Son un método utilizado para la multiplicación de microorganismos, tales como bacteria, hongos y parásitos; utilizando distintos nutrientes que van, desde azucares simple hasta sustancias complejas como la sangre o extracto de caldo de carne.
¿Que son los Medio de Cultivo?
Selectivo y
diferencial
Nutritivo
Enriquecimiento
Clasificación de los medios de cultivo según utilización
Contienen nutrientes que favorecen el desarrollo de la mayoría de los
microorganismos sin requerimientos especiales de cultivo.
No promueven el crecimiento de ningún agente en particular
Medio Nutritivo
Contienen nutrientes específicos requeridos para el crecimiento de
patógenos que pueden estar presentes solo o con otras especies de bacterias en
la muestra de un paciente
Se utilizan para favorecer el desarrollo de un patógeno determinado a partir de
una mezcla de microorganismos mediante el uso de especificidad de
nutrientes
En general, son medios líquidos
Medios de Enriquecimiento
Contienen uno o más
agentes que inhiben el
crecimiento de los
microorganismos que no se quieren estudiar
Agentes inhibidores: colorantes,
sales biliares, alcoholes, ácidos y
antibióticos
Medio Selectivo
Contienen un factor o factores que permite que las colonias de una especie o un tipo bacteriano exhiban ciertas características metabólicas o de cultivo que puedan utilizarse para diferenciarlas de otras bacterias que crecen en el mismo agar
Medio Diferencial
Disponibilidad de nutrientes esenciales Consistencia adecuada del medio Condiciones adecuadas de humedad Temperatura Presencia o ausencia oxígeno y CO2 Presión Luz ambiental PH adecuado Temperatura Esterilidad
Es importante destacar que la transición exitosa de un microorganismo in vivo a un
ambiente in vitro va ha depender de:
El Control de Calidad en la preparación y evaluación de los medios de cultivo es considerado como una esencial y buena práctica de laboratorio, necesaria para mantener el nivel y la ejecución de cualquier técnica microbiológica.
Proceso continuo que se extiende desde las materias primas ; a través del productor hasta el producto final utilizado en los diferentes departamentos de análisis y diagnóstico microbiológico.
Control de Calidad
Se evalúa utilizando criterios objetivos del medio respecto a: La recuperación o supervivencia de los microorganismos de interés La inhibición de los microorganismos no deseados tiene que ser cuantitativa Los atributos ( por ejemplo: Propiedades físicas y bioquímicas) Variaciones en el volumen del medio Hemólisis Cristales en el medio Presencia de coágulos Cambio de color normal Contaminación Falla en la inhibición de microorganismos saprofitos Esterilidad
Criterios de Evaluación de la Calidad de los Medios de Cultivo Preparados
Para evaluar cada lote de medio de cultivo que sea recibido en el laboratorio, se emplean cepas patrones (ATCC) de varios géneros y especies de acuerdo al medio de cultivo a analizar.
El control del funcionamiento consistirá en comprobar: capacidad del medio de recuperar un bajo número
de los microorganismos más sensibles para los que ha sido preparado.
capacidad de inhibir un alto número de los microorganismos que deben ser inhibidos en caso de los medios selectivos y
diferenciar los microorganismos para los que ha sido diseñado en caso de los medios diferenciales.
Pruebas de Funcionamiento
Método de Siembra
Los métodos de siembra se utilizan para inocular por distintos métodos sobre un medio de cultivo apropiado una muestra que contenga bacterias con el fin de reproducirlas, para aumentar el número de individuos de la población y formar colonias en el caso de medios sólidos.
- Siembra con asa de cultivo - Diseminación en superficie- Agotamiento en superficie- Tubos en superficie- Tubos en profundidad o picada
Tipos de Siembra
Siembra en estría o zig-zag
Siembra por estría múltiple
Siembra de los cuatro cuadrantes
Siembra de los tres giros.
Técnica de Siembra
En Medio Sólido
EN PLACA• EN UNA SOLA
DIRECCIÓN, O POR AGOTAMIENTO.
• EN 3 o 4 DIRECCIONES• POR DILUCIÓN
EN TUBO - POR PUNCIÓN
- ESTRIADO EN BISEL
En Medio Liquido
A PARTIR DE UNA COLONIA
DESDE UNA SUSPENSIÓN BACTERIANA
DESDE UNA MUESTRA BIOLÓGICA
CON HISOPO , CON PIPETA O JERINGA , CON ANSA O POR
VERTIDO
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