Universidad Tecnológica de la Mixteca

Maestría en Ciencias Productos Naturales y Alimentos

Separación y determinación de tocoferoles en aceites vegetales por extracción en fase sólida con cartuchos de polímeros porosos y análisis

cromatografía de gases capilar

(Beldean-Galea et al.)

PRESENTA:

Analleli Jiménez Durán

Huajuapan de León , Oax. Noviembre de 2012

Contenido

1. Introducción

2. Objetivo

3. Procedimiento experimental

4. Resultados y discusiones

5. Conclusiones

1

1. Introducción

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1. Espectrofotometría

2. Voltametría

3. Cromatografía de capa fina

4. Cromatografía de gas

5. HPLC

1.1. Técnicas analíticas para tocoferoles:

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1.2. Los tocoferoles están asociados con membranas,

lipoproteínas, etc. Tipos de extracciones:

1. Extracción directa de la matriz del alimento.

2. Extracción después de la saponificación.

4

Libera las vitaminas,

aunque se debe tener

cuidado con la cantidad

de hidróxido de sodio

que se utilice.

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1.3. Métodos de extracción de tocoferoles y tocotrienoles

Fluidos supercríticos

Fase Solida

Líquido – Líquido

Solventes orgánicos

Baja cantidad de solventes Concentración de analítos Limpieza de la muestra

Se utilizan cartuchos con:

Ciclohexil [18] Diol [20] Sílica gel [12, 21] Octadecil [18] Polímeros de impresión molecular Polímeros porosos

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1.4. Extracción fase sólida

Evaluar la eficiencia de extracción de 4 polímeros porosos en SPE de tocoferoles de aceites vegetales, seguida de un análisis cromatográfico de gases capilar.

7

2. Objetivo

3.1. Materiales

7 Tipos de aceites

Polímeros porosos (Carlos Erba, Italia)

Estándares (Supelco, USA)

Solventes orgánicos grado HPLC (Merck, Alemania)

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3. Procedimiento experimental

Tabla 1. Características de los polímeros porosos

Hewlett Packard HP 4890 serie D

Columna capilar de sílice fundida

Inyector splitless

Detector de ionización de llama

Gas acarreador (Nitrógeno al 99.999%)

Temperatura inicial 140ºC

Velocidad de flujo 1.5 mL min-1

Características

del equipo

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3.2. Equipo y cromatografía de gases

Saponificación

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3.3. Pretratamiento de muestra

1 • 400 mg de aceite

2 • 0.2 grs. de ácido ascórbico

3 • 15 mL de metanol absoluto

4 • 1.5 mL de hidróxido de sodio al 50%

5 • Calentamiento a 70ºC por 3 min

6 • Enfriar los tubos

7 • 3 mL de cloruro de sodio

Análisis de NaOH

Muestra+15 mL de

mezcla de hexano:

acetato de etilo (85:15,

v/v)

Evaporar en

Nitrógeno

Disolver en 2

mL de la misma

mezcla

Cromatografía

de gases capilar

Preparación y

acondicionamiento Evaluar la

selectividad de los

poros

Extracción

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0.5g de polímero

poroso

Acetona y metanol

10µL de estándar + metanol

Elución (2 mL de

hexano:acetato de

etilo (90:10,v/v))

Evaporación de eluato en

nitrógeno 100 µL de

metanol

Cromatógrafo de

gases capilar

Lavado con agua

destilada

3.4. Extracción líquido-líquido

3.5. Extracción fase-sólido

Porapak Q

Análisis

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4.1. Optimización de la saponificación

Tabla 2. La influencia de la adición de NaOH en la recuperación de tocoferoles.

4.2. Extracción eficiente de los polímeros porosos.

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4. Resultados y discusiones

Figura 1. Gráficas sobre la eficiencia de los polímeros.

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Buen método para limpiar las muestras y para la concentración de especies requeridas

4.3. Comparación de la extracción líquido - líquido y extracción en fase

sólida en porapak Q

Figura 2. Extracción en fase sólida cromatograma B, extracción líquido-líquido cromatograma C.

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Resultados cuantitativos y cualitativos . Se determinaron en base al método

de curva de calibración.

4.4. Análisis cuantitativo

Tabla 3. Contenido de tocoferoles de varios aceites vegetales, extracción con cartuchos Porapak Q y análisis GC en PE

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En la saponificación, la perdida de tocoferoles puede ser controlada con

una cantidad y concentración adecuada de hidróxido de sodio.

La estabilidad de los tocoferoles se incrementa con el número de grupos

metilos unidos al anillo fenólico.

El uso de una extracción de fase sólido con cartucho Porapak Q es un

buen método para limpiar las muestras.

Con los polímeros no polares o copo polares se obtienen buenos

rendimientos de los tocoferoles.

5. Conclusiones

Gracias

Voltametría

Comprende un grupo de métodos electroanalíticos que

suministran información sobre el analíto, a partir de la

medida de la corriente en función del potencial aplicado, en

condiciones que estimulan la polarización de un electrodo

indicador o de trabajo.

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Diapositiva de apoyo

Inyector splitless

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Diapositiva de apoyo

Polímero molecularmente impreso

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Una tecnología emergente llamada impresión molecular, conduce a polímeros

sintéticos altamente estables, llamados polímeros de impresión molecular

(MIPs), poseen propiedades de reconocimiento molecular selectivo debido a que los

sitios de reconocimiento dentro de la matriz del polímero son complementarios al

analíto en la forma y posición de los grupos funcionales.

Algunos de estos polímeros tienen altas selectividades y constantes de afinidad,

comparables con los sistemas de reconocimiento que ocurren naturalmente tales

como anticuerpos monoclonales o receptores, los cuales los hacen especialmente

adecuados como constituyentes en sensores químicos (biomiméticos) para la

química analítica.

Diapositiva de apoyo