Agosto 2008

1.16141.0001

Test Sacarosa (sucrosa)

Merck KGaA, 64271 Darmstadt, R. F. A.,tel. +49(0)6151 72-2440, fax +49(0)6151 72-7780environmental.analysis@merck.de http://fea.merck.de

1. MétodoLa sacarosa es escindida en fructosa y glucosa-1-fosfato por la sacarosa-fosforilasa. La fosfogluco-mutasa transforma el glucosa-1-fosfato en glucosa-6-fosfato. Éste es oxidado por NAD a gluconato-6-fosfato bajo la acción catalítica de la glucosa-6-fos-fato-deshidrogenasa. En presencia de diaforasa laNADH aquí formada reduce una sal de tetrazolio aun formazano azul que se determina reflectométri-camente.

2. Intervalo de medida y número de determinaciones

Intervalo de medida Número dedeterminaciones

0,25 - 2,50 g/l de sacarosa 50

3. Campo de aplicacionesMaterial de las muestras:Bebidas, p. ej. zumo de fruta/verdura, refrescostras preparación apropiada de la muestra (aplica-ciones, ver sitio web) o dilución apropiada (verapartado 6)Productos lácteos tras preparación apropiada de lamuestra (ver apartado 6)

4. Influencia de sustancias extrañasTras dilución apropiada o preparación apropiadade la muestra, la determinación no es interferidapor las sustancias usualmente contenidas en bebi-das y alimentos.

5. Reactivos y auxiliares

Las tiras de ensayo son utilizables hasta lafecha indicada en el envase, si se conservan entre +2 y +8 °C en la caja cerrada.

Contenido del envase:Caja con 50 tiras de ensayo1 tira de código de barras1 frasco de reactivo Sa-11 jeringa de plástico graduada de 12 ml1 jeringa de plástico graduada de 1 ml1 recipiente de ensayo con tapón

Otros reactivos y accesorios:Reflectoquant® Carbón activo Kit de decoloración,art. 117992Sacarosa, art. 107687

Reflectoquant® Kit de dilución, art. 117990Cronómetro

6. Preparación• Extraer las muestras sólidas según un procedi-

miento adecuado.

• Si es necesario, antes de la determinación (verapartado 7) la muestra a analizar debe ser dilui-da con agua destilada (p. ej. 1:100, esto es, 1 mlde muestra + 99 ml de agua):

Concentración de sacarosa Dilución Factor deg/l dilución

2,5 - 25 1 + 9 10

25 - 250 1 + 99 100

> 250 1 + 999 1000

El kit de dilución Reflectoquant® es apropiadopara esta dilución.

• Las muestras fuertemente coloreadas deben de-colorarse antes de la determinación, p.ej. con elkit de decoloración Reflectoquant® (aplicaciones,ver sitio web).

• Yogures y batidos de leche, así como zumosturbios, deben clarificarse según Carrez.

7. TécnicaObservar el manual de instrucciones del reflectó-metro.Para el test Sacarosa es válido:Procedimiento ATiempo de reacción memorizado: 300 segundos

Enjuagar varias veces el recipiente de ensayo con aguadestilada.

Agua destilada 10 ml Introducir con la je-(23 + 3 °C) ringa en el recipiente

de ensayo.

Reactivo Sa-1 5 gotas Añadir y agitar por balanceo.

Muestra preparada 1,0 ml Añadir con la jeringa (23 + 3 °C) y mezclar.

Pulsar la tecla START del reflectómetro e introducir deforma absolutamente simultánea la tira de ensayo conambas zonas de reacción durante 2 segundos en lamuestra de medición.

Dejar que se escurra cuidadosamente el exceso delíquido por el borde longitudinal de la tira sobre un pa-ñuelo de papel absorbente.

Introducir inmediatamente la tira con las zonas de reac-ción en dirección a la pantalla hasta el tope en el adapta-dor de tiras.

Después de transcurrido el tiempo de reacción, leer en lapantalla el valor de medición en g/l de sacarosa.El valor se memoriza automáticamente.

Notas sobre la medición:

• Las dos zonas de reacción cambian de colordiferentemente.

• Si el valor de medición es superior al intervalode medida (en la pantalla se indica HI), deberepetirse la medición con nuevas muestras di-luidas, hasta que se obtenga un valor inferior a2,5 g/l de sacarosa.

• En el resultado del análisis debe considerarse cor-respondientemente la dilución (ver también apar-tado 6):

Resultado del análisis = valor de medición x factor de dilución

• Mediciones en serie:Después de la primera medición pueden reali-zarse más mediciones pulsando la tecla START.Para éstas se necesitará sin embargo un cronó-metro, porque la función cuenta atrás del reflec-tómetro está disponible una sola vez por serie.Proteger las zonas de reacción de la luz du-rante el tiempo de reacción.Todos los resultados se indican y se memorizanautomáticamente.

8. Control del procedimientoComprobación de las tiras de ensayo, del reactivodel test, del dispositivo de medición y de la mani-pulación:Disolver 1.00 g de sacarosa en agua destilada,completar con ésta a 1000 ml y mezclar. Contenidode sacarosa: 1,00 g/l.Analizar esta solución patrón como se describe enel apartado 7.

9. Notas• Cerrar de nuevo inmediatamente el frasco

tras la toma del reactivo y la caja tras la tomade la tira de ensayo.

• Enjuagar el recipiente de ensayo y las jeringassolamente con agua destilada.

• Al final de la jornada de trabajo, limpiar a fondoel adaptador de tiras con agua destilada o etanol.