29 al 30 de noviembre de 2012 Dominguezia III Jornadas ... (Philippi) V. A. Funk (sinónimo:...

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Dominguezia - Vol. 28(2) - 201229 al 30 de noviembre de 2012

PRINCIPIOS BIOACTIVOS EN ESPECIESAROMÁTICAS Y MEDICINALES ANDINAS:“PUPUSA” (XENOPHYLLUM POPOSUM),“PUPUSA DE AGUA” (X. INCISUM), “YACÓN”(SMALLANTHUS SONCHIFOLIUS), “COPA-COPA” (ARTEMISIA COPA) Y “CHACHA-COMA” (SENECIO NUTANS). César A. N. Ca-talán. INQUINOA-CONICET e Instituto de Quí-

mica Orgánica, Facultad de Bioquímica, Quími-ca y Farmacia, Universidad Nacional de Tucumán,SanMiguel de Tucumán (4000), Argentina. Correoelectrónico: [email protected] aislamiento geográfico de las comunidades y lospueblos que habitan la región andina del noroestede la Argentina, Bolivia y Perú, ha contribuido a laconservación y el mantenimiento de sus tradiciones

III Jornadas Nacionales de Plantas Aromáticas Nativasy sus Aceites Esenciales

San Salvador de Jujuy-República Argentina29 y 30 de noviembre de 2012

Facultad de Ingeniería. Universidad Nacional de Jujuy (FI-UNJu)República Argentina

Conferencias

Dr. Arnaldo BaldoniMSc. Ing. Agr. Miguel A. Elechosa

Dra. Dora VignaleDr. César Catalán

Dra. Carmen ViturroIng. Qco. Armando Ricciardi

Dra. Catalina van BarenDra. Ana María Molina

Dra. Susana Gattuso

Comisión Científica

Dra. Carmen Inés ViturroIng. Mabel Zampini

Ing. Cecilia HeitDra. Adriana Olleta

Lic. Ana Cristina MolinaMSc. Ing. Miguel Ángel Elechosa

Tec. Qco. Miguel Ángel JuárezIng. Walter Villa

Ing. Sigfrido Alemán

Ing. Elizabeth GarcíaLic. Marta Labarta

Ing. Luciana SaluzzoLic. Roxana CabanaIng. Liliana Celaya

Lic. María Ana GonzálezIng. Adriana Apaza

Dra. Cecilia GonzálezProf. María Rosa Poma

Comisión Organizadora

Resúmenes de conferencias y trabajos presentados

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III Jornadas Nacionales de Plantas Aromáticas Nativas y sus Aceites Esenciales

ancestrales, entre ellas, la medicina folklórica. Lafarmacopea herbaria de los pueblos andinos es ricay variada, aun cuando la flora del ambientesemidesértico de la región bajo consideración (pro-vincias fitogeográficas de la puna, prepuna yaltoandina) es relativamente pobre (Cabrera, 1971;Giberti, 1983). En esta presentación se analizaránlos principales metabolitos producidos por algunasde las especies pertenecientes a la familia de lasAsteraceae que son utilizadas en la farmacopeafolklórica del noroeste argentino así como los prin-cipios responsables de su actividad. Xenophyllumpoposum (Philippi) V. A. Funk (sinónimo: Werneriapoposa Philippi) es un subarbusto perenne,rizomatoso, con aroma desagradable, conocido conel nombre vulgar de “pupusa”, “poposa” o “fosfosa”.Crece en las altas montañas del norte de la Argenti-na, norte de Chile, Bolivia y Perú a 4.600-5.300m.s.n.m. Sus partes aéreas se emplean para el trata-miento de la hipertensión, “apunamiento” y desór-denes digestivos como indigestión, inflamación in-testinal, cólicos intestinales y diarrea (Alonso yDesmarchelier, 2006). También se usa para el dolorabdominal, el reumatismo y como condimento dealimentos para convalecientes de neumonía (Giberti,1983; Alonso y Desmarchelier, 2006). El aceite esen-cial se obtuvo por arrastre con vapor de agua dediversas colecciones de material vegetal, realizadasen años diferentes, en el Cerro Pabellón, Departa-mento Andalgalá, provincia de Catamarca, a 4.600m.s.n.m., con rendimientos del 0,6 al 0,8 %. El aná-lisis por cromatografía gaseosa acoplada a espectro-metría de masa mostró, en todos los casos, una com-posición muy parecida. Se identificaron 56 compo-nentes en total que representan el 93 % del aceite.Los principales componentes fueron δ-cadineno16,5 %, 6-hidroxitremetona 14,7 %, epi-α-cadinol12,0 %, α-cadinol 8,8 %, γ-cadineno 7,5 %, 1-epi-cubenol 4,2 % y α-muuroleno 3,0 %. El aceite esen-cial mostró significativa actividad antibacterianafrente a Pseudomonas aeruginosa y Escherichiacoli. Por su parte, los principales componentes delextracto metanólico de las partes aéreas fueron: elcompuesto antifúngico 4-hidroxi-3-(isopenten-2-il)-acetofenona (Figura 1), 6-hidroxitremetona (Figu-ra 2) y tremetona. El extracto metanólico mostró ac-tividad antibacteriana frente a diversas cepas deStaphylococcus aureus. El extracto metanólico y elaceite esencial mostraron, respectivamente, actividadantirradicalaria y antioxidante moderado y débil, en

comparación al BHT usado como referencia, emplean-do el ensayo del radical 2,2’-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH) y el sistema micelar β-caroteno/ácidolinoleico. Los componentes más relevantes del aceiteesencial de la “poposa” son fuertemente bioactivos.La 6-hidroxitremetona (Figura 2) (14,7 % en el acei-te esencial) exhibe potente actividad anticáncer fren-te a células HL-60 de leucemia humana y de la lí-nea tumoral HeLa (Liu y col., 2010); tiene efectoinhibitorio sobre el crecimiento de plantas (Céspe-des y col., 2002), anti-HIV (Piacente y col., 1994) yactividad alergénica (Hausen y Helmke, 1995). Elepi-α-cadinol (t-cadinol), 12,0 %, induce célulasdendríticas a partir de monocitos y estimula la pola-rización Th1 (Takei y col., 2006). También inhibela hipersecreción intestinal inducida en ratones y lascontracciones inducidas eléctricamente en el íleonde conejillos de india (Claeson y col., 1991a) asícomo propiedades antagonista de calcio (Claeson ycol., 1991b). El tau-cadinol (12,0 %) y el α-cadinol(8,8 %) suprimen la producción de óxido nítricoinducida por lipopopisacáridos y tienen significati-va actividad antiinflamatoria (Tung y col., 2011).El α-cadinol también exhibe poderosa actividadantiácaros (Chang y col., 2001). El antifúngico4-hidroxi-3-(isopenten-2-il)-acetofenona (Figura 1),componente ampliamente mayoritario del extracto

Figura 2.- (2R)-6-hidroxitremetona

Figura 1.- 4-hidroxi-3-(isopenten-2-ilo)-acetofenona

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de partes aéreas de la “poposa” tiene propiedadesvasodilatadoras. En conclusión, X. poposum con-tiene cantidades significativas de metabolitos fuer-temente bioactivos cuyas propiedades son consis-tentes con algunos de sus usos en medicina tradi-cional. Debido al contenido de tantos compuestosbioactivos (González y col., 2013), cabe esperar quela ingesta de infusiones o decocciones de esta hier-ba produzca efectos significativos que merecen serinvestigados en profundidad, especialmente en re-lación con posibles sinergias. Debe investigarse tam-bién la existencia de quimiotipos, como se infierede la composición muy diferente detectada en acei-tes esenciales de esta especie provenientes de co-lecciones realizadas en las provincias de Catamarcay Jujuy (Viturro y Ferro, 1994; Abella y col, 2000).X. incisum (Philippi) V. A. Funk (sin. Werneria incisaPhil.), también conocida como “pupusa”, “poposa”,“pupusa del cerro”, “pupusa de agua” o “pupusa delrío”, se confunde frecuentemente con X. poposum ylos usos de ambas plantas son esencialmente losmismos. Un estudio realizado por de Marchese ycolaboradores en 2007, de material vegetal prove-niente del Departamento Susques, provincia deJujuy, dio un aceite esencial con β-pineno (19,4 %),un nuevo alcohol sesquiterpénico denominadoincisol (Figura 3), C15H24O, (13,0 %); un óxido ses-quiterpénico C15H26O (11,0 %), un hidrocarburosesquiterpénico no identificado C15H22 (6,4 %) y 2,2-dimetil-6-acetil-3-cromeno (5,9 %) como compo-nentes principales. Por su parte, la cromatografíaen columna del extracto clorofórmico de las partesaéreas permitió aislar e identificar, a igual que en X.poposum, la p-hidroxiacetofenona prenilada 1 comocomponente ampliamente mayoritario. En X.incisum se identificó además, acetovanillona (4-hidroxi-3-metoxi-acetofenona), un inhibidor potente

y selectivo de la NADH oxidasa-dependiente deespecies reactivas de oxígeno y, notablemente, 9miligramos de la hormona pregnenolona (deMarchese y col., 2007). En resumen, X. incisum tie-ne un aceite esencial con una composiciónmarcadamente diferente a la de su pariente cercanoX. poposum, aunque ambos tienen un uso similar enmedicina tradicional. Ambas especies tienen el de-rivado prenilado de p-hidroxiacetofenona 1 comocomponente ampliamente mayoritario. El “yacón”o “yakón” [Smallanthus sonchifolius (Poepp &Endl.) H. Robinson] es una planta herbácea peren-ne originaria de Sudamérica. Esta especie fue culti-vada durante siglos por los pueblos originarios, des-de el sur de Colombia hasta el norte de Argentina,por sus raíces tuberosas que se consumen como fru-ta. Las raíces de este cultivo andino poco difundidoson un componente regular en la dieta de los luga-reños y puede encontrarse en algunos mercados lo-cales de Salta y Jujuy. Las hojas secas son reco-mendadas para personas que sufren de diabetes tipoII y también para desórdenes renales y digestivos.En el año 2001, investigadores de la UniversidadNacional de Tucumán (UNT) aportaron evidenciacientífica sobre la actividad hipoglucemiante de losextractos acuosos (decocción) de las hojas de yacón.La decocción al 10 % de hojas produce una dismi-nución significativa de los niveles de glucosaplasmática (Aybar y col., 2001) en ratas con diabe-tes inducida. Sin embargo, la naturaleza de los com-puestos responsables de esa actividad antidiabéticano era conocida. Estudios fitoquímicos realizadossobre el yacón indican la presencia de varias lactonassesquiterpénicas tipo melampolido, como sonchi-folina, uvedalina, enhidrina y fluctuanina. Laenhidrina es la principal lactona que se aísla de lashojas del yacón y se ha sugerido que tiene propie-dades antidiabéticas, sin evidencia que lo sustente.También se han identificado en las hojas compues-tos fenólicos, principalmente ácido clorogénico (áci-do cafeoil-quínico) además de otros derivados delácido cafeico que parecen ser los responsables de laactividad antioxidante. En nuestro laboratorio encolaboración con los grupos de la doctora Sara S.Sánchez, la doctora Susana Genta y el doctor AlfredoGrau, todos de la UNT, hemos realizado un estudiopara determinar la actividad hipoglucemiante in vivode cinco extractos orgánicos preparados con hojasde yacón, así como de la lactona sesquiterpénicaenhidrina, aislada pura en forma cristalina. Como

Figura 3.- Incisol

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animales de experimentación se emplearon ratasnormoglicémicas y ratas con diabetes inducida porstreptozotocin. Se aislaron e identificaron los com-ponentes principales de las fracciones activas. Elextracto butanólico donde se identificaron ácidocafeico, ácido clorogénico y tres ácidos dica-feoilquínicos resultó ser la fracción más activa. Porsu parte, la principal lactona sesquiterpénica delyacón, la enhidrina, mostró también ser efectiva parareducir los niveles de glucosa posprandial (Aybar ycol., 2001). Nuestros resultados apoyan fuertemen-te la idea de que los compuestos fenólicos deriva-dos del ácido cafeico así como la enhidrina, sonimportantes principios hipoglucemiantes del yacónque producen un mejoramiento de la condicióndiabética.Referencias bibliográficasAbella, L.; Cortella, A.R.; Velasco-Negueraela, A.; Pérez-

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DE ESPONTÁNEAS A CULTIVADAS: ECO-NOMÍA, SUSTENTABILIDAD Y CONSERVA-CIÓN DEL RECURSO. Miguel A.Elechosa. Ins-tituto de Recursos Biológicos INTA, Las Caba-ñas y de los Reseros s/n. Hurlingham (1686),Pcia. de Buenos Aires. Correo electrónico:[email protected] investigación en plantas aromáticas nativas re-conoce antecedentes ya en el siglo XIX, con los es-tudios fitoquímicos de Arata y Arata y Canzonierisobre el aromito (Acacia caven Mol.), y las contri-buciones de Domínguez con la obra “MateriaMedica Argentina” en las primeras décadas del si-glo pasado. Pero es a partir de la publicación de “LosAceites Esenciales de la República Argentina” en1961, por Fester y sus colaboradores, que la inves-tigación en plantas aromáticas adquiere un fuerteimpulso por medio de sus discípulos y de los gru-pos científicos que se derivaron y generaron unaimportante producción. En el INTA Castelar el gru-po dedicado al estudio de plantas aromáticas y nati-vas, inició en 1982 un plan de trabajo dedicado alestudio y domesticación de especies aromáticas in-dígenas, en un contexto de fuerte restricción presu-puestaria, que obligó a su interrupción en 1987, peroa mediados de la última década del siglo XX reanu-daron las actividades financiadas con fondosextrapresupuestarios generados por el mismo gru-po hasta que finalmente en 2006, con la aprobacióndel proyecto PNHFA4164, se obtuvo una base fir-me de financiación que logró una mayor interaccióncon grupos extra INTA como las Universidades deBuenos Aires, Jujuy y San Luis. De esta manera seprodujo una gran cantidad de información útil paraencarar un proceso de introducción al cultivo de lasespecies nativas amenazadas por su demanda co-mercial. Estos estudios tuvieron mayor continuidaden las Universidades, y la labor de grupos de cientí-ficos en las de Córdoba, Cuyo, Nordeste, Patagonia,Río Cuarto, Santa Fe y Tucumán, además de lasnombradas, generaron y continúan generando

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importantes contribuciones en los aspectos de ca-racterización y evaluación y métodos de propaga-ción de estas y otras especies nativas. El ProyectoEspecífico PNHFA4164, “Desarrollo de tecnologíasinnovativas para la exploración, conservación, eva-luación y utilización de plantas aromáticas nativas”,pertenece a la cartera de proyectos del INTA co-rrespondientes al período comprendido entre 2006y 2009. El objetivo del proyecto fue contribuir a laconservación y utilización sostenible de las plantasaromáticas nativas amenazadas por sobreexplotacióny que experimentan grave erosión genética por sudemanda comercial. En la primera etapa se trabajócon un grupo de once especies que aparecen some-tidas a la mayor presión de recolección, comproba-da por el retroceso, el debilitamiento en términosde número y densidad, o la desaparición de las po-blaciones en numerosas localidades. Se debe reco-nocer que la recolección no es la única causa de laerosión biológica; el desmonte a tala rasa que exigela ampliación de la frontera agrícola y otras prácti-cas, como la roza a fuego intencional para proveerpasto al ganado que deviene en incendios arra-sadores, tienen efectos a menudo permanentes so-bre la composición florística y la diversidad vegetalde inmensas áreas, que junto a la urbanizaciónincontrolada en grandes áreas de interés turístico,como nuestros paisajes serranos, cuentan tal vez másen superficie. El cumplimiento estricto de la legis-lación existente o la creación de otra, actualizada,darían fin a estos flagelos. En cambio, la recolec-ción de estas plantas efectuada por los pobladorespara proveerse de dinero para sus necesidades, tie-ne un carácter alimentario, y no existe ni deberíaexistir ley que la suprima. Por ello, se eligió estesector para trabajar, porque al proteger estas espe-cies, finalmente se protege a los que las usan, paraque puedan seguir haciéndolo ellos y sus descen-dientes. Cuando un recurso natural adquiere un va-lor económico, existen dos criterios de protecciónde la vida silvestre, la preservación a ultranza esta-bleciendo un área intangible, o la intervención con-trolada sobre el recurso. El que defendemos en nues-tro proyecto es el segundo, pues los recursos ocu-rren en un área poblada y constituyen buena partedel ingreso de los pobladores, cuyo interés es conti-nuar aprovechándolos. A su vez, se debe considerarel interés de los consumidores de estos productos,que demandan autenticidad y calidad. El ideal decontrol en este caso es el cultivo de la especie. La

filosofía subyacente al proyecto es simple: se buscaestablecer y difundir pautas de recolección másamigables con la subsistencia de las poblaciones,mientras se desarrolla un proceso de introducciónal cultivo que culmine en la mejora de la calidad, lacantidad y la continuidad del suministro. Inclusoincrementaría su valor para el pequeño productor ytransformaría la recolección en subsidiaria, y asícontribuiría a la conservación de las especies en sushábitats naturales. Este proceso de introducción alcultivo de especies nativas, está basado en estudiosprevios que han seguido una metodología estricta.La selección preliminar de procedencias se realizósobre la base de los rendimientos y composicionesdel aceite esencial, y con estos materiales se plan-tea la segunda etapa, el proyecto PNHFA064641,“Desarrollo de materiales base para la introducciónal cultivo de quimiotipos seleccionados de plantasaromáticas nativas”. Se redujo el número originalde especies en estudio a cuatro, sobre la base de lasmayores demandas del mercado y la erosión genéticaestimada por las observaciones de retroceso en lasáreas de recolección analizadas. Hasta ahora solose han implantado ensayos preliminares y acaba-mos de distribuir las plantas para los definitivos yse esperan los primeros resultados para el próximootoño. Una vez que transcurran tres ciclos, se ha-brán obtenido un número de resultados esta-dísticamente confiables y se podrá tomar decisio-nes respecto de las variantes que serán multiplica-das para ensayarse ya en el pequeño y el medianocultivos. La experiencia de los investigadores yextensionistas locales en la selección de los produc-tores será crucial para el éxito de esa etapa. Ahorabien, el proceso así descripto es apasionante, fluyenaturalmente en un círculo virtuoso; sin embargo,debemos considerar que el éxito de la introduccióna cultivo solo se hace sustentable por los factoressocioeconómicos externos, una vez que se transfor-me en un eslabón de la cadena de valor, y supere ala mera recolección. El cultivo de plantas aromáti-cas es de larga data en la Argentina, puesto que elPrograma Nacional Plantas Aromáticas del INTA seinició en 1964; en los últimos cincuenta años pasópor picos y valles, principalmente debido a las polí-ticas macroeconómicas adoptadas en diferentes pe-ríodos. Las décadas de 1960 y 1970 significaron laexpansión del área de cultivo y el crecimiento de laindustria nacional, pero a finales de la última larestauración de políticas neoliberales frenó ese

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impulso, y en consecuencia provocó la entrada deproductos extranjeros, muchas veces en condicio-nes de dumping, que ni el retorno a la democraciaen la década de 1980 y los consiguientes cambiosen la economía, lograron revertir totalmente. En laúltima década del siglo pasado, sobre todo despuésde 1995 y comienzos de la primera década del pre-sente siglo, el paradigma de la convertibilidad afec-tó en forma negativa al desarrollo de la actividad.Solo permanecieron en pie los productores e indus-triales consolidados y relativamente integrados, sedefendieron nichos de mercado ganados con ante-rioridad, mientras que la mayor parte de los pro-ductores pequeños y medianos redujeron su produc-ción a causa de la falta de competitividad derivadade la situación económica y sus consecuencias ínti-mamente relacionadas, como la desinversión y elatraso tecnológico que les impedían cumplir las exi-gencias del mercado interno a los precios que im-ponía el mercado mundial. Con la salida de laconvertibilidad entre 2002 y 2003, cambiaron lascondiciones de rentabilidad, y desde ese punto enadelante se reanimaron las explotaciones en las zo-nas tradicionales, donde además se pudo notar elincremento de las superficies cultivadas y se radi-caron nuevos emprendimientos hasta 2008, momen-to en que la sequía y el comienzo de la crisis exter-na, ralentizaron el impulso inicial. Así nos encon-tramos en la actualidad, en un compás de espera porla subvaluación del dólar que disminuye lacompetitividad de la producción nacional. El mer-cado mundial de aromáticas y especias asciende amás de un millón de toneladas con valor superior acinco mil millones de dólares, con un crecimientosostenido del consumo mundial del 4 % anual du-rante la última década. El balance nacional esnetamente favorable a las importaciones (17 millo-nes de dólares contra exportaciones de 8,2 millonesen 2007). La mayoría de las especias que se impor-tan no se pueden producir en nuestro territorio; yotras especias como el orégano, las mentas entreotras que se producen en el país, y cuya producciónnacional se encuentra por debajo del consumo in-terno; así la exportación no alcanza a equilibrar labalanza comercial. En la actualidad, la superficieen producción está estimada en más de 8 000 ha dearomáticas cultivadas, excluidos el limón y los pi-nos, que son trabajadas por aproximadamente 3 000productores, que generan una demanda de empleotemporario que ronda el millón de jornales por año,

lo que equivale a más de 5 000 puestos de trabajopermanente, solo en la producción primaria. En elmercado de las hierbas participan también las plan-tas aromáticas nativas de recolección en ambientenatural, que movilizan un consumo interno de alre-dedor de 1 500 toneladas al año, y representan unvalor final cercano a los quince millones de dólaresy que solo en la etapa primaria da sustento econó-mico familiar a un estimado grosero de 1 000recolectores. En este caso se debe considerar ade-más, el deterioro creciente de estos recursos y delambiente que ocurren debido a la sobreexplotación.En la cadena de la comercialización de plantas aro-máticas los productores primarios son en su granmayoría pequeños y medianos, se insertan en siste-mas de minifundios y explotaciones familiares conmano de obra intensiva (con la excepción de algu-nos de los cultivos pampeanos) y muchos de ellosejercen una precaria tenencia de la tierra. Losrecolectores se reclutan también en este segmentosocial. Las problemáticas regionales presentan di-ferencias no solo de contexto sino de preferencia oraigambre de determinados cultivos que imprimenrasgos particulares a las formas de producción ycomercialización de estos productos, donde hay uncomún denominador: la pobreza estructural que de-terminan estas formas de producción y su interaccióncon relaciones de intercambio asimétricas, de bajatransparencia. Los problemas generales para las aro-máticas son: escasez de normas para la tipificaciónde calidad de la droga cruda, alta dependencia delos precios internacionales, falta de datos estadísti-cos confiables, subsistencia de materiales y prácti-cas de multiplicación y cultivo inadecuadas, condi-ciones deficientes en el tratamiento poscosecha, in-suficiente asistencia técnica zonal y embrionariaorganización local y regional de los productores. Elcultivo de las plantas aromáticas nativas soluciona-ría los siguientes problemas: la calidad desparejadel producto obtenido de la recolección en ambien-te natural, la excesiva presión de extracción con res-pecto a la recuperación del recurso, el deterioro dela integridad genética de las poblaciones naturalesy el hábitat, la falta de estabilidad de la oferta porinfluencia de fenómenos climáticos o antrópicos yla insuficiente remuneración en relación con el tiem-po invertido en la recolección. En este sentido, elmercado, sobre todo el acopio primario, debería re-accionar con precios adecuados a las nuevas calida-des, ya que los costos por volumen entregado se

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incrementarían. Las oportunidades del cultivo deplantas aromáticas son: el creciente interés del mer-cado en el uso de aromas y condimentos naturales,nuevos sabores para la industria de las bebidas yproductos para la fármaco-fitoterapia, la necesidadde las industrias de la perfumería y la cosmética pornotas novedosas florales, frutales, herbáceas yfijadores, relacionados con aceites esenciales yoleorresinas naturales, y la posibilidad de desarro-llar los cultivos con mano de obra familiar, en su-perficies pequeñas, en zonas marginales, áridas omontañosas de difícil mecanización agrícola. Todosestos factores desempeñan un rol importante en laadopción de nuevos cultivos, por lo que habrá quetrabajar con tenacidad y perspicacia en la instala-ción de esta alternativa entre nuestros pequeños pro-ductores. La preservación de nuestros recursos de-pende de ello.

IMPORTANCIA DEL ANÁLISIS FITOQUÍ-MICO EN LA NORMALIZACIÓN DE PLAN-TAS AROMÁTICAS Y MEDICINALES. Cata-lina M. van Baren. Cátedra de Farmacognosia-IQUIMEFA (UBA-CONICET), Facultad de Far-macia y Bioquímica, Universidad de Buenos Ai-res. Junín 956 (1113) Buenos Aires, Argentina.Correo electrónico: [email protected] plantas aromáticas son utilizadas principalmen-te por sus cualidades aromáticas (aroma y sabor);sin embargo, tienen numerosas propiedades tera-péuticas que también las constituyen en medicina-les. Estas características hacen que su utilizaciónse haya extendido más allá del uso tradicional enla herboristería, a otras industrias como la farma-céutica, la cosmética y alimentaria. La Argentinatiene una elevada riqueza de especies nativas queincluyen aromáticas y medicinales; muchas de ellasson endémicas. Dentro de este grupo, existen alre-dedor de 300 especies cuya recolección se realizadirectamente del ambiente natural y en general, enforma extractiva (se descalza la planta entera)(Núñez y Cantero, 2000). Si bien los pobladoreslocales han recolectado estas especies desde hacesiglos para su utilización tradicional, en las últi-mas décadas la presión sobre las poblaciones na-turales se ha incrementado notablemente debido asu gran demanda industrial, principalmente por laindustria alimentaria en la elaboración de bebidasamargas sin alcohol y el gran auge que han tenidoen los últimos años las aguas saborizadas y con

propiedades funcionales (energizante, antioxidante,entre otras). La consecuencia de esta coyuntura esla reducción de las poblaciones naturales, que nosolo está asociada en gran medida al tipo de cose-cha extractiva, sino además a la expansión de lasfronteras para la explotación agrícola extensiva, aluso del paisaje para el desarrollo del turismo liga-do a las inversiones inmobiliarias en las zonas se-rranas y a los incendios ocasionales. Estas prácti-cas han provocado no solo una importante dismi-nución de las poblaciones naturales de las espe-cies nativas sino que también ocasionan que mu-chas de ellas se encuentren en peligro de extinción(Goleniowski y col. 2006). Más aún, hasta la reco-lección local por pobladores para consumo propio,principalmente como droga vegetal cruda (hojas,flores, frutos) en la preparación de infusiones ca-seras (yerba mate “compuesta”), en la actualidad,también tiene impacto sobre las poblaciones natu-rales. La introducción al cultivo de estas especieses una acción necesaria y recomendada, ya quecontribuiría no solo a la conservación de labiodiversidad sino también a la estabilización dela oferta y al mejoramiento de la calidad de la dro-ga cruda para su utilización como materia primapor las diversas industrias. Por otra parte, la posi-ble obtención de los aceites esenciales a partir deespecies aromáticas nativas con las característicasde calidad que requiere el mercado, podría consti-tuir una oportunidad de mayores y mejores fuen-tes de ingreso para los pobladores que se sustentande ellas, que se estima en más de 800 familias soloen la región central de la Argentina (Elechosa,2010). Esta misma problemática incluso ha fomen-tado el interés por iniciar el cultivo a escala indus-trial, como se planteó en países vecinos (Uruguay,Paraguay, Bolivia y Brasil). La amplia variabili-dad química que pueden presentar estos materia-les dada su alta biodiversidad, constituye una delas problemáticas para el sector productivo, tantode la droga cruda como de los aceites esenciales.Las industrias necesitan materias primas de cali-dad constante para proveer al mercado de produc-tos con calidad homogénea. Sin embargo, las es-pecificaciones de calidad son diferentes para losdistintos sectores industriales que utilizan estasplantas. Como etapa inicial del proceso de domes-ticación es necesario disponer de las normas decalidad que aseguren materiales aptos para cadauna de estas aplicaciones y sirvan como base para

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seleccionar los mejores materiales genéticos. Ana-lizaremos la importancia del análisis fitoquímicoen la normalización de plantas aromáticas y medi-cinales, utilizando dos especies nativas de ampliouso tradicional en la Argentina: “marcela” y“cedrón”. Con el nombre común de “marcela” suelenombrarse a las especies Achyrocline satureioides(Lam.) DC., Achyrocline flaccida (Weinm.) DC. yGnaphalium gaudichaudianum DC. (Asteraceae).Las tres comparten el área de distribución, sonmorfológicamente muy similares y ante la falta denormas de calidad oficiales, es bastante usual lautilización de una u otra de manera indistinta. Jun-to a estas especies también se puede llegar a en-contrar la especie Achyrocline alata (Kunth) DC.,aunque con bastante menor frecuencia, y de la cualresulta más sencilla su diferenciación, por su dis-tinta morfología. Estas especies son utilizadas porsus cualidades aromáticas y medicinales otorga-das por distintos metabolitos secundarios. Se rea-lizó una serie de estudios farmacognósticos y aná-lisis fitoquímicos de las distintas fracciones (volá-til y no volátil) de la especie A. satureioides, laespecie más estudiada y reconocida como “mar-cela”, con el objetivo de definir sus criteriosfitoquímicos de calidad, soportado en el análisisde varias poblaciones silvestres y comerciales, re-colectadas en las áreas más representativas de sulocalización. Además, se analizaron las otras es-pecies mencionadas, como adulterantes usuales, demanera de encontrar parámetros diferenciales en-tre ellas. Los análisis fitoquímicos permitierondeterminar metodologías analíticas de laboratorioy valores de referencia que especifican su calidadcomo droga vegetal para su utilización medicinal,justificar que las inflorescencias constituyen la par-te usada, determinar el mejor momento de reco-lección y establecer metodologías analíticas sen-cillas para diferenciarla de sus adulterantes. Porotra parte, por medio de estudios sensoriales, selograron establecer diferencias significativas parasu uso en la preparación de bebidas. También sepudo demostrar que la cualidad aromática no estáasociada a su aceite esencial. Los resultados de estetrabajo permiten proponer una norma farmacopeicapara su uso medicinal (Retta, 2012). El “cedrón”es Aloysia citrodora Palau (Verbenaceae). Crecedesde México hasta Chile, Uruguay y sur de Bra-sil, y en el centro y noroeste de la Argentina. Lafracción volátil es su característica más destacada

junto a la fracción polifenólica no volátil (Carnaty col., 1999). El principal componente en el aceiteesencial es el citral (mezcla de los isómeros geranialy neral); sin embargo, se conocen en el mercadolocal variedades de “cedrón” que contienen otroscompuestos distintos al citral (Gil y col., 2007).Nuestro grupo de trabajo definió los parámetrosfitoquímicos básicos que identifican la mejor cali-dad del aceite esencial de cedrón en la Argentina(Di Leo Lira y col., 2008). Este trabajo fue adop-tado para la redacción de una propuesta de mono-grafía para el “cedrón”, a fin de ser incluida en lapróxima edición de la Farmacopea Argentina. Porotra parte, ya se encuentra incluido en el CódigoAlimentario Argentino y en Códigos de países li-mítrofes; así como también existen monografíasen Farmacopeas y Asociaciones de países europeoscon las exigencias mínimas requeridas. De todasestas normas, solamente en tres de ellas (EuPh,FFX y EHIA) se indican algunos parámetros congravitación discriminante para la determinación decalidades; uno de ellos es el rendimiento de aceiteesencial, pero sin especificar la composición quí-mica específica de la parte volátil. Nuestros traba-jos demostraron la relevancia de esta determina-ción, teniendo en cuenta que existen calidades de“cedrón” con posibles efectos negativos sobre lasalud (contenido de los isómeros de tuyona)(Molina y col., 2003; Di Leo Lira y col., 2008).Respecto del análisis de la fracción no volátil, res-ponsable de gran parte de las propiedades medicina-les, se analizó su contenido en polifenoles determi-nados como activos y se están determinando los va-lores de referencia por medio del análisis poblacionalde “cedrón” en la Argentina. En función de las cali-dades determinadas y conociendo las exigencias delmercado, se impone la introducción al cultivo de es-tos materiales a fin cubrir las necesidades internas,homogeneizar su calidad y evitar recurrir a materia-les de otras procedencias foráneas. Es indudable queexiste una creciente necesidad de implementar nor-mas de calidad de los materiales vegetales que se em-plean como materia prima en la elaboración de ali-mentos, productos cosméticos, farmacéuticos y otros.Esta necesidad se sostiene en la importancia de co-mercializar productos con garantía de calidad y ho-mogeneidad y que además satisfagan los requerimien-tos del mercado, posibilitando por otro lado, la iden-tificación de nuevos productos con característicasdiferenciales potencialmente útiles. Para obtener

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productos de calidad hay que partir de materias pri-mas de calidad. El control de calidad de materias pri-mas vegetales requiere, entre otras cosas, de profe-sionales experimentados, instrumental, patrones pri-marios o estándares, insumos varios, pero fundamen-talmente es necesario poder contar con especifica-ciones de calidad, que deben contener valores de re-ferencia, criterios de aceptación o rechazo, incluirgráficos o tablas que le permitan al profesional a car-go del control de calidad decidir si esa materia primase encuentra dentro de los parámetros de calidad óp-timos o necesarios, y conforme a su utilización. Lasespecificaciones de referencia deben ser consisten-tes y estar avaladas por una serie de análisis previos;por otra parte, deben ser representativas; en el casode materias primas de origen vegetal, como lo sonlas especies aromáticas y medicinales nativas, debe-rán ser representativas de las poblaciones de ese paíso de la región. Cualquier acción que promueva el es-tudio fitoquímico de plantas aromáticas y medicina-les nativas será un aporte importante en la valoriza-ción de los recursos vegetales nativos.A g r a d e c i m i e n t o s : P r o y e c t o s U B A C y T20020110200118 y 20020100100348; PICT2008-1969.Referencias bibliográficasNúñez, C. y Cantero J.J. (2000). Las plantas medicinales del

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ESTRATEGIAS EN LA INVESTIGACIÓNCON PLANTAS AROMÁTICAS Y MEDICI-NALES. Arnaldo L. Bandoni. Cátedra deFarmacognosia-IQUIMEFA (UBA-CONI-CET), Facultad de Farmacia y Bioquímica,Universidad de Buenos Aires. Junín 956 (1113)Buenos Aires, Argentina. Correo electrónico:[email protected] la Argentina existe abundante bibliografía cien-tífica dedicada a las plantas aromáticas y medici-nales. Si se revisaran estos antecedentes se com-probaría que prácticamente la mayoría fuerongestados sin un objetivo común, algo totalmenteesperable y hasta casi lógico: cada grupo de inves-tigación actúa en función de distintos incentivos,competencias e intereses. Sin embargo, y conside-rando que estamos integrando un país en desarro-llo, sería loable que una parte importante de losesfuerzos realizados se orientaran a fines específi-cos, como una forma de optimizar los recursos ylograr en un plazo mínimo los adelantos necesa-rios para mejorar nuestro nivel de vida o impulsarnuestra economía. El Ministerio de Ciencia y Tec-nología de la Nación inicialmente percibió esta ne-cesidad y trató de conciliar opiniones y necesida-des de los distintos actores que participan en la ges-tión de I+D+i nacional, para consensuar una polí-tica nacional en el sector. No sabemos si esta ini-ciativa tuvo algún resultado, pero cabe entoncesplantearse cuáles serían las pautas mínimas a lasque deberíamos amoldarnos como para aprovecharesta coyuntura o, por lo menos, definir cuáles de-ben ser los paradigmas que deberíamos proponercomo lineamientos más adecuados. Y esto debieraconsiderar tres elementos básicos: la elección dequé planta estudiar, hacia qué objetivo orientarlo ycómo planificar el trabajo. Con respecto a la elec-ción de las plantas más promisorias de estudio, nosparece útil recordar una clasificación que propusi-mos en otra oportunidad, donde las dividimos encuatro tipos básicos según su importancia econó-mica y su disponibilidad, tal como se muestra enel cuadro 1. Dentro de este esquema los trabajosfitoquímicos tradicionalmente abordan el estudiode plantas silvestres no aprovechadas, mientras queel sector agronómico se orienta hacia las cultiva-das aprovechadas. Queda entonces un riquísimocampo de acción en el estudio fitoquímico y agro-nómico de plantas cultivadas no aprovechadas osilvestres aprovechadas, para facilitar o mejorar su

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explotación comercial sustentable. En cuanto a laflora autóctona es indispensable recopilar la infor-mación existente sobre su conocimiento, ya sea portrabajos científicos previos, por la tradición de usoo por la experiencia personal. También resulta útilpoder reconocer cuáles serían las especies máspromisorias de la flora autóctona para su potencialaplicación industrial. Para esta tarea se ha propues-to y se explicarán brevemente una serie de pautasque permiten caracterizar cada especie con un valornumérico que permite ponderar la legitimidad de suestudio. ¿Con qué perfiles se podrían concebir es-tos estudios? Para las silvestres aprovechadas, elestudio de la variabilidad genotípica, la normaliza-ción de su calidad, la domesticación y el mejora-miento del manejo agronómico con criterios de pro-ductividad y calidad y el escalamiento de su proce-samiento industrial, son algunos de los posibles ca-minos que se pueden seguir. En cuanto a las no apro-vechadas y cultivadas, merece destacarse el reco-nocimiento de nuevas funcionalidades o bioacti-vidades. Cuando se evalúa el cómo estudiar las plan-tas aromáticas y medicinales, el principal criterioque debería ser justipreciado es cuál es la motiva-ción de trabajar en esta temática, que debería justi-ficarse por intereses sociales o regionales, y no porintereses curriculares o personales. Con esta premi-sa hay dos condiciones que se debieran priorizar: lalabor multidisciplinaria y la coparticipación del sec-tor privado. Esta metodología permite garantizar dospremisas básicas para alcanzar el éxito en la trans-ferencia de la tecnología al sector productivo: a)evitar esfuerzos aislados y alcanzar manco-munadamente objetivos de mayor alcance e inte-grales; b) no ofrecer lo que se procura, sino lo quese demanda. Una amenaza cierta que se puede en-contrar en este camino es la pretensión de alcanzarobjetivos que no se correspondan con las circuns-

tancias económicas o sectoriales existentes o plani-ficadas en el mediano plazo. Es el riesgo de crearfalsas expectativas o de alentar propuestas errónea-mente fundamentadas o alejadas de la realidad o delas posibilidades futuras. Un paquete tecnológicoaporta solamente la factibilidad técnica de desarro-llar un nuevo emprendimiento. En forma concomi-tante debiera implementarse un adecuado asesora-miento en lo referente al estudio de factibilidad eco-nómica y comercial de la propuesta. Con frecuen-cia se encuentran trabajos científicos que tienencomo corolario una propuesta de aprovechamientoindustrial de la planta aromática o medicinal en cues-tión, sin considerar o desconociendo la compe-titividad o las contingencias del mercado para suimplementación. Se observa entonces que el objeti-vo de la investigación necesariamente tiene que es-tar supeditada a la demanda y a sus especificacio-nes o a las potenciales fortalezas de la planta estu-diada, cualidades que justificarían la creación de unnuevo producto o un nuevo negocio. Las plantasaromáticas y medicinales pueden comercializarse demuy distintas formas (frescas, desecadas, para ob-tener extractos purificados, compuestos químicospuros, entre otras) y a través de muy diversas espe-cialidades (cosmética, alimentaria, medicinal,agroquímicas, productos domisanitarios, industria-les, etcétera). Por esas razones, desde el punto devista operativo nos parece muy positivo utilizar es-trategias de selección de potenciales interesados,para invitarlos a asociarse a nuestra labor científica.Para este objetivo hemos propuesto en su momentodefinir los tres tipos de emprendimientos universal-mente utilizados en la comercialización de plantasaromáticas y medicinales: el modelo vertical (don-de el productor trabaja patrocinado por una empre-sa que demanda el producto y proveedora del pa-quete tecnológico), el horizontal (labor cooperativao asociada entre productores o entre productores eindustriales) y el puntual (desarrollo familiar, indi-

Figura 1.-

Categorías Cultivadas Silvestres

Aprovechadas Tradicionales

(cítricos, menta…)

Peperina, marcela…

No aprovechadas Aguaribay,

ciprés…

Flora aromática y medicinal autóctona

Cuadro 1.-

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vidual o aislado, por iniciativa propia) (Figura 1).A la hora de elegir un socio del sector productivopara un proyecto, entre estos tres modelos parececasi obvio priorizar los provenientes del tipo hori-zontal, por su trascendencia social y su influenciaeconómica. Pero puede también ser muy útil enca-rar el modelo puntual, si realmente hay un interéscierto en promover un negocio de este tipo. Un ejem-plo de este último planteo es la creación de un ne-gocio con productos que llamaremos marcadoresterritoriales. El “mate” en Misiones, el “calafate”en la Patagonia o la “peperina” en Córdoba son al-gunos ejemplos de productos que aportan un senti-do geográfico y cultural distintivo, que los hacecomercialmente competitivos. Se fundamentan enla tradición de uso local y en el relativo endemismode las especies. La plasticidad de las plantas aromá-ticas y medicinales para adecuarse a distintos am-bientes y la frecuente presencia de quimiotipos en-tre ellas aportan verdaderas oportunidades para iden-tificarlos como marcadores de territorios y generarnegocios con este esquema de trabajo. Por último,no se debe omitir el modelo vertical de producción,si es requerido específicamente para algún tipo deasesoramiento externo al compromiso contractualexistente entre la industria y el productor o provee-dor, sea por sustitución de importaciones, por re-querimientos de control de calidad, por resoluciónde problemas puntuales o temporales, etcétera. Enel NOA hay grupos de investigación de reconocidonivel científico, ONG interesadas en estas proble-máticas, numerosos productores e industriales de en-vergaduras muy distintas y, por último, tal vez lomás significativo, importantes carencias sociales.Sería un gran logro saber aunar esfuerzos para apor-tar soluciones a algunas de las necesidades de laregión.

ESTRATEGIAS METODOLÓGICAS EN LAINVESTIGACIÓN DE LA FUNCIONALIDADDE METABOLITOS SECUNDARIOS VEGETA-LES BIOACTIVOS. SilviaMoreno. FundaciónInstituto Leloir (IIBBA-CONICET), PatriciasArgentinas 435. Ciudad Autónoma de Buenos Ai-res (1405), Argentina. Correo electrónico:[email protected] naturaleza es el mejor químico que, comenzan-do con agua, dióxido de carbono y elementos mine-rales ha mostrado su habilidad sintética para produ-cir hidratos de carbono, proteínas, grasas, vitami-

nas y metabolitos secundarios. A partir de la grandiversidad estructural y funcional de moléculas na-turales sintetizadas a partir de metabolitos secunda-rios se pueden originar innumerables productos na-turales que, ya se utilizan, o se les reconoce su altopotencial como productos alimentarios, agentesaromatizantes, colorantes, insecticidas, hipo-lipidémicos, y agentes reguladores del crecimientode microorganismos y de células de mamíferos. Enparticular, las plantas sintetizan una inmensa diver-sidad de estructuras químicas que las transformanen una de las principales fuentes renovables y po-tencialmente ilimitadas de materias primas. Una grancantidad de aceites esenciales aislados de diversasespecies aromáticas y medicinales se utilizan en laindustria alimentaria como saborizantes (Ponce ycol., 2011), así como bioconservantes para prolon-gar la vida útil de los alimentos, al reducir o elimi-nar las bacterias patógenas y aumentar la calidadglobal de los productos alimenticios. Ciertosconservantes que contienen aceites esenciales estándisponibles comercialmente en algunos países y es-tán clasificados como Generalmente Reconocidoscomo Seguros (GRAS aditivos alimentarios); sinembargo, las cantidades de sus componentes exac-tas no están informadas. Otras fracciones obtenidasde plantas aromáticas y medicinales muestran unalto potencial en el área de la alimentación y para laproducción de nuevos productos en el área de lasalud humana como nuevos agentes terapéuticos.Sin embargo, su utilización en la medicina moder-na requiere del conocimiento de su eficacia bioló-gica, ensayos de toxicidad, entre otra informacióncientífica. En términos generales el estudio de lafuncionalidad de metabolitos secundarios aisladosde fracciones vegetales requiere el conocimiento desu composición química, la determinación de la fun-ción biológica en modelos de estudio que puede in-volucrar estudios in vitro mediante técnicasbioquímicas, el uso de líneas celulares en cultivo yel uso de animales de experimentación. Además, serequieren estudios de toxicidad. Con el desarrollode varios métodos analíticos de alta precisión, y losavances en biología molecular y de ingenieríagenética, es ahora posible aislar compuestos, estu-diar su estructura química y potencialidades tera-péuticas. A continuación se puede alterar la molé-cula para adecuarla a la producción de más selecti-vos y nuevos agentes terapéuticos. Recientemente,una planta que ha despertado un gran interés por

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sus potencialidades terapéuticas es el Rosmarinusofficinalis L. (Lamiaceae) (“romero”), una plantadoméstica muy común. El “romero” es una hierbaculinaria utilizada en todo el mundo desde la anti-güedad como saborizante y conservante de alimen-tos por sus propiedades antioxidantes. Esta plantaque se reconoce como una de las especies que pre-sentan mayores contenidos de compuestos poli-fenólicos antioxidantes se encuentra naturalizada envarias provincias de la Argentina, como el NOA, elNE, el centro y la zona cuyana. Es bien conocidoque algunos aceites esenciales del romero ejercenpropiedades antimicrobianas y antioxidantes (Burt,2004). Se ha investigado mucho la naturaleza quí-mica de sus moléculas constituyentes tanto de frac-ciones volátiles como no volátiles. Por otro lado,más recientemente se han enfocado investigacionestendientes a conocer sus efectos antimicrobianos(Moreno y col., 2006) antiinflamatorios y antican-cerígenos (Barni y col., 2012) para entender cómoejerce el romero efectos benéficos sobre la saludhumana. Sin embargo, resta por conocer la identi-dad de sus moléculas bioactivas particulares y losmecanismos de acción tanto sobre células de mamí-feros como sobre microorganismos. El objetivo ge-neral de nuestras investigaciones es identificar losprincipales bioactivos presentes en plantas de ro-mero naturalizadas en la Argentina y comprendersus mecanismos de acción. Investigamos accionesantioxidantes, antibacterianas in vitro e in vivo delos bioactivos solos, y en combinación conantibióticos de uso en clínica, así como en sus posi-bles efectos inmunomoduladores y antitumorales.Desarrollamos diferentes ensayos in vitro, bioen-sayos y utilizamos diferentes líneas celulares tantode células normales como macrófagos y fibroblastoscomo de células tumorales y de adenocarcinoma decolon humano. Ensayamos acciones antimicrobianassobre bacterias de colección sensibles a antibióticosy sobre cepas patogénicas multirresistentes a diver-sos antibióticos utilizados en la clínica actual. He-mos caracterizado químicamente diversos extractosno volátiles por cromatografía líquida de alta pre-sión y aceites esenciales de romero por croma-tografía gaseosa determinando su composición eidentificando sus componentes mayoritarios. Sobrela base de la actividad biológica obtenida ensayan-do los extractos completos y la observada por suscomponentes principales aislados, se conocen losbioactivos particulares responsables de cada una de

las acciones biológicas estudiadas. Inicialmente de-mostramos acciones antimicrobianas de extractos ycompuestos no volátiles aislados de hojas de rome-ro sobre bacterias sensibles a antibióticos (Morenoy col., 2006). Recientemente informamos el meca-nismo de acción del principal bioactivo antimi-crobiano de extractos orgánicos, el diterpenoantioxidante ácido carnósico (Ojeda-Sana y col.,2012). El ácido carnósico es capaz de potenciar laactividad antimicrobiana de varios antibióticos. Sinembargo, el mecanismo molecular subyacente queregulaba este efecto no estaba claro. Nosotros in-vestigamos el efecto del ácido carnósico sobre eltransporte del fluorocromo bromuro de etidio, lapermeabilidad o el potencial de membrana enEnterococcus faecalis y Staphylococcus aureus.Mediante el uso de ensayos fluorométricos demos-tramos que en E. faecalis, el ácido carnósico es unmodulador de la captación y el eflujo de bromurode etidio. Aunque no induce la permeabilización dela membrana celular, es capaz de alterar el poten-cial de membrana en S. aureus y E. faecalis. Por lotanto, este compuesto natural, estructuralmente norelacionado con antibióticos conocidos, podría fun-cionar como un modulador de la bomba de eflujobacteriana por disipación del potencial de membra-na. La resistencia bacteriana a los antibióticos, comoinformó la Organización Mundial de la Salud, esuna de las tres mayores amenazas para la salud hu-mana. Limita la eficacia de los antibióticos clásicosy limita las alternativas actuales para el tratamientode enfermedades infecciosas (Leclercq, 2009). Lafalta de antibióticos eficaces requiere iniciativas dealcance global para paliar esa situación, y entre ellasla obtención de nuevos agentes antimicrobianos deorigen vegetal es una estrategia posible (Cowan ycol., 1999). En los últimos años se informó de ungran incrementode S. aureus resistentes a meticilinay vancomicina que pueden producir septicemias yconstituyen una de las primeras causas de muerterelacionadas con infecciones nosocomiales en mu-chos países (Taubes, 2008). En este contexto he-mos estudiado la acción microbicida de compues-tos naturales de naturaleza terpénica aislados deplantas de Rosmarinus officinalis, informando ac-ciones bacteriostáticas y bactericidas de sus com-puestos bioactivos. En este contexto avanzamos enel conocimiento del potencial uso de compuestosvolátiles aislados del “romero” en nuevas aplica-ciones para inhibir el crecimiento de bacterias

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patógenas para humanos (Ojeda-Sana y col., 2012).Para ello, evaluamos la relación entre la composi-ción química de los aceites esenciales y la activi-dad antibacteriana contra patógenos humanos y lalibre capacidad de captación de radicales libres endiferentes plantas que crecen en la Argentina. En-contramos que un quimiotipo de aceite esencial de“romero” rico en mirceno tenía mayor capacidadantioxidante, probablemente debido al alto conte-nido de mirceno, demostrado por el ensayo deDPPH. Comprobamos cambios en la permeabili-dad de la membrana de Escherichia coli despuésdel tratamiento con 1,8-cineol mediante el ensayode Sytox Green y se correlacionó su actividadbactericida con su capacidad para romper la mem-brana celular de E. coli. Cuando investigamos suefecto sobre células clave del sistema inmune inna-to, encontramos posibles efectos inmunomo-dulatorios en la línea celular de macrófagos murinosRAW 264.7. Evaluamos efectos antibacterianossobre bacterias patógenas de difícil tratamiento,como son bacterias multirresistentes a antibióticoscomunes como, por ejemplo, S. aureus resistente ala meticilina y vancomicina, tanto en ensayos invitro como in vivo (Cáceres y col., 2012). Encon-tramos que el aceite esencial de “romero” y algu-nos de sus compuestos principales presentan acti-vidad antibacteriana contra cepas hospitalariasmultirresistentes. En otros trabajos demostramosefectos antiproliferativos sobre la migración y ad-hesión celular en líneas celulares de cáncercolorrectal humano (Barni y col., 2012). Utilizan-do líneas celulares de fibroblastos en cultivo y me-diante el uso de sales de formazás (reactivo MTS)determinamos los efectos sobre la viabilidad y latoxicidad celular de los compuestos bajo estudio.Encontramos blancos moleculares modulados porbioactivos particulares del “romero” en pre-adipocitos (línea celular NIH 3T3) y en células decáncer colorrectal (Caco-2), ambos tipos celularesregulados directamente por componentes de la die-ta (Moreno y col., 2012). En conclusión, mediantetécnicas bioquímicas, moleculares y cultivos celu-lares identificamos proteínas y genes regulados porbioactivos aislados de la planta modelo bajo estu-dio. Toda la evidencia científica sostiene que el “ro-mero”, muy utilizado como conservante y aditivoalimentario, es una rica fuente de compuestosbioactivos de alto valor en otros campos, como elárea farmacológica para la prevención y el trata-

miento de diversas patologías humanas.Referencias bibliográficasPonce, A.; Roura, S.I.; Moreira, M.R. (2011). Journal of Food

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PLANTAS CON TRADICIÓN DE USO COMOALEXÍTERAS EN LA ÉPOCA PRECOLOM-BINA. ACTUALIDAD Y VALIDACIÓN DE SUCONOCIMIENTO. Armando I.A. Ricciardi.Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agri-mensura. Química Orgánica III C. UniversidadNacional del Nordeste (UNNE), (Corrientes).República Argentina.En las crónicas de los primeros cronistas españolesde la época de la colonia, que nos trasmitieron losconocimientos de la etnomedicina aborigen del cen-tro norte argentino, se encuentran numerosas refe-rencias al empleo de plantas con efectos sorpren-dentes para tratar los accidentes provocados pormordeduras o “picaduras” de víboras, riesgo fre-cuente y temido. De esas plantas, hoy conocidascomo alexíteras, hemos relevado más de ciento se-tenta especies a las que se atribuyen esas propieda-des. Su caracterización por nombres vernáculos di-ficulta su correlación con los taxones reconocidosen la botánica sistemática moderna, sobre todo te-niendo presente que la falta de ejemplares de herba-rio impide su verificación. Otro aspecto de incerteza

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es la variabilidad en constituyentes de las especiesvegetales o animales según su origen geográfico.Pero casi sobre el final del siglo veinte la tradiciónen la medicina popular ha llevado a investigar elempleo de sus especies o extractos para contrarres-tar los accidentes por ponzoñas animales. Así, sehan podido comprobar acciones in vitro e in vivocon resultados sorprendentes en la inhibición o neu-tralización de venenos, como es el caso de lascabenegrinas A-I y A-II, pterocarpanos de las raícesde una planta conocida como “cabeça de negro”sobre el veneno de Bothrops atrox, el (-)edunol, otropterocarpano de Brongniartia; la wedelolactona,cumestano de plantas del género Eclipta queantagoniza los venenos de crotálidos, la ar-turmerona, sesquiterpeno de Curcuma sobre los ve-nenos de la “yararaca” y de la “cascabel sudameri-cana”, y la publicación de un número creciente detrabajos vinculados. En esta exposición examina-mos los antecedentes y evidencias relacionados conespecies autóctonas de los géneros Aristolochia,Asclepias, Bidens, Brunfelsia, Casearia, Chiococca,Cissampelos, Clematis, Dorstenia, Eclipta, Flaveria,Petiveria, Pilocarpus, Sapindus y Tabernaemontanadel norte-nordeste argentino; en algunos casos referi-mos nuestras propias observaciones sobre coagulacióndel plasma sanguíneo, y hemólisis por acción del ve-neno de Bothrops neuwiedi diporus Cope (“yararáchica”) y de este con diluciones de extractos acuoso oetanólico de Aristolochia y Cissampelos sobre la basede los efectos observados experimentalmente. Se abreasí la posibilidad de una nueva terapia alternativa aluso tradicional de sueros heterólogos no siempre ac-cesible o exento de riesgos.

APLICACIÓN EN MEDICINA VETERINARIADE ACEITES ESENCIALES PROVENIENTESDE PLANTAS DE LA FLORA LATINOAME-RICANA. Heriberto V. Elder. Programa de Plan-tas Aromáticas y Medicinales para la provinciade Santa Fe. Convenio MAGIC-UNL-CONICET,Ruta Prov. 2, Nº 2400, Monte Vera, Pcia. SantaFe (3014). República Argentina. Correo electró-nico: [email protected] resistencia a los tratamientos ectoparasitariosen medicina veterinaria, mediante productos sin-téticos, que está generando la “mosca de los cuer-nos” (Haematobia irritans) y las “garrapatas”(Rhipicephalus microplus), en animales bovinos;y en apicultura, la “varroa” (Varroa destructor),

trae aparejado a las respectivas cadenas de valorpérdidas económicas significativas. En la ganade-ría bovina los productos utilizados son, en gene-ral, clorados, fosforados, carbamatos, piretroides,formamidinas, benzoilfenilureas, avermectinas y,muchos de ellos ya han comenzado a perder efec-tividad en los tratamientos. El ejemplo de lacipermetrina, uno de los más usados por su bajocosto en los baños sanitarios ganaderos por inmer-sión, es emblemático, y en los últimos años hancomenzado a manejarse de dos formas: en algunoscasos han triplicado la cantidad de baños por tem-porada y han duplicado la dosis de producto porbaño. Esto trae como consecuencia dos impactosnegativos: mayor costo de los tratamientos y unaelevada contaminación ambiental. En el caso de lacadena apícola la situación es parecida, aunque sonmucho menos los acaricidas sintéticos utilizados:amidinas, formamidinas, piretroides y difenilbromados, pero ocurre algo similar al caso anterior;con el aumento de las dosis surge inmediatamenteel peligro de contaminación de los productos deri-vados de la colmena. En el año 1998, en apiarios dela provincia de Santa Fe, comenzamos con los pri-meros ensayos de aplicaciones de aceites esencia-les crudos (AEC) provenientes de especies vegeta-les nativas, y desde 2004 se aplican en ganaderíabovina. Los AEC utilizados son: “aguaribay”(Schinus molle L. –Anacardiaceae–), “lipia” (Lippiaalba (Mill).N.E. Br. ex Britton & Wilson –Verbenaceae–) y “carqueja” (Baccharis articulata(Lam.) Pers. –Asteraceae–), todas cultivadas en for-ma intensiva en el Centro de Extensión y Capacita-ción en Plantas Aromáticas y Medicinales en Mon-te Vera, Santa Fe y los ensayos se realizan en elCentro Operativo Experimental “Tito L. Coppa”, LasGamas, Vera, Pcia. Santa Fe. La extracción de losAEC se realizó por arrastre con vapor de agua. Lasexperiencias y los ensayos llevados a cabo se resu-men en los resultados que se expresan en la tabla 1,y dan una idea de la potencialidad de los AEC en elcontrol de ectoparásitos. Para el control de la “mos-ca” de los cuernos (Haematobia irritans), se da comoejemplo una de las experiencias que se llevó a cabopara determinar la eficiencia de la solución oleosadel AEC de aguaribay al 5 %. Se trabajó con untotal de 48 vacas adultas sin cría al pie, de razasBrangus y Bradford. La observación preliminar per-mitió estimar que había más de 200 moscas posa-das sobre el lomo del animal y otras tantas volando

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Tabla 2.-

Emulsión de AEC Concentración (% en peso)

Tiempo (min)

Resultados

24 050 % mort. 25 33 100 % mort.

50 32 100 % mort. Aguaribay

75 17 100 % mort. 25 16 100 % mort.

16 050 % mort. 50

22 100 % mort. Lipia

75 25 100 % mort. 25 60 000 % mort. 50 60 000 % mort. Carqueja 75 28 050 % mort.

Cipermetrina 0,10 60 000 % mort.

00Poca vitalidad

Animales 0 h 8 h 24 h 48 h 96 h Tratados 200 20 45 60 100 Testigos 200 200 200 200 200

Tabla 1.-

a su alrededor. Se tomaron 2 lotes de animales A y B;Lote A: 24 vacas para ser tratadas mediante apli-cación del AEC de “aguaribay”, y Lote B: 24 va-cas que quedaron como testigos. Los animales paratratar fueron marcados con pintura de esmalte sin-tético blanco en el lomo o la grupa para su poste-rior identificación; los restantes se dejaron sin mar-car. Se aplicó sobre el lomo de cada animal trata-do, 40 ml de una solución oleosa de AEC de“aguaribay” al 5 % peso/peso, utilizando una je-ringa de 100 ml con dosificador automático. In-mediatamente después de la aplicación del produc-to los dos lotes (tratados y testigos), se dejaron encorrales diferentes, separados entre 25 y30 metrosentre sí. Las observaciones se efectuaron luego dela aplicación del producto: 0, 8, 24, 48 y 96 horas.Para determinar la eficiencia sobre el control delas garrapatas se realizaron ensayos in vitro, pro-bando con emulsiones de diferentes aceites esen-ciales y tomando como testigo la concentración de

cipermetrina permitida para los baños sanitarios(Tabla 2). Para los ensayos del control de“varroas”, presentamos un resumen representati-vo de los ensayos realizados a lo largo de los años.Se trabajaron en total sobre 40 colmenas, dividi-das en grupos de 10. El método de aplicación fueel de la tira de cartón de 3 mm (espesor) x 20 mm(ancho) x 200 mm (largo), embebida con el pro-ducto respectivo, 10 con AEC de “aguaribay”; 10con AEC de “lipia”, 10 con “amitraz” y 10 blan-co (sin producto). El conteo de las “varroas” serealizó por el método del frasco con detergente,que permite determinar cuántos ácaros vivos que-dan adheridos al cuerpo de las abejas. Se tomó elpromedio porcentual de infestación de las“varroas” sobre las 10 colmenas por producto. LosAEC se aplicaron en soluciones oleosas. Con #se marca cuando se aplicó el producto (Tabla 3).La composición de los aceites esenciales crudosutilizados para los ensayos se determinaron por

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Tabla 3.-

# Fecha de aplicación. Sintético I: Amitraz : N,N-bis(2,4-xililiminometil) metilamina, C19H23N3, PM: 293.4.

Tabla 4.- Composición química del AEC de “aguaribay”(Schinus molle L.)

Tabla 5.- Composición química del AEC de “lipia”(Lippia alba (Mill.) N.E. Brown)

Compuesto Porcentaje alfa-pineno 03,2 beta-pineno 04,0 sabineno 41,9 mirceno 02,7 limoneno 02,0 gamma-terpineno 01,8 terpinen-4-ol 07,1 e-cariofileno 02,8 germacreno D 04,2 biciclogermacreno 04,5 gamma-cadineno 02,2 delta-cadineno 01,8 espatulenol 02,2 alfa-muurolol 02,1

Compuesto Porcentaje mirceno 00,3 cis-beta-ocimeno 00,1 limoneno 04,3 trans-beta-ocimeno 00,9 linalol 00,2 cis-óxido de limoneno 00,1 cis-dihidrocarvona 17,3 trans-dihidrocarvona 57,8 dihidrocarveol (isómero n.i.) 00,5 carvona 00,2 dihidrocarveol acetato (isómero n.i.)

00,5

beta-elemeno 00,8 beta-cariofileno 01,0 beta-farneseno 01,0 alfa-humuleno 00,2 allo-aromadendreno 00,1 germacreno D 04,6 alfa-muuroleno 00,4 bicicloermacreno 00,1 germacreno D-4-ol 02,4 tau-muurolol 00,4 Compuestos menores a 0,1 % (n.i.) 06,1

# Fecha Amitraz # Aguaribay # Lipia # Blanco Porcentaje de infestación

1-12-2010 # -- # -- # -- # -- 2-12-2010 # 1,3 # 1,8 # 1,5 # 3,1 9-12-2010 # 1,1 # 1,5 # 1,0 # 2,8

16-12-2010 # 1,2 # 1,8 # 1,1 # 2,3 23-12-2010 # 0,9 # 1,2 # 0,8 # 2,6 30-12-2010 # 0,7 # 1,0 # 1,0 # 3,0

7-1-2011 # 0,8 # 0,9 # 0,6 # 3,3 14-1-2011 # 0,8 # 1,3 # 1,1 # 3,6 21-1-2011 # 1,3 # 1,5 # 1,0 # 1,9 28-1-2011 # 1,6 # 2,2 # 1,7 # 2,2 5-2-2011 # 0,4 # 1,2 # 0,5 # 3,4

12-2-2011 # 1,0 # 1,6 # 1,3 # 4,1

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CG-EM y se muestran en la tablas 4, 5 y 6.La conclusión sobre la base de los resultados delas experiencias realizadas, es que se pueden utili-zar los AEC como productos alternativos en el con-trol de ectoparásitos; de esta manera se reduce lacontaminación ambiental, la resistencia de los pa-rásitos es nula y se mejora la huella de carbono denuestros productos alimenticios acordes con lasexigencias internacionales para exportación.Agradecimientos: Mg. Ing. Química María SilviaGuala, Dr. Veterinario Matías Lapissonde, Ing. Quí-mico Gustavo Pérez, Dr. Eduardo Dellacassa,Dr. Arnaldo L. Bandoni, Dra. Catalina van Bareny la Asociación Cooperativa Centro Operativo“Tito L. Coppa”.

Tabla 6.- Composición química del AEC de carqueja(Baccharis articulata (Lam.) Pers.)

Compuesto Porcentaje alfa-pineno 02,9 sabineno 00,6 mirceno 06,1 beta-pineno 26,7 limoneno 02,6 beta-felandreno 00,8 o-cimeno 01,5 beta-cariofileno 11,1 germacreno D 08,6 viridifloreno 01,3 biciclogermacreno 09,4 gamma-cadineno 01,1 delta-cadineno 02,8 espatulenol 08,1 óxido de cariofileno 04,4 ledol 02,3 tau-cadinol +epi-alfa-muurolol 03,6 alfa-cadinol 01,7 Compuestos menores al 0,1% (n. i.) 04,7

Trabajos Presentados

AVANCES EN LA MULTIPLICACIÓN INVITRO DE LIPPIA INTEGRIFOLIA (GRISEB.)HIERON. (“INCAYUYO”). Jésica Iannicelli1*,Lucía González Roca1, Miguel A. Elechosa2 y Ale-jandro Escandón3. 1Instituto de Floricultura,CNIA, CIRN, INTA. De los Reseros y NicolásRepetto s/n.º (1686) Hurlingham, Pcia. de BuenosAires, Argentina. [email protected];[email protected]. 2Instituto de Re-cursos Biológicos, CNIA, CIRN, INTA [email protected]. 3Instituto de GenéticaEwald A. Favret, CNIA, CICVyA, INTA-Castelar,El Ñandú y Aristizabal s/n.º (1686) Hurlingham.*Autor a quien dirigir la correspondencia:[email protected]

En los últimos años el consumo de hierbas medici-nales y aromáticas nativas ha devenido cada vez máspopular. Dado que la mayoría de estos materiales secosechan de manera extractiva, trae aparejado lapérdida en su diversidad genética y la destrucciónde su hábitat. Con el objetivo de propagar genotiposseleccionados a partir de su producción de aceitesesenciales de Lippia integrifolia (Verbenaceae)(“incayuyo”), se intentó optimizar la respuesta invitro de esta especie frente a diferentes concentra-ciones de BAP sobre la base de los resultados pre-viamente obtenidos (Iannicelli y col., 2011). Comoexplantos se utilizaron segmentos nodales obteni-dos de vitroplantas cultivadas en medio MS librede hormonas. Los explantos se transfirieron al

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mismo medio suplementado con 2,2; 3,3 y 4,4 µMde BAP, con un n de 15 explantos por tratamiento;el ensayo se repitió 2 veces. Las condiciones de cul-tivo fueron: temperatura: 24 ± 2 ºC, fotoperíodo de16 h y 4 500 lux. Al cabo de 2 subcultivos (40 díasde cultivo) los brotes regenerados fueron transferi-dos a un medio MS 0,5X para su enraizamiento, yuna vez cumplido este paso, se transplantaron amacetas de 10 cm de diámetro que contenían sustratoartificial (GrowingMix®) y cultivadas en cámarahúmeda, bajo condiciones de invernáculo, para suaclimatación. Excepto en los controles, se observa-ron multibrotaciones en todos los tratamientos pro-bados, aunque no se detectaron diferencias signifi-cativas entre sí, por lo que se optó por utilizar el demenor concentración, que mostró una tasa de mul-tiplicación promedio de 14 brotes por explanto lue-go del segundo subcultivo. Los brotes obtenidos deeste tratamiento fueron aislados, y se obtuvo el 80% de eficiencia tanto en el enraizamiento y comoen la aclimatación (Figura 1). En relación con losresultados obtenidos previamente en esta especie,donde a mayores niveles de regulador de crecimientoy tiempo de cultivo se obtuvo mejor tasa de multi-plicación, estos resultados muestran que fue posi-ble optimizar el protocolo de propagación in vitro apartir de la utilización de menor concentración deregulador de crecimiento (BAP) y con menor tiem-po de cultivo, además fue posible lograr mejor por-centaje de enraizamiento, con lo cual ya se podríaavanzar en la aplicación de técnicas de mutagénesisin vitro (por ejemplo: poliploidización). Asimismo,

y a partir de que bajo las condiciones probadas segeneraron brotes de novo a partir de una masa ca-llosa, indicaría que el protocolo desarrollado seríaadecuado para la búsqueda de variabilidad in vitro.Referencias bibliográficasIannicelli, J. y col. (2011). VIII Simposio Nacional de

Biotecnología REDBIO Argentina, CABA, Argentina.

DETERMINACIÓN DE LAS CONCENTRA-CIONES DE N, P, K EN LA BIOMASA AÉREADE ACHYROCLINE FLACCIDA (WEINM.).Maricel Bálsamo* y Bárbara Iwasita. EEA INTACerro azul. Misiones. Ruta Nac. 14 km 1085.*Autor a quien dirigir la correspondencia:[email protected] flaccida (Weinm.) (Asteraceae), conocidavulgarmente como “marcela” es una importante hierbaaromática medicinal, nativa de Uruguay, sur de Brasil,Argentina y Paraguay. Por sus propiedades farma-cológicas está incluida en la 7ª edición de la FarmacopeaArgentina. Sus inflorescencias se emplean como “esto-macales”, “digestivas” y “antiespasmódicas” (Davies,2004). Mediante estudios se constató su acción en lareversión o disminución de lesiones cerebrales(Arredondo y col., 2004). La “marcela”, es explotadade forma totalmente extractiva, y se desconocen inicia-tivas de cultivo racional. Existen pocas informacionesde los aspectos nutricionales de plantas nativas y de sudesarrollo en ambientes cultivados. Una de las herra-mientas utilizadas en el balance de las fertilizaciones esla marcha de absorción de nutrientes, expresada bajo lasformas de curvas en función de la edad de la planta

Figura 1.- Multiplicación in vitro de Lippia integrifolia

A: tratamiento 2,2 µm; B: brotes aislados de 2,2 µm; C: enraizamiento de los brotes aislados; D: plantas aclimatadas deL. integrifolia.

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(Nunes y col., 1981). En este contexto, este trabajo tienecomo objetivo determinar la exportación de tresmacronutrientes (N, P, K) por el cultivo A. flaccida. Elensayo fue realizado en el sector plantas medicinales dela EEA INTA Cerro Azul, Misiones, en un suelo pedre-goso poco desarrollado. El diseño experimental utiliza-do fue en bloques al azar con cuatro repeticiones, lostratamientos se realizaron en las épocas de cosecha delas plantas (20-120-180 días después del trasplante). Secosecharon las partes aéreas de dos plantas por repeti-ción. La determinación de la concentración demacronutrientes fue realizada en los extractos obteni-dos por digestión nítrico-perclórica (fósforo, potasio) porfotometría de emisión de llama. El nitrógeno fue cuanti-ficado por el método Kjeldahl. Cuantitativamente, lasecuencia de los nutrientes extraídos por la especie fue:N > K > P. El período de mayor exigencia de nutrientesocurrió alrededor de los 120 días después del trasplante.Por lo tanto, es muy importante considerar esta etapapara la definición de un programa de fertilización deeste cultivo.Referencias bibliográficasDavies, P. (2004). “Estudios en domesticación y cultivo de

especies medicinales aromáticas nativas”. Serie FPTAINIA,Nº 11. 229 p.

Arredondo, F.; Blasina, F.; Echeverry, C.; Morquio, A.;Ferreira, M.; Abín, J.A.; Lafón, L.; Dajas, F. (2004). Journalof Ethnopharmacology 91: 13-20.

Nunes, M.R.; Velloso, A.C.S.; Leal, J.R. (1981). Pesq. Agropec.Bras. 16(2): 171.

AJUSTE DE LA TÉCNICA DE MICROSATÉ-LITES ANCLADOS (ISSRSISSRS) EN LIPPIAINTEGRIFOLIA. Jésica Iannicelli1*, MarianaPérez de la Torre1, Miguel A. Elechosa2 y Alejan-dro Escandón3. 1Instituto de Floricultura, CNIA,CIRN, INTA. De los Reseros y Nicolás Repetto s/n.º (1686) Hurlingham, Pcia. de Buenos Aires,Argentina. [email protected]; [email protected]. 2Instituto de RecursosBiológicos, CNIA, CIRN, INTA. [email protected]. 3Instituto de Genética EwaldA. Favret, CNIA, CICVyA, INTA-Castelar, El Ñan-dú y Aristizabal s/n.º (1686) [email protected]. *Autor a quien diri-gir la correspondencia: [email protected] marcadores moleculares son una poderosa he-rramienta para el estudio de la diversidad genéticade poblaciones naturales y como complemento delos métodos morfométricos para la determinación

de la distinguibilidad, uniformidad y estabilidad delas nuevas variedades y para el control de las colec-ciones de referencia. El objetivo de este trabajo fueajustar la técnica de ISSR en Lippia integrofolia(Griseb.) Hieron. (Verbenaceae) para el estudio desus poblaciones naturales. Se extrajo ADN a partirde hojas jóvenes mediante un método CTAB modi-ficado (Pérez de la Torre y col., 2010). La concen-tración de ADN extraído se calculó por compara-ción sobre el mismo gel (agarosa 0,8 % y 0,01 % debromuro de etidio), con cantidades conocidas delmarcador de peso molecular λ/HindIII. Para la re-acción en cadena de la polimerasa (PCR) se ajusta-ron las temperaturas de hibridación de 6 iniciadoresISSR (Tabla 1). Las condiciones generales de reac-ción fueron: 30 ng de ADN molde, 2,5 µl de bufferde reacción 10X (500 mM KCl; 100 mM Tris–HCl,pH 9,0 a 25 °C; 1 % Triton® X-100); 3 mM MgCl2;0,2 mM dedNTP’s; 0,8 µM de iniciadores y 0,5 Ude Taq polimerasa (Inbio–Highway); volumen final25 µl, en termociclador BioRad (MyCycler). Lascondiciones de ciclado fueron: (A) desnaturalizacióninicial de 10 min a 94 °C, (B) 40 ciclos de: 40 seg a94 °C, 45 seg a la temperatura de interés para cadainiciador y (C) extensión final por 10 min a 72 °C.El gradiente de temperatura de las reacciones (paracada uno de los iniciadores) se llevó a cabo usandocomo referencia la temperatura de hibridación teó-rica (Ta) de los iniciadores (Tm-4 °C). Se probaron6 temperaturas decrecientes de a 1 ºC a partir de Tapara obtener finalmente la temperatura de uso (Tu).Una vez obtenida la temperatura óptima de cada ini-ciador, se procedió a ajustar la concentración deMgCl2 para los 6 iniciadores, para lo cual se varió laconcentración de MgCl2 entre 1,0 y 3,0 mM conuna variación de 0,5 mM en cada punto del gradiente.Los productos de PCR se corrieron en geles deagarosa al 2 % en TAE 1X, teñidos en bromuro deetidio (0,05 %) (Figura 1). Los resultados obtenidos

Figura 1-. Muestra a manera de ejemplo

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se muestran en la tabla 1. Están en progreso las con-diciones de PCR para 7 iniciadores más. Productosde amplificación obtenidos con el iniciador 5’CTen concentraciones crecientes de MgCl2 (mM) a 67ºC. Calle 1: 3,0 (mM); calle 2: 2,5 (mM); calle 3:2,0 (mM); calle 4: 1,5 (mM); calle 5: 1,0 (mM).Referencias bibliográficasPérez de la Torre, M. y col. (2010). Revista de la Facultad de

Agronomía, La Plata, 109: 23-30.

EVALUACIÓN PRELIMINAR DE LA RE-PRODUCCIÓN ASEXUAL DE “PEPERINA”(MINTHOSTACHIS MOLLIS GRISEB.) EN ELINTA EEA, SALTA. ARGENTINA. SimónLópez*, Julio Mamaní y Gloria E. Payo. Esta-ción Experimental Agropecuaria Salta del INTA,Ruta Nacional 68, km 172 (4403) Cerrillos, Sal-ta, Argentina. *Autor a quien dirigir la corres-pondencia: [email protected] “peperina” es un arbusto de la familia de lasLamiaceae que se distribuye naturalmente en el cen-tro y noroeste de la Argentina (Catamarca, Córdo-ba, Jujuy, Salta, Santiago del Estero, San Luis yTucumán). Crece desde los 500 a los 3.500 m.s.n.m,en suelos pedregosos y en laderas generalmente pro-tegidas por especies arbóreas. En el marco delPNHFA-064641 “Desarrollo de materiales base parala introducción al cultivo de quimiotipos seleccio-nados de especies aromáticas nativas” se introdujoel Jardín de la EEA Salta, material colectado de po-blaciones naturales de Tucumán, Córdoba y San Luispara su adaptación, reproducción y domesticación.El objetivo de este trabajo fue evaluar la interacciónde factores que inciden en la reproducción asexualde “peperina” bajo cubierta. Se realizó un ensayoDCA con 2 repeticiones, con n = 10 y arreglofactorial de 3 x 2 x 2 x 2, en bandejas de aluminio.

Los factores fueron: Tratamiento IBA (0,500 y 1000ppm), sustrato (perlita, turba), fertilizante foliar (0,1%) y estacas (apical con ápice truncado, subapicales)con longitudes de 5 a 8 cm, y desinfección con solu-ción de hipoclorito de sodio al 0,05 %. El trasplante serealizó a los 30 días de la siembra en bolsines plásti-cos. Se analizó el porcentaje de enraizamiento y la es-tructura radicular (0-sin reacción, 1-con callo radicular,2-escasa raíz, 3-buena raíz, 4-abundante raíz) median-te ANOVA y comparación múltiple de medias (Tukeyal 5 %). Durante el proceso no hubo ataque de plagasni enfermedades y tan solo el 1 % de las estacas feneció.A los 25 días del trasplante, el 99,8 % de los plantinesse mantuvieron vivos en excelentes condiciones y, a lafecha, continúan su desarrollo. En el análisis de lavariancia de porcentaje de enraizamiento solo huborespuesta a la interacción tratamiento x estaca (Pr > F= 1,54). En la comparación de estacas hubo diferen-cias a la dosis 500 ppm. Las apicales enraizaron en un100 % y las subapicales, en un 95 %. A la dosis de1000 ppm ambas enraizaron en un 100 %. No hubodiferencias significativas entre tratamientos de estacasapicales. A las dosis de 1000 y 500 ppm enraizaron enun 100 %, mientras que a la dosis 0 en un 98 %. Paralas estacas subapicales hubo diferencias significativasentre los tratamientos (Pr > F = 3,46). A las dosis de 0y 1000 ppm enraizaron en un 100 % y a la dosis 500ppm, en un 95 %. En el análisis de la variancia deestructura radicular solo hubo respuesta a la interacciónde sustrato x estaca (Pr > F = 1,16) y de sustrato xtratamiento (Pr > F = 0,19). En la comparación de es-tacas hubo diferencias tanto para perlita como paraturba. Las estacas apicales de perlita con valor 4 difi-rieron de las subapicales con valor 3. Las estacasapicales de turba con valor 3 difirieron de lassubapicales con valor 2. En la comparación de sustratoshubo diferencias significativas tanto para las estacas

Nombre Secuencia Tm (ºC) Ta (ºC) Tu (ºC) MgCl2 (mM) 3ĆAC (CAC)5GT 62 58 57 1,5 3ĆAG (CAG)5AT 59 55 55 2,5 5ĆA CCCGGATCC(CA)9 71 67 57 1,0 5ĆT CCGGATCC(CT)9 71 67 67 2,5 5´GT CCCGGATCC(GT)9 71 67 67 2,5 5´GA CCCGGATCC(GA)9 71 67 67 2,5

Tabla 1-. Temperaturas y concentraciones de MgCl2 utilizadas en los iniciadores probados

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apicales (Pr > F = 2,55) como para las subapicales (Pr> F = 0,01). En las apicales, perlita con valor 4 difirióde turba con valor 3. En las subapicales, perlita convalor 3 difirió de turba con valor 2. En perlita, la dosis1000 ppm con valor 4 difirió de la dosis = 0 con valor3 pero no de la dosis 500 ppm con valor 3,49. Hubodiferencias altamente significativas entre tratamientospara turba. Las dosis 1000 y 500 ppm con valor 3 difi-rieron significativamente de la dosis 0 con valor 2.Hubo diferencias altamente significativas entresustratos para la dosis 0. Perlita con valor 3 difirió deturba con valor 2. Para la dosis 500 ppm no hubo dife-rencias entre los sustratos que presentaron valor 3. Parala dosis 1000 ppm hubo diferencias significativas en-tre sustratos. Perlita con valor 4 difirió signi-ficativamente de turba con valor 3. El factor fertiliza-ción no interactuó ni influyó en las variables analiza-das. El mayor porcentaje de enraizamiento y la mejorestructura radicular se obtuvo en estacas apicales ysustrato perlita. Las estacas subapicales en sustratoperlita obtuvieron mayor porcentaje de enraizamientopor acción de las dosis 1000 ppm. Se debe repetir laexperiencia del ensayo en ambiente natural, con mate-rial proveniente de plantas adaptadas y conservadasen el mismo ambiente y utilización de otros sustratoscon el fin de poder establecer un protocolo de repro-ducción para la especie y generar una tecnología defácil adopción por parte de pequeños y medianos pro-ductores de la región norteña.

ORÉGANOS NATIVOS (LIPPIA Y ALOYSIA–VERBENACEAE–) Y ORÉGANOS CO-MERCIALIZADOS (ORIGANUM SPP –LAMIACEAE–) EN ARGENTINA. ASPEC-TOS IMPORTANTES PARA EL CONTROLDE CALIDAD. Beatriz G. Varela*, GracielaB. Bassols, Karina A. Borri, Alberto A.Gurni y Marcelo L. Wagner. Cátedra deFarmacobotánica, Facultad de Farmacia yBioquímica, Universidad de Buenos Aires,Junín 956, Ciudad Autónoma de Buenos Ai-res (1113) Argentina. *Autor a quien dirigirla correspondencia: [email protected] el nombre de “orégano” se conocen unas 60especies de varias familias botánicas. En la Argen-tina, Lippia y Aloysia son dos géneros deVerbenaceae con especies nativas llamadas oréga-no, entre otros nombres. El orégano comercial pro-viene del género Origanum (Lamiaceae), cuyas ho-jas y sumidades floridas se usan principalmente

como condimento. Originario del Mediterráneo es,sin embargo, un cultivo importante en la Argenti-na, donde comprende varias especies, subespeciese híbridos. Tanto las nativas como las cultivadasson plantas muy aromáticas debido a sus aceitesesenciales. En el Código Alimentario Argentino(CAA), se hace referencia al género Origanum, yse permite hasta un 5 % de material extraño. Elobjetivo del trabajo fue comprobar la pureza delas muestras comerciales de orégano y detectar silas especies nativas se usan como sustituto de lascultivadas. Se analizaron ejemplares de herbariode oréganos nativos y ocho marcas de oréganocomercializadas en la Ciudad de Buenos Aires. Delas últimas, se tomaron muestras representativas,se separaron los componentes bajo lupa y se cal-cularon sus porcentajes. Además, se realizaron di-sociados leves de los componentes separados y delas hojas de los ejemplares de herbario, y se obser-varon al microscopio óptico. Los elementos sepa-rados y los disociados obtenidos fueron fotogra-fiados digitalmente. Las muestras comerciales con-tenían hojas, brácteas, flores, tallos y elementosajenos al orégano. El material extraño consistió enfragmentos irregulares, amarillo-verdosos en cua-tro marcas, y hojas fragmentadas, coriáceas ydiscolores en dos marcas. La microscopía reveló,a) para el orégano comercial: estomas diacíticos,pelos eglandulares 1-pluricelulares, pelos glandu-lares peltados y capitados; b) para los fragmentosamarillentos: células alargadas tangencialmente,células con aleurona y pelos eglandulares 1-celu-lares; c) para las hojas coriáceas: escamaspluricelulares y esclereidas filiformes; d) para losoréganos nativos: pelos eglandulares 1-celularescistolíticos y no cistolíticos, y pelos glandularesde distintos tipos. Los trozos amarillentos corres-pondieron a salvado de trigo y las hojas coriáceasa olivo. Los porcentajes de tallos, de salvado y deolivo fueron superiores a los permitidos por elCAA, y altos con respecto a los elementos genui-nos. El salvado y el olivo se consideran adulterantesde las muestras analizadas; mientras que en losoréganos nativos no se hallaron en las muestras.Los datos obtenidos indican que: a) las especiesnativas no se usan para sustituir los oréganos co-merciales; b) hay una marcada disminución de laspartes usadas debido al contenido de elementosajenos, lo cual afecta negativamente la calidad delproducto comercializado.

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CARACTERIZACIÓN DE CAROTENOIDESPRESENTES EN VARIEDADES DEL GÉNE-RO CAPSICUM DE LA REGIÓN DE LOS VA-LLES CALCHAQUÍES. Victoria WiernaSánchez Iturbe1*, Mónica A. Nazareno2 yNorberto A. Bonini1. 1INIQUI-Universidad Na-cional de Salta, Salta (4400) Argentina. 2Insti-tuto de Ciencias Químicas, Facultad de Agro-nomía y Agroindustrias, Universidad Nacionalde Santiago del Estero, Santiago del Estero(4200), Argentina. *Autor a quien dirigir la co-rrespondencia: [email protected] región de los valles Calchaquíes se ha ca-racterizado por la producción de distintas es-pecies de aromáticas de fruto. En particular, elpimiento para pimentón (Capsicum annuum L.–Solanaceae–) ha sido importante para el desa-rrollo de su economía regional. Sin embargo, de-bido a entrecruzamientos, y a adaptaciones a lascondiciones climáticas locales, se desarrollaroncultivares que producen frutos con propiedadesvariables, hecho que dificulta la obtención de unproducto con características de color y aromauniformes. En el momento actual la estación ex-perimental Encalilla de INTA-Tucumán está de-sarrollando variedades adaptadas a la región y concaracterísticas adecuadas para su comercia-lización. Entre ellas, “largo de encalilla” es unavariedad que por sus propiedades merece una ca-racterización de su perfil de carotenoides.Capsicum annuum se caracteriza por la presen-cia, en sus frutos maduros, de una gran variedadde carotenoides que van desde carotenos apolaresa xantófilas monohidroxiladas, dihidroxiladas ycarbonílicas altamente polares (Collera-Zúñiga ycol., 2005). Estas xantofilas se encuentran bajosu forma esterificada. Siguiendo la metodologíapropuesta por Rodríguez-Amaya y Kimura(1999), Rodríguez-Amaya (2002), se realizó lapuesta a punto de una técnica para la extracción,saponificación y concentración de los caro-tenoides presentes en la variedad “largo deencalilla”, a fin de obtener estándares para la pos-terior cuantificación de los principales carote-noides. Mediante cromatografía de columna abier-ta (CCA), empleando como adsorbente MgO-Hyflosupercel/1:1 (activado 2 h a 110 °C), se rea-lizó la separación de fracciones que contienen losprincipales carotenoides presentes en el fruto. Lasdiferentes fracciones se eluyeron con mezclas de

hexano que contenía cantidades crecientes de éteretílico, acetona y metanol. Por cromatografía enplaca delgada (TLC) de silicagel se realizó unexamen preliminar para determinar el tipo y lacantidad de pigmentos presentes en cada una delas fracciones. Teniendo en cuenta que los máxi-mos de absorción y la estructura fina de los es-pectros UV-Vis son característicos del cromóforopresente en la molécula Britton, (1995), su deter-minación constituyó una herramienta de diagnós-tico preliminar para la identificación de caro-tenoides mayoritarios. Por HPLC sobre columnade sílice (Zorbax RX-Sil), usando como fase mó-vil un gradiente de hexano/acetato de etilo-isopropanol, se verificó la pureza de las xantófilasobtenidas mediante el empleo de detectores UV-Vis y de arreglo de diodos (DAD). Se emplearoncomo estándares β-caroteno (Merck) y β-apo-8-carotenal (Aldrich). Otros carotenoides, comoluteína, β-criptoxantina y zeaxantina entre otros,se obtuvieron de sus fuentes naturales. Lacapsantina y capsorubina se obtuvieron de las pro-pias muestras de Capsicum y se identificaron porsus espectros UV-Vis en distintos solventes y porsus reacciones específicas luego de purificación.La presencia de epóxidos en las fracciones se de-terminó por exposición de las cromatoplacas avapores de HCl. El desarrollo de un protocolo es-tandarizado de extracción y saponificación, com-binado con el análisis por HPLC permitirá deter-minar la calidad de las variedades de pimientopara pimentón y cómo variables como madura-ción, temperatura, tiempo de secado, entre otras,afectan a la calidad de este producto de la regiónde los Valles Calchaquíes.Referencias bibliográficasCollera-Zúñiga O.; García Jimenez F.; Meléndez Gordillo R.

(2005). Food Chemistry 90: 109-114.Rodríguez-Amaya D.B.; Washington, D.C. (1999). Int. Life

Sciences Institute Press ISBN 1-57881-072-8.Rodríguez-Amaya D.B.; Kimura M. (2002). Food Chemistry

78: 389-398.Britton G. (1995). Carotenoids. Volume 1 B: Spectroscopy,

Chapter 2: 13-62.

ACEITES ESENCIALES DE DOS VERBE-NÁCEAS Y SU ACTIVIDAD ANTIBACTE-RIANA. María I. Aguado*, Cristina PérezZamora, Carola Torres, Carlos Vonka, Alberto J.Bela y María B. Núñez. Universidad Nacional del

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Chaco Austral, Departamento de Ciencias Bási-cas y Aplicadas, Carrera de Farmacia, Cte.Fernández 755 (3700) Sáenz Peña, Chaco, Argen-tina. *Autor a quien dirigir la correspondencia:[email protected] infusión de las hojas de Aloysia polystachya(Griseb.) Mold. se emplea como tónico, digestivo ycarminativo, para dolores de estómago, contra tras-tornos hepáticos y como sedativo. Diversos estu-dios refieren bioactividad del aceite esencial y deextractos hexánico y etanólico. El empleo de Lippiaturbinata Griseb. está referido como antivenéreo,aromático, estomáquico, emenagogo, nervino, endispepsia, oliguria, dismenorreas y para acelerar elparto. Hay investigadores que asocian a los extrac-tos etanólicos con efectos depresores del sistemanervioso central, y otros que refieren actividadinhibitoria del aceite esencial frente a Pseudomonasaeruginosa. Los aceites esenciales de las plantasaromáticas en general han demostrado capacidadinhibitoria frente a bacterias Gram positivas y Gramnegativas, que resultó en que las últimas eran másresistentes. En este trabajo se presentan datos expe-rimentales acerca de la composición química y dela actividad antibacteriana de aceites esenciales delas dos Verbenáceas mencionadas. En el caso de A.polystachya la materia prima se recogió de plantaslogradas por micropropagación de un ejemplar ca-rente de tuyona, en tanto que la de L. turbinata secolectó de una única planta desarrollada en un jar-dín de la ciudad. La obtención de los aceites esen-ciales se realizó a partir de material vegetal oreado,mediante destilación por arrastre con vapor, con undispositivo de diseño propio (a escala de laborato-rio) y posterior separación del aceite esencial en unsegundo equipo con trampa según Dean Stark (IVA).El rendimiento fue de alrededor del 1 % para ambasespecies. En muestras diluidas en hexano (para ob-tener mejor resolución de los picos, evitandosolapamientos) se investigó la composición quími-ca por GC-MS (estudio realizado en la UniversidadNacional de Córdoba, en el IMBIV). Los compo-nentes mayoritarios en ambas especies fueroncarvona, limoneno y cineol; cariofileno se encontrósolo en L. turbinata. La actividad antibacteriana sedeterminó por el método de difusión en discos. Seutilizaron 8 cepas de Staphylococcus, 1 cepa deEnterococcus, 2 cepas de Enterobacter, 2 dePseudomonas y 1 de cada una de las siguientes:Morganella, Proteus, Escherichia y Klebsiella

Ambos aceites esenciales mostraron actividadantibacteriana contra la mayor parte de las bacte-rias Gram positivas y Gram negativas ensayadas.Además, se determinó la concentración inhibitoriamínima (CIM) y la concentración bactericida míni-ma (CBM) por el método de microdilución en cal-do. Para la determinación de la CIM también seempleó el método de difusión en discos. En amboscasos se evaluó aceite puro y también 3 dilucionesen dimetilsulfóxido de aceite puro. El aceite esen-cial de burrito resultó ser el más activo; fuebactericida para la mayoría de las cepas evaluadas.El aceite esencial de poleo, si bien no mostró activi-dad bactericida a las concentraciones ensayadas,tuvo actividad inhibitoria para la mayoría de lasbacterias Gram positivas y Gram negativas: fue másefectivo contra el último grupo de bacterias. Las doscepas de Pseudomonas aeruginosa resultaron resis-tentes a ambos aceites esenciales. Tanto la compo-sición química como el comportamiento antimi-crobiano hallado se encuentran, con algunas dife-rencias, de acuerdo con lo descripto por otros auto-res, para aceites esenciales de estas especies.

GENERACIÓN DE QUIMIOTIPOS EN LIPPIAALBA COMO RESPUESTA A LA PLASTICI-DAD FENOTÍPICA EN CORRIENTES. GabrielaRicciardi*, Ana María Torres, Armando I.Ricciardi y Eduardo Dellacassa. Laboratorio Dr.G. A. Fester, Facultad de Ciencias Exactas y Na-turales y Agrimensura, Universidad Nacional delNordeste (3400) Corrientes, Argentina. *Autor aquien dirigir la correspondencia: [email protected] alba (Mill.) N.E. Brown (Verbenaceae) pasóa constituir, en los últimos años, el modelo de unfenómeno bastante particular por la amplísima va-riabilidad en la composición química de su aceiteesencial que puede estar relacionada con factoresedafológicos, climáticos, genéticos, ambientales engeneral (Ricciardi y col., 2009). Esto determina queno se puede pensar en que el aceite de L. alba seaun aceite estable con una composición determinadaque permita utilizar a la especie no solo como aro-mática, sino también como medicinal, desde el puntode vista de las múltiples aplicaciones vernáculas quede ella se hacen (Bassols y Gurni, 1996). Según re-cientes y variados trabajos realizados por diferen-tes grupos de investigación, es posible reconocer7 quimiotipos de L. alba, en función de la presencia

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de componentes mayoritarios y con predominanciadel quimiotipo citral (neral-geranial)-linalol (conposibles modificaciones metabólicas de uno en otro),el quimiotipo tagetenonas (mircenona-ocimenonas)y otros, según la presencia de limoneno, piperitona,carvona, mirceno, terpineno, alcanfor o estragol(Dellacassa, 2010). En este trabajo se presentan losresultados obtenidos del estudio del aceite esencialproveniente de poblaciones de L. alba colectadasen Corrientes: Paso de la Patria (muestras I y II) ySan Isidro (III) todas de primavera. Las muestras Iy II provienen de dos poblaciones naturales separa-das aproximadamente a un metro de distancia, a lamisma distancia de la orilla del río, seleccionadasen función de las características organolépticas delas hojas frescas, sin ningún carácter morfológicodistintivo. El análisis fitoquímico se realizó por GC-FID y GC-MS en columna polar (Carbowax) tenien-do en cuenta los IRL de la serie homóloga de n-alcanos (C9-C26). Como resultado, la esencia I secaracteriza por un 41,5 % de β−mirceno, 5,6 % demircenona, 10,1 % de neral y 16,4 % de geranial; laesencia II por 28,7 % de limoneno, 28,2 % de β-felandreno y 23,6 % de óxido de piperitenona. Laesencia III, en cambio, se caracteriza por 18,2 % demircenona, 17,8 % de 1,8-cineol, 16,6 % de β−mirceno, 6,5 % de Z-ocimenona y 4,7 % de E-ocimenona. En las tres esencias caracterizadas, seencuentra β−cariofileno en proporciones variables(4,5-10,1 %). Esta composición plantea un nuevointerrogante: el posible entrecruzamiento dequimiotipos, o la existencia de nuevos. La esencia Ipresenta a la vez, citral y β-mirceno y mircenonacoincidente con tres quimiotipos identificados(Dellacassa, 2010): quimiotipos mirceno, citral ymircenona. A su vez, la esencia II se corresponde alquimiotipo limoneno y piperitenona, y la esenciaIII coincide con el quimiotipo mircenona, pero tie-ne una elevada proporción de cineol. Se han des-cartado modificaciones metabolómicas por el esta-do vegetativo ya que todas las muestras fueron co-lectadas en primavera. Por otra parte, entre las mues-tras I y II, al estar ubicadas a muy poca distancia,no existen diferencias edafológicas, por lo cual esevidente que las diferencias fitoquímicas se debenplantear como posibles hibridaciones de la especie,aunque esto debería corroborarse con posterioresanálisis con más muestras.Referencias bibliográficasRicciardi, G.; Cicció, J.F.; Ocampo, R.; Lorenzo, D.; Ricciardi,

A.; Bandoni, A.; Dellacassa, E. (2009). Natural ProductCommunications 4(6): 853-858.

Bassols, G.; Gurni, A. (1996). Dominguezia 13(1): 7-24.Dellacassa, E. (ed.). (2010). Normalización de Productos Na-

turales obtenidos de Especies de la Flora Aromática Lati-noamericana, CYTED-EdiPUCRS.

AJUSTE DE MULTIPLICACIÓN IN VITRO DELIPPIA JUNELLIANA (MOLD.) TRONC.(SALVIALORA). Jésica Iannicelli1*, LucíaGonzález Roca1, Miguel A. Elechosa2, AlejandroEscandón3. 1Instituto de Floricultura, CNIA, CIRN,INTA-Castelar. De los Reseros y Nicolás Reppetos/n.º (1686) Hurlingham, Pcia. de Buenos Aires,Argentina. 2Instituto de Recursos Biológicos, CNIA,CIRN, INTA-Castelar, Las Cabañas y Los Reseross/n.º. [email protected]. 3Instituto deGenética Ewald A. Favret, CNIA, CICVyA, INTA-Castelar, El Ñandú y Aristizábal s/n.º (1686)Hurlingham. [email protected]. *Autora quien dirigir la correspondencia: [email protected] junelliana (Mold.) Tronc. (Verbenaceae) esuna especie de amplia distribución en la Argentina.Estudios en las regiones centro y NO del país haninformado gran variabilidad en la composición desus aceites esenciales, efectos de repelencia contraCulicidae, antifúngicos y antivirales ( Juárez y col.,2005). Con el objetivo de propagar L. junelliana(“salvialora”) se estudió la repuesta in vitro de estaespecie. Se utilizaron como explantos segmentosnodales obtenidos de vitroplantas cultivadas enmedio MS libre de hormonas y, dados los resulta-dos obtenidos para la multiplicación in vitro de L.integrifolia (Griseb.) Hieron. (Iannicelli y col. 2011),para L. junelliana se ensayó con 4,4 µM de BAPadicionado al medio base (MS); el “n” por ensayofue 13. A partir de los resultados obtenidos, en unsegundo ensayo, se probaron las siguientes concen-traciones de BAP (µM): 4,4; 8,8 y 17,6, con un “n”de 13 por tratamiento. Se efectuaron 2 repeticionesen ambos experimentos y las condiciones de culti-vo fueron: temperatura: 24 ± 2 ºC, fotoperíodo de16 horas y 4 500 lux. Al cabo de 2 subcultivos (50días de cultivo) los brotes regenerados fueron trans-feridos a medio MS para su enraizamiento, y luegose transplantaron a macetas de 10 cm de diámetroque contenían sustrato artificial (GrowingMix®) ycultivados en cámara húmeda, bajo condiciones deinvernáculo, para su aclimatación. En el primer

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experimento, a diferencia de los controles, el tra-tamiento 4,4 µM de BAP no produjo el desarrollode raíces, pero solo produjo una tasa de multipli-cación de 3 yemas/explanto. En la segunda instan-cia se produjeron multibrotaciones en todos los tra-tamientos sin la producción de raíces, a diferenciade los controles; 17,6 µM fue el que produjo unamayor proporción de explantos con esta respues-ta. Asimismo, en este tratamiento se obtuvo lamayor tasa de multiplicación (13 brotes/explanto,promedio) al cabo de 2 subcultivos. Sin embargo,no se observaron diferencias significativas entrelos tratamientos 17,6 y 8,8 µM. Los brotes delmejor tratamiento fueron aislados, y se obtuvo el90 % de enraizamiento y aclimatación (Figura 1).

CONTROL DE CALIDAD BOTÁNICO DEASTERACEAE ANDINAS CONDIMENTI-CIAS QUE SE COMERCIALIZAN EN LA CIU-DAD DE SAN SALVADOR DE JUJUY. LeilaAyelén S. Giménez y Nilda D. Vignale. Labora-torio de Botánica Sistemática y Etnobotánica,Cátedra de Botánica Sistemática y Fitogeografía,Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Na-cional de Jujuy, S. S. de Jujuy (4600) Argentina.*Autor a quien dirigir la correspondencia:[email protected] diversos platos que integran la cocina andinatradicional incluyen entre sus ingredientes diversoscondimentos, entre ellos, elementos integrantes dela fitodiversidad procedente de la prepuna y punade Jujuy, que se han integrado al circuito decomercialización local. La familia botánicaAsteraceae aporta varias especies al espectro de con-dimentos andinos disponibles mediante el uso delas hojas, que contribuyen con el otorgamiento delcarácter de identidad a los alimentos regionales. Lacomercialización de los órganos foliares deAphyllocladus spartioides Wedd., “tola blanca”;Baccharis grisebachii Hieron., “quinchamal”;Mutisia friesiana Cabrera, “chinchircoma”;Parastrephia quadrangularis (Wedd.) Cabrera,“tola”; Senecio nutans Sch. Bip., “chachacoma” yXenophyllum poposum (Phil.) V.A. Funk, “pupusa”se realiza generalmente de modo informal. Se sue-len presentar en bolsas de plástico pequeñas, listaspara ser comercializadas, aunque también se encuen-tran disponibles en grandes bolsas abiertas de modoque el consumidor pueda adquirir la cantidad quedesea. En ambos casos las denominaciones por lasque se las identifica suelen estar escritas de modoartesanal, que evidencia en todo el proceso decomercialización ausencia de normativas tendien-tes a procurar calidad en los productos. Mediante laaplicación del método micrográfico se analizaronmuestras de productos en los cuales, por su deno-minación, se presume que en su elaboración se em-plearon hojas de las especies mencionadas, con elobjetivo de conocer la calidad botánica del materialque se encuentra a disposición del consumidor en laciudad de S. S. de Jujuy. La primera etapa de todocontrol de calidad botánico la constituye el examenmacroscópico mediante el cual se referencian deta-lles a simple vista acerca de la presentación delproducto y de la existencia de materia extraña.Seguidamente se aplica la técnica de disociado

A partir de este trabajo se ajustó un protocolo de pro-pagación in vitro para esta especie, con una tasa demultiplicación que permitiría la aplicación de técni-cas de mutagénesis in vitro (i.e.: poliploidización).Bajo las condiciones probadas se generaron brotesde novo a partir de una masa callosa, lo que indicaríaque el protocolo desarrollado sería adecuado para labúsqueda de variabilidad in vitro.Referencias bibliográficasJuárez, M.A. y col. (2005). XXX Jornadas Argentinas de Bo-

tánica. Rosario, Sta. Fe, Boletín SAB vol. 40, (Supl.),Fitoquímica: 112.

Iannicelli, J. y col. (2011). VIII Simp. Nac. Biotec. REDBIOArgentina, CABA, Argentina.

Figura 1.- Multiplicación in vitro de Lippia junelliana

A, Tratamiento 17,6 µM. B, Brotes aislados de 17,6 µM.C, Enraizamiento de los brotes aislados. D, Plantasaclimatadas de L. junelliana.

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(disgregado) leve a todas las muestras analizadas, yaque se adecua a la naturaleza herbácea de los órga-nos foliares en cuestión. Consiste en el tratamientode una pequeña porción del material con soluciónacuosa al 5 % de NaOH, durante 5 min, a ebullicióny posterior observación al microscopio óptico. Lasobservaciones se realizaron en un microscopiotrinocular Carl Zeiss Axiostar Plus, con cámara foto-gráfica digital Canon Powershot A640 para la tomade las fotomicrografías. De cada uno de los materia-les disociados se realizaron diez preparados para suobservación. En la medida de lo posible se analiza-ron materiales procedentes de diez muestras diferen-tes adquiridas en las instancias comerciales. La com-paración entre las características observables al mi-croscopio con los indicadores micrográficos, dispo-nibles en la bibliografía, de las hojas de las especiesobjeto de estudio permitió concluir respecto de lacalidad botánica de los materiales que están a la ven-ta en mercados y ferias regionales y en algunasherboristerías o comercios naturistas. Todas las mues-tras analizadas contenían hojas de las especies indi-cadas en sus rótulos según su nombre vulgar, ya quese han detectado de modo cualitativo los caracteresmicrográficos definidos como elementos para su va-lor diagnóstico, por lo que se estarían cumpliendo lascondiciones de producto genuino desde el punto devista botánico. En algunas se encontraron elementosanatómicos extraños en baja proporción, los que in-dican contaminación del material. El examenmacroscópico de todas las muestras estudiadas indi-có la presencia de elementos extraños, seguramentegenerados por la vigencia de prácticas de manufac-tura desadecuadas y por la ausencia del cumplimien-to de normas básicas de higiene en el procesamientode los materiales. La conjunción de los resultadosobservables otorga a estos productos su ineptitud parael consumo humano, situación que merece su aten-ción con el propósito de generar la diagramación ypuesta en práctica de acciones tendientes a otorgarcalidad botánica a estos importantes productos, des-de el punto de vista de la alimentación regional,disponibles por parte de la sociedad. Ello contribui-ría a la conservación de los saberes tradicionalesvinculados con la diversidad vegetal andina, repre-sentada en este caso por las especies de Astereaceaeanalizadas.

CONTROL DE CALIDAD BOTÁNICA DE PI-MENTONES PRODUCIDOS Y/O COMERCIA-

LIZADOS EN LA QUEBRADA DE HUMA-HUACA, JUJUY, ARGENTINA. Estela N. Flo-res1*, Nilda D. Vignale1 y Alberto A. Gurni2. 1Cá-tedra de Botánica Sistemática y Fitogeografía,Facultad de Ciencias Agrarias. Universidad Na-cional de Jujuy. San Salvador de Jujuy (4600),Argentina. 2Cátedra de Farmacobotánica, Facul-tad de Farmacia y Bioquímica. Universidad deBuenos Aires. *Autor a quien dirigir la corres-pondencia: [email protected] la región de la quebrada de Humahuaca existencircuitos de comercialización no formales, que es-tán determinados por mercados y ferias regionalespor donde circulan una gran variedad de alimentosproducidos y comercializados en la zona, como losderivados de materias primas de origen vegetal. Enesta situación de informalidad el método micro-gráfico se presenta como una herramienta útil y fá-cil de aplicar en el control de calidad botánico deproductos alimenticios de origen vegetal para ga-rantizar su genuinidad. En estos productos la espe-cie vegetal usada como materia prima ha sido frag-mentada, trozada o pulverizada durante el procesotecnológico, por lo cual su identificación taxonómicano se puede realizar por medio de los caracteres demorfología externa; en consecuencia, se recurre alos caracteres de morfología interna o anatómicos.El método micrográfico mediante la toma defotomicrografías de los caracteres internos obser-vados en el material en estudio, y luego su compa-ración con el patrón micrográfico establecido en labibliografía puede verificar la calidad botánica delalimento de origen vegetal en cuestión. La regióndel noroeste argentino concentra la producción depimiento de la Argentina; sus variedades y cultivaresrojos son apreciados para la elaboración de pimen-tón, condimento muy usado en el arte culinario paracolorear y saborizar diversos platos. El CódigoAlimentario Argentino, en su artículo 874 estableceque el producto conocido como pimentón debe co-rresponder a variedades rojas y dulces de Capsicumannuum L. Se analizaron muestras de deshidratadosque se elaboran y comercializan en la región de que-brada de Humahuaca, específicamente pimentón,para verificar su calidad botánica utilizando el mé-todo micrográfico. Se reconoció previamente el pa-trón micrográfico de frutos de la especie, estableci-do y disponible en la bibliografía. Sus caracteresdiagnósticos se aplicaron en muestras de pimentón;se usó una muestra genuina como testigo adquirida

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en San Salvador de Jujuy y otras, provenientes demercados y ferias y de productores locales. La mues-tra testigo y la producida por una cooperativa localevidenciaron claramente los parámetros micro-gráficos de la especie, se verificó su calidad botáni-ca, por lo cual se puede afirmar que la materia pri-ma utilizada corresponde a C. annuum. El resto delas muestras, a pesar de que revelaban algunos ele-mentos diagnóstico, mostraron la presencia de gra-nos de almidón, carácter que no debe estar presen-te; además, la prueba del Lugol dio positiva, por locual no se garantiza su genuinidad y, por lo tanto,no se recomiendan para el consumo humano.

PARÁMETROS MICROGRÁFICOS FOLIA-RES DE OCHO ESPECIES DE LA FLORAAROMÁTICA ANDINA DE JUJUY, ARGENTI-NA: SU APLICACIÓN EN EL ANÁLISIS DECALIDAD BOTÁNICA. Nilda D. Vignale1* yAlberto A. Gurni2. 1Laboratorio de Botánica Sis-temática y Etnobotánica, Cátedra de BotánicaSistemática y Fitogeografía, Facultad de Cien-cias Agrarias, Universidad Nacional de Jujuy,San Salvador de Jujuy (4600) Argentina. 2Cá-tedra de Farmacobotánica, Facultad de Far-macia y Bioquímica, Universidad de BuenosAires, Argentina. [email protected]. *Au-tor a quien dirigir la correspondencia:[email protected] acuerdo con el Capítulo XVI del CódigoAlimentario Argentino (CAA) se denominan es-pecias o condimentos de origen vegetal a las plan-tas o a sus partes que se utilizan con el propósitode aderezar, aliñar o mejorar el sabor de alimentosy bebidas, ya que tienen substancias aromáticas,sápidas o excitantes. La flora andina de Jujuy com-prende ocho especies cuyos órganos foliares seemplean para condimentar alimentos y saborizarbebidas típicas, prácticas componentes de la iden-tidad cultural andina cuya persistencia obedece areglas de transmisión generacional por vía oral.Acantholippia salsoloides Griseb., “rica-rica”(Verbenaceae) y Clinopodium gilliesii (Benth.)Kuntze, “muña muña” (Lamiaceae) otorgan al clá-sico mate un sabor particular; son también emplea-das para la elaboración de licores, bebidas regio-nales de interés para los turistas. La “muña muña”también es aromatizante de sopas y de las bebidaselaboradas a base de leche, como la “leche piri” yleche hervida. Aphyllocladus spartioides Wedd.,

“pular” o “tola blanca”, Baccharis grisebachiiHieron., “quinchamal”, Mutisia friesiana Cabre-ra, “chinchircoma”, Parastrepia lepidophylla(Wedd.) Cabrera, “tola”, Senecio nutans Sch. Bip.,“chachacoma” y Xenophyllum poposum (Phil.)V.A. Funk, “pupusa”, todas pertenecientes a la fa-milia Asteraceae, se caracterizan porque sus hojasconstituyen ingredientes de platos andinos elabo-rados con maíz como chilcán, tostado y ulpada.S. nutans también es usada como condimento decalapurca, guiso de “achacana” (Neowerdermanniavorwerckii Fric), majadillo, sopas y asado de car-ne de llama. La provisión de las hojas de estas es-pecies se realiza ya sea por recolección directa delinteresado en su hábitat (la puna jujeña) ubicada apartir de 2 000 m.s.n.m. o mediante su adquisiciónen puestos de mercados y ferias locales permanen-tes o ambulantes en diversas localidades de la que-brada de Humahuaca, y llega hasta la capital de laprovincia. Su comercialización, al igual que todaslas especies que integran la etnoflora andina (me-dicinales, rituales, entre otras) se realiza de modoartesanal, pero se encuentran ausentes los análisisde calidad a los que deben responder los produc-tos elaborados con vegetales cuyo destino sea eluso humano. Con el propósito de generar futurasacciones encaminadas a posibilitar la permanen-cia de estos productos en el circuito de comercia-lización, en función de su importancia en la con-solidación del patrimonio cultural andino represen-tado por los saberes tradiciones que otorgan sus-tento al uso en alimentación, se analizan hojas pro-cedentes de ejemplares de las especies en estudiocoleccionadas en la puna jujeña, con la participa-ción de los pobladores locales para asegurar cuá-les son las plantas realmente empleadas mediantela aplicación de la técnica que provee el métodomicrográfico. Para el caso de órganos foliares sesometen las hojas a la acción de una solución acuo-sa al 5 % de NaOH a ebullición por espacio de 5minutos, para provocar la disolución de la lamini-lla media. Este disociado o disgregado leve obte-nido se lava hasta lograr que el líquido de lavadopermanezca límpido, y a continuación se procedea su observación con el microscopio óptico. Me-diante la aplicación de la técnica citada a las hojas–parte útil– de las especies de interés alimenticio,se proponen los caracteres micrográficos de valordiagnóstico cuya aplicación en muestras deproductos localizados en mercados y ferias,

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presumiblemente elaborados con estas especies,permitirá definir la autenticidad botánica del ma-terial, es decir, si en su composición está presentela especie cuyo rótulo indica. Los resultados indi-can que los caracteres diferenciales son aportadospor el tejido epidérmico, particularmente por la va-riedad de tricomas, tanto tectores como glandula-res, y en Xenophyllum poposum se incorporan loscuerpos resinosos. El control de calidad botánicopropuesto se puede realizar en un laboratorio pro-visto de microscopio, elementos auxiliares de bajocosto y personal idóneo, en un tiempo breve.

RELACIÓN MACRO Y MICROSCÓPICA DESIETE APIACEAS CONDIMENTICIAS. JudithMontenegro, Roberto Souto da Rosa, RominaNumata, María E. Marovic, Alberto A. Gurni yGraciela B. Bassols. Cátedra de Farmaco-botánica, Facultad de Farmacia y Bioquímica,Universidad de Buenos Aires. Junín 956, 4º PisoBuenos Aires (1113), Argentina. *Autor a quiendirigir la correspondencia: [email protected] frutos de Apiaceae son utilizados comocondimentos: Pimpinella anisum L. “anís verde”,Coriandrum sativum L. “coriandro”, Cuminumcyminum L. “comino”, Carum carvi L. “kummel”,Foeniculum vulgare Miller. “hinojo”, Petroselinumcrispum (Miller.) A. W. Hill “perejil” y Anethumgraveolens L. “eneldo”. Los objetivos de la investi-gación son generar una clave diacrítica con los ca-racteres microscópicos para ser utilizada en el con-trol de calidad y comprobar su correlación con loscaracteres macroscópicos. Se utilizaron muestrascomerciales que se analizaron mediante disociadoleve (NaOH 5 %, 5 min en ebullición), reducción apolvo (raspado con bisturí) y observación con lupa.Macroscópicamente, se diferencian por caracterís-ticas de los mericarpios: presencia de alas (“enel-do”), forma esférica (“coriandro”), presencia detricomas (“comino” –solo en costillas secundarias–y “anís verde” –en toda la superficie–), ausencia detricomas y forma oblonga (“perejil” (2,5-4,1 mm);longitud de la cara comisural (“kummel” (1,2-1,4mm) e “hinojo” (2-3 mm). Microscópicamente, porla presencia de células del mesocarpio reticuladas ycutícula estriada (“eneldo”), ausencia de estas célu-las (“kummel”), mesocarpio con cristales (“perejil”),mesocarpio con capas de células dispuestas de for-ma perpendicular (“coriandro”), cutícula no estriaday mesocarpio con parénquima reticulado (“hinojo”),

presencia de tricomas unicelulares simples (“anísverde”) y presencia de tricomas pluricelularesmultiseriados (“comino”). El análisis microscópicopermitió crear una clave, que no guarda relación conla clave macroscópica. La aplicación de una u otraclave va a depender de la forma de presentación delas especies, enteras o en polvo. Además, la meto-dología empleada para analizar estas especias pue-de ser aplicada a cualquier material que presentecaracterísticas herbáceas o no lignificadas.

EL MODELO ALOYSIA CITRIODORA: ESTU-DIO IN VITRO DE LA ACTIVIDAD ALEXI-TÉRICA DEL ACEITE ESENCIAL. MarcelaCáceres Wenzel*, Ana María Torres, GabrielaRicciardi, Bárbara Ricciardi Verrastro, Arman-do I. Ricciardi y Eduardo Dellacassa. Laborato-rio. Dr. G.A. Fester, Facultad de Ciencias Exac-tas y Naturales y Agrimensura, Universidad Na-cional del Nordeste, Corrientes (3400), Argenti-na. *Autor a quien dirigir la correspondencia:[email protected] citriodora Palau (Verbenaceae) (“cedrón”)es una especie aromática utilizada en medicina po-pular para el tratamiento de desórdenes digestivos,como antiinflamatorio, analgésico, antipirético, tó-nico, estimulante (Oliva y col., 2010), sedativo yanticonvulsivo (Oksay y col., 2005). El aceite esen-cial ha sido informado como antimicrobiano,antimicótico (Sartoratto y col., 2004), antitripano-sómico (Rojas y col., 2010) y antioxidante(Stashenko y col., 2003). Además, la especie se hainformado como antídoto para tratar mordedurasde animales venenosos en forma de infusiones ycataplasmas (Manfred, 1969; Duke y col., 2009).Esta información etnobotánica tiene más de 400años de uso avalado por la práctica y es sumamen-te importante si se tiene en cuenta que los acciden-tes ofídicos son un grave problema de salud públi-ca en la Argentina, de los que son responsables del80 % de Bothrops diporus “yarará chica” (BoletínEpidemiológico Periódico, 2009). En este trabajose propone comprobar científicamente esta propie-dad que le ha sido atribuida. Se estudió la compo-sición química de la fracción volátil de poblacio-nes de A. citriodora colectada en Laguna Brava(LB) y San Luis del Palmar (SLP), Corrientes. Losresultados del análisis por GC-FID y GC-MS die-ron resultados coherentes con los obtenidos porRicciardi y colaboradores (2011) en lo que respecta

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a los componentes mayoritarios, que verificó asíla estabilidad y la homogeneidad de las poblacio-nes (Ricciardi y col., 2010). Para el estudio de laactividad alexitérica se utilizó un pool de venenode B. diporus desecado al vacío. El screening porSDS-PAGE (Camargo, 2011) se realizó para acei-tes directos (ed) obtenidos por hidrodestilación delas partes aéreas, y aceites de aguas (ea) obtenidospor extracción con éter etílico de las aguas de arras-tre. En paralelo, se evaluó la capacidad in vitro delos aceites para inhibir las acciones coagulantes(técnica del plasma recalcificado), hemolítica in-directa (difusión radial en placas de agar sangre-fosfatidilcolina) y proteolítica (SDS-PAGE con ca-seína). Los resultados del screening indicaron quetodas las muestras modificaron sustancialmente elperfil electroforético del veneno, borrando com-pletamente las bandas de las fosfolipasas (18 KDa)y disminuyendo las demás. En las pruebas de inhi-bición de la actividad coagulante del veneno (rela-ción 1:10 veneno: aceite), resultaron activos todoslos aceites, mayoritariamente los de aguas: ea deSLP de otoño (92 %) y de primavera (56 %); ea deLB de otoño y primavera (58 %). Las pruebas deinhibición de la capacidad hemolítica in vitro serealizaron para los aceites de LB; fueron activostanto ed como ea (20 % de inhibición). Con res-pecto a la inhibición de la proteólisis de la caseínapor el veneno, tanto las esencias directas como lasde aguas presentaron actividad frente a B. diporus.En conclusión, el aceite esencial de A. citriodorano solo es importante desde un punto de vista in-dustrial por su alto contenido en citral (variable enlos aceites estudiados entre el 25,7 y el 52 %), sinoque además, la actividad alexitérica demostrada invitro, avala el uso etnofarmacológico de estaVerbenácea como antiveneno. Lo expuesto sustentala necesidad de continuar el trabajo de investiga-ción en la búsqueda de determinar si la actividadalexitérica evaluada se debe a los aceites esencia-les, o bien, a componentes activos presentes en susfracciones.Referencias bibliográficasBoletín Epidemiológico Periódico. (2009). Envenenamiento

por animales ponzoñosos. Ministerio de Salud. Presidenciade la Nación Argentina,.

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Manfred, L. (1969). 7 000 Recetas botánicas a base de 1 300plantas medicinales americanas.

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Oskay, M.; Usame Tamer, A.; Ay, G.; Sari, D.; Aktas, K. (2005).J. of Biol Sciences 5: 620-622.

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Stashenko, E.; Jaramillo, B.; Martínez, J. (2003). Rev. Ac. Col.Cienc. 27: 579-598.

ACEITE ESENCIAL DE OCOTEA ACUTIFOLIA:QUÍMICA Y ACTIVIDAD ALEXÍTERA. JuanJosé Ruiz Díaz, Ana María Torres, BárbaraRicciardi Verrastro, Gabriela Ricciardi, ArmandoI.A. Ricciardi y Eduardo Dellacassa. LaboratorioDr. G.A. Fester, Facultad de Ciencias Exactas yNaturales y Agrimensura, Universidad Nacio-nal del Nordeste, Corrientes (3400) Argentina.*Autor a quien dirigir la correspondencia:[email protected] especies pertenecientes a la familia Lauraceaeson utilizadas frecuentemente como aromatizantes,saborizantes y fitoterápicos. Ocotea acutifolia(Ness) Mez., “laurel”, “laurel negro” o “laurel blan-co” es utilizada para la construcción de bancos,puertas y ventanas. Los extractos de hojas enacetona son activos frente a Staphyloccocus aureus,Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa yCandida albicans; mientras que los extractos encloroformo lo son contra S. aureus y B. subtiliy(Barneche y col., 2010). Los extractos etanólicospresentan alto potencial genotóxico en células dealas de Drosophila melanogaster (Guterres y col.,2012). La corteza y las hojas tienen alcaloides dela aporfina: (+)-6S-N-óxido de ocoteína y (+)norocoxilonina y análogos con actividad citotóxica(Garcez y col., 2011). No se ha informado, hasta elmomento, la química del aceite esencial ni otro tipode actividad biológica, pero teniendo en cuenta quees confundida por la población con otros laurelescomo Nectandra angustifolia (“laurel amarillo”)y, dado que esta especie es muy activa contra elveneno de Bothrops diporus (Torres y col., 2011)responsable del 80 % de los accidentes ofídicos

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del país, es nuestro interés investigar si esta acti-vidad está presente en O. acutifolia. Para ello, serecolectaron hojas y tallos tiernos en la localidadde San Isidro, Corrientes. El aceite esencial se ob-tuvo por destilación por arrastre con vapor de agua(0,34 % de rendimiento). Del agua de arrastre seseparó la esencia de aguas mediante extracción conéter etílico; se conservaron ambas en freezer a -15ºC y atmósfera inerte hasta su uso. La composi-ción química fue analizada por GC-MS utilizandoademás, una serie homóloga de n-alcanos (C9-C26).Se realizó el screening de la actividad alexítera porSDS-PAGE (Camargo y col., 2011) y se realizaronpruebas in vitro para determinar la capacidad delos aceites para neutralizar las actividadescoagulante (por la técnica del plasma recalcificado)y proteolítica (por SDS-PAGE sobre caseína) delveneno de yarará chica (pool de veneno de B.diporus por ordeñe y desecado al vacío). Se pudodeterminar el 88,7 % de los componentes del acei-te, de los cuales el 18,2 % corresponde a hidrocar-buros terpénicos (principalmente trans-β-ocimeno13,3 %, limoneno 3,4 %, β-pineno 0,6 %); el 0,5% a monoterpenos oxigenados, 16 % a hidrocar-buros sesquiterpénicos, y una elevada proporción,el 57,5 %, a sesquiterpenos oxigenados entre losque se destacan atractilona (20 %) y curzerenona(3,5 %). Con respecto a la actividad alexitérica,tanto del aceite como la esencia de aguas borrarontotalmente las bandas del veneno en el screeningpor SDS-PAGE, que demostró elevada actividaden una relación 1:7 (veneno:aceite). Ambosinhibieron in vitro la actividad proteolítica sobrela caseína en relación 1:120 y también, en un 50%, la actividad coagulante del veneno en propor-ción tan baja como 1:5. En conclusión, en primerainstancia se puede afirmar que esta especie, queno ha sido informada como alexítera hasta el mo-mento, y cuya química no ha sido evaluada, es muyactiva contra el veneno de yarará chica como otrasespecies de Lauraceae, lo que podría constituir unrasgo característico de la familia.Referencias bibliográficasBarneche, S.; Bertucci, A.; Haretche, F.; Olivaro, C.; Cerdeiras,

M.; Vázquez, A. (2010). Rev. Bras. Farmacogn. 20: 878-885.Camargo, F.; Torres, A.; Ricciardi, G.; Ricciardi, A.; Dellacassa,

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Torres, A; Camargo, F; Ricciardi, G; Dellacassa, E; Ricciardi,A. (2011). Nat. Prod. Comm. 6: 1393-1396.

INVESTIGACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTI-OXIDANTE DE CIS-βββββ-OCIMENO Y DE CIS YTRANS TAGETENONA DE TAGETES MINU-TA DE JUJUY. Adriana M. Apaza1*, Adriana C.Olleta2 y Carmen I. Viturro1. 1PRONOA-UNJu-Facultad de Ingeniería-Universidad Nacional deJujuy. San Salvador de Jujuy (4600). Argentina.2Cátedra de Química Computacional-Facultadde Ingeniería-Universidad Nacional de Jujuy.San Salvador de Jujuy (4600). Argentina. *Au-tor a quien dirigir la correspondencia: [email protected] género Tagetes (Asteraceae) es de origen sud-americano. En Jujuy crece espontáneamente T. mi-nuta L., una de las seis especies que Cabrera (1978)describe en la provincia. Como consecuencia de sufacilidad de adaptación a diferentes ambientes, sedispersó por distintos lugares del mundo. En conse-cuencia, la composición del aceite esencial (AE) fueestudiada por diversos autores (Chisowa y col., 2001;Mooghaddam y col., 2007) en diferentes regiones.En nuestros laboratorios se realizaron análisis pre-vios de la capacidad antirradicalaria de diversosextractos de la especie colectada en varias regionesde Jujuy (Apaza y col., 2010). En estos estudios seobservaron diferencias en los porcentajes de deco-loración del radical activo 2,2-difenil-1-picrilhidrazil(DPPH). En el caso de los AE obtenidos por desti-lación por arrastre con vapor, se realizó un estudioparticular de correlación estructura-actividad. So-bre la base de la estructura de los compuestos prin-cipales se formularon hipótesis de contribución degrupos activos a la actividad antirradicalaria (AAR).Por otra parte, este grupo de fitoquímicos presentagran interés debido a sus efectos benéficos para lasalud, por lo que numerosas investigaciones han sidoenfocadas para evaluar sus propiedades biológicas(Miguel, 2010); sin embargo, la información exis-tente respecto a los factores estructurales que influ-yen en estas propiedades es escasa o nula. Losterpenos tienen diferencias en su acción farma-cológica, que pueden estar asociadas a las modifi-caciones en la disposición del esqueleto básico y enlos efectos localizados en las propias cadenas en el

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curso de la reacción. Establecer el origen de estasdiferencias, sería un aporte en la interpretación delas características estructurales y electrónicas másadecuadas para la actividad biológica evaluada. Enlos AE analizados se determinaron, entre otros, lossiguientes componentes cis-β-ocimeno; dihidro-tagetona; trans-tagetona y cis-tagetona; cis-tagetenona y trans-tagetenona. Los resultados sefocalizaron en la relación entre la capacidaddecolorante (CD) y el porcentaje de cis-β-ocimenoy cis y trans-tagetenona en cada uno de los AE es-tudiados. Posteriormente, se evaluó la relación es-tructura-actividad antioxidante de los monoterpenosprincipales, por medio de diferentes métodoscomputacionales, a fin de establecer las propieda-des electrónicas y estructurales que favorecen laeficiencia de la actividad antioxidante. En ese sen-tido se calcularon las energías de disociaciónhomolítica C-H. Para justificar en forma más ajus-tada lo observado experimentalmente se definierondos nuevas variables: el parámetro de acercamiento(PA) y el ángulo de acercamiento (AA). PA y AAcontemplan la interacción que se produce entre lossitios reactivos de la molécula objetivo (DPPH) ycada uno de los monoterpenos analizados. Se con-cluye que a) la actividad antioxidante de los terpenosse incrementa conforme aumenta el número de do-bles enlaces conjugados presentes en la estructuraentre otros factores; b) la AAR está relacionada conla presencia de hidrógenos doblemente alílicos; c)el PA y AA proporcionan herramientas adicionalespara la interpretación de las determinaciones deAAR. De esta manera se verifica que existe un im-portante acuerdo entre los resultados experimenta-les de AAR y los teóricos de la matriz de composi-ción compleja.Referencias bibliográficasApaza, A.M.; Viturro, C.I.; Molina, A.C.; Luna Pizarro, P.

(2010). XIII Simposio Latinoamericano de Farmacobotánica:106.

Cabrera A.L. (1978). Flora de la Provincia de Jujuy, Parte X.Chisowa y col. (2001). J. Essent. Oil Res. 10: 183-184.Miguel, M.C. (2010). Flavour and Fragrance Journal 25(5):

291-312.Mooghaddam y col. (2007). J. Essent. Oil Res. 19: 3-4.

GENÉTICA EN “PEPERINA” Y “CEDRONCI-LLO”: EFECTO DE LA ACCIÓN ANTRÓPICASOBRE POBLACIONES NATURALES DETUCUMÁN. Adriana del Valle Pastoriza1, Car-

los J. Budegue1, Pablo Herrero Nasif1, Miguel A.Elechosa2, Miguel A. Juárez2 y Ana M. Molina2.1Facultad de Agronomía y Zootecnia (FAZ–UNT). 2Instituto de Recursos Biológicos – INTACastelar. *Autor a quien dirigir la corresponden-cia: [email protected] los últimos años se han realizado investigacio-nes relacionadas con el estudio, la evaluación, lacaracterización, y la conservación de especies aro-máticas nativas. En Tucumán existen especies aro-máticas nativas cuya demanda se incrementósustancialmente en los últimos tiempos. Por ello, seha planteado como objetivo general estimar la va-riabilidad genética en especies aromáticas nativas,mediante análisis morfológicos, citológicos ymoleculares, promoviendo la conservación del re-curso fitogenético y, lograr así, su mayor aprove-chamiento. En este estudio se han incorporado parasu investigación poblaciones naturales de “peperina”Minthostachys mollis (Kunth.) Griseb. (Lamiaceae)y de “cedroncillo”, Aloysia gratissima (Gill. etHook) Tronc. (Verbenaceae). El material deM. mollis provino de Río Nío y de Villla Padre Monti(Burruyacú, Tucumán) y el de A. gratissima de ElMollar (Tafí del Valle, Tucumán). Se determinaronnúmeros cromosómicos, niveles de ploidía, fertili-dad y marcadores moleculares de isoenzimas. Serealizaron observaciones in situ de las poblacionespara inferir el efecto de la acción antrópica sobre lapermanencia de las especies. Para las determinacio-nes de número cromosómico y los niveles de ploidíase utilizaron meristemas radiculares, con técnica decoloración con hematoxilina. La valoración de lafertilidad se realizó por medio del análisis decromosomas en meiosis, en células madre del polen(CMP). La viabilidad del grano de polen se deter-minó por coloración con azul de algodón enlactofenol. Para obtener las fotografías se usó mi-croscopio óptico Carl Zeiss Primo Star con cámaradigital incorporada. Los marcadores moleculares sedeterminaron por electroforesis en gel de acrilamidavertical y se reveló para peroxidasas y esterasas. Losresultados mostraron: 1) M. mollis. Se encontró unnúmero cromosómico 2n = 48, con tamaño cro-mosómico de entre 0,2 y 0,4 µm. En meiosis se ob-servaron divisiones normales y anormales, en di-ferente porcentaje. Entre las anormalidades, se pre-sentaron multivalentes, díadas, tríadas y políadas degrado y tamaño diferentes. También se observaronconfiguraciones como orientación anormal del huso,

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rezagados (laggards) y micronúcleos en porcenta-je variable. El estudio viabilidad de polen, dio 87,2% de polen viable y 12,8 % inviable. Se trataría depoblaciones octoploides, con un comportamientodiploidizado, según el número x = 6 informado porotros autores. Las determinaciones isoenzimáticasmostraron una banda única para peroxidasas. Paraα y β esterasas, las muestras analizadas presenta-ron variabilidad fenotípica interpoblacional.2) A. gratissima. El número cromosómico fue2n = 54, con complemento cromosómico asimétrico,con variaciones de tamaño cromosómico de entre 0,5a 2 µm. La meiosis fue muy irregular, con escasa fer-tilidad para las poblaciones observadas. Se presenta-ron univalentes, puentes y rezagados. La viabilidadde polen dio 7,59 % normal y 92,41 % anormal. Setrataría de una población hexaploide, considerandoel número básico x = 6 citado previamente. En losanálisis isoenzimáticos, en peroxidasas se expresó unasola banda y en α y β esterasas las bandas obtenidasindican escasa variabilidad para estos marcadores. Elfenotipo observado en peroxidasas (una sola banda),fue encontrado en otras especies de géneros relacio-nados (Aloysia y Lippia), por ello podría inferirse queesta expresión génica sería característica de estosgéneros; sería necesario incluir más especies paraconfirmar el hecho. Se sabe que los poliploides seadaptan a condiciones ambientales más desfavora-bles, como ocurre con algunas poblaciones de M.mollis y de A. gratissima. Es probable que su valorselectivo compense sus dificultades reproductivas,para lo cual recurre a la multiplicación vegetativa,para mantenerse y prosperar como poblaciones. Sinembargo, se ha detectado una alarmante disminucióndel número de especímenes, que se atribuye a la ex-tracción antrópica, realizada sin un análisis desustentabilidad ambiental y de conservación de labiodiversidad natural. En el caso de A. gratissima deEl Mollar, Tafí del Valle, se ha introducido como or-namental para cerco, un arbusto con gran agresivi-dad invasora (Crataegus pyracantha) que ocupa losnichos ecológicos naturales de A. gratissima, y porello, esta última se ve afectada en su número, por loque resulta muy importante el rescate de esta especiey la conservación de su germoplasma, concepto váli-do también para M. mollis.

COMPOSICIÓN DEL ACEITE ESENCIALDE XENOPHYLUM POPOSUM Y X. ROSENII(ASTERACEAE). Carola Schuff* y César A.N.

Catalán. INQUINOA-CONICET e Instituto deQuímica Orgánica, Facultad de Bioquímica,Química y Farmacia, Universidad Nacional deTucumán, San Miguel de Tucumán (4000), Ar-gentina. *Autor a quien dirigir la corresponden-cia: [email protected] manera de continuación de nuestras investigacio-nes sobre hierbas empleadas en la medicina tradi-cional andina, estudiamos la composición químicade Xenophyllum poposum (Philippi) V.A. Funk, unsubarbusto conocido con el nombre vulgar de“poposa”, que crece en las altas montañas del no-roeste de la Argentina, el norte de Chile, Bolivia yel sur de Perú entre 4 600 y 5 300 m.s.n.m. lasinfusiones de las partes aéreas (a pesar de su olorfétido) son usadas en medicina tradicional para eltratamiento de la hipertensión, para combatir elapunamiento, las náuseas y los problemas digesti-vos. También analizamos X. rosenii (R.E.Fr.) V.A.Funk, un subarbusto que crece a los 5 200 m en lasmontañas de Jujuy. En este trabajo se determinó lacomposición química del aceite esencial (AE) devarias colecciones de X. poposum y una colecciónde X. rosenii. Fueron recolectadas partes aéreas deX. poposum en el Cerro Pabellón a 4 600 m.s.n.m.,Departamento Andalgalá, provincia de Catamarca,Argentina en los años 2003, 2005, 2009 y 2011. Seanalizó también una muestra comercial adquiridaen 2006, en una herboristería de San Miguel deTucumán. X. rosenii fue recolectada en el Departa-mento Rinconada de la provincia de Jujuy en febre-ro de 2009. En todos los casos el AE se obtuvo pordestilación por arrastre de vapor en un equipo tipoClevenger. Los aceites fueron analizados porcromatografía gaseosa acoplada a espectrometría demasas (CG-EM). La identificación de los compo-nentes se realizó por comparación computarizadacon la biblioteca de espectros del equipo (NBS75K,NIST, WILEY), por comparación visual con los es-pectros informados en la literatura y por los Índicesde Kovats. El perfil cromatográfico de los AE detodas las colecciones de X. poposum fue similar. Lossesquiterpenoides (72,2 %) fueron los componen-tes dominantes, mientras que el contenido demonoterpenoides (3,6 %) fue escaso. Notablemen-te, se detectaron cantidades significativas decompuestos de origen no terpénico, los derivadosde p-hidroxiacetofenona 6-hydroxytremetona ytremetona. El AE de X. rosenii también mostrópredominancia de sesquiterpenos (59,7 %), una

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cantidad importante de monoterpenos (36,7 %) juntoa cantidades menores de tremetona y 6-hydroxytre-metona. Investigaciones previas de una colecciónde X. poposum de un lugar no especificado de laPuna (Abella y col., 2000) y otras realizadas en laprovincia de Jujuy por Viturro y Ferro (1994), mos-tró monoterpenos como componentes principales(76,4 %) con predominio de β-pineno, baja canti-dad de sesquiterpenoides (6,2 %) y ausencia de de-rivados de benzofurano. La composición químicadiferente exhibida por el AE de nuestra colecciónsugiere que se trata de otro quimiotipo, como tam-bién lo demostraron las colecciones de X. poposumque analizamos posteriormente, en diciembre de2005, marzo de 2009 y marzo de 2011, en el mismolugar (Cerro Pabellón, provincia de Catamarca). Laestabilidad del perfil químico durante varios añosde X. poposum recolectado en Andalgalá (Cata-marca) y su similitud con el AE del material prove-niente de una herboristería de Tucumán indica queprobablemente se trata de un nuevo quimiotipo. Estetrabajo constituye el primer informe del AE de X.rosenii cuya composición tiene algunas similitudescon el quimiotipo de X. poposum de Catamarca.Referencias bibliográficasAbella, L.; Cortella, A.R.; Velasco-Negueraela, A.; Pérez-

Alonso, M.J. (2000). Pharmaceutical Biology 38: 197-203.Viturro, C.; Ferro, E. (1994). Actas del Simposio Internacio-

nal de Química de Productos Naturales y sus Aplicaciones.Concepción, Chile: 296-297.

AVANCES EN EL ESTUDIO DE CLINOPODIUMGILLIESII (BENTH.) KUNTZE DE LA PROVIN-CIA DE JUJUY, ARGENTINA. Roxana del C.Cabana1*, Carmen I. Viturro1*, Cecilia I. Heit1,Luciana Saluzzo1 y Juliana Vinholes2. 1 PRONOA,Facultad de Ingeniería, Universidad Nacional deJujuy, San Salvador de Jujuy (4600) Argentina. 2La-boratorio de Farmacognosia, Departamento deQuímica, Faculdade de Farmácia, Universidade doPorto, Porto, 4050-313, Portugal. *Autores a quiendirigir la correspondencia: [email protected],[email protected] gilliesii (sin: Satureja parvifolia (Phil.)Epling) (Lamiaceae), popularmente es conocidacomo “muña-muña”. Es un arbusto propio de la re-gión Andina, donde suele ser abundante, crece encercanías de ríos y, en particular en la Argentina, enlas provincias de Salta, Jujuy, Córdoba, Catamarca,Tucumán, La Rioja, San Luis y San Juan. Es usada

en infusiones por su aroma y por sus propiedadesetnobotánicas (Bustos y col., 1996). En trabajos pre-vios evaluamos la actividad antioxidante (AAOx)de extractos polares de esa especie, en una pobla-ción (A) del departamento de Humahuaca, Jujuy, yencontramos que tiene un potencial interesante. Enfunción de esos resultados se amplió la búsquedade poblaciones en la provincia de Jujuy, se expan-dió el espectro de actividades estudiadas y se pro-fundizó en la fitoquímica. El objetivo principal deeste trabajo es la determinación del perfil de voláti-les en las poblaciones en estudio por medio del aná-lisis de sus aceites esenciales y del espacio de cabe-za de la planta entera. Además, se presentan avan-ces logrados en el estudio integral. Fueron colecta-das tres poblaciones de Clinopodium gilliesii: po-blación A (HN 10 05/marzo 2010/ 2a floración //HN11 08/abril 2011/principio de fructificación) y dospoblaciones B y C pertenecientes al departamentode Cochinoca HN11 01/marzo 2011/plena floracióny HN 11 06 /abril 2011/fructificación. La mediciónde la actividad antioxidante frente a DPPH de mues-tras de las tres locaciones permitió la selección dela más activa (B) en todos los extractos polares, paraprofundizar la investigación de actividad biológi-ca: inhibición de acetilcolinesterasas (AChE,BuChE) y α-glucosidasa y determinar el perfilmetabólico de los extractos activos. La AAOx fueevaluada frente a los radicales DPPH, óxido nítricoy superóxido. Los compuestos volátiles fueron de-terminados por GC-MS y, en otros casos, HS-SPME/GC-ITMS, y los compuestos polifenólicos se deter-minaron por HPLC / UV DAD. La AAOx de todoslos extractos muestra un buen potencial: los acuo-sos fueron los más eficaces. Además, el etanólicomostró mejor inhibición de AChE y el hidrolato fueel más activo para inhibir BuChE y α-glucosidasa.Los componentes volátiles monoterpénicos mayo-ritarios de las tres poblaciones son coincidentes cualiy cuantitativamente: óxido de piperitenona (31-35%), piperitenona (13-16 %), pulegona (4-5 %), entanto que la composición de los sesquiterpenosmuestra diferencias con la fenología. En fructifica-ción se determinó elemol, γ-eudesmol, β-eudesmole hinesol. En general se mantiene el perfil volátil delas poblaciones estudiadas. Fueron identificados 34compuestos volátiles en el espacio de cabeza de tresextractos polares de B. La mayor diversidad de com-puestos se encuentra en el extracto etanólico, segui-do de infusión e hidrolato. El metabolito volátil

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captado en mayor proporción en el espacio de cabe-za de la muestra HN 11 01, resultó ser el óxido depiperitenona. De los compuestos polifenólicos, elácido rosmarínico es el mayoritario en todos losextractos y la luteolina la más abundante en el ex-tracto etanólico. Las poblaciones de C. gilliesii es-tudiadas pueden constituirse en un aporte deantioxidantes para la industria alimentaria comoposibles sustitutos naturales de antioxidantes artifi-ciales. El seguimiento temporal de la composiciónde volátiles y no volátiles se abordará en estudiosposteriores para confirmar la homogeneidad de es-tas tres poblaciones. Se encaró, además, la adapta-ción de la especie como herramienta de bio-preservación.Referencias bibliográficasBustos, D. A.; Tapia, A.A.; Feresin, G.E.; Ariza-Espinar, L.

(1996). Fitoterapia 5: 411-415.

ESTUDIO PRELIMINAR PARA DETERMI-NAR POSIBLES RESPONSABLES DE LAPUNGENCIA EN FRUTOS DE SCHINUSAREIRA DE JUJUY. María A. González, WalterC. Villa, Ana C. Molina y Carmen I. Viturro.Laboratorio de Productos Naturales PRONOA,Facultad de Ingeniería, Universidad Nacional deJujuy, San Salvador de Jujuy (4600) Argentina.*Autor a quien dirigir la correspondencia:[email protected] areira L. (Anacardiaceae) crece naturalmen-te en la quebrada de Humahuaca, Jujuy (Argenti-na). Es una especie a la que los lugareños dan diver-sas aplicaciones en su vida cotidiana, como ser: an-tiséptico veterinario, antirreumático (hojas) y comocondimento culinario picante (frutos). El objetivode este trabajo fue tratar de orientarnos respecto alos fitoquímicos responsables de pungencia en losfrutos de Schinus areira mediante el uso decromatografía en capa fina (CCF). Las muestrasensayadas provienen de frutos de ejemplares de laslocalidades de Pinchayoc, Juella, Tilcara y Huajra,seleccionados por su pungencia mediante una eva-luación preliminar exploratoria y teniendo en cuen-ta que pertenecieran a los quimiotipos: α-felandreno,β-felandreno y limoneno previamente identificados(Viturro y col., 2005). Los extractos se obtuvieron apartir de frutos molidos usando como solventesmetanol y cloroformo. Se sometieron a calentamien-to a reflujo durante 10 minutos, se enfriaron, filtra-ron y evaporaron para posteriormente realizar CCF

(Wagner y Bladt, 1995). Como referencias se usa-ron productos pungentes adquiridos en los comer-cios locales: ají molido, páprika (pimentón), pimien-ta blanca, pimienta negra, pimienta verde y rocoto(ají locoto), y se obtuvieron extractos con la mismametodología. Como fase fija se emplearon croma-tofolios de sílica gel (Merck 60 F254) y como fasemóvil, una mezcla de tolueno y acetato de etilo(70:30) (Wagner y Bladt, 1995) para la determina-ción de sustancias pungentes. Se revelaron convainillina al 1 % en etanol y ácido sulfúrico 10 %en etanol. Se observó en el visible luego de mante-nerlos 10 minutos a 100 °C. Todos los ensayos serealizaron por triplicado y con diferentes concen-traciones de los extractos. Al comparar las placasreveladas con las publicadas (Wagner y Bladt, 1995)se concluye que las muestras de Schinus areira nocontendrían piperina, aunque se halló similitud enRf (0,2) y color de mancha con capsaicina determi-nada en páprika. Se observa la presencia de muchasmanchas en la zona con Rf mayor que 0,6 que pue-den atribuirse a los compuestos monoterpénicoshidrocarbonados presentes en los aceites esenciales(Wagner y Bladt, 1995). Por debajo de Rf 0,6 seencuentran otros grupos de manchas que podríanpertenecer o no, a otros responsables de pungencia.Es muy probable que la pungencia se deba princi-palmente a compuestos del tipo felandrénicos pre-sentes en los aceites esenciales (González y col.,2011) ya que en un ensayo previo se determinó queel orden decreciente de pungencia para los distintosquimiotipos es: α-felandreno, β-felandreno ylimoneno (González y col., 2011). Se llevarán a caboevaluaciones sensoriales de los frutos y de sus acei-tes esenciales vehiculizados para contar con elemen-tos que permitan avalar estas hipótesis.Referencias bibliográficasGonzález, M.; Viturro, C.; Molina, A.; Heit, C.; Villa, W.

(2011). Investigaciones en Facultades de Ingeniería del NOA1: 355-362.

Viturro, C.; Corro, M.; Molina, A.; Heit, C.; Villa, W.; Bandoni,A.; Elder, H.; Dellacassa, E. (2005). Investigaciones en Fa-cultades de Ingeniería del NOA 2: 309-316.

Wagner H.; Bladt, S. (1996). Plant Drug Analysis (2ª ed.):291-299.

EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIMI-CROBIANA DE PROPÓLEOS DE TRANCASPARA SU APLICACIÓN EN TECNOLOGÍAALIMENTARIA. Florencia López Airaghi,

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Martín M. Tolay, Javier E. de Quintana, AnaC. Albornoz, Verónica Albarracín, Patricia M.Albarracín y Mariela González*. Cátedra deQuímica Orgánica, Dpto. de Ingeniería de Pro-cesos y Gestión Industrial, Facultad de Cien-cias Exactas y Tecnología, Universidad Nacio-nal de Tucumán. Av. Independencia 1800 (4000)San Miguel de Tucumán, Argentina. *Autor aquien dirigir la correspondencia: [email protected] propóleos es una mezcla compleja elaborada porlas abejas a partir de resinas vegetales y secrecionespropias (Asís, 1991). Sus principales componentesson compuestos fenólicos y derivados, con efectosbiológicos y farmacológicos, aunque su composi-ción química y su actividad biológica varían segúnla fuente vegetal (Schmeda-Hirschmann y col.,2003). El creciente uso de propóleos en tecnologíaalimentaria presenta el problema de su variabilidad.Para el control de la calidad y la normalización deeste producto, en la actualidad se considera la nece-sidad de relacionarlo con los metabolitos secunda-rios provenientes de su fuente vegetal. Por esta ra-zón, cobra importancia el estudio en paralelo de lospropóleos y las especies vegetales de las que pro-vienen. Las sustancias provenientes de las plantas ymodificadas por las abejas son finalmente las res-ponsables de su actividad biológica (Bakova, 2005).El objetivo de este trabajo es evaluar la actividadantimicrobiana de propóleos de Trancas para suposible uso en la conservación de alimentos. Coneste fin se cosecharon propóleos del departamentode Trancas (Tucumán), que se encuentra en un granvalle que forma parte de dos regiones fitogeográ-ficas: el bosque chaqueño serrano y las yungas. Setrabajó con ocho muestras, que fueron cosechadasmediante técnica de raspado y trampas en colmenasde abejas Apis mellifera. Para estudiar la actividadantimicrobiana se siguió el método de Rahalisonmodificado (Rahalison y col., 1991), frente aStaphylococcus aureus (ATCC 25923) y Escherichiacoli (ATCC 2592). En los ensayos bioautográficosse estudiaron extractos etanólicos de propóleos(EEP), usando como control positivo gentamicina,y como control negativo, etanol 80 %. Se sembra-ron 10 µL de los EEP. Todos los EEP de Trancasmostraron actividad antibacteriana frente a S. aureus,mientras que las muestras n.º 3 y n.° 4 presentaronhalos de inhibición frente a E. coli. Estos resultadospresentan la factibilidad del uso de EEP de Trancas

en tecnología alimentaria como conservante natu-ral. En el futuro se estudiarán con la metodologíaaquí descripta, otras especies vegetales colectadasen zonas circundantes a las colmenas de las que secosecharon las muestras de propóleos.Referencias bibliográficasAsís, M. (1991). Propóleos: oro púrpura de las abejas. CIDA.

La Habana (2a ed.): 62-70.Bankova, V. (2005). J. of Ethnopharmacology 100: 114-117.Rahalison, L.; Hamburguer, M.; Hostettman, K.; Monod, M.;

Frenk, E. (1991). Phytochemical Analysis 2: 199-203.Schmeda-Hirschmann, G.; Rodríguez, J.; Theoduloz, C.;

Astudillo, S.L.; Feresin, G.E.; Tapia, A. (2003). Free Radi-cal Research 37: 447.

EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD BIOLÓGI-CA DE ESPECIES VEGETALES NATIVASPARA SU USO EN TECNOLOGÍA ALIMEN-TARIA. Lucrecia Corral, Cristian G. Vivacqua,Luis A. Ojeda López, Iván Rosales, Ezequías L.Fernández, Mariela González y María L.Tereschuk*. Cátedra de Química Orgánica, Dpto.de Ingeniería de Procesos y Gestión Industrial,Facultad de Ciencias Exactas y Tecnología, Uni-versidad Nacional de Tucumán. Av. Independen-cia 1800 (4000) San Miguel de Tucumán, Argen-tina. *Autor a quien dirigir la correspondencia:[email protected] la actualidad existe un creciente interés en el es-tudio de fitoquímicos como nuevas fuentes deantioxidantes y antimicrobianos naturales para utili-zarlos en alimentos y preparados farmacéuticos a finde reemplazar los antioxidantes sintéticos, que sonrestringidos debido a su potencial toxicidad. Losflavonoides se pueden encontrar en los vegetales ytienen propiedades antioxidantes. Se han estudiadoestos compuestos en la prevención de enfermedadesligadas al estrés oxidativo (Veskoukis y col., 2012).Las familias Fabaceae, Solanaceae y Zygophyllaceaecomprenden especies vegetales nativas de América.Algunos miembros de estas familias presentan diver-sas actividades biológicas (Harborne y Williams,2000). El objetivo de este trabajo fue estudiar la acti-vidad biológica de plantas conocidas en la medicinatradicional por sus propiedades que se encuentran enAmaicha del Valle (Tucumán) y, además, determinarcompuestos fenólicos totales para establecer una co-rrelación entre la actividad biológica y la presenciade polifenoles. Las especies seleccionadas fueron:Bulnesia schickendantzii Hieron. ex Griseb.

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(Zygophyllaceae) , Larrea divaricata Cav.(Zygophyllaceae), Plectrocarpa rougesii Descole,O´Donell & Lourteig (Zygophyllaceae), Zuccagniapunctata Cav. (Fabaceae), Lycium chilense Miers exBertero (Solanaceae) y Fabiana sp. (Solanaceae). Sedeterminó la capacidad antioxidante según el méto-do de DPPH (Schmeda-Hirschmann y col., 2004), yen todas las muestras era superior al 76 % para unaconcentración de 100 µg/cm3. El contenido de com-puestos fenólicos se determinó por la técnica de Folin-Ciocalteau modificado (Tawaha y col., 2007). El re-sultado de fenoles totales siempre fue superior a 400mg EAG/ 100 gramos de muestra. Para determinar laactividad antimicrobiana se aplicó la bioautografíaen agar según Rahalison y col. (1991) modificado.Se emplearon: Escherichia coli (ATCC 259229) yStaphylococcus aureus (ATCC 25923). Z. punctata,L. divaricata y Fabiana sp. que mostraron actividadfrente a ambos microorganismos, presentes comopatógenos en alimentos. Se concluye que tres de lasespecies estudiadas tienen buena actividad antioxi-dante, altos contenidos de compuestos fenólicos yactividad antimicrobiana positiva, por lo que se en-carará un estudio más profundo para evaluarlas comofuturos conservantes naturales y aplicarlos en tecno-logía de alimentos.Referencias bibliográficasHarborne, J.B.; Williams, C.A. (2000). Phytochemistry 55:

481-504.Rahalison, L.; Hamburguer, M.; Hostettman, K.; Monod, M.;

Frenk, E. (1991). Phytochem. Anal. 2: 199-203.Schmeda-Hirschmann, G.; Tapia, A.; Theoduloz, C.; Rodríguez,

J.; López, S.; Feresin, G.E. (2004). Z. Naturforschung 59:345-353.

Tawaha, K.; Alali Feras, Q.; Gharaibeh, M.; Mohammad, M.;El-Elimat, T. (2007). Food Chemistry 104: 1372-1378.

Veskoukis, A.; Tsatsakis, A.M.; Kouretas, D. (2012). Cell Stress& Chap.17: 11-21.

ANÁLISIS PRELIMINAR DE LA INCIDEN-CIA DE COCHINILLAS (INSECTO) EN LAFITOQUÍMICA DE APHYLLOCLADUSSPARTIOIDES. Lilia Estela Neder1*, CarmenI. Viturro2*, María I. Zamar1, Cecilia I. Heit2

y Ana C. Molina2. 1Instituto de Biología de laAltura, Universidad Nacional de Jujuy. 2La-boratorio de productos naturales PRONOA,Facultad de Ingeniería, Universidad Nacio-nal de Jujuy, San Salvador de Jujuy (4600),Argentina. *Autores a quien dirigir la corres-

pondencia: [email protected],[email protected] spartioides Wedd. (Asteraceae) co-nocida como “pular”, “tola blanca”, “tojra tola”,es una especie nativa distribuida en el sur de Boli-via y el noroeste de la Argentina, en la prepuna deSalta y Jujuy. Es usada en la medicina folklóricacomo infusión (tallos y hojas) para afecciones di-gestivas, y externamente se utilizan las inflo-rescencias para baños curativos de enfermedadesreumáticas (Vignale, 1996). En estudios previosse evaluó la actividad antioxidante de extractosacuosos de dos poblaciones de A. spartioides dedos localidades de la prepuna jujeña (Maimará yJuella). Se observó que no existen diferencias quí-micas cuali y cuantitativas entre los componentesde los aceites esenciales de ambas poblaciones, quepredominan los sesquiterpenos (Viturro y col.,2007). Con respecto a la entomofauna asociada al“pular” se registró un predominio del OrdenHemiptera (57 %) (Neder de Román y col., 2011).Entre estos insectos se destacan las cochinillas quepertenecen a la familia Coccidae (Homoptera), que,en general, se desarrollan sobre hojas, ramas y raí-ces; se alimentan de la savia y eliminan gran can-tidad de melado o líquido azucarado rico enaminoácidos y otros compuestos nitrogenados quefavorecen el desarrollo de hongos (fumaginas) ydeterioran el aspecto de la planta e inhiben la foto-síntesis. En ataques intensos producen defoliación,decaimiento y pueden provocar la muerte del ve-getal (Granara de Willink, 1994). Este trabajo tie-ne como objetivo iniciar estudios sobre la inciden-cia de los insectos en la fitoquímica de A.spartioides. Se realizaron muestreos mensuales (n= 4) en Maimará y Juella, que abarcaron dos esta-dos fenológicos. Se empleó un aspirador DVAC yse tomaron diez ramas al azar. El aceite esencialde plantas en el mismo estado fenológico con ysin ataque de cochinillas se extrajo por arrastre convapor y su composición se determinó por GC/FIDy GC/EM. El muestreo con aspiradores permitióla recolección de 733 ejemplares de artrópodos,que brindan un panorama general de la riqueza deespecies asociada a A. spartioides. La especie do-minante por el número de ejemplares obtenidos enel muestreo de ramas fue una especie de Coccidae.En Maimará y Juella se registraron dos coloniascon 60 y 78 individuos respectivamente, en distin-tos estados de desarrollo. El análisis del aceite

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esencial de las plantas atacadas por cochinillas nomuestra diferencias en la cantidad e identidad demonoterpenos. Sin embargo, hay variaciones por-centuales de sesquiterpenos: disminuyen E-cariofileno, a-cadineno, óxido de cariofileno, a-cadinol y aumentan biciclogermacreno, espatule-nol, epi-a-cadinol, shyobunol, entre otros. Hastael presente no existen referencias bibliográficas dela incidencia de Coccidae sobre la producción defitoquímicos, por lo cual es necesario continuar losestudios en relación con los distintos estadosfenológicos que permitan determinar el efecto di-recto que tienen al succionar la savia vegetal.Referencias bibliográficasGranara de Willink, M.C. (1995). Serie Monográfica y Didác-

tica Nº 24. Fac. de Ciencias Naturales e IML, UNT.Neder de Román, L.E.; Zamar, M.I.; Ortiz, F.; Linares, M.;

Hamity, V.C; Contreras, E.F.; Quispe, R. (2011). 3er Congre-so Nacional de Entomología de Bolivia. CD-R.

Vignale, N.D. (1996). Anales de SAIPA 14: 177-182.Viturro, C.I.; Valdiviezo, A.L.; Villa, W.C.; Molina, A.C.

(2007). Boletín Latinoamericano y del Caribe de PlantasMedicinales y Aromáticas 6(5): 286-287.

ACANTHOLIPPIA SALSOLOIDES DE JUJUY:SCREENING PRELIMINAR, ACTIVIDADANTIOXIDANTE Y ACEITE ESENCIAL.Liliana S. Celaya*, Carmen I. Viturro*, Ana C.Molina, Roxana del C. Cabana, Marta Labartay Patricia Luna Pizarro. Facultad de Ingeniería,PRONOA-UNJu, San Salvador de Jujuy, (4600)Jujuy, Argentina. *Autores a quien dirigir la co-rrespondencia: [email protected]; [email protected] salsoloides Griseb. (Verbenaceae),“rica rica” es un arbusto aromático de ramasespiniscentes, de hojas alternas sésiles y flores blan-cas pequeñas en racimos terminales (Caro, 1982;Elechosa y col., 2011). Crece en suelos salados de

la quebrada y la puna de Jujuy, también en Salta,Catamarca y en Bolivia (Viturro y col., 1994; Viturroy Molina, 2007). Las ramas florecidas son utiliza-das en la preparación de infusiones con finesanalgésicos y digestivos (Viturro y Molina, 2007).El objetivo de este trabajo fue caracterizar los acei-tes esenciales (AE) de tres poblaciones de “rica rica”de zonas áridas y semiáridas de Jujuy, realizar lacaracterización fitoquímica preliminar y determinarla actividad antirradicalaria (AAR) de los hidrolatos.Los AE fueron obtenidos por hidrodestilación dehojas, flores y tallos del material colectado en flo-ración en Casabindo (HN 10-10), Cianzo (HN 09-03), Salinas Grandes (HN 07-27); la composicióndel AE se cuantificó por CG/FID. Para la determi-nación de la AAR de los hidrolatos frente al DPPH•

se utilizó un microplate reader Epoch BioTeK. Laspoblaciones de Cianzo y Casabindo son principal-mente del tipo tuyonas, al igual que la de Chucalezna(Elechosa y col., 2011); los componentes mayorita-rios son cis-tuyona y trans-tuyona (Tabla 1). La po-blación de Salinas Grandes (Tres Morros) pertene-cería a otra variedad química, con trans-tuyona ysabinil acetato (trans) como componentes mayori-tarios; para esta última población, se observó tam-bién, variación de la composición con el tiempo dealmacenamiento (se incrementa principalmente eltrans-sabinol). Son necesarios estudios posterioressobre el AE de distintas poblaciones en diferentesfenologías y evaluar el efecto del almacenamientosobre la composición de volátiles de la “rica rica”.No se registraron diferencias entre las evaluacionesfitoquímicas preliminares de las poblaciones estu-diadas (hojas y flores): azúcares reductores (+),esteroides (+), alcaloides (-), flavonoides (+). Encuanto a la AAR de los hidrolatos frente al DPPH•:en las condiciones del ensayo todas las muestras deconcentración > 100 µg / ml (sólidos totales) mos-traron AAR superior al 50 %, los IC50 variaron entre

Componente Cianzo Casabindo Salinas Grandes

Salinas# Grandes#

Chucalezna#

cis-tuyona 18,54 18,56 00,90 trazas 26,77 trans-tuyona 72,46 69,75 25,69 65,37 63,30 sabinil acetate (trans) 00,30 trazas 26,03 20,74 - sabinol (trans) 00,20 01,02 38,51 09,53 -

Tabla 1-. Acantholippia salsoloides de Jujuy: principales componentes del AE

# Elechosa y col., 2011.

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64,1 y 93,5 µg/ml. La población de Cianzo mostrólos mejores IC50 (64,1 y 82,8 µg/ml, a los 5 y 30min, respectivamente); sin embargo, no hay dife-rencia significativa con las otras dos poblaciones.Referencias bibliográficasCaro, J.A. (1982). Dominguezia 3: 7-9.Elechosa, M.A.; Viturro, C.I.; Juárez, M.A.; Heit, C.; Molina,

A.C.; Martínez, A.J.; Molina, A.M. (2011). Bol. Soc. Argent.Bot. 46: 170-171.

Molina, A.C.; Viturro, C.I. (2007). SIBEAQO I, PN: 51.Viturro, C.I.; Molina, A.C.; Saavedra, O.N.; Campos, E.;

Molina, S. (1994). VI Reunión Técnica Nacional sobre Es-pecies y Productos Aromáticos y Medicinales, SAIPA.

VARIACIONES EN LA COMPOSICIÓN QUÍ-MICA DE ACEITES ESENCIALES MICRO-ENCAPSULADOS EN UN ENSAYO DE CON-TROL DE VARROA EN COLMENAS EN JU-JUY. Sigfrido P. Alemán*, Walter C. Villa, AnaC. Molina, Silvia G. Maidana, Celia A. Gonzálezy Carmen I. Viturro*. Laboratorio de ProductosNaturales PRONOA, Facultad de Ingeniería,Universidad Nacional de Jujuy, San Salvador deJujuy (4600), Argentina. *Autores a quien dirigir lacorrespondencia: [email protected];[email protected] ácaro Varroa destructor Oud (Varroidae) es unparásito que afecta a Apis mellifera L., y provoca,en consecuencia, disminuciones en el rendimientode productos de la colmena y la muerte de las colo-nias. Las colmenas se tratan generalmente conacaricidas de síntesis que producen residuos inde-seables en sus productos, y la aparición de resisten-cia en varroa frente a algunos compuestos. El em-pleo de productos naturales, ecológicamente com-patibles, representa una alternativa viable en la lu-cha contra ese parásito. Hay registros de aceites esen-ciales (AE) provenientes de especies diversas queexhiben efecto acaricida en condiciones de labora-torio. Desde 2007 realizamos ensayos de actividadvarrocida con distintos métodos de laboratorio conAE libre (Viturro y col., 2009) y AE micro-encapsulado (me) (Alemán y col., 2011) de espe-cies introducidas y nativas de Jujuy de composicióndiferente. El objetivo de este trabajo es estudiar lavariación relativa en la composición química deaceite esencial de Origanum vulgare L. (Lamiaceae)microencapsulado (me) con goma arábiga comomaterial de pared y secado con spray, antes y des-pués de ser utilizado en un ensayo de control del

ácaro Varroa destructor en colmenas. El volumentotal del aceite esencial retenido en las micro-cápsulas, antes y después de su aplicación en lascolmenas durante un período de 15 días, se recupe-ró por hidrodestilación (Clevenger). Los aceitesesenciales fueron cuantificados por CG/FID. Losensayos se realizaron por triplicado. Se verificaronvariaciones en la composición porcentual relativade los aceites esenciales microencapsulados antes ydespués de su aplicación en las colmenas; así paratrans-sabineno-hidrato de 9,3 a 2,0 %; terpinen-4-ol de 21,5 a 12,5 %; timol de 14,8 a 9,9 %; carvacrolde 2,7 a 0,2 % respectivamente, entre otros. Se ob-servó un incremento en el porcentaje de p-cimeno yuna disminución del porcentaje de terpinenos, lo cualpuede corresponder en gran medida a la oxidaciónde estos terpenos a p-cimeno debido a la exposi-ción, durante la permanencia en las colmenas, a lascondiciones de temperatura y la presión de oxíge-no. Los compuestos que experimentaron mayor dis-minución porcentual podrían ser los responsablesde la actividad varrocida observada.Referencias bibliográficasAlemán, S.P.; Viturro, C.I.; Molina, A.C.; Villa, W.C. (2011).

XVIII SINAQO (XVIII Simposio Nacional de Química Orgá-nica). Carlos Paz, Argentina. PN: 223.

Viturro, C.I.; Alemán, S.P.; Heit, C.I.; Molina, A.C. (2009).XVII SINAQO (XVII Simposio Nacional de Química Orgá-nica). Mendoza, Argentina. PN: 77.

POACEAS DE MISIONES: QUIMIOTIPOSDE ELIONURUS MUTICUS. Eugenio Kolb*,Nicolás Kolb, Darío J. Ferreyra, Roberto F.Uliana, Liliana S. Celaya, Carlos Puglisi, Ro-berto A. Miño y Jorge Huk. Facultad de Cien-cias Exactas, Químicas y Naturales. UNaM.Félix de Azara 1552 (3300) Posadas, Misiones,Argentina. *Autor a quien dirigir la correspon-dencia: [email protected] varias décadas, se han implantado con rela-tivo éxito en la provincia de Misiones, tres especiesde Cymbopogon: C. flexuosus (Nees. ex Steud.)Watson (“lemongrass”), C. martinii (Roxb.) Will.Watson (“palmarosa”) y C. winterianus Jowitt. ex Bor.(“citronella”), con el objeto de aprovechar el aceiteesencial (AE) rico en citral y geraniol. De la mismafamilia (Gramineae, ex Poaceae), hemos aislado yestudiado diferentes quimiotipos locales de Elionurusmuticus (Spreng.) Kuntze (“espartillo”): espartillocitral, con un contenido de neral + geranial superior

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al 80 %, rendimiento en AE > 1 % y gran resisten-cia a condiciones climáticas adversas (con gran po-tencial para su explotación comercial); espartillogeraniol, con más de 60 % de geraniol, y otrosquimiotipos con elevado contenido en sesqui-terpenoides: oxobisaboleno (óxido monocíclico,hasta 44 %), acorenona (cetona bicíclica, hasta 57%), nerolidol (alcohol acíclico, hasta 53 %). Comola gran mayoría de los componentes identificadosen el AE de espartillo, mono y sesquiterpenoides,se forman por medio de la ruta del mevalonato seplanteó como objetivo estudiar las rutas metabólicasinvolucradas en la producción de los principalescomponentes del AE y definir las variables que per-mitan explicar la diversidad química de Elionurusmuticus. La diversidad de quimiotipos aislados yestudiados en condiciones controladas de cultivollevó a las grandes bases de datos científicas, dondese almacena la información relacionada con lasenzimas involucradas en cada reacción de biosíntesisde un metabolito secundario específico al utilizarclaves EC (índice global de descripción de acciónenzimática). Las claves EC 1.1.1.183 (GPP (geranilpirofosfato) → geraniol → geranial), EC 4.2.3.25(GPP → linalol), EC 5.4.4.4 (linalol → geraniol),describen una primera etapa de la ruta del me-valonato, donde se forma el siguiente grupo de com-puestos: ocimeno, mirceno, geraniol, genarial, nerol,neral. Cuando estos compuestos no se consolidan,la ruta del mevalonato continúa hacia la formaciónde sesquiterpenoides (EC 2.5.1.10). Un menor con-tenido de citral y geraniol se detecta en presenciade monoterpenoides monocíclicos y bicíclicos quese forman también a partir del GPP y sesqui-terpenoides formados a partir del FPP (farnesilpirofosfato). El cultivo controlado del espartillo de-berá considerar varios aspectos, entre ellos: (a) con-viene realizar la multiplicación de manera clonal yevitar la contaminación entre genotipos; (b) no co-sechar hojas nuevas o plantas en etapa de floración,pues en esta etapa la concentración de acetato degeranilo (precursor del citral) es mayor, mientrasque la de citral es menor; (c) son necesarios mayo-res estudios sobre fenotipos, y se observan varia-bles como composición del suelo, contenido denutrientes y método de irrigación, que pueden in-ducir la inhibición de las enzimas conducentes a laformación de citral o a la activación de enzimas quelleven a la formación de productos competitivos conesas reacciones. Esos factores podrían explicar la

inactivación de la formación de citral y prolongar,en consecuencia, la ruta metabólica hasta la forma-ción de sesquiterpenoides.

VARIABILIDAD DEL ACEITE ESENCIAL DEZUCCAGNIA PUNCTATA CAV. OBTENIDODE 7 POBLACIONES EN LA REGIÓN NO-ROESTE ARGENTINO Y CUYO. Catalina M.van Baren1, Miguel A. Juárez2, Paola Di LeoLira1, Miguel A. Elechosa2, Ana M. Molina2,Alejandro J. Martínez2 y Arnaldo L. Bandoni1.1Cátedra de Farmacognosia, Facultad de Far-macia y Bioquímica, UBA. Junín 952, 2º P.(C1113AAD) Ciudad Autónoma de Buenos Ai-res, Argentina. 2Instituto de Recursos Biológi-cos, CIRN, INTA, Las Cabañas y Los Reseross/n.º, (1686) Hurlingham, Prov. de Buenos Ai-res, Argentina. *Autores a quien dirigir la co-rrespondencia: [email protected];[email protected] punctata Cav. (Leguminosae), “jarillamelosa”, “jarilla macho”, “pus pus”, es un arbustoaromático xerófilo, endémico de la provinciaBiogeográfica del Monte (NOA y Cuyo), de unos 3m de alto, muy ramificado, con flores amarillas, quepor su aspecto resinoso y viscosidad es muy pareci-do a las verdaderas jarillas (Larrea spp.), con lascuales convive. Florece desde agosto a marzo y fruc-tifica de noviembre a abril. Fue mencionado comoantiséptico pédico, y también como que su aceiteesencial tiene actividad antifúngica. El objetivo deeste trabajo es determinar la composición del aceiteesencial en varias poblaciones del noroeste y Cuyo,las variaciones entre poblaciones y la posible utili-dad de sus principios activos. Se colectaron mues-tras de la parte aérea en floración en 7 poblaciones,algunas a fines de noviembre y otras, a mediados deabril. Los sitios fueron: Salta: Departamentos SanCarlos, Angastaco (n.º 1) y La Viña, Tres Cruces(n.º 2 y 3); La Rioja: Departamentos Independen-cia, Paganzo (n.º 4) y Sanagasta, Pampa de la Viuda(n.º 5); Tucumán: Departamento Tafí del Valle,Amaicha del Valle (n.º 6); Mendoza: DepartamentoTupungato, San José (n.º 7); San Juan: Departamento25 de Mayo, Cuesta de las Vacas (n.º 8). Los aceitesesenciales se obtuvieron por hidrodestilación(Clevenger) del material oreado. Los rendimientossobre la parte aérea oreada variaron entre 0,18 y0,34 % (v/w). Estos valores son muy superiores alos obtenidos en Larrea divaricata Cav., L. nitida

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Cav. o L. cuneifolia Cav. (Zygophyllaceae) en va-rias poblaciones de la región patagónica (0,01-0,03%). La composición fue determinada por GC/FID/MS. Se identificaron 55 componentes (79,0-95,2 %del total). La gran mayoría son monoterpenos (oxi-genados 27,7-87,2 % e hidrocarburos 4,4-35,4 %).Entre los principales, con una gran variabilidad cuan-titativa en todos ellos, se destacan: 5,6-dehidro-alcanfor (1,1-56,5 %), p-cimen-8-ol (2,3-16,0 %),linalol (0,9-14,5 %), p-cimeno (1,6-10,9 %) y2,4(10)-tuyadieno (0,1-10,0 %). Los 10 componen-tes principales, así como el subtotal de ellos, y eltotal identificado en cada muestra, están indicadosen la tabla 1. La única población donde se efectua-ron dos colectas fue Tres Cruces, ruta 68 haciaCafayate, en noviembre de 2006 y abril de 2008;destaca el aumento en los contenidos de 5,6-dehidroalcanfor (12,3 a 33,0 %), p-cimen-8-ol (5,7a 16,0 %) y linalol (2,7 a 8,0 %) con significativasdisminuciones en los restantes compuestos. Lascomposiciones de Paganzo y Cuesta de las Vacasresponden a un quimiotipo definido “5,6-dehi-droalcanfor-linalol” (58,8-71,0 %), no confirmadoen las otras muestras. Dada la diversidad cuantitati-va detectada se continuarán evaluando poblaciones,para definir los parámetros más útiles en la compo-sición y la calidad de sus aceites esenciales.

ENSAYOS DE CULTIVO DE PLANTINES DELIPPIA ALBA PROVENIENTES DE 5 ORÍGE-NES EN LA CIUDAD DE LA PLATA. MarcosBlanco1, Catalina M. van Baren2, Jorge Rin-guelet1* y Arnaldo L. Bandoni2

. 1Cátedra de

Bioquímica y Fitoquímica. Facultad de CienciasAgrarias y Forestales. UNLP. 60 y 119 (1900) LaPlata. 2Cátedra de Farmacognosia, Facultad deFarmacia y Bioquímica, UBA. Junín 956, 2º P.(C1113AAD) Ciudad Autónoma de Buenos Aires,Argentina. *Autores a quien dirigir la correspon-dencia: [email protected]; [email protected] “salvia morada” (Lippia alba (Mill.) N.E.Brown, Verbenaceae), es una planta aromática am-pliamente distribuida en América y utilizada condistintos objetivos en muchos países de la región,fundamentalmente como medicinal o para la pre-paración de infusiones. Desde el año 2004 se estáensayando en los alrededores de la ciudad de LaPlata el cultivo en escala experimental de esta es-pecie, utilizando estacas provenientes de los si-guientes orígenes: Costa Rica (quimiotipocarvona), Uruguay (quimiotipo linalol) (UY),Iquitos (selva tropical de Perú, quimiotipo carvona)(PE) y Argentina (La Plata, quimiotipo citral; San-ta Fe, quimiotipo dihidrocarvona) (AR). La elec-ción de los orígenes se basó en los antecedentes

Muestra n.º 1 2 3 4 5 6 7 8 Componentes % % % % % % % % 2,4(10)-tuyadieno 05,3 05,3 00,1 00,5 04,4 10,0 00,8 00,4 p-cimeno 06,8 04,5 02,4 06,9 03,8 10,9 08,0 01,6 1,3,5-trimetilbenceno 04,9 04,6 02,0 03,6 01,8 08,7 06,0 00,4 p-cimeneno 04,6 06,0 01,2 01,4 01,6 04,6 04,3 00,6 linalol 05,9 02,7 08,0 10,1 06,7 00,9 01,9 14,5 5,6-dehidroalcanfor 01,1 12,3 33,0 48,7 18,1 04,0 44,2 56,5 neo-iso-tuyanol 03,9 03,4 T 00,5 03,9 00,6 00,9 00,7 p-menta-1,5-dien-8-ol 09,6 07,6 T 00,7 05,5 00,1 00,5 01,8 p-cimen-8-ol 05,1 05,7 16,0 02,3 06,4 11,9 04,5 03,2 2,4,6-trimetilbenzaldehido 06,8 05,0 02,0 03,4 03,2 04,9 04,3 01,1 Subtotal 54,0 57,1 64,7 78,1 55,4 56,6 75,4 80,8 Total identificado 79,8 80,0 85,3 95,2 83,1 79,0 89,5 94,5

Tabla 1.-

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existentes sobre la composición química de su acei-te esencial que difieren notoriamente entre losquimiotipos. El objetivo de esta investigación esevaluar el comportamiento de los distintos mate-riales en la zona, para sugerir su posible produc-ción en escala industrial. Se utilizó para esto laEstación Experimental de la Facultad de CienciasAgrarias y Forestales de la Universidad Nacionalde La Plata. Para evaluar la calidad de los aceitesesenciales, se colectaron las partes aéreas en mar-zo de 2012, y se destilaron en trampa Clevenger yun destilador de 100 litros, por arrastre con vapor.Los aceites esenciales fueron analizados por GC/FID/MS. Cabe consignar que el material de CostaRica se perdió totalmente en 2007, debido a lasfuertes heladas de ese invierno, al no adaptarse alos climas y suelos de la ciudad de La Plata (Ar-gentina). En la tabla 1 se presentan los datos obte-nidos y los principales compuestos detectados decada uno de los materiales. En general, los cuatromateriales han mantenido su perfil químico de acei-te esencial, salvo el originario de La Plata, dondese observa una reducción en el contenido de citral(neral + geranial) y un incremento significativo decarvona. Se seguirán ensayando los 4 materialesexistentes, para evaluar no solo su calidad, sinotambién su rinde por hectárea en biomasa y aceiteesencial.

QUIMIOTIPOS EN LOS ACEITES ESENCIALESDE POBLACIONES NATURALES DE ALOYSIACITRIODORA, ALOYSIA POLYSTACHYA YCLINOPODIUM GILLIESII. Miguel A. Juárez 1*,Carmen I. Viturro 2*, Miguel A. Elechosa1, Cecilia I.Heit2, Ana C. Molina2, Alejandro J. Martínez1 y AnaM. Molina1. 1Instituto de Recursos Biológicos, CIRN-INTA, De Los Reseros y Nicolás Repetto s/n.º (1686)Hurlingham, Buenos Aires, Argentina. 2Facultad deIngeniería. Universidad Nacional de Jujuy. I. Palanca10. (4600) San Salvador de Jujuy, Jujuy, Argentina.*Autores a quien dirigir la correspondencia:[email protected]; [email protected] trabajo forma parte del Proyecto INTA PNHFA064641 sobre caracterización de poblaciones deplantas aromáticas nativas y la introducción al cul-tivo de los quimiotipos seleccionados por sus acei-tes esenciales. Se evaluaron 10 poblaciones deAloysia citriodora Palau (“cedrón”), en Salta, Jujuy,Catamarca y Tucumán; 8 poblaciones de Aloysiapolystachya (Griseb.) Mold. (“burrito”), en Salta,La Rioja, San Luis y Córdoba y 14 poblaciones deClinopodium gilliesii (Benth.) Kuntze (syn. Saturejaparvifolia), (“muña muña”), en Salta, Jujuy,Tucumán, San Luis, Córdoba y Mendoza, con va-rias repeticiones en épocas y años distintos. En cadapoblación de “cedrón” se detectaron in situ una grandiversidad de aromas, por lo cual se colectó planta

Categoría/origen Brujas, UY Santa Fe, AR La Plata, AR Iquitos, PE Peso seco tallos cosechados (g) 374 175,3 190,2 37,6 Peso seco hojas cosechadas (g) 304,4 213,9 404,3 59,1 % de tallo 55,1 45 32 38,8 % de hojas 44,9 55 68 61,2 Rinde de esencia en hojas (% v/p) 1,2 1,7 0,7 1,5 Principales compuestos limoneno 0,2 6,7 8,2 26,0 1,8-cineol 6,0 - - - linalol 64,2 0,5 0,8 1,3 carvona - 0,4 16,7 45,9 beta cariofileno 2,7 3,6 3,8 1,1 cis dihidrocarvona 0,2 32,8 0,2 0,2 trans dihidrocarvona 0,5 37,5 0,2 0,3 neral 0,1 0,3 11,5 tr germacreno D 3,0 2,9 4,6 7,3 geranial 0,1 0,2 19,5 0,2 Total identificado 90,6 95,6 90,8 93,6

Tabla 1.-

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por planta, las ramas terminales en floración, iden-tificándolas según su característica olfativa. En lasde “burrito” y “muña muña” se colectaron muestrasde la parte aérea en floración de varias plantas, se-paradas según los aromas in situ. Los aceites esen-ciales se obtuvieron por hidrodestilación –Cle-venger– del material oreado con rendimientos va-riables, en “cedrón” (0,16-1,93 %); “burrito” (0,56-2,52 %) y “muña muña” (0,23-1,93 %). La com-posición de los aceites esenciales fue determinadapor GC/FID/MS. Los valores obtenidos fueron anali-zados estadísticamente mediante el Análisisde Agrupamiento con el programa InfoStat(www.infostat.com.ar, 2011), utilizando el coeficien-te de distancia euclídea y ligamiento Ward, se de-terminaron los dendrogramas según los principalescomponentes hallados en cada aceite esencial. Losresultados indican la existencia de 10 quimiotiposen “cedrón”, 7 de ellos en dos poblaciones de Jujuy,según la fuerte predominancia de los componentesprincipales: cis y trans-tuyona; citronelal; carvona;trans-sabinol; citral y carveol. En las poblacionesde Salta, Catamarca y Tucumán se confirmaron va-rios y, además, se obtuvieron otros 3 quimiotiposcon linalol, cis y trans-dihidrocarvona y limoneno.En conclusión, de las 36 muestras, solo se determi-naron 2 con el quimiotipo citral –muy usado co-mercialmente–, en cambio, se destacan varios muyinteresantes por su composición y posible utiliza-ción en la industria aromática, como tuyona (86,2-86,5 %) en San Roque, Jujuy; linalol (82,3-85,1 %)en Mutquin y Colana, Catamarca; carvona (70,9 %)en Chilcayo, Jujuy y citronellal (66,7 %) en Chorri-llos, Salta. Los rendimientos de aceite esencial ob-tenidos en “burrito” destacan la población de Puntade los Llanos, La Rioja (2,52 %). Sobre la base dela composición de los aceites esenciales se confir-mó el quimiotipo cis-tuyona en las poblaciones deLa Rioja (65,4-80,8 %), indicado en otros trabajos,además en las restantes provincias se determinaronotros 3 quimiotipos, carvona (61,0-74,3 %) en Sal-ta; limoneno (41,3 %) en Córdoba y tuyona (41,3%)-carvona (32,1 %), en San Luis. La composiciónde las muestras de “muña muña” destaca 5quimiotipos. Uno de ellos –óxido de piperitenona-piperitenona (46,3-87,2 %)– corresponde a las po-blaciones de San Luis (Valle de Pancanta, Carolina,Piedra Bola e Inti Huasi); Jujuy (Tres Cruces) yMendoza (Los Hornillos). En San Luis los valoresobtenidos confirman el quimiotipo de un estudio

anterior. En Salta las 3 poblaciones destacan elquimiotipo terpinen-4-ol (33,8-58,0 %). En Córdo-ba las poblaciones de Altas Cumbres (pampa deAchala, El Cóndor, Tres Cruces) son tipo pulegona(48,8-72,5 %); mientras que en Tucumán se halla-ron 2 quimiotipos, uno en Tafí del Valle con isocitral(38,7 %) y otro, en El infiernillo, con acetato decarvacrilo-carvacrol (74,1 %). Los resultados obte-nidos –19 quimiotipos en 32 poblaciones de 3 espe-cies– nos indican la importancia de la preservacióndel recurso aromático nativo por medio de la con-servación, caracterización y utilización sustentables.

ENSAYOS PRELIMINARES DE EXTRAC-CIÓN DE FLAVONOIDES EMPLEANDO CO2SUPERCRÍTICO SATURADO CON ETANOL.Noelia Palacios, Rodrigo Rodríguez, Roxana delC. Cabana, José Luis Zacur* y Carmen I.Viturro*. Laboratorio PRONOA, Facultad de In-geniería, Universidad Nacional de Jujuy, San Sal-vador de Jujuy (4600) Argentina. *Autores a quiendirigir la correspondencia: [email protected],[email protected] aromáticas nativas de zonas áridas ysemiáridas del NOA, como Mutisia friesiana Ca-brera (Asteraceae) y Clinopodium gilliesii (Benth.)Kuntze (Lamiaceae), fueron evaluadas en su capa-cidad antioxidante (Viturro y col., 1999; Cabana ycol., 2012). Se aislaron (Viturro y col., 1999) eidentificaron (Díaz-Reinoso y col., 2006) compues-tos polifenólicos responsables de la actividad, es-pecialmente flavonoles glicosidados y sus aglico-nas. Resulta de interés indagar sobre las condicio-nes del proceso supercrítico para la obtención deestos principios antioxidantes, dado que es una áreade activa investigación (Díaz-Reinoso y col.,2006). Los metabolitos secundarios en las matri-ces naturales se presentan en mezclas complejas,que frecuentemente se utilizan como modelos ex-perimentales de comportamiento para simplificarel diseño y la evaluación de la experiencia(Reverchon y De Marco, 2006). En este trabajo seutiliza una mezcla sintética de quercetina y suglicósido, rutina, como caso de estudio. Debido ala baja polaridad del ScCO2, la obtención de com-puestos flavonoides complejos, altamente hidro-xilados como la rutina, debe ser efectuada utili-zando un cosolvente polar, como el etanol (Chafery col., 2004). El manejo de las variables de pro-ceso permitiría determinar las condiciones para

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lograr rendimiento y selectividad. Se informan losresultados preliminares de ensayos efectuados paraextraer una mezcla sintética de rutina y de suaglicona quercetina, empleando una mezclasupercrítica de CO2 saturado con etanol. El objeti-vo es determinar si es factible la extracción de am-bos compuestos, (como caso de estudio de princi-pios flavonoides) empleando un diseño de proce-so particular (acondicionamiento de flujo) comoparte de un desarrollo más extenso en este tema.El sistema de extracción consta de un recipientevertical en el que se deposita la mezcla deflavonoides sólidos, sobre un lecho de algodón através del cual fluye el fluido supercrítico (FSc).Por encima del depósito, también se rellena la cel-da de extracción con algodón. Se efectuaron dostipos de experiencias: una, con el lecho inferiorembebido en etanol absoluto. El solvente super-crítico fue una mezcla de ScCO2 saturado conetanol. La velocidad de flujo de CO2 permite esasaturación; otra, con el lecho sin embeber si el sol-vente es solo ScCO2. Las condiciones del procesofueron: temperatura: 40 ºC, presión: 120 bar, cau-dal: 0,002 moles ScCO2/min. La mezcla fue reco-gida luego de la expansión del FSc, en viales quecontenían etanol absoluto en ambos tipos de expe-riencias. Se determinó cualitativamente la presen-cia de quercetina y rutina mediante TLC. En lasplacas desarrolladas se observa que con las condi-ciones propuestas es factible la obtención de dis-tintas cantidades del glucósido y su aglicona a partirde una mezcla sintética (1:1) de quercetina y ruti-na, que se solubilizan en el solvente supercríticomodificado en las condiciones de operación defi-nidas. Futuros trabajos en el área estarán orienta-dos a la determinación de las condiciones óptimasde proceso, a la cuantificación de rendimientos yselectividad y a su aplicación a matrices vegetalesnaturales.Referencias bibliográficasCabana, R.; Viturro, C.; Salinas, R.; Molina, A. (2010). En-

cuentros Binacionales de Jóvenes Investigadores Argentino-Chileno: 289-292.

Cabana, R.; Silva, L.; Valentão, P.; Viturro, C.; Andrade, P.(2012). Phenolic and volatile compounds and biologicalactivity of Satureja parvifolia extracts (en preparación).

Díaz-Reinoso, B.; Moure, A.; Domínguez, H.; Parajó, J.C.(2006). J. Agric. Food Chem. 54: 2441-2469.

Reverchon, E.; De Marco, I. (2006). Journal of SupercriticalFluids 38: 146-166.

Chafer, A.; Fornari, T.; Berna, A.; Stateva, R.P. (2004). J. ofSupercritical Fluids 32: 89-96.

Viturro, C.I.; Molina, A.C.; Schmeda-Hirschmann, G. (1999).Phytother. Res. 13: 422-424.

CARACTERÍSTICAS FENOLÓGICAS COMOINDICADORES PRELIMINARES DE ADAPTA-BILIDAD DE ESPECIES AROMÁTICAS NATI-VAS DE REGIONES SEMIÁRIDAS Y ÁRIDAS DEJUJUY. Elizabeth del Valle García1*, Silvia M.Zampini1, Carmen I. Viturro2* y Ana C. Molina2

.1Facultad de Ciencias Agrarias, UNJu, San Salva-dor de Jujuy (4600) Jujuy, Argentina. 2PRONOA,Facultad de Ingenieria, UNJu, San Salvador de Jujuy(4600) Jujuy, Argentina. *Autores a quien dirigir lacorrespondencia: [email protected];[email protected] manejo y la preservación de los recursos natu-rales, en particular la conservación de las espe-cies vegetales y su variabilidad, demanda el estu-dio de su comportamiento en el ecosistema don-de se desarrollan las etapas fenológicas de losvegetales durante su ciclo biológico, a fin de es-tablecer las pautas de multiplicación de la espe-cie. Las especies nativas como Satureja parvifolia(Phil.) Epling syn Clinopodium gilliesii (Benth.)Kuntze (Lamiaceae) y Aphyllocladus spartioidesWedd. (Asteraceae) (Cabrera, 1993), con uso lo-cal para antiinflamatorios, antimicrobianos,analgésicos (Viturro y col., 2000), constituyen unimportante recurso de materias primas que podríanser utilizadas en diferentes industrias. El manejoen sistemas de cultivo garantizaría la homogenei-dad, la trazabilidad de sus productos y la dispo-nibilidad de biomasa necesaria. Los registros delos diferentes muestreos de material vegetal paralas especies en estudio se iniciaron a partir delaño 2004 en forma sistemática en diferentes lo-calidades de la quebrada y la puna de la provin-cia de Jujuy, y en distintas épocas del año. Se pro-cedió en todos los casos a herborizar los ejem-plares recolectados. A partir de 2011 se procedióa la multiplicación agámica de especies en estu-dio seleccionadas en fases de floración y fruc-tificación. Se realizó en el invernáculo de la Fa-cultad de Ciencias Agrarias, UNJu. Se partió deestacas de 10 cm de longitud y el diámetro deun lápiz, en macetas individuales utilizandocomo sustrato una mezcla de arena cernida, tie-rra vegetal, turba y perlita. Las estacas fueron

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sumergidas, en su parte basal, en alfa-naftalenacético al 0,3 %. Se registró el comportamientofenológico de las especies durante el ciclo bioló-gico. Las etapas fenológicas registradas para lasdos especies fueron brotación, crecimientovegetativo, reposo invernal, inicio de floración,floración y fructificación (Moreira y Arnáez,1995). Para Satureja parvifolia en estado silves-tre se observa en una misma localidad, en distin-tos años, diferencia en la cronología de la mani-festación de la etapa reproductiva probablementedebidas a causas climáticas. Se observa diferen-cias en las fechas de manifestación de las etapasde brotación y floración en las poblaciones enestado silvestre respecto a las de ambiente con-trolado, y un adelanto para ambas etapas en lasplantas en adaptación, lo que indicaría un incre-mento de la biomasa durante el ciclo estudiado.

Para Aphyllocladus spartioides en estado silves-tre se observa un adelanto de la etapa reproductivaen las zonas de menos altura. En condiciones con-troladas durante 2 ciclos anuales no se manifiestala etapa reproductiva y se observa siempre esca-sa producción de biomasa. Es importante el estu-dio del comportamiento químico de las especiesen adaptación por medio de la cuantificación delas variables correspondientes y la medición dela actividad biológica, que efectuaremos en cuantose disponga de suficiente biomasa.Referencias bibliográficasCabrera, A L. (1993). Flora de la provincia de Jujuy, tomo

XIII, parte IX: 147-149.Viturro, C.I. y col. (2000). XXIV Congreso Latinoamericano

de Química. P N: 14.Moreira, I.; Arnáez, E. (1995). Simposio Latinoamericano de

semillas. 123-130.

29 al 30 de noviembre de 2012 Dominguezia III Jornadas ... (Philippi) V. A. Funk (sinónimo:...

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