Cromatografía líquida

Clasificación

Cromatografía líquida convencionalAdsorciónRepartoCambio iónicoExclusiónAfinidad

HPLC (CLAR)

Cromatografía líquida planaCapa finaPapel

Cromatografía líquida convencional

eluyente

capa protectora(arena, papel de filtro)

relleno

disco de vidrio sinterizado

vacío

a) b)

.

Cromatografía líquidaADSORCION (CLS)

Adsorbentes: gel de sílice (SiO2.xH2O)(activación)

alúmina (Al2O3.xH2O)

Disolventes: serie eluotrópica (ordenación según la capacidad relativapara desplazar solutos de un adsorbente dado. Ej (gel de sílice)agua>metanol>acetona>ac. etilo>cloroformo>benceno>tolueno> etc

REPARTO (CLL)Normal: fase estacionaria polar; Inversa: fase estacionaria no polar

Soportes sólidos: gel de sílice, tierra de diatomeas, celulosa,almidón, microbolas de vidrio

Fase estacionaria: agua (para muchos compuestos orgánicos)

Eluyentes: cloroformo, Cl4C, hidrocarburos, etc.

Cromatografía de cambio iónico

R-H+ + M+ <--> R-M+ + H+ Kd = [M+]R [H+] / [M+] [H+]R

Resinas de cambio iónico

Resinas ácidas y básicas

Exclusión molecular

Exclusión molecular

Exclusión molecular

Separación de proteínas

Geles

.

CH2=CH–CONH2 (CH2=CH–C–NH–)2CH2

O=

Acrilamida NN'-metilenbisacrilamida

CONH2

CONHCH2

CONH2

CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–

CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH

CONH

CONH

CONH

CH2CONH

CONH2

CONH2

CONH

CH2

CONH

–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CONH2

CONHCONH

– –

–

Cromatografía de afinidad

C de A: fundamento

Equipo HPCL

Cromatógrafo HPLC

Bomba recíproca

Bomba recíproca

Bomba de desplazamientoVálvula

de entradaVálvulade salida

ColumnaEluyente

Cámara conteniendeluyente

Detector de índice de refracción

Detector electroquímico

Detector de fluorescencia

Derivatización

Columna

Bomba

Reactivo

Bucle

Baño de agua

Detector

.

.

Cromatografía plana

Cromatografía en capa fina

Cromatografía en capa fina

Cromatografía en capa fina

Cromatografía en capa fina

Cromatografía en papel

Cromatografía en papel

Cromatografía de fluidos supercríticos

10

20

30

40

50

60

70

80

–80 –60 –40 –20 0 20 40

Sólido

Líquido

Gas

Punto triple (–56.4 ºC, 5.11 atms.)

Punto crítico(31.3ºC, 72.9 atms.)

Zonasupercrítica

P, atms.

t, ºC