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CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN Servicio de Microbiología Alimentaria
JORNADAS DE REFERENCIA
ANÁLISIS DE ALIMENTOS
5-7 junio 2013
CONTROL MICROBIOLÓGICO DE
ALIMENTOS. ACTIVIDADES DE
REFERENCIA.
Mª Carmen Blanco Vidal Jefe del Servicio de Microbiología Alimentaria
Mª Jesús Zamora Escribano Facultativo Especialista
David Pérez Boto Carmen Zigorraga
Laboratorio de Salud Pública de Gipuzkoa
Juan Olmedo Mendicouague Jefe de Sección de Parasitología y Técnicas Especiales
Inmaculada García Laboratorio Normativo de Salud Pública del Gobierno Vasco
Actividades de referencia en el control microbiológico de alimentos. PONENTE: Mª Carmen Blanco Vidal
Nuevas tendencias en las normas ISO relacionadas con el control microbiológico de alimentos. PONENTE: Mª Jesús Zamora Escribano
Tipificación molecular de gérmenes patógenos mediante la técnica de electroforesis en campo pulsado (PFGE). PONENTE: David Pérez Boto
Ejercicios de intercomparación. PONENTE: Carmen Zigorraga
Actividades de referencia para parásitos de origen alimentario. PONENTE: Juan Olmedo Mendicouague
Programa de seguridad microbiológica de la C. A. del País Vasco. PONENTE: Inmaculada García
PROGRAMA 2013
SERVICIO DE MICROBIOLOGIA ALIMENTARIA
Actividades de referencia en el control microbiológico de alimentos
Ponente: Mª del Carmen Blanco Vidal
PARTICIPACIÓN EN EJERCICIOS DE INTERCOMPARACIÓN 2012-2013 ORGANIZADOS
POR LR-UE
1. LR-UE Campylobacter
2. LR-UE Salmonella
3. LR-UE E.coli (VTEC)
5. LR-UE contaminantes bacteriológicos
de moluscos bivalvos
6. LR-UE Listeria monocytogenes
7. LR-UE Enterotoxinas estafilocócicas
4. LR-UE Parásitos
ORGANIZACIÓN DE EJERCICIOS DE INTERCOMPARACIÓN POR EL CNA EN
2012
Ejercicios de Intercomparación: 8 Nº TOTAL DE LABORATORIOS
PARTICIPANTES
E. coli y Salmonella en moluscos 30
Investigación de Salmonella spp. 43
Investigación de Listeria monocytogenes 40
Recuento de Listeria monocytogenes 40
Recuento de Estafilococos coagulasa positivo 41
Recuento de gérmenes aerobios 41
Investigación de Trichinella spp. 27
Investigación de Enterotoxinas estafilocócicas 15
Organización de Ejercicios de Intercomparación de recuento (NMP) de E.
coli en moluscos
LNR Contaminantes bacteriológicos de moluscos bivalvos. I
Nº laboratorios participantes
MUESTRA A
MUESTRA B
2006 ( Donovan)
24 75% 79%
2007 (Donovan)
27 63% 89%
2009 (ISO 16649-3)
25 80% 81%
2010 (ISO 16649-3)
24 83.3% 75%
2011 (ISO 16649-3)
28 71.4% 71.4%
2012 (ISO 16649-3) 25 92% 100%
ACREDITACIÓN DE LOS LABORATORIOS PARTICIPANTES
TOTAL (25 laboratorios)
Acreditados por ISO/TS 16649-3:2005 5 laboratorios (4 laboratorios en 2011)
Acreditados por Procedimiento Interno
8 laboratorios
No Acreditados 12 laboratorios (16 laboratorios en 2011)
LNR Contaminantes bacteriológicos de moluscos bivalvos. II
1 laboratorio acreditado
3 laboratorios no participan
Organización de Ejercicio de Intercomparación de recuento (NMP) de E. coli
en moluscos 2012 (ISO 16649-3)
Organización de Ejercicios de Intercomparación de Salmonella en moluscos (
NORMA ISO 6579)
Nº laboratorios participantes
% resultados satisfactorios
2006 24 100 %
2007 27 100 %
2009 30 97%
2010 24 96%
2011 31 100 %
2012 26 100%
LNR Contaminantes bacteriológicos de moluscos bivalvos. III
Organización por el CNA - VII Ejercicio de Intercomparación
Año Nº
laboratorios participantes
Tipo de alimento
% resultados satisfactorios
2006 47 P. Cárnicos 98%
2007 53 Leche 96 %
2008 53 P. Cárnicos 100 %
2009 49 Leche 100%
2010 39 P. lácteos 97,4%
2011 46 P. lácteos 100%
2012 43 P. lácteos 100%
LNR Salmonella spp
Métodos utilizados por los 43 Laboratorios participantes en el Ejercicio
de Intercomparación Salmonella spp. 2012
LNR Salmonella spp
NORMA ISO 6579 33
P.I. BASADO EN NORMA ISO 6579 2
ISO + PCR BAX 2
ISO + VIDAS 2
MÉTODO VIDAS 2
NO INFORMAN 2
TOTAL 43
CNA. Organización de Ejercicios Intercomparación
2006 2007 2009 2010 2011 2012
Tipo de muestra
Productos
lácteos
Productos lácteos (GSC)
Productos Lácteos (GSC)
Productos Lácteos
Productos Lácteos
Productos
Lácteos
Nº laboratorios participantes
42 51 48 34 43 40
Muestras Resultados
2006 Resultados
2007 Resultados
2009 Resultados
2010 Resultados
2011 Resultados
2012
A 95 %
satisfactorios 100%
satisfactorios 97,9 %
satisfactorios 91,2%
satisfactorios
97,8 %
satisfactorios
100% satisfactorios
B 100 %
satisfactorios 100 %
satisfactorios 100 %
satisfactorios
VI E.I. Detección de Listeria monocytogenes
ESTADO DE ACREDITACIÓN DE LOS LABORATORIOS
PARTICIPANTES E.I. 2012 Listeria monocytogenes
LNR Listeria monocytogenes
Detección de Listeria monocytogenes (40 Participantes)
IMPLANTADO ACREDITADO
NORMA UNE-EN-ISO 11290-1 5 5
PROCEDIMIENTO INTERNO BASADO EN NORMA UNE-EN-ISO 11290-1 6 18
OTROS MÉTODOS (VIDAS, ALOA ONE DAY) 2 4
TOTAL 13 27
CNA. ORGANIZACIÓN DE EJERCICIOS DE INTERCOMPARACIÓN
2010 2011 2012
Número de Laboratorios participantes
26 44 40
Resultados Satisfactorios 24 (92,3 %) 39 (88,6%) 31 (77,5%)
Resultados Cuestionables 1 (3,8 %) 2 ( 4,5%) 3 (7,5%)
Resultados No Satisfactorios 1 (3,8 %) 3 (6,8%) 6 (15%)
E.I. Recuento de Listeria monocytogenes
ESTADO DE ACREDITACIÓN DE LOS LABORATORIOS
PARTICIPANTES E.I. 2012 Listeria monocytogenes
LNR Listeria monocytogenes
Recuento de Listeria monocytogenes (40 Participantes)
IMPLANTADO ACREDITADO
NORMA UNE-EN-ISO 11290-2 8 4
PROCEDIMIENTO INTERNO BASADO EN NORMA UNE-EN-ISO 11290-2 7 16
OTROS MÉTODOS (ALOA COUNT, Rapid L.
mono) 1 4
TOTAL 16 24
LNR ESTAFILOCOCOS COAGULASA POSITIVO
CNA. ORGANIZACIÓN EJERCICIO INTERCOMPARACIÓN Recuento Estafilococos coagulasa positivo
(Norma ISO 6888)
2010 2011 2012
Número de Laboratorios participantes.
38 43 41
Resultados Satisfactorios 31 (81,6 %) 42 ( 97,7%) 41 (100%)
Resultados No satisfactorios
7 (18,4 %) 1 (2,3%) 0 (0%)
ESTADO DE ACREDITACIÓN DE LOS LABORATORIOS DE
CONTROL OFICIAL. CUESTIONARIO 2013
Recuento de Estafilococos coagualasa positivo
IMPLANTADO ACREDITADO
NORMA UNE-EN-ISO 6888 10 15
PRODECIMIENTO INTERNO BASADO EN NORMA UNE-EN-ISO 6888 9 12
TEMPO 0 1
AFNOR V 08 057 0 2
Otros métodos 3 0
TOTAL 22 30
LNR ESTAFILOCOCOS COAGULASA POSITIVO
ACREDITACIÓN DE LOS LABORATORIOS PARA DETECCIÓN DE ENTEROTOXINAS ESTAFILOCÓCICAS
LNR ENTEROTOXINAS ESTAFILOCÓCICAS
MÉTODOS Nº
LABORATORIOS ACREDITADOS
Nº LABORATORIOS
NO ACREDITADOS
Método del LR-UE v5 VIDAS 5 2
RIDASCREEN 1 1
Protocolo VIDAS BioMrieux 1 5
7 8
Recuento de aerobios mesófilos
CNA. ORGANIZACIÓN EJERCICIO INTERCOMPARACIÓN Recuento de aerobios mesófilos totales a 30ºC
(método, Norma ISO 4833)
2010 2011 2012
Número de Laboratorios 37 44 41
Resultados Satisfactorios 36 (97,3 %) 43 ( 97,7%) 38 (92,7%)
Resultados No satisfactorios
1 (2,7 %) 1 (2,3%) 1 (2,3%)
2012 Misión DG SANCO 2012/6431: Producción y comercialización de carne de ave de corral y derivados. 5 marzo 2012
Misión DG SANCO 2012/6335: Evaluar los controles oficiales en preparados para lactantes,
preparados de continuación y alimentos infantiles, incluida la cadena de suministro. 16 abril
2012.
Misión DG SANCO 2012/6368: Control sobre criterios de seguridad alimentaria y de Higiene de
los Procesos (Reglamento 2073/2005). 26 noviembre - 7 diciembre 2012.
2013 Misión DG SANCO 2013/6672: Control sobre Productos de la Pesca y Agua de Bebida. 21 mayo -
31 mayo 2013.
FVO Misión DG (SANCO) 2013/6837. Perfil País. 30 de mayo 2013.
VISITAS INSPECCION: FVO- DG SANCO
ORGANIZACIÓN DE EJERCICIOS DE INTERCOMPARACIÓN PREVISTOS PARA
EL 2013
EJERCICIOS DE INTERCOMPARACIÓN Nº TOTAL DE LABORATORIOS
SOLICITANTES
E. Coli y Salmonella en moluscos 32
Investigación de Salmonella spp. 50
Investigación de Listeria monocytogenes 42
Recuento de Listeria monocytogenes. 41
Recuento de gérmenes aerobios 39
Recuento de Estafilococos coagulasa positivo 49
Investigación de Trichinella spp. 29
Investigación de Enterotoxinas estafilocócicas 16
LABORATORIOS DE CONTROL OFICIAL. Reg (CE). 882/2004
Métodos analíticos de referencia. Anexo I- Reg (CE). 2073/2005
Laboratorios acreditados conforme a la Norma ISO 17025
Participación en ejercicios de intercomparación
LNR: Seguimiento adecuado de los participantes en los ejercicios de intercomparación
MODIFICACIONES DEL REGLAMENTO 2073
•Fresas congeladas: Origen China. Norovirus y Hepatitis A •Hojas de cilantro, albahaca, menta: Origen Tailandia. Salmonella
Reglamento de ejecución (UE) nº 1235/2012 de la Comisión de 19 de diciembre de 2012 . Intensificación de los controles oficiales de las importaciones de piensos de origen animal
• E. coli STEC: ISO/TS 13136:2012
• Salmonella
Reglamento (UE) nº 209/2013 de la Comisión de 11 de marzo de 2013. Criterios microbiológicos para los brotes y las normas de muestreo para los canales de aves de corral y la carne fresca de aves de corral
NUEVAS NORMAS ISO PARA PATÓGENOS EN ALIMENTOS
Vibrio
• ISO/TS 21872-1:2007. Microbiology of food and animal feeding stuffs-Horizontal method for the detection of potentially enteropathogenic Vibrio spp. Part 1. Detection of Vibrio parahaemolyticus and Vibrio cholera.
ISO/TS 21872-2:2007. Microbiology of food and animal feeding stuffs-Horizontal method for the detection of potentially enteropathogenic Vibrio spp. Part 2. Detection of species other than Vibrio parahaemolyticus and Vibrio cholera.
E. coli VTEC / STEC
• ISO/TS 13136:2012. Microbiology of food and animal feed. Real time polimerasa chain reaction (PCR) based method for the detection of food-borne pathogen. Horizontal method for the detection of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) and the detection of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) and the determination of O157, O111, O103 and O145 serogroups.
Virus
• ISO/TS 15216-1:2013. Microbiology of food and animal feed. Horizontal method for determination of hepatitis A virus and norovirus in food using real-time RT-PCR. Part 1: Method for quantification.
• ISO/TS 15216-2:2013. Microbiology of food and animal feed. Horizontal method for determination of hepatitis A virus and norovirus in food using real-time RT-PCR. Part 2: Method for qualitative detection.
SERVICIO DE MICROBIOLOGIA ALIMENTARIA
Nuevas tendencias en las normas ISO relacionadas
con el control microbiológico de alimentos
PONENTE: María Jesús Zamora Escribano
NOMENCLATURA
• 3 subtipos
• Stx1a, Stx1c, Stx1d Stx1
• 7 subtipos
• Stx2a, Stx2b, Stx2c, Stx2d, Stx2e, Stx2f, Stx2g
Stx2
Se establecen dos tipos de Shiga-toxinas Stx o Verotoxinas VTX
Ejercicios intercomparación LRUE
Número
Ejercicio Año Muestra Objetivo Resultado
1º 2007 Cepas Estudio genes virulencia Satisfactorio
2º 2008 Cepas Estudio genes virulencia Satisfactorio
3º 2009 Esponjas muestras de
superficie
Estudio genes virulencia y
principales serogrupos Satisfactorio
4º 2010 Leche Estudio genes virulencia y
principales serogrupos Satisfactorio
5º 2010 Cepas Estudio genes virulencia y
principales serogrupos Satisfactorio
6º 2011 Cepas SUBTIPADO Satisfactorio
7º 2011 Espinacas frescas Estudio genes virulencia y
principales serogrupos Satisfactorio
8º 2012 Agua Estudio genes virulencia y
principales serogrupos Satisfactorio
9º 2012 Semillas Estudio genes virulencia y
principales serogrupos Satisfactorio
Modificaciones relativas STEC/VTEC
Publicación en Nov. de 2012 de la Norma ISO/TS 13136 : 2012
Microbiology of food and animal feed Real-time polymerase chain reaction (PCR)-based method for the detection of food-borne pathogens.
Horizontal method for the detection of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) and the determination of O157, O111, O26, O103 and O145 serogroups.
Modificación del Reglamento (EC) Nº 2073/2005 marzo de 2013 -1 de julio de 2013
Matriz Brotes semillas. Productos durante su vida útil
Ausencia en 25 gramos
E. coli (STEC/VTEC) productor de Shiga toxinas O157, O26, O111, O103, O145 y O104:H4
CEN/ISO TS 13136 y procedimiento del Laboratorio de Referencia de la Unión
Europea para Escherichia coli Verotoxigenica (VTEC), para detectar el serotipo O104:H4. )
Norma ISO 13136
Es una norma que se aplica para la detección de E.coli STEC/VTEC : Productos destinados a consumo humano y la alimentación de animales Muestras ambientales en el área de manipulación y producción alimentaria
Muestras ambientales en el área de producción primaria.
Norma ISO 13136
OBJETIVO : La detección de los genes de virulencia que codifican las Stx asociados a E.coli STEC/VTEC : stx1 y stx2. La detección se realiza mediante Tiempo Real. La detección de los genes asociados a los principales serogrupos asociados a E.coli STEC/VTEC :O157, O111, O26, O103 y O145 y el gen que codifica la intimina, eae. La detección se realiza mediante Tiempo Real. Confirmación del resultado de las colonias aisladas de aquellas muestras con resultado stx positivo y/o alguno o algunos de los otros genes descritos en el método.
1. Enriquecimiento de la muestra
2. Extracción del ácido nucleico
3. Detección de los genes de virulencia
4. Detección de los genes del serogrupo (5)
5. Aislamiento de E.coli VTEC/STEC de las
muestras con resultado stx positivo
FASES DEL MÉTODO
1. Fase de enriquecimiento
Para muestras con elevada cantidad de flora
acompañantente TSB + Acriflavina/Novobiocina
Para muestras con bacterias estresadas APT
Se incuban las muestras entre 18-24 h/37
C
1
C
FASES DEL MÉTODO
FASES DEL MÉTODO
2. Fase de Extracción del ADN
Del sobrenadante del cultivo centrifugado se realiza la
extracción el ADN de las muestras y de los controles. La
extracción se realiza empleando un Kit comercial.
Los controles empleados son los obtenidos de cepas
positivas para cada uno de los genes analizados, una
cepa negativa y un control interno de amplificación.
3 y 4. Detección de los genes mediante tiempo real
Amplificación empleando primers y
sondas específicas para detectar el
ADN presente en la muestra
Interpretación de los resultados
FASES DEL MÉTODO
ESQUEMA DE PROCEDIMIENTO de SCREENING
Muestra g / ml
9 x ml TSB + N/A
APT
Enriquecimiento 18 h-24h a 37 °C ± 1 °C
Porción del cultivo (1ml), purificación de DNA y PCR tiempo real de los genes stx y eae
Aislamiento de las colonias
Pos para stx
Neg stx Pos para stx y eae. Estudio serogrupo
CONFIRMACIÓN
ESQUEMA PROCEDIMIENTO DE CONFIRMACIÓN
Aislar las colonias en medio sólido desde el medio de enriquecimiento
Seleccionar 50 colonias típicas de E.coli y hacer pooles de 10 colonias
PCR Tiempo Real para detectar stx y eae
Seleccionar colonias positivas y analizar cada una por PCR tiempo real de los genes stx y eae
Identificación de las colonias positivas y determinación del serogrupo (PCR o aglutinación)
RESULTADO FINAL LRUE
Interpretacion de los resultados
• Muestras negativas no se ha detectado la presencia de los genes stx en la muestra analizada.
• Muestras sospechosas o presuntamente positivas aquellas muestras en la que no se han aislado las colonias pero se ha detectado:
La presencia de los genes stx
La presencia de los genes stx y eae
La presencia de los genes stx , eae y uno de los 5 serogrupos estudiados.
• Muestras positivas aquellas muestras que resultan positivas para stx en el screening de PCR y se han aislado las colonias. Pueden ser:
Positivas para los genes stx
Positivas para los genes stx y eae
Positivas para los genes stx, eae y uno de los 5 serogrupos estudiados.
RESULTADOS
Gen Limite detección
Nºcopias/reacción Sensibilidad %
stx1 5 94,7
stx2 5 94
rfbE / O157 1 94,2
wbdI / O111 5 94
Wzx / O26 5 97,7
Ihp / O145 5 99,6
SENSIBILIDAD Y LÍMITE DE DETECCIÓN
SERVICIO DE MICROBIOLOGIA ALIMENTARIA
Tipificación molecular de gérmenes patógenos
mediante la técnica de electroforesis en campo
pulsado (PFGE)
PONENTE: David Pérez Boto
Tipificación de microorganismos
Métodos de tipificación disponibles •Fenotípicos: Basados en características expresadas por las bacterias: serología, fagotipificación, biotipificación,…
•Genotípicos: Basados en características del material genético (secuencia)
Definición: Caracterización de la variación intraespecie. Permite la diferenciación
de aislamientos dentro de una misma especie.
Van Belkum 2007 Clin. Microbiol. Infect
Tipificación de microorganismos
Características de los métodos de tipificación 1. Tipabilidad: Proporción de cepas que pueden ser asignadas a un tipo por un
método determinado 2. Poder de discriminación: Capacidad de discriminar entre cepas no relacionadas 3. Reproductibilidad: Proporción de cepas tipificadas de la misma forma tras
ensayos repetidos 4. Concordancia epidemiológica: Congruencia con los datos epidemiológicos
existentes 5. Automatización: Reducción de errores en los métodos
Idéntico material
genético
Variaciones: •Mutaciones
•Inserciones
•Deleciones
•Recombinaciones
Métodos genotípicos disponibles:
•Basados en tamaños de fragmentos de
ADN (tipo fingerprint):
PCR-RFLP, RAPD, AFLP, PFGE,..
•Basados en la secuencia del ADN:
MLST, MLVA, secuencia genes
individuales (porA, flaA, etc..)
Cepa parental
División binaria
Métodos genotípicos
Comparación de dos cepas
PFGE: Pulse Field Gel Electrophoresis. 1983 Schwartz y Cantor
ADN: Carga negativa
Electroforesis convencional: No
podemos resolver entre
fragmentos de más de ~50 Kb
PFGE: La dirección del campo eléctrico aplicado
en la electroforesis no es unidireccional, sino
que experimenta variaciones en su orientación
en periodos de tiempo (pulsos) que aumentan
progresivamente con el tiempo
ADN
http://www.bio.davidson.edu/Courses/genomics/method/PFGE_animated.gif
Genoma intacto (sin cortes)
•Lisis bacteriana
•Lavados
Suspensión bacteria Matriz de
agarosa
Enzima de restricción:
Cortes en el ADN (sitios
poco frecuentes)
Cultivo puro
Tinción ADN.
Captura de
imagen y
análisis
Separación de
fragmentos
Electroforesis
16-30 horas
Esquema general del método de PFGE
Pulsotipos
Lisozima
Proteinasa K
Generación de fragmentos de ADN genómico
de tamaños 20-600 Kb.
10-30 bandas
Análisis de los pulsotipos que se generan en la técnica de PFGE
Aislamiento de
Listeria
monocytogenes
Ejemplo práctico de uso de PFGE
•Pruebas bioquímicas
•Serotipificación (Aglutinación o PCRm)
Serotipado: Todas 1/2a
¿Es la cepa aislada en el
enfermo, en la comida y en el
lugar de procesado del
alimento la causante?
No podemos afirmarlo hasta
tipificar genotipicamente la
cepa …
Ejemplo práctico de uso de PFGE
Tipificación por PFGE
A
B
C
A B C M
100% semejanza
Ejemplo práctico de uso de PFGE
Tipificación por PFGE
A
B
C
A B C M Cepas A y B:
alimento y sitio
de procesado:
100% semejanza
Cepa C
(enfermo): No
guarda relación
con las
anteriores. El
alimento no es
causante de la
listeriosis
Ejemplo práctico de uso de PFGE
Ventajas:
•Elevado poder de discriminación
•Reproductibilidad alta
•Elevada tipabilidad. Utilidad en brotes
•Aplicable a la mayoría de bacterias
•Screening completo del genoma
Desventajas:
•Duración del método
•Poca automatización. Múltiples pasos
•Discriminación no es absoluta
•Equipamiento/Coste
•Comparación interlaboratorios
Conclusiones
Ventajas y desventajas de la técnica de PFGE frente a otros
métodos de tipificación
SERVICIO DE MICROBIOLOGIA ALIMENTARIA
Ejercicios de intercomparación
PONENTE: Carmen Zigorraga
SERVICIO DE MICROBIOLOGIA ALIMENTARIA
Actividades de referencia para parásitos de origen alimentario
PONENTE: Juan Olmedo Mendicouague
•Envío de Material de Referencia a los Laboratorios de Control Oficial. •Confirmación y aislamiento de muestras de suidos y équidos positivas a triquina y tipificación molecular de las mismas. •Participación en los Ejercicios de Intercomparación organizados por el LCR para parásitos. •Organización del tercer Ejercicio de Intercomparación de triquina en España. •Asistencia y participación en el Workshop anual de los LNRs organizada por el LCR en Roma. •Validación de nuevo método de detección de Anisakis mediante digestión clorhidropépsica.
Actividades del LNR para zoonosis parasitarias transmitidas por
los alimentos
Jornadas de Referencia. CNA. 2013. Majadahonda. Madrid
Resultados del ejercicio de intercomparación de detección de larvas de triquina
mediante el método de referencia Reglamento CE 2075/05
• Laboratorios participantes: 27
• Muestras de carne picada de cerdo cargadas con larvas vivas.
• 5 muestras por envío: 1 sin cargar y 4 cargadas.
• Evaluación del ejercicio cualitativa.
• Resultados correctos 24 laboratorios.
• Falsos negativos: 2 laboratorios.
Brotes y casos de triquinelosis humana en España (CNE)
AÑO BROTES CASOS HUMANOS
2008 1 43
2009 4 18
2010 2 17
2011 3 33
2012 2 23
• Resultados :
• Total: 22 muestras (jabalíes)
• No detectado: 2 muestras
• T. spiralis: 11 muestras
• T. britovi: 9 muestras
Confirmación, aislamiento y tipificación de muestras de Trichinella 2010 por Multiplex PCR
Jornadas de Referencia. CNA. 2013. Majadahonda. Madrid
Foto: Gabriel Jiménez
• Temporada de caza 2006-07: 171 muestras
• Temporada de caza 2007-08: 96 muestras
• Temporada de caza 2008-09: 104 muestras
• Temporada de caza 2009-10: 157 muestras
• Temporada de caza 2010-11: 131 muestras
Publicación Ley 17/2011 de 5 de julio de seguridad alimentaria y nutrición
• Temporada de caza 2011-12: 43 muestras
• Temporada de caza 2012-13: 22 muestras
Jornadas de Referencia. CNA. 2013. Majadahonda. Madrid
Resumen muestras analizadas por LNR para el aislamiento e identificación de larvas de triquina a nivel de especie
Gracias por su atención