SÍNTESIS, CARACTERIZACIÓN Y EVALUACIÓN DE ACTIVIDAD
BIOLÓGICA DE NUEVOS 4,5-DIHIDRO-1H-PIRAZOLES, 8,9-DIHIDRO-7H-
PIRIMIDO[4,5-b][1,4]DIAZEPINAS Y (Z)-5-HETARILIDEN-1,3-TIAZOL-2-
TIOXO-4-ONAS A PARTIR DE 2,4-DICLOROTIAZOL-5-CARBALDEHÍDO
JUAN SEBASTIAN RAMÍREZ PRADILLA, Qco.
UNIVERSIDAD DEL VALLE
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
GRUPO DE INVESTIGACIÓN DE COMPUESTOS HETEROCÍCLICOS
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
SANTIAGO DE CALI
2014
SÍNTESIS, CARACTERIZACIÓN Y EVALUACIÓN DE ACTIVIDAD
BIOLÓGICA DE NUEVOS 4,5-DIHIDRO-1H-PIRAZOLES, 8,9-DIHIDRO-7H-
PIRIMIDO[4,5-b][1,4]DIAZEPINAS Y (Z)-5-HETARILIDEN-1,3-TIAZOL-2-
TIOXO-4-ONAS A PARTIR DE 2,4-DICLOROTIAZOL-5-CARBALDEHÍDO
Trabajo presentado como requisito para optar el título de Magister en Ciencias-
Química
AREA: QUÍMICA ORGÁNICA Y SÍNTESIS
JUAN SEBASTIAN RAMÍREZ PRADILLA, Qco.
Director:
BRAULIO INSUASTY OBANDO, Ph. D
UNIVERSIDAD DEL VALLE
FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
GRUPO DE INVESTIGACIÓN DE COMPUESTOS HETEROCÍCLICOS
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
SANTIAGO DE CALI
2014
AGRADECIMIENTOS
- A mi abuela Jeanette por todo su apoyo incondicional
- A mis padres por su amor y colaboración
- A mi hermano Tomas que siempre cree en mí
- A Sara, por su cariño, paciencia y entendimiento
- A la familia Chuaire, por todo su apoyo
- A las familias Reyes y Ramírez
- Al profesor Braulio Insuasty, por todo el apoyo, los consejos, la sabiduría brindada
y por haberme formado como un profesional completo
- Al profesor Jairo Quìroga, por su gran colaboración y animo
- A los profesores Rodrigo Abonia y Alejandro Ortìz, por su colaboración
- A mis compañeros del Grupo de Investigación de Compuestos Heterocíclicos de la
Universidad del Valle, en especial a Jonathan Prada por toda su colaboración.
- A Carlos Rodríguez y Luis Eduardo, por la toma oportuna de espectros
- A mi mejor amigo y colega Juan Diego Ramírez, por todo su apoyo
- A mis amigos Mauricio Cerón, Juan Tobar, Sergio Rojas y Margarita Silva
- A todos los profesores de la Universidad del Valle que hicieron parte de mi
formación
- A la Universidad del Valle
TABLA DE CONTENIDO
RESUMEN
INTRODUCCIÓN ................................................................................................................ 1
1. ANTECEDENTES ........................................................................................................ 2
1.1 PARTE 1. SÍNTESIS DE COMPUESTOS HETEROCÍCLICOS
NITROGENADOS DE 5 Y 7 MIEMBROS A PARTIR DEL 2,4-
DICLOROTIAZOL-5-CARBALDEHÍDO .................................................................... 2
1.1.1 Generalidades acerca de los derivados del tiazol .............................................. 2
1.1.2 Generalidades de compuestos carbonílicos α,β-insaturados ............................ 3
1.1.3 Generalidades de compuestos del tipo 4,5-dihidro-1H-pirazol ........................ 5
1.1.4 Generalidades de las diazepinas y sus derivados ............................................. 8
1.2 PARTE 2. SÍNTESIS DE (Z)-5-HETARILIDEN-1,3-TIAZOL-2-TIOXO-4-
ONAS, BASADOS EN 2,4-DICLOROTIAZOL-5-CARBALDEHÍDO ................... 12
1.2.1 Generalidades sobre las rodaninas (tioxotiazolidindionas) y sus derivados . 12
2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIÓN ............................. 16
3. OBJETIVOS ................................................................................................................ 19
3.1 OBJETIVO GENERAL ........................................................................................... 19
3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS .................................................................................. 19
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ................................................................................. 20
4.1 PARTE 1. SÍNTESIS DE COMPUESTOS HETEROCÍCLICOS
NITROGENADOS DE 5 Y 7 MIEMBROS A PARTIR DEL 2,4-
DICLOROTIAZOL-5-CARBALDEHÍDO .................................................................. 20
4.1.1 Síntesis de 4,5-dihidro-1H-pirazoles derivados del 2,4-diclorotiazol-5-
carbaldehído. ............................................................................................................... 20
4.1.2 Síntesis de 4,5-dihidro-1H-pirazoles derivados de 4-clorotiazol-2-morfolino-
5-carbaldehído. ............................................................................................................ 32
4.1.3 Síntesis de 8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepinas a partir de 2,4-
diclorotiazol-5-carbaldehído. ..................................................................................... 42
4.2 PARTE 2. SÍNTESIS DE (Z)-5-HETARILIDEN-1,3-TIAZOL-2-TIOXO-4-
ONAS, BASADOS EN 2,4-DICLOROTIAZOL-5-CARBALDEHÍDO ................... 53
4.2.1 Síntesis de nuevas (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-2-tioxo-4-onas ....................... 53
4.3 ESTUDIOS DE ACTIVIDAD BIOLÓGICA ......................................................... 62
4.3.1 Estudios de actividad antitumoral .................................................................... 62
4.3.2 Estudios de actividad antifúngica ..................................................................... 67
6. SECCIÓN EXPERIMENTAL ................................................................................... 73
6.1 Reactivos comerciales ............................................................................................... 73
6.2 Disolventes ................................................................................................................. 73
6.3 Instrumentación ........................................................................................................ 73
6.4 Síntesis de precursores ............................................................................................. 74
6.5 Síntesis de productos finales .................................................................................... 76
6.5.1 Síntesis de NH, N-Acetil y N-formil-5-(2,4-diclorotiazol-5-il)-3-(R-fenil)-4,5-
dihidro-1H-pirazoles ................................................................................................... 76
6.5.2 Síntesis de los N-acetil y N-formil-4,5-dihidro-1H-pirazoles 84a-f y 85a-f ... 87
6.5.3 Síntesis de 8,9-dihidro-[4,5-b][1,4]-diazepinas ................................................ 94
6.5.4 Síntesis de (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-4-onas 98/99/100/101/102a-d .......... 101
7. REFERENCIAS…………………………………………………………………….111
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Fármacos comerciales que contienen el fragmento tiazólico................................. 2
Figura 2. Compuestos carbonílicos α,β-insaturados con importante actividad antitumoral. 4
Figura 3. Compuestos carbonílicos α,β-insaturados basados en tiofeno y tiazol. ................. 4
Figura 4. Estructura general de los 4,5-dihidro-1H-pirazoles o 2-pirazolinas. ..................... 5
Figura 5. Compuestos pirazolínicos biológicamente activos. ............................................... 6
Figura 6. Estructura general de las 1,2-diazepinas, 1,3-diazepinas y 1,4-diazepinas y
estructuras del diazepan y milazolam, drogas comerciales. ................................................... 8
Figura 7. Compuestos de tipo diazepínico biológicamente activos. ..................................... 9
Figura 8. Estructura general de las rodaninas. ..................................................................... 12
Figura 9. Compuestos derivados de rodaninas con diversa actividad biológica. ................ 13
Figura 10. Espectro infrarrojo de los compuestos 75b y 77b.............................................. 23
Figura 11. Espectro RMN-1H del compuesto 75b en CDCl3, 400 MHz. ............................ 25
Figura 12. Espectro RMN-13
C y DEPT-135 del compuesto 75b en CDCl3, 100 MHz. ..... 25
Figura 13. Espectros de infrarrojo de los compuestos 77d, 78d y 79d. .............................. 28
Figura 14. Espectro RMN-1H de los compuestos 78d y 79d en CDCl3, 400 MHz............. 29
Figura 15. Espectro RMN-13
C y DEPT-135 de los compuestos 78d y 79d en CDCl3, 100
MHz. ..................................................................................................................................... 30
Figura 16. Espectro de masas del compuesto 79d. .............................................................. 32
Figura 17. Espectros de infrarrojo de los compuestos 84e y 85e. ....................................... 37
Figura 18. Espectro RMN-1H de los compuestos 84e y 85e en CDCl3, 400 MHz. ............ 38
Figura 19. Espectro RMN-13
C y DEPT-135 de los compuestos 84e y 85e en CDCl3, 100
MHz. ..................................................................................................................................... 39
Figura 20. Experimento HSQC del compuesto 84e. ........................................................... 40
Figura 21. Espectro de masas del compuesto 85d. .............................................................. 42
Figura 22. Producto inesperado de reacción........................................................................ 44
Figura 23. Espectros de infrarrojo de los compuestos 88c y 89c. ....................................... 46
Figura 24. Espectro RMN-1H de 88c en DMSO-d6 y 89c en CDCl3, 400 MHz. ................ 47
Figura 25. Espectro RMN-13
C y DEPT-135 de 88c en DMSO-d6 y 89c en CDCl3, 100
MHz. ..................................................................................................................................... 49
Figura 26. Experimento HMBC del compuesto 88c. .......................................................... 50
Figura 27. Espectro de masas del compuesto 88c. .............................................................. 52
Figura 28. Espectros infrarrojo de los compuestos 99a y 101b. ......................................... 58
Figura 29. Espectro RMN-1H del compuesto 99a y 101b en CDCl3, 400 MHz. ................ 59
Figura 30. Espectro RMN-13
C del compuesto 99a y 101b en CDCl3, 100 MHz. ............... 60
Figura 31. Compuestos ofrecidos y seleccionados por el NCI, USA, para realizar ensayos
de actividad antitumoral. ...................................................................................................... 63
Figura 32. Compuestos que presentaran actividad antifungica. .......................................... 67
Figura 33. Curvas de dosis-respuesta de fluconazol, itraconazol y amfotericina B en
solución pura y mezclas con los compuestos 84e y 84f contra Candida albicans. .............. 70
LISTA DE ESQUEMAS
Esquema 1. Reactividad de compuestos carbonílicos α,β-insaturados. ................................ 3
Esquema 2. Síntesis de compuestos pirazolínicos basados en cafeína. ................................. 6
Esquema 3. Síntesis de la pirazolina 29 con importante actividad antitumoral, bajo
irradiación con microondas. ................................................................................................... 7
Esquema 4. Síntesis de la 8,9-dihidro-7H-pirimido[1,4]diazepina 42 con importante
actividad antitumoral. ........................................................................................................... 10
Esquema 5. Síntesis de 8,9-dihidro-7H-pirimido[1,4]-diazepinas mediante irradiación con
microondas. .......................................................................................................................... 11
Esquema 6. Síntesis del compuesto 57 a partir de isotiocianato de ácido 3-aminobenzoico.
.............................................................................................................................................. 14
Esquema 7. Síntesis one-pot de rodaninas N-sustituidas. ................................................... 14
Esquema 8. Síntesis de rodaninas N-sustituidas. ................................................................. 14
Esquema 9. Síntesis de hetarilidenderivados de la rodanina y del ácido-3-acético de la
rodanina. ............................................................................................................................... 15
Esquema 10. Síntesis del bencilidenderivado 71 a partir de L-fenilalanina........................ 15
Esquema 11. Estrategia sintética para la obtención de nuevos compuestos heterocíclicos
nitrogenados de 5 y 7 miembros que contienen el fragmento tiazólico. .............................. 17
Esquema 12. Estrategia sintética para la obtención de nuevas (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-
2-tioxo-4-onas ....................................................................................................................... 18
Esquema 13. Formación del 3-(4-clorofenil)-5-(2,4-diclorotiazol-5-il)-4,5-dihidro-1H-
pirazol 77b. ........................................................................................................................... 21
Esquema 14. Posible esquema de fragmentación del compuesto 79d. ............................... 31
Esquema 15. Formación del 3-(4-clorofenil)-5-(4-clorotiazol-2-morfolino-5-il)-4,5-
dihidro-1H-pirazol 83b. ........................................................................................................ 33
Esquema 16. Síntesis de N-acyl y N-formil-3-(4-clorofenil)-5-(4-clorotiazol-2-morfolino-
5-il)-4,5-dihidro-1H-pirazol 84/85b. .................................................................................... 34
Esquema 17. Posible ruta de fragmentación del compuesto 85e......................................... 41
Esquema 18. Formación de la 4-amino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-fenil-8,9-dihidro-7H-
pirimido[4,5-b][1,4]diazepina 88a. ...................................................................................... 43
Esquema 19. Posible ruta para la obtención del compuesto 88c. ........................................ 50
Esquema 20. Posible ruta de fragmentación en espectrometría de masas del compuesto
88c. ....................................................................................................................................... 52
Esquema 21. Síntesis de los aldehídos tiazólicos 90a-d. .................................................... 53
Esquema 22. Síntesis de las rodaninas N-sustituidas 94, 95, 96 y 97 ................................. 54
Esquema 23. Síntesis de nuevas (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-2-tioxo-4-onas ..................... 55
LISTA DE TABLAS
Tabla 1. Valores de actividad antimalárica de 4,5-dihidro-1H-pirazoles basados en cafeína.
................................................................................................................................................ 7
Tabla 2. Condiciones de reacción para la formación del 4,5-dihidro-1H-pirazol 77b. ....... 21
Tabla 3. Rendimientos y tiempos de reacción para la serie de compuestos 77a-f .............. 22
Tabla 4. Rendimientos y tiempos de reacción para la serie de compuestos 78/79a-f ......... 26
Tabla 5. Condiciones de reacción para la formación del 4,5-dihidro-1H-pirazol 83b ........ 33
Tabla 6. Rendimientos y tiempos de reacción para la serie de compuestos 84/85a-f ......... 35
Tabla 7. Condiciones de reacción para la formación de la 8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-
b][1,4]diazepina 88a. ............................................................................................................ 43
Tabla 8. Rendimientos y tiempos de reacción de los compuestos 84/85a-f ........................ 45
Tabla 9. Condiciones de reacción para la formación de los hetarilidenderivados
98/99/100/101/102a-d. ......................................................................................................... 55
Tabla 10. Rendimientos de reacción de los compuestos 98/99/100/101/102a-d. ............... 57
Tabla 11. Evaluación in vitro de los compuestos 77d, 89d y 89g. ...................................... 64
Tabla 12. Actividad antifúngica in vitro (valores de CMI y CMF en μg/mL, escritos como
MIC/MFC) de los compuestos 75a-f. ................................................................................... 68
Tabla 13. Actividad antifúngica (% de inhibición) de los compuestos 84a-f y 85a-f. ........ 68
Tabla 14. MIC50 de las drogas FCZ, ITZ y AnB actuando solas y en combinación con los
compuestos 84e y 84f. .......................................................................................................... 70
LISTA DE ABREVIATURAS
α Posición adyacente respecto a un grupo funcional principal
β Posición 1,3 respecto a un grupo funcional principal
Ar Grupo arilo
°C Grados centígrados
CDCl3 Cloroformo deuterado
cm-1
Centímetro recíproco, asociado con el número de onda
CMI Concentración mínima inhibitoria
CMF Concentración mínima fungicida
CMI50 Concentración mínima para inhibir el 50% de crecimiento
d Doblete
dd Doble doblete
DEPT-135 (Distortionless Enhancement by Polarization Transfer)
DMSO-d6 Dimetilsulfóxido deuterado
E
Designación que se le da a los isómeros cuando los sustituyentes
más importantes enlazados por el doble enlace están opuestos E
(del alemán Engegen= de través).
g Gramos
GI50 Concentración inhibitoria del 50% del crecimiento
HMBC Heteronuclear Multiple Bond Conectivity
HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation
Hz Hertz
Ci Carbono Cuaternario C-1 (ipso) en un anillo aromático
IR Infrarrojo
nJ Constante de acoplamiento a n enlaces
LC50
Concentración letal al 50%
m Multiplete
m Posición “meta” de un anillo aromático
M.W. Microondas (radiación)
MHz Megahertz (Resonancia Magnética Nuclear)
mmol Milimoles
o Posición “orto” de un anillo aromático
p ……… Posición “para” de un anillo aromático
p.f. Punto de fusión
Ph Designación para grupo fenilo
ppm Partes por millón
R Grupo sustituyente
Rend. Rendimiento
RMN-1H Resonancia magnética nuclear protónica
RMN-13
C Resonancia magnética nuclear de carbono 13
s Singlete
t Triplete
Z
Designación que se le da a los isómeros cuando los sustituyentes
más importantes enlazados por el doble enlace están en lados
iguales Z (del alemán zusammen= juntos).
RESUMEN
Se llevó a cabo la síntesis de nuevos compuestos heterocíclicos nitrogenados de 5 y 7
miembros y (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-2-tioxo-4-onas con potencial actividad biológica y
diversidad estructural, a partir del 2,4-diclorotiazol-5-carbaldehído. Las metodologías de
síntesis se enmarcaron en el campo de la Química Verde, debido a la baja demanda de
solventes costosos y contaminantes, tiempos de reacción cortos como también el uso de
métodos de purificación sencillos.
El trabajo se realizó en dos partes, la primera describe la síntesis de nuevos compuestos
heterocíclicos nitrogenados de 5 miembros (4,5-dihidro-1H-pirazoles) y 7 miembros (8,9-
dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepinas) a partir de compuestos carbonílicos α,β-
insaturados derivados del 2,4-diclorotiazol-5-carbaldehído, empleando reacciones de
ciclocondensación con hidrato de hidracina, triamino y tetraamino pirimidinas en ausencia
de catalizador y por lo general a temperatura ambiente.
La segunda parte describe la síntesis de (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-2-tioxo-4-onas
mediante condensación de tipo Knoevenagel a partir de aldehídos tiazólicos y rodaninas N-
sustituidas obtenidas mediante dos aproximaciones; “Reacción One-Pot en medio acuoso
bajo irradiación con microondas a partir de (L)-fenilalanina” y “Sustitución y ciclación en
agua de derivados de anilina y biscarboximetiltritiocarbonato”.
Se presentan los estudios de actividad antitumoral realizados por el National Cancer
Institute (NCI, USA) frente a 60 líneas celulares comprendidas en 9 paneles (leucemia,
melanoma y cáncer de pulmón, colon, ovario, cerebro, mama, próstata y riñón). Los
resultados obtenidos, muestran que el compuesto 89g se postula como un candidato para
investigaciones futuras sobre potencialización de actividad antitumoral, debido a sus
buenos resultados con valores de GI50 de 0.56-1.46 μM y LC50>100 μM frente a varias
líneas celulares.
Con respecto a la actividad antifúngica, realizada en la Universidad Nacional de Rosario
(Argentina), los compuestos carbonílicos α,β-insaturados a partir del 2,4-diclorotiazol-5-
carbaldehído presentan actividad contra las cepas dermatofítas (Trichophyton rubrum, T.
mentagrophytes y Microsporum gypseum) con CMI de 31.25 μg/mL en todos los casos.
Adicionalmente se discuten los efectos sinérgicos y antagónicos que presentan los
compuestos pirazolínicos 84e y 84f frente a las drogas comerciales, Fluconazol, Itraconazol
y Anfotericina B.
Palabras Clave: Compuestos carbonílicos α,β-insaturados, 2-pirazolinas, diazepinas,
hetarilidenrodaninas, rodaninas-N-sustituidas, 2,4-diclorotiazol-5-carbaldehído, one-pot,
microondas, actividad antitumoral, actividad antifúngica, efecto sinérgico, efecto
antagónico.
1
INTRODUCCIÓN
La síntesis de compuestos heterocíclicos se ha establecido como uno de los métodos más
aplicados en la búsqueda de nuevas moléculas para su uso como fármacos, especialmente
en el tratamiento de enfermedades de impacto mundial como el cáncer o los hongos
patógenos, esto se debe principalmente a la relativa facilidad de obtención de este tipo de
compuestos permitiendo obtener numerosas bibliotecas con diversidad estructural y amplio
espectro de actividad biológica.
Algunos fragmentos heterocíclicos han tomado protagonismo durante las últimas décadas
como bases estructurales, un ejemplo de ello es el tiazol, que ha sido ampliamente
estudiado debido a su versatilidad sintética que conduce a la obtención de un sinnúmero de
derivados, además comercialmente se encuentran fármacos que contienen este fragmento.
Por otra parte, compuestos como las 2-pirazolinas, 1,4-diazepinas y derivados de
rodaninas se han consolidado como moléculas líderes debido a que su uso en química
medicinal ha crecido durante las últimas décadas, como también la investigación orientada
hacia la obtención de nuevos compuestos y su estudio de relación estructura-actividad.
Recientemente, la investigación y desarrollo de metodologías empleadas para la obtención
de compuestos heterocíclicos, se ha encaminado hacia el marco de la “Química Verde”,
promoviendo estrategias de síntesis como; libre de disolvente, uso de disolventes no-
contaminantes, síntesis acuosa, irradiación con microondas, reacciones one-pot, entre otras.
Por tal razón, el presente trabajo se orientó hacia la obtención de nuevos 4,5-dihidro-1H-
pirazoles, 8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepinas y (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-2-
tioxo-4-onas, empleando diversos métodos enmarcados bajo este concepto, generando de
esta manera nuevas series de compuestos con fragmentos potencialmente activos.
2
1. ANTECEDENTES
1.1 PARTE 1. SÍNTESIS DE COMPUESTOS HETEROCÍCLICOS
NITROGENADOS DE 5 Y 7 MIEMBROS A PARTIR DEL 2,4-DICLOROTIAZOL-
5-CARBALDEHÍDO
1.1.1 Generalidades acerca de los derivados del tiazol
El tiazol es un fragmento heterocíclico ampliamente utilizado en síntesis orgánica debido a
la versatilidad sintética que presenta, que permite obtener un sinnúmero de derivados con
potencial actividad biológica,1-3
como antitumorales,4-10
antibacteriales,11-13
antifúngicos,14
antimaláricos,15
y antimicobacteriales.16
Actualmente, algunos compuestos que contienen
este fragmento son empleados como agentes terapéuticos; el abafungin 1 como antifúngico,
el lidorestat 2 en medicación de diabetes, el dasitinib 3 como agente quimioterapéutico, el
sulfatiazol 4 reconocido agente antibacterial, la nizatidina 5 empleada en el tratamiento de
la ulcera gástrica y ritonavir 6 usado en medicación anti VIH. Figura 1.
Figura 1. Fármacos comerciales que contienen el fragmento tiazólico.
3
1.1.2 Generalidades de compuestos carbonílicos α,β-insaturados
Los compuestos carbonílicos α,β-insaturados 7 han sido ampliamente estudiados ya que la
presencia del doble enlace adyacente al carbonilo confiere una reactividad característica del
tipo 1,3-dielectrófilo, Esquema 1, que permite diseñar rutas de obtención de compuestos
heterocíclicos del tipo pirazolínico 8,17
piridínico 9,18
y diazepínico 10.19
Esquema 1. Reactividad de compuestos carbonílicos α,β-insaturados.
Los compuestos carbonílicos α,β-insaturados también han sido investigados debido al
espectro de actividad biológica que presentan,20-26
por ejemplo, en el grupo de investigación
de compuestos heterocíclicos de la Universidad del Valle, Abonia, R., y colaboradores, 27
sintetizaron el compuesto 11 que presentó actividad antitumoral importante en ensayos in
vivo. Insuasty, B., y colaboradores, 28
sintetizaron el compuesto 12 basado en pirazol, que
presentó actividad antitumoral remarcable con valores de GI50 de 0.09 y 0.10 μM para las
líneas celulares K-562 de leucemia y UO-31 de cáncer renal, ambos con valores de LC50>
100 μM. Figura 2.
4
Figura 2. Compuestos carbonílicos α,β-insaturados con importante actividad antitumoral.
Una aproximación sintética con resultados favorables es la inclusión de anillos
heterocíclicos a los compuestos carbonílicos α,β-insaturados; Tomar, V., y colaboradores,29
insertaron un fragmento del tipo 2,5-diclorotiofeno, observando resultados importantes de
concentración mínima inhibitoria (CMI) contra Candida albicans, los compuestos 13, 14 y
15 exhibieron CMI’s de 2.22, 4.67 y 5.97 μg/mL respectivamente. Figura 3; Liaras, K., y
colaboradores,12
reportaron la síntesis de los compuestos 16, 17 y 18 basados en tiofeno, los
cuales presentaron actividad antfúngica contra Candida albicans con CMI’s de 2.97, 3.27
y 2.89 μg/mL y actividad antibacterial contra la cepa Enterococcus faecalis aislada de
humanos, con CMI’s de 7.42, 4.89 y 5.71 μg/mL. Figura 3.
Figura 3. Compuestos carbonílicos α,β-insaturados basados en tiofeno y tiazol.
5
1.1.3 Generalidades de compuestos del tipo 4,5-dihidro-1H-pirazol
Los compuestos heterocíclicos de 5 miembros que contienen dos nitrógenos en posición
adyacente son denominados pirazoles, en adición, cuando un enlace se encuentra saturado
en el anillo de pirazol, se denomina pirazolina o dihidro-1H-pirazol 19, Figura 4. El
desarrollo del marco teórico y discusión de resultados estará basado en los 4,5-dihidro-1H-
pirazoles que generalmente se obtienen a partir de compuestos carbonílicos α,β-insaturados,
Esquema 1, por lo cual las posiciones C-3 y C-5 del anillo, están sustituidas.30
Figura 4. Estructura general de los 4,5-dihidro-1H-pirazoles o 2-pirazolinas.
Los 4,5-dihidro-1H-pirazoles han sido ampliamente estudiados debido a su variado
espectro de actividad biológica.30-35
Por ejemplo, el compuesto 20 que contiene en su
estructura el fragmento pirazolínico y tiazólico presentó actividad anti-Trypanosoma brucei
brucei (IC50=5.43 μM) y Trypanosoma brucei gambiense (IC50=2.53 μM), parásitos
responsables de la enfermedad de chagas, de alto impacto en Latinoamérica.36
El
compuesto fluorado 21 que también contiene el fragmento pirazolínico y tiazólico en la
estructura, exhibió actividad antimicrobiana contra Streptococcus pyogenes (CMI 12.5
μg/mL), bacteria responsable de faringitis bacteriana y reconocida por ser un
microorganismo comedor de carne.37
La pirazolina 22 derivada de la hidrazida del ácido
nicotínico, presentó actividad antimalárica in vitro e in vivo exhibiendo valores más
óptimos que el estándar cloroquina.38
EL compuesto 23 presentó actividad antifúngica contra Candida albicans (CMI 6.25
μg/mL) y actividad antibacterial contra Klebsiella pneumoniae (CMI 6.25 μg/mL), bacteria
responsable de las neumonías.39
Figura 5.
6
Figura 5. Compuestos pirazolínicos biológicamente activos.
Los métodos de obtención de las 2-pirazolinas, por lo general van acompañados de tiempos
de reacción cortos y metodologías de purificación sencillas, en el trabajo que desarrollé
anteriormente en el grupo de investigación de compuestos heterocíclicos de la Universidad
del Valle, se realizó la síntesis de NH, N-acetil y N-formil-4,5-dihidro-1H-pirazoles basados
en cafeína 25/26/27a-f, a partir de los compuestos carbonílicos α,β-insaturados 24a-f
mediante reacción de cicloadición con hidrato de hidracina. Los compuestos sintetizados
exhibieron actividad antimalárica importante. Esquema 2. Tabla 1.
Esquema 2. Síntesis de compuestos pirazolínicos basados en cafeína.
7
Tabla 1. Valores de actividad antimalárica de 4,5-dihidro-1H-pirazoles basados en cafeína.
R Comp. %Inhib.a
Comp. %Inhib.a
Comp. %Inhib.a
H 25a 85.2 ± 5.4 26a N.A 27a 30.8 ± 4.9
4-Cl 25b 23.9 ± 2.2 26b 22.1 ± 3.7 27b N.A
4-Br 25c 56.8 ± 9.0 26c 44.1 ± 9.5 27c N.A
4-CH3 25d N.A 26d N.A 27d 37.1 ± 3.1
4-OCH3 25e 13.1 ± 2.9 26e 11.6 ± 1.0 27e N.A
-3,4,5-triOCH3 25f 30.7 ± 0.1 26f 46.3 ± 6.3 27f 23.0 ± 0.0
CQb 58.2 ± 5.6
a Datos obtenidos del PECET bajo ensayos invitro contra Plasmodium falciparum. b CQ:difosfato de cloroquina.
Análogamente, en el grupo de investigación de compuestos heterocíclicos de la
Universidad del Valle, Insuasty, B., y colaboradores,28
sintetizaron el compuesto 29
mediante ciclación del compuesto 28 con hidrato de hidracina bajo irradiación con
microondas en presencia de ácido acético, el cual presentó actividad antitumoral importante
bajo ensayos in vitro contra las líneas celulares K-562 y SR del panel leucemia, HOP-92
de cáncer de pulmón y UO-31 de cáncer renal con valores de GI50 en un rango de 0.04-11.4
μM y LC50 > 100 μM. Esquema 3.
Esquema 3. Síntesis de la pirazolina 29 con importante actividad antitumoral, bajo
irradiación con microondas.
8
1.1.4 Generalidades de las diazepinas y sus derivados
Las diazepinas, son compuestos heterocíclicos que contienen en su estructura un anillo de
siete miembros con dos átomos de nitrógeno en posiciones [1,2] 30, [1,3] 31 y [1,4] 32.
Figura 6. Debido a que este tipo de compuestos se puede obtener por diferentes rutas y el
espectro de actividad biológica es muy amplio,40
se considera el esqueleto diazepínico
como base estructural privilegiada y líder para la obtención de nuevas moléculas que
exhiban actividad biológica. Muestra de ello, son algunos compuestos de tipo diazepínico
como el diazepam y el milazolam que son empleados comercialmente para el tratamiento
de la ansiedad y desordenes relacionados con el sistema nervioso central (SNC). Figura 6.
Figura 6. Estructura general de las 1,2-diazepinas, 1,3-diazepinas y 1,4-diazepinas y
estructuras del diazepan y milazolam, drogas comerciales.
Recientemente se ha reportado la síntesis y evaluación de actividad biológica de diversos
derivados del tipo 1,4-diazepínico, Smith, L., y colaboradores,41
reportaron la síntesis de la
pirimido[1,4]diazepina 35 que presentó actividad contra el receptor de la enzima tirosina
quinasa con un IC50 enzimático de 0.2 μM, esta enzima es responsable de la proliferación
9
celular en el cáncer de piel. El compuesto 36 exhibió actividad contra el parásito
Schistosoma mansoni, responsable de la enfermedad esquistosomiasis, el compuesto se
evaluó in vivo a una concentración de 50 μg/mL contra el parásito, encontrando niveles de
mortalidad cercanos al 80 % después de exposición durante 24 horas.29
La ERK5 es una
enzima que está presente en la metástasis del cáncer de próstata, el compuesto 37 presentó
actividad importante contra esta enzima con un IC50 de 0.11 μM.18
El compuesto 38
presentó actividad antimicrobial contra la bacteria Escherichia coli, con una CMI de 62.5
μg/mL. 42
El compuesto 39 de tipo diazepinona, presentó un IC50 enzimático de 1.2 μM
contra la transcriptasa reversa, involucrada en los procesos de replicación asociados al VIH.
43Figura 7.
Figura 7. Compuestos de tipo diazepínico biológicamente activos.
10
La síntesis de diazepinas se puede lograr a través de varias rutas,40
sin embargo un método
asequible para la obtención de este tipo de compuestos es la condensación de o-diaminas
aromáticas, heteroaromáticas o saturadas con compuestos carbonílicos α,β-insaturados,
debido a la versatilidad y alta regioselectividad de la reacción. De esta manera, en el grupo
de investigación de compuestos heterocíclicos de la Universidad del Valle, Insuasty, B., y
colaboradores, realizaron la síntesis del compuesto 42 mediante condensación a reflujo de
la diaminopirimidina 40 con el compuesto carbonílico α,β-insaturado 41 basado en
indandiona, el compuesto 42 presentó un GI50 de 0.49 μM contra la línea celular MDA-
MB-435 de cáncer de mama. Esquema 4.44
Esquema 4. Síntesis de la 8,9-dihidro-7H-pirimido[1,4]diazepina 42 con importante
actividad antitumoral.
Otros métodos aplicados a la síntesis de diazepinas, se basan en la irradiación con
microondas, la síntesis A, Esquema 5, muestra la ciclación entre el compuesto 43 con la
diaminopirimidina 44 en una reacción catalizada por BF3OEt2, empleando DMF como
disolvente y bajo irradiación de microondas, obteniendo el compuesto 45 que presentó
actividad antitumoral con un GI50 de 0.47 μM contra la línea celular MDA-MB-435 de
cáncer de mama.19
La síntesis B, Esquema 5, no emplea catálisis ácida, la mezcla de la
diaminopirimidina 46 con el compuesto 47 en DMF bajo irradiación de microondas,
condujo a la formación del compuesto 48 el cual exhibió actividad antitumoral importante
con un GI50 de 0.068 μM contra la línea celular IGROV1 de cáncer de ovario.
11
Esquema 5. Síntesis de 8,9-dihidro-7H-pirimido[1,4]-diazepinas mediante irradiación con
microondas.
12
1.2 PARTE 2. SÍNTESIS DE (Z)-5-HETARILIDEN-1,3-TIAZOL-2-TIOXO-4-ONAS,
BASADOS EN 2,4-DICLOROTIAZOL-5-CARBALDEHÍDO
1.2.1 Generalidades sobre las rodaninas (tioxotiazolidindionas) y sus derivados
Las rodaninas son una familia de compuestos heterocíclicos de cinco miembros que
contienen azufre y nitrógeno en posiciones 1,3 respectivamente, su estructura general se
representa en la Figura 8 (49) y es una forma saturada del tiazol. La presencia de un
metileno activo en posición 5, un tiocarbonilo en posición 2 y la variedad de sustituyentes
sobre el nitrógeno, han situado a las rodaninas dentro del concepto de “privileged
scaffolds” y “promiscuous binders”, lo que convierte este tipo de esqueletos en plantillas
líderes para la obtención de nuevas bibliotecas de compuestos.3,45
Figura 8. Estructura general de las rodaninas.
Otra característica de las rodaninas y sus derivados, se basa en su potencial actividad
biológica,46-48
entre las que se destacan; actividad antifúngica, como ejemplo el compuesto
50 el cual fue evaluado contra hongos como Penicillium funiculosum (asociado a la
descomposición de la piña) con CMI de 0.60 μg/mL y Aspergillus versicolor CMI de 2.38
μg/mL, hongo patógeno que puede producir cáncer de pulmón, daños a vías respiratorias y
a la visión;49
actividad antitubercular, en el caso del compuesto 51, contra la cepa
Mycobacterium tuberculosis con una CMI de 6.25 μg/mL;50
actividad antitumoral para el
caso del compuesto 52, contra las líneas celulares HT-29 (cáncer de colon), H460 (cáncer
de pulmón) y MDA-MB-231 (Cáncer de mama) con valores de GI50 de 0.025, 0.075 y 0.77
μM;51
y actividad anti-VIH asociada al compuesto 53 que presentó un IC50 enzimático de 7
μM contra la transcriptasa reversa, enzima involucrada con esta enfermedad.52
Figura 9.
13
Figura 9. Compuestos derivados de rodaninas con diversa actividad biológica.
Los compuestos anteriormente mencionados se pueden obtener bajo diferentes
metodologías,47,53,54
Cutshald, N., y colaboradores,55
reportaron la síntesis desde moléculas
abiertas del bencilidenderivado de rodanina N-sustituida 57 en tres pasos de reacción, que
consistieron en la ciclación del isotiocianato 54 con tioglicolato de metilo, con posterior
condensación del producto 55 con benzaldehído 56 en presencia de acetato de sodio. El
compuesto 57 presentó actividad antiinflamatoria, en ensayos contra la enzima JSP-1
involucrada en trastornos inflamatorios y de proliferación, con un IC50 de 18 μM. Esquema
6.
Otra aproximación importante para la síntesis de rodaninas es la metodología “One-pot”,
Nitsche, C., y colaboradores,56
realizaron la síntesis del compuesto 61 bajo el concepto de
Química Verde, empleando como disolvente agua y bajo irradiación con microondas,
mediante metodología One-pot de tres pasos. Esquema 7.
14
Esquema 6. Síntesis del compuesto 57 a partir de isotiocianato de ácido 3-aminobenzoico.
Esquema 7. Síntesis one-pot de rodaninas N-sustituidas.
Kun, L., y colaboradores, sintetizaron a partir de anilinas p-sustituidas 62 y
biscarboximetiltritiocarbonato 63 en agua como disolvente y bajo calentamiento a reflujo,
las rodaninas N-sustituidas 64a-c las cuales presentaron actividad anti-VIH con valores de
EC50 en un rango de 35.7-63.0 μM. Esquema 8.
Esquema 8. Síntesis de rodaninas N-sustituidas.
Con respecto a la reactividad de las rodaninas, la acidez de los hidrógenos α en posición C-
5 del anillo rodanínico, permite realizar reacciones de condensación tipo Knoevenagel,
empleando diversas metodologías.51,57-62
En el grupo de investigación de compuestos
15
heterocíclicos de la Universidad del Valle, Insuasty, A., Ramírez, J. S, 63
y colaboradores,
realizaron la síntesis de los compuestos 67a-d, 68a-d y 69a-d a partir de la rodanina 64a,
ácido-3-acético de la rodanina 64b y los aldehídos 65a-e. El compuesto 69e exhibió
actividad antifúngica importante contra Saccharomyces cerevisiae con una CMI de 3.9
μg/mL. Esquema 9.
Esquema 9. Síntesis de hetarilidenderivados de la rodanina y del ácido-3-acético de la
rodanina.
Con base en los sustituyentes sobre el nitrógeno, algunos derivados de rodaninas N-
sustituidas que contienen el grupo carboxílico han demostrado tener diferentes tipos de
actividad biológica.58,64-67
Hardej, D., y colaboradores,68
obtuvieron la rodanina 70a a partir
de L-fenilalanina 70, Esquema 10, la cual se sometió a reacción de Knoevenagel con
benzaldehído 56 obteniendo el compuesto 71 que presentó actividad antifúngica contra
Candida albicans, con una CMI de 1.95 μg/mL
Esquema 10. Síntesis del bencilidenderivado 71 a partir de L-fenilalanina.
16
2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIÓN
En la actualidad existen problemas de salud críticos asociados a diferentes enfermedades, la
primera de ellas el cáncer, que cobra alrededor de siete millones de vidas anualmente a
nivel mundial y en Colombia alrededor de setenta mil casos son reportados con un 80 % de
mortalidad. Otro tipo de problema son las enfermedades asociadas a los hongos patógenos,
debido a que muchos de los fármacos empleados para su tratamiento tienen efectos
secundarios en los pacientes, además estos microorganismos presentan fármaco-resistencia,
factores que conllevan a altos índices de padecimiento y mortalidad, especialmente en los
países tropicales.
De esta manera, se crea la necesidad de investigar en el diseño, síntesis, estudio de
actividad biológica y desarrollo de compuestos que puedan ser empleados como fármacos
para el tratamiento de dichas enfermedades, con una mayor selectividad y una mejor dosis-
respuesta, teniendo en cuenta que fragmentos del tipo tiazólico, dihidro-1H-pirazolico,
diazepínico y rondanínico, han sido bases estructurales para la obtención de compuestos
con reconocida actividad biológica.
Como se observó en el marco teórico, los 4,5-dihidro-1H-pirazoles, las pirimido[4,5-
b][1,4]diazepinas y las (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-2-tioxo-4-onas se obtienen bajo
metodologías de reacción asequibles y amigables al medio ambiente, además el amplio
espectro de actividad biológica que exhiben hace que la síntesis de este tipo de compuestos
surja como una alternativa para solucionar los problemas de salud críticos asociados al
cáncer y los hongos patógenos, por tal razón en la parte 1 de este trabajo se plantea la
síntesis de compuestos heterocíclicos nitrógenados de tipo 4,5-dihidro-1H-pirazol (V, VI,
VII, VIII y IX) y 8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (X y XI) a partir de los
compuestos 1,3-dielectrofílicos II y III derivados del 2,4-diclorotiazol-5-carbaldehído I, y
empleando como binucleófilos; hidrato de hidracina, triaminopirimidina y
tetraaminopirimidina. Esquema 11.
17
Esquema 11. Estrategia sintética para la obtención de nuevos compuestos heterocíclicos
nitrogenados de 5 y 7 miembros que contienen el fragmento tiazólico.
Con respecto a la parte 2, se plantea la síntesis de los aldehídos I, Ia, Ib y Ic,
posteriormente se propone la síntesis de rodaninas N-sustituidas XV, XVI, XVII, XVIII
bajo dos metodologías diferentes; la primera empleando biscarboximetiltritiocarbonato XII
18
y derivados de anilina y la segunda a partir de (L)-fenilalanina XIII y disulfuro de carbono.
Finalmente, se plantea una combinación de los aldehídos derivados del tiazol y las
rodaninas N-sustituidas, incluyendo el compuesto comercial XIV con el fin de obtener las
nuevas (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-2-tioxo-4-onas XIX como se muestra en el Esquema
12.
Esquema 12. Estrategia sintética para la obtención de nuevas (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-
2-tioxo-4-onas
19
3. OBJETIVOS
3.1 OBJETIVO GENERAL
Sintetizar nuevos compuestos heterocíclicos nitrogenados de 5 y 7 miembros y (Z)-5-
hetariliden-1,3-tiazol-2-tioxo-4-onas con potencial actividad biológica y diversidad
estructural, a partir de reacciones bicomponente en solución enmarcadas en el concepto de
la “Química Verde”.
3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Sintetizar nuevos compuestos heterocíclicos nitrogenados de 5 miembros a partir de
compuestos carbonílicos α,β-insaturados basados en 2,4-diclorotiazol-5-
carbaldehído.
Realizar la reacción de ciclación de compuestos carbonílicos α,β-insaturados
basados en 2,4-diclorotiazol-5-carbaldehído con triamino y tetraminopirimidina
para la obtención de pirimido[4,5-b][1,4]diazepinas.
Obtener nuevas (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-2-tioxo-4-onas a partir de rodaninas N-
sustituidas y aldehídos que contienen el fragmento tiazólico.
Elucidar las estructuras de los precursores y productos obtenidos mediante el uso de
técnicas espectroscópicas como; FT-IR, RMN-1H,
13C, experimentos
bidimensionales como COSY, HMBC, HSQC y NOESY, espectrometría de masas
y difracción de rayos X en el caso de obtener monocristales.
Suministrar los compuestos obtenidos al National Cancer Institute (USA) con el fin
de evaluar la actividad antitumoral y a la Universidad Nacional de Rosario
(Argentina) para evaluar la actividad antifúngica.
20
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1 PARTE 1. SÍNTESIS DE COMPUESTOS HETEROCÍCLICOS
NITROGENADOS DE 5 Y 7 MIEMBROS A PARTIR DEL 2,4-DICLOROTIAZOL-
5-CARBALDEHÍDO
En esta primera sesión, se describen y discuten protocolos enmarcados en el concepto de la
“Química verde” para la síntesis de 4,5-dihidro-1H-pirazoles derivados de 2,4-
diclorotiazol-5-carbaldehído y 4-cloro-2-morfolinotiazol-5-carbaldehído, y pirimido[4,5-
b]diazepinas derivadas de compuestos carbonílicos α,β-insaturados basados en 2,4-
diclorotiazol-5-carbaldehído, a partir de reacciones de cicloadición empleando hidrato de
hidracina, triamino y tetraaminopirimidina.
4.1.1 Síntesis de 4,5-dihidro-1H-pirazoles derivados del 2,4-diclorotiazol-5-
carbaldehído.
Debido a la versatilidad sintética característica de los compuestos carbonílicos α,β-
insaturados y el amplio espectro de actividad biológica que presentan los 4,5-dihidro-1H-
pirazoles, en un primer acercamiento para la obtención de nuevos compuestos con
diversidad estructural, se realizó una reacción bicomponente entre el compuesto carbonílico
α,β-insaturado 75b obtenido previamente a partir de 2,4-diclorotiazol-5-carbaldehído
empleando la metodología reportada por Kotlyar, V., y colaboradores69
e hidrato de
hidracina 76, Esquema 13.
Se realizó un total de 4 ensayos; a temperatura ambiente, calentamiento convencional a
reflujo e irradiación con microondas, Tabla 1, sin embargo ningún ensayo arrojó resultados
favorables, el seguimiento por CCD mostró una mezcla compleja de reacción. Se
implementó otra metodología, en la cual se disminuyó la temperatura de reacción a 10 °C
empleando un baño de hielo y agitando constantemente por un periodo de 60 minutos. El
control por CCD mostro la aparición de un único producto. El sólido formado, se aisló por
filtración a vacío, realizando lavados con agua, sin ningún método de purificación
adicional. La formación del producto se comprobó mediante RMN-1H.
21
Esquema 13. Formación del 3-(4-clorofenil)-5-(2,4-diclorotiazol-5-il)-4,5-dihidro-1H-
pirazol 77b.
Tabla 2. Condiciones de reacción para la formación del 4,5-dihidro-1H-pirazol77b.
Entrada Condiciones Disolvente Tiempo de reacción
a T. Ambiente EtOH 30 minutos
b Calentamiento a reflujo EtOH 10 minutos
c MW, 100 W/100 °C EtOH 1 minuto
d 10 °C EtOH 60 minutos
Se extrapoló las condiciones de reacción establecidas, para la obtención de la serie de
compuestos 77a-f, mezclando 1 mmol del compuesto 75a-f con 2 mmol de hidrato de
hidracina 76 en etanol, a una temperatura de 10 °C con agitación constante por un periodo
de 60-90 minutos. Los productos se obtuvieron con rendimientos de reacción buenos.
Tabla 3.
22
Tabla 3. Rendimientos y tiempos de reacción para la serie de compuestos 77a-f
Compuesto Sustituyente (R) Rendimiento (%)a
Tiempo de Reacción
77a H 85 90 min.
77b 4-Cl 88 60 min.
77c 4-F 93 60 min.
77d 4-CH3 76 90 min.
77e 4-OCH3 72 90 min.
77f 3,4,5-triOCH3 59 90 min.
aDatos obtenidos considerando los reactivos limitantes, compuestos 75a-f.
La caracterización de los compuestos se llevó a cabo mediante las técnicas espectroscópicas
FT-IR, RMN-1H y
13C, experimentos bidimensionales y espectrometría de masas. Para
discutir la caracterización de la serie de compuestos 77a-f se tomó como referencia los
datos espectroscópicos del compuesto 77b.
En el espectro de infrarrojo del compuesto 77b, Figura 10 (Espectro B), se observa la
banda de vibración de tensión asociada a la funcionalidad –NH del anillo pirazolínico a
3203 cm-1
, como se puede observar, esta señal no aparece en el espectro del compuesto
precursor 75b. A menor número de onda, no se observa la banda de vibración de tensión
correspondiente al carbonilo y se observa en cambio las bandas asociadas a la vibración de
tensión de los enlaces C=C y C=N a 1640, 1600 y 1521 cm-1
23
Figura 10. Espectro infrarrojo de los compuestos 75b y 77b.
En el espectro RMN-1H y según la numeración para el compuesto 77b Figura 11, se
observa a campo alto un sistema de espines tipo AMX (corroborado empleando la Ec.1)
formado entre los protones diastereotópicos unidos al C-4 y el protón metínico C-5 del
anillo pirazolínico. A 2.95 ppm se observa un doble doblete con constantes de
acoplamiento vecinal y geminal de 3J = 10.5 y
2J = 16.3 Hz correspondiente al protón
diastereotópico H4A, a 3.63 ppm se observa un segundo doble doblete con constantes de
acoplamiento vecinal y geminal de 3J = 10.5 y
2J = 16.3 Hz correspondiente al protón
diastereotópico H4M, a 5.23 ppm se observa un falso triplete asociado al protón H5X. A
campo bajo, a 6.24 ppm se observa un singulete ancho asignado al protón –NH y los dos
dobletes a 7.40 y 7.61 ppm con constante de acoplamiento 3J = 7.5 Hz correspondientes a
los protones Hm y Ho del anillo bencénico.
-C=O
-C=C, -C=N
-C=C trans
c
-NH
-C=C, -C=N
A
B
24
En el espectro de RMN-13
C y DEPT-135 Figura 12, se observa un total de 10 señales
correspondientes a todos los carbonos del compuesto 77b los cuales fueron elucidados
empleando experimentos bidimensionales de análisis (HSQC y HMBC). A 40.5 ppm y con
ayuda del DEPT-135, se observa la señal con fase inversa del carbono metilénico C-4, a
57.2 ppm la señal del carbono metínico C-5. A campo bajo se observa; a 127.3 ppm la señal
correspondiente al carbono Cm, a 128.9 ppm la señal del carbono Co, a 130.3 ppm la señal
del carbono Cp y a 135.3 ppm la señal del carbono Ci. Las señales correspondientes a los
carbonos C4’, C5’ y C2’ se observan a 133.3, 135.7 y 150.7 ppm respectivamente.
Finalmente, a 151.5 ppm, se observa la señal asociada al carbono C3 del sistema
pirazolínico.
Con base en los buenos resultados de actividad biológica que han presentado los
compuestos pirazolínicos N-acilados y N-formilados,28,33
se llevó a cabo una reacción de N-
sustitución a partir de los compuestos 77a-f empelando anhídrido acético y ácido fórmico.
En un primer ensayo, se sometió el compuesto 77b a reacción bajo calentamiento a reflujo
con anhídrido acético y ácido fórmico en recipientes por separado, después de 30 minutos
de reacción, el control por CCD evidenció la formación de un nuevo producto, sin embargo
la purificación solo se pudo realizar empleando extracción con solvente orgánico,
descartando el uso de este tipo de solventes. Por tal razón, se realizó la reacción a
temperatura ambiente, agitando por un periodo de 60 minutos y realizando control con
CCD. El producto formado después de adicionar al crudo de reacción agua y etanol 1:1 se
aisló por filtración a vacío. Se extrapoló la metodología para los compuestos 77a-f
obteniendo resultados favorables y buenos rendimientos de reacción. Tabla 4.
25
Figura 11. Espectro RMN-1H del compuesto 75b en CDCl3, 400 MHz.
Figura 12. Espectro RMN-13
C y DEPT-135 del compuesto 75b en CDCl3, 100 MHz.
Ho Hm
H4H4A H5X
-NH
Co
Cm C5
C3
C4
26
Tabla 4. Rendimientos y tiempos de reacción para la serie de compuestos 78/79a-f
Compuesto Sustituyente (R) Rendimiento (%)a
Tiempo de Reacción
78 a H 81 60 min.
78 b 4-Cl 79 60 min.
78 c 4-F 86 60 min.
78 d 4-CH3 78 60 min.
78 e 4-OCH3 62 60 min.
78 f 3,4,5-triOCH3 64 60 min.
79 a H 86 60 min.
79 b 4-Cl 90 60 min.
79 c 4-F 93 60 min.
79 d 4-CH3 80 60 min.
79 e 4-OCH3 78 60 min.
79 f 3,4,5-triOCH3 68 60 min.
aDatos obtenidos considerando los reactivos limitantes, compuestos 77a-f.
La caracterización de los compuestos se llevó a cabo mediante las técnicas espectroscópicas
FT-IR, RMN-1H y
13C, experimentos bidimensionales y espectrometría de masas. Para
discutir la caracterización de la serie de compuestos 78/79a-f se tomó como referencia los
datos espectroscópicos de los compuestos 78d y 79d.
En los espectros de infrarrojo de los compuestos 78d y 79d se observa la banda de
vibración de tensión correspondiente al grupo carbonilo; del grupo acilo a 1687 cm-1
para el
compuesto 78b; del grupo formilo a 1682 cm-1
para el compuesto 79d. La banda
correspondiente al grupo –NH a 3207 cm-1
del anillo pirazolínico para el compuesto 77d
27
desaparece en los espectros de los compuestos 78d y 79d, hecho que indica la posible N-
sustitución.
Con respecto a la caracterización mediante RMN-1H, en los espectros correspondientes
para los compuestos 78d y 79d, Figura 14, se observa la formación de un sistema de spines
tipo AMX (Corroborado mediante la Ec. 1 para el compuesto 78d).
Debido a que los espectros de los compuestos 78d y 79d presentan similaridad, se hará el
análisis del compuesto 78d; a 2.43 ppm se observa un singulete que integra para seis
protones correspondiente a los grupos metilo; del grupo acilo en N-1 y el grupo p-metilo, a
3.29 ppm un doble doblete con constantes de acoplamiento vecinal y geminal de 3J = 5.1 y
2J = 17.8 Hz asociado al protón diastereotópico H4A, a 3.81 ppm un doble doblete con
constantes de acoplamiento vecinal y geminal de 3J = 11.8 y
2J = 17.8 Hz del protón
diastereotópico H4M, a 5.79 ppm el doble doblete del protón estereogénico H5 con
constantes de acoplamiento vecinales de 2J = 5.1 y
2J = 11.8 Hz. A campo bajo, se observa a
7.27 y 7.65 dos dobletes con constantes de acoplamiento de 3J = 8.0 Hz correspondientes a
los protones Hm y Ho del anillo bencénico.
El compuesto 79d presenta señales similares en el espectro de RMN-1H en comparación al
compuesto 78d, pero al tratarse de un compuesto formilado, la señal del protón del grupo
formilo se observa a 8.92 ppm y un singulete a campo alto que integra para tres protones
correspondiente al grupo para-metilo.
28
Figura 13. Espectros de infrarrojo de los compuestos 77d, 78d y 79d.
En el espectro de RMN-13
C, Figura 15, se observa a 21.5 ppm la señal correspondiente al
grupo p-CH3, a 21.80 ppm la señal asignada al grupo CH3 del grupo acilo, a 40.8 ppm y
con ayuda del DEPT-135 se observa con fase inversa la señal del carbono metilénico C-4, a
52.8 ppm se observa la señal del carbono metínico C-5. A campo bajo se observa; a 126.6
ppm la señal correspondiente al carbono Cm, a 127.7 ppm la señal del carbono Cp, a 129.6
ppm la señal del carbono Co y a 141.3 ppm la señal del carbono Ci. Las señales
correspondientes a los carbonos C4’, C5’ y C2’ se observan a 133.2, 134.0 y 149.7 ppm
respectivamente. A 153.9 ppm se observa la señal correspondiente al C3 del sistema
pirazolínico y a 169.2 ppm la del carbonilo. El espectro de 13
C-RMN del compuesto 79d
-NH
-C=C, -C=N -C=O
-C=C, -C=N
-C=C, -C=N
-C=O
A
B
C
29
presentó resultados similares con respecto al compuesto 78d, con la diferencia en la señal
correspondiente al grupo carbonilo, la cual se observó a 160.0 ppm.
Figura 14. Espectro RMN-1H de los compuestos 78d y 79d en CDCl3, 400 MHz.
Ho Hm H4 H4A H5X
-pCH3
Ho Hm H4 H4A H5X
-COCH3
30
Figura 15. Espectro RMN-13
C y DEPT-135 de los compuestos 78d y 79d en CDCl3, 100
MHz.
C5 C4
C3
C=O
C3
C=O
C5 C4
31
El espectro de masas para el compuesto 78d presenta el pico del ion molecular a m/z (%)
353 (2.81) con muy pocas fragmentaciones, observando el pico base a m/z (%) 83 (100).
Por el contrario, en el espectro de masas para el compuesto 79d se observa el pico del ion
molecular a m/z (%) 341/339 (22.7/32.5), con el perfil isotópico característico para un
compuesto diclorado, Figura 16. El espectro muestra fragmentaciones típicas para este tipo
de compuestos, Esquema 13, donde el pico a m/z (%) 312/310 (8.9/11.7) conserva el perfil
isotópico para dos cloros y corresponde a la pérdida de CHO, el pico a m/z (%) 306/304
(11.8/31.3) indica pérdida de cloro en el fragmento tiazólico y se evidencia con el cambio
en el perfil isotópico, el pico a m/z (%) 278/276 (87.2/35.9) indica la pérdida de CO de la
especie III. La especie IV sufre una pérdida del fragmento 4-clorotiazólico para formar la
especie V, con el pico a m/z (%) 159 (37.8)
Esquema 14. Posible esquema de fragmentación del compuesto 79d.
32
Figura 16. Espectro de masas del compuesto 79d.
4.1.2 Síntesis de 4,5-dihidro-1H-pirazoles derivados de 4-clorotiazol-2-morfolino-5-
carbaldehído.
Con base en los buenos resultados de actividad biológica que han demostrado tener los
compuestos cuyo esqueleto contiene el fragmento morfolino,70-72
se sometió a reacción, el
aldehído 73 con morfolina 80 en acetonitrilo a temperatura ambiente, con el fin de obtener
el aldehído 81, Esquema 14. Posteriormente el compuesto 81 se sometió a reacción de
condensación tipo Claisen-Schmidt con las acetofenonas sustituidas 74a-f, siguiendo la
metodología reportada por Kotlyar, V. N., y colaboradores,69
con modificación en el
método de purificación, donde se realizó por filtración a vacío y realizando lavados con
etanol. Se extrapoló las condiciones empleadas para obtener los compuestos previamente
descritos 77a-f.
En este nuevo caso el compuesto 82b se sometió a reacción de cicloadición con hidrato de
hidracina 76 bajo cuatro metodologías diferentes; reacción por calentamiento a reflujo que
requirió purificación adicional mediante extracción con diclorometano; reacción bajo
irradiación con microondas donde se observó mediante el control por CCD, la formación de
subproductos; y reacción a 10 °C, donde al transcurso de una hora la presencia del producto
era muy baja. De esta manera la condición de reacción óptima fue a temperatura ambiente,
la cual al transcurso de 1 hora evidenció la formación de un solo producto mediante el
33
control por CCD y el sólido blanco precipitado se aisló por filtración a vacío realizando
lavados con agua y etanol para eliminar el exceso de hidracina. Esquema 14.
Esquema 15. Formación del 3-(4-clorofenil)-5-(4-clorotiazol-2-morfolino-5-il)-4,5-
dihidro-1H-pirazol 83b.
Tabla 5. Condiciones de reacción para la formación del 4,5-dihidro-1H-pirazol83b
Entrada Condiciones Disolvente Tiempo de reacción
a T. Ambiente EtOH 60 minutos
b Calentamiento a reflujo EtOH 30 minutos
c MW, 100 W/100 °C EtOH 1 minuto
d 10 °C EtOH 60 minutos
A los 30 minutos después de aislar el compuesto blanco, presentó coloración amarilla y el
control por CCD evidenció la formación de subproductos. Al realizar la caracterización por
RMN-1H la solución traslúcida se tornó amarilla cuando se disolvió en el disolvente
deuterado (CDCl3) y al cabo de un minuto presentó coloración café. La rápida
34
descomposición del producto no permitió su caracterización y almacenaje, por lo cual se
procedió a realizar un ensayo de N-sustitución, empleando la metodología descrita
anteriormente para los compuestos 78/79a-f, de esta manera se sometió el compuesto 83b
inmediatamente aislado a reacción con anhídrido acético y ácido fórmico durante 1 hora a
temperatura ambiente, Esquema 14, y el control por CCD evidenció la formación de un
solo producto el cual precipitó y se aisló por filtración a vacío. El compuesto aislado no
presentó descomposición y se pudo caracterizar mediante RMN-1H. De esta manera, se
extrapoló la metodología para la síntesis de la serie de compuestos 84/85a-f, donde, en un
primer paso se sometió a reacción 1 mmol de los compuestos 82a-f con 3 mmol de hidrato
de hidracina, en etanol durante una hora a temperatura ambiente y agitación constante. El
sólido aislado correspondiente a los compuestos 83a-f se dividió en porciones de 0.3 mmol
las cuales se sometieron a reacción con anhídrido acético y con ácido fórmico en
experimentos aislados, durante 1 hora a temperatura ambiente y con agitación constante.
Después de adicionar agua al crudo de reacción se formó un precipitado blanco el cual se
aisló por filtración a vacío, realizando lavados con agua:etanol 1:1 obteniendo de esta
manera los compuestos 84/85a-f puros y con buenos rendimientos de reacción, Tabla 6.
Esquema 16. Síntesis de N-acil y N-formil-3-(4-clorofenil)-5-(4-clorotiazol-2-morfolino-5-
il)-4,5-dihidro-1H-pirazol 84/85b.
35
Tabla 6. Rendimientos y tiempos de reacción para la serie de compuestos 84/85a-f
Compuesto Sustituyente (R) Rendimiento (%)a
Tiempo de reacción
84a H 84 60 min.
84b 4-Cl 86 60 min.
84c 4-F 71 60 min.
84d 4-CH3 67 60 min.
84e 4-OCH3 62 60 min.
84f 3,4,5-triOCH3 60 60 min.
85a H 66 60 min.
85b 4-Cl 72 60 min.
85c 4-F 54 60 min.
85d 4-CH3 60 60 min.
85e 4-OCH3 59 60 min.
85f 3,4,5-triOCH3 56 60 min.
aDatos obtenidos considerando los reactivos limitantes, compuestos 83a-f.
La caracterización de los compuestos se llevó a cabo mediante las técnicas espectroscópicas
FT-IR, RMN-1H y
13C, experimentos bidimensionales y espectrometría de masas. Para
discutir la caracterización de la serie de compuestos 84/85a-f se tomó como referencia los
datos espectroscópicos de los compuestos 84e y 85e.
En los espectros de infrarrojo de los compuestos 84e y 85e, Figura 17, se observa la banda
de vibración de tensión correspondiente al grupo carbonilo; del grupo acilo a 1671 cm-1
para el compuesto 84e; del grupo formilo a 1673 cm-1
para el compuesto 85e.
36
Con respecto a la caracterización mediante RMN-1H, en los espectros correspondientes
para los compuestos 84e y 85e Figura 18, se observa la formación de un sistema de spines
tipo AMX (Corroborado mediante la Ec. 1 para el compuesto 84e).
Debido a que los compuestos presentan similaridad, se hará el análisis del compuesto 84e; a
2.39 ppm se observa un singulete correspondiente al grupo metilo del grupo acilo en N-1, a
3.22 ppm se observa el primer doble doblete con constantes de acoplamiento vecinal y
geminal de 3J = 4.6 y
2J = 17.6 Hz asociado al protón diastereotópico H4A, a 3.35-3.42 ppm
se observa un multiplete correspondiente a los protones metilénicos CH2-N-CH2 del
fragmento morfolínico, a 3.68 ppm se observa el segundo doble doblete con constantes de
acoplamiento vecinal y geminal de 3J = 11.8 y
2J = 17.8 Hz asignado al protón
diastereotópico H4M, a 3.73-3.76 el segundo multiplete de los protones metilénicos CH2-O-
CH2 del fragmento morfolínico, a 5.76 ppm se observa el tercer doble doblete
correspondiente al protón estereogénico H5X con constantes de acoplamiento vecinales de 3J
= 5.1 y 3J = 11.8 Hz. A campo bajo, se observa a 6.96 y 7.69 ppm dos dobletes con
constante de acoplamiento de 3J = 8.7 Hz asociado a los protones Hm y Ho.
En el espectro RMN-1H del compuesto 85e no está definido el sistema de protones
diastereotópicos debido a un solapamiento de señales entre el protón H4M y los protones
metilénicos CH2-O-CH2. La señal del protón del grupo formilo, se observa a 8.89 ppm.
En el espectro de RMN-13
C, Figura 19, se observa a 21.8 ppm la señal correspondiente al
CH3 del grupo acilo, con ayuda del DEPT-135 y el experimento HSQC, Figura 20, se
observa; con fase inversa la señal del carbono metilénico C-4 a 40.8 ppm, con fase inversa
la señal de los carbonos metilénicos simétricos CH2-N-CH2 del fragmento morfolino, a
52.9 ppm se observa la señal asociada al carbono metínico C-5, a 55.4 ppm la señal
correspondiente al carbono del grupo pOCH3 y a 65.9 ppm la señal con fase inversa de los
carbonos metilénicos simétricos CH2-O-CH2 del fragmento morfolínico. A campo bajo se
observa; a 114.2 ppm la señal del carbono Cm, a 118.3 la señal del carbono C5’, a 123.7
ppm la señal del carbono Ci, a 128.2 ppm la señal del carbono Co, a 132.1 ppm la señal del
37
carbono C4’, a 153.8 ppm la señal correspondiente al C-3 (C=N) del anillo pirazolínico, a
161.4 ppm la señal del carbono Cp, a 167.5 ppm la señal del carbono C2’ y finalmente la
señal a 168.76 ppm correspondiente al carbono carbonílico del grupo acilo.
El espectro RMN-13
C del compuesto 85e muestra señales similares, con la diferencia en la
señal correspondiente al carbono carbonílico, observada a 159.8 ppm.
Figura 17. Espectros de infrarrojo de los compuestos 84e y 85e.
-C=C, -C=N -C=O
-C=C, -C=N -C=O
-CH2-
=C-H
-CH
-CH2-
-CH
A
B
38
Figura 18. Espectro RMN-1H de los compuestos 84e y 85e en CDCl3, 400 MHz.
Ho Hm
H4
H4A
H5X
-pOCH3
-CHO
CH2-O-CH2
CH2-N-CH2
HHm H4 H4A H5X
CH2-O-CH2 CH2-N-CH2
-pOCH3
39
Figura 19. Espectro RMN-13
C y DEPT-135 de los compuestos 84e y 85e en CDCl3, 100
MHz.
C5
C4
CH2-O-CH2 CH2-N-CH2
C5
C4
CH2-O-CH2 CH2-N-CH2
C=O
40
Figura 20. Experimento HSQC del compuesto 84e.
El espectro de masas para el compuesto 84e presenta el pico del ion molecular a m/z (%)
420 (2.3) con pocas fragmentaciones hasta el pico base en m/z (%) 85 (100). Por el
contrario en el espectro de masas para el compuesto 85e se observa el pico del ion
molecular a m/z (%) 408/406 (75.6/28.3), con el perfil isotópico característico para un
compuesto monoclorado, Figura 21. El espectro muestra fragmentaciones típicas para este
tipo de compuestos, Esquema 17, donde solo el pico a m/z (%) 275/273 (26.1/12.4)
conserva el perfil isotópico para un cloro y corresponde a un rearreglo para formar la
especie VI que contiene un anillo de 3 miembros, el pico a m/z (%) 371 (53.5) supone una
pérdida de cloro en el fragmento tiazólico, el pico a m/z (%) 343 (29.5) supone la pérdida
de CO de la especie III que sufre una pérdida del grupo metilo unido al oxígeno para
formar la especie IV, con el pico a m/z (%) 328 (33.9). El pico base a m/z (%) 265 (100)
H4
CH2-O-CH2 CH2-N-CH2
H4A
CH2-O-CH2
CH2-N-CH2
C-4
41
corresponde a la especie V, formada después de que la especie II pierde el grupo p-
metoxifenilo.
Esquema 17. Posible ruta de fragmentación del compuesto 85e.
42
Figura 21. Espectro de masas del compuesto 85d.
4.1.3 Síntesis de 8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepinas a partir de 2,4-
diclorotiazol-5-carbaldehído.
Debido a la importancia que presentan las diazepinas dado su amplio espectro de actividad
biológica discutido en la sección 1.1.3, en un acercamiento para la obtención de nuevos
compuestos del tipo diazepínico con diversidad estructural, se planteó la reacción
bicomponente del triamino y la tetraaminopirimidina 86 y 87 con los compuestos
carbonílicos α,β-insaturados 75a-f, Esquema 18.
La reacción modelo se llevó a cabo a partir del compuesto 75a con la triaminopirimidina
86, bajo 6 metodologías diferentes, Tabla 7. El calentamiento convencional a reflujo,
empleando etanol o metanol como disolventes con ácido acético en proporción 10:1,
entradas a y b, no se observó cambio significativo en la reacción después de 48 horas. Se
decidió realizar la reacción bajo irradiación con microondas, empleando DMF como
disolvente en un primer caso y DMF en presencia de + BF3OEt2, entradas c y d, sin
embargo en ambos casos se observó una mezcla compleja de productos. Se realizó la
reacción a reflujo sin catalizadores y empleando los disolventes ya utilizados, DMF, EtOH
y MeOH, entradas e, f y g, en el primer caso, al transcurso de 2 horas la CCD evidenció el
consumo del compuesto 75a y la aparición de un producto color amarillo, el cual precipitó
y fue aislado y caracterizado mediante RMN-1H y correspondió al compuesto inesperado
90, figura 22, producto de la descomposición de la DMF y un ataque nucleofílico por parte
43
de la dimetilamina. El segundo caso, empleando EtOH, transcurrió con poco éxito, al cabo
de 24 horas de reacción la presencia de precursores era muy alta, según el control por CCD,
finalmente en el caso del MeOH, la reacción fue altamente exitosa, comprobando con CCD
la formación de un producto mayoritario al transcurso de 24 horas de reacción. La reacción
requirió neutralización con NH4OH 6M y extracción inmediata con diclorometano. El
producto formado se aisló empleando cromatografía de columna y La caracterización por
RMN-1H, corroboró la estructura. La regioselectividad de la reacción es específica, dado el
ataque nucleofílico del grupo amino en posición C-5 sobre el grupo carbonilo del
compuesto carbonílico α,β-insaturado, lo que produce un único producto. La
regioselectividad se discutirá más adelante, Figura 26.
Esquema 18. Formación de la 4-amino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-fenil-8,9-dihidro-7H-
pirimido[4,5-b][1,4]diazepina 88a.
Tabla 7. Condiciones de reacción para la formación de la 8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-
b][1,4]diazepina 88a.
Entrada Condiciones Disolvente Tiempo de reacción
a Calentamiento a reflujo EtOH/AcOH 10:1 48 horas
b Calentamiento a reflujo MeOH/AcOH 10:1 48 horas
c MW, 80 W/120 °C DMF 5 minutos
d MW, 80W/120 °C DMF + BF3OEt2 3 minutos
e Calentamiento a reflujo DMF 2 horas
f Calentamiento a reflujo EtOH 24 horas
g Calentamiento a reflujo MeOH 24 horas
44
Figura 22. Producto inesperado de reacción.
Se extrapoló las condiciones empleadas en la reacción anteriormente descrita para obtener
los compuestos 88/89a-g. De esta manera, se sometió a reacción 0.5 mmol de los
compuestos carbonílicos α,β-insaturados 75a-g con 0.6 mmol de la triaminopirimidina 86 o
tetraaminopirimidina 87, empleando metanol como disolvente, llevando la mezcla de
reacción a reflujo con agitación constante durante 24 horas o 30 horas en el caso de los
sustituyentes electrodadores. La reacción se trató con NH4OH 6M, realizando extracción
con diclorometano y purificación por cromatografía de columna con una mezcla 60:1
DCM:MeOH, obteniendo los compuestos deseados con buenos rendimientos de reacción,
Tabla 8.
La caracterización de los compuestos se llevó a cabo mediante las técnicas espectroscópicas
FT-IR, RMN-1H y
13C, experimentos bidimensionales y espectrometría de masas. Para
discutir la caracterización de la serie de compuestos 88/89a-f se tomó como referencia los
datos espectroscópicos de los compuestos 88c y 89c.
En los espectros de infrarrojo de los compuestos 88c y 89c, Figura 23, se observan las
bandas de vibración de tensión correspondientes a los grupos amino; del grupo –NH
diazepínico a 3460 cm-1
y del grupo amino a 3272 y 3218 cm-1
para el compuesto 88c; del
grupo –NH diazepínico a 3475 cm-1
y las bandas correspondientes a los grupos amino en
posición 2 y 4, se encuentran solapadas en un rango de 3309-3446 cm-1
.
Con respecto a la caracterización mediante RMN-1H, en los espectros de los compuestos
88c y 89c, Figura 24, se observa la formación de un sistema de spines tipo AMX
(Corroborado mediante la Ec. 1 para el compuesto 88c).
45
Tabla 8. Rendimientos y tiempos de reacción de los compuestos 84/85a-f
Compuesto Sustituyente (R) Rendimiento (%)a
Tiempo de Reacción
88a H 57 24 h
88b 4-Cl 68 24 h
88c 4-F 71 24 h
88d 4-CH3 55 24 h
88e 4-OCH3 56 30 h
88f 3,4,5-triOCH3 50 30 h
88g 3,4-metilendioxi 62 30 h
89a H 59 24 h
89b 4-Cl 72 24 h
89c 4-F 78 24 h
89d 4-CH3 59 24 h
89e 4-OCH3 53 30 h
89f 3,4,5-triOCH3 49 30 h
89g 3,4-metilendioxi 58 30 h
aDatos obtenidos considerando los reactivos limitantes, compuestos 75a-g.
En el espectro RMN-1H del compuesto 88c, Figura 24, se observa; a 3.00 ppm el primer
doble doblete con constantes de acoplamiento vecinal y geminal de 3J = 2.1 y
2J = 14.5 Hz
correspondiente al protón diastereotópico H7A, a 3.83 ppm el segundo doble doblete con
constantes de acoplamiento vecinal y geminal de 3J = 5.7 y
2J = 14.5 Hz asociado al protón
diastereotópico H7M, a 5.76 ppm un falso triple doblete asignado al protón estereogénico
H8X. Se observa a 6.66 ppm el singlete ancho del grupo 4-NH2, a 7.19 ppm un falso triplete
46
correspondiente a los protones Hm, a 7.73 ppm el doblete del protón –NH, a 7.83 ppm un
singulete correspondiente al protón H-2 y a 7.88 un doble doblete con constantes de
acoplamiento de 3JHF = 5.5 y
3J = 9.0 Hz asociado al protón Ho. En el espectro RMN-
1H
del compuesto 89c también se observa el sistema de spines tipo AMX y las señales
restantes son similares al espectro RMN-1H del compuesto 88c, la diferencia radica en la
nueva señal a 5.20 ppm correspondiente al grupo 2-NH2.
Figura 23. Espectros de infrarrojo de los compuestos 88c y 89c.
-NH, 4-NH2
-NH
4-NH2
2-NH2
-C=C, -C=N
-C=C, -C=N
A
B
47
Figura 24. Espectro RMN-1H de 88c en DMSO-d6 y 89c en CDCl3, 400 MHz.
Ho
Hm
H7 H7A H8X H2
-NH
4-NH2
Ho
Hm
H7 H7A H8X
-NH
4-NH2
4-NH2
48
En el espectro RMN-13
C y DEPT-135 del compuesto 88c, Figura 25, se observa a 36.8
ppm con fase inversa la señal del carbono metilénico C-7, a 56.0 ppm la señal del carbono
metínico C-8, a 108.4 ppm la señal correspondiente al carbono puente C4a, a 115.5 ppm se
observa un doblete con constante de acoplamiento 2JCF = 21.5 Hz correspondiente al Cm, a
129.5 ppm un doblete con constante de acoplamiento 3JCF = 8.6 Hz del Co, a 130.4 ppm la
señal del carbono C4’, a 136.2 ppm un doblete con constante de acoplamiento 4JCF = 3.0 Hz
correspondiente al Ci, a 139.7 ppm la señal asociada al carbono C5’, a 149.4 ppm la señal
del carbono C4, a 152.5 ppm la señal correspondiente al carbono puente C9a (determinante
en la regioselectividad de la reacción), a 156.0 ppm la señal correspondiente al C2, a 161.7
ppm se observa el doblete correspondiente al Cp, con la señal a 162.4 ppm se encuentra
solapada la señal del C6, finalmente, a 164.9 ppm se observa la señal del carbono C2’ del
fragmento tiazólico. En el espectro RMN-13
C y DEPT-135 del compuesto 89c se observan
señales similares que corresponden a la estructura planteada.
Para determinar la regioselectividad de la reacción, fue necesario acudir al experimento
HMBC del compuesto 88c, Figura 26. Como se puede observar en el espectro, la señal del
protón H7X acopla a 3 enlaces (línea punteada) con el carbono puente 9a, la única
posibilidad de acoplamiento para otro protón a 3 enlaces la presenta H-2 del fragmento
pirimidínico (línea en negrilla). Este hecho deja en evidencia que la reacción sucede a
través de un ataque nucleofílico por parte del grupo 5-amino sobre el grupo carbonilo y un
posterior cierre bajo una adición tipo Michael al carbono β, así, el regioisómero obtenido es
el correspondiente a la estructura planteada y no el regioisómero de 88c, en el cual no se
observaría este sistema de acoplamiento, Esquema 19.
Se realizó cristalización del compuesto 88b, empleando disolventes como MeOH, EtOH,
DMF y DMSO. La cristalización en DMF condujo a la formación de monocristales aptos
para realizar un estudio de difracción de rayos X. Como se puede observar en la Imagen 1,
el diagrama ortep para el compuesto 88b corrobora la estructura planteada y comprueba la
regioselectividad de la reacción.
49
Figura 25. Espectro RMN-13
C y DEPT-135 de 88c en DMSO-d6 y 89c en CDCl3, 100
MHz.
Co Cm
C7
C8 C2
Co Cm C7
C8
50
Figura 26. Experimento HMBC del compuesto 88c.
Esquema 19. Posible ruta para la obtención del compuesto 88c.
C9a
H8X H2
51
Imagen 1. Diagrama ortep del compuesto 88b.
En el espectro de masas del compuesto 88c, Figura 27, se observan pocas fragmentaciones
importantes, a m/z (%) 410/408 (20.4/30.8) se observa el pico del ion molecular I con el
perfil isotópico característico de un compuesto diclorado, el cual por pérdida de cloro forma
la especie II que aparece a m/z (%) 375/373 (28.0/77.9) con el perfil isotópico de un
compuesto monoclorado. El pico base a m/z (%) 229 (100) es producto de la fragmentación
del anillo diazepínico, al sufrir perdida del fragmento III que conduce a la formación de la
especie IV de tipo purínico, altamente estable. Esquema 20.
52
Figura 27. Espectro de masas del compuesto 88c.
Esquema 20. Posible ruta de fragmentación en espectrometría de masas del compuesto
88c.
53
4.2 PARTE 2. SÍNTESIS DE (Z)-5-HETARILIDEN-1,3-TIAZOL-2-TIOXO-4-ONAS,
BASADOS EN 2,4-DICLOROTIAZOL-5-CARBALDEHÍDO
4.2.1 Síntesis de nuevas (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-2-tioxo-4-onas
Debido a la importancia que han presentado los derivados de rodaninas y los derivados del
tiazol, se planteó la reacción entre cuatro aldehídos tiazólicos diferentes, 90a-d y cinco
rodaninas N-sustituidas diferentes 93, 94, 95, 96 y 97.
Para llevar a cabo la síntesis de los aldehídos 90a-d, se siguió la metodología reportada por
Kotlyar, V. N., y colaboradores,69
sintetizando el aldehído 90a, el cual mediante reacción
de sustitución nucleofílica con morfolina y pirrolidina, condujo a la formación de los
aldehídos 90d y 90c. El aldehído 90d se obtuvo a partir de tiourea y ácido cloroacético bajo
una reacción de ciclación, posterior cloración y formilación tipo Vilsmeier-Haack.
Esquema 21.
Esquema 21. Síntesis de los aldehídos tiazólicos 90a-d.
Se sintetizó la rodanina N-sustituida 94 análoga del ácido 3-acético de la rodanina 93
(reactivo comercial empleado para obtener los compuestos 91a-d), pero con un sustituyente
54
bencilo sobre el metileno α. Para lograr dicho fin, se extrapoló la metodología “one-pot”
reportada por Nitsche, C., y colaboradores,56
donde en un primer paso se sometió a reacción
L-fenilalanina 91 con disulfuro de carbono en presencia de hidróxido de sodio bajo
irradiación con microondas, posteriormente se adicionó ácido cloroacético y se sometió a
irradiación con microondas y finalmente se acidificó con HCl 37% sometiendo de nuevo a
calentamiento bajo irradiación con microondas durante 20 minutos, obteniendo el
compuesto 94. Esquema 22.
Se realizó la síntesis de las rodaninas 95/96/97 empleando el método del
biscarbometoximetiltritiocarbonato I, el cual se obtuvo sometiendo a reacción sulfuro de
sodio con disulfuro de carbono y luego una sustitución nucleofílica sobre ácido
cloroacético, obtenido el biscarbometoximetiltritiocarbonato I, se realizó la síntesis acuosa
en combinación con aminas aromáticas 92a-c durante 24 horas a reflujo obteniendo las
rodaninas N-sustituidas 95/96 y 97, Esquema 22.
Esquema 22. Síntesis de las rodaninas N-sustituidas 94, 95, 96 y 97
Con las dos familias de compuestos sintetizados, se sometió a reacción de prueba el
aldehído 90b con el ácido 3-acético de la rodanina 93 bajo tres metodologías diferentes,
55
Tabla 9. Esquema 23. El calentamiento a reflujo empleando ácido acético como disolvente
y acetato de sodio, condujo a la formación del producto, sin embargo el tiempo de reacción
fue muy prolongado, entrada a. Cuando se realizó la reacción bajo irradiación con
microondas, el control por CCD evidenció la formación de muchos productos de reacción,
entrada c. La metodología más eficaz, fue el calentamiento a reflujo empleando ácido
acético como disolvente y acetato de amonio como catalizador durante 4 horas, entrada b,
el control por CCD evidenció la formación de un solo producto, que después de su
caracterización, correspondió al compuesto 98b.
Esquema 23. Síntesis de nuevas (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-2-tioxo-4-onas
Tabla 9. Condiciones de reacción para la formación de los
hetarilidenderivados98/99/100/101/102a-d.
Entrada Condiciones Disolvente Tiempos de reacción
a Calentamiento a reflujo AcOH + AcOONa 24 horas
b Calentamiento a reflujo AcOH + NH4OAc 4 horas
c MW, 100 W/100 °C DMF 1 minuto
56
La metodología establecida, se extrapoló para los precursores restantes, de esta manera se
sometió a calentamiento a reflujo una mezcla que consistió en; 0.5 mmol de rodanina N-
sustituida 93/94/95/96/97, 0.5 mmol de aldehído tiazólico 90a-d, en ácido acético y 2
equivalentes de acetato de amonio, durante un periodo de 4 horas. Los compuestos se
obtuvieron sin procesos complejos de purificación y con rendimientos de reacción buenos.
Tabla 10.
La caracterización de los compuestos se llevó a cabo mediante las técnicas espectroscópicas
de FT-IR, RMN-1H y
13C, experimentos bidimensionales y espectrometría de masas.
Debido a la variedad de compuestos sintetizados, se discutirán los datos espectroscópicos
de los compuestos 99a y 101b. En los espectros de infrarrojo de los compuestos 99a y
101b, Figura 28, a 3430 cm-1
se observa la banda de vibración de tensión del enlace O-H
del grupo –COOH, a1702 cm-1
se observa una banda ancha donde se encuentran solapadas
las bandas asociadas a la vibración de tensión del grupo COOH y C=O, a 1259 cm-1
la
banda asociada a la vibración del enlace C=S. Para el compuesto 101b; una banda a 1709
cm-1
correspondiente a la vibración del enlace C=O y la banda a 1232 cm-1
a la vibración
del enlace C=S.
Con respecto al espectro de RMN-1H del compuesto 99a, Figura 29, se observa; un doblete
a 3.60 ppm con constante de acoplamiento vecinal de 3J = 7.2 Hz correspondiente a los
protones metilénicos β, a 5.95 ppm un triplete con constante de acoplamiento 3J = 7.2 Hz
correspondiente al protón metínico α. A campo bajo se observa un multiplete a 7.10-7.18
ppm asignado a los protones Ho, a 7.19-7.27 un multiplete asociado a los protones Hm y Hp,
finalmente se observa la señal del protón vinílico H5’’. En el espectro de RMN-1H del
compuesto 101b, se observa; a 3.62-3.72 ppm un multiplete correspondiente a los protones
metilénicos CH2-N-CH2 del fragmento morfolínico, a 3.85-3.91 ppm un multiplete, donde
se encuentran solapadas las señales correspondientes a los protones CH2-O-CH2 del
fragmento morfolínico y el grupo –pOCH3. A campo bajo se observan dos dobletes a 7.22 y
7.94 ppm con constante de acoplamiento 3J = 8.9 Hz correspondientes a los protones Hm y
Ho respectivamente y la señal del protón vinílico H5’’ a 7.94 ppm.
57
Tabla 10.Rendimientos de reacción de los compuestos 98/99/100/101/102a-d.
Compuesto/R Rendimiento (%) Compuesto/R Rendimiento (%)
98a -Cl 82 99a -Cl 91
98b 73
99b 65
98c 61
99c 73
98d -NH2 78 99d -NH2 87
Compuesto/R Rendimiento (%) Compuesto/R Rendimiento (%)
100a -Cl 53 101a -Cl 88
100b 64
101b 76
100c 75
101c 68
100d -NH2 42 101d -NH2 71
Compuesto/R Rendimiento (%)
102a -Cl 69
102b 63
102c 55
102d -NH2 63
58
Figura 28. Espectros infrarrojo de los compuestos 99a y 101b.
En el espectro RMN-13
C y DEPT-135 del compuesto 99a, Figura 30, se observan las
señales más relevantes; a 33.7 ppm la señal con fase inversa correspondiente al carbono Cβ,
a 58.6 ppm la señal del carbono Cα, a 119.7 ppm la señal correspondiente al carbono
vinílico C5’’, a 124.9 ppm la señal del carbono Ci, a 127.2 ppm la señal del carbono Cp, a
128.6 ppm la señal del carbono Cm, a 129.1 ppm la señal del carbono Co, a 172.6 ppm la
señal del carbono carbonílico del grupo –COOH y finalmente a 189.6 ppm la señal del
carbono del grupo tiocarbonilo C=S.
En los espectros RMN-13
C y DEPT-135 del compuesto 101b, Figura 30, se observan las
señales más relevantes a; 48.2 ppm la señal con fase inversa de los carbonos metilénicos
CH2-N-CH2, a 55.5 ppm la señal del grupo pOCH3, a 65.9 ppm la señal con fase inversa de
los carbonos metilénicos CH2-O-CH2, a 114.8 ppm la señal del carbono Cm, a 123.0 ppm la
señal del carbono vinílico C5’’, a 129.3 ppm la señal del carbono Co, a 171.2 ppm la señal
-COOH
-COOH
-C=O
-C=O -C=S
-C=S
59
del carbono C2’ del fragmento tiazólico y finalmente la señal a 191.9 correspondiente al
carbono del grupo tiocarbonilo.
Figura 29. Espectro RMN-1H del compuesto 99a y 101b en CDCl3, 400 MHz.
Ho Hp y Hm
CH2-N-CH2
Hα
Hβ
H5’’
Ho Hm H5’’
CH2-O-CH2
pOCH3
60
Figura 30. Espectro RMN-13
C del compuesto 99a y 101b en CDCl3, 100 MHz.
Al compuesto 99a se le realizó polarimetría, empleando un equipo JASCO-P2000 con el
fin de determinar su actividad óptica. Los resultados mostraron una rotación óptica de -99
Cα Cβ
C5’’
Co,Cm, Cp
Co Cm
H5’’
CH2-N-CH2 CH2-O-CH2
C5’’ pOCH3
61
%, valor que indica, que la reacción no involucro el centro quiral en ningún momento, y el
compuesto es ópticamente puro.
El espectro de masas del compuesto 99a y 101b muestran el pico del ión molecular a m/z
(%) 445/443 (13/37) y m/z (%) 455/453 (35/74) sin fragmentaciones importantes,
corroborando de esta manera la presencia de los compuestos.
62
4.3 ESTUDIOS DE ACTIVIDAD BIOLÓGICA
4.3.1 Estudios de actividad antitumoral
Todos los productos obtenidos fueron ofrecidos al National Cancer Institute (NCI, USA)
para realizar estudios de actividad antitumoral in vitro. Los compuestos seleccionados por
el NCI empleando el programa COMPARE (subrayados en la Figura 31), fueron evaluados
a una dosis de 10 μM, frente a un panel de 60 líneas celulares tumorales humanas.
Realizado el primer ensayo a una dosis, el NCI escogió los compuestos 77d, 89d y 89g
para continuar al segundo ensayo con el propósito de determinar la actividad citostática
frente a 60 líneas celulares tumorales humanas, consistentes en 9 páneles de cáncer
conocidos (Leucemia, melanoma, cáncer de pulmón, colon, sistema nervioso central,
mama, ovario, riñón y próstata), realizando microdiluciones a 0.01, 0.1, 1.0, 10.0 y 100.0
μM mediante un protocolo de exposición continua durante 48 h empleando el ensayo de
tinción con sulforodamida B (SRB) para estimar el crecimiento celular. El procedimiento
general de esta metodología y la información complementaria relacionada con los patrones
de actividad sobre las líneas celulares ha sido previamente reportado en la literatura.73,74
En la Tabla 11 se encuentran reportados los datos suministrados por el NCI, expresados de
la siguiente manera:
GI50: concentración molar del compuesto requerida para inhibir el crecimiento de la línea
celular en un 50 %
LC50: Parametro de citotoxicidad; concentración molar para inhibir el 50% de las células
normales.
Los valores significativos de actividad antitumoral, son aquellos que presentan GI50< 3.0
μM y que su LC50 es mayor que 100μM, indicando una buena relación “costo-beneficio”,
en negrita se encuentran resaltados los mejores valores de GI50 reportados para cada
compuesto.
63
Figura 31. Compuestos ofrecidos y seleccionados por el NCI, USA, para realizar ensayos
de actividad antitumoral.
64
Tabla 11.Evaluación in vitro de los compuestos 77d, 89d y 89g.
Compuestos
Línea Celular
77d 89d 89g
GI50b (μM) LC50
c (μM) GI50
b (μM) LC50
c (μM) GI50
b (μM) LC50
b (μM)
Leukemia
CCRF-CEM
HL-60(TB)
K-562
MOLT-4
RPMI-8226
SR
2.75
10.4
3.63
3.58
3.86
2.54
˃100
˃100
˃100
˃100
˃100
˃100
3.21
2.04
1.68
4.06
4.99
2.25
˃100
˃100
˃100
˃100
˃100
76.7
3.02
36.1
0.54
5.91
4.66
1.90
˃100
˃100
˃100
˃100
˃100
˃100
Non Small Cell Lung
A549/ATCC
HOP-62
HOP-92
NCI-H226
NCI-H23
NCI-H460
NCI-H522
29.8
28.4
2.85
10.6
12.4
24.3
2.23
˃100
˃100
>100
67.5
53.1
>100
31.6
5.02
3.72
3.72
13.7
8.23
4.06
4.05
52.5
48.9
45.4
90.3
58.7
49.4
42.1
6.47
5.32
4.25
17.7
8.87
3.99
2.51
˃100
62.6
77.5
˃100
˃100
˃100
55.3
Colon Cancer
COLO205
HCC-2998
HCT-116
HCT-15
KM12
SW-620
2.17
16.9
3.39
3.78
5.56
4.87
8.9
68.0
71.5
>100
56.0
˃100
4.18
10.3
3.70
3.05
3.80
3.42
42.1
46.8
37.3
50.1
40.4
40.7
3.48
6.11
3.42
1.07
3.93
2.98
45.6
48.8
44.5
>100
73.6 >100
CNS Cancer
SF-268
SF-295
SF-539
SNB-19
SNB-75
5.65
25.1
4.58
20.0
3.66
˃100
˃100
˃100
˃100
˃100
5.68
3.06
2.69
5.51
1.63
67.3
36.4
33.1
47.2
38.1
9.84
2.21
2.22
4.83
1.39
92.2
39.8
33.6
˃100
61.4
65
Melanoma
LOXIMVI
MALME-3M
M14
MDA-MB-435
SK-MEL-2
SK-MEL-28
SK-MEL-5
UACC-257
UACC-62
3.25
11.2
3.47
3.25
5.47
10.9
3.51
16.0
6.94
54.5
75.5
79.0
>100
61.6
5.64
5.18
81.7
51.0
5.39
6.33
2.64
1.47
2.98
4.26
3.69
6.76
3.05
43.2
44.0
35.6
39.0
35.6
42.8
37.3
48.6
37.2
7.02
14.3
2.01
0.35
5.19
7.63
3.43
14.6
2.17
75.6
59.2
44.6
48.4
48.6
91.6
40.8
>100
63.9
Ovarian Cancer
IGROV1
OVCAR-3
OVCAR-5
OVCAR-8
NCI/ADR-RES
SK-OV-3
5.21
3.26
11.5
9.21
3.60
10.2
83.1
31.4
5.62
7.20
˃100
˃100
7.08
3.60
10.2
4.80
3.13
3.60
63.2
43.4
46.8
80.7
58.5
43.0
10.4
3.94
6.03
4.86
3.55
2.78
˃100
66.8
˃100
>100
˃100
˃100
Renal Cancer
786-0
A498
ACHN
CAKI-1
RXF393
SN12C
TK10
UO-31
4.06
33.1
4.58
1.18
18.4
4.02
-
6.62
˃100
57.5
7.82
8.36
12.9
62.3
-
>100
5.05
1.28
4.56
3.28
2.48
5.83
11.5
3.04
49.0
31.2
41.0
91.2
38.9
44.7
50.2
39.6
5.43
2.30
5.86
3.17
1.40
6.55
15.0
4.52
84.6
45.2
99.6
>100
36.5
59.8
˃100
87.1
Prostate Cancer
PC-3
DU-145
6.11
7.38
>100
˃100
5.89
11.2
73.1
52.4
5.15
8.45
˃100
˃100
Breast Cancer
MCF7
MDA-MB231/ATCC
HS578T
BT-549
T-47D
MDA-MB-468
3.28
3.12
16.8
2.89
2.68
2.60
72.9
>100
˃100
37.5
48.7
42.1
3.56
3.86
2.44
3.93
3.35
2.12
97.6
42.1
˃100
40.6
˃100
41.6
2.81
5.81
2.35
3.79
5.36
1.65
˃100
55.7
˃100
53.9
˃100
˃100
[a] Datos obtenidos a partir del ensayo in vitro realizado por el NCI en líneas celulares tumorales humanas. [b] GI50 es la concentración de la muestra que induce una reducción del 50% en el incremento proteíco neto (medido por
tinción de SRB) en las células de control durante la incubación de la muestra. Determinado a cinco niveles de
concentración (100, 10, 1,0, 0,1 y 0,01 μM). [c]LC50 es un parámetro de citotoxicidad y refleja la concentración molar
para inhibir el 50% de las células normales.
66
El compuesto 77d presentó actividad moderada frente a las líneas celulares; CCRF-CEM y
SR del panel leucemia, con valores GI50 de 2.75 y 2.54 μM, y LC50>100 μM,
respectivamente. También presentó actividad moderada frente a las líneas NCI-H226 y
NCI-H522 de cáncer de pulmón con valores GI50 de 2.85, 2.23 μM y LC50>100 μM y 31.6
μM respectivamente. La línea celular frente a la cual el compuesto presentó más
sensibilidad fue COLO 205 del panel de cáncer de colon, con un valor GI50 de 2.17 μM y
LC50 89.0 μM. La actividad contra las líneas BT-549, T-47D y MDA-MB-468 no se
considera buena, ya que a pesar de presentar valores GI50 de 2.89, 2.68 y 2.60 μM los
valores de LC50 fueron muy bajos <50 μM.
Con respecto al compuesto 89d, se observó una actividad moderada frente a todas las líneas
celulares del panel leucemia, con un rango de valores GI50 de 1.68-4.99 μM y LC50>100
μM. También presentó actividad moderada frente a la línea SNB-75 del panel de cáncer de
sistema nervioso central, con un valor GI50 de 1.63 μM, pero con un LC50 de 38.1 μM. Las
líneas celulares HS 578T y MDA-MB-468 del panel de cáncer de mama, fueron sensibles
ante el compuesto 89d con valores GI50 de 2.44, 2.12 μM y LC50>100 y 41.6 μM.
De los tres compuestos evaluados, 89g presentó los mejores resultados de actividad
antitumoral; todas las líneas celulares del panel leucemia fueron sensibles, con un rango de
GI50 de 0.54-5.91 μM y LC50>100 μM, donde se destaca especialmente la línea K-562 con
GI50 de 0.54 μM y LC50>100 μM. Las líneas HCT-15 y SW-620 del panel de cáncer de
colon, presentaron valores GI50 de 1.07, 1.39 μM y LC50>100 μM. La línea MDA-MB-435
exhibió un valor GI50 de 0.65 μM, sin embargo el valor LC50 48.4 μM no es remarcable.
Finalmente las líneas MCF7, HS-578T y MDA-MB-468 del panel celular de cáncer de
mama, presentaron sensibilidad con valores GI50 de 2.81, 2.35 y 1.65 μM y LC50>100 μM.
Los compuestos 98/99/100/101/102a-d, se encuentran en procesos de selección y se está a
la espera de resultados.
67
4.3.2 Estudios de actividad antifúngica
Todos los compuestos sintetizados fueron enviados a la Universidad Nacional de Rosario
(Argentina), donde se realizan los estudios de actividad antifúngica, hasta la fecha han
sido reportados algunos resultados y se explican a continuación.
La concentración mínima inhibitoria (CMI) de los compuestos 75a-f, 84a-f y 85a-f, Figura
32, fue determinada con los métodos de microdiluciones M27-A3 y M38-A2 (CLSI),75
contra 10 especies fúngicas sensibles, comprendidas en cuatro levaduras (Candida
albicans, Candida tropicalis, Cryptococcus neoformans y Saccharomyces cerevisiae), tres
Aspergillus spp. (A. niger, A. fumigatus y A. flavus) y tres dermatofitas (Trichophyton
rubrum, T. mentagrophytes y Microsporum gypseum). Los compuestos con CMI’s >250
μg/mL son considerados inactivos, con MIC’s entre 150-125 μg/mL son considerados poco
activos, con MIC’s entre 62.5-31.25 son considerados moderadamente activos, MIC’s
<31.25 indican alta actividad. A los compuestos que presenten valores de CMI <250, se
evaluará su concentración mínima fungicida (CMF).
De los compuestos evaluados parcialmente, solo la serie 75a-f, Figura 32, presentó
actividad, Tabla 12. El compuesto 75a presentó actividad contra las cepas dermatofitas
(Trichophyton rubrum, T. mentagrophytes y Microsporum gypseum) con una CMI/CMF de
31.25/31.25 μg/mL. El compuesto 75d también presentó actividad contra las mismas cepas
con resultados similares, CMI/CMF de 31.25/31.25 μg/mL
Figura 32. Compuestos que presentaran actividad antifungica.
68
Tabla 12. Actividad antifúngica in vitro (valores de CMI y CMF en μg/mL, escritos como
MIC/MFC) de los compuestos 75a-f.
Se propuso estudiar la actividad antifúngica de los compuestos 84a-f y 85a-f en
combinación con agentes antifúngicos comerciales. Para lograr dicho fin, se realizaron dos
etapas; la primera de ellas consistió en evaluar los compuestos 84a-f y 85a-f contra las
cepas C. albicans ATCC 10231 y C. neoformans ATCC 32264 empleando los métodos de
microdilución en microplacas,75
usualmente aplicados a la determinación concentración
mínima inhibitoria (CMI). Para este caso particular, los resultados se expresan en
porcentaje de inhibición, Tabla 13.
Tabla 13. Actividad antifúngica (% de inhibición) de los compuestos 84a-f y 85a-f.
Compuesto
Candida albicans Cryptococcus neoformans
200 µg/mL 100 µg/mL 50 µg/mL 200
µg/mL
100
µg/mL
50 µg/mL
84a 0 0 0 31.14±1.9 30.33±3.3 27.59±1.7
84b 40.09±2.5 5.80±0.2 0 15.35±1.2 12.04±0.2 11.87±1.5
84c 29.16±1.8 4.70±1.2 2.28±0.1 27.79±0.1 25.52±0.3 22.32±0.4
84d 0 0 0 13.60±1.7 12.072.8 10.510.6
84e 65.902.6 8.280.5 0 69.97±3.9 16.16±1.7 10.87±1.4
84f 50.85±2.8 17.29±1.1 3.77±0.7 57.59±1.2 23.59±1.3 15.14±2.3
85a 13.59±0.4 7.44±0.6 5.18±0.1 20.34±1.7 3.13±0.4 0
85b 23.93±0.5 13.00±1.3 11.84±1.3 22.63±1.6 18.70±1.3 9.29±0.3
85c 16.30±2.0 7.20±0.3 4.26±1.0 17.96±2.3 13.72±1.6 12.30±1.3
85d 33.42±1.7 21.20±1.1 12.72±1.4 65.35±1.1 20.76±2.1 19.91±0.1
85e 36.20±0.6 19.19±1.6 8.96±0.2 24.07±1.5 18.42±1.1 15.83±1.2
85f 27.51±0.5 15.02±0.2 9.81±1.1 24.77±1.8 3.25±1.1 0
AnB
100 100 100 100 100 100
Comp. Ca Ct Cn Afu Afl Ani Mg Tr Tm
75a >250 >250 250/>250 >250 >250 >250 31.25/31.25 31.25/31.25 31.25/31.25
75b >250 >250 >250 >250 >250 >250 >250 >250 >250
75c >250 >250 >250 >250 >250 >250 250/>250 250/>250 250/>250
75d >250 >250 250/>250 >250 >250 >250 31.25/31.25 31.25/31.25 31.25/31.25
75e >250 >250 >250 >250 >250 >250 125/>250 62.5/>250 62.5/>250
75f >250 >250 >250 >250 >250 >250 >250 >250 >250
69
Los compuestos 84e y 84f inhibieron más del 50 % a una concentración de 200 µg/mL, lo
que indica que presentan actividad baja cuando actúan solos, en comparación con el control
(amfortericina B) AmB.
De esta manera, los compuestos 84e y 84f, se sometieron a ensayos de actividad antifúngica
en combinación con las drogas comerciales Fluconazol (FCZ), Anfotericina B (AnB) e
Itraconazol (ITZ) contra C. albicans y C.neoformans, tomando las ventajas de cada uno de
ellos; la diversidad estructural de los compuestos pirazolínicos y la actividad alta de los
agentes antifúngicos.
El método empleado para realizar estos ensayos, es el reportado por Zhang, y
colaboradores,76
nombrado como HTSS (High Troughput Screening Synergy Assay) o
ensayo de detección de sinergia de alto rendimiento. El método consistió en realizar una
mezcla de los compuestos con la droga comercial fluconazol y observar cual solución
resultante alcanza el 50% de inhibición, o lo supera. El compuesto 84e exhibió un 8.28% de
inhibición aislado y superó el 50% en presencia de la droga fluconazol.
Para estudiar más a fondo los efectos que pueden presentar los compuestos 84e y 84f, se
evaluaron en combinación con tres drogas comerciales para determinar si presentan un
efecto sinérgico, antagónico o simplemente es un aditivo. Se realizaron soluciones con
FCZ, AnB e ITZ frente a Candida albicans. Para este nuevo diseño, el hongo patógeno se
incubo con una serie de diluciones de las drogas comerciales, en paralelo con las mezclas
de droga + 100 μg/mL del compuesto 84e o 84f, en una microplaca de 96 pozos. Las curvas
de dosis respuesta se construyeron teniendo en cuenta la actividad de la droga sola y en
combinación con los compuestos. Figura 33. Con los resultados de la curva dosis-
respuesta, se obtuvieron los datos de CMI50 (Concentración mínima para inhibir el
crecimiento en un 50%) de las drogas comerciales solas y en combinación con los
compuestos 84e y 84f y de esta manera predecir si presentaron efecto sinérgico o
antagónico. Tabla 14. En adición, el compuesto 84e solopresentó efecto sinérgico sobre
fluconazol y efecto antagónico sobre itraconazol y anfotericina B, destacando el efecto
fuertemente antagónico sobre itrazonazol, el cual evidenció un cambio de 162 μM en la
CMI50. Por su parte, el compuesto 84e presentó sinergismo sobre todas las drogas, en
70
especial la combinación con fluconazol, donde la CMI50 del fluconazol solo (2.730 μM) dio
un salto a 0.018 μM.
Figura 33. Curvas de dosis-respuesta de fluconazol, itraconazol y amfotericina B en
solución pura y mezclas con los compuestos 84e y 84f contra Candida albicans.
Tabla 14. MIC50 de las drogas FCZ, ITZ y AnB actuando solas y en combinación con los
compuestos 84e y 84f.
Compuesto
MIC50
Efecto
FCZ 2.730 ± 0.260
ITZ 1.780±0.30 x 10-5
AmB 0.071 ± 0.01
84e 180 ±0.61
84f 200±2.01
FCZ + 84ea
0.972 ± 0.11 Sinérgico
FCZ + 84fa
0.018 ± 0.01 Sinérgico
ITZ + 84eb
164±0.15 x 10-5
Antagónico
ITZ + 84fb
0.15 ±0.00 x 10-5
Sinérgico
AnB + 84ec
0.083 ± 0.003 Antagónico
AnB + 84fc
0.022 ± 0.001 Sinérgico aFCZ + 100 µg/mL de 84e o 84f; b ITZ + 100 µg/mL de 84e o 84f; c AnB + 100 µg/mL de 84e o 84f
71
5. CONCLUSIONES
- Se implementó una metodología versátil y enmarcada en el campo de la “Química
Verde” para la síntesis de nuevos 4,5-dihidro-1H-pirazoles 77/78/79/84 y 85a-f con
buenos rendimientos, bajo reacción de ciclocondensación no catalizada y a
temperatura ambiente durante tiempos cortos.
- Se desarrolló un método eficaz para la síntesis de nuevas 8,9-dihidro-7H-
pirimido[4,5-b][1,4]-diazepinas 88 y 89a-g mediante reacción de ciclocondensación
de compuestos carbonílicos α,β-insaturados con triamino y tetraaminopirimidina.
Esta reacción presentó regioselectividad, evidenciada mediante la espectroscopia de
resonancia magnética nuclear, empleando la técnica bidimensional HMBC y
difracción de rayos X.
- Se obtuvo diversidad estructural al emplear cinco rodaninas N-sustituidas y cuatro
aldehídos basados en el 2,4-diclorotiazol-5-carbaldehído, obteniendo nuevos
hetarilidenderivados de rodaninas N-sustituidas 98/99/100/101/102a-f bajo reacción
de condensación tipo Knoevenagel con catálisis básica, estableciendo esta
metodología como la más eficiente.
- Los estudios de actividad antitumoral suministrados por el NCI, USA, mostraron
que de 30 compuestos seleccionados, presentaron actividad; el 4,5-dihidro-1H-
pirazol 77d contra las líneas celulares CCRF-CEM y SR de leucemia, con valores
GI50 de 2.75 y 2.54 μM, y LC50 > 100 μM y COLO 205 de cáncer de colon, con un
valor GI50 de 2.17 μM y LC50 89.0 μM; la 8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]-
diazepina 89d contra las todas las líneas celulares del panel leucemia con un rango
de valores GI50 de 1.68-4.99 μM y LC50 > 100 μM y la línea más sensible, SNB-75
con un valor GI50 de 1.63 μM, pero con un LC50 de 38.1 μM; la 8,9-dihidro-7H-
pirimido[4,5-b][1,4]-diazepina 89g la cual presentó actividad contra todas las líneas
del panel leucemia con un rango de GI50 de 0.54-5.91 μM y LC50 > 100 μM, donde
72
se destaca especialmente la línea K-562 con GI50 de 0.54 μM y LC50>100 μM,
también las líneas HCT-15 y SW-620 de cáncer de colon fueron sensibles con
valores GI50 de 1.07, 1.39 μM y LC50>100 μM y las líneas MCF7, HS-578T y
MDA-MB-468 del panel celular de cáncer de mama, presentaron sensibilidad, con
valores GI50 de 2.81, 2.35 y 1.65 μM y LC50>100 μM, estos resultados importantes
perfilan al compuesto 89g como candidato para investigaciones futuras con el fin de
modificar su estructura y potencializar su actividad antitumoral.
- Los resultados de actividad antifúngica realizados por la Universidad Nacional de
Rosario (Argentina), mostraron que los compuestos 75a y 75d se consideraron
activos contra las cepas de hongos dermatofitos Trichophyton rubrum, T.
mentagrophytes y Microsporum gypseum con valores de CMI de 31.25 μg/mL en
todos los casos. También mostraron que el compuesto 84e presentó un antagonismo
fuerte sobre la droga comercial itraconazol con cambio de la CMI50 de 1.78 a 165
μM, por el contrario el compuesto 84f presentó un fuerte efecto sinérgico con la
droga comercial fluconazol con un cambio de la CMI50 de 2.73 a 0.018 μM y contra
la droga comercial itraconazol con un cambio de la CMI50 de 1.78 a 0.15 μM. Estos
resultados muestran que el compuesto 84f presenta muy buenos resultados de
sinergismo, por lo cual se realizarán más estudios acerca de esta interacción.
- Todos los resultados obtenidos, generaron material para cuatro artículos, de los
cuales uno se encuentra sometido al European Journal of Medicinal Chemistry, otro
en proceso de sometimiento y los dos restantes en proceso de escritura.
73
6. SECCIÓN EXPERIMENTAL
6.1 Reactivos comerciales
Acetofenonas sustituidas, ácido 3-acético de rodanina, ácido cloroacético, hidrato de
hidracina, morfolina, pirrolidina, triaminopirimidina, tetraaminopirimidina, oxicloruro de
fósforo (POCl3).
6.2 Disolventes
CDCl3, cloroformo, diclorometano, dioxano, dimetilformamida (DMF), DMSO-d6, etanol,
hexano, metanol.
6.3 Instrumentación
Los puntos de fusión se determinaron usando un aparato de punto de fusión Büchi B-450
(sin corrección). El análisis por CCD se realizó con placas de sílica gel Merck 60 F254
soportadas en aluminio usando una lámpara de luz ultravioleta Spectroline serie E con una
longitud de onda larga (365 nm) y corta (254 nm). Los espectros de IR se tomaron con un
espectrofotómetro Shimadzu FTIR 8400 en pastilla de KBr. Los espectros de RMN 1H y
13C se tomaron con un espectrómetro Bruker Avance 400 operando a 400 MHz y 100 MHz
respectivamente, usando CDCl3 o DMSO-d6 como disolvente y tetrametilsilano (TMS)
como estándar interno. Los espectros de masas se obtuvieron en un espectrómetro
Shimadzu GCMS-DI 2010 (equipado con una sonda de inyección directa), con una fuente
de impacto electrónico a 70 eV. Los análisis elementales se obtuvieron usando un
analizador elemental LECO CHNS-900.
74
6.4 Síntesis de precursores
Síntesis del 2,4-diclorotiazol-5-carbaldehído (73)
Un peso de 4.8 g de DMF (0.066 mol) se adicionaron gota a gota durante una hora, a una
suspensión de tioxotiazolidindiona (7.2 g, 0.06 mol) y 36 mL de POCl3 (0.36 moles). La
reacción se agito a temperatura ambiente durante un periodo de 1 hora, posteriormente se
llevó a una temperatura de 80-90 °C durante 1 hora y finalmente se sometió a reflujo por un
periodo restante de 4 horas. El crudo de reacción se vertió sobre 200 gramos de hielo
picado hasta neutralización completa del POCl3. El producto altamente irritante, se aisló
por destilación y el precipitado formado se aisló por filtración. Sólido cristalino, 56 %
rendimiento, FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 2831.4 (CHO) y 1669.10 (C=O), MS (IE, 70 eV) m/z
(%): 182/180 [M+] (58.3/76.4), m.p 53-54 °C (calculado).
Síntesis de 4-cloro-2-morfolinotiazol-5-carbaldehído (81)
Una mezcla de 1.8 de 2,4-diclorotiazol-5-carbaldehído (10 mmol), 0.87 gramos de
morfolina (10 mmol) se disolvieron en acetonitrilo y se sometieron a reacción a 10 °C
durante 1 hora, se dejó 7 horas a temperatura ambiente y con agitación constante. La
solución resultante se precipitó en frio y el sólido obtenido se aisló por filtración a vacío.
Sólido blanco, 97 % rendimiento. FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 2829 (CHO) y 1658.3 (C=O), MS
(IE, 70 eV) m/z (%): 234/232 [M+] (74.5/29.8), 197 (100), m.p 187-188 °C (calculado)
reportado (195)
Síntesis de 2-amino-4-clorotiazol-5-carbaldehído (90d)
A una solución de 1.0 gramo de tiourea (13.1 mmol) en DMF (10 mL) se adicionó 1.24
gramos (13.1 mmol) de ácido cloroacético en porciones y se agito a 40 °C durante dos
horas. La solución resultante se enfrió en baño hielo-sal y se adicionó gota a gota 4.24 mL
de POCl3 (45.9 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 30 minutos,
posteriormente a 90 °C durante 5 horas. El crudo de reacción se adicionó a 100 mL de agua
75
y se adicionó 4.56 gramos de NaCl (45.9 mmol) y 3.36 gramos de Ca(OH)2. El precipitado
resultante se aisló por filtración a vacío y se purificó por cromatografía de columna,
empleando diclorometano como fase móvil. Sólido beige, 64 % rendimiento. FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 3201 (NH), 2830 (CHO) y 1661 (C=O), MS (IE, 70 eV) m/z (%): 164/162 [M+]
(21.0/57.5), 127 (100), m.p 237-238 °C (calculado).
Síntesis de (R)-ácido 2-(4-oxo-2-tioxotiazolidin-3-il)-3-fenilpropanoico (94)
0.83 gramos de L-fenilalanina (5 mmol), 0.47 gramos de NaOH (11 mmol) y 0.38 gramos
de disulfuro de carbono (5 mmol) se sometieron a calentamiento bajo irradiación con
microondas durante 5 minutos a 100 °C y 100 W. posteriormente se adicionó 0.47 gramos
de ácido cloroacético (5 mmol) y se sometió a calentamiento bajo irradiación con
microondas durante 5 minutos a 100 °C y 100 W. Finalmente se adicionó 1.5 mL de HCl
37% y repitió el calentamiento con microondas, pero durante 20 minutos. El producto
formado se extrajo del crudo de reacción empleando diclorometano. Sólido cristalino, 77 %
rendimiento. 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.36 – 7.22 (m, 3H), 7.22 – 7.15 (m, 2H), 5.91-
5.87 (m, 1H), 3.85 (s, 2H), 3.59 (d, J = 6.5 Hz, 2H). 13
C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 200.36,
173.34, 173.08, 135.63, 129.19, 128.59, 127.25, 57.95, 34.50, 33.39.
Síntesis de rodaninas N-sustituidas 95, 96 y 97
A 3 mmol de anilina 4-sustituida diluidos en caliente en 5 mL de agua se adicionó 3.3
mmol de biscarbometoximetiltritiocarbonato, sometiendo la suspensión resultante a reflujo
durante un periodo de 24 horas. Finalizado el periodo de reacción, se enfrió la mezcla en
baño de hielo y el sólido formado se aisló por filtración a vacío. (95) Sólido beige, 59%
rendimiento, (IE, 70 eV) m/z (%): 253 [M+] (43), m.p 186-187 °C (reportado, 180-182 °C).
(96) Sólido en agujas verde pálido, 68 % rendimiento, (IE, 70 eV) m/z (%): 238 [M+]
(73.4) m.p 176-177 °C (96) Sólido beige, 53 % rendimiento, (IE, 70 eV) m/z (%): 244/242
[M+] (24.9/62.8), m.p 201-202 °C.
76
6.5 Síntesis de productos finales
6.5.1 Síntesis de NH, N-Acetil y N-formil-5-(2,4-diclorotiazol-5-il)-3-(R-fenil)-4,5-
dihidro-1H-pirazoles
- Procedimiento experimental para la síntesis de los compuestos carbonílicos
α,β-insaturados 75a-f
Una mezcla de 5 mmol de 2,4-diclorotiazol-5-carbaldehído73 y 5 mmol de acetofenona
sustituida 74a-f se disolvieron en 10 mL de ácido acético y se adicionó 2 mL d H2SO4,
siguiendo la metodología reportada por Kotlyar, V. N, y colaboradores.69
La mezcla
resultante se agitó a temperatura ambiente y durante 36 horas. El precipitado formado se
aisló por filtración al vacío, y se recristalizó de ácido acético obteniendo de esta manera los
compuestos 75a-f como sólidos amarillos. Los compuestos 75c/d/f/g no han sido
reportados.
(E)-3-(2,4-diclorotiazol-5-il)-1-(4-fluorofenil)prop-2-en-1-
ona (75c) p.f. 157-158 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1657 (C=O),
1592, 1554 y 1507 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz,
CDCl3): δ 7.15-7.28 (m, 3H, Hm, Hα), 7.87 (d, J = 15.4 Hz,
1H, Hβ),8.04 (dd, JHF = 5.4 Hz, J = 8.8 Hz, 2H, Ho) ppm.
RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): 116.0 (d, 2JCF = 22.0 Hz, Cm), 124.7 (CH), 130.2 (CC),
131.13 (CC), 131.1 (d, 3JCF = 8.5 Hz Co), 133.6 (d,
4JCF = 3.5 Hz Ci), 140.6 (CC), 152.4
(CC), 165.9 (d, 1JCF = 255 Hz, Cp), 186.9 (C=O). MS (IE, 70 eV) m/z (%): 302/300 [M
+]
(17/51). Análisis calculado para C12H6Cl2FNOS: C, 47.70; H, 2.00; N, 4.64; Encontrado: C,
47.77; H, 2.09; N, 4.59.
77
(E)-3-(2,4-diclorotiazol-5-il)-1-(4-metilfenil)prop-2-en-1-
ona (75d) p.f. 149-150 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1659
(C=O), 1591, 1552 y 1510 (C=N y C=C). RMN-1H (400
MHz, CDCl3): δ 2.47 (s, 3H, CH3), 7.23 (d, J = 15.5 Hz,
1H, Hα), 7.33 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Hm),7.85 (d, J = 15.5 Hz,
1H, Hβ), 7.91 (d, J = 8.2 Hz, 2H, Ho)ppm. RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): 21.7 (CH3), 125.4
(CH), 128.7 (CH), 129.55 (CH), 130.5 (CH), 134.7 (CC), 140.6 (CC), 144.4 (CC), 152.1
(CC), 188.1 (C=O). MS (IE, 70 eV) m/z (%): 298/296 [M+] (23/58). Análisis calculado para
C13H9Cl2NOS: C, 52.37; H, 3.04; N, 4.70; Encontrado: C, 52.45; H, 3.11; N, 4.64.
(E)-3-(2,4-diclorotiazol-5-il)-1-(3,4,5-trimetoxifenil)prop-
2-en-1-ona (75f) p.f. 183-184 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
):
1660 (C=O), 1589, 1547 y 1506 (C=N y C=C). RMN-1H
(400 MHz, CDCl3): δ 3.97 (s, 9H, pCH3y mCH3), 7.17 (s,
2H, Ho), 7.24 (d, J = 15.5 Hz, 1H, Hα), 7.85 (d, J = 15.5 Hz,
1H, Hβ) ppm. RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): 56.4 (mOCH3),
61.0 (pOCH3), 106.2 (CH), 125.2 (CH), 130.3 (CH), 130.8 (CC), 132.5 (CC), 140.3 (CC),
143.1 (CC), 152.2 (CC), 153.2 (CC), 187.4 (C=O). MS (IE, 70 eV) m/z (%): 374/372 [M+]
(23/58). Análisis calculado para C15H13Cl2NO4S: C, 48.14; H, 3.50; N, 3.74; Encontrado:
C, 48.08; H, 3.55; N, 3.82.
(E)-3-(2,4-diclorotiazol-5il)-1-(4-metilendioxifenil)prop-
2-en-1-ona (75g) p.f. 168-169 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
):
1654 (C=O), 1576, 1551 y 1506 (C=N y C=C). RMN-1H
(400 MHz, CDCl3): δ 6.10 (s, 2H, O-CH2-O), 6.92 (d, J =
8.2 Hz, 1H, Hm), 7.18 (d, J = 15.4 Hz, 1H, Hα), 7.51 (d, J
= 1.6 Hz, 1H, Ho’), 7.60 (d, J = 8.1 Hz, 1H, Ho), 7.83 (d, J
= 15.4 Hz, 1H, Hβ) ppm. RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): 102.0 (CH2), 108.05 (CH), 108.32
(CH), 124.9 (CH), 125.1 (CH), 130.39 (CH), 130.47 (CC), 132.1 (CC), 140.2 (CC), 148.5
(CC), 152.0 (CC), 152.7 (CC), 186.3 (C=O). MS (IE, 70 eV) m/z (%): 328/326 [M+] (43/96).
78
Análisis calculado para C13H7Cl2NO3S: C, 47.58; H, 2.15; N, 4.27; Encontrado: C, 47.66;
H, 2.21; N, 4.20.
- Procedimiento experimental para la síntesis de los NH-4,5-dihidro-1H-
pirazoles 77a-f
1 mmol del compuesto carbonílico α,β-insaturado75a-f se disolvió en 5mL de etanol, la
mezcla de reacción se enfrió empleando baño de hielo hasta una temperatura de 10 °C, se
adicionó 3 mmol de hidrato de hidracina gota a gota durante un periodo de 10 minutos. La
reacción se agitó durante 1 hora en el baño hielo, controlando el progreso mediante CCD.
Al terminar el tiempo de reacción, el sólido formado se aisló por filtración a vacío,
realizando lavados con una mezcla fría de agua:etanol 1:1. Los compuestos 77a-f se
obtuvieron como sólidos blancos, sin procesos de purificación adicionales.
5-(2,4-diclorotiazol-5-il)-3-fenil-4,5-dihidro-1H-pirazol
(77a), p.f. 121-122 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3206 (-NH),
1641, 1598 y 1522 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz,
CDCl3): δ 2.94 (dd, JAX = 5.4 Hz, JAM = 16.1 Hz, 1H, H4A),
3.69 (dd, JAX = 10.6 Hz, JAM = 16.1 Hz, 1H, H4M), 5.19-
5.25 (m, 1H, H5X), 7.44-7.48 (m, 3H, Hm, Hp), 6.25 (s, 1H, -
NH), 7.69-7.71 (m, 2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 40.4 (CH2), 53.8 (CH),
126.4 (CH), 128.1 (CH), 128.8 (CH), 131.2 (CC), 135.4 (CC), 136.3 (CC), 150.5 (CC), 151.7
(CC) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 299/297 [M+] (31/49), 262 (100). Análisis calculado
para C12H9Cl2N3S: C, 48.34; H, 3.04; N, 14.09; Encontrado: C, 48.42; H, 3.11; N, 14.01.
4-clorofenil-5-(2,4-diclorotiazol-5-il)-4,5-dihidro-1H-
pirazol (77b) p.f. 127-128 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
):
3203 (-NH), 1640, 1600 y 1521 (C=N y C=C). RMN-1H
(400 MHz, CDCl3): δ 2.95 (dd, JAX = 10.5 Hz, JAM =
16.3 Hz, 1H, H4A), 3.69 (dd, JAX = 10.5 Hz, JAM = 16.3
Hz, 1H, H4M), 5.20-5.26 (m, 1H, H5X), 6.25 (s, 1H, -NH),
79
7.40 (d, J = 7.5 Hz, 2H, Hm), 7.61 (d, J = 7.5 Hz, 2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100 MHz,
CDCl3): δ 40.6 (C-4), 53.2 (C-5), 127.3 (Cm), 128.9 (Co), 130.3 (Cp), 133.3 (C-4'), 136.5
(Ci), 135.7 (C-5'), 150.7 (C-2'), 151.5 (C-3) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 428/426/424
[M+] (22/48/46), 297/295 (13/34) 260 (100). Análisis calculado para C12H8Cl3N3S: C,
43.33; H, 2.42; N, 12.63; Encontrado: C, 43.29; H, 2.46; N, 12.68.
5-(2,4-diclorotiazol-5-il)-3-(4-fluorofenil)-4,5-dihidro-
1H-pirazol (77c) p.f. 101-102 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
):
3227 (-NH), 1649, 1603 y 1523 (C=N y C=C): δ 2.99 (dd,
JAX = 10.2 Hz, JAM = 16.4 Hz, 1H, H4A), 3.69 (dd, JAX =
10.4 Hz, JAM = 16.4 Hz, 1H, H4M), 5.07-5.11 (m, 1H,
H5X), 6.25 (s, 1H, -NH), 7.06-7.12 (m, 2H, Hm), 7.74 (dd,
3JHF = 5.2 Hz,
3J = 8.5 Hz 2H, Ho) ppm; RMN-
13C (100
MHz, CDCl3): δ 40.8 (CH2), 54.7 (CH), 124.8 (d, 2JCF = 21.0 Hz, Cm), 128.9 (d,
4JCF = 3.6
Hz Ci), 128.5 (d, 3JCF = 8.5 Hz Co), 133.7 (CC), 135.6 (CC), 151.2 (CC), 154.8 (CC) 157.1 (d,
1JCF = 249 Hz, Cp) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 316/314 [M
+] (37/69) Análisis calculado
para C12H8Cl2FN3S: C, 45.59; H, 2.55; N, 13.29; Encontrado: C, 45.66; H, 2.52; N, 13.33.
5-(2,4-diclorotiazol-5-il)-3-(4-metilfenil)-4,5-dihidro-
1H-pirazol (77d) p.f. 125-126 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-
1): 3207 (-NH), 1640, 1601 y 1520 (C=N y C=C).
RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.41 (s, 3H, pCH3), 2.95
(dd, JAX = 10.3 Hz, JAM = 16.3 Hz, 1H, H4A), 3.63 (dd,
JAX = 10.4 Hz, JAM = 16.3 Hz, 1H, H4M), 5.14-5.18 (m,
1H, H5X), 6.18 (s, 1H, -NH), 7.23 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Hm), 7.57 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ho)
ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 21.4 (CH3), 40.7 (CH2), 57.0 (CH), 126.1 (CH),
129.0 (CH), 131.4 (CC) 133.1 (CC), 135.4 (CC), 139.7 (CC), 150.6 (CC), 152.8 (CC) ppm;
MS (IE, 70 eV) m/z (%): 313/311 [M+] (9/21). Análisis calculado para C13H11Cl2N3S: C,
50.01; H, 3.55; N, 13.46; Encontrado: C, 50.08; H, 3.60; N, 13.41.
80
5-(2,4-diclorotiazol-5-il)-3-(4-metoxifenil)-4,5-
dihidro-1H-pirazol (77e) p.f. 116-117 °C; FT-IR
(KBr), υ(cm-1
): 3208 (-NH), 1638, 1610 y 1520 (C=N
y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.99 (dd, JAX
= 10.4 Hz, JAM = 16.5 Hz, 1H, H4A), 3.61 (dd, JAX =
10.4 Hz, JAM = 16.5 Hz, 1H, H4M), 3.78 (s, 3H,
pOCH3), 5.20-5.25 (m, 1H, H5X), 6.25 (s, 1H, -NH),
6.96 (d, J = 7.2 Hz, 2H, Hm), 7.57 (d, J = 7.2 Hz, 2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100 MHz,
CDCl3): δ 40.4 (CH2), 56.8 (CH3), 57.2 (CH), 119.4 (CH), 127.2 (CH), 129.3 (CC) 133.1
(CC), 135.4 (CC), 150.6 (CC), 151.7 (CC), 152.8 (CC) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%):
329/327 [M+] (41/85). Análisis calculado para C13H11Cl2N3OS: C, 47.57; H, 3.38; N, 12.80;
Encontrado: C, 47.65; H, 3.31; N, 12.88.
5-(2,4-diclorotiazol-5-il)-3-(3,4,5-trimetoxilfenil)-4,5-
dihidro-1H-pirazol (77f) p.f. 180-181 °C; FT-IR
(KBr), υ(cm-1
): 3203 (-NH), 1643, 1609 y 1519 (C=N
y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.96 (dd, JAX
= 10.5 Hz, JAM = 15.8 Hz, 1H, H4A), 3.61 (dd, JAX =
10.7 Hz, JAM = 15.8 Hz, 1H, H4M), 5.19-5.24 (m, 1H,
H5X), 3.78 (s, 9H, m y pOCH3), 6.24 (s, 1H, -NH),
6.91 (s, 2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 40.8 (CH2), 56.2 (CH3), 57.2 (CH),
60.9 (CH3), 103.5 (CH), 127.3 (CC), 133.2 (CC) 135.7 (CC), 139.5 (CC), 150.6 (CC), 152.5
(CC), 153.3 (CC) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 389/387 [M+] (23/58). Análisis calculado
para C15H15Cl2N3O3S: C, 46.40; H, 3.89; N, 10.82; Encontrado: C, 46.51; H, 3.80; N,
10.86.
- Procedimiento experimental para la síntesis de los N-acetil y N-formil-4,5-
dihidro-1H-pirazoles 78a-f y 79a-f
81
Se disolvieron 0.3 mmol de las NH-pirazolinas 77a-f respectivamente en 1 mL de anhídrido
acético (78a-f) o ácido fórmico (79a-f) y se agitó a temperatura ambiente durante una hora.
Al crudo de reacción se adicionó 1 mL de agua y el sólido precipitado se aisló por filtración
a vacío, realizando lavados con etanol:agua 1:1, obteniendo de esta manera los compuestos
78a-f y 79a-f como sólidos blancos, sin procesos de purificación adicionales.
1-Acetil-5-(4-cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-fenil-4,5-
dihidro-1H-pirazol (78a), p.f. 163-164 °C; FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 1686 (C=O), 1665 y 1520 (C=N y C=C). RMN-
1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.44 (s, 3H, CH3), 3.32 (dd, JAX
= 5.0 Hz, JAM = 17.8 Hz, 1H, H4A), 3.83 (dd, JAX = 11.9
Hz, JAM = 17.8 Hz, 1H, H4M), 5.80 (dd, JAX = 5.1 Hz, JBX
= 11.9 Hz, 1H, H5X), 7.40-7.54 (m, 3H, Hm, Hp), 7.76 (dd, J = 2.0 Hz, J= 7.5 Hz, 2H, Ho)
ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 21.8 (CH3), 40.8 (CH2), 52.9 (CH), 126.6 (CH),
128.9 (CH), 130.5 (CH), 130.8 (CC),133.9 (CC), 133.9 (CC), 149.8 (CC), 153.9 (CC), 169.2
(CC) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 341/339 [M+] (12/17), 306/304 (16/41), 299/297
(69/100), 264/262 (27/73), 145 (23), 43 (65). Análisis calculado para C14H11Cl2N3OS: C,
49.42; H, 3.26; N, 12.35; Encontrado: C, 49.52; H, 3.34; N, 12.28.
1-Acetil-3-(4-clorofenil)-5-(4-cloro-2-morfolinotiazol-
5-il)-4,5-dihidro-1H-pirazol (78b) p.f. 100-101 °C;
FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1687 (C=O), 1663 y 1591 (C=N
y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.43 (s, 3H,
CH3), 3.29 (dd, JAX = 5.2 Hz, JAM = 17.8 Hz, 1H,
H4A), 3.83 (dd, JAX = 12.0 Hz, JAM = 17.8 Hz, 1H,
H4M), 5.81 (dd, JAX = 5.2 Hz, JBX = 12.0 Hz, 1H, H5X),
7.44 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Hm), 7.69 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100 MHz,
CDCl3): δ 21.7 (CH3), 40.6 (CH2), 53.2 (CH), 127.8 (CH), 129.0 (CC), 129.2 (CH), 133.3
82
(CC),133.6 (CC), 136.9 (CC), 149.8 (CC), 152.7 (CC), 169.2 (CC) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z
(%): 377/375/373 [M+] (6/15/14.), 340/338 (16/23), 333/331 (74/77), 298/296 (34/48), 81
(30), 69 (47), 43 (100). Análisis calculado para C14H10Cl3N3OS: C, 44.88; H, 2.69; N,
11.22; Encontrado: C, 44.95; H, 2.60; N, 11.27.
1-Acetil-5-(4-cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-(4-
fluorofenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (78c) p.f. 93-94 °C;
FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1691 (C=O), 1667 y 1589 (C=N
y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.43 (s, 3H,
CH3), 3.30 (dd, JAX = 5.1 Hz, JAM = 17.8 Hz, 1H, H4A),
3.82 (dd, JAX = 11.9 Hz, JAM = 17.8 Hz, 1H, H4M), 5.80
(dd, JAX = 5.1 Hz, JBX = 11.9 Hz, 1H, H5X), 7.14-7.16 (m, 2H, Hm), 7.76 (dd, 3JHF = 5.3
Hz, 3J = 8.7 Hz 2H, Ho) ppm; RMN-
13C (100 MHz, CDCl3): δ 21.7 (CH3), 40.8 (CH2), 52.8
(CH), 116.12 (d, 2JCF = 22.1 Hz, Cm), 126.8 (d,
4JCF = 3.3 Hz Ci), 128.7 (d,
3JCF = 8.6 Hz
Co), 133.3 (CC), 133.8 (CC), 149.8 (CC), 152.8 (CC), 164.2 (d, 1JCF = 252.2 Hz, Cp) 169.2
(CC) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 359/357 [M+] (11/18), 324/322 (12/33), 317/315
(69/100), 282/280 (27/70), 163 (22), 43 (66). Análisis calculado para C14H10Cl2FN3OS: C,
46.94; H, 2.81; N, 11.73; Encontrado: C, 47.06; H, 2.90; N, 11.67.
1-Acetil-5-(4-cloro-2-morfolinofiazol-5-il)-3-(4-
metilfenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (78d) p.f. 130-131
°C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1685 (C=O), 1665 y 1593
(C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.43 (s,
6H, pCH3 y CH3), 3.29 (dd, JAX = 5.1 Hz, JAM = 17.8
Hz, 1H, H4A), 3.83 (dd, JAX = 11.8 Hz, JAM = 17.8 Hz,
1H, H4M), 5.79 (dd, JAX = 5.1 Hz, JBX = 11.8 Hz, 1H, H5X), 7.28 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Hm),
7.65 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 21.5 (pCH3), 21.8
(CH3), 40.8 (C-4), 52.8 (C-5), 126.6 (Cm), 127.7 (Cp), 129.6 (Co), 133.2 (C-4’),134.0 (C-
5’), 141.3 (Ci), 149.7 (C-2’), 153.9 (C=N), 169.2 (C=O) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%):
83
355/353 [M+] (19/28), 278/276 (3/8), 85/83 (64/100). Análisis calculado para
C15H13Cl2N3OS: C, 50.86; H, 3.70; N, 11.86; Encontrado: C, 50.95; H, 3.78; N, 11.80.
1-Acetil-5-(4-cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-(4-
metoxifenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (78e) p.f. 131-
132 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1688 (C=O), 1664 y
1591 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ
2.43 (s, 3H, CH3), 3.28 (dd, JAX = 5.0 Hz, JAM = 17.7
Hz, 1H, H4A), 3.80 (dd, JAX = 11.8 Hz, JAM = 17.7 Hz,
1H, H4M), 3.89 (s, 3H, pOCH3), 5.78 (dd, JAX = 5.0
Hz, JBX = 11.8 Hz, 1H, H5X), 6.98 (d, J = 8.8 Hz, 2H, Hm), 7.70 (d, J = 8.8 Hz, 2H, Ho)
ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 21.7 (CH3), δ 40.8 (CH2), 52.8 (CH3), 55.4 (CH),
114.3 (CH), 123.1 (CC), 128.3 (CH) 133.1 (CC), 134.1 (CC), 149.7 (CC), 153.6 (CC), 161.7
(CC) 169.1 (CC) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 371/369 [M+] (26/36), 329/327 (71/100),
294/292 (20/54.), 133 (46), 43 (47). Análisis calculado para C15H13Cl2N3O2S: C, 48.66; H,
3.54; N, 11.35; Encontrado: C, 48.58; H, 3.61; N, 11.39.
1-Acetil-5-(4-cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-(3,4,5-
trimetoxilfenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (78f) p.f. 167-
161 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1687 (C=O), 1663 y
1592 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ
2.45 (s, 3H, CH3), 3.27 (dd, JAX = 5.2 Hz, JAM = 17.5
Hz, 1H, H4A), 3.80 (dd, JAX = 11.6 Hz, JAM = 17.5 Hz,
1H, H4M), 3.89 (s, 3H, pOCH3), 3.91 (s, 6H, mOCH3),
5.76 (dd, JAX = 5.2 Hz, JBX = 11.6 Hz, 1H, H5X), 6.96 (s, 2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100
MHz, CDCl3): δ 21.9 (CH3) 40.8 (CH2), 55.3 (CH3) 56.2 (CH3), 57.2 (CH), 104.3 (CH),
127.8 (CC), 133.1 (CC) 134.8 (CC), 138.9 (CC), 149.8 (CC), 151.1 (CC), 153.9 (CC), 168.9
(CC) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 431/429 [M+] (45/66), 389/387 (72/98), 374/372
(34/48), 354/352 (11/29), 193 (14), 85/83 (64/100). Análisis calculado para
C16H14Cl2N3O4S: C, 46.28; H, 3.40; N, 10.12; Encontrado C, 46.39; H, 3.44; N, 10.06.
84
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-1-formil-3-fenil-4,5-
dihidro-1H-pirazol (79a) p.f. 137-138 °C; FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 1683 (C=O), 1596 y 1523 (C=N y C=C). RMN-1H
(400 MHz, CDCl3): δ 3.36 (dd, JAX = 5.3 Hz, JAM = 17.9
Hz, 1H, H4A), 3.90 (dd, JAX = 11.8 Hz, JAM = 17.9 Hz, 1H,
H4M), 5.78 (dd, JAX = 5.3 Hz, JBX = 11.8 Hz, 1H, H5X),
7.47-7.51 (m, 3H, Hm, Hp), 7.76 (d, J = 7.2 Hz, 2H, Ho), 8.94 (s, 1H, CHO) ppm; RMN-13
C
(100 MHz, CDCl3): δ 41.1 (CH2), 51.9 (CH), 126.7 (CH), 128.9 (CH), 130.1 (CC), 131.1
(CH),132.5 (CC), 133.9 (CC), 155.6 (CC), 160.0 (CHO) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%):
327/325 [M+] (24/36), 292/290 (29/78), 264/262 (40/100), 85/83 (47/65). Análisis
calculado para C13H9Cl2N3OS: C, 47.87; H, 2.78; N, 12.88; Encontrado: C, 47.96; H, 2.83;
N, 12.80.
3-(4-clorofenil)-5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-il)- 1-
formil-4,5-dihidro-1H-pirazol (79b) p.f. 143-144 °C;
FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1682 (C=O), 1591 y 1522 (C=N y
C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 3.33 (dd, JAX =
5.4 Hz, JAM = 17.9 Hz, 1H, H4A), 3.87 (dd, JAX = 11.9
Hz, JAM = 17.9 Hz, 1H, H4M), 5.78 (dd, JAX = 5.4 Hz,
JBX = 11.9 Hz, 1H, H5X), 7.46 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Hm), 7.69 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Ho) 8.92 (s,
1H, CHO) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 40.9 (CH2), 52.0 (CH), 128.6 (CC), 129.3
(CH), 132.7 (CC), 133.3 (CC),134.0 (CC), 137.2 (CC), 150.3 (CC), 154.4 (CC), 160.0 (CHO)
ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 363/361/359 [M+] (34/62/61), 326/324 (52/76), 298/296
(65/100), 179 (16), 138 (24), 85/83 (29/44). Análisis calculado para C13H8Cl3N3OS: C,
43.30; H, 2.24; N, 11.65; Encontrado: C, 43.38; H, 2.17; N, 11.73.
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-(4-fluorofenil)-1-
formil-4,5-dihidro-1H-pirazol (79c) p.f. 119-120 °C;
FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1688 (C=O), 1594 y 1522 (C=N
y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 3.34 (dd, JAX =
85
5.4 Hz, JAM = 17.8 Hz, 1H, H4A), 3.88 (dd, JAX = 11.8 Hz, JAM = 17.8 Hz, 1H, H4M), 5.78
(dd, JAX = 5.4 Hz, JBX = 11.8 Hz, 1H, H5X), 7.16-7.19 (m, 2H, Hm), 7.76 (dd, 3JHF = 5.3
Hz, 3J = 8.8 Hz 2H, Ho) 8.92 (s, 1H, CHO) ppm; RMN-
13C (100 MHz, CDCl3): δ 41.1
(CH2), 51.9 (CH), 116.2 (d, 2JCF = 22.2 Hz, Cm), 126.4 (d,
4JCF = 3.3 Hz Ci), 128.8 (d,
3JCF
= 8.7 Hz, Co), 132.3 (CC), 133.9 (CC), 150.3 (CC), 154.5 (CC), 160.0 (CHO) 164.4 (d, 1JCF =
252.7 Hz, Cp) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 345/343 [M+] (25/38), 310/308 (27/72),
282/280 (37/100), 122 (52), 85/83 (35/57). Análisis calculado para C13H8Cl2FN3OS: C,
45.37; H, 2.34; N, 12.21; Encontrado: C, 45.31; H, 2.40; N, 12.29.
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-1-formil-3-(4-
metilfenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (79d) p.f. 148-149 °C;
FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1682 (C=O), 1596 y 1523 (C=N y
C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.44 (s, 3H, pCH3),
3.34 (dd, JAX = 4.9 Hz, JAM = 17.7 Hz, 1H, H4A), 3.87 (dd,
JAX = 11.5 Hz, JAM = 17.7 Hz, 1H, H4M), 5.76 (dd, JAX =
4.9 Hz, JBX = 11.5 Hz, 1H, H5X), 7.29 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Hm), 7.65 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ho),
8.93 (s, 1H, CHO) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 21.5 (CH3), 41.7 (C-4), 51.8 (C-
5), 126.7 (Cm), 127.3 (Cp), 129.7 (Co), 132.6 (C-4’),133.8 (C-5’), 141.7 (Ci), 150.2 (C-2’),
155.7 (C=N), 160.0 (C=O) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 341/339 [M+] (22/32), 306/304
(11/31), 278/276 (35/87), 118 (85), 85 (100). Análisis calculado para C14H11Cl2N3OS: C,
49.42; H, 3.26; N, 12.35; Encontrado: C, 49.34; H, 3.31; N, 12.44.
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-1-formil-3-(4-
metoxifenyl)-4,5-dihidro-1H-pirazol (75e) p.f. 150-
151 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1679 (C=O), 1590 y
1515 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ
3.35 (dd, JAX = 5.3 Hz, JAM = 17.8 Hz, 1H, H4A), 3.84
(dd, JAX = 11.7 Hz, JAM = 17.8 Hz, 1H, H4M), 3.88 (s,
3H, pOCH3), 5.74 (dd, JAX = 5.3 Hz, JBX = 11.7 Hz, 1H, H5X), 6.97 (d, J = 7.2 Hz, 2H,
Hm), 7.76 (d, J = 7.2 Hz, 2H, Ho), 8.94 (CHO) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 41.1
(CH2), 53.8 (CH3), 57.1 (CH), 115.2 (CH), 124.2 (CC), 129.1 (CH) 132.7 (CC), 134.5 (CC),
86
150.3 (CC), 154.7 (CC), 158.9 (CC), 160.7 (CHO) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 357/355
[M+] (96/100), 329/327 (12/18), 322/320 (9/22), 294/292 (34/85). Análisis calculado para
C14H11Cl2N3O2S: C, 47.20; H, 3.11; N, 11.80; Encontrado: C, 47.29; H, 3.17; N, 11.72.
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-l)-1-formil-3-(3,4,5-
trimetoxifenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (79f) p.f. 196-
197 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1678 (C=O), 1589 y
1520 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ
3.35 (dd, JAX = 4.9 Hz, JAM = 16.8 Hz, 1H, H4A), 3.84
(dd, JAX = 11.2 Hz, JAM = 16.8 Hz, 1H, H4M), 3.90 (s,
3H, pOCH3), 3.92 (s, 6H, mOCH3), 5.70 (dd, JAX =
4.9 Hz, JBX = 11.2 Hz, 1H, H5X), 6.99 (s, 2H, Ho) 8.93 (s, 1H, CHO) ppm; RMN-13
C (100
MHz, CDCl3): δ 41.9 (CH2), 54.9 (CH3), 57.1 (CH3), 57.6 (CH), 105.3 (CH), 128.9 (CC),
133.4 (CC) 135.6 (CC), 139.7 (CC), 150.1 (CC), 152.3 (CC), 154.5 (CC), 161.0 (CHO) ppm;
MS (IE, 70 eV) m/z (%): 417/415 [M+] (26/34), 374/372 (12/17), 354/352 (21/50), 194
(19), 85/83 (64/100). Análisis calculado para C16H15Cl2N3O4S: C, 46.17; H, 3.63; N, 10.09;
Encontrado: C, 46.22; H, 3.58; N, 10.14.
87
6.5.2 Síntesis de los N-acetil y N-formil-4,5-dihidro-1H-pirazoles 84a-f y 85a-f
- Procedimiento experimental para la síntesis de los compuestos carbonílicos
α,β-insaturados 82a-f
Una mezcla de 2 mmol del 4-cloro-2-morfolinotiazol-5-carbaldehído 81 y 2 mmol de la
acetofenona sustituida 74a-f y3 mL de NaOH 20%se disolvieron en 20 mL de etanol,
siguiendo la metodología reportada por Kotlyar, V. N, y colaboradores.69
La mezcla
resultante se agitó a temperatura ambiente durante 8 horas. El precipitado formado se aisló
por filtración al vacío y se lavó etanol, obteniendo de esta manera los compuestos 82a-f
como sólidos amarillos y sin métodos adicionales de purificación.
- Procedimiento experimental para la síntesis de los 4,5-dihidro-1H-pirazoles
84a-f y 85a-f
1 mmol del compuesto carbonílico α,β-instaurado 82a-f se disolvió en 5 mL de etanol y se
adicionó un exceso de 3 mmol de hidrato de hidracina. La solución resultante se agitó
durante una hora a temperatura ambiente. El progreso de la reacción se controló empleando
CCD, empleando DCM:MeOH 20:1 como fase móvil. El sólido precipitado se aisló por
filtración a vacío, realizando lavados con agua, obteniendo de esta manera los compuestos
83a-f los cuales, debido a su descomposición rápida se disolvieron (0.3 mmol de 83a-f) en
anhídrido acético (84a-f) o ácido fórmico (85a-f) y se agitó a temperatura ambiente durante
una hora. Al crudo de reacción se adicionó 1 mL de agua y el sólido precipitado se aisló por
filtración a vacío, realizando lavados con etanol:agua 1:1, obteniendo de esta manera los
compuestos 84a-f y 85a-f como sólidos blancos, sin procesos adicionales de purificación.
88
1-Acetil-5-(4-cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-fenil-4,5-
dihidro-1H-pirazol (84a), p.f. 165-166 °C; FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 1673 (C=O), 1595 y 1525 (C=N y C=C). RMN-
1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.40 (s, 3H, CH3), 3.26 (dd, JAX
= 4.7 Hz, JAB = 17.7 Hz, 1H, H-4A), 3.38-3.42 (m, 4H,
CH2-N-CH2), 3.68-3.76 (m, 5H, H-4B, CH2-O-CH2), 5.78
(dd, JAX = 4.7 Hz, JBX = 11.7 Hz, 1H, H-5X), 7.43-7.47 (m, 3H, Hm, Hp), 7.75 (dd, J = 2.9
Hz, J = 6.6 Hz, 2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 21.8 (CH3), 40.8 (C-4), 47.7
(CH2-N-CH2), 53.1 (C-5), 65.9 (CH2-O-CH2), 117.9 (C-5'), 126.6 (Co), 128.8 (Cm), 130.5
(Cp), 131.1 (Ci), 132.2 (C-4'), 153.8 (C-3), 167.5 (C-2'), 168.9 (C=O) ppm; MS (IE, 70 eV)
m/z (%): 392/390 [M+] (8/20), 355 (15), 313 (14), 287 (35), 252 (100), 130 (45), 83 (60).
Análisis calculado para C18H19ClN4O2S: C, 55.31; H, 4.90; N, 14.33. Encontrado: C, 55.36;
H, 5.01; N, 14.37.
1-Acetil-3-(4-clorofenil)-5-(4-cloro-2-morfolinotiazol-
5-il)-4,5-dihidro-1H-pirazol (84b) p.f. 179-180 °C;
FT-IR (KBr), υ(cm-1
):1672 (C=O), 1595 y 1525 (C=N
y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.40 (s, 3H,
CH3), 3.24 (dd, JAX = 4.7 Hz, JAB = 17.7 Hz, 1H, H-
4A), 3.39-3.41 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.70 (dd, JBX =
11.8 Hz, JAB = 17.7 Hz, 1H, H-4B), 3.75-3.77 (m, 4H,
CH2-O-CH2), 5.78 (dd, JAX = 4.7 Hz, JBX = 11.8 Hz, 1H, H-5X), 7.43 (d, J = 8.5 Hz, 2H,
Hm), 7.69 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 21.8 (CH3), 40.6
(C-4), 47.6 (CH2-N-CH2), 53.2 (C-5), 65.9 (CH2-O-CH2), 117.6 (C-5'), 127.8 (Co), 129.0
(Cm), 129.6 (Ci), 132.3 (C-4'), 136.5 (Cp), 152.6 (C-3), 167.5 (C-2'), 168.9 (C=O) ppm; MS
(IE, 70 eV) m/z (%): 428/426/424 [M+] (2/10/16), 389 (13), 347 (20), 287 (33), 252 (100),
130 (43), 83 (97). Análisis calculado para C18H18Cl2N4O2S: C, 50.83; H, 4.27; N, 13.17.
Encontrado: C, 50.89; H, 4.30; N, 13.28.
89
1-Acetil-5-(4-cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-(4-
fluorofenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (84c) p.f. 154-155
°C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1674 (C=O), 1598 y 1523
(C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.39 (s,
3H, CH3), 3.23 (dd, JAX = 4.7 Hz, JAB = 17.7 Hz, 1H,
H-4A), 3.35-3.43 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.64-3.78 (m,
5H, H-4B, CH2-O-CH2), 5.78 (dd, JAX = 4.7 Hz, JBX =
11.7 Hz, 1H, H-5X), 7.11-7.15 (m, 2H, Hm), 7.74 (dd, 3JHF = 4.6 Hz,
3J = 8.0 Hz 2H, Ho)
ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 21.8 (CH3), 40.7 (C-4), 47.6 (CH2-N-CH2), 53.1 (C-
5), 65.9 (CH2-O-CH2), 115.9 (d, 2JCF = 22.0 Hz, Cm), 117.7 (C-5’), 127.3 (d,
4JCF = 3.5 Hz
Ci), 128.5 (d, 3JCF = 8.5 Hz Co), 132.6 (C-4’), 152.7 (C-3), 164.0 (d,
1JCF = 251 Hz, Cp),
167.5 (C-2'), 168.8 (C=O) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 410/408 [M+] (8/22), 373 (19),
331 (26), 287 (35), 252 (100), 189 (14), 83 (31). Análisis calculado para C18H19FClN4O2S:
C, 52.87; H, 4.44; N, 13.70. Encontrado: C, 52.90; H, 4.51; N, 13.82.
1-Acetil-5-(4-cloro-2-morfolinofiazol-5-il)-3-(4-
metilfenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (84d) p.f. 191-192
°C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1672 (C=O), 1596 y 1524
(C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.41 (s,
3H, CH3), 2.43 (s, 3H, ArCH3), 3.24 (dd, JAX = 4.6 Hz,
JAB = 17.7 Hz, 1H, H-4A), 3.35-3.45 (m, 4H, CH2-N-
CH2), 3.64-3.82 (m, 5H, H-4B, CH2-O-CH2), 5.77 (dd, JAX = 4.6 Hz, JBX = 11.7 Hz, 1H, H-
5X), 7.26 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Ho), 7.65 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Hm) ppm; RMN-13
C (100 MHz,
CDCl3): δ 21.8 (CH3), 21.9 (ArCH3), 40.8 (C-4), 47.6 (CH2-N-CH2), 53.0 (C-5), 65.9 (CH2-
O-CH2), 118.3 (C-5'), 126.5 (Co), 128.3 (Ci), 129.5 (Cm), 132.1 (C-4'), 140.9 (Cp), 153.8 (C-
3), 167.5 (C-2'), 168.9 (C=O) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 406/404 [M+] (3/8), 369 (8),
327 (10), 287 (12), 252 (46), 159 (56), 83 (100). Análisis calculado para C19H21ClN4O2S:
C, 56.36; H, 5.23; N, 13.84. Encontrado: C, 56.40; H, 5.28; N, 13.83.
90
1-Acetil-5-(4-cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-(4-
metoxifenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (84e) p.f. 181-
182 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1671 (C=O), 1595 y
1520 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ
2.39 (s, 3H, CH3), 3.22 (dd, JAX = 4.6 Hz, JAB = 17.6
Hz, 1H, H-4A), 3.34-3.43 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.68
(dd, JBX = 11.6 Hz, JAB = 17.6 Hz, 1H, H-4B), 3.73-
3.80 (m, 4H, CH2-O-CH2), 3.87 (s, 3H, OCH3), 5.76 (dd, JAX = 4.6 Hz, JBX = 11.6 Hz, 1H,
H-5X), 6.96 (d, J = 8.7 Hz, 2H, Hm), 7.69 (d, J = 8.7 Hz, 2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100
MHz, CDCl3): δ 21.8 (CH3), 40.8 (C-4), 47.6 (CH2-N-CH2), 53.0 (C-5), 55.4 (OCH3), 65.9
(CH2-O-CH2), 114.2 (Co), 118.3 (C-5'), 123.7 (Ci), 128.2 (Cm), 132.1 (C-4'), 153.8 (C-3),
161.5 (Cp), 167.5 (C-2'), 168.7 (C=O) ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 422/420 [M+] (4/10),
341 (5), 256 (9), 149 (30), 137 (40), 83 (100). Análisis calculado para C19H21ClN4O3S: C,
54.22; H, 5.03; N, 13.31. Encontrado: C, 54.27; H, 5.04; N, 13.32.
1-Acetil-5-(4-cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-(3,4,5-
trimetoxilfenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (84f) p.f. 182-
183 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1673 (C=O), 1595 y
1525 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ
2.41 (s, 3H,-CH3), 3.24 (dd, JAX = 4.7 Hz, JAB = 17.6
Hz, 1H, H-4A), 3.35-3.43 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.64-
3.83 (m, 5H, H-4B, CH2-O-CH2), 3.91 (s, 3H,
pOCH3), 3.93 (s, 6H, mOCH3), 5.78 (dd, JAX = 4.6 Hz, JBX = 11.7 Hz, 1H, H-5X), 6.96 (s,
2H, Ho) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 21.9 (CH3), 40.8 (C-4), 47.6 (CH2-N-CH2),
53.1 (C-5), 56.3 (mOCH3), 60.1 (pOCH3), 65.9 (CH2-O-CH2), 103.9 (Co), 117.9 (C-5'),
126.4 (Ci), 132.1 (C-4'), 136.4 (Cm), 140.4 (Cp), 153.5 (C-3), 167.5 (C-2'), 168.2 (C=O)
ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 482/480 [M+] (12/32), 445 (35), 403 (22), 287 (30), 256
(98), 173 (11), 130 (100). Análisis calculado para C21H25ClN4O5S: C, 52.44; H, 5.24; N,
11.65. Encontrado: C, 52.51; H, 5.32; N, 11.70.
91
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-1-formil-3-fenil-4,5-
dihidro-1H-pirazol (85a) p.f. 171-172 °C; FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 1678 (C=O), 1597 y 1528 (C=N y C=C). RMN-1H
(400 MHz, CDCl3): δ 3.30 (dd, JAX = 4.8 Hz, JAB = 17.8
Hz, 1H, H-4A), 3.36-3.45 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.69-3.86
(m, 5H, H-4B, CH2-O-CH2), 5.76 (dd, JAX = 4.8 Hz, JBX =
11.6 Hz, 1H, H-5X), 7.46-7.47 (m, 3H, Hm, Hp), 7.75 (d, J = 7.5 Hz, 2H, Ho), 8.91 (s, 1H,
CHO) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 42.4 (C-4), 49.1 (CH2-N-CH2), 53.6 (C-5),
67.3 (CH2-O-CH2), 117.9 (C-5'), 128.2 (Co), 130.3 (Cm), 132.0 (Cp), 132.3 (Ci), 134.4 (C-
4'), 156.9 (C-3), 161.4 (C=O), 168.9 (C-2') ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 378/376 [M+]
(25/63), 341 (34), 313 (23), 298 (22), 273 (40), 256 (43), 238 (51), 230 (22), 173 (51), 145
(58), 130 (65) 86 (100). Análisis calculado para C17H17ClN4O2S: C, 54.18; H, 4.55; N,
14.87. Encontrado: C, 54.20; H, 4.56; N, 14.70.
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-(4-clorofenil)-1-
formil-4,5-dihidro-1H-pirazol (85b) p.f. 186-187 °C;
FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1679 (C=O), 1596 y 1529 (C=N
y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 3.26 (dd, JAX
= 4.9 Hz, JAB = 17.8 Hz, 1H, H-4A), 3.36-3.43 (m, 4H,
CH2-N-CH2), 3.67-3.85 (m, 5H, H-4B, CH2-O-CH2),
5.75 (dd, JAX = 4.9 Hz, JBX = 11.6 Hz, 1H, H-5X), 7.43 (d, J = 8.6 Hz, 2H, Hm), 7.68 (d, J =
8.6 Hz, 2H, Ho), 8.91 (s, 1H, CHO) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 40.9 (C-4), 47.7
(CH2-N-CH2), 52.3 (C-5), 65.9 (CH2-O-CH2), 116.2 (C-5'), 127.9 (Co), 129.1 (Ci), 129.2
(Cm), 133.1 (C-4'), 136.8 (Cp), 154.4 (C-3), 159.9 (C=O), 167.7 (C-2') ppm; MS (IE, 70 eV)
m/z (%): 414/412/410 [M+] (9/47/65), 375 (37), 347 (22), 332 (24), 290 (35), 273 (57), 238
(62), 230 (54), 173 (41), 130 (71) 86 (100). Análisis calculado para C17H16Cl2N4O2S: C,
49.64; H, 3.92; N, 13.62. Encontrado: C, 49.71; H, 4.01; N, 13.65.
92
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-3-(4-fluorofenil)-
1-formil-4,5-dihidro-1H-pirazol (85c) p.f. 160-161
°C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1680 (C=O), 1596 y 1528
(C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 3.27
(dd, JAX = 4.9 Hz, JAB = 17.8 Hz, 1H, H-4A), 3.37-
3.44 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.69-3.83 (m, 5H, H-4B,
CH2-O-CH2), 5.75 (dd, JAX = 4.9 Hz, JBX = 11.7 Hz, 1H, H-5 X), 7.11-7.19 (m, 2H, Hm),
7.75 (dd, 3JHF = 4.9 Hz,
3J = 8.8 Hz 2H, Ho), 8.90 (s, 1H, CHO) ppm; RMN-
13C (100
MHz, CDCl3): δ 41.0 (C-4), 47.6 (CH2-N-CH2), 52.2 (C-5), 65.9 (CH2-O-CH2), 116.1 (d,
2JCF = 22.1 Hz, Cm), 116.3 (C-5’), 126.9 (d,
4JCF = 3.5 Hz Ci), 128.7 (d,
3JCF = 8.5 Hz Co),
133.0 (C-4’), 154.4 (C-3), 159.9 (C=O), 164.2 (d, 1JCF = 252.2 Hz, Cp), 167.5 (C-2') ppm;
MS (IE, 70 eV) m/z (%): 396/394 [M+] (10/24), 273 (28), 257 (20), 236 (40), 185 (40), 163
(60) 86 (100). Análisis calculado para C17H16FClN4O2S: C, 51.71; H, 4.08; N, 14.19.
Encontrado: C, 51.73; H, 4.02; N, 14.30.
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-1-formil-3-(4-
metilfenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (85d) p.f. 177-178 °C;
FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1677 (C=O), 1596 y 1527 (C=N y
C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.43 (s, 3H,
ArCH3), 3.28 (dd, JAX = 4.8 Hz, JAB = 17.8 Hz, 1H, H-
4A), 3.38-3.44 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.71-3.83 (m, 5H,
H-4B, CH2-O-CH2), 5.75 (dd, JAX = 4.8 Hz, JBX = 11.4 Hz, 1H, H-5X), 7.28 (d, J = 8.1 Hz,
2H, Ho), 7.65 (d, J = 8.1 Hz, 2H, Hm), 8.92 (s, 1H, CHO) ppm; RMN-13
C (100 MHz,
CDCl3): δ 21.5 (ArCH3), 41.1 (C-4), 47.7 (CH2-N-CH2), 52.1 (C-5), 65.9 (CH2-O-CH2),
116.2 (C-5'), 126.8 (Co), 127.8 (Ci), 129.6 (Cm), 132.9 (C-4'), 141.3 (Cp), 155.6 (C-3),
159.92 (C=O), 167.5 (C-2') ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%): 392/390 [M+] (4/10), 355 (7),
256 (8), 185 (14), 159 (17), 130 (24) 86 (100). Análisis calculado para C18H19ClN4O2S: C,
54.18; H, 4.55; N, 14.87. Encontrado: C, 54.20; H, 4.56; N, 14.70.
93
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-il)-1-formil-3-(4-
metoxifenyl)-4,5-dihidro-1H-pirazol (85e) p.f. 213-
214 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1673 (C=O), 1596 y
1527 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ
3.25 (dd, JAX = 4.9 Hz, JAB = 17.7 Hz, 1H, H-4A),
3.35-3.43 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.66-3.82 (m, 5H, H-
4B, CH2-O-CH2), 3.87 (s, 3H, OCH3), 5.73 (dd, JAX = 4.9 Hz, JBX = 10.8 Hz, 1H, H-5X),
6.96 (d, J = 8.9 Hz, 2H, Ho), 7.68 (d, J = 8.9 Hz, 2H, Hm), 8.89 (s, 1H, CHO) ppm; RMN-
13C (100 MHz, CDCl3): δ 41.1 (C-4), 47.6 (CH2-N-CH2), 52.0 (C-5), 55.4 (OCH3), 65.9
(CH2-O-CH2), 114.3 (Co), 116.8 (C-5'), 123.2 (Ci), 128.3 (Cm), 132.8 (C-4'), 155.3 (C-3),
159.8 (C=O), 161.7 (Cp), 167.7 (C-2') ppm; MS (IE, 70 eV) m/z (%):408/406 [M+] (28/75),
371 (53), 293 (69), 265 (100), 230 (43), 175 (39), 130 (65) 86 (71). Análisis calculado para
C18H19ClN4O3S: C, 53.13; H, 4.71; N, 13.77. Encontrado: C, 53.17; H, 4.77; N, 13.89.
5-(4-Cloro-2-morfolinotiazol-5-l)-1-formil-3-(3,4,5-
trimetoxifenil)-4,5-dihidro-1H-pirazol (85f) p.f. 223-
224 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1677 (C=O), 1596 y
1524 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ
3.28 (dd, JAX = 4.7 Hz, JAB = 17.6 Hz, 1H, H-4A),
3.34-3.49 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.67-3.85 (m, 5H, H-
4B, CH2-O-CH2), 3.92 (s, 3H, pOCH3), 3.93 (s, 6H,
mOCH3), 5.77 (dd, JAX = 4.7 Hz, JBX = 11.5 Hz, 1H, H-5X), 6.97 (s, 2H, Ho), 8.91 (s, 1H,
CHO) ppm; RMN-13
C (100 MHz, CDCl3): δ 41.4 (C-4), 47.7 (CH2-N-CH2), 52.3 (C-5),
56.3 (mOCH3), 60.0 (pOCH3), 65.9 (CH2-O-CH2), 104.0 (Co), 116.4 (C-5'), 125.9 (Ci),
133.0 (C-4'), 140.6 (Cp), 153.5 (C-3), 155.2 (Cm), 159.8 (C=O), 167.5 (C-2') ppm; MS (IE,
70 eV) m/z (%):468/466 [M+] (37/89), 431 (46), 388 (30), 346 (18), 273 (23), 130 (41), 86
(100). Análisis calculado para C20H23ClN4O5S (466.10): C, 51.44; H, 4.96; N, 12.00.
Encontrado: C, 51.48; H, 4.99; N, 12.24.
94
6.5.3 Síntesis de 8,9-dihidro-[4,5-b][1,4]-diazepinas
-Procedimiento general para la síntesis de las 8,9-dihidro-[4,5-b][1,4]-diazepinas 88a-f
y 89a-f.
Se sometió a reflujo durante un tiempo de 24-30 horas, una mezcla de 0.5 mmol de
compuesto carbonílico α,β-insaturado 75a-f y 0.6 mmol de triaminopirimidina (86) o
tetraaminopirimidina (87) disueltas en 20 mL de metanol. La reacción se controló mediante
CCD empleando DCM como fase móvil. Al terminar la reacción, se adicionó NH4OH 6%
gota a gota hasta neutralización y rápidamente se realizó un proceso de extracción
empleando diclorometano como fase orgánica. Se eliminó el disolvente mediante
destilación con presión reducida y el crudo obtenido se sometió a proceso de cromatografía
de columna, empleando una mezcla 60:1 de DCM:MeOH, obteniendo de esta manera las
8,9-dihidro-[4,5-b][1,4]-diazepinas 88a-f y 89a-f, como sólidos beige.
4-amino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il) -6-fenil-8,9-dihidro-7H-
pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (88a)p.f. 242-243 °C; FT-IR
(KBr), υ(cm-1
): 3462, 3278 y 3231 (-NH, 4-NH2), 1631, 1591
y 1564 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 3.00
(dd, J = 14.4, 3.0 Hz, 1H, H7A), 3.84 (dd, J = 14.4, 5.6 Hz, 1H,
H7M), 5.49 (dd, J = 5.6, 3.0 Hz, 1H, H8X), 6.65 (s, 2H, 4-NH2),
7.31-7.45 (m, 3H, Hm y Hp), 7.74 (d, J = 6.0 Hz, 1H, -NH)
7.81 (dd, J = 7.9, 1.5 Hz, 2H, Ho) 7.84 (s, 1H, H2) ppm.RMN-
13C (100 MHz, DMSO-d6): δ 36.5 (CH2), 56.1 (CH), 108.5 (s), 127.04 (CH), 128.7 (CH),
130.35 (CH), 130.4 (Cc), 139.6 (Cc), 139.8 (Cc), 149.3 (Cc), 152.5 (Cc), 156.0 (CH) 162.1
(Cc), 162.4 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 392/390 [M+] (27.0/40.4), 357/355
(33.6/87.7), 211 (100). Análisis Calculado para C16H12Cl2N6S: C, 49.11; H, 3.09; N, 21.48;
Encontrado: C, 49.28; H, 2.50; N, 21.53.
95
4-amino-6-(4-clorofenil)-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-8,9-dihidro-
7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (88b)p.f. 238-239 °C; FT-IR
(KBr), υ(cm-1
): 3462, 3278 y 3231 (-NH, 4-NH2), 1629, 1590 y
1563 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, DMSO-d6): δ2.99 (dd,
J = 14.5, 3.0 Hz, 1H, H7A), 3.84 (dd, J = 14.5, 5.7 Hz, 1H, H7M),
5.46 (dd, J = 5.7, 3.0 Hz, 1H, H8X), 6.69 (s, 2H, 4-NH2), 7.42 (d,
J = 8.7 Hz, 2H, Hm), 7.79 (d, J = 6.2 Hz, 1H, -NH), 7.84 (d, J =
8.7 Hz, 2H, Ho) 7.86 (s, 1H, H2) ppm.RMN-13
C (100 MHz,
DMSO-d6): δ36.5 (CH2), 55.7 (CH), 108.3 (Cc), 128.7 (CH),
128.9 (CH), 130.5 (Cc), 135.2 (Cc), 138.4 (Cc), 139.0 (Cc), 149.9 (Cc), 152.6 (Cc), 156.2
(CH), 160.6 (Cc), 162.5 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%):428/426/424 [M+] (10/29/30),
391/389 (58/80), 247/245 (31/100). Análisis Calculado para C16H11Cl3N6S: C, 45.14; H,
2.60; N, 19.74; Encontrado: C, 45.30; H, 2.77; N, 19.95.
4-amino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-(4-fluorofenil)-8,9-dihidro-
7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (88c)p.f. 244-245 °C; FT-IR
(KBr), υ(cm-1
): 3460, 3272 y 3218 (-NH, 4-NH2), 1630, 1586 y
1563 (C=N y C=C). RMN-1H(400 MHz, DMSO-d6): δ 3.00 (dd, J
= 14.5, 2.1 Hz, 1H, H7A), 3.83 (dd, J = 14.4, 5.7 Hz, 1H, H7M),
5.45-5.49 (m, 1H, H8X), 6.66 (s, 2H, 4-NH2), 7.17-7.21 (m, 2H,
Hm), 7.73 (d, J = 6.2 Hz, 1H, -NH), 7.83 (s, 1H, H2), 7.88 (dd, J =
9.0 y JHF = 5.5 Hz, 2H, Ho) ppm.RMN-13
C (100 MHz, DMSO-
d6): δ 36.5 (C7), 56.0 (C8), 108.4 (C4a), 115.5 (d, 2JCF = 21.5 Hz, Cm), 129.5 (d,
3JCF = 8.6
Hz, Co), 130.4 (C4’), 136.2 (d, 4JCF = 3.0 Hz, Ci), 139.7 (C5’), 149.4 (C4), 152.5 (C9a), 156.0
(C2), 161.7 (d, 1JCF = 246.9 Hz), 162.4 (C=N), 164.9 (C2’) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%):
410/408 [M+] (20.4/30.8), 375/373 (28.7/77.9), 229 (100). Análisis Calculado para
C16H11Cl2FN6S: C, 46.95; H, 2.71; N, 20.53; Encontrado: C, 46.99; H, 2.89; N, 20.51.
96
4-amino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-(4-metilfenil)-8,9-dihidro-
7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (88d)p.f. 250-251 °C; FT-IR
(KBr), υ(cm-1
): 3408, 3301 y 3237 (-NH, 4-NH2), 1630, 1589 y
1557 (C=N y C=C). RMN-1H(400 MHz, DMSO-d6): δ 2.31 (s,
3H, pCH3), 2.97 (dd, J = 14.3, 2.0 Hz, 1H, H7A), 3.81 (dd, J =
14.3, 5.6 Hz, 1H, H7M), 5.46-5.50 (m, 1H, H8X), 6.62 (s, 2H, 4-
NH2), 7.17 (d, J = 8.2 Hz, 2H, Hm), 7.67 (d, J = 6.2 Hz, 1H, -NH),
7.71 (d, J = 8.2 Hz, 2H, Ho), 7.83 (s, 1H, H2) ppm. RMN-13
C (100
MHz, DMSO-d6): δ21.3 (CH3), 36.3 (CH2), 55.3 (CH), 108.5 (Cc), 127.0 (CH), 129.3 (CH),
130.4 (Cc), 136.9 (Cc), 139.8 (Cc), 140.1 (Cc), 149.3 (Cc), 152.5 (CH), 155.8 (Cc), 162.8
(Cc), 162.4 (Cc) ppm.MS (IE, 70 eV) m/z (%): 406/404 [M+] (26.2/35.1), 371/369
(24.4/63.7), 225 (100). Análisis Calculado para C17H14Cl2N6S: C, 50.38; H, 3.48; N, 20.74;
Encontrado: C, 50.32; H, 3.76; N, 20.75.
4-amino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-(4-metoxifenil)-8,9-
dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (88e)p.f. 226-227
°C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3468, 3280 y 3229 (-NH, 4-NH2),
1629, 1590 y 1563 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, DMSO-
d6): δ 2.96 (dd, J = 14.3, 2.1 Hz, 1H, H7A) 3.84 - 3.75 (m, 4H,
H7M y pOCH3), 5.45-5.49 (m, 1H, H8X), 6.58 (s, 2H, 4-NH2),
7.63 (d, J = 6.0 Hz, 2H, Hm), 7.68 (d, J = 6.0 Hz, 1H, -NH)
7.79 (d, J = 8.9 Hz, 2H, Ho), 7.81 (s, 1H, H2) ppm.
RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ36.1 (CH2), 55.7 (CH3),
56.4 (CH), 108.7 (Cc), 114.0 (CH), 128.7 (CH), 130.3 (Cc), 132.2 (Cc), 139.9 (Cc), 149.2
(Cc), 152.4 (CH), 155.5 (Cc), 161.2 (Cc), 161.8 (Cc), 162.2 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z
(%): 422/420 [M+] (42.4/58.7), 387/385 (32.4/87.7), 371/369 (6.5/16.1), 241 (100). Análisis
Calculado para C17H14Cl2N6OS: C, 48.46; H, 3.35; N, 19.95; Encontrado: C, 48.73; H,
3.51; N, 19.93.
97
4-amino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-(3,4,5-trimetoxifenil)-8,9-
dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (88f)p.f. 249-250
°C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3395, 3288 y 3256 (-NH, 4-NH2),
1669, 1583 y 1561 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz,
DMSO-d6): δ 3.04 - 2.92 (m, 1H, H7A), 3.69 (s, 3H, pOCH3),
3.92 - 3.72 (m, 7H, H7M y pOCH3), 5.53 (d, J = 3.9 Hz, 1H,
H8X), 6.62 (s, 2H, 4-NH2), 7.01 (s, 2H, Ho), 7.59 (d, J = 6.1 Hz,
1H, -NH), 7.84 (s, 1H, H2) ppm. RMN-13
C (100 MHz, DMSO-
d6): δ36.19 (CH2), 56.38 (CH), 57.74 (CH3), 60.58 (CH3),
104.68 (CH), 108.97 (Cc), 130.24 (Cc), 135.01 (Cc), 139.84 (Cc), 140.47 (Cc), 149.25 (Cc),
152.58 (Cc), 152.92 (Cc), 155.79 (CH), 162.08 (Cc), 162.69 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z
(%): 482/480 [M+] (66.1/96.3), 447/445 (38.8/100), 431/429 (7.6/21.9), 301 (68.2), 286
(45.1). Análisis Calculado para C19H18Cl2N6O3S: C, 47.41; H, 3.77; N, 17.46; Encontrado:
C, 47.48; H, 3.85; N, 17.53.
4-amino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-(3,4-metilendioxifenil)-8,9-
dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (88g)p.f. 261-262
°C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3471, 3288 y 3256 (-NH, 4-NH2),
1675, 1581 y 1573 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz, DMSO-
d6): δ 2.95 (d, J = 14.1 Hz, 1H, H7A), 3.75 (dd, J = 14.1, 5.4 Hz,
1H, H7M), 5.46 (s, 1H, H8X), 6.07 (s, 2H, O-CH2-O), 6.63 (s,
2H, 4-NH2), 6.88 (d, J = 8.1 Hz, 1H, Hm), 7.20 (d, J = 8.1 Hz,
1H, Ho), 7.58 (s, 1H, -NH), 7.63 (d, J = 5.9 Hz, 1H, Ho’), 7.81
(s, 1H, H2) ppm.RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ36.33
(CH2), 56.49 (CH), 101.96 (CH2), 107.16 (CH), 108.00 (CH), 108.63 (Cc), 121.87 (CH),
130.47 (Cc), 134.22 (Cc), 139.89 (Cc), 148.19 (Cc), 149.34 (Cc), 149.47 (Cc), 152.52 (Cc),
155.67 (CH), 161.51 (Cc), 162.26 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 436/434 [M+]
(54.5/83.1), 401/399 (45.1/100), 385/383 (8.9/22.3), 255 (30.0). Análisis Calculado para
C17H12Cl2N6O2S: C, 46.91; H, 2.78; N, 19.31; Encontrado: C, 47.09; H, 2.99; N, 19.35.
98
2,4-diamino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il) -6-fenil-8,9-dihidro-
7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (89a)p.f. 172-173 °C;
FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3468, 3444 y 3310 (-NH, 2-NH2, 4-
NH2), 1551, 1579 y 1548 (C=N y C=C). RMN-1H (400
MHz, CDCl3): δ 2.89 (dd, J = 14.6, 1.8 Hz, 1H, H7A), 3.81
(dd, J = 14.6, 5.5 Hz, 1H, H7M), 5.31-5.42 (m, 1H, H8X),
5.89 (s, 2H, 2-NH2), 6.36 (s, 2H, 4-NH2), 7.28-7.40 (m,
4H, -NH, Hm y Hp), 7.65-7.75 (m, 2H, Ho) ppm.RMN-13
C
(100 MHz, DMSO-d6): δ 36.7 (CH2), 53.5 (CH), 102.3 (s), 126.4 (CH), 128.68 (CH), 129.6
(CH), 130.4 (Cc), 132.3 (Cc), 140.6 (Cc), 153.9 (CH), 154.7 (Cc), 160.8 (Cc), 163.8 (Cc),
167.4 (Cc) ppm.MS (IE, 70 eV) m/z (%): 407/405 [M+] (4.1/25.3), 372/370 (7.1/17.1), 226
(56.5), 91 (100). Análisis Calculado para C16H13Cl2N7S: C, 47.30; H, 3.23; N, 24.13;
Encontrado: C, 47.59; H, 3.50; N, 24.32.
2,4-diamino-6-(4-clorofenil)-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-
8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (89b)p.f.
215-216 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3476, 3446 y 3311 (-
NH, 2-NH2, 4-NH2), 1648, 1585 y 1549 (C=N y C=C).
RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 3.06 (dd, J = 14.6, 2.0 Hz,
1H, H7A), 3.67 (dd, J = 14.6, 6.1 Hz, 1H, H7M), 5.16 (s,
2H, 2-NH2), 5.34 (d, J = 4.5 Hz, 1H, H8X), 5.88 (s, 2H, 4-
NH2), 6.48 (s, 1H, -NH), 7.31 (d, J = 8.7 Hz, 2H, Hm),
7.60 (d, J = 8.7 Hz, 2H, Ho) ppm.RMN-13
C (100 MHz,
DMSO-d6): δ37.6 (CH2), 53.0 (CH), 103.0 (Cc), 127.4 (CH), 128.6 (CH), 131.9 (Cc), 135.6
(Cc), 136.3 (Cc), 138.4 (Cc), 151.0 (Cc), 153.4 (Cc), 155.2 (Cc), 160.4 (Cc), 163.9 (Cc) ppm.
MS (IE, 70 eV) m/z (%): 443/441/439 [M+] (29/57/58), 406/404 (35.8/52.4), 370/368
(11.2/24.6), 262/260 (48.3/100). Análisis Calculado para C16H12Cl3N7S: C, 43.60; H, 2.74;
N, 22.25; Encontrado: C, 43.71; H, 2.85; N, 22.45.
99
2,4-diamino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-(4-fluorofenil)-8,9-
dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (89c)p.f. 214-215
°C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3475, 3446 y 3309 (-NH, 2-NH2,
4-NH2), 1651, 1587 y 1552 (C=N y C=C). RMN-1H (400
MHz, CDCl3): δ 3.06 (dd, J = 14.5, 1.9 Hz, 1H, H7A), 3.68
(dd, J = 14.4, 5.7 Hz, 1H, H7M), 5.20 (s, 2H, 2-NH2), 5.34 (d,
J = 3.9 Hz, 1H, H8X), 5.89 (s, 2H, 4-NH2), 6.53 (s, 1H, -NH),
6.98-7.08 (m, 2H, Hm), 7.65 (dd, J = 8.9 y JHF = 5.3 Hz, 2H,
Ho) ppm.RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ 37.6 (C), 53.2 (C8), 103.7 (C4a), 115.47 (d,
2JCF = 21.7 Hz, Cm), 128.1 (d,
3JCF = 8.4 Hz, Co), 131.83 (C4’), 136.2 (d,
4JCF = 3.1 Hz, Ci),
136.49 (C5’), 150.9 (C4), 153.3 (C9a), 155.6 (C2), 160.3 (C=N), 163.1 (d, 1JCF = 246.9 Hz),
164.9 (C2’) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 425/423 [M+] (7.1/12.5), 390/388 (16.0/40.6),
352 (19.5), 244 (100). Análisis Calculado para C16H12Cl2FN7S: C, 45.29; H, 2.85; N, 23.11;
Encontrado: C, 45.36; H, 2.89; N, 23.21.
2,4-diamino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-(4-metilfenil)-8,9-
dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (89d)p.f. 217-
218 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3471, 3439 y 3313 (-NH,
2-NH2, 4-NH2), 1641, 1588 y 1550 (C=N y C=C). RMN-
1H (400 MHz, CDCl3): δ 2.36 (s, 3H, pCH3) 3.06 (dd, J =
14.6, 2.0 Hz, 1H, H7A), 3.69 (dd, J = 14.6, 6.1 Hz, 1H,
H7M), 5.16 (s, 2H, 2-NH2), 5.35 (d, J = 4.3 Hz, 1H, H8X),
5.89 (s, 2H, 4-NH2), 6.48 (s, 1H, -NH), 7.14 (d, J = 8.2
Hz, 2H, Hm), 7.57 (d, J = 8.2 Hz, 2H, Ho) ppm.RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ21.2
(CH3), 37.5 (CH2), 53.3 (CH), 103.2 (Cc), 126.2 (CH), 129.2 (CH), 131.8 (Cc), 136.7 (Cc),
137.3 (Cc), 138.7 (Cc), 150.8 (Cc), 153.3 (Cc), 156.8 (Cc), 160.2 (Cc), 163.8 (Cc) ppm. MS
(IE, 70 eV) m/z (%): 421/419 [M+] (19.1/54.0), 386/384 (10.8/31.4), 370/368 (6.1/15.9),
240 (100). Análisis Calculado para C17H15Cl2N7S: C, 48.58; H, 3.60; N, 23.33; Encontrado:
C, 48.83; H, 3.89; N, 23.57.
100
2,4-diamino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-(4-metoxifenil)-
8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-b][1,4]diazepina (89e)p.f.
202-203 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3460, 3433 y 3309 (-
NH, 2-NH2, 4-NH2), 1648, 1584 y 1551 (C=N y C=C).
RMN-1H (400 MHz, CDCl3): δ 3.06 (d, J = 13.3, 1H,
H7A), 3.69 (dd, J = 14.4, 6.0 Hz, 1H, H7M), 3.83 (s, 3H,
pOCH3), 5.06 (s, 2H, 2-NH2), 5.36 (s, 1H, H8X), 5.82 (s,
2H, 4-NH2), 6.31 (s, 1H, -NH), 6.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H,
Hm), 7.64 (d, J = 8.8 Hz, 2H, Ho) ppm.RMN-13
C (100
MHz, DMSO-d6): δ37.1 (CH2), 53.8 (CH), 55.3 (CH3), 103.3 (Cc), 113.8 (CH), 127.8 (CH),
131.6 (Cc), 132.66 (Cc), 136.8 (Cc), 150.84 (Cc), 153.2 (Cc), 156.8 (Cc), 160.7 (Cc), 160.9
(Cc), 163.6 (Cc) ppm.MS (IE, 70 eV) m/z (%): 437/435 [M+] (15.4/21.8), 401.90/399.95
(14.7/41.9), 386/384 (2.3/6.3), 269 (31.7), 256 (100). Análisis Calculado para
C17H15Cl2N7OS: C, 46.80; H, 3.47; N, 22.47; Encontrado: C, 47.09; H, 3.61; N, 22.46.
2,4-diamino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-(3,4,5-
trimetoxifenil)-8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-
b][1,4]diazepina (89f)p.f. 223-224 °C; FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 3476, 3439 y 3311 (-NH, 2-NH2, 4-NH2),
1661,1581 y 1556 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz,
CDCl3): δ3.06 (d, J = 14.4, 1H, H7A), 3.70 (dd, J = 14.3,
5.9 Hz, 1H, H7M), 3.89 (s, 9H, pOCH3, mOCH3), 4.89 (s,
2H, 2-NH2), 5.42 (s, 1H, H8X), 5.69 (s, 2H, 4-NH2), 6.15
(s, 1H, -NH), 6.87 (s, 2H, Ho) ppm.RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ37.3 (CH2), 54.7
(CH), 56.2 (CH3), 60.9 (CH3), 103.4 (Cc), 103.7 (CH), 131.8 (Cc), 135.5 (Cc), 137.2 (Cc),
139.8 (Cc), 150.8 (Cc), 153.0 (Cc), 153.3 (Cc), 157.3 (Cc), 160.2 (Cc), 163.5 (Cc) ppm. MS
(IE, 70 eV) m/z (%): 497/495 [M+] (63.4/100), 462/460 (11.1/28.2), 446/444 (7.7/20.5), 316
(55.6). Análisis Calculado para C19H19Cl2N7O3S: C, 45.97; H, 3.86; N, 19.75; Encontrado:
C, 45.99; H, 3.97; N, 19.81.
101
2,4-diamino-8-(2,4-diclorotiazol-5-il)-6-(3,4-
metilendioxifenil)-8,9-dihidro-7H-pirimido[4,5-
b][1,4]diazepina (89g)p.f. 189-190 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-
1): 3467, 3440 y 3313 (-NH, 2-NH2, 4-NH2), 1657, 1578 y
1552 (C=N y C=C). RMN-1H(400 MHz, CDCl3): δ 3.04 (d,
J = 14.5, 1H, H7A), 3.68 (dd, J = 14.5, 6.0 Hz, 1H, H7M),
4.91 (s, 2H, 2-NH2), 5.34 (d, J = 4.0 Hz, 1H, H8X), 5.73 (s,
2H, 4-NH2), 6.01 (s, 2H, O-CH2-O) 6.13 (s, 1H, -NH), 6.76
(d, J = 8.2 Hz, 1H, Hm), 7.09 (d, J = 8.2, 1.5 Hz, 1H, Ho), 7.33 (s, 1H, Ho’) ppm.RMN-13
C
(100 MHz, DMSO-d6): δ37.3 (CH2), 53.6 (CH), 101.4 (CH2), 103.0 (Cc), 106.4 (CH), 107.8
(CH), 120.8 (CH), 131.8 (Cc), 134.3 (Cc), 136.5 (Cc), 148.1 (Cc), 149.1 (Cc), 150.9 (Cc),
153.2 (Cc), 156.2 (Cc), 160.1 (Cc), 163.6 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 451/449 [M+]
(56.0/78.3), 416/414 (13.3/34.1), 400/398 (7.6/19.3), 283 (19.9), 270 (100). Análisis
Calculado para C17H13Cl2N7O2S: C, 45.34; H, 2.91; N, 21.77; Encontrado: C, 45.57; H,
3.11; N, 21.79.
6.5.4 Síntesis de (Z)-5-hetariliden-1,3-tiazol-4-onas 98/99/100/101/102a-d
Se disolvió 0.5 mmol de rodanina N-sustituida 93/94/96/96/97 en 5 mL de ácido acético,
posteriormente se adicionó 0.5 mmol de aldehído tiazólico 90a-d y 2 equivalentes de
NH4Ac. Se sometió la mezcla resultante a calentamiento convencional a reflujo durante un
periodo de 4 horas, realizando control con CCD empleando una mezcla DCM:MeOH 30:1.
El sólido formado se aisló por filtración a vacío, realizando lavados con una mezcla 2:1 de
agua:etanol. Los compuestos se obtuvieron sin procesos de purificación adicionales a
excepción de la serie de compuestos 100a-d que requirieron cromatografía de columna,
empleando una mezcla de AcOEt:EtOH 30:1.
Ácido (Z)-2-(5-((2,4-diclorotiazol-5-il)metilen)-4-oxo-2-
tioxotiazolidin-3-il)acético (98a)p.f. 183-184 °C; FT-IR
102
(KBr), υ(cm-1
): 3453 (-CO-OH), 1729 (C=O), 1560-1519 (C=N y C=C). RMN-1H(400
MHz, DMSO-d6): δ4.70 (s, 2H, -CH2), 7.72 (s, 1H, H5’), 13.21 (s.a. 1H, -COOH)
ppm.RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ46.0 (CH2), 118.7 (Cc), 120.6 (Cc), 121.9 (CH),
142.8 (Cc), 162.1 (Cc), 166.7 (Cc), 167.6 (Cc), 191.4 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%):
355/353 [M+] (2/5), 149 (54), 83 (100). Análisis calculado para C9H4Cl2N2O3S3: C, 30.43;
H, 1.14; N, 7.89; Encontrado: C, 30.51; H, 1.21; N, 7.79.
Ácido (Z)-2-(5-((4-cloro-2-morfolinotiazol-5-
il)metilen)-4-oxo-2-tioxotiazolidin-3-il)acético
(98b)p.f. 190-191 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3451 (-
CO-OH), 1735 (C=O), 1571-1521 (C=N y C=C).
RMN-1H(400 MHz, DMSO-d6): δ3.67-3.70 (m, 4H,
CH2-N-CH2), 3.71-3.83 (m, 4H, CH2-O-CH2)4.71 (s,
2H, -CH2), 7.83 (s, 1H, H5’) ppm.(La señal de -COOH) no se observa. RMN-13
C (100
MHz, DMSO-d6): δ 46.0 (CH2), 49.3 (CH2), 65.8 (CH2), 117.1 (Cc), 123.4 (Cc), 127.8
(CH), 136.1 (Cc), 155.9 (Cc), 166.8 (Cc), 171.4 (Cc), 190.5 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z
(%): 407/405 [M+] (21/69), 369 (72), 83 (100).Análisis calculado para C13H12ClN3O4S3: C,
41.63; H, 3.49; N, 10.40; Encontrado: C, 41.71; H, 3.55; N, 10.36.
Ácido (Z)-2-(5-((4-cloro-2-(pirrolidin-1-il)tiazol-5-
il)metilen)-4-oxo-2-tioxotiazolidin-3-il)acético (98c)p.f.
193-194 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3455 (-CO-OH),
1715 (C=O), 1568-1530 (C=N y C=C). RMN-1H(400
MHz, DMSO-d6): δRMN-1H(400 MHz, DMSO-d6): δ
2.15-2.18 (m, 4H, CH2-CH2), 3.58-3.61 (m, 4H, CH2-N-
CH2)4.70 (s, 2H, -CH2), 7.68 (s, 1H, H5’) ppm.(La señal de -COOH) no se observa.RMN-
13C (100 MHz, DMSO-d6): δ 25.5 (CH2), 45.6 (CH2), 50.6 (CH2), 112.9 (Cc), 114.3 (Cc),
123.3 (Cc), 146.7 (CH), 166.8 (Cc), 167.8 (Cc), 179.7 (Cc), 191.2 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV)
m/z (%): 391/389 [M+] (32/81), 354 (68), 83 (100).Análisis calculado para
C13H12ClN3O3S3: C, 40.05; H, 3.10; N, 10.78; Encontrado: C, 40.125; H, 3.18; N, 10.83.
103
Ácido (Z)-2-(5-((2-amino-4-clorotiazol-5-il)metilen)-4-
oxo-2-tioxotiazolidin-3-il)acético (98d)p.f. 210-211
°C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3453 (-CO-OH), 3203 (-
NH2) 1729 (C=O), 1560-1519 (C=N y C=C). RMN-
1H(400 MHz, DMSO-d6): δ4.52 (s, 2H, -CH2), 7.62 (s,
1H, H5’), 8.64 (s, 2H, NH2) ppm. (La señal de -COOH)
no se observa.δ 47.3(CH2), 117.7 (Cc), 118.8 (Cc), 122.0 (CH), 143.8 (Cc), 164.4 (Cc),
166.3 (Cc), 166.3 (Cc), 191.4 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 337/335 [M+] (1/3), 300
(54), 83 (100).Análisis calculado para C9H6ClN3O3S3: C, 32.19; H, 1.80; N, 12.51;
Encontrado: C, 32.23; H, 1.77; N, 12.58.
Ácido (R,Z)-2-(5-((2,4-diclorotiazol-5-il)metilen)-4-
oxo-2-tioxotiazolidin-3-il)-3-fenilpropanoico(99a)p.f.
176-177 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3430 (-CO-OH),
1702 (C=O), 1581-1519 (C=N y C=C). RMN-1H(400
MHz, DMSO-d6): δ3.60 (d, J = 7.2 Hz, 2H, Hβ), 5.95
(t, J = 7.2 Hz, 1H, Hα), 7.10-7.18 (m, 2H, Ho), 7.19-
7.27 (m, 3H, Hm y Hp), 7.72 (s, 1H, H5’) ppm. (La señal de -COOH) no se observa.RMN-
13C (100 MHz, DMSO-d6): δ33.7 (CH2), 58.6 (CH), 119.7 (CH),124.9 (Cc), 127.2 (CH),
128.2 (Cc), 128.6 (CH), 129.1 (CH),135.6 (CC), 142.0 (Cc), 155.6 (Cc), 166.1 (Cc), 172.6
(Cc), 189.6 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 448/444 [M+] (3.9/13.1), 298/296
(26.6/32.9), 263/261 (28.9/55.3), 211/209 (71/100). Análisis calculado para
C15H8Cl2N2O3S3: C, 41.77; H, 1.87; N, 6.49; Encontrado: C, 41.70; H, 1.96; N, 6.56.
Ácido (R,Z)-2-(5-((4-cloro-2-morfolinotiazol-5-
il)metilen)-4-oxo-2-tioxotiazolidin-3-il)-3-
fenilpropanoico(99b)p.f. 184-185 °C; FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 3436 (-CO-OH), 1704 (C=O), 1581-1547
(C=N y C=C). RMN-1H(400 MHz, DMSO-d6):
104
δ3.61(d, J = 7.0 Hz, 2H, Hβ), 3.65-3.68 (m, 4H, CH2-N-CH2),3.87-3.91(m, 4H, CH2-O-
CH2),5.89 (t, J = 7.0Hz, 1H, Hα), 7.12-7.18 (m, 2H, Ho), 7.20-7.26 (m, 3H, Hm y Hp), 7.80
(s, 1H, H5’) ppm. (La señal de -COOH) no se observa). RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6):
δ33.8 (CH2), 48.5 (CH2), 59.9 (CH), 65.6 (CH2), 113.6 (Cc), 122.2 (CH), 126.9 (CH), 128.6
(CH), 129.3 (CC), 133.4(CC), 137.7 (CC), 145.5 (CC), 166.4 (Cc), 169.6 (Cc), 171.5 (Cc),
191.3 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 497/495 [M+] (13/37), 349/347 (7.2/22.1),
314/312 (23/50), 262/260 (62/100). Análisis calculado para C20H18ClN3O4S3: C, 50.04; H,
3.78; N, 8.75; Encontrado: C, 50.12; H, 3.71; N, 8.80.
Ácido (R,Z)-2-(5-((4-cloro-2-(pirrolidin-1-il)tiazol-5-
il)metilen)-4-oxo-2-tioxotiazolidin-3-il)-3-
fenilpropanoico (99c)p.f. 179-180 °C; FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 3471 (-CO-OH), 1705 (C=O), 1584-1530
(C=N y C=C). RMN-1H(400 MHz, DMSO-d6): δ
2.13-2.16 (m, 4H, CH2-CH2), 3.61(d, J = 7.2Hz, 2H,
Hβ), 3.63-3.67 (m, 4H, CH2-N-CH2),5.92 (t, J = 7.2Hz, 1H, Hα), 7.08-7.12 (m, 2H, Ho),
7.17-7.21 (m, 3H, Hm y Hp), 7.83 (s, 1H, H5’) ppm. (COOH, no se observa).RMN-13
C (100
MHz, DMSO-d6): δ25.5 (CH2), 33.5 (CH2), 49.7 (CH2), 60.1 (CH), 112.7 (Cc), 123.1 (CH),
127.9 (CH), 129.4 (CH), 130.3 (CC), 134.1 (CC), 136.9 (CC), 146.7 (CC), 159.4 (Cc), 168.0
(Cc), 172.4 (Cc), 189.3 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 481/479 [M+] (17.1/69.4), 331
(4.2), 296 (47.2), 244 (100).Análisis calculado para C19H16ClN3O3S3: C, 48.97; H, 3.46; N,
9.02; Encontrado: C, 49.05; H, 3.55; N, 8.97.
Ácido (R,Z)-2-(5-((2-amino-4-clorotiazol-5-
il)metilen)-4-oxo-2-tioxotiazolidin-3-il)-3-
fenilpropanoico(99d)p.f. 193-194 °C; FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 3429 (-CO-OH), 3210 (-NH2) 1710 (C=O),
1584-1537 (C=N y C=C). RMN-1H (400 MHz,
DMSO-d6): δ3.59(d, J = 6.9Hz, 2H, Hβ), 5.88 (t, J =
6.9 Hz, 1H, Hα), 7.16-7.22(m, 5H, Ho, Hm y Hp), 7.60 (s, 1H, H5’), 8.81 (s, 2H, NH2) ppm.
(COOH, no se observa). δ33.6 (CH2), 63.5 (CH), 112.6 (Cc), 123.3 (CH), 127.1 (CH),
105
128.7 (CH), 128.8 (Cc), 129.4 (CH), 137.1 (Cc), 146.0 (Cc), 166.3 (Cc), 169.0 (Cc), 169.2
(Cc), 191.0 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 424 [M+] (7), 276 (100). Análisis calculado
para C16H12ClN3O3S3: C, 43.74; H, 2.45; N, 10.20; Encontrado: C, 43.82; H, 2.49; N,
10.27.
Ácido (Z)-4-(5-((2,4-diclorotiazol-5-il)metilen)-4-
oxo-2-tioxotiazolidin-3-il)benzoico(100a)p.f. 243-
244 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3470 (-CO-OH),
1709 (C=O), 1586-1551 (C=N y C=C). RMN-
1H(400 MHz, DMSO-d6): δ7.53 (d, J = 8.0 Hz, 2H,
Hm), 7.89 (s, 1H, H5’), 8.11 (d, J = 8.0 Hz, 2H, Ho),
ppm. (La señal de -COOH) no se observa.RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ123.8 (CC),
125.9 (Cc), 126.2 (Cc), 134.3 (CH), 135.6 (CH), 136.4 (CC), 144.1 (CC), 149.7 (CC), 146.4
(CC), 152.9 (Cc), 171.2 (Cc), 196.8 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 418/416 [M+]
(2.3/4.2).Análisis calculado para C14H6Cl2N2O3S3: C, 40.30; H, 1.45; N, 6.71; Encontrado:
C, 40.42; H, 1.50; N, 6.66.
Ácido (Z)-4-(5-((4-cloro-2-morfolinotiazol-5-
il)metilen)-4-oxo-2-tioxotiazolidin-3-il)benzoico
(100b)p.f. 217-218 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
):
3436 (-CO-OH), 1704 (C=O), 1581-1547 (C=N y
C=C). RMN-1H(400 MHz, DMSO-d6): δ3.67-
3.71 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.77-3.81(m, 4H,
CH2-O-CH2),7.49 (d, J = 8.2 Hz, 2H, Hm), 7.88 (s, 1H, H5’), 8.13 (d, J = 8.2 Hz, 2H, Ho),
ppm. (La señal de -COOH) no se observa). RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ49.4 (CH2),
64.7 (CH2), 117.2 (Cc), 124.9 (CC), 125.1 (Cc), 128.9 (Cc), 133.2 (CH), 134.8 (CH), 137.2
(CC), 144.9 (CC), 147.8 (CC), 150.2 (Cc), 173.7 (Cc), 195.4 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z
(%): 469/467 [M+] (42/100). Análisis calculado para C18H14ClN3O4S3: C, 48.97; H, 3.46;
N, 9.02; Encontrado: C, 49.05; H, 3.51; N, 9.06.
106
Ácido (Z)-4-(5-((4-cloro-2-(pirrolidin-1-il)tiazol-5-
il)metilen)-4-oxo-2-tioxotiazolidin-3-
il)benzoico(100c)p.f. 221-222 °C; FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 3472 (-CO-OH), 1713 (C=O), 1591-1553
(C=N y C=C). RMN-1H(400 MHz, DMSO-d6):
δ2.14-2.17 (m, 4H, CH2-CH2), 3.64-3.68 (m, 4H,
CH2-N-CH2),7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Hm), 7.89 (s, 1H, H5’), 8.09 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Ho),
ppm. (COOH, no se observa).RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ30.2 (CH2), 57.4 (CH2),
119.32 (Cc), 125.1 (CC), 125.2 (Cc), 127.8 (Cc), 132.9 (CH), 135.3 (CH), 140.1 (CC), 147.5
(CC), 148.6 (CC), 152.8 (Cc), 174.0 (Cc), 192.9 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 453/451
[M+] (27.2/78.4), 416 (100).Análisis calculado para C18H14ClN3O3S3: C, 47.84; H, 3.12; N,
9.30; Encontrado: C, 47.95; H, 3.19; N, 9.22.
Ácido (Z)-2-(5-((2-amino-4-clorotiazol-5-
il)metilen)-4-oxo-2-tioxotiazolidin-3-
il)benzoico(100d)p.f. 289-290 °C; FT-IR (KBr),
υ(cm-1
): 3461 (-CO-OH), 3207 (-NH2) 1707
(C=O), 1583-1553 (C=N y C=C). RMN-1H(400
MHz, DMSO-d6): δ7.54 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Hm),
7.88 (s, 1H, H5’), 8.11 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ho), 8.71 (s, 2H, NH2) ppm. (COOH, no se
observa). δ124.7 (CC), 127.5 (Cc), 127.8 (Cc), 137.8 (CH), 139.4 (CH), 140.9 (CC), 144.0
(CC), 150.1 (CC), 156.2 (CC), 156.7 (Cc), 175.7 (Cc), 193.8 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z
(%): 399/397 [M+] (3.2/6.1), 365 (100). Análisis calculado para C14H8ClN3O3S3: C, 42.26;
H, 2.03; N, 10.56; Encontrado: C, 42.30; H, 1.97; N, 10.62.
(Z)-4-(5-((2,4-diclorotiazol-5-il)metilen)-3-(4-
metoxifenil)-2-tioxotiazolidin-4-ona (101a) p.f. 196-
197 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1709 (C=O), 1687-
1548 (C=N y C=C). RMN-1H(400 MHz, DMSO-
d6): δ 3.67 (s, 3H, OCH3), 7.53 (d, J = 8.0 Hz, 2H,
107
Hm), 7.89 (s, 1H, H5’), 8.11 (d, J = 8.0 Hz, 2H, Ho), ppm. RMN-13
C (100 MHz, DMSO-
d6): δ 64.3 (OCH3), 123.8 (CC), 125.9 (Cc), 126.2 (Cc), 134.3 (CH), 135.6 (CH), 136.4 (CC),
144.1 (CC), 149.7 (CC), 146.4 (CC), 152.9 (Cc), 171.2 (Cc), 196.8 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV)
m/z (%): 404/402 [M+] (32/87). Análisis calculado para C15H8Cl2N2O3S3: C, 41.77; H, 1.87;
N, 6.49; Encontrado: C, 41.70; H, 1.96; N, 6.56.
(Z)-4-(5-((4-cloro-2-morfolinotiazol-5-il)metilen)-3-
(4-metoxifenil)-2-tioxotiazolidin-4-ona
(101b) p.f. 187-186 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1710
(C=O), 1684-1549 (C=N y C=C). RMN-1H(400
MHz, DMSO-d6): δ 3.65 (s, 3H, OCH3), 3.67-3.71
(m, 4H, CH2-N-CH2), 3.77-3.81(m, 4H, CH2-O-
CH2), 7.49 (d, J = 8.2 Hz, 2H, Hm), 7.88 (s, 1H, H5’), 8.13 (d, J = 8.2 Hz, 2H, Ho) ppm.
RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ49.4 (CH2), 63.2 (OCH3),64.7 (CH2), 117.2 (Cc), 124.9
(CC), 125.1 (Cc), 128.9 (Cc), 133.2 (CH), 134.8 (CH), 137.2 (CC), 144.9 (CC), 147.8 (CC),
150.2 (Cc), 173.7 (Cc), 195.4 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 455/453 [M+] (13/49).
Análisis calculado para C18H16ClN3O3S3: C, 50.49; H, 4.01; N, 9.30; Encontrado: C, 50.54;
H, 4.11; N, 9.23
(Z)-4-(5-((4-cloro-2-(pirrolidin-1-il)tiazol-5-
il)metilen)-3-(4-metoxifenil)-2-tioxotiazolidin-4-
ona (101c) p.f. 191-192 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
):
1708 (C=O), 1684-1545 (C=N y C=C). RMN-
1H(400 MHz, DMSO-d6): δ 2.14-2.17 (m, 4H,
CH2-CH2), 3.64-3.68 (m, 4H, CH2-N-CH2), 3.69 (s,
3H, OCH3),7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Hm), 7.89 (s, 1H, H5’), 8.09 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Ho)
ppm. RMN-13
C (100 MHz, DMSO-d6): δ30.2 (CH2), 57.4 (CH2), 64.1 (OCH3), 119.32 (Cc),
125.1 (CC), 125.2 (Cc), 127.8 (Cc), 132.9 (CH), 135.3 (CH), 140.1 (CC), 147.5 (CC), 148.6
(CC), 152.8 (Cc), 174.0 (Cc), 192.9 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 439/437 [M+]
(21/52), 416 (100). Análisis calculado para C18H16ClN3O2S3: C, 49.36; H, 3.68; N, 9.59;
Encontrado: C, 49.42; H, 3.73; N, 9.51.
108
(Z)-4-(5-((2-amino-4-clorotiazol-5-il)metilen)-3-
(4-metoxifenil)-2-tioxotiazolidin-4-ona (101d) p.f.
203-204 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3225 (-NH2)
1706 (C=O), 1686-1544 (C=N y C=C). RMN-
1H(400 MHz, DMSO-d6): δ 3.66 (s, 3H, OCH3),
7.54 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Hm), 7.88 (s, 1H, H5’), 8.11
(d, J = 7.9 Hz, 2H, Ho), 8.71 (s, 2H, NH2) ppm. δ 66.1 (OCH3), 124.7 (CC), 127.5 (Cc),
127.8 (Cc), 137.8 (CH), 139.4 (CH), 140.9 (CC), 144.0 (CC), 150.1 (CC), 156.2 (CC), 156.7
(Cc), 175.7 (Cc), 193.8 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 385/383 [M+] (3.3/7.0). Análisis
calculado para C14H10ClN3O2S3: C, 43.80; H, 2.63; N, 10.95; Encontrado: C, 43.88; H,
2.69; N, 11.00.
(Z)-4-(5-((2,4-diclorotiazol-5-il)metilen)-3-(4-
clorofenil)-2-tioxotiazolidin-4-ona (102a) p.f. 211-
212 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1704 (C=O), 1679-
1555 (C=N y C=C). RMN-1H(400 MHz, DMSO-
d6): δ7.53 (d, J = 8.0 Hz, 2H, Hm), 7.89 (s, 1H, H5’),
8.11 (d, J = 8.0 Hz, 2H, Ho) ppm. RMN-13
C (100
MHz, DMSO-d6): δ123.8 (CC), 125.9 (Cc), 126.2 (Cc), 134.3 (CH), 135.6 (CH), 136.4 (CC),
144.1 (CC), 149.7 (CC), 146.4 (CC), 152.9 (Cc), 171.2 (Cc), 196.8 (Cc) ppm. MS (IE, 70 eV)
m/z (%): 408/406 [M+] (32/55). Análisis calculado para C13H5Cl3N2OS3: C, 38.30; H, 1.24;
N, 6.87; Encontrado: C, 38.39; H, 1.20; N, 6.93.
(Z)-4-(5-((4-cloro-2-morfolinotiazol-5-il)metilen)-3-
(4-clorofenil)-2-tioxotiazolidin-4-ona
(102b) p.f. 184-185 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1708
(C=O), 1677-1557 (C=N y C=C). RMN-1H(400
MHz, DMSO-d6): δ3.67-3.71 (m, 4H, CH2-N-CH2),
3.77-3.81(m, 4H, CH2-O-CH2), 7.49 (d, J = 8.2 Hz,
2H, Hm), 7.88 (s, 1H, H5’), 8.13 (d, J = 8.2 Hz, 2H, Ho) ppm. RMN-13
C (100 MHz, DMSO-
109
d6): δ49.4 (CH2), 64.7 (CH2), 117.2 (Cc), 124.9 (CC), 125.1 (Cc), 128.9 (Cc), 133.2 (CH),
134.8 (CH), 137.2 (CC), 144.9 (CC), 147.8 (CC), 150.2 (Cc), 173.7 (Cc), 195.4 (Cc) ppm. MS
(IE, 70 eV) m/z (%): 458/456 [M+] (43/100). Análisis calculado para C17H13Cl2N3O2S3: C,
47.37; H, 3.31; N, 9.21; Encontrado: C, 47.44; H, 3.39; N, 9.27.
(Z)-4-(5-((4-cloro-2-(pirrolidin-1-il)tiazol-5-
il)metilen)-3-(4-clorofenil)-2-tioxotiazolidin-4-ona
(102c) p.f. 226-227 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 1705
(C=O), 1584-1530 (C=N y C=C). RMN-1H(400
MHz, DMSO-d6): δ 2.14-2.17 (m, 4H, CH2-CH2),
3.64-3.68 (m, 4H, CH2-N-CH2),7.47 (d, J = 8.5 Hz,
2H, Hm), 7.89 (s, 1H, H5’), 8.09 (d, J = 8.5 Hz, 2H, Ho) ppm. RMN-13
C (100 MHz,
DMSO-d6): δ30.2 (CH2), 57.4 (CH2), 119.32 (Cc), 125.1 (CC), 125.2 (Cc), 127.8 (Cc), 132.9
(CH), 135.3 (CH), 140.1 (CC), 147.5 (CC), 148.6 (CC), 152.8 (Cc), 174.0 (Cc), 192.9 (Cc)
ppm. MS (IE, 70 eV) m/z (%): 443/441 [M+] (17.2/41). Análisis calculado para
C17H13Cl2N3OS3: C, 46.16; H, 2.96; N, 9.50; Encontrado: C, 46.22; H, 2.89; N, 9.57.
(Z)-4-(5-((2-amino-4-clorotiazol-5-il)metilen)-3-
(4-clorofenil)-2-tioxotiazolidin-4-ona (102d) p.f.
237-238 °C; FT-IR (KBr), υ(cm-1
): 3210 (-NH2)
1710 (C=O), 1584-1537 (C=N y C=C). RMN-
1H(400 MHz, DMSO-d6): δ7.54 (d, J = 7.9 Hz, 2H,
Hm), 7.88 (s, 1H, H5’), 8.11 (d, J = 7.9 Hz, 2H, Ho),
8.71 (s, 2H, NH2) ppm. δ 124.7 (CC), 127.5 (Cc), 127.8 (Cc), 137.8 (CH), 139.4 (CH),
140.9 (CC), 144.0 (CC), 150.1 (CC), 156.2 (CC), 156.7 (Cc), 175.7 (Cc), 193.8 (Cc) ppm. MS
(IE, 70 eV) m/z (%): 389/387 [M+] (37/65),. Análisis calculado para C13H7Cl2N3OS3: C,
40.21; H, 1.82; N, 10.82; Encontrado: C, 40.16; H, 1.90; N, 10.86.
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