4. Efecto de Los Tratamientos Térmicos Sobre La Tcs

7/23/2019 4. Efecto de Los Tratamientos Trmicos Sobre La Tcs

1/10

Revista FAVE - Ciencias Veterinarias 9 (2) 2010 ISSN 1666-938X

EFECTO DE LOS TRATAMIENTOS TRMICOSSOBRE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA

DE TETRACICLINAS EN LECHE

RESUMEN

La presencia de residuos de antibiticos en la leche no solamente produce un potencial riesgo para

la salud del consumidor, sino que adems, ocasiona serios problemas en los procesos fermentativosutilizados en la industria lctea. Por este motivo, el presente trabajo evala el efecto que producenaquellos tratamientos trmicos utilizados en la industria lctea (40C-10 min, 60C-30 min, 83C-10

min, 120C-20 min y 140C-10 s) sobre la actividad antimicrobiana de muestras de leche fortificadas

con tetraciclinas (clortetraciclina, doxiciclina, oxitetraciclina y tetraciclina). Para la medicin de la

prdida de actividad antimicrobiana se emple un bioensayo basado en la inhibicin del crecimiento

deBacillus cereussubssp. mycoidesATCC11778. Para cada antibitico se ensayaron tres concentra-

ciones. Los datos se analizaron utilizando el modelo de regresin lineal mltiple. Los resultadossealan que la esterilizacin clsica (120C-20 min) produce prdidas que superan el 90% para

clortetraciclina, 84% para doxiciclina, 89% para oxitetraciclina y 91% para tetraciclina, mientras que

el calentamiento a 140C-10 s produce bajas prdidas de actividad antimicrobiana (29% clortetraciclina,39% doxiciclina, 17% oxitetraciclina y 29% tetraciclina), similares a la baja pasteurizacin (60C-30

minutos) (31% clortetraciclina, 18% doxiciclina, 23% oxitetraciclina y 21% tetraciclina). Los trata-

mientos trmicos de laboratorio (40C-10 min y 83C-10 min) ocasionan prdidas de actividadantimicrobiana an menores.

Palabras clave:antibiticos, tetraciclinas, termoestabilidad, inactivacin trmica, leche.

SUMMARYHeat treatment effects on the antimicrobial activity of tetracycline in milk.The presence of antibiotic residues in milk is not only a potential consumer risk, but may also

cause serious problems in the fermentation processes used in the dairy industry. The aim of the study

was, therefore, to analyze the effect of different heat treatments (40C-10 min, 60C-30 min, 83C-10min, 120C-20 min and 140C-10 s) on the antimicrobial activity of milk samples fortified with

tetracycline (chlortetracycline, doxycycline, oxytetracycline and tetracycline). To measure the loss

1.- Instituto de Ciencia y Tecnologa Animal. Universidad Politcnica de Valencia. Camino de Vera, 14,46071 Valencia, Espaa.2.- Departamento de Produccin Agraria. Universidad Pblica de Navarra. Campus de Arrosada, 31006Pamplona, Espaa3.- Ctedra de Biofsica, Departamento de Ciencias Bsicas, Universidad Nacional del Litoral. Kreder 2805(3080) Esperanza, provincia de Santa Fe.Manuscrito recibido el 10 de noviembre de 2010 y aceptado para su publicacin el 10 de febrero de 2011.

ZORRAQUINO, M. A..2; ALTHAUS, R. L.3; NAGEL, O. G.3; ROCA, M.1& MOLINA, P.1


2/10

M. A. Zorraquino et al.

60 | Revista FAVE - Ciencias Veterinarias 9 (2) 2010

of antimicrobial activity a bioassay based on inhibition of growth of de Bacillus cereussubssp.mycoidesATCC11778 was used. For each antibiotic three concentrations were tested. The data were

analyzed using a multiple linear regression model. The results showed that classic sterilization

(120C-20 min) produced losses that exceeded 90% for chlortetracycline, 84% doxycycline, 89 %oxytetracycline and 91% tetracycline, while the heat treatment 140C-10 s produced little loss in

antimicrobial activity (29 % chlortetracycline, 39% doxycycline, 17% oxytetracycline and 29%

tetracycline), similar to low temperature pasteurization (60C-30 min) (31% chlortetracycline, 18%doxycycline, 23% oxytetracycline and 21% tetracycline). Laboratory heat treatments (40 C-10 min

and 83 C-10 min) caused little loss of antimicrobial activity.Key words:antibiotics, tetracycline, thermostability, heat inactivation, milk.

INTRODUCCIN

Las tetraciclinas (TCs) constituyen ungrupo de antibiticos naturales (clortetraci-clina, oxitetraciclina, tetraciclina) y semisin-tticos (metaciclina, doxiciclina, minociclina,limeciclina, rolitetraciclina y glicilciclina-

tigeciclina) derivados de diferentes especiesde Streptomyces spp. que se caracterizan porinhibir la biosntesis proteica.

En su forma de accin, las TCs acceden alinterior celular por un doble mecanismo dedifusin pasiva y transporte activo. Luego,se unen a la subunidad 30S del ribosoma

bacter iano bloqueando la fi jacin delaminoacil-tRNA al sitio aceptor del complejoformado por el mRNA y la subunidad 50S del

ribosoma. De esta forma, actan comobacteriostticos, al impedir la elongacin dela cadena peptdica en crecimiento (Klein &Cunha, 1995; Joshi & Miller, 1997; Smilack,1999; Prez-Trallero & Iglesias, 2003).

Estas molculas presentan un amplio es-pectro antibacteriano y buena actividadantibacteriana contra microorganismos Gram-

positivos y Gram-negativos, incluyendo los

gneros Spirochaeta, Actinomyces,Rickettsia y Mycoplasma (Epstein et al.,1997; Cu & Morejn, 1999).

En medicina veterinaria, se emplean en eltratamiento de infecciones sistmicas comoenteritis bacterianas, metritis, neumonas,entre otras, e infecciones locales como quera-toconjuntivitis infecciosa en ganado bovi-no, clamidiasis y actinobacilosis, entre otrasenfermedades (Zorraquino, 2005).

Sin embargo, el uso sistmico de estosfrmacos puede dar lugar a la presencia deresiduos de medicamentos en leche y/o car-ne. Estos residuos de antibiticos, en gene-ral, no poseen efectos txicos verdaderamen-te intrnsecos, pero pueden desencadenarsntomas alrgicos en personas con hiper-sensibilidad, shock anafilctico (McManus1997; Demoly & Romano 2005) y problemasen la elaboracin de productos fermentados

(Perreten & Teuber 1995; Packham et al.,2001; Berruga et al., 2007).

A fin de prevenir los inconvenientes aso-ciados a la presencia de antibiticos, la UninEuropea (CEC, 1991) y el Codex Alimentarius(Codex Aimentarius, 2001) establecieron losLmites Mximos de Residuos (LMRs) declortetraciclina, tetraciclina y oxitetraciclinaen un valor de 100 g/kg para los alimentos

de origen animal, tales como carne, leche yhuevo. Sin embargo, existe limitada informa-cin acerca de los efectos que producen los


3/10

Revista FAVE - Ciencias Veterinarias 9 (2) 2010 | 61

Efecto de los tratamientos trmicos

residuos de TCs en leche sobre los proce-sos tecnolgicos.

Adems, la informacin disponible acer-ca de la inactivacin que experimentan lasTCs frente a los diferentes tratamientos tr-micos en las industrias lcteas es muy esca-sa y evala algunos tratamientos trmicos,como la pasteurizacin a bajas temperatu-ras, sobre la actividad antimicrobiana de losresiduos de clortetraciclina y tetraciclina(Shahani, 1957, 1958; Jacques y Auxepaules,1978). Por ello, la Comisin del Codex

Alimentarius (Codex Alimentarius, 2001) se-ala la necesidad de llevar a cabo estudiosmas detallados acerca de las consecuenciasque producen los tratamientos industrialessobre los antibiticos presentes en los ali-mentos, tales como la pasteurizacin y laesterilizacin.

Debido a la escasa informacin disponi-ble, el objetivo de este trabajo fue analizar elefecto que producen los diferentes tratamien-

tos trmicos utilizados en laboratorios decontrol de calidad de leche (40C-10 min y83C-10 min) y en las industrias lcteas (60C-30 min, 120C-20 min y 140C-10 s) sobre laactividad antimicrobiana de las TCs en le-che.

MATERIALES Y MTODOS

Diseo experimental. Las muestras de le-che libre de antibiticos se fortificaron contres concentraciones (C1, C2 y C3) de cadauna de las cuatro TCs detalladas en el Cua-dro 1.

Los tratamientos trmicos ensayados fue-ron los que habitualmente se emplean en loslaboratorios lactolgicos para la homogeni-zacin de las muestras de leche para su pos-terior anlisis de composicin (40 C-10 mi-

nutos) y para la posible inactivacin de losinhibidores naturales en el anlisis de resi-duos (83 C-10 minutos). Tambin se estu-diaron calentamientos similares a los utiliza-dos en la industria lctea para la elaboracinde leches de consumo, tales como la

pasteurizacin a bajas temperaturas (60 C-30 minutos), la esterilizacin (120 C-20 mi-nutos) y la esterilizacin a ultra alta tempera-tura (140 C-10 segundos).

Para cada TC se emplearon quince placasde agar conteniendo los nutrientes y espo-ras deBacillus cereus, utilizando tres placas

para cada uno de los cinco tratamientos tr-micos antes mencionados.

En cada placa se ensayaron 36 perfora-

Tetraciclina C1 C2 C3 Referencia

Clortetraciclina 40 80 160 Sigma C-4881

Doxiciclina 15 30 60 Sigma D-9891

Oxitetraciclina 100 200 400 Sigma O-5750

Tetraciclina 100 200 400 Sigma T-3258

C1, C2, C3: concentraciones.

Cuadro 1. Concentraciones ( g/l) de las tetraciclinas utilizadas en el estudio de

inactivacin trmica


4/10



ciones segn un diseo 6 x 6. Cada perfora-cin se llen con un volumen de muestra deleche fortificada que se distribuyeron en for-ma aleatoria segn un diseo cuadrado lati-no que se representa en la Figura 1. En estediseo, seis replicas de cada una de las tresconcentraciones de las muestras sin trata-miento trmico (S1, S2 y S3) y las tres con-centraciones de las muestras tratadastrmicamente (T1, T2 y T3) se distribuyeronde modo tal de ubicar cada una de ella enuna nica fila y una nica columna, sin que

se repita su ubicacin.

Muestras de leche forti f icadas y disolu -

ciones patrones de tetracicli nas:Se trabajcon patrones de clortetraciclina, doxiciclina,oxitetraciclina y tetraciclinas suministrados

por Sigma (St. Louis, MO). Se prepararondisoluciones estndares conteniendo 1 mg/ml mediante la disolucin de los compues-tos en metanol. Las disoluciones se prepara-

ron antes de su uso y cada vez que se ensa-y un tratamiento trmico, a fin de evitar la

prdida de la actividad antimicrobiana por

efecto del tiempo de elaboracin o por la ac-cin de la luz.

A continuacin, las disoluciones de TCsen leche se prepararon mediante la fortifica-cin de leche comercial calidad UHT con lasdisoluciones estndares. Se utiliz leche que

present resultados negativos al mtodoDelvotestSP (DSM, The Netherlands) y ala placa especfica para TCs que emplea

Bacillus cereus(Nouws et al., 1999).

Tratamientos trmicos:Cada muestra de

leche fortificada con los niveles de TCs delCuadro 1 se dividi en seis alcuotas con elpropsito de evaluar los diferentes tratamien-tos: ST: sin tratamiento trmico, T1: 40C-10minutos, T2: 80C-10 minutos, T3: 60C-30minutos, T4: 120C-20 minutos y T5: 140C-10 segundos. Los calentamientos a 40C-10minutos, 80C-10 minutos y 60C-30 minutosse llevaron a cabo en un calentador termos-ttico de bao de agua con regulador de tem-

peratura de 0.1C, mientras que el trata-miento a 120C-20 minutos se realizcolocando las muestras de leche en un auto-

Fig. 1. Distribucin de la muestras de leche segn el diseo cuadrado latino utilizadopara el bioensayo cuadrado. S: Sin tratamiento trmico, T: Tratada trmicamente. 1, 2

y 3: concentraciones de tetraciclinas en leche.


5/10



clave con sensibilidad de 1C. Por ltimo,el tratamiento a 140C-10 segundos se desa-rroll segn la tcnica descripta porPagliarini et al.(1990). Para ello, las mues-tras de leche conteniendo las tetraciclinasse colocaron en tubos capilares de aceroinoxidable de 1.6 mm de dimetro interno,0.5 mm de espesor de la pared y 1 m de lon-gitud plegado en forma de espiral. El volu-men de muestra de leche fue de 3 ml. Unavez lleno, se coloc a calendar en un baocompacto de aceite de siliconas a 140 1C

durante 10 segundos. Inmediatamente des-pus del calentamiento, los tubos se transfi-rieron en un bao de agua con hielo a 0C

para detener el calentamiento.

Preparacin de las placas:Para la de-teccin de residuos de TCs en leche se em-

ple la placa especfica propuesta por Nouwset al. (1999). Se utiliz medio de cultivo STDII (Standar II Nhragar) suplementado con

KH2PO4e inoculado con una suspensin deesporas de B. cereus var. mycoidesATCC11778, de modo tal de obtener una con-centracin final de 105esporas /ml en agarde a pH 6.0 0.1.

Se utilizaron placas cuadradas de 243 mmx 243 mm x 18 mm (NUNC Ai, Roskilde,Denmark). En cada placa se deposit 115 mlde medio de cultivo de modo tal de obtenerun espesor de 2.2 mm. Se dej enfriar en am-

biente estril de flujo laminar en una superfi-cie totalmente horizontal perfectamente ni-velada para garantizar el mismo espesor deagar.

Una vez que el medio estaba solidificado,se practicaron 36 perforaciones de 14 mm dedimetro en el agar. Los orificios se distribu-yeron segn un cuadrado de 6 filas por 6columnas (Fig. 1). En cada orificio se coloc

250 l de las muestras de leche fortificadascon TCs segn el diseo cuadrado latinodescripto en el diseo experimental. Las pla-

cas cuadradas se colocaron a temperaturaambiente durante 30 minutos y luego se in-cubaron a 30 1C por un tiempo de 16 a18 h.

Trascurrido este tiempo, los dimetros delos halos inhibitorios (incluido el dimetrode la perforacin de 14 mm) se midieron conun calibre digital electrnico (rango 0-150mm, sensibilidad 0.02 Selecta, Espaa).

Anlisis estadsti co de los resul tados:

Con el propsito de evitar las posibles dife-rencias entre las distintas placas utilizadas

para cada tratamiento y antibitico, se apli-caron las recomendaciones de correccin delos dimetros de las zonas de inhibicin pro-

puestas por AOAC International (2000). Paraevaluar el efecto de los tratamientos trmi-cos sobre los dimetros de los halos inhibito-rios se emple un modelo de regresin linealmltiple aditivo. Dicho modelo contempla unefecto constante de cada tratamiento trmi-co sobre la actividad antimicrobiana, que es

independiente de la concentracin detetraciclina presente en la muestra de leche.De este modo, el efecto de cada tratamientotrmico se visualizar por un desplazamientoen la ordenada al origen con respecto a larecta construida a partir de las muestras deleche no tratadas. El modelo utilizado fue elsiguiente:

Donde: yij: dimetro de la zona de inhibi-

cin (en milmetros); log Ci: logaritmo deci-

mal de la concentracin de tetraciclina (en g/l); 0: intercepto; 1: pendiente de la recta; Tj:correccin del intercepto de las rectas debi-do a los efectos de los diferentes tratamien-tos trmicos "i"; T

j: efecto del tratamiento

trmico "i" en trminos de variable dummy

(no tratada: T1 = 0, T2 = 0, T3 = 0, T4 = 0, T5= 0; 40C-10 minutos: T1 = 1, T2 = 0, T3 = 0,T4 = 0, T5 = 0; 83C-10 minutos: T1 = 0, T2 =

y ij= 0 + 1 log C i + Tj .Tj+ i j


6/10



1, T3 = 0, T4 = 0, T5 = 0; 60C-30 minutos: T1= 0, T2 = 0, T3 = 1, T4 = 0, T5 = 0; 120C-20minutos: T1 = 0, T2 = 0, T3 = 0, T4 = 1, T5 = 0y 140C-10 s: T1 = 0, T2 = 0, T3 = 0, T4 = 0, T5= 1) y e

ij: error residual del modelo lineal.

Los resultados se obtuvieron mediante laaplicacin de la opcin stepwise del proce-dimiento REG contenido en el paquete esta-dstico SAS(SAS, 2001). Esta opcin per-mite incorporar al modelo en forma secuencialnicamente aquellas variables significativas(p < 0.05), de modo tal de ingresar aquellos

tratamientos que presentaron efecto signifi-cativo y dejar fuera del modelo aquellos tra-tamientos que no lo fueron. Por ltimo, paracada TCs, se calcularon los porcentajes deinactivacin trmica (%IT) relativos debidoal efecto de cada uno de los tratamientostrmicos, segn la siguiente expresin:

Donde: 0: Intercepto; Tj: correccin delintercepto de la recta debido al efecto deltratamiento "i" calculado mediante los trmi-nos dummy de la Ecuacin (I). Los porcenta-

jes de inactivacin trmica calculados me-diante esta ecuacin son independientes dela concentracin de tetraciclina presente enla muestra de leche.

Para las TCs que no presentaron zonasde inhibicin cuando se sometieron al trata-miento trmico de 120-20 s, se estim el por-centaje mnimo inhibitorio como el porcenta-

je relativo entre la concentracin mximaensayada y la mnima concentracin estima-da por el modelo de regresin que no produ-ce zona de inhibicin (14 mm), utilizando lasiguiente expresin:

% IT = [(Cmx - C 14mm))/Cmx] x 100

Donde los nuevos trminos son: Cmx:concentracin mxima ensayada para cada

% I T = [ 1 1 0 ( - Tj /0 ) ] x 1 0 0

antibitico, C(14mm) concentracin mnimaestimada por el modelo de regresin linealque no produce zona de inhibicin (14 mm).

RESULTADOS Y DISCUSIN

En el anlisis estadstico de los datos nose consider el calentamiento a 120C-10 min

porque produjo grandes prdidas de la acti-vidad antimicrobiana de las cuatro

tetraciclinas ensayadas y no fue posible ob-tener halos inhibitorios. Por ello, los resulta-dos obtenidos mediante la opcin stepwisedel Modelo de Regresin Lineal Mltiple(Cuadro 2) para el resto de los tratamientostrmicos estudiados sealan efectos signifi-cativos (p


7/10



Cuadro 2. Efecto de los tratamientos trmicos y las concentraciones de tetraciclinas en leche

sobre los dimetros de los halos de inhibicin de B. cereus

a : D: Dimetro de la zona de inhibicin (mm) T1: 40C durante 10 minutos; T2: 83C durante 10 minutos,

T3: 60C durante 30 minutos, T5, 140C durante 10 segundos.; b: R: Coefciente de regresin.

Figura 2. Efectos de los tratamientos trmicos de laboratorios e industrias sobre los dimetros de

los halos inhibitorios de tetraciclinas en leche.

entre 1,57 mm (clortetraciclina) y 2,51 mm

(doxiciclina) y aquellas muestras de leche

calentadas a 60C-30 min, ya que causan

disminuciones importantes en los dimetros

de inhibicin que se hallan dentro del rango

1,05 mm (doxiciclina) y 1,72 mm (clortetra-

ciclina). Con respecto al tratamiento UHT

(140C-10 s), doxiciclina mostr prdidas

ms importantes (2,51 mm) que el resto de

las TCs.

En el Cuadro 3 se muestran las prdidas

de las actividades antimicrobianas calcula-

das para las cuatro TCs. El calentamiento

a 40C-10 min no produce prcticamente

inactivaciones sobre estas molculas, por

Tetraciclina Modelo de regression lineal mltiple R

Clortetraciclina Da= 1,07 +10,69 Log[Clortetraciclina] -1,15TT2-1,72TT2-1,57TT5 0,9801

Doxiciclina Da= 2,45 +11,92 Log[Doxiciclina] -0,51TT1-0,75TT2-1,05TT3-2,51TT5 0,9863

Oxitetraciclina Da= -6,34 +12,24 Log[Doxiciclina] -0,42TT2-1,36TT3-1,671TT5 0,9773

Tetraciclina Da= -3,38 +11,16 Log[Doxiciclina] -0,32TT1-0,62TT2-1,14TT3-1,67TT5 0,9821


8/10



tratarse de una calefaccin suave para lo-grar la homogeneizacin de las muestras deleche antes de realizar los anlisis fsico-qu-micos en los laboratorios. Tambin, la

pasteurizacin a 83C-10 min causa levesprdidas de TCs, comprendidas entre el 8%(oxitetraciclina) y 22% (clortetraciclina).

Por el contrario, el calentamiento a 120C-20 min presenta mayor prdida de la activi-dad antimicrobiana que el resto de los trata-mientos trmicos ensayados, si bien no se

pudieron medir los dimetros de los halos

inhibitorios, se estimaron las prdidas quesuperaron el 84% en todos los casos. Losotros dos tratamientos industriales produje-ron una prdida menor (18-39%) en la activi-dad antimicrobiana de las TCs.

En las revisiones realizadas por Moats(1988, 1999) se citan los trabajos de Shahaniet al. (1954) y Shahani (1957, 1958) dondeevalan el efecto del tratamiento a 62C-30min sobre la actividad antimicrobiana de

clortetraciclina y tetraciclina en leche. Estostrabajos sealan prdidas en la actividad declortetraciclina (16,6%) y tetraciclina (23,6%)similares a las determinadas en este trabajo(Cuadro 3). Por el contrario, Jacquet y

Auxepaules (1978) luego de someter mues-tras de leche fortificadas con clortetraciclinay tetraciclina a una pasteurizacin baja (63C-30 min) obtienen menores porcentajes deinactivacin (2,5% y 6,1%, respectivamente)que los sealados en el Cuadro 3.

Para la esterilizacin clsica, Shahani(1957, 1958) seala una inactivacin total(100%) para tetraciclina y clortetraciclinacuando se someten a un calentamiento de121C durante 15 minutos, semejantes a laselevadas prdidas que se estiman en el Cua-

dro 3 para el calentamiento de 120C durante10 minutos.Tambin, Pilet et al.(1969) al calentar mues-

tras de leche a 100C-30 min observan por-centajes de inactivaciones comprendidosentre el 75 y 100% para residuos deoxitetraciclina y tetraciclina. Se debe desta-car que en la bibliografa consultada no seencontraron datos de prdida de actividadantimicrobiana para doxiciclina y

oxitetraciclina en leche.Para otros agentes antimicrobianos, tam-

bin se sealan elevadas prdidas de activi-dad antimicrobiana durante la esterilizacina 120C-20 min y menores prdidas para la

Cuadro 3. Porcentaje de inactivacin (%) de tetraciclinas en la leche segn los diferentes trata-

mientos trmicos

NS: efecto no signif icativo en comparacin con las muestras sin tratamiento trmico; *: mnimoporcentaje de inactivacin calculado a partir de la concentracin estimada que no produce zona de

inhibicin (14 mm).

TetraciclinaTratamientos de laboratorio Tratamientos industria les

40C-10 min 83C-10 min 60C-30 min 120C-20 min 140C-10 s

Clortetracilina NS 22 31 > 90 29

Doxiciclina 9 14 18 > 84 39

Oxitetraciclina NS 8 23 > 89 27

Tetraciclinas 6 12 21 > 91 29


9/10



pasteurizacin a 60C-30 min y la pasteu-rizacin a ultra alta temperatura de antibi-ticos betalactmicos (Zorraquino et al.,2009a), aminoglucsidos (Zorraquino et al.,2009b) y macrlidos (Zorraquino et al., 2010).Por el contrario, las quinolonas son molcu-las termoestables que manifiestan baja pr-dida de actividad antimicrobiana cuando selas calientan a 120C-20 min (Zorraquino etal., 2008).

CONCLUSIONESA modo de sntesis, se puede establecer

que los tratamientos trmicos empleados enlos laboratorios lactolgicos causan bajas

prdidas de la actividad antimicrobiana delas tetraciclinas. Los tratamientos trmicosindustriales producen prdidas moderadas(inferiores al 31%) de la actividad antimicro-

biana de doxicicl ina, clor te tracic lina,

oxitetraciclina y tetraciclina en leche cuandose someten a 60C-30 min (pasteurizacin

baja) y 140C-10 s (UHT), mientras que laesterilizacin clsica (120C-20 minutos) oca-sionan una elevada prdida de la actividadantimicrobiana de las cuatro tetraciclinasensayadas, superando al 84%. Al respecto,resulta interesante llevar a cabo estudios ten-dientes a evaluar la posible toxicidad de losmetabolitos producidos mediante este calen-tamiento a fin de garantizar una inocuidad

para el consumidor.

AGRADECIMIENTO

El presente trabajo de investigacin fuellevado a cabo con aportes del proyectoAGL2003-03663 financiado por el Ministerio

de Educacin y Ciencia (Madrid, Espaa).Adems, los autores agradecen a la Univer-sidad Politcnica de Valencia (UPV, Espaa)

por su colaboracin para hacer posible laestancia del Dr. Rafael Althaus en el Institu-to de Ciencia y Tecnologa Animal de la UPV.

BIBLIOGRAFIA

AOAC (ASSOCIATION OF OFFICIAL

ANALYTICAL CHEMISTS). 2000.

Official methods of analysis, 17th ed., pp.

39-44. AOAC International, Arlington, VA.

BERRUGA, M. I.; MOLINA, M. P.; NOVES,

B.; ROMAN, M. & A. MOLINA.2007. InVitro study about the effect of several

penicillins during the fermentatio of yogurt

made from ewe's milk. Milchwissenschaft,

62: 303-305.

CEC (COMMISSION OF THE EUROPEAN

COMMUNITIES).1991. Establishment by

the European Community of Maximum

Residue Limits (MRLs) for residues of

veterinary medical products in foodstuffs of

animal origin. The rules governing medicalproducts in European Community VI. ECSC-

EEC-EAEC. Brussels. Belgium.CODEX ALIMENTARIUS COMMISSION.

2001. Committee on Residues of Veterinary

Drugs in Foods, Document Control ofVeterinary Drug Residues in Milk and Milk

Products CX/RVDF, 01/8. Joint Food and

Agriculture Organization of the United

Nations-World Heal th Organiza tion

Program, Rome, Italy.CU, M. & M. MOREJN. 1999. Antibiticos

de accin sistmica. Parte III. Sulfonamidas

y tetraciclinas. Rev Cub Med Gen Integr;

15:156-67.DEMOLY, P. & A. ROMANO.2005. Update on

beta-lactam allergy diagnosis. Curr. Allergy

Asthma Rep., 1: 9-14.EPSTEIN, M.; AMODIO-GROTON, M. & N.

SADICK. 1997. Antimicrobial Agents for theDermatologist. II. Macrolides, Fluro-quinolones,

Rifamiciycins, Tetracyclines, Trimethoprim-


10/10



Sulfamethoxazole, and Clin-damycin. J. Am.

Acad. Dermatol., 37: 365-81.JACQUES, J. & M. AUXEPAULES. 1978. Le

problme de la pollution du lait par lesantibiotiques. tat actuel de la question. Bull.

Acad. Vt. de France, 51: 73-79.

JOSHI, N. & D. MILLER.1997. Doxycycline

revisited. Arch Intern Med, 157:1421-1428.KLEIN, N. & B. CUNHA.1995. Tetracyclines.

Med Clin North Am, 79:789-801.MCMANUS, M. C. 1997. Mechanisms of

bacterial resistance to antimicrobial agents.

Am. J. Health Syst. Pharm., 54: 1420-1433.MOATS, W. A. 1988. Inactivation of antibiotics

by heating in foods and other substrates - Areview. J. Food Prot., 51: 491-497.

MOATS, W. A. 1999. The effect of processing on

veterinary residues in foods. 233-241. In Impact

of processing on Food Safety. Ed. Kluwer

Academic, Plenum Publishers, New York.NOUWS, J.; VAN EGMOND, H.; SHULDERS,

I.; LOEFFEN, G.; SCHOUTEN, J. & H.

STEGEMAN.1999. A microbiological assaysystem for assessment of raw milk exceeding EU

maximum residue level. Int. Dairy J., 9: 85-90.PACKHAM, W.; BROOME, M. C.; LIMSOWTIN,

G. K. & H. ROGINSKI.2001. Limitations of

standard antibiotic screening assays when applied

to milk for cheesemaking. Aust. J. Dairy Tech.,

56: 15-18.

PAGLIARINI, E.; VERNILE, M. & C. PERI.

1990. Kinetic study on colour changes in

milk due to heat. J. Food Sci., 55: 1766-1767.PREZ-TRALLERO, E. & L. IGLESIAS.2003.

Tetraciclinas, Sulfamidas, Metronidazol. Enferm.

Infecc. Microbiol. Clin., 21(9):520-529.

PERRETEN, V. & M. TEUBER.1995. Antibioticresistance bacteria in fermented dairy

products a new challenge for raw milk cheese.

In Residues of antimicrobial drugs and other

inhibitors in milk. IDF S.I. 9505. Kiel,

Germany, 144-148.PILET, C.; TOMA, B.; MUZET, J. & F.RENARD.1969. Essais sur la thermostabilit

de quelques antibiotiques (Investigation of

the thermostability of several antibiotics).

Cahier. Med. Vet., 38: 227-234.

SAS. 2001. Institute Inc. SAS users guide: statisticsversion 9.1. SAS Institute, Cary, NC.

SHAHANI, K. M.; GOULD, I. A.; WEISER, H.

H. & W. L. SLATTER.1954. Effect of heat

treatments on streptomycin and chlortetracy-

cline (aureomycin) in milk. Antibiotic Ann.

(1954-55), p. 353, Medical Encyclopedia,Inc., New York.

SHAHANI, K. M.1957. The effect of heat and storage

on the stability of Aureomycin in milk, buffer,and water. J. Dairy Sci., 40: 289-296.SHAHANI, K. M. 1958. Factors affecting

Terramycin activity in milk, broth, buffer,

and water. J. Dairy Sci., 41: 382-391.SMILACK, J.1999. The Tetracyclines. Clin

Proc., 74:727-729.ZORRAQUINO, M. A.2005 Inactivacin trmi-

ca de sustancias antimicrobianas en la leche.Ph.D. Diss., Universidad Pblica de Nava-

rra, Navarra, Espaa.ZORRAQUINO, M. A.; ROCA, M.; CASTI-

LLO, M.; ALTHAUS, R. & M. P. MOLINA.

2008. Effect of thermal treatments on the

activity of quinolones in milk. Milchwissens-chaft, 63 (2): 192-195.

ZORRAQUINO, M. A.; ROCA, M.;

FERNANDEZ, N.; MOLINA, M. P. & R.

ALTHAUS. 2009a. Heat inactivation of beta

lactam antibiotics in milk. Journal of Food

Protection, 71 (6): 1193-1198.ZORRAQUINO, M. A.; ALTHAUS, R. L.; ROCA,

M. & M. P. MOLINA.2009b. Effect of Indus-

trial Heat Treatments on the Antimicrobial

Activity of Aminoglycosides in Milk. Journal of

Food Protection, 72: 1338-1341.ZORRAQUINO, M. A.; ALTHAUS, R. L.;

ROCA, M. & M. P. MOLINA. 2010. Heat

treatment effects on the antimicrobial activity

of macrolide and lincosamide antibiotics inmilk. Journal of Food Protection. En Prensa

4. Efecto de Los Tratamientos Térmicos Sobre La Tcs

Documents

Transcript of 4. Efecto de Los Tratamientos Térmicos Sobre La Tcs