TEMA 4
FUNDAMENTOS DE
HISTOLOGA I
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Histos: Tejido Logos: Estudio
TEJIDO:
Agrupacin de clulas similares para llevar a cabo una funcin especfica.
HERRAMIENTAS DE ESTUDIO
HISTOLOGA:
Microscopa
ptica
Electrnica
Obtencin de muestras
Preparacin de la muestra
Tema4. Fundamentos de Histologa 1
Tamaos relativos de las clula y sus componentes
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Microscopio ptico
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Aumento
Ninguno
Imagen
visualizada
ojo
Lente ocular
Imagen intermedia
(invertida respecto
a la muestra)
Lente objetivo
Muestra
Condensador
Fuente de luz
Microscopio ptico
Recorrido
de la luz
Tema4. Fundamentos de Histologa I
de Barrido (MEB / SEM)
Microscopio que utiliza un haz de electrones para visualizar un objeto.
La potencia amplificadora de un microscopio ptico est limitada por la
longitud de onda de la luz visible.
Para este microscopio se utiliza una muestra ultrafina y la imagen se obtiene
de los electrones que atraviesan la
muestra.
Los microscopios electrnicos de transmisin pueden aumentar un objeto
hasta un milln de veces.
Microscopio Electrnico de Transmisin (MET /TEM)
Tema4. Fundamentos de Histologa I Microscopio Electrnico de Transmisin (MET)
Partes:
Can de electrones: emite los electrones que
chocan o atraviesan la muestra, creando una
imagen aumentada.
Lentes magnticas: crean campos que dirigen y
enfocan el haz de electrones.
Sistema de vaco para que los electrones no
puedan ser desviados por las molculas del aire.
Placa fotogrfica o pantalla fluorescente: se
coloca detrs del objeto a visualizar para registrar
la imagen aumentada.
Sistema de registro: muestra la imagen que
producen los electrones (ordenador)
Tema4. Fundamentos de Histologa 1
Historia:
El primer microscopio electrnico de transmisin
(MET), fue desarrollado en
1932 por Ernst Ruska.
La ptica bsica de ese primer microscopio
electrnico se mantiene
hasta nuestros das
Los cambios en los microscopios modernos
consisten en adicionar ms
lentes para incrementar los
aumentos y darle mayor
versatilidad.
El primer MET comercial lo construy Siemens en
1939
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Tema4. Fundamentos de Histologa 1
Microscopio Electrnico de Barrido (MEB) 1 (SEM)
ME de barrido
Anodo
Lente
condensador
Serpentn
de exploracin
Haz de exploracin
Tema4. Fundamentos de Histologa 1
Ctodo - - - - - - i l
Espcimen Imagen en la pantalla de observacin
Microscopio el ctrnico de barrido
Tema4. Fundamentos de Histologa I
- No es necesario cortar el objeto en capas.
-El SEM explora la superficie de la imagen punto
por punto.
-Recorre la muestra con un haz muy concentrado
de electrones, que pueden dispersarse de la
muestra o provocar la aparicin de electrones
secundarios.
-Los electrones perdidos y los secundarios son
recogidos y contados; cada punto ledo corresponde
a un pxel en un monitor de televisin.
-A medida que el haz de electrones barre la
muestra, se presenta toda la imagen de la misma en
el monitor.
- Pueden ampliar los objetos 200.000 veces o ms.
-Produce imgenes tridimensionales realistas de la
superficie del objeto.
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Clula cortada
transversalmente
Glbulo rojo Glbulo blanco
Piel humana Glomrulo renal
EJEMPLOS
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Obtencin de las
muestras
In Vivo
Citologa
Biopsia
Post-mortem
Necropsia (animales)
Autopsia (humana)
Area de
excisin
(piel)
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Citologa Obtencin
PAAF: Puncin con aguja fina
Raspado:
Hisopado
Impresin:
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Citologa Procesado
Muestras Slidas: Squash (aplastamiento)
Muestras Lquidas:
Frotis o extensin
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Wright
Panptico rpido
Papanicolau: en clulas de cuello vaginal. Laboriosa
Citologa
Tinciones
- Sencillas
- Muy usada en frotis sanguneos
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Biopsia Obtencin
Invasivas
Excisional: estirpacin de tumores
Incisional: slo se extra
un trozo de tejido
Min. Invasiva
Agujas tru-cut (1)
Punch (2)
Endoscopia (3)
colonoscopia
1 1
2 2
1
3 2-3
Tema4. Fundamentos de Histologa I Biopsia
Procesado
1. Fijacin
2. Tallado
3. Inclusin
4. Corte
1
5
3
4
2
5. Tincin
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Soluciones fijadoras:
MO: - Formaldehdo 4-10%. 24h mnimo
- Solucin de Bouin (6-8 horas). Lavar con
Alcohol 70 Acido pcrico
Acido actico
Formol
- Solucin de Zinc: 24h mnimo.
Acetato de calcio 3 mM
Acetato de zinc 0,25 M
Cloruro de zinc 0,4 M
ME: Glutaraldehido + Tetraxido de osmio
Fijacin
Congelacin: el corte se realiza con criostato
AndreiNota adhesivaMicroscopio ptico
AndreiNota adhesivaMicroscopio electrnico
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Tallado
- Delimitar al mximo la
zona a estudiar
-Tomar suficientes
fragmentos
representativos
- Optimizar el espacio
dentro del cassette
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Inclusin
MO: Parafina o resinas
sintticas Xilol-Alcohol-Parafina
ME: Resinas duras
LfQUIOO
INTERMEDIARIO
xido de propileno
3x10 min
Tema4. Fundamentos de Histo/ogla 1
xido de propileno :resin;, (1:1)
Hasta b ev; por.1cin del xido d propileno.
R in
ntr 10 y 20 horas. depfndiendo de r de solucin u iliz d
cantid d
POLIMERIZACIN
ESTUFA - 60 e
Mold
Bloque d r sin
polim riz da
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Corte
Microtomo para parafina (MO): Para material incluido en parafina
Secciones de 5 a 20 m de grosor
Vibratomo (MO): Corta material no incluido, aunque s fijado o duro
Secciones de 30 a centenares de m de grosor
Criostato (MO): Material congelado
Secciones de 10 a 40 m
Ultramicrotomo (MET): Para material incluido en resinas
Secciones del orden de nanometros de grosor
Ultracriotomo (MET): Su uso no est muy extendido
Cuando se necesitan secciones del orden de nanometro
Material que no se debe incluir
elevadora
Tema4. Fundamentos de Histologa 1
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Tincin
Tincin general.
-Una de las tinciones ms comnmente usada en histologa es la
hematoxilina-eosina (H-E) sobre cortes de parafina.
- Se usa un colorante bsico y otro cido para teir de diferente color a
las
estructuras cidas y bsicas de la clula.
- Antes de la tincin:
desparafinado e hidratacin
* Xilol
* Alcohol: graduacin decreciente
* Agua
Tema4. Fundamentos de Histologa I
- Despus de la tincin:
lavado y deshidratacin:
* Agua
* Alcohol: graduacin creciente
- Montaje:
* Medio de montaje (DPX)
* Cubreobjetos
Tincin Tema4. Fundamentos de Histologa 1
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Tinciones de semifinos
(ME):
A partir de la observacin
del semifino se elije qu
porcin cortaremos en el
ultrafino
Tema4. Fundamentos de Histologa I
El ultrafino se contrasta con
metales pesados
As chocan mejor los electrones
La imagen siempre es en
blanco y negro, aunque
Puede colorearse en el
ordenador
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Tinciones Histoqumicas (MO):
- Consisten en la modificacin qumica de molculas del tejido para
posteriormente poder colorearlas.
- Existen tcnicas histoqumicas para detectar glcidos, protenas y
nucletidos.
- La tcnica histoqumica ms empleada es la reaccin de PAS (Periodic
Acid Schiff). Se utiliza para la deteccin de hidratos de carbono, libres o
conjugados.
- Modificacin qumica del tejido con formacin de grupos aldehdos que se
teirn con el reactivo de Schiff, para dar un color rojizo brillante.
Otras tinciones de inters
Tema4. Fundamentos de Histologa I
-Tricrmica de Masson: Azul oscuro: Ncleo Rojo: msculo, queratina y citoplasma
Azul claro: colgeno, mucingeno
-Tincin con Orcena: Marrn: Fibras elsticas
-Tincin de plata: Negro: Fibras reticulares
-Tincin de Sudn: Para tincin de grasas. Se tien de rojo
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Cilios
Corte longitudinal
y tranversal
Microvellosidades ID
Clulas
caliciformes
en colon
Epitelio
respiratorio
ME de transmisin
Tema4. Fundamentos de Histologa I
ME de barrido
Axones nerviosos Bronquio ciliado Epitelio nasal
Tubo seminfero Mucosa estomacal Intestino delgado
Glbulo blanco
Tema4. Fundamentos de Histologa I
ME de barrido
Epitelio trquea fetal
(con y sin cilios)
1: bronquiolo
1
2 3
2: arteria
3: alvolos con poros
alveolares
Tema4. Fundamentos de Histologa I
PRINCIPALES TEJIDOS
1. Tejido epitelial
2. Tejido conectivo
3. Tejido muscular
4. Tejido nervioso
TEJIDO EPITELIAL Tema4. Fundamentos de Histologa I
Origen:
Ectodermo: la mayor parte de la piel epitelio que tapiza cavidad anal epitelio que tapiza la cavidad bucal epitelio que tapiza las fosas nasales
Endodermo: epitelio de casi todo el tubo digestivo epitelio del rbol respiratorio epitelio de hgado y pncreas
Mesodermo: epitelio del rin epitelio de los rganos reproductores
Morfologa:
Clulas muy juntas (glucoprotenas)
Escasa o nula sustancia intercelular
ntima conexin Bronquio ciliado
Epitelio nasal
TEJIDO EPITELIAL
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Funciones:
Revestir
Aislar
Tapizar
Separar
Secretar sustancias (epitelio glandular)
Regulacin de la prdida de agua
Caractersticas:
Alta capacidad de regeneracin
Avascular (se nutre a partir de los vasos del tej. Conjuntivo)
Descansa sobre una lmina basal (colgeno tipo IV y glucoprotenas)
Polaridad de las clulas:
Polo apical: mira a la luz y en l encontramos vellosidades, cilios, flagelos
Polo basal: superficie paralela a la lmina basal
Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Epitelio simple
Escamoso
Cuboidal
Cilndrico
Pseudoestratificado
Epitelio estratificado
De transicin
Escamoso no queratinizado
Queratinizado
Cuboidal
Cilndrico
Cilndrico pseudoestratificado
Transicional relajado
Distendido
Tej. Epitelial
De revestimiento
Tej. Epitelial
Glandular
Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Tej. Epitelial
Glandular
Segn donde se vierte la secrecin
Segn el material segregado
Segn la manera de segregar
G. exocrinas
G. endocrinas
G. mixtas
G. serosas
G. mucosas
G. seromucosas
G. merocrinas
G. holocrinas
G. apocrinas
Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Epitelio simple
Escamoso
Cuboidal
Cilndrico
Pseudoestratificado
Epitelio estratificado
De transicin
Escamoso no queratinizado
Queratinizado
Cuboidal
Cilndrico
Cilndrico pseudoestratificado
Transicional relajado
Distendidodo
Tej. Epitelial
De revestimiento
Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Epitelio simple
Cuboidal
Tej. Epitelial
De revestimiento
Escamoso
Cilndrico
- Endotelio de los vasos - Mesotelios (pleuras, pericardio, peritoneo)
- Conductos de glndulas - Capa externa retina - Tbulos contorneados rin
- Algunos conductos - Intestino (microvellosidades) - Trompas uterinas (cilios)
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Escamoso
Membrana
serosa
Vaso. Corte
transversal
Vaso. Corte
longitudinal
Cuboidal
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Epitelio
glandular
Folculos tiroideos
Tbulos
contorneados
rin
Cilndrico
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Intestino
Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Epitelio simple
Escamoso
Cuboidal
Cilndrico
Pseudoestratificado
Epitelio estratificado
De transicin
Escamoso no queratinizado
Queratinizado
Cuboidal
Cilndrico
Cilndrico pseudoestratificado
Transicional relajado
Distendidodo
Tej. Epitelial
De revestimiento
Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Tej. Epitelial
De revestimiento
Queratinizado
Epitelio estratificado Piel
Cilndrico
Cuboidal
Conductos interlobulillares de glndulas salibares
En partes de uretra masculina Conjuntiva del ojo
Escamoso no queratinizado
En esfago
Escamoso no queratinizado
Esfago
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Escamoso queratinizado
Piel
Estratificado cuboidal Estratificado cilndrico
Conductos de glndulas Conjuntiva
Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Epitelio simple
Escamoso
Cuboidal
Cilndrico
Pseudoestratificado
Epitelio estratificado
De transicin
Escamoso no queratinizado
Queratinizado
Cuboidal
Cilndrico
Cilndrico pseudoestratificado
Transicional relajado
Distendido
Tej. Epitelial
De revestimiento
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Pseudoestratificado
TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Tej. Epitelial De revestimiento
Cilndrico pseudoestratificado
Conductos del epiddimo
De transicin
Transicional relajado
Distendido
Vara entre Estratificado cilndrico y cuboidal
Vejiga Tbulos renales
De transicin
Pseudoestratificado
Epiddimo
Rin
De transicin
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Vejiga urinaria
Tema4. Fundamentos de Histologa I Resumen epitelio simple
Simple Aplanada
De revestimiento: Alveolos pulmonares
Pared cap. de Bowman Vasos sanguneos
Vasos linfticos Pleura y Peritoneo
Membrana limitante
Transporte Intercambio de gases
Lubricacin
Cbico simple Cuboidea Tirodes Ovario
Tbulos renales
Secrecin Absorcin Proteccin
Cilndrico simple Cilndrica
S. Paranasales, tero, Bronquios pequeos
Tracto digestivo Vescula biliar
Transporte Absorcin Secrecin Proteccin
Psudoestratificado
Cilndrica. no todas llegan a
la superficie
Vas urinarias desde clices renales hasta
uretra
Secrecin Absorcin
Lubricacin Proteccin Transporte
Tipo Forma
celular Localizacion Funciones
Tema4. Fundamentos de Histologa I Resumen estratificado
Escamoso Estratificado
NO queratinizado
Aplanadas con ncleo
Cav. oral, Epiglotis, Esfago, Vagina
Cuerdas vocales
Proteccin Secrecin
Escamoso Estratificado
Queratinizado
Aplanadas sin ncleo
Epidermis, Parte de enca
Proteccin
Cuboideo Estratificado
Cuboideas Conductos de las
glndulas sudorparas
Absorcin Secrecin
Cilndrico estratificado
Cilndricas Conjuntiva ocular,
Conductos excretores Uretra masculina
Secrecin Absorcin Proteccin
Transicional
En forma de cpula (relajado)
Aplanada (distendida)
Vias urinarias desde clices renales hasta
uretra
Proteccin Distensible
Tipo Forma
celular Localizacion Funciones
Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Tej. Epitelial
Glandular
Segn donde se vierte la secrecin
G. exocrinas
G. endocrinas
G. mixtas
-Vierten su secrecin por medio de un sistema de conducto, su secrecin es externa.
- En algunas glndulas, la secrecin se caracteriza por contener clulas vivas integras.
-Vierten sus secreciones en forma directa hacia la sangre o la linfa como secreciones internas (hormonas)
- Carecen de conductos
- Presentan ambos sistemas de excrecin
Tema4. Fundamentos de Histologa 1
Secrecin
Conducto externo
Al exterior del cuerpo
A una cavidad del cuerpo
AndreiLnea
AndreiLnea
AndreiCuadro de TextoCapilar sanguneo
AndreiCuadro de TextoGlndula exocrina
Tema4. Fundamentos de Histologa I G. EXOCRINAS Clasificacin segn las ramificaciones de Verde: porcin secretora Morado: conducto de la glndula
Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Tej. Epitelial
Glandular
G. serosas
G. mucosas
S
G. mucoserosas
-Poseen acinos (unidades secretorias) que producen
secreciones serosas (S) y secreciones mucosas (M)
- Ejemplo: g. sublinguales y submandibulares
M
- Secretan mucingenos: (protenas glucosiladas grandes) + H2O = Sustancia gelatinosa (mucina)
-Ejemplos: clulas caliciformes g. salivales menores de lengua y paladar
-Secretan lquido acuoso rico en enzimas - Elemplo: pncreas exocrino
Segn el material segregado
Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL
Clasificacin
Tej. Epitelial
Glandular
Segn la manera de segregar
G. Merocrinas
G. Holocrinas
EXOCRINAS G. Apocrinas
-Liberacin del producto secretorio por exocitosis
- La clula permanece intacta
- Elemplo: g. partida
-Se libera una porcin de citoplasma
- Elemplo: g. mamaria
- Cuando madura la clula secretora, se combierte en el producto secretorio
- Elemplo: g. sebcea
Segn la manera
de segregar
Merocrina
. o . . .
Secrecin
Clula intacta
Tema4. Fundamentos de Histologa 1
Segn la manera
de segregar
Tema4. Fundamentos de Histologa 1
Apocrina
Pellizcamiento de
una porcin de la clula (secrecin)
Segn la manera
de segregar
Holocrina
Clula en desintegracin
y su contenido (secrec in)
Tema4. Fundamentos de Histologa 1
Tema4. Fundamentos de Histologa I
Esquema de una
Glndula salival.
Organizacin de
sus unidades secretoras
y sistemas de conductos