INTRODUCCION A LA BACTERIOLOGIA

MASS MA. DEL PILAR BADA PEREZMASS MA. TERESA MARTINEZ CAZARES

SESVER-SSA

BACTERIOLOGIA

• Es la parte de las ciencias medicas que se dedica al estudio de las bacterias, incluyendo su clasificación y la prevención de enfermedades de etiología bacteriana.

Las bacterias no solo son objeto de estudio de microbiólogos sino de químicos, bioquímicos, genetistas, patólogos inmunólogos y médicos.

BACTERIA.

• Bacteria proviene del griegobakteira “bastón” nombre que reciben los organismos unicelulares y microscópicos que carecen de núcleo diferenciado y se reproducen por división celular sencilla.

SISTEMA DE CLASIFICACION DE LOS CINCO REINOS DE WHITTAKER

• PLANTAS

• FUNGIS

• ANIMALIAS

• PROTISTAS (Microalgas y Protozoos)

• MONERAS (Bacterias y algas azul-verdosas)

BACTERIA.

• En el actual sistema de clasificación en cinco reinos según Whittaker,se basa en tres niveles de organización celular.

• Así como en los tres tipos principales de nutrición: Fotosíntesis, Absorción e Ingestión.

BACTERIA.

• Las bacterias pertenecen al Reino Moneras cuyos miembros son organismos procariotas. Que se caracterizan porque las células carecen de un núcleo con una membrana diferenciada que lo rodee, se conocen unas 1600 especies.

BACTERIA.

Dibujo mostrando las principales estructuras presentes en las bacterias

Estructuras de una célula procariótica típica:

• Membrana Celular: Barrera critica separa el interior del exterior

• Pared Celular: Estructura rígida que recubre la membrana y da soporte y protección.

• Ribosomas: Pequeñas partículas compuestas de proteínas y ácidos ribonucleicos

• Región Nuclear:Las funciones del núcleo las realiza una sola cadena de DNA

peptidoglicano

Lípidos más

lipopolisacárido

porinas

micolato

Acyl lipid

arabinogalactano

LAM

Membranas de bacterias Gram positivas, Gram negativas y micobacterias

DESINFECCION Y ESTERILIZACION

MASS MARIA DEL PILAR BADA PEREZ

Esterilización:

• Es evidente que en donde se necesitan cultivos microbianos, los medios de cultivo y los aparatos utilizados deben encontrarse bacteriológicamente limpios, para obtener un resultado real del contenido de la muestra.

Esterilización:

• Por lo que existen varios métodos de esterilización, cada uno con sus ventajas particulares.

Esterilización:

1. Calor seco

2. Llama directa

3. Horno de aire caliente

4. Calor húmedo

5. Ebullición

6. Vapor

7. Autoclave

8. Productos químicos

9. Filtración

Esterilizacion:

• CALOR SECO : es el más simple de todos.

Es frecuente el empleo de la flama directa paraesterilizar las asas de platino o nicromel ysembrar o resembrar.

Al flamear un asa se debe evitar contengagrandes cantidades de material pues alcalentar puede “saltar”contaminando conpartículas infectantes.

Calor seco:

• HORNO DE AIRE CALIENTE:

La temperatura de una hora a 160ºC durante una hora destruye todas las bacterias incluyendo las esporas. Pero no pueden esterilizarse los aparatos que tengan empaques de hule, tampoco para los líquidos ó medios de cultivo. Es propio para cristalería envuelta en papel craf para almacenarla sin contaminarla.

CALOR HUMEDO:

• EBULLICION : usualmente no es adecuada en bacteriología ni en cirugía, ya que permite la supervivencia de organismos esporulados.

• VAPOR: la exposición al vapor a 100ºC durante 90 min. Asegura generalmente la esterilización, pero se dispone de métodos más seguros.

CALOR HUMEDO:

• AUTOCLAVE: el fundamento esta en que el agua bajo presión hierve a temperaturas progresivamente mayores. La formula efectiva de tiempo presión para esterilizar es de 2.724Kg/cm2 15 libras/pulgada cuadrada durante 15 minutos, es el más adecuado para la mayoría de aparatos y medios de cultivo.

PRODUCTOS QUIMICOS:

• ALCOHOL al 70 a 95 %:

Produce desnaturalización de proteínas bacterianas, y puede emplearse como desinfectante cutáneo.

• YODO y CLORO: estos Halógenos son buenos desinfectantes por sus poderes oxidantes. Pero no deben usarse soluciones con yodo o mercurio en personas sensibles.

PRODUCTOS QUIMICOS:

• CLOROFORMO: AL 0.25 % se utiliza para preservar los medios de cultivo en general.

• FENOL y CRESOL: DE 3 A 5 % son usados para descontaminación, desnaturalizan las proteínas bacterianas.

• PERCLORURO DE MERCURIO: al 1 por 1000. rara vez se utiliza salvo como desinfectante de las manos.

PRODUCTOS QUIMICOS:

• MERTIOLATO: al 1 por 10,000 (etilmercuriosalicilato de sodio) es usado como preservador en sueros.

• GLICEROL: solución al 50% destruye las bacterias pero no los virus y por lo tanto tiene aplicación especial en la preservación de algunas vacunas y sueros aglutinadores.

PRODUCTOS QUIMICOS:

• AZIDA DE SODIO: AL 1 POR 1000 también es usado como preservador, la desventaja es que una vez añadidas continúan su acción.

PRODUCTOS QUIMICOS:

• OXIDO DE ETILENO: este gas diluido con alguna sustancia inerte como bióxido de carbono es un buen esterilizador de instrumental quirúrgico en especial el plástico que no puede esterilizarse al calor. Si su concentración pasa de 10 % al aire este gas es explosivo.

PRODUCTOS QUIMICOS:

• JABONES Y DETERGENTES:Son agentes tenso activos, con los jabones los ácidos grasos se adsorben sobre las membranas celulares y los cationes sobre el agua del medio, la membrana celular sufre una tensión considerable y se rompe. Debe notarse que carecen de importancia frente a Pseudomonas aeruginosa.

FILTRACION:

• Este método se basa en que las bacterias son de mayor tamaño, que las moléculas del liquido y que los poros del filtro, aún los virus pueden ser eliminados de esta forma, los filtros son de diversos tipos:

FILTRACION:

• FILTROS DE BERKEFELD: esta hecho de kieselgur, que es una tierra de diatomeas fosilizadas existen 3 tipos V (viel) grueso, N (normal) intermedio, y W (wening) fino. El tipo V no debe permitir el paso de Serratia marcescens. Un filtro idéntico es el Mandler.

FILTRACION:

• FILTROS DE CHAMBERLAND: de porcelana sin pulir varían desde el mas poroso hasta el más fino, son empleados para eliminar microorganismos de los medios de cultivo pueden usarse a presiones negativas y positivas dejando las toxinas bacterianas estériles

FILTRACION:

• FILTROS SEITZ: son filtros de asbesto de varios tamaños para ajustarse a las jeringas. Existen en el mercado dos tipos de porosidad , fino y extrafino.Designados como tipo suero 1, y tipo suero 3 respectivamente.

FILTRACION:

• Filtros de Membrana: estos filtros milipore son membranas porosas compuestas de esteres de celulosa puros, biológicamente inertes. Para esterilización y pruebas de esterilidad. Tipos H.A (0.45micras) y G.S. (0.22 micras ), para líquidos, se usan con jeringas o soportes especiales.

FILTRACION:

• Filtros de Colodión: son filtros sintéticos. Que pueden prepararse de diferente porosidad permiten medir el tamaño de algunos virus.

Esterilización:

• Entre otros métodos de esterilización se cuenta la luz ultravioleta de aplicación restringida. Se cree que la luz es absorbida por el DNA bacteriano y produce mutaciones letales. Se emplea para esterilizar paquetes quirúrgicos.

Esterilización:

• También son eficaces los rayos Beta y Gamma.Los Rayos X producen ionizacion, apareciendo en las células iones que dan lugar a combinaciones químicas mortales. También tienen lugar cambios genéticos.

Esterilización:

• Pueden emplearse ondas supersónicaso ultrasónicas ( 9000 ciclos por segundo en adelante) para romper y desintegrar las células, se cree que las bacterias se dañan y destruyen por la formación de pequeñas burbujas de gas en la suspensión a consecuencia se las ondas sonoras.

Requerimientos para el desarrollo bacteriano:

• A estos requerimientos se les llama Medios de Cultivo.

• Y de acuerdo a las características propias de las bacterias se les puede clasificar en Autótrofas o Heterótrofas

Medios de Cultivo:

• Las Autótrofas comprenden las bacterias del suelo y el agua, que obtienen carbono y nitrógeno de la atmósfera y de la materia inorgánica simple.

Medios de Cultivo:

• Las Heterótrofas requieren compuestos orgánicos mas complejos, como fuente de carbono y nitrógeno, así como proteínas ó sus derivados, carbohidratos y grasas. Este ultimo grupo de organismos es el mas importante en bacteriología médica.

Medios de Cultivo:

• Proteínas.

• Carbohidratos.

• Factores de crecimiento(Tiamina ,Ac. Nicotínico etc.)

• Sales minerales.

• Atmósfera

• Presión osmótica.

• Temperatura.

• Reacción (pH).

Medios de Cultivo:

• Tipos de medios (Líquidos, semisólidos o sólidos).Se pueden dividir en cuatro grandes grupos:

• Medios simples, líquidos y sólidos.

• Medios enriquecidos y de enriquecimiento.

• Medios especiales o selectivos.

• Medios diferenciales.

Medios simples, líquidos y sólidos.

• Peptona de caseína

• Caldo de soya tripticaseína

• Peptona de carne

• Agar agar

• Base de agar sangre sin sangre

• Agar soya tripticaseína

Medios enriquecidos y de enriquecimiento.

• Caldo Mueller-Hinton

• Agar Mueller-Hinton

• Base de agar sangre

• Caldo de infusión cerebro corazón

• Medio de cultivo de mudell

• Agar nutritivo alcalino

• Agar estracto de carne

Medios especiales o selectivos.

• Agar Mac Conckey

• Agar eosina azul de metileno

• Medio TCBS

• Agar campy-Bap

• Medio de Skirrow

• Agar de Baird parker

• Sulfito de Bismuto

• Agar de Salmonella Shigella

Medios diferenciales.

• Agar de Hierro y Triple azúcar (TSI)

• Agar de Hierro y Lisina (LIA)

• Medio Mio

• Caldo Urea

• Caldo Arginina

• Caldo Malonato

• Agar Citrato de Simmons