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CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN
ENSAYOS DE MIGRACIÓN ESPECÍFICA EN ENSAYOS DE MIGRACIÓN ESPECÍFICA EN SIMULANTE E PARA ALIMENTOS SECOS (TENAX®)
SECCION MONOMEROS Y ADITIVOSSERVICIO CONTAMINANTES
Juana BustosCentro Nacional de AlimentaciónAESAN
Jornadas de Referencia- Análisis de Alimentos – CNA, 6 junio 2013
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JUSTIFICACIÓN: BASE LEGALR l t (UE) Nº 10/2011 M t i l bj tReglamento (UE) Nº 10/2011 - Materiales y objetosplásticos para contacto con alimentos
REQUISITOS MATERIALES REQUISITOS MATERIALES PLASTICOSPLASTICOS
DE COMPOSICIÓN GENERALES DE LOS DE COMPOSICIÓN GENERALES DE LOS MATERIALES PLASTICOSMATERIALES PLASTICOSMATERIALES PLASTICOSMATERIALES PLASTICOS
• Lista de sustancias• Pureza / calidad técnica
• PAAs: migración N.D.(0.01mg/kg alimento)
• Límites de migraciónLímites de migración-GlobalEspecífica
• Metales pesados: límites máximos de migración
(Ba Co Cu Fe Li Mn Zn)-Específica• Otras restricciones
(Ba,Co,Cu,Fe,Li, Mn, Zn)
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JUSTIFICACIÓN: BASE LEGALRESTRICCIONES IMPUESTAS A LAS SUSTANCIAS
LIMITE MIGRACIÓN GLOBAL (LMG)
RESTRICCIONES IMPUESTAS A LAS SUSTANCIAS
LIMITE MIGRACIÓN GLOBAL (LMG)Cantidad máxima permitida de sustancias no volátiles liberadasdesde un material u objeto en simulantes alimentarios: ≤ 10mg/dm² materialmg/dm² material.(60 mg/kg simulante, materiales destinados a alimentos paralactantes /niños corta edad)
LIMITE MIGRACIÓN ESPECIFICA (LME; LME[T]):C ió á i d t i i di id l dCesión máxima de sustancias individuales o grupos desustancias, desde el material al alimento o simulantealimentario.(máximo: 60 mg/kg )
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JUSTIFICACIÓN: BASE LEGALVERIFICACIÓN ANALÍTICA DE LOS LÍMITES MIGRACIÓNVERIFICACIÓN ANALÍTICA DE LOS LÍMITES MIGRACIÓN:
ENSAYO DE MIGRACIÓNENSAYO DE MIGRACIÓNSIMULACION EN EL LABORATORIO DEL CONTACTOMATERIAL-ALIMENTO, EN LAS PEORES CONDICIONESMATERIAL ALIMENTO, EN LAS PEORES CONDICIONESPREVISIBLES DE USO REAL (T, t)
SE REALIZA ENSE REALIZA EN:
ALIMENTOS (ME)materiales en contactomateriales aún no en contacto
SIMULANTES DE ALIMENTOS (MG, ME) - materiales aún no en contacto
materiales aún no en contacto
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JUSTIFICACIÓN: BASE LEGALSIMULANTES DE ALIMENTO
M di d i l d t l
SIMULANTES DE ALIMENTO:
Medios de ensayo convencionales para demostrar laconformidad de los materiales / objetos plásticos queaún no están en contacto con los alimentosaún no están en contacto con los alimentos.
Representan categorías de alimentosTENAX ®
p g
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Control oficial: A partir 1 enero 2013Simulantes de alimentos : Regl. 10/2011 (Anexo III)
A Etanol 10% (v/v) Alimentos acuosos
B 3% (p/v) ac acético Alimentos ácidos-pH<4.5
C Et l l 20 % ( / )Alimentos alcohólicos ≤20%
li iC: Etanol al 20 % (v/v) y alimentos con ciertocarácter lipofílicoAlimentos alcohólicos >20%
D1 Etanol al 50 % (v/v) y emulsiones grasa en agua-productos lácteos
D2 Aceite vegetal Alimentos con grasa libreD2 Aceite vegetal(especificación en distribución AG)
Alimentos con grasa libresuperficial
E:E: MPPOMPPO Alimentos secos (solo ME)E: E: MPPOMPPO Alimentos secos (solo ME)
A,B,C alimentos hidrofílicos D1, D2 alimentos lipofílicosJornadas de Referencia- Análisis de Alimentos – CNA, 6 junio 2013
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SIMULANTE E
REGLAMENTO (UE) Nº 10/2011:
Introduce el MPPO como simulanteconvencional para alimentos secos sóloconvencional para alimentos secos sólo migración específica
Introduce límites de migración de sustancias en alimentos secosalimentos secos
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SIMULANTE EREGLAMENTO (UE) Nº 10/2011 ANEXO IIIREGLAMENTO (UE) Nº 10/2011, ANEXO III
TENAX ®TENAX ®TENAX ®
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SIMULANTE Eli(ó id d 2 6 dif il f il )poli(óxido de 2,6-difenil-p-fenileno)
(MPPO) – TENAX ®POLIMERO DE ALTA POROSIDAD
ELEVADA SUPERFICIE ESPECÍFICA: gran capacidad de TENAX ®
TENAX ®g
adsorción (volátiles)
ESPECIFICACIONES simulante:ESPECIFICACIONES simulante:− tamaño de partícula: 60-80
malla− poro 200 nm
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SIMULANTE E
INCONVENIENTES:
− Elevado precio.−Requiere limpieza antes del usoRequiere limpieza antes del uso.−Dificultad en la manipulación.
VENTAJAS:
−Reutilizable (tras lavado)
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PROCEDIMIENTO DE ENSAYO
PREPARACIÓN DEL SIMULANTE
ENSAYO DE MIGRACIÓN (exposición ( pmaterial/simulante)
EXTRACCIÓN DEL SIMULANTE
DETERMINACIÓN INSTRUMENTAL DE ANALITOS
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PREPARACIÓN DEL SIMULANTELIMPIEZA: eliminación de sustancias
10 g del simulante en cartuchos para Soxhlet.
LIMPIEZA: eliminación de sustancias adsorbidas
0 g de s u a te e ca tuc os pa a So etReflujo continuo con acetona 6 horas (300 ml, mínimo 250 ml por 20 g simulante).
Pasar el simulante a placas de vidrio (ej. 150x25 mm), extendiéndolo. Tapar y dejar 24h, agitar suavemente de vez en cuandoagitar suavemente de vez en cuando. Introducir las placas tapadas en estufa a 160 ºC, 6 horas.Almacenar en desecador hasta su usoAlmacenar en desecador hasta su uso.
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ENSAYO DE MIGRACIÓN MUESTRAS TIPO FILM:MUESTRAS TIPO FILM:OPTATIVO PREVIO AL ENSAYO:Identificación del material (PP, PE,( , ,PVC, etc) por espectroscopía IR.
Placas de ensayo: Petri devidrio (60x20 mm) y aro devidrio interior (di 4 cm).( )Lavadas con disolventeadecuado.
Cortar la muestra (3 replicados),diámetro aprox. igual al exteriordel aro de vidrio. Manipulacióncon guantes de algodón!.
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ENSAYO DE MIGRACIÓN I t d i l t t d lIntroducir la muestra cortada en laplaca y colocar encima el aro devidrio.
Eliminar la electricidad estáticadel vidrio y pesar 1 g de simulantesobre la muestra de plástico.
Blanco de ensayo: 1 g simulanteBlanco de ensayo: 1 g simulante,sin muestra (film).
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ENSAYO DE MIGRACIÓNEnvolver las Estufa / climatizador: tiempo y
temperatura de ensayo en función del uso real (Reg. (UE) 10/2011).
Envolver las placas en papel
de aluminio ( g ( ) )Ej.: 10 días, 60ºC : cubre período de
contacto > 6 meses a Tª ambiente o <, incluido calentamiento hasta 70ºC, 2h ó
hasta 100ºC 15 minutoshasta 100ºC, 15 minutos
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EXTRACCIÓN DEL SIMULANTE
Finalizada la fase de exposición,trasvasar el simulante desde laplaca a un vial (40 mL) conplaca a un vial (40 mL), conayuda de un embudo.Añadir 20 mL del disolvente de
t ió l d l b dextracción, lavando el embudo.
Agitador orbital, 1 min, 700 rpm.Decantar el sobrenadante enDecantar el sobrenadante enotro vial.
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EXTRACCIÓN DEL SIMULANTE
Repetir extracción y combinar sobrenadantes.sobrenadantes.
GC/ MS
Concentrar el extracto si esnecesario (bajo nitrógeno).
GC/ MSHPLC/ UV- FLLC/MSetcFiltrar una alícuota (PTFE, 0.45
µm) en viales para el análisisinstrumental de las sustancias.
etc.
st u e ta de as susta c as
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DETERMINACIÓN INSTRUMENTALEJEMPLO 1) ANÁLISIS POR GC/MS
Analitos: BHT (cas 128-37-0) antioxidante
EJEMPLO 1) ANÁLISIS POR GC/MS
BHT (cas 128-37-0) antioxidanteBP (cas 119-61-9) filtro UVDIBP (cas 84-69-5) DEHA (cas 103-23-1)DEHA (cas 103 23 1) DINCH (cas166412-78-8) plastificantes
Extracción del Tenax® :Extracción del Tenax® :Disolvente de extracción: hexanoCurvas calibrado en matriz (simulante): patrones añadidos antes de extracciónpatrones añadidos antes de extracción
Técnica: Cromatografía de gases- Espectrometría de masas (GC-MS)C o atog a a de gases spect o et a de asas (GC S)Uso de benzyl butyl phthalate (BBP) como patrón interno
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DETERMINACIÓN INSTRUMENTALCondiciones GC- MS
C l HP 5MS 5% h lAnalito
Target Ion
QualifierIon
BHT 205 1 220 2
Columna: HP-5MS 5% phenylmethyl siloxane. 30m x 250 µm, 0.25 µm
BHT 205.1 220.2
BP 104.9 182.0
DEHA 129 0 147 0
Horno: 70°C (1 min); 20°C/min → 250 ºC;10°C/min → 320°C(6 min) DEHA 129.0 147.0
DIBP 148.9 223.0
DINCH 155 0 127 0
( )Temperatura Inyector: 280ºCModo Inyección: splitlessVolumen Inyección: 1 µl DINCH 155.0 127.0
BBP 91.0 149.0
Volumen Inyección: 1 µlFlujo: 1.3 ml/minAdquisición: SIM
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DETERMINACIÓN INSTRUMENTALÓ ÁSEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA
6x10ntens.
BBP
1.0
1.2
0.6
0.8
0.4
BHTDEHA
DINCH
6 8 10 12 14 16 Time [min]0.0
0.2
BPDiBP
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matriz: simulante E
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DETERMINACIÓN INSTRUMENTALEJEMPLO 2) ANÁLISIS POR HPLC/UV
Analitos: BP (cas 119-61-9) filtro UV
EJEMPLO 2) ANÁLISIS POR HPLC/UV
DPBD* (cas 886-65-7)UVITEX ob
( 7128 64 5)
blanqueantesópticos
(cas 7128-64-5) p
* No incluido en la lista positiva
Curvas de calibrado en el simulante.Extracción del Tenax® :Disolvente de extracción: acetonitrilo
Técnica: Cromatografía de líquidos con detector ultravioleta (HPLC-UV)
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DETERMINACIÓN INSTRUMENTALCondiciones HPLC- UVCondiciones HPLC- UV
Tiempo (min)
% FM A % FM B
Gradiente
Columna: LUNA C18(2), 50 x 3 mm, 2.5 µm, 30 ºC Fase móvil:
0 35 6510 5 9515 5 95Fase móvil:
A: aguaB: ACN/0.1%AcOH
Analito λ (nm)
16 35 65
Flujo fase móvil: 0.6 ml/min
Volumen Inyección: 5 µl
Analito λ (nm)
BP 280
Volumen Inyección: 5 µl
Tiempo de análisis: 20 min
DPBD 230
UVITEX OB 230
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DETERMINACIÓN INSTRUMENTALÓ Á
BP
SEPARACIÓN CROMATOGRÁFICA
Jornadas de Referencia- Análisis de Alimentos – CNA, 6 junio 2013matriz: simulante E
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VALIDACIÓNBASADA EN RESULTADOS DE:
MIGRACIÓN film polietileno en el E. Intercomparación (EURL):
precisiónexactitud y precisión
Determinación en el SIMULANTE: - 5 ANALITOS BHT
BP
simulante (10 días, 60ºC) y determinación en el SIMULANTE:
- 3 ANALITOS BPDiBPDEHA DINCH
DPBDUVITEX ob
- 3 SERIES- 3 NIVELES concentración- 4 REPLICADOS por nivel- extracción con hexano
- 5 REPLICADOS por serie- extracción con ACN
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extracción con hexanoTécnica : GC/MS (ejemplo 1) Técnica :HPLC/UV (ejemplo 2)
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VALIDACIÓNENSAYO INTERCOMPARACION validación método (EURL)
E t ió SIMULANTE Emg/kg Resultado - Extracción: SIMULANTE E (Tenax®)5 ANALITOS,
ANALITO mg/kgasignado
Resultadomedio CV % repet. z-score
BHT
1.63
n=4
1.74 5,8 0.0923.47 3.4175 6.1 -0.235
3 NIVELES CONCENTR.
- GC/MS
0.205 0.29 2.8 0.708
BP
0.4867
n=4
0.475 5.3 -0.1360.9583 1.06875 1.4 0.8290.2521 0.24 7.6 0.708
DiBP
1.6463
n=4
1.35 7.9 -0.7780.9769 1.075 8.4 0.2120.7928 0.5925 13.8 -0.723
17.4297 17.295 1.5 -0.054DEHA n=4
0.05433.4127 32.8325 2.6 -0.1872.8681 3.0575 10.3 0.229
DINCH
45.3443
n=4
39.5425 5.2 -0.73990.4588 73.3 13.4 -1 258
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1.2588.976 10.755 2.6 0.692
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VALIDACIÓNMIGRACION BP DPBD UVITEX ob desde FILM PE al SIMULANTE /MIGRACION BP, DPBD, UVITEX ob desde FILM PE al SIMULANTE /
EXTRACCION SIMULANTE Y ANALISIS POR HPLC/UV
Resultados migración (10 días 60ºC) / HPLC-UVResultados migración (10 días, 60 C) / HPLC-UV
ANALITO
resultado medio migración
mg/kg simulante (S/V = 6)
CV % repet. CV % Reprod.
0.948 6.3 7.2DPBD 3 SERIESd
BP 2.710 4,5 16,7
0.170 16.1 29.7Uvitex ob
de n= 5 replicados
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