Histología biologica

TEMA 4

FUNDAMENTOS DE

HISTOLOGA I

Tema4. Fundamentos de Histologa I

Histos: Tejido Logos: Estudio

TEJIDO:

Agrupacin de clulas similares para llevar a cabo una funcin especfica.

HERRAMIENTAS DE ESTUDIO

HISTOLOGA:

Microscopa

ptica

Electrnica

Obtencin de muestras

Preparacin de la muestra

Tema4. Fundamentos de Histologa 1

Tamaos relativos de las clula y sus componentes


Microscopio ptico


Aumento

Ninguno

Imagen

visualizada

ojo

Lente ocular

Imagen intermedia

(invertida respecto

a la muestra)

Lente objetivo

Muestra

Condensador

Fuente de luz

Microscopio ptico

Recorrido

de la luz


de Barrido (MEB / SEM)

Microscopio que utiliza un haz de electrones para visualizar un objeto.

La potencia amplificadora de un microscopio ptico est limitada por la

longitud de onda de la luz visible.

Para este microscopio se utiliza una muestra ultrafina y la imagen se obtiene

de los electrones que atraviesan la

muestra.

Los microscopios electrnicos de transmisin pueden aumentar un objeto

hasta un milln de veces.

Microscopio Electrnico de Transmisin (MET /TEM)

Tema4. Fundamentos de Histologa I Microscopio Electrnico de Transmisin (MET)

Partes:

Can de electrones: emite los electrones que

chocan o atraviesan la muestra, creando una

imagen aumentada.

Lentes magnticas: crean campos que dirigen y

enfocan el haz de electrones.

Sistema de vaco para que los electrones no

puedan ser desviados por las molculas del aire.

Placa fotogrfica o pantalla fluorescente: se

coloca detrs del objeto a visualizar para registrar

la imagen aumentada.

Sistema de registro: muestra la imagen que

producen los electrones (ordenador)

Historia:

El primer microscopio electrnico de transmisin

(MET), fue desarrollado en

1932 por Ernst Ruska.

La ptica bsica de ese primer microscopio

electrnico se mantiene

hasta nuestros das

Los cambios en los microscopios modernos

consisten en adicionar ms

lentes para incrementar los

aumentos y darle mayor

versatilidad.

El primer MET comercial lo construy Siemens en

1939


Microscopio Electrnico de Barrido (MEB) 1 (SEM)

ME de barrido

Anodo

Lente

condensador

Serpentn

de exploracin

Haz de exploracin


Ctodo - - - - - - i l

Espcimen Imagen en la pantalla de observacin

Microscopio el ctrnico de barrido


- No es necesario cortar el objeto en capas.

-El SEM explora la superficie de la imagen punto

por punto.

-Recorre la muestra con un haz muy concentrado

de electrones, que pueden dispersarse de la

muestra o provocar la aparicin de electrones

secundarios.

-Los electrones perdidos y los secundarios son

recogidos y contados; cada punto ledo corresponde

a un pxel en un monitor de televisin.

-A medida que el haz de electrones barre la

muestra, se presenta toda la imagen de la misma en

el monitor.

- Pueden ampliar los objetos 200.000 veces o ms.

-Produce imgenes tridimensionales realistas de la

superficie del objeto.


Clula cortada

transversalmente

Glbulo rojo Glbulo blanco

Piel humana Glomrulo renal

EJEMPLOS


Obtencin de las

muestras

In Vivo

Citologa

Biopsia

Post-mortem

Necropsia (animales)

Autopsia (humana)

Area de

excisin

(piel)


Citologa Obtencin

PAAF: Puncin con aguja fina

Raspado:

Hisopado

Impresin:


Citologa Procesado

Muestras Slidas: Squash (aplastamiento)

Muestras Lquidas:

Frotis o extensin


Wright

Panptico rpido

Papanicolau: en clulas de cuello vaginal. Laboriosa

Citologa

Tinciones

- Sencillas

- Muy usada en frotis sanguneos


Biopsia Obtencin

Invasivas

Excisional: estirpacin de tumores

Incisional: slo se extra

un trozo de tejido

Min. Invasiva

Agujas tru-cut (1)

Punch (2)

Endoscopia (3)

colonoscopia

1 1

2 2

1

3 2-3

Tema4. Fundamentos de Histologa I Biopsia

Procesado

1. Fijacin

2. Tallado

3. Inclusin

4. Corte

1

5

3

4

2

5. Tincin


Soluciones fijadoras:

MO: - Formaldehdo 4-10%. 24h mnimo

- Solucin de Bouin (6-8 horas). Lavar con

Alcohol 70 Acido pcrico

Acido actico

Formol

- Solucin de Zinc: 24h mnimo.

Acetato de calcio 3 mM

Acetato de zinc 0,25 M

Cloruro de zinc 0,4 M

ME: Glutaraldehido + Tetraxido de osmio

Fijacin

Congelacin: el corte se realiza con criostato

AndreiNota adhesivaMicroscopio ptico

AndreiNota adhesivaMicroscopio electrnico


Tallado

- Delimitar al mximo la

zona a estudiar

-Tomar suficientes

fragmentos

representativos

- Optimizar el espacio

dentro del cassette


Inclusin

MO: Parafina o resinas

sintticas Xilol-Alcohol-Parafina

ME: Resinas duras

LfQUIOO

INTERMEDIARIO

xido de propileno

3x10 min

Tema4. Fundamentos de Histo/ogla 1

xido de propileno :resin;, (1:1)

Hasta b ev; por.1cin del xido d propileno.

R in

ntr 10 y 20 horas. depfndiendo de r de solucin u iliz d

cantid d

POLIMERIZACIN

ESTUFA - 60 e

Mold

Bloque d r sin

polim riz da


Corte

Microtomo para parafina (MO): Para material incluido en parafina

Secciones de 5 a 20 m de grosor

Vibratomo (MO): Corta material no incluido, aunque s fijado o duro

Secciones de 30 a centenares de m de grosor

Criostato (MO): Material congelado

Secciones de 10 a 40 m

Ultramicrotomo (MET): Para material incluido en resinas

Secciones del orden de nanometros de grosor

Ultracriotomo (MET): Su uso no est muy extendido

Cuando se necesitan secciones del orden de nanometro

Material que no se debe incluir

elevadora



Tincin

Tincin general.

-Una de las tinciones ms comnmente usada en histologa es la

hematoxilina-eosina (H-E) sobre cortes de parafina.

- Se usa un colorante bsico y otro cido para teir de diferente color a

las

estructuras cidas y bsicas de la clula.

- Antes de la tincin:

desparafinado e hidratacin

* Xilol

* Alcohol: graduacin decreciente

* Agua


- Despus de la tincin:

lavado y deshidratacin:

* Agua

* Alcohol: graduacin creciente

- Montaje:

* Medio de montaje (DPX)

* Cubreobjetos

Tincin Tema4. Fundamentos de Histologa 1


Tinciones de semifinos

(ME):

A partir de la observacin

del semifino se elije qu

porcin cortaremos en el

ultrafino


El ultrafino se contrasta con

metales pesados

As chocan mejor los electrones

La imagen siempre es en

blanco y negro, aunque

Puede colorearse en el

ordenador


Tinciones Histoqumicas (MO):

- Consisten en la modificacin qumica de molculas del tejido para

posteriormente poder colorearlas.

- Existen tcnicas histoqumicas para detectar glcidos, protenas y

nucletidos.

- La tcnica histoqumica ms empleada es la reaccin de PAS (Periodic

Acid Schiff). Se utiliza para la deteccin de hidratos de carbono, libres o

conjugados.

- Modificacin qumica del tejido con formacin de grupos aldehdos que se

teirn con el reactivo de Schiff, para dar un color rojizo brillante.

Otras tinciones de inters


-Tricrmica de Masson: Azul oscuro: Ncleo Rojo: msculo, queratina y citoplasma

Azul claro: colgeno, mucingeno

-Tincin con Orcena: Marrn: Fibras elsticas

-Tincin de plata: Negro: Fibras reticulares

-Tincin de Sudn: Para tincin de grasas. Se tien de rojo


Cilios

Corte longitudinal

y tranversal

Microvellosidades ID

Clulas

caliciformes

en colon

Epitelio

respiratorio

ME de transmisin


ME de barrido

Axones nerviosos Bronquio ciliado Epitelio nasal

Tubo seminfero Mucosa estomacal Intestino delgado

Glbulo blanco


ME de barrido

Epitelio trquea fetal

(con y sin cilios)

1: bronquiolo

1

2 3

2: arteria

3: alvolos con poros

alveolares


PRINCIPALES TEJIDOS

1. Tejido epitelial

2. Tejido conectivo

3. Tejido muscular

4. Tejido nervioso

TEJIDO EPITELIAL Tema4. Fundamentos de Histologa I

Origen:

Ectodermo: la mayor parte de la piel epitelio que tapiza cavidad anal epitelio que tapiza la cavidad bucal epitelio que tapiza las fosas nasales

Endodermo: epitelio de casi todo el tubo digestivo epitelio del rbol respiratorio epitelio de hgado y pncreas

Mesodermo: epitelio del rin epitelio de los rganos reproductores

Morfologa:

Clulas muy juntas (glucoprotenas)

Escasa o nula sustancia intercelular

ntima conexin Bronquio ciliado

Epitelio nasal

TEJIDO EPITELIAL


Funciones:

Revestir

Aislar

Tapizar

Separar

Secretar sustancias (epitelio glandular)

Regulacin de la prdida de agua

Caractersticas:

Alta capacidad de regeneracin

Avascular (se nutre a partir de los vasos del tej. Conjuntivo)

Descansa sobre una lmina basal (colgeno tipo IV y glucoprotenas)

Polaridad de las clulas:

Polo apical: mira a la luz y en l encontramos vellosidades, cilios, flagelos

Polo basal: superficie paralela a la lmina basal

Tema4. Fundamentos de Histologa I TEJIDO EPITELIAL

Clasificacin

Epitelio simple

Escamoso

Cuboidal

Cilndrico

Pseudoestratificado

Epitelio estratificado

De transicin

Escamoso no queratinizado

Queratinizado

Cuboidal

Cilndrico

Cilndrico pseudoestratificado

Transicional relajado

Distendido

Tej. Epitelial

De revestimiento

Tej. Epitelial

Glandular


Clasificacin

Tej. Epitelial

Glandular

Segn donde se vierte la secrecin

Segn el material segregado

Segn la manera de segregar

G. exocrinas

G. endocrinas

G. mixtas

G. serosas

G. mucosas

G. seromucosas

G. merocrinas

G. holocrinas

G. apocrinas


Clasificacin

Epitelio simple

Escamoso

Cuboidal

Cilndrico

Pseudoestratificado


De transicin


Queratinizado

Cuboidal

Cilndrico



Distendidodo

Tej. Epitelial

De revestimiento


Clasificacin

Epitelio simple

Cuboidal

Tej. Epitelial

De revestimiento

Escamoso

Cilndrico

- Endotelio de los vasos - Mesotelios (pleuras, pericardio, peritoneo)

- Conductos de glndulas - Capa externa retina - Tbulos contorneados rin

- Algunos conductos - Intestino (microvellosidades) - Trompas uterinas (cilios)


Escamoso

Membrana

serosa

Vaso. Corte

transversal

Vaso. Corte

longitudinal

Cuboidal


Epitelio

glandular

Folculos tiroideos

Tbulos

contorneados

rin

Cilndrico


Intestino


Clasificacin

Epitelio simple

Escamoso

Cuboidal

Cilndrico

Pseudoestratificado


De transicin


Queratinizado

Cuboidal

Cilndrico



Distendidodo

Tej. Epitelial

De revestimiento


Clasificacin

Tej. Epitelial

De revestimiento

Queratinizado

Epitelio estratificado Piel

Cilndrico

Cuboidal

Conductos interlobulillares de glndulas salibares

En partes de uretra masculina Conjuntiva del ojo


En esfago


Esfago


Escamoso queratinizado

Piel

Estratificado cuboidal Estratificado cilndrico

Conductos de glndulas Conjuntiva


Clasificacin

Epitelio simple

Escamoso

Cuboidal

Cilndrico

Pseudoestratificado


De transicin


Queratinizado

Cuboidal

Cilndrico



Distendido

Tej. Epitelial

De revestimiento


Pseudoestratificado

TEJIDO EPITELIAL

Clasificacin

Tej. Epitelial De revestimiento


Conductos del epiddimo

De transicin


Distendido

Vara entre Estratificado cilndrico y cuboidal

Vejiga Tbulos renales

De transicin

Pseudoestratificado

Epiddimo

Rin

De transicin


Vejiga urinaria

Tema4. Fundamentos de Histologa I Resumen epitelio simple

Simple Aplanada

De revestimiento: Alveolos pulmonares

Pared cap. de Bowman Vasos sanguneos

Vasos linfticos Pleura y Peritoneo

Membrana limitante

Transporte Intercambio de gases

Lubricacin

Cbico simple Cuboidea Tirodes Ovario

Tbulos renales

Secrecin Absorcin Proteccin

Cilndrico simple Cilndrica

S. Paranasales, tero, Bronquios pequeos

Tracto digestivo Vescula biliar

Transporte Absorcin Secrecin Proteccin

Psudoestratificado

Cilndrica. no todas llegan a

la superficie

Vas urinarias desde clices renales hasta

uretra

Secrecin Absorcin

Lubricacin Proteccin Transporte

Tipo Forma

celular Localizacion Funciones

Tema4. Fundamentos de Histologa I Resumen estratificado

Escamoso Estratificado

NO queratinizado

Aplanadas con ncleo

Cav. oral, Epiglotis, Esfago, Vagina

Cuerdas vocales

Proteccin Secrecin

Escamoso Estratificado

Queratinizado

Aplanadas sin ncleo

Epidermis, Parte de enca

Proteccin

Cuboideo Estratificado

Cuboideas Conductos de las

glndulas sudorparas

Absorcin Secrecin

Cilndrico estratificado

Cilndricas Conjuntiva ocular,

Conductos excretores Uretra masculina

Secrecin Absorcin Proteccin

Transicional

En forma de cpula (relajado)

Aplanada (distendida)

Vias urinarias desde clices renales hasta

uretra

Proteccin Distensible

Tipo Forma

celular Localizacion Funciones


Clasificacin

Tej. Epitelial

Glandular

Segn donde se vierte la secrecin

G. exocrinas

G. endocrinas

G. mixtas

-Vierten su secrecin por medio de un sistema de conducto, su secrecin es externa.

- En algunas glndulas, la secrecin se caracteriza por contener clulas vivas integras.

-Vierten sus secreciones en forma directa hacia la sangre o la linfa como secreciones internas (hormonas)

- Carecen de conductos

- Presentan ambos sistemas de excrecin


Secrecin

Conducto externo

Al exterior del cuerpo

A una cavidad del cuerpo

AndreiLnea

AndreiLnea

AndreiCuadro de TextoCapilar sanguneo

AndreiCuadro de TextoGlndula exocrina

Tema4. Fundamentos de Histologa I G. EXOCRINAS Clasificacin segn las ramificaciones de Verde: porcin secretora Morado: conducto de la glndula


Clasificacin

Tej. Epitelial

Glandular

G. serosas

G. mucosas

S

G. mucoserosas

-Poseen acinos (unidades secretorias) que producen

secreciones serosas (S) y secreciones mucosas (M)

- Ejemplo: g. sublinguales y submandibulares

M

- Secretan mucingenos: (protenas glucosiladas grandes) + H2O = Sustancia gelatinosa (mucina)

-Ejemplos: clulas caliciformes g. salivales menores de lengua y paladar

-Secretan lquido acuoso rico en enzimas - Elemplo: pncreas exocrino

Segn el material segregado


Clasificacin

Tej. Epitelial

Glandular

Segn la manera de segregar

G. Merocrinas

G. Holocrinas

EXOCRINAS G. Apocrinas

-Liberacin del producto secretorio por exocitosis

- La clula permanece intacta

- Elemplo: g. partida

-Se libera una porcin de citoplasma

- Elemplo: g. mamaria

- Cuando madura la clula secretora, se combierte en el producto secretorio

- Elemplo: g. sebcea

Segn la manera

de segregar

Merocrina

. o . . .

Secrecin

Clula intacta


Segn la manera

de segregar


Apocrina

Pellizcamiento de

una porcin de la clula (secrecin)

Segn la manera

de segregar

Holocrina

Clula en desintegracin

y su contenido (secrec in)



Esquema de una

Glndula salival.

Organizacin de

sus unidades secretoras

y sistemas de conductos

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