DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN DE UNA CÁMARA DE ELECTROFORÉSIS CASERAINTRODUCCIÓN
El término electroforesis significa mover con electricidad y es una técnica muy usada cuando se trabaja
con moléculas que tengan carga eléctrica como las proteínas y el ADN. Debido a que el ADN es una molécula
cargada negativamente puede moverse hacia un polo positivo dentro de un campo eléctrico. Si además el medio
donde se mueve tiene ciertas características que le permiten obstaculizar el paso de las moléculas más grandes
y permitir el paso de las más pequeñas, tenemos una técnica que permite separar el ADN por tamaño. Esta
técnica es muy útil hoy en día y tiene múltiples aplicaciones, por ejemplo test de paternidad.
La electroforesis es una herramienta común en biología molecular, biotecnología, ingeniería genética,
etc., por lo que es útil para analizar y separar macromoléculas de ADN, ARN, proteínas y entre otras de uso
cotidiano (como compuestos coloreados, como los colorantes de los jugos, extractos de frutas) que tengan
cargas eléctricas y por lo tanto pueden moverse a través de un campo eléctrico.
MATERIALES
Recipientes rectangulares de plástico
Probeta de 100 mL
Matraz de 250 mL
Piceta con agua destilada
Agar o colapiz
Colorantes
05 baterías de 9V
Cables y ganchitos de metal
Papel de aluminio
Bicarbonato
Glicerina
Bandejas de plumavit
Jeringas o goteros
Balanza
Cocinilla eléctrica
Regla en cm y mm
PROCEDIMIENTO:
1. Diseñar, construir o adquirir una cámara de plástico (envase pequeño rectangular), en la cual irán en los
extremos dos cables hechos de aluminio a los que posteriormente conectarás las baterías montadas en serie
(figura de abajo), asegurarse de que los alambres queden bien firmes a la cámara, para ello se puede usar
cinta adhesiva. En esta cámara se preparará el gel, que en este caso se usará colapiz.
2. Construir un peine que irá por encima y en el medio de la cámara, y los dientes estarán a 0,5 cm por encima
del fondo. Se hacen los pocillos en este caso en el medio por que vamos a hacer correr muestras positivas y
negativas a la vez.
3. Para preparar el gel, esta se hace con colapiz y como diluyente o buffer de corrida (1 litro de agua con una
cucharada de bicarbonato). La solución debe quedar homogénea. Así como el gel.
4. El gel disuelto agregar en la cámara que contenga el peine. El peine nos permitirá dejar huecos en el gel
donde se cargarán las muestras.
5. Una vez que el agar este sólido quita con cuidado el peine
6. Luego que este sólido el gel, retirar porciones del gel de los extremos donde irán los electrodos. Y luego cubrir
estos espacios con buffer de corrida hasta la altura del gel.
7. Seguidamente cargar las muestras (para este caso con diferentes colorantes que tengan cargas positivas y
negativas. A esta cámara colocar una tapa transparente.
8. Ahora conecta los cables en 5 baterías de 9 V cada una y observar cómo se mueven los colorantes en el gel.
9. Responder que moléculas de colorantes tienen cargas positivas o negativas, y cuales han migrado más.
Peine
Recipiente con el gel
Pocillos
Electrodo negativo
Electrodo positivo
Espacio del gel recortado
Espacio del gel
recortado
Muestras
✓ Freifelder, D. 1981.Técnicas de Bioquímica y Biología Molecular. 2Da. Ed., Publicado por Reverté: 235-240
✓ Fuentes, M. J. 1998. Bioquímica Clínica y Patología Molecular: Volumen 1. 2da Ed., Publicado por Reverté: 169-171
Baterías en serie
Migración de moléculas
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