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Contar células
Métodos para contar células
Métodospara contar
célulasElectrónicos
Basados en lamicroscopía
Medidores dela resistencia
Citometríade flujo
Análisis deimagen
Hemocitómetro
Incorporación de
colorantes fluorescentes
Tinción de cultivosen monocapa
Aproximados
Peso
Contenido de ADN
Contenido de proteínas
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Contar células
El hemocitómetro o cámara de Neubauer
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Contar células
(rojo)
(azul)
(verde)
(amarillo)
(gris)
1 mm
Profundidad = 0,1 mm
La cuadrícula del hemocitómetro
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Contar células
Se introduce la suspensión de células en el hemocitómetro
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Contar células
La región de recuento del hemocitómetro
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Contar células
Observación con microscopio óptico y recuento de células
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Contar células
Diferencias entre células vivas y muertas
Célula viva
Célula muerta
De las tres líneas,la del centro es laque corresponde allímite del cuadrado
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Contar células
Tinción de cultivos en monocapa
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Contar células
Hay tres tipos de contadores electrónicos
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Contar células
Contador de células electrónico (CASY)
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Contar células
Resultados del recuento de células
Es importante poner límites (inferior ysuperior) a los tamaños que se miden
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Contar células
Recuento mediante análisis de imagen
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Contar células
Fundamento del recuento de células por análisis de imagen
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Contar células
Recuento de células por análisis de imagen
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Contar células
Esquema del análisis de la imagen
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Contar células
Citometría de flujo
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Contar células
Citometría de flujo
La difracción de luz frontal permitecontar las células y, a la vez, nos
da información sobre su tamaño.
é
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Contar células
Estimación del número de células a partir del peso
C él l
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Contar células
Estimación del número de células a partir contenido proteico
C él l
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Contar células
Método de Bradford: fundamento
C t él l
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Contar células
Método de Bradford: protocolo
C t él l
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Contar células
Estimación del número de células a partir contenido de ADN
C t él l
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Contar células
Determinación de ADN por la fluorescencia del H33258
C t él l
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Contar células
Estimación del ADN por la absorbancia en el ultravioleta
C t él l
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Contar células
Comparación de los diversos métodos para contar células
Contar cél las
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Contar células
Métodos para determinar la viabilidad de las células
Métodos paradeterminar laviabilidad delas células
Síntesis de novo de proteínas
Incorporación de3H-timidina al ADN
Exclusión del azul tripán
Marcaje fluorescentecon naranja de acridina
y ioduro de propidio
Contar células
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Contar células
Viabilidad celular mediante tinción con azul tripán
Contar células
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Contar células
Naranja de acridina: atraviesala membrana celular y tiñe los
ácidos nucleicos, generando unaintensa fluorescencia de colorverde a bajas concentraciones.
Ioduro de propidio: noatraviesa la membrana decélulas intactas, pero sí la de
las células dañadas. Se une alos ácidos nucleicos,desplazando al naranja deacridina y genera una intensafluorescencia de color rojo.
Viabilidad celular: Naranja de acridina + Ioduro de propidio
Células vivas
Células muertas
Contar células
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Contar células
Medida de la viabilidad celular a partir de la síntesis de proteínas
Contar células
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Contar células
Medida de la viabilidad celular a partir de la síntesis de ADN