RETROVIRUS Características y replicación del genoma de los retrovirus El genoma de los retrovirus contiene dos copias de ARN monocatenario de polaridad positiva. El extremo 5´ del ARN presenta cap y el extremo 3´ esta poliadenilado, de modo que el ARN es capaz de actuar directamente como ARNm, aunque no es usado como tal. Todos los retrovirus contienen los siguientes genes y en el mismo orden: • gag: que codifica proteínas estructurales internas (antígeno especifico de grupo). • pol: que codifica la transcriptasa inversa, la proteasa y la integrasa.

• env: que codifica las proteínas de la envoltura.

REPLICACIÓN La replicación de los retrovirus es iniciada por la unión de las espículas a proteínas receptoras específicas de la superficie celular. La presencia de receptores para el virus es el determinante inicial del tropismo para tejidos y huéspedes concretos.

mediana edad;

• De madre a hijo. Aproximadamente una cuarta parte de las madres que están

infectadas con el VLTH-1 pueden transmitir el virus a sus bebés durante el parto o al

amamantarlos, especialmente si los amamantan durante seis meses o más

¿Debe de amamantar?

Si usted ha contraído el VLTH-1 no debe de amamantar. Si corre alto riesgo, debe de

someterse a análisis. De lo contrario, el amamantamiento se recomienda ampliamente. La

leche materna es uno de los alimentos más perfectos de la naturaleza.

¿Cómo puede protegerse contra la infección del VLTH-1?

Todos deben de tomar las mismas precauciones para protegerse contra la infección del VIH

o hepatitis B, y éstas mismas se pueden aplicar al VLTH-1.

En otras palabras:

• No comparta agujas, jeringas u otro equipo para inyectarse drogas.

• Siempre utilice un condón de látex, especialmente si tiene relaciones sexuales con más de

una persona.

Al igual que con el VIH y la hepatitis B, hay pruebas de que el VLTH-1 NO se transmite

por medio del contacto doméstico común de todos los días como son los besos, el uso del

inodoro o la preparación de alimentos. Para que la enfermedad se transmita, debe de existir

contacto directo entre la sangre o relaciones sexuales.

¿Hay algún tratamiento para la infección del VLTH-1?

No hay ningún tratamiento en la actualidad que elimine el virus una vez que lo ha contraído.

¿Puede contraer el VLTH-1 por medio de transfusiones de sangre?

La organización de servicios de sangre canadienses (Canadian Blood Services en inglés y

anteriormente Cruz Roja Canadiense) ha estado analizando todas las donaciones de sangre

para detectar el VLTH-1 desde abril de 1990 y la transmisión del VLTH por medio de

transfusiones ha sido virtualmente eliminada en Canadá.

¿Debe de someterse a la prueba?

No, a menos que tenga alguna enfermedad para la cual su médico piense que necesita

someterse a análisis o que haya estado en contacto con un caso sabido.

VLTH-1 (VIRUS LINFOTRÓPICO HUMANO DE CÉLULAS T TIPO I)

El aislamiento original de este virus se hizo a partir de células leucémicas de pacientes con

formas agresivas de carcinomas de células T. Este virus causa leucemia linfocítica aguda de

células T del adulto (LLTA) y la paraparesia espástica tropical, una enfermedad neurológica

no oncogénica que presenta un cuadro similar al producido por la esclerosis múltiple. Además,

474 TEMAS DE BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA MÉDICA

se han descrito otras tres condiciones asociadas con la infección por VLTH-1: uveítis por

VLTH-1, dermatitis infecciosa asociado a VLTH-1 y artropatía asociada a VLTH-1

Características estructurales

El virus linfotrópico humano de células T, tipos I y II, es un miembro de la subfamilia Oncovirinae,

y es un típico exponente de retrovirus de clase C. Tanto VLTH-I como VLTH-II

poseen una organización genómica similar (gag, pro/pol, env, pχ, flanqueados por repeticiones

terminales largas o LTR) y presenta una homología del 60% a nivel de sus secuencias

nucleotídicas.

El gen gag codifica para las proteínas estructurales p19, p24, y p15. Los genes pro/pol codifican

para la proteasa y la transcriptasa reversa, respectivamente. El gen env codifica para las

proteínas transmembrana y las glucoproteínas de la envoltura gp21 y gp46. El gen pχ codifica

para las proteínas reguladoras Tax y Rex y otros tres marcos abiertos de lectura.

Epidemiología

Las regiones inmunodominantes de las proteínas estructurales y ciertas regiones de los genes

reguladores son la base para la diferenciación de VLTH-I y II.

Si bien el genoma de estos virus se encuentra bastante conservado, existe una mayor

divergencia en lo referente a las LTR; esta diferencia ha sido explotada mediante RFLP (polimorfismos

en el largo de fragmentos de restricción) para la separación del VLTH-I en tres

subtipos (denominados cosmopolita, africano y melanesio, cada uno relacionado al origen

geográfico del virus). Otras herramientas de biología molecular han permitido subdividir al

subtipo cosmopolita en subtipos designados A-D. Los estudios virológicos han confirmado

la presencia de VLTH-1 en las células T de los pacientes seropositivos para los anticuerpos

anti-VLTH-1. La comparación de los virus aislados en Estados Unidos, Japón, el Caribe e

Israel ha demostrado que son iguales sobre la base de la homología de ácidos nucleicos. Se

han identificado áreas endémicas de infección por VLTH-1 en Asia, África, Medio Oriente,

Europa y el Hemisferio Occidental.

Del mismo modo, VLTH-II ha sido dividido en dos subtipos, IIa y IIb, que no parecen tener

una distribución geográfica determinada, aunque sí se asocian a determinadas poblaciones de

riesgo. En este sentido, el subtipo IIa se halla frecuentemente asociado a usuarios de drogas

intravenosas a lo largo de todo el mundo, mientras que el subtipo IIb se halla presente en

indios americanos.

Transmisión

El VLTH-1 permanece asociado con las células y se contagia por trasfusión de sangre, relaciones

sexuales o alimentación mamaria. Se ha sugerido la transmisión sexual (mayor probabilidad

de VLTH-1 positivas en mujeres de hombres infectados, habiéndose detectado linfocitos

portando el virus en el semen). Se han hallado linfocitos infectados por el VLTH-1 en la leche

de mujeres con anticuerpos contra el virus. Además, se han detectado células infectadas en

la sangre del cordón umbilical de recién nacidos de mujeres infectadas, hecho que sugiere de

manera contundente que la infección podría ocurrir intraútero. También se ha demostrado

que la transmisión se produce por vía parenteral.

Ciclo del virus

Entra al torrente sanguíneo e infecta los linfocitos T helper CD4+ y otros linfocitos implicados

en la hipersensibilidad retardada. Esas células T tienden a residir en la piel, lo que

TEMAS DE BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA MÉDICA 475

contribuye a los síntomas de LLTA. El VLTH es competente para la replicación y los genes

gag, pol y env son transcriptos, traducidos y procesados de una manera muy similar al VIH,

aunque su regulación es diferente. Además de su acción sobre los genes virales, la proteína

tax, transactiva los genes celulares para el factor de crecimiento de las células T, IL-2 y sus

receptores, lo que activa el crecimiento de la célula infectada.

El virus puede permanecer latente o multiplicarse con lentitud durante muchos años,

pero también puede inducir proliferación de clones particulares de células T. Aunque esta

proliferación de células T habitualmente es de origen policlonal, la leucemia linfocítica de

célula T del adulto (LLTA) causada por el VLTH-1 suele ser monoclonal. En las células con

crecimiento estimulado por VLTH se acumulan aberraciones cromosómicas y reordenamientos

del gen que codifica para el receptor beta del antígeno de las células T, lo que favorece la

transformación leucémica.

Clínica

La mayor parte de las infecciones ocurren mas tarde en la vida y casi todos los individuos

infectados permanecen asintomáticos de por vida, y la incidencia acumulativa de las formas

de leucemia de células T del adulto se produce aproximadamente en el 4% de los infectados.

Aproximadamente 1 de cada 20 personas desarrollan leucemia a los largo de un período

variable entre 10-50 años.

La LLTA por el VLTH-1 es una neoplasia de las células T helper CD4+ con curso

agudo o crónico. Los linfocitos malignos han sido denominados “células en flor” porque son

pleomórficos y contienen núcleos lobulados. Además de una cifra alta de leucocitos, esta

forma de LLTA se caracteriza por lesiones cutáneas similares a otras leucemias. La LLTA

aguda suele conducir a la muerte en menos de un año desde el momento del diagnostico,

independientemente del tratamiento.

Métodos diagnósticos

Se ha implementado el monitoreo en bancos de sangre para evitar la transmisión de VLTH-1

y 2 por transfusión. Dicho monitoreo emplea métodos indirectos para detección anticuerpos

específicos en suero y plasma.

La respuesta inmunológica está dada principalmente contra ciertas regiones altamente

inmunogénicas de las proteínas codificadas por los genes gag y env. Habitualmente se emplean

EIA como el ELISA para el tamizaje (screening) primario de los distintos sueros. Estos ensayos

son simples y sensibles y están preparados a partir de lisados de células infectadas por VLTH-1.

Las pruebas confirmatorias se realizan mediante WB. Estos ensayos serológicos, sin embargo,

no son capaces de discernir entre una infección presente o pasada. La detección directa del

virus en fluidos corporales puede realizarse mediante ensayos para proteínas o ácidos nucleicos

virales, como ELISA de captura para antígenos virales (usualmente productos del gen gag),

hibridación de ácidos nucleicos (Southern Blot) con sondas marcadas o PCR. Esta última

se ha convertido en el método de referencia para la determinación de infecciones presentes,

validando ensayos serológicos, diferenciando entre infecciones por VLTH-1 y VLTH-2.

En la población pediátrica el diagnóstico se realiza mediante PCR; esta herramienta es

de suma utilidad ya que los ensayos serológicos no son indicadores confiables de infección

debido a la transferencia pasiva de anticuerpos maternos.

Tratamiento, prevención y control

No se conoce tratamiento eficaz contra la infección por el VLTH-1. Es probable que el AZT

476 TEMAS DE BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA MÉDICA

y otros inhibidores de la transcriptasa inversa sean efectivos contra el VLTH-1, pero se necesitan

estudios controlados para demostrar el beneficio de estas terapias. Los medios para

limitar la diseminación del virus son los mismos descritos para el VIH: precauciones sexuales,

detección del suministro de sangre y la divulgación de los riesgos y enfermedades potenciales,

contribuirán a bloquear la transmisión del virus.

Es muy difícil controlar la infección de origen materno en los niños. En un futuro próximo

probablemente se instituyan procedimientos de despistaje o screening habituales para el

virus en la sangre donada. Hasta el momento se han reportado en el Uruguay dos casos por

el VLTH-1.

RETROVIRUS ENDÓGENOS

Diferentes retrovirus están integrados y forman parte de los cromosomas de humanos y

animales. En las personas se pueden detectar secuencias provirales completas y parciales,

con secuencias de genes similares a las del VLTH, el virus de tumor mamario del ratón

(MMTV) y otros retrovirus. Estos virus endógenos carecen generalmente de capacidad para

multiplicarse, debido a deleciones, inserción de codones de terminación o escasa eficacia de

la transcripción. Las secuencias de retrovirus pueden constituir hasta el 0,1% del genoma

humano. Esas secuencias pueden proporcionar sitios de integración para otros retrovirus o

cumplir alguna función desconocida.

Bibliografía

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El proceso global de replicación del virus se puede resumir en los siguientes pasos: entrada a la célula, transcripción inversa, integración del ADNc (ADN copia) viral en el genoma hospedador, transcripción del ADN vírico originando la formación de ARNm víricos y el ARN de la progenie, encapsidación en el citoplasma y por ultimo, la gemación de viriones con envoltura, con la consiguiente liberación de la célula.

La transcriptasa inversa es en esencia una ADN polimerasa que convierte el ARN viral en una copia de ADN lineal y monocatenario en el citoplasma de la célula huésped. Esta enzima muestra tres actividades enzimáticas: 1) síntesis de ADN usando como molde el ARN viral, 2) síntesis

de ADN usando como molde ADN, y 3) actividad de ribonucleasa H (degrada la cadena de ARN de un híbrido ARN:ADN). Como todas las ADN polimerasas, la transcriptasa inversa necesita un cebador, que en los retrovirus es un ARN de transferencia específico (ARNt) de origen celular.

Usando el ARNt como cebador, se transcribe a ADN un centenar de nucleótidos cercanos al extremo 5´ del ARN viral, allí el proceso de transcripción se detiene. Para copiar el resto del ARN viral (que representa la mayor parte), se emplea un mecanismo distinto. Primero se eliminan secuencias terminales redundantes del extremo 5´ de la molécula de ARN por medio de la ribonucleasa H. Esto conduce a la formación de un pequeño ADN monocatenario que es complementario al segmento de ARN que esta en el otro extremo del ARN vírico (3´).

Este pequeño trozo de ADN híbrida luego el otro extremo de la molécula de ARN (3´) donde TEMAS DE BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA MÉDICA 451 continua la copia de las secuencias del ARN vírico (“cambio de plantilla”), así se crea una cadena negativa de ADN. Aquí vuelve a actuar la ribonucleasa H y elimina toda la cadena positiva de ARN, excepto un pequeño fragmento usado como cebador que es eliminado luego de sintetizarse un pequeño segmento de ADN de polaridad positiva complementario, aquí vuelve a actuar la transcriptasa inversa y se termina de sintetizar la cadena de ADN bicatenario con largas repeticiones terminales (LTRs) en cada extremo. Estas LTRs contienen promotores transcripcionales y están relacionadas con el proceso de integración (figura 1).

La integración del genoma viral puede ocurrir en cualquier zona del ADN celular (que una vez integrado se denomina provirus) pasa a ser un elemento genético estable. Así, el provirus puede expresarse o permanecer en un estado latente y no expresarse.

Si se activan los promotores en la LTR adecuada, se transcribe el ADN proviral integrado formándose transcriptos que pueden ser encapsidados en partículas víricas o pueden ser procesados y traducidos a proteínas vírales. Cuando las proteínas víricas se acumulan en suficiente cantidad, tiene lugar el ensamblaje de la nucleocápside que luego se mueven hacia la membrana citoplasmática para la constitución final de las partículas víricas con envoltura.