1.  QUIMOTRIPSINA 2.  PROTEASA DE VIH 3.  HEXOKINASA 4.  ENOLASA 5.  LISOZIMA 6.  TRANSPEPTIDASA

TAREA PARA EL LUNES CONVERTIRSE EN EXPERTOS SECCIÓN 6.4 DEL LIBRO (FINAL DE 6.2)

http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/4/42/COX-2_inhibited_by_Aspirin.png

INHIBICIÓN

GRÁFICA LINEWEAVER-BURK DOBLE RECÍPROCO (BOX 6–1)

INHIBICIÓN REVERSIBLE

INHIBICIÓN REVERSIBLE

INHIBICIÓN REVERSIBLE

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ENZIMAS REGULACIÓN

ENZIMAS REGULACIÓN

OBJETIVOS DE APRENDIZAJE:

Capítulo 6 // Secciones 6.4 – 6.5

1.  Entender, analizar e interpretar ejemplos de reacciones enzimáticas con los respectivos sustratos, cofactores, productos y reguladores de cada reacción. a)  Secuencia temporal y mecanismo. b)  Relación estructural entre enzima e intermediarios. c)  Residuos y factores claves en el proceso de catálisis. d)  Ejemplos del uso de este conocimiento para desarrollo de tratamientos y medicamentos.

2.  Entender el efecto de los moduladores alostéricos en la actividad enzimática incluyendo el impacto que tienen en parámetros cinéticos.

3.  Entender las diferentes modificaciones covalentes reversibles que afectan la actividad enzimática con particular énfasis en la trasferencia de grupos fosfatos (enzimas que lo regulan, secuencias de consenso, regulación por múltiples fosforilaciones)

4.  Entender y apreciar la importancia de la activación de algunas enzimas por lisis proteolítica de precursores enzimáticos (zimógenos)

5.  Apreciar la integración de múltiples mecanismos de regulación en las enzimas reguladoras.

QUIMOTRIPSINA Páncreas Bovino (Mr 25,191)

• Enzima proteolítica que actúa en los sistemas digestivos de mamíferos y otros organismos.

• Proteasa que hidroliza enlaces péptidos adyacentes a residuos aromáticos

• Estabilización de estado de transición • Catálisis ácido-base • Catálisis covalente

• Aumenta la tasa de hidrólisis de enlaces péptidos por un factor de 109

EVIDENCIA CINÉTICA DE LA FORMACIÓN DE INTERMEDIARIO ACILO-ENZIMA

REACCIONES CATALIZADAS POR QUIMOTRIPSINA SON DEPENDIENTES DEL pH

FORMACIÓN DE COMPLEJO ENZÍMA-SUSTRATO

TRÍADA CATALÍTICA SER195| | |HIS57| | |ASP102

pKa HIS57 ~7 12

FORMACIÓN DE INTERMEDIARIO ENERGÍA DE ENLACE PARA CATÁLISIS

GLY193| | |SER195

SOLO EN EL INTERMEDIARIO

FORMACIÓN DE INTERMEDIARIO ACIL-ENZIMA

CATÁLISIS DE BASE GENERAL (AGUA)

MECANÍSMO DE ACCIÓN DE LA PROTEASA DE HIV RETRO-TRANSCRIPTASA—INTEGRASA—PROTEASA

Aspartil-Proteasa Preferencia por enlace entre Phe-Pro

INHIBIDORES DE LA PROTEASA DE HIV ANALOGOS DE ESTADO DE TRANSICIÓN

HEXOKINASA—ENCAJE INDUCIDO (INDUCED FIT) HEXOKINASA DE LEVADURAS (Mr 107,862)

FAVORECE REACCIÓN CON GLUCOSA SOBRE AGUA POR FACTOR DE 106

HEXOKINASA—ENCAJE INDUCIDO (INDUCED FIT) HEXOKINASA DE LEVADURAS (Mr 107,862)

FAVORECE REACCIÓN CON GLUCOSA POR FACTOR DE 106

ENOLASA REQUIERE IONES METÁLICOS PARA SU REACCIÓN ENOLASA DE LEVADURAS (Mr 93,316)

ENOLASA REQUIERE IONES METÁLICOS PARA SU REACCIÓN ENOLASA DE LEVADURAS (Mr 93,316)

LISOSÍMA—DOS DESPLAZAMIENTOS NUCLEOFÍLICOS SUCESIVOS LISOSÍMA DE CLARA DE HUEVO DE GALLINA (Mr 14,296)

LISOSÍMA—DOS DESPLAZAMIENTOS NUCLEOFÍLICOS SUCESIVOS LISOSÍMA DE CLARA DE HUEVO DE GALLINA (Mr 14,296)

LISOSÍMA—DOS DESPLAZAMIENTOS NUCLEOFÍLICOS SUCESIVOS LISOSÍMA DE CLARA DE HUEVO DE GALLINA (Mr 14,296)

PENICILINA INTERFIERE EN LA SÍNTESIS DE PEPTIDOGLUCANO

INHIBICIÓN DE TRANSPEPTIDASA POR ANTIOBIÓTICOS β-LACTAM

INHIBICIÓN DE TRANSPEPTIDASA POR ANTIOBIÓTICOS β-LACTAM

β-LACTAMASA Y SU INHIBICIÓN GUERRA QUÍMICA ENTRE HUMANOS Y BACTERIAS

ENZIMAS REGULADORAS: TIENE MAYOR EFECTO EN LA PROCESOS CELULARES DEMUESTRAN CAMBIO EN ACTIVIDAD EN RESPUESTA A SEÑALES

REGULACIÓN ALOSTÉRICA DE FOSFOFRUCTOKINASA–1 (PFK–1) FIGURA 15.16

MODULADORES ALOSTÉRICOS AFECTAN LA FUNCIÓN ENZIMÁTICA AL ESTIMULAR UN CAMBIO CONFORMACIÓN

REGULACIÓN ALOSTÉRICA DE ASPARTATO TRANSCARBAMILASA ATCASE: BIOSÍNTESIS DE PIRIMIDINAS

MODULADOR + : ATP MODULADOR – : CTP

VARIACIONES CINÉTICAS PRODUCIDAS POR ENZIMAS ALOSTÉRICAS HIPERBÓLICO SIGMOIDAL

(EFECTO COPERATIVO=CAMBIO EN UNA SUBUNIDAD AFECTA LA OTRA)

KM VARÍA EN CASO DE ATCASE

MODULADOR + : ATP MODULADOR – : CTP

REGULACIÓN POR MODIFICACIONES COVALENTES REVERSIBLES

REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE GLUCÓGENO FOSFORILASA (Mr 94,500) POR TRANSFERENCIA DE GRUPOS FOSFATOS

CINASAS (KINASE): AÑADEN GRUPO FOSFATO FOSFATASAS (PHOSPHATASE): REMUEVEN GRUPO FOSFATO

SECUENCIAS DE CONSENSO: MOTIFS ESTRUCTURALES COMUNES

REGULACIÓN POR MÚLTIPLES FOSFORILACIONES

REGULACIÓN POR LISIS PROTEOLÍTICA DE PRECURSORES ENZIMÁTICOS

ZIMÓGENO: PRECURSOR INACTIVO

CASCADA PROTEOLÍTICA ACTIVA ZIMÓGENOS QUE CONDUCEN A LA COAGULACIÓN SANGUÍNEA

CASCADA DE SEÑALIZACIÓN: PERMITE LA AMPLIFICACIÓN DE

SEÑALES MOLECULARES

INTEGRACIÓN DE MÚLTIPLES MECANISMOS DE REGULACIÓN