-;B*0820,*1402 Ecuatoriano A*24020101-B*3579-Cw*010201 Cauc.Espaol A*01,*02; B*08,*4077

B*9523 Cw*0220 Cw*030203 Cw*0736 Cw*0742

B*1591 B*1503 Cw*020202 Cw*030201 Cw*070101 Cw*070201

Cauc.Espaol No definido Cauc. Espaol Desconocida Cauc.Espaol Cau. Hungaro A*3301-B*440301-Cw*0220 A*020104-B*5801-Cw*030203 A*020101-B*180101-Cw*0736 B*070201-Cw*0742

EL ORIGEN DE LOS HABITANTES DE LAS ISLAS ALEUTIANAS (ESTRECHO DE BERING) SEGN LOS GENES HLA. Moscoso J1, Vicario JL2, Crawford M3, Serrano-Vela JI1, Reguera R1, Ferri A1, AbdEl-Fatah-Khalil S4, Millan P1, Arnaiz-Villena A1. 1Dept. Inmunologa, Universidad Complutense, Centro de Transfusin de la Comunidad de Madrid, Madrid. 2Dept. Inmunologa, Centro de Transfusin de la Comunidad de Madrid, Madrid. 3Dept. Anthropology, University of Kansas, Lawrence, USA. 4Dept. Hematologa, Centro de Transfusin de la Comunidad de Madrid, Madrid. Los Aleutianos son una poblacin que vive en las Islas Aleutianas situadas entre las actuales Alaska y Rusia, en la zona Sur del Estrecho de Bering. Su lengua no pertenece a ninguna familia conocida, incluidas las lenguas Amerindias, Na-Dene (Atabascos), Eskimales o Siberianas. Se han identificado los alelos de los genes HLA-A, -B, -C y -DRB1 mediante tcnicas estndar de alta resolucin en 58 individuos Aleutianos no emparentados.

Se definieron dos nuevas variantes caracterizadas por mutaciones no productivas, A*020115 y Cw*030203. Asimismo se han definido dos variantes de A*02, *0281 y *9224 que presentan un eptopo Bw4 equivalente al presente en alelos A*25 y A*32. De forma similar, se ha caracterizado y detectado en dos muestras procedentes de donantes ecuatorianos un nuevo alelo, A*6836, que presenta el eptopo Bw4 presente en alelos A*23 y A*24.

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Los resultados se compararon con poblaciones de todo el mundo, que incluan Amerindios, Eskimos, NaDene (Atabascos), Europeos, Asiticos, Africanos y Australianos; en total, se analizaron 12.298 cromosomas. No se encontraron los alelos HLA caractersticos de Amerindios. Los clculos realizados usando distancias genticas, dendrogramas Neighbour-Joining, anlisis de correspondencia y haplotipos HLA extendidos muestran que genticamente, los Aleutianos estn estrechamente relacionados con los actuales Europeos Finlandeses y Lapones, que emigraron hacia el Oeste desde los montes Altai de Siberia hasta los lugares que actualmente ocupan en Escandinavia. Se discute la hiptesis de que los Aleutianos representen una migracin hacia el Este de las poblaciones originarias de los montes Altai Siberianos.

DIVERSIDAD ALELICA DEl gen MICA Y HAPLOTIPOS mica/hlab EN UNA POBLACIN DE LA REGION DE MURCIA. Lucas D, Campillo JA, Lpez M, Salgado G, Botella C, Lpez-Hernndez R, Sanchs MJ, Alemany JM, Minguela A, lvarez-Lpez MR, Muro M. Servicio de Inmunologa, Hospital Universitario Virgen de la Arrixaca, Murcia, CIBERehd, Spain. MICA esta localizado a 46 kb centromrico a HLA-B. Su estructura genmica es similar a los genes HLA de clase I, aunque no se asocia a 2-microglobulina. Los exones 2, 3 y 4 del gen codifican los 3 dominios extracelulares (1, 2 y 3, respectivamente), y el exn 5 codifica el dominio transmembrana. MICA es muy polimrfico y se han descrito hasta ahora 63 alelos. El significado funcional de estos polimorfismos no se conoce an, aunque cambios en la secuencia aminoacdica de MICA influencian la afinidad de la interaccin con NKG2D, su ligando en la clulas NK, T y T CD8. As, la presencia de metionina o valina en el codn 129 del dominio 2 confiere fuerte o dbil afinidad, respectivamente. Nuestro propsito fue establecer la diversidad allica de MICA y su ligamiento a HLA-B (gen HLA prximo) en nuestra poblacin. DNA fue extrado con el extractor Maxwell16 (Promega, WI). Genotipaje de MICA y HLA-B se realizo por PCR-SSO y PCR-SSP alelo especfica. Las frecuencias gnicas y haplotpicas se analizaron mediante el programa Arlequin (Universidad de Ginebra). El alelo MICA*008 fue el ms frecuente (25.3%), seguido por MICA*002 (15.6%), MICA*004 (14.9%), MICA*001 (7.8%), MICA*009 y MICA*016 (7.2%), y MICA*010 (4.6%). Los alelos menos representados fueron MICA*005, MICA*007, MICA*017, MICA*023, MICA*030, MICA*033, MICA*046, MICA*050 y MICA*052. En el anlisis de haplotipos, el ms frecuentemente observado es MICA*008-B*07 (9.4%), seguido de MICA*004-B*44 y MICA*001-B*18 (8.1%), MICA*002-B*35 (6.7%), MICA*008-B*44 y MICA*004-B*49 (4.7%) y, MICA*008-B*08 y MICA*002-B*38 (4.1%). Combinaciones no vistas ocasionalmente y no reportadas en poblacin espaola serian MICA*010-B*1501, MICA*015-B*45, MICA*008-B*13 y MICA*008B*4001. En conclusin, la diversidad allica de nuestra poblacin es similar a otras poblaciones ibricas, aunque encontramos una serie de alelos poco frecuentes, as como determinadas asociaciones haplotpicas no descritas en otras poblaciones de la Pennsula Ibrica.

LA IgD DE EUBLEPHARIS MACULARIUS. UN GEN GENERA MLTIPLES ANTICUERPOS. Magadn Momp S1, Snchez Espinel C2, Gambn-Deza F2. 1Hospital Meixoeiro. 2Instituto Superior de Sade do Alto Ave. Al igual que la IgM, la IgD se expresa en la membrana de los linfocitos B maduros como receptor para el antgeno. La ausencia de IgD en aves y su descripcin en peces seos contribuy a la confusin relativa a sus orgenes evolutivos. Recientes estudios han establecido la presencia de IgD en el anfibio Xenopus tropicalis, siendo esencial el estudio gentico en reptiles para conocer mejor el proceso evolutivo de la IgD en vertebrados. En trabajos realizados por nuestro grupo describimos en el reptil Eublepharis macularius (Gecko leopardo) el gen para la IgD. Est constitudo por 11 dominios Ig y un dominio TM. En el presente estudio describimos diferentes ARNs mensajeros generados a partir del gen de la IgD, indicando la presencia de varias formas secretadas y de membrana. El gran nmero de dominios Ig y la diversidad de ARNs mensajeros sugiere una actividad funcional de la IgD relevante. Metodologa. Se obtuvo ARNm a partir de sangre perifrica, bazo y tracto digestivo. Se realizaron RT-PCR con primers especficos para diferentes dominios variables (V) y constantes (C) de inmunoglobulina y TM. Los amplificados obtenidos fueron clonados utilizando el vector pGEM-T y/o secuenciados. Las secuencias obtenidas fueron analizadas utilizando el software DNAstar. Resultados. El anlisis de las secuencias de ADNc obtenidas mediante RT-PCR y/o posterior clonacin, indican la expresin de mltiples ARNm generados, a travs de splacing, a partir del gen de la IgD. A su vez, los resultados indican la produccin de ARNm que codifica para dos formas de IgD secretada. Ambas presentan tallo secretor en el dominio CH11, el cual tiene un menor nmero de aminocidos que el descrito en la IgM e IgA , y no presenta cistenas, sugiriendo que no polimeriza en formas mltiples. Con respecto a la forma transmembrana, hemos descrito al menos 4 formas de ARN mensajero, siendo los dominios CH4, CH9 y CH11, los que realizan splicing con el exn TM. Conclusiones. Un nico gen de anticuerpo IgD puede generar numerosos anticuerpos con capacidades funcionales diferentes, lo que debe conferir ventajas evolutivas que condicionan la permanencia de la IgD en los reptiles. Estos mismos resultados podran obtenerse en otras especies, como peces y anfibios, en los que se encuentran Igs con un gran nmero de dominios, como la IgW e IgY.

EFECTO DE LOS RECEPTORES KIR EN LA RESPUESTA AL TRATAMIENTO COMBINADO EN PACIENTES CON HEPATITIS CRNICA C. Vidal-Castieira JR1, Lpez-Vzquez A1, Daz-Pea R1, Pruneda L1, Alonso-rias R1, Prez R2, Rodrigo L2, Lpez-Larrea C1. 1Servicio de Inmunologa, Unidad de Histocompatibilidad y Transplantes, Hospital Universitario Central de Asturias, Oviedo. 2Servicio de Digestivo, Hospital Universitario Central de Asturias, Oviedo. Los receptores KIR (killer immunoglobulin-like receptors) estn relacionados con la activacin e inhibicin de las clulas NK, y pueden jugar un papel muy importante en la respuesta innata frente a infecciones virales, tales como el HCV. El propsito de este estudio era investigar la posible implicacin de los receptores KIR en la respuesta al tratamiento con interferon pegilado (Peg-IFN--2b) y ribavirina. Para ello se seleccion un grupo de 186 pacientes diagnosticados de infeccin por HCV crnica. Todos los pacientes recibieron tratamiento combinado a lo largo de 6-12 meses y fueron clasificados en

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INMUNOLOGA


funcin de su respuesta al finalizar el periodo de seguimiento posttratamiento: 77 fueron no respondedores (NR) y 109 alcanzaron una respuesta viral sostenida (RVS). Todos fueron tipados para HLA-B, HLA-Cw y KIR mediante PCR-SSOr por la tecnologa Luminex. Se observ que la presencia KIR2DL3 estaba significativamente incrementada en pacientes RVS (61.93% vs. 45.46%, p= 0.001). Adems este receptor en homocigosis tambin se encontraba aumentado en este grupo (p=0.05). Por otro lado, la frecuencia de KIR2DL2 era mayor en pacientes NR (54.54% vs. 38.07%, p=0.001, OR= 1.95). Este receptor en homocigosis tambin se encontraba significativamente aumentado en NR (p=0.005, OR=2.52). Tambin se analizaron las distintas interacciones de estos receptores con sus ligandos HLA. Se observ que el genotipo KIR2DL2/KIR2DL2-HLA-C1C2 estaba aumentado en el grupo NR (p=0.007, OR=3.15) frente al genotipo KIR2DL3/KIR2DL3-HLAC1C1 que se encontraba aumentado en el grupo RVS (p= 0.028). Como conclusin hemos observado que la mayora de los pacientes con el genotipo KIR2DL3/KIR2DL3-HLA-C1C1 responden adecuadamente al tratamiento antiviral. Este genotipo buen respondedor parece facilitar la consecucin de una respuesta viral sostenida. En cambio, la mayora de los pacientes con el genotipo KIR2DL2/KIR2DL2-HLA-C1C2 no responden adecuadamente al tratamiento y no pueden eliminar el RNA viral.

REGULACIN EPIGENETICA DEL MHC EN LINEAS EMBRIONARIAS HUMANAS. Lopez-Larrea C, Bravo-Mendoza C, SuarezAlvarez B. Hospital Central de Asturias. Las clulas embrionarias humanas (hESC) son capaces de diferenciarse a la mayoria de tipos celulares y cultivarse durante largos periodos de tiempo. Estas caracteristicas las hacen ser una fuente importante de clulas capaces de ser utilizadas para el futuro del trasplante y la medicina regenerativa. Uno de los problemas principales es el reconocimiento alognico del injerto y la activacin del sistema inmune conduciendo al rechazo del rgano transplantado. Las hESC expresan niveles muy bajos de MHC-I, pudiendo incrementarse pero nnca alcanzando los niveles detectados en una clulas somticas. No existe expresin de MHC-II y HLA-G. Los mecanismos epigeneticos (metilacin del ADN y modificacin de histonas) son claves en la regulacin de genes en eucariotas, implicando la activacin o silenciamientos de los mismos. Las hESC presentan patrones de metilacin y acetilacin nicos que afectan a la regulacin de genes implicados en su pluripotencialidad y diferenciacin. Todos esto nos ha llevado a estudiar la expresin de MHC en la lnea de hESC Shef-1 (Sheffield, UK) en diversos estadios, as como las molculas implicadas en la maquinaria de procesamiento antignico, factores de transcripcin y los mecanismos epigeneticos que podrian regular su expresin. Hemos observado una deficiencia en los niveles de expresin del MHC-I en hESC como consecuencia de la disminucin de expresin en los genes implicados en la maquinaria de procesamiento antignico (Tapasina, TAP y Erp57), adems de la ausencia de expresin de HLA-DR y de los factores de transcripcin CIITA y RFX-5. Mediante tcnicas de secuenciacin de bisulfito, detectamos hypermetilacin en los genes HLA-DR, CIITA, LMP7 y HLA-G. Adicionalmente, y mediante ensayos de inmunoprecipitacin de la cromatina (ChIP) se observ que modificaciones especificas en las histonas H3 y H4 participan tambien en la regulacin de estos genes. Tratamiento de las hESC con inhibidores de deacetilasas de histonas (HDACs), slo o en combinacin con agentes desmetilantes del ADN, inducen la reexpresin en superficie de las molculas MHC. En conclusin, determinamos que la expresin del MHC-I y II en lineas embrionarias humanas puede estar regulada mediante mecanismos epigenticos.

ANLISIS DEL POLIMORFISMO ALLICO DE KIR3DL1 Y SU ASOCIACIN CON ESPONDILITIS ANQUILOSANTE EN LA POBLACIN ESPAOLA. Daz Pea R, Blanco Gelaz MA, Vidal Castieira JR, Lpez Vzquez A, Surez lvarez B, Lpez Larrea C. Hospital Universitario Central de Asturias. Los diferentes loci de receptores KIRs (Killer cell immunoglobulin-like receptors) y antgenos leucocitarios humanos (HLA) son altamente polimrficos, y algunas molculas HLA de clase I se unen a estos receptores KIRs. En el presente estudio se ha realizado un anlisis del polimorfismo allico del loci KIR3DL1 y se ha examinado si la combinacin de los diferentes subtipos junto con genotipos HLA-B27 est asociado con susceptibilidad a desarrollar espondilitis anquilosante (EA). Para llevar a cabo el estudio, fue seleccionada una poblacin espaola HLA-B27 positiva (56 pacientes con EA y 55 controles sanos). Nuestros resultados mostraron que la diferente distribucin de KIR3DL1 en la poblacin espaola se debe principalmente al descenso de los subtipos KIR3DL1*001 y KIR3DL1*004 en pacientes EA (15.6% vs. 4.5%, pG, lo que da lugar a un cambio en el AA 101 Leu>Prol. Esta mutacin afecta a la zona final del dominio EVH1, y probablemente se encuentre fuera del lugar de acoplamiento de WIP. Por tanto, el tratamiento con inhibidores de la calpana y proteosoma slo sera efectivo en pacientes con mutaciones que afecten directamente a la zona de interaccin WASP-WIP.

y una expansin de linfocitos T CD8 CD57+ DR+. Se inicia tratamiento sustitutivo con IGIV, con adecuado control de las infecciones. A los dos aos debuta con episodios recurrentes de fiebre sin foco, plaquetopenia, neutropenia y anemia, coincidentes con expansines de T CD8 y con adenopatas, gran esplenomegalia e infiltracin nodular en higado y riones. Se realiza esplenectoma en un intento de controlar la plaquetopenia. Dos aos despus desarrolla una neumona por P. carinii (linfocitos T CD4: 723/mmc), corroborandose la disfuncin T (muy bajas respuestas proliferativas a PHA, IL2 y anti-CD3). Se detectan asimismo concentraciones sricas muy elevadas de IL6, TNFalfa, IFNgamma y CD95L. En Diciembre de 2007 la paciente desarrolla una insuficiencia hepatorenal severa tras un episodio de diarrea, fiebre, pancitopenia y sntomas B, coincidentes con infiltracin sistmica por linfocitos T CD8 de carcter oligoclonal. Los sntomas se atenuan con corticoides y se plantea la posibilidad de un Tx hematopoytico de hermano HLA-identico, como posible solucin terica a la inmunodeficiencia B y T y a la expansin de linfocitos T clnicamente agresiva. Se traslada al hospital ValldHebron para valoracin, y se diagnostica un shunt hepato-pulmonar aadido. El shunt hepato-pulmonar es una patologa de mal pronostico, habitualmente asociada a cirrosis y/o hipertensin portal, y que no se ha descrito en la IDVC. En este punto se replantea la idoneidad de Tx hematopoytico versus inmunosupresin.

SESIN 6: CLULAS B Y NK Moderadores: Dra. frica Gonzlez (Vigo), Dr. Miguel Lpez-Botet (Barcelona) LA LEUCEMIA LINFTICA CRNICA B MIGRA EN RESPUESTA A LOS LIGANDOS DE CCR7 A TRAVS DE UN MECANISMO DEPENDIENTE DE PI3K Y RHO. Cuesta Mateos C, Alfonso Prez M, Lpez Giral S, Muoz Calleja C. Hospital Universitario de la Princesa. Nuestro grupo de investigacin ha demostrado que las neoplasias de clulas B con amplia diseminacin a ganglio linftico expresan altos niveles de los receptores de quimioquinas CCR7, CXCR4 y CXCR5, que median la entrada de los linfocitos en los rganos linfoides secundarios. Los ndices de migracin de la leucemia linftica crnica de clulas B (LLC-B) en respuesta a los ligandos de CCR7, CCL19 y CCL21, correlacionan con la presencia de linfadenopata clnica y mediante experimentos in vitro demostramos que anticuerpos anti-CCR7 eliminan clulas de LLC y bloquean su migracin. El objetivo de este estudio es estudiar las vas de sealizacin que median la migracin de clulas de LLC en respuesta a CCL19/21 dada la posible relevancia de CCR7 como diana teraputica. As, mediante ensayos de inmunoblot y quimiotaxis in vitro, analizamos la participacin de las MAPKs, de PI3K y de la familia Rho de pequeas GTPasas, que se encuentran entre los principales mediadores de la quimiotaxis linfocitaria. Los ligandos de CCR7 indujeron una fuerte activacin de ERK1/2, y en menor medida de p38 y JNK, que sin embargo no jugaron ningn papel en la migracin de clulas LLC. En cambio, las vas PI3K y Rho s regularon la quimiotaxis dependiente de CCR7 de esta leucemia. As, inhibidores de PI3K y del efector de Rho, ROCK, redujeron notablemente la migracin celular de LLC en respuesta a los ligandos de CCR7. Ensayos de inmunoblot evidenciaron niveles de Akt constitutivamente fosforilado que aumentaron tras estimulacin con CCL19/21.

INMUNODEFICIENCIA VARIABLE COMUN CON DISFUNCIN T, SNDROME LINFOPROLIFERATIVO, PANCITOPENIA Y SHUNT HEPATO-PULMONAR: INDICACIN DE TRASPLANTE HEMATOPOYTICO? Sampalo A, Rodriguez-Gutierrez JF, Bernal MJ, Nieto A, Fernandez-Valle C, Giron JA, Espaol T, Barrenechea C, Juli A, Brieva JA. Servicios de Inmunologa, Hematologa y Medicina Interna. Hospital Puerta del Mar (Cdiz), Hospital Vall dHebron (Barcelona). Mujer de 32 aos diagnosticada hace 11 de IDVC por infecciones otosinusales de repeticin que comienzan a partir de una mononucleosis infecciosa de evolucin torpida. Al diagnstico presenta panhipogammaglobulinemia (IgG 258 mg/dl; IgA: < 5 mg/dl, IgM: 9 mg/dl, IgE: < 2 UI/ml), incapacidad de produccin de anticuerpos, baja respuesta proliferativa T y ausencia de linfocitos B (

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