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Laboratorio:Entomología

Fecha de elaboración: Mayo de 2011

Revisión:00

Datos de Control

DIRECCIÓN GENERAL DE SANIDAD VEGETALCENTRO NACIONAL DE REFERENCIA FITOSANITARIA

PROTOCOLO PARA LA IDENTIFICACIÓN DEL MINADOR DE LA HOJA Liriomyza huidobrensis MEDIANTE LA TÉCNICA DE CLAVES

TAXÓNOMICAS

Nombre Cargo Firma

Elabora(n): Dr. Mariano Flores Dávila Director General del

laboratorio CISEF

Ing. María Esther García Raya Jefatura de Área de

Entomología

Revisa (n): Dr. Mariano Flores Dávila

Autoriza (n): Ing. María Esther García Raya

ÍNDICE

SECRETARIA DE AGRICULTURA, GANADERÍA. DESARROLLO RURAL,

PESCA Y ALIMENTACIÓN

Página

Antecedentes 2

Hospederos 3

Daños e Importancia Económica 3

Sinónimos 4

Origen y Distribución 4

Clasificación 6

Descripción de la familia Agromyzidae 6

Descripción de Liriomyza huidobrensis 8

Protocolo 10

Identificación 11

Claves taxonómicas 11

Almacenamiento y Destrucción de la muestra 13

Bibliografía 13

ANTECEDENTES

Dentro de la familia Agromyzidae (Diptera) el género más importante, en relación con el

número de especies y daños causados en la agricultura, es sin duda el género Liriomyza Mik.

En él se engloban 339 especies, aunque sólo 26 han sido citadas en la literatura atacando a

vegetales cultivados por el hombre y ocasionando, por tanto, importantes pérdidas económicas

(Martínez, 1993). En los últimos 10 años algunas especies de este género se han convertido,

dramáticamente, en una de las plagas de mayor incidencia en varios cultivos (Spencer, 1973;

Hussey y Scopes, 1985; Parrella, 1987; Martínez, 1993).

Se les conoce con el nombre común de minadores de las hojas, minador serpentina, mosca

minadora de la papa. La "mosca minadora de las hojas" (Liriomyza huidobrensis Blanchard

(Diptera: Agromyzidae) es nativa Del Neotrópico (Perú, Chile, Argentina, Brasil, América

Central y México) y se está difundiendo rápidamente hacia otras regiones (Europa, varios

países de África y lugares aislados de Malasia e Israel).

2

HOSPEDEROS

L. huidobrensis es un insecto altamente polífago, atacando a numerosos cultivos hortícolas,

ornamentales y malezas representados en más de 15 familias de plantas entre la cuales se

encuentran Asteraceae, Apiaceae, Brassicaceae, Caryophyllaceae, Chenopodaceae,

Solanaceae, Cucurbitaceae, Leguminosae, Liliaceae y Solanaceae (Steck, 1996). Entre los que

destacan papa, tomate, apio, lechuga, pimiento y espinaca, entre otros, además de malezas

asociadas a los cultivos. La planta hospedera puede ser de gran influencia en el crecimiento de

la población de la mosca minadora, así como en la de sus parasitoides. Hospederos que

resultan particularmente susceptibles al ataque de L. huidobrensis, son apio, arveja, espinaca,

haba, lechuga, papa, pimiento, remolacha y numerosas plantas ornamentales cultivadas,

principalmente de la familia Asteraceae (Neder y Arce, 1984).

Esta plaga ha desarrollado niveles significativos de resistencia a los insecticidas comúnmente

utilizados para matar las moscas adultas entre los que destacan los grupos de carbamatos,

organofosforados y piretroides.

DAÑOS E IMPORTANCIA ECONÓMICA

Tanto las galerías causadas por las larvas de la mosca minadora al alimentarse en el mesófilo

de las hojas, como las numerosas picaduras que la hembra realiza con su ovipositor en las

hojas como sitios de alimentación y ovipostura, afectan al follaje de las plantas hospederas.

Cuando las poblaciones del insecto son altas, este daño puede provocar la marchitez total del

follaje en papa, afectando al rendimiento especialmente si el ataque ocurre en el período de

formación y llenado de tubérculos hojas. Las larvas de todos los Agromizidae se alimentan de

los tejidos de las plantas vivas. Alrededor del 75% de las especies son minadores de hojas

mientras que las especies restantes se alimentan de ramas o forman agallas. Generalmente

las larvas son cilíndricas en forma, estrechándose anteriormente, con proyecciones llevando los

espiráculos anterior y posterior, el primero localizado en la superficie dorsal del protórax y

partes bucales fuertemente esclerotizadas.

Parrella (1987) revisó la literatura de minadores Liriomyza, y concluyó que este grupo de plagas

pueden afectar los cultivos en al menos seis formas: la enfermedad vectorial, la destrucción de

los jóvenes plántulas, causando reducciones en los rendimientos de los cultivos, causando

"Quemaduras solares" de la fruta, la reducción de la estética valor de las plantas ornamentales,

y causando problemas para la cuarentena de las plantas.

3

SINÓNIMOS

Nombre científico: Liriomyza huidobrensis (Blanchard 1926)SinónimosAgromyza huidobrensis Blanchard 1926

Liriomyza cucumifoliae Blanchard 1938

Liriomyza langei Frick 1951

Liriomyza decora Blanchard 1954

Liriomyza dianthi Frick 1958

Nombre ComúnMinadores de la hoja

Mosca minadora de la papa

Minadores serpentina

ORIGEN Y DISTRIBUCIÓN

Liriomyza huidobrensis (Diptera: Agromyzidae), fue descrita por primera vez en 1926 por

Blanchard, desde una muestra obtenida en Argentina, y clasificada como Agromyza

huidobrensis. (Spencer, 1981). Debido a su alta variedad de hospederos y distribución, fue

también descrita como L. langei Frick, L. decora Bl., L. bryoniae Kalt, y L. cucumifoliae Bl.

Todas estas especies fueron posteriormente establecidas como sinonimia de L. huidobrensis

por Spencer (1973). Desde su centro de origen, posiblemente regiones de clima más bien

fresco y de altura de América Latina (Spencer, 1992), L. huidobrensis, se dispersó por el resto

de los países de América. Esta dispersión ocurrió probablemente en forma natural y por el

desarrollo intensivo de hortalizas y ornamentales y el aumento de intercambio de algunas

plantas (esquejes de flores), sin considerar medidas cuarentenarias.

En América del Norte, se encuentra establecida en México, California y Hawaii produciendo

infestaciones ocasionales en Florida. Últimamente ha invadido varios países europeos,

asiáticos y algunos países de África.

4

En el mapa de distribución dado por el Crop Protection Compendium (2005).

= Presente = Ampliamente Distribuido = Localizado = Confinado y sujeto a cuarentena =

Ocasional o pocos reportes = Presencia no confirmada = Presente solo en algunas aéreas

Por otra parte a continuación se muestra la distribución que tiene en la EPPO (Organización

Europea de Protección de Plantas, 2005).

CLASIFICACIÓN

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Reino: Animalia

Phylum: Arthropoda

Clase: Hexapoda

Orden: Diptera

Familia: Agromizidae

Subfamilia: Phytomyzinae

Género: Liriomyza

Especie: L. huiobrensis (Blanchard, 1926)

DESCRIPCIÓN DE LA FAMILIA AGROMYZIDAE

La familia Agromizidae tiene alrededor de 1900 especies en 26 géneros en el mundo y 500

especies en Norteamérica.

Las siguientes combinaciones de características define a la familia Agromyzidae (Hennig 1958;

Spencer 1987, Borror y White, 1970): Vibrissae presentes Setas orbitales 1-7 presentes. Ala con costal rota cerca del final de R. (Fig. 1). Alas con las venas A1+CuA2 no alcanzan el margen del ala (Fig. 1). Machos con los escleritos pregenitales con un complejo de tergos fusionados de los

tergitos 6-8, con solo 2 espiráculos entre el tergito 5 y el segmento genital. Hembras con la parte anterior del segmento abdominal 7 formando un oviscapto.

Una descripción detallada de la morfología de Agromizidae es dada por Spencer (1972, 1973,

1987) and Dempewolf (2004). Y también en el atlas anatómico de las moscas la cual es dada

en la siguiente liga http://www.ento.csiro.au/biology/fly/fly.html. La nomenclatura anatómica

usada en este protocolo es la del Atlas Anatómico de Hamilton et al., 2006.

Género LiriomyzaLos adultos del género Liriomyza presentan las siguientes características morfológicas (EPPO,

2005; Spencer, 1987): Moscas pequeñas de 1-3 mm en longitud. Setula fronto-orbital reclinada (punteando hacia atrás).

6

Usualmente con un área pre-escutelar obscura del mismo color que el escutum,

raramente amarillo. Escutelum Amarillo en la mayoría de las especies, raramente obscuro. Costa extendiéndose hasta la vena M1+2 (Fig. 1). Celda discal (dm) pequeña. (Fig. 1). Segunda Vena trasversa (exterior) (dm-cu) presente en la mayoría de las especies

(Fig. 1). Órgano estridulatorio presente en los machos (un “raspador”, una cresta quitinizada en

los fémures posteriores, y un “archivo”, una línea de baja escala quitinizada en la

membrana de conexión entre los tergitos abdominales y esternitos).

1Fig. 1.- Venación general del ala de un Liriomyzidae.

Las diferencias morfológicas entre especies estrechamente relacionadas a Liriomyza son muy

leves, pero las diferencias en color las cuales son detectables son considerablemente

constantes. Sin embargo una identificación correcta de muchas especies de Liriomyza solo es

posible examinando la genitalia del macho (Spencer, 1972).

 

DESCRIPCIÓN DE Liriomyza huidobrensis

1 www.DrawWing.org

7

Huevo: los huevos son de forma elipsoidal, levemente arriñonada; de coloración blanco

opalescente y consistencia delicada. Miden, en promedio, 0,32 mm de longitud por 0,17 mm de

ancho. Son colocados individualmente, preferentemente, en el envés sobre la epidermis de la

hoja. A medida que se acerca el momento de la eclosión, el cordón se torna transparente y con

la ayuda de un microscopio estereoscópico se puede observar fácilmente el movimiento del

gancho bucal de la larva tratando de romper el corión.

Larva: las larvas son de tipo vermiforme y de 3.25mm de longitud (Fig. 2). El primer estadio

larval o recién emergidas son trasparentes y elipsoidales y se van tornan amarillo anaranjado

en el ultimo instar larval. EL cuerpo consta de tres segmentos torácicos y ocho abdominales; a

través del estereoscopio pueden observarse tres pares asociados con cada uno de los

espiráculos posteriores. Además, presentan una abertura anal sobre el último segmento

abdominal y una abertura oral en la región de la cabeza.

2Figura 2. Larva de L. huidobrensis.

Prepupa: durante la fase de prepupa las larvas se contraen y toman una forma elipsoidal, su

grosor aumenta y se acorta su longitud; finalmente cesan todos sus movimientos para luego

pupar. Las prepupas recién salidas de las minas presentan una coloración amarillenta sobre la

región de la cabeza.

Pupa: la pupa es típicamente coartada, cilíndrica y transversalmente segmentada de 1.3-2.3 ×

0.5-0.75 mm de longitud. En los extremos sobresalen los espiráculos. La región anterior es más

ancha que la posterior; ventralmente es aplanada y arqueada en el dorso. La coloración varía

de café amarillo a oscuro y luego el integumento se torna cristalino y es posible observar la

formación del adulto. Las pupas de las hembras son de mayor tamaño y peso que las del

2 Patricia Larrain Sanhueza, Ing. Arg., M.Sc., INIA Intihuasi, Chile.

8

macho. En el Cuadro 1 se presenta la longitud, ancho y peso de las pupas, discriminadas por

sexo.

Figura 3. Pupa de L. huidobrensis.

Adulto: los adultos machos miden, en promedio, 1,84 mm de longitud, desde el ápice de la

cabeza hasta el ápice del abdomen y 0,061 mm de ancho en la parte media del tórax; las

hembras miden 2,17 mm de longitud por 0,77 mm de ancho. En la cabeza el color

predominante es el amarillo, destacándose notoriamente los ojos color café rojizo. El tórax,

vista dorsalmente, es negro con el escutelo amarillo y el abdomen es negro con márgenes color

amarillo en cada tergito .

L. huidobrensis pueden ser distinguidos de otras especies de Liriomyza por las partes

amarillas de la patas y la cabeza siendo de un amarillo naranja oscuro, El tercer segmento

antenal muy oscuro algunas veces casi negro en la punta y la mesopleura es en gran parte

negra. El aspecto general es de una mosca pequeña oscura.

Figura 4. Adulto de L. huidobrensis.

PROTOCOLO

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Toma de muestra.- Las recolectas de las larvas de los minadores se pueden realizar

directamente de las minas hechas en las hojas por los agromizidos, mientras que los adultos

los puede uno recolectar con una red entomológica.

Envío de las muestras.- Las muestras deberán ser enviadas directamente en el laboratorio,

para su análisis inmediato. Los ejemplares (larvas y adultos) de los minadores deberán ser

enviados en alcohol al 70 % en perfectas condiciones en frascos (viales) cerrados con tapa.

Datos de la Muestra.- En ambos casos (larvas y adultos) se debe enviar todos los datos de la

colecta como son:

Hospedero.- Nombre común y Nombre científico.

Localidad.- De ser posible usar un GPS (Sistema de Posicionamiento Global).

Nombre del colector.

Fecha de colecta.

Método de colecta.

Otras observaciones.

Preparación de la genitalia del macho.La preparación de la genitalia del macho es esencial para obtener una identificación correcta en

Agromyzidae. El siguiente es un método satisfactorio para la preparación de especímenes,

para más detalles del método consultar en EPPO (2005), Spencer (1981, 1992) y Spencer &

Steyskal (1986).

1. Usando unas agujas de disección finas, cuidadosamente, separe el abdomen del resto

del cuerpo del Agromizido.

2. Hierva el abdomen en Hidróxido de potasio al 10% (KOH) de 2-4 minutos, y déjelo

enfriar toda la noche.

3. Transfiera el abdomen a ácido acético glacial frío de 2 a 3 minutos para neutralizar el

KOH.

10

4. Seque y retire el exceso de ácido acético glacial y trasfiera el abdomen en una gota de

líquido de Hoyer sobre un portaobjeto cóncavo.

5. Bajo un microscopio estereoscópico y usando una agujas de disección finas,

cuidadosamente corte el complejo genital y sepárelo de las membranas, cutícula y

musculatura asociada.

6. Coloque el complejo genital para una vista lateral bajo un microscopio compuesto con al

menos 400 aumentos.

7. Reposicione el complejo genital para una vista ventral del distiphallus (parte distal del

edeago) en 400 aumentos.

8. Para realizar una preparación semipermanente transfiera el complejo genital a una gota

de líquido de Hoyer sobre un portaobjeto plano limpio. Cuidadosamente sumerja la

genitalia en el medio de montaje y coloque un cubreobjeto procurando que se extienda

uniformemente el líquido de Hoyer.

9. Las laminillas permanentes pueden ser preparadas de la manera siguiente:

Después de la etapa 3, el abdomen puede ser trasferido a etanol al 70% y usando unas

agujas de disección finas separe el complejo genital y trasfiera la genitalia a etanol

absoluto por 2 a 4 minutos y luego transfiéralo a aceite de clavo, donde puede dejarlo el

tiempo necesario, posteriormente transfiéralo a una gota de Euparal (es una alternativa

del bálsamo de Canadá) y coloque un cubreobjetos, teniendo cuidado de que no

queden burbujas dentro de él.

10. Etiquete la laminilla con todos los datos (localidad, fecha de colecta, nombre del colector

nombre común y científico de el hospedero.

11. Coloque la laminilla en una incubadora manteniéndola a 45 grados centígrados durante

dos semanas para que quede totalmente seca.

12. Monte el resto del espécimen dentro de un alfiler pequeño con una etiqueta adecuada y

haga referencia a la genitalia montada en el portaobjeto.  

IDENTIFICACIÓN

Clave para la identificación de Liriomyza spp. usando el distiphallus o parte distal del edeago

del macho

1.- Con un bulbo distal…………………………………………………………………………………2

Con dos bulbos distales…………………………………………………………………………..3

11

2.- Con una constricción bien marcada entre las partes apical y basal de el bulbo: Sección

basal fuertemente curveada ……………………………………………………………………L. trifolii

Con solo constricción muy ligera, entre las partes apical y basal: Sección basal no

fuertemente curveada……………………………………………………………………..L. sativae

3.- Con Rims bulbares circulares, Uniformemente esclerotizados……………………..L. bryoniae

Con Rims bulbares espiralados, fuertemente esclerozados anterio ventralmente…….…..4

4.- Con los bulbos juntandose en la linea media solo en sus rims………………L. huidobrensis

Con los bulbos juntandose en la linea media de sus rims a sus bases …………L. strigata

Fig 5.- Diagrama General del Distiphallus de: (a) L. bryoniae; (b) L. huidobrensis; (c) L.strigata;

(d) L. sativae; (e) L. trifolii

12

ALMACENAMIENTO Y CONERVACIÓN DE LA MUESTRA

Los ejemplares procesados e identificados se conservan en frascos con alcohol al 70 %,

asegurándose que este bien herméticos. Y deben estar etiquetados con todos los datos de

recolecta y se pueden almacenar en un refrigerador a 4°C ò en su caso a temperatura

ambiente, en la gaveta correspondiente a plagas de los cultivos.

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