Alumno:Pérez Pérez José Manuel

Asesor:

QFB Ma. De las Mercedes Zamudio Durán

Definiciones

• Presencia de bacterias en sangre

Bacteremia

• Manipulación de tejidos

• Abscesos, forúnculos, celulitis, cepillado, estreñimiento.

• Instrumentación sobre superficies mucosas

• Extracción dentaria, caterización uretral

Transitoria

• Abscesos intraabdominales o viscerales no drenados

• Osteomielitis, artritis, meningitis, neumonía

Intermitente

• Endocarditis bacteriana

Continua

• Por lo menos dos manifestaciones

• 1) Fibre mayor a 38°C o hipotermia menor a 36°C. 2) Frecuencia cardiaca mayr a 90 cpm; 3) Frecuencia respiratoria mayor a 20 rpm, o pCO2 menor a 32 mm de Hg. Leucocitosis mayor a 12000 o menor a 4000/mm3; o mas de 10% de formas inmaduras.

Sindrome de Respuesta inflamatoria sistemica(SIRS)

• Situación de sepsis asociada a hipotención, pese a reposición de fluidos

Shock septico

• Sindrome severo asociada a infección aguda y falla orgánica relacionada con mediadores del tipo citoquinas en circulación

Septicemia

• Infección por pyogenos. S pyogenes.

Piemia

• Presencia de bacterias en sangre

Toxiemia

PRINCIPALES AGENTES DE BACTEREMIA

• Afecta

• Endocardio y valvulas

Endocarditis

• Biota normal de la boca y tracto gastronistestinal

• Streptococcus del grupo viridans

• Staphylococcus aureus (drogadictos)

Causantes

• Endocarditos aguda

• Valvulas normales o lesionadas con progreso rápido y mortal (S. aureus)

• Endocarditis subaguda (cronica)

• Válvulas anormales, con deformacionscongénitas y lesiones reumaticas o escleroticas (S. viridans)

Tipos

• Insuficiencia renal

• Embolias en cerebro y riñon

• Insuficiencia valvular aguda

Secuelas

Endocarditis infecciosa

Video que muestra cómo se observa una válvula normal y una con

endocarditis y cuerpos vegetativos.

Endocarditis

¿Qué es un hemocultivo?

• Sepsis: 20 y 80% de mortalidad en UCI

IMPORTANCIA y ETIOPATOGENIA

• Tratamiento excesivo o inadecuado

• Fármacos inmunosupresores

Tratamiento antimicrobiano

• Enterococcus, gramnegativos y hongos

Microorganismo responsable

• Mayores de 40 años, recién nacidos

Edad

• Genitourinario>respiratorio>absesos

Foco infecciosos

• Nosocomial>Comunitaria

Entorno de Infección

• Polimicrobiana>Monomicrobiana

Naturaleza de la bacteriemia

• Neoplasias Hematológicas y no hematológicas, diabetes, insuficiencia renal en etapap de diálisis, cirrosis hepática, SIDA-

Enfermedades subyacentes

• Shock

Complicaciones de la Sepsis

• Catéteres, cirugías del tracto digestivo y genitourinario, endoscopia.

Procedimientos invasivos

Clasificación de Hemocultivos

Polianetol Sulfonato de Sodio (SPS) a 0.025-0.05%

Para: Peptostreptococcus, Gardnerella, y algunascepas de Neisseria spp agregar 1.2% de Gelatina

Mayor riesgo de contaminación.

Incubación desición del microbiologó basado en el diagnóstico clínico.

Micoorganismo intracelulares y cuantificación.

Hongos, Micobacterias.

SPS: Anticoagulante

Saponina: Agente lítico de eritrocitos y leucocitos

Polipropilenglicol: Antiespumante

Hemocultivos cuantitativos.

Diagnóstico de bacteremia relacionada a CatéterVenoso Central (CVC)

Rapides en detección, sensibilidad, mejora en lasbacterteremias y terapia antimicrobiana.

Botellas con diverversos medios: (aeróbicos, anaeróbicos, hongos, micobacterias con resinas).

Detección de productos del metabolismo (CO2) mediante técnicas radiometricas, espectrofotometricas,

fluorométricas, y/o colorimetricas.

El computador relaciona los indices del crecimientobacteriano.

Automatizados

Semi-automatizados

Lisis-Centrifugación

Manuales

Monofásico

Bifasico

Según el tipo de Paciente

Pediátrico

Adulto

Inmunocompetente

Inmosuprimido

Según toma de la Muestra

Central

Periféricos

Según el Tipo de Microorganismo

Bacterias aeróbicas

Bacterias anaeróbicas

Bacterias Fastidiosas

Micobacterias

Hongos

Según la Metodología

Cerrado o Abierto

Manuales

Semi-automatizados

Automatizados

Clasificación de los hemocultivos.

Según tipo de paciente, toma de muestra, tipo de microorganismo y metodología.

CLASIFICACIÓN DE SISTEMAS DE HEMOCULTIVO MANUEL

Clasificación de Hemocultivos

BACTEC 13A - RADIOMETRICO

Sustratos marcados con C14, la cantidad de CO2 (C14) es medida porsu ionización y transformada a un numero, proporcial al crecimientobacterinano

Reacción del CO2 con material colorimetrico en el fondo (gas permeable) con vire de verde a amarillo.

BACTEC SERIES 9000 Fluorescencia.

Reacción del CO2 con material fluorescente al fondo esproporcional a la luz absorbida. Monitoriea cada 10 minutos.

BACTEC 9000 SeriesFluorescence

Becton Dickinson BD

BacT/AlertColorimetriaBiomerieux

Bactec 13A Radiometrico

Becton Dickinson BD

FUNDAMENTO DE ALGUNOS AUTOMATIZADOS

Your Logo

Arrow ProcessWhy use graphics from PowerPointing.com?

ECONOMICO

Sensibilidad y velocidad de detecciónMejora en diagnóstico y mejora en el trabamiento

Disminución de carga de trabajo y contaminación

Estadistica de positividad y contaminación, control de bacteremias intrahospitalarias

Costo de 2-4 veces el convencional

Costo equipo

EPIDEMIOLOGICOMICROBIOLOGICOCLINICO

IMPACTO DE HEMOCULTIVOS AUTOMATIZADOS

Dismunución de horas/hombreMaterial de resiembreDisminuye riesgo de cortopunzantes

Se ideo para el diagnóstico de Brucelosis.Medio para el cultivo de bacterias como estafilococos, pseudomonas, E. coli, Salmonella, Neumococo, a partir de muestras sanguíneas y líquido céfalo raquídeo.Observar crecimiento en medio solido sin abrir el frascoEvita contaminación y riesgo de infección.•Fase solida: Agar Soya Tripticasa (AST)•Fase líquida: Caldo Soya Tripticasa•SPS: 0.025%•Cisteína: 0.025%•Sacarosa: 10%

MEDIO “RUIZ CASTAÑEDA” SISTEMA BIFASICO

Concentración por sedimento.

Diagnóstico de bacteremia relacionada a CatéterVenoso Central (CVC)

Micoorganismos intracelulares y cuantificación.

Hemocultivos cuantitativos.

•SPS: Anticoagulante

•Saponina: Agente lítico de eritrocitos y leucocitos

•Polipropilenglicol: Antiespumante

Micobacterias y Hongos (25 – 50%)

MEDIO LISIS-CENTRIFUGACIÓN (ISOLATOR)

• Recolección y Transporte

•Número de Hemocultivo

•Tiempo e intervalo de toma de muestras

•Volumen de sangre por frasco

•Relación Sangre-Caldo

•Medios de cultivo y Anticoagulante

•Duración de la Incubación

PROCEDIMIENTO EN LA TOMA DEL HEMOCULTIVO Your Logo

TOMA DE MUESTRA

• 2 horas a 30 minutos antes del pico febril. (puede ser precedida por escalofríos)

• Si no de puede predecir.

• Tomar de forma arbitraria 2 hemocultivos a intervalos de 30 a 90 minutos (Endocarditis)

• Tomar 2 Hemocultivos al mismo tiempo de diferente sitio de punción

Intervalo de la toma de muestra

• Periférica (venosa o arterial) y ser la primera del examen, el catéter se coloniza a las 48 h de instalado.

Método de Obtención de Muestra

• Lavado de piel (Pavidona Yodada)

• Desinfección con Tintura de Yodo o Clorhexidinaalcohólica y remoción con alcohol al 70%

• Guantes estériles

Preparación de la Piel (CRITICO)

• Bacterias en sangre 1 a 10 UFC/mL

• Adolescentes y adultos: 10 mL

• Recien nacidos: 1 -2 mL

• Lactantes (1 mes – 2 años): 2-3 mL

• Mayores de 2 años: 5 mL

Volumen de la muestra

• 1:5 a 1:10

• Mayor: Dilución del microorganismos

• Menor: inhibición bactericida del suero

Relación Sangre-Caldo de Cultivo

• Desinfectar el tapón de las botellas (alcohol 70%)

• Sistemas manuales hay mayor contaminación

Inoculación de las Botellas

• 2 a 3 H apropiados (95% de bacteremias)

• 2 H para endocarditis en 24h (98%) sin Txantibiótica, si los primeros son negativos tomar otro set a las 24-48 h.

• Antes de la siguiente administración antibiótica

• 3-5% contaminación

• Más de 4 hemocultivos provoca anemia al paciente Hospitalizado.

Numero de Hemocultivos

• Medios de Cultivo

• Aeróbicos y anaeróbicos facultativos

• Caldos: Soya-Tripticasa, Columbia, Brucela, BHI, peptona complementada

• Sistemas bifasicos: Setpi-Chek (BectonDickinson)

• Lisis centrifugación

• Sistemas automatizados: Bactec 6A, 16A, 26 Plus, PEDS Plus (BectonDickinson). BacT/Alert (Biomeriuoux)

Medios de cultivo

• Anaerobios facultativos

• Líquidos: BHI anaerobios, Caldo Tioglicolato

• Automatizados: Bactec 7A, 17A, litico

• Hongos

• Isolator y Bactec para hongos

• Micobacterias.

• Isolator, Bactec 13A

Medios de Cultivo

• Anticoagulante: Polyanetol Sulfonato de Sodio

• 0.025 – 0.05%

• Inhibe:

• Complemento, fagocitosis, antibióticos (amino glucósidos), lisozimas

• Gelatina: 1.2% por efecto inhibitorio PSS

• Neisseria spp. Peptostreptococcus spp, Gardnerella sp.

• Estabilizadores osmóticos (pared deficiente)

• Sacarosa, manitol (10%)

• Resinas

• Inhibe antibióticos

• Aditivos y otros

• Piridoxal (B6) Streptococcus viridans

• L-cistenia

Anticoagulante y Aditivos

Hemocultivo: procedimiento de toma

Video que muestra cómo se toma la muestra para un hemocultivo,

cuidados y precauciones. Las botellas pertenecen al sistema

BacT/ALERT (aerobio y anaerobio).

Hemocultivo Parte I

Incubación y seguimiento manual

Observación macroscopicaIncubación

TA 25°C maximo 2

horas.

Incubar a 35°C.

Nunca refrigerar

Manual: Observación

díaria

Automatizado: Por

ordenador

Aspecto

macroscopico

Microoganismo asociado

Hemólisis Streptococus, Staphylococcus, Listeria

spp. Clostridoum, Bacillus spp.

Turbidez Bacilo gramnegativo aerobio,

Stpaphylococcus, Bacteroides spp.

Formación de gas Bacilo gramnegativo aerobio, anaerobios

Formación pelicula Pseudomonas spp., Bacillus spp.,

levaduras

Coágulo Staphylococcus aureus

Colonias visibles Staphylococcus, Streptococcus.

Hemocultivo, sistema automatizado BACTEC™

Video que muestra cómo se procesa la muestra en un hemocultivos

automatizado BACTEC PEDS PLUS/F después que el equipo detecta

que es positivo.

Hemocultivo parte II

• Interpretación a la luz del cuadro clínico.

• Hemocultivo positivo en diferente sitio de punción.

• Bacterima verdadera (90%)

• S. aureus, > Bateremia intrahosp.

• Enterobacterias

• S. pneumoniae

• Micobacterias,

• Hongos levaduriformes

Hemocultivo positivo

• Corynebacterium spp.

• Bacillus spp.

• Propionebacterum acnes.

• Staphylococcus coagulasanegativa.

Contaminantes

• Cultivo positivo en Hemocultivo y Catéter para el mismo mo. <15 UFC

Hemocultivo CVC

• Hemocultivos positivos para el mismo microogranismo en una toma

• Indadecuada desinfección de piel

• Indadecuada desifección del frasco (tapón)

Falsos posivos

• Virus

• Endocarditis no infecciosa

• Microoganismos de dificil desarrollo

• Cultivos al final de un proceso crónico

• Endocardoitis causada por Chlamidiaspp., Rickettsia spp. Coxiellabuernetti, Legionella pneumophila.

Hemocultivos negativos

INTERPRETACION

• Recolección y Transporte

SELECCION DE MEDIOS DE CULTIVO Your Logo

GRAM ASC5% AC MAC CNA ANA BRUC

Cocacea grampositivo X X X X

Bacilo grampositivo X X X X

Cocacea gramnegativo X X X X X

Bacilo gramnegativo X X X X X

ASC: Agar Sangre de Carnero; AS: Agar Chocolate; CNA: Agar Columbia Cistin-ácido nalidixicoBRUC: Agar Vrucela

• Desinfectar con yodo 3% una zona de aproximadamente 2 cm de diámetro sobre la piel de la vena escogida.

• Eliminar con alcohol al 70% el exceso de yodo.

• Realizar punción extrayendo 3mL de sangre y depositarlos inmediatamente el frasco del medio de cultivo.

• Agitar lentamente el frasco por unos segundos e incubar a 37°C por 30 min en posición horizontal , para hacer contacto con la fase solida

• Enderezar el frasco e incubar a 37°C y observar cada 24 hrs, si hay crecimiento en fase solida turbidez en la liquida por una semana. Continuar la observación semanalmente

• 7. Si hay cambios en el medio, realizar frotis y teñir con la técnica de Gram y hacer resiembras para aislamientos de m.o en A.S, EMB Y Staph 110 e incubar a 37°C por 24 hrs.

• Hacer pruebas especiales según la morfología colonial y microscópica.

• Antibiograma una vez identificado el m.o

PROCEDIMIENTO DE PRACTICA

Referencias:Koneman E. Diagnóstico microbiológico. 5ª edición. Editorial médica panamericana. México. 2003.

García C, Pérez C. Hemocultivos. Instituto de Salud de Chile. Pontificia Universidad Católica de

Chile: 2003 [LINK]

Macedo M, Algorta G, Vola M, Pardo L. Bactermias y sepsis. Endocarditis. Instituto de Salud.

Facultad de Medicina; Uruguay: 2006. pp 197-211 [LINK]

Sitios visitados.

BIOMERIEUX. BacT/Alert [LINK]

Becton Dickenson (BD) Bactec™ [LINK]

Material audio-visual

Introduction to Bloodcultures. Dalhousie University Faculty of Medicine. [LINK]

Lancashire Teaching Hospital. NHS. The University of Manchester [LINK01], [LINK02], [LINK03]

Blood culture. BlackBearl [LINK]

Use of the BacT/ALERT® 3D microbial detection system in the biopharmaceutical industry [LINK]

Fail mitral valve due to inefective endocarditis [LINK]

How the hearth animation video [LINK]

Mitral Valve Prolapse and Mitral Regurgitation [LINK]

Diseño Designado EK790M: http://ark461.wordpress.com

ANCIENT REPOSITORY KNOWLEDGE 461

Pérez Pérez José Manuel

Diseño Designado EK790M: http://ark461.wordpress.com