UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TRABAJO DE TITULACIÓN SOMETIDO A CONSIDERACIÓN DEL

H.CONSEJO DIRECTIVO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS

AGROPECUARIAS COMO REQUISITO PREVIO PARA OPTAR

AL TÍTULO DE GRADO:

MEDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

DETERMINACIÓN DEL ÍNDICE DE PREVALENCIA DE LA

BRUCELOSIS BOVINA EN EL CANTÓN PIÑAS, PROVINCIA DE EL

ORO

AUTOR:

JUAN CARLOS ORTEGA CHAMBA

DIRECTOR:

DR. CARLOS ARMANDO ÁLVAREZ DÍAZ, PhD

MACHALA - EL ORO - ECUADOR

2014

II

CERTIFICO

Que el proyecto de titulación de grado, ha sido pródigamente revisado y

autorizado a quién corresponda para su aprobación y ejecución:

Dr. Carlos Armando Álvarez Díaz PhD, Director de Tesis

Dr. Napoleón Oliverio Vargas Mg Sc, Miembro de Tesis

Dr. Luis Hurtado Flores Mg. Sc, Miembro de Tesis

III

La responsabilidad por las

investigaciones, resultados y

discusión del presente trabajo,

pertenece exclusivamente a la

autor.

Juan Carlos Ortega Chamba.

IV

DEDICATORIA

Este trabajo se lo dedico con mucho amor a todos mis seres queridos como lo son mis padres

Alfonso Ortega y Isabel Chamba a mi hermanita Tatiana Ortega, a mis tías Carmita, Evila,

Mariana, America y más aún una persona que nunca olvidare a mi abuelita Mercedes

Valdiviezo que me supo inculcar los más grandes valores del mundo amor y respeto hacia los

demás.

V

AGRADECIMIENTO

Agradezco principalmente a Dios por la vida que me ha dado, por brindarme salud, voluntad y

fuerzas para lograr mi objetivo.

También agradezco a mis padres por el apoyo incondicional que me brindan y por su arduo

trabajo por ayudarme, económica y moralmente, por estar presentes en todo momento hasta

en las etapas más difícil de mi vida; También quiero agradecerle a la familia Romero

Espinoza por brindarme su apoyo y confianza en su hogar cuando realice mi trabajo de tesis

en el cantón Piñas.

Al Dr. Carlos Armando Álvarez Díaz PhD, por brindarme su apoyo al depositar su confianza

en mí para realizar este trabajo y ser un gran ejemplo a seguir.

Al Dr. Napoleón Vargas Mg. Sc, por sus sabios consejos a pesar del poco tiempo que nos

brindó sus conocimientos es un gran amigo y un excelente profesional.

Al Dr. Luis Hurtado, por su noble y sencillez gentileza nos brindó todos sus conocimientos a

nuestra formación como profesional.

A todos mis profesores, que nos impartieron sus conocimientos y valores para mi formación

profesional, en especial al Dr. Alfredo González, Dr. Fausto Ortiz, Dr. Mario Erazo, Dr.

William López, Dr. David Masache, Dr. Segundo Martínez, Dr. Iván Ramírez y al

Arquitecto Jorge Moreno.

A mi amigo el Dr. Alexander Romero, por su gran y valiosa ayuda en la realización de mi

tesis por la gran amistad con los señores ganaderos del cantón piñas al colaborarme con sus

animales para realizar este trabajo.

A mis compañeros que estuvieron presentes en todos los momentos necesarios, gracias por su

amistad y compañerismo, y más aun a todas las secretarias que me brindaron su tiempo ante

algún inconveniente y a todo el personal de la de la Facultad de Ciencias Agropecuarias.

VI

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ACTA DE CESIÓN DE LOS DERECHOS DE TESIS DE GRADO Y TRABAJOS DE

TITULACIÓN

Consigno con el presente escrito la cesión de los Derechos de Tesis de grado/ Trabajo de

Titulación, de conformidad con las siguientes clausulas:

PRIMERA.

Por sus propios derechos y en calidad de director de Tesis Sr... Dr. Carlos Armando Álvarez

Díaz PhD, tesista…Sr. Juan Carlos Ortega Chamba, por sus propios derechos, en calidad de

Autor de tesis.

SEGUNDA.

El/la tesista Sr. Juan Carlos Ortega Chamba, realizó la Tesis Titulada: “Determinación del

Índice de Prevalencia de la Brucelosis Bovina en el Cantón Piñas, provincia de el Oro”, para

optar por el título de Médico Veterinario Zootecnista, en la Facultad de ciencias

Agropecuarias de la Universidad Técnica de Machala, bajo la dirección del Docente Dr.

Carlos Armando Álvarez Díaz PhD., es política de la Universidad que la Tesis de Grado se

aplique y materialice en beneficio de la colectividad.

Los comparecientes… Dr. Carlos Armando Álvarez Díaz PhD., Como Director de Tesis y

el/la tesista…Sr. Juan Carlos Ortega Chamba, como autor/a de la misma, por medio del

presente instrumento, tienen a bien ceder en forma gratuita sus derechos en la tesis de Grado

titulada: “Determinación del Índice de Prevalencia de la Brucelosis Bovina en el Cantón

Piñas, provincia de el Oro”, para optar por el título de Médico Veterinario Zootecnista, a

favor de la facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Técnica de Machala y

conceden autorización para que la Universidad pueda utilizar esta Tesis en su favor y/o de la

colectividad, sin reserva alguna.

APROBACIÓN

Las partes declaran que reconocen expresamente todo lo estipulado en la presente cesión de

Derechos.

Para constancia suscriben la presente cesión de Derechos en la ciudad de Machala a los días

del mes de……….del año 2014.

Dr. Carlos Armando Álvarez Díaz PhD Juan Carlos Ortega Chamba

DIRECTOR DE TESIS AUTOR

VII

ÍNDICE

Tema Página

1. Introducción 13

1.1. Objetivos 14

1.1.1. Objetivo General 14

1.1.2. Objetivos Específicos 14

2. Revisión literatura 15

2.1 Historia 15

2.2 Definición 16

2.3 Distribución geográfica 16

2.4 Etiología 17

2.5 Morfología y tinción de la bacteria. 18

2.6 Patogenia 18

2.7 Respuesta Inmune 19

2.8 Medios de cultivo 21

2.9 Resistencia bacteriana 21

2.10 Fuentes de infección 22

2.11 Modos de transmisión 23

2.11.1Transmisión Horizontal 23

2.11.2 Transmisión Vertical 23

2.12 Signos clínicos 23

2.13Alteraciones Anatomopatológicos. 25

2.14Diagnóstico. 25

2.14.1Diagnóstico Clínico. 25

2.14.2Diagnóstico Bacteriológico. 25

2.14.3Diagnóstico Serológico. 26

2.15Tratamiento. 26

2.16 Control Y Profilaxis. 27

2.17 Importancia En La Salud Pública. 28

2.18Estudios Realizados Sobre Brucelosis Bovina En La Provincia De El Oro. 29

3. Materiales y métodos 31

3.1 Ubicación Y Herramientas De La Investigación 31

VIII

3.2 Materiales 32

3.3 Equipos 32

3.4. Población Y Muestra. 33

3. 5Metodología. 33

3.5.1 Toma De Muestras. 34

3.5.2 Procesamiento De La Muestras. 35

3.6.3 Análisis Estadístico. 36

3.6.3.1 Variables 36

4. Resultados y Discusión 37

4.1 Índice de prevalencia de brucelosis bovina en el cantón piñas. 37

4.2 Variable edad. 39

4.3 Variable Sexo. 41

4.4 Variable Raza. 42

4.5 Pruebas De Comprobación. 43

5. Conclusiones 44

6. Recomendaciones. 45

7. Resumen 46

8. Summary 47

9. Bibliografía. 48-51

10. Anexos. 52-58

IX

ÍNDICE DE TABLAS Tablas Páginas

1. En la provincia de El Oro han sido múltiples las investigaciones encaminadas a

determinar el índice de prevalencia de la Brucelosis 29

2. Total De Animales Muestreados Por Punto Cardinal. 38

3. Clasificación Por Edad De Los Animales Muestreados. 40

4. Variable Sexo 41

5. Razas De Los Animales Muestreados. 42

X

ÍNDICE DE GRÁFICOS

Gráficos Páginas

1.Índice De Prevalencia Para El Cantón Piñas 39

2. Variable Edad. 40

3. Variable Sexo. 41

4. Variable Raza. 42

XI

ÍNDICE DE ANEXOS

Figuras Páginas

1. Mapa 1. Distribución mundial de la Brucelosis bovina 16

2. Mapa 2. Cantón Piñas, provincia de El Oro. 31

3. Mapa 3. Ubicación de los sectores muestreadas en el Cantón. 37

.

XII

ÍNDICE DE ANEXOS

Anexos Páginas

ANEXO N° 1 Ejemplo De Las Hoja De Registro Empleadas En La Investigación. 52

ANEXO N° 2 Fotos. 52

Foto 1. Materiales 52

Foto 2. Recolección De Muestras (Punción Y Colocación Del Tubo). 53

Foto 3. Recolección De Muestras (Extracción De Sangre) 53

Foto 4. Recolección De Muestras (Muestras Recolectadas). 54

Foto 5. Análisis De Muestras. 54

Foto 6. Muestra coagulada con presencia de suero y antígeno rosa de bengala. 55

Foto 7. Colocación del suero de cada una de las muestras y el antígeno aglutinoscopio. 55

Foto 8. Lectura Negativa De Las Muestras Homogenizadas En El Aglutinoscopio. 56

Foto 9. Lectura Negativa De Las Muestras Homogenizadas En El Aglutinoscopio. 57

Foto 10. Comprobación De Las Muestras. 58

Foto 11. Lectura De Las Muestras. 58

Foto 12. Lectura Negativa De Las Muestras. 58

13

1. INTRODUCCIÓN

Para Samartino (2003), la brucelosis es una enfermedad infecciosa de los animales que se

trasmite al hombre constituyendo una zoonosis; La misma es producida por bacterias del género

Brucella de acuerdo a la variación antigénica y hospedadores primarios, en los bovinos afecta la

Brucella abortus que causa grandes pérdidas económicas a nivel mundial.

La Brucelosis bovina es una enfermedad contagiosa ampliamente distribuida en el mundo, la cual

produce abortos e infertilidad en los animales, es causa de considerables pérdidas económicas,

especialmente en el ganado lechero, ya que provoca disminución en la producción de leche,

pérdida de peso y cojera ya que es causada específicamente por la B. abortus; se le conoce como

Brucelosis bovina, Enfermedad de Bang, Aborto contagioso o Aborto infeccioso; afecta a ganado

de leche y de carne, induciendo aborto espontáneo, retención de placenta y problemas de

fertilidad. Esta especie también afecta a ovejas, cabras, perros, camellos, búfalos, animales

salvajes y al hombre en forma incidental, al consumir 2 productos lácteos derivados de animales

infectados o por el contacto con material infeccioso (Iowa State University, 2009).

La transmisión de la brucelosis al hombre y su prevalencia en las distintas áreas geográficas,

dependen de factores tales como las especies de brucella presentes en la región, las condiciones

climáticas, la distribución de la población en riesgo, los tipos de producción pecuaria, los

métodos de procesamiento de la leche para obtener derivados, los hábitos alimentarios locales y

las normas de higiene personal.

Las fincas ganaderas se ven afectadas por enfermedad debido a que es causante de abortos y los

animales infectados se deberían eliminar por el alto índice de contagio que presenta, esto influye

mucho en la economía pecuaria de la zona, de la provincia y el país.

Los estudios realizados anteriormente en el cantón Piñas revelan la presencia de la enfermedad, y

por ende en la presente investigación se demostrará si el índice de prevalencia de Brucelosis

perdura aún, o se ha reducido parcialmente o en su totalidad.

14

1.1 OBJETIVOS:

1.1.1 OBJETIVO GENERAL

Determinar el índice de prevalencia de Brucelosis Bovina en el cantón Piñas.

1.1.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

1. Determinar el índice de prevalencia de Brucelosis Bovina, mediante la prueba diagnóstica

Rosa de Bengala (Card-test) en bovinos del cantón Piñas.

2. Determinar el índice de prevalencia de Brucelosis Bovina en relación con las variables: raza,

edad y sexo.

15

2. REVISIÓN DE LITERATURA.

2.1 HISTORIA.

La brucelosis es una enfermedad conocida desde la época de Hipócrates, (400 años AC) sin

embargo, las primeras descripciones de ésta enfermedad las realizó Cleghornen en el año de 1751

(Suárez et al, 2001).

Expresan Paredes et al (2012) que en 1887, Bruce describió el primer miembro del género

Brucella a partir de casos de fiebre de malta en la isla de este nombre; para posteriormente,

denominarla Micrococcus melitensis y en 1905 pudo comprobar que las cabras estaban

generalmente infectadas y que el hombre contraía la enfermedad, principalmente por el consumo

de leche de cabra infectada. En 1897, Bang, en Dinamarca, descubrió B. abortus en vacas

abortadas y demostró que era la causa de la enfermedad, conocida con el nombre de enfermedad

de Bang, o aborto epizoótico del ganado bovino (Paredes et al (2012).

Plantean Miño y Pico (2003), que en 1914, Traum descubrió B.suis en cerdas abortadas mientras

que en 1896, el veterinario danés Bernhard Bang, identificó la etiología del aborto epizoótico

bovino para ser en Norteamericana que Alice Evans comprobara la relación entre Brucella

melitensis y el Bacterium abortus (Brucella abortus bovis) identificado por Bang.

Según Alvarado et al (1959) en nuestro país Ecuador en una encuesta serológica hecha en 1952,

en un grupo de 566 manipuladores de carne (matarifes, carniceros, etc.) procedentes de varios

puntos del país, se encontró que el 4.06 % era reactor. En un estudio hecho por los mismos

investigadores, en 1547 muestras de enfermos febriles del Hospital de Enfermedades Infecciosas

de Guayaquil, se encontraron 14 reactores (0,9%). En 1955, se realizó la primera notificación

sobre la existencia de la brucelosis en la ganadería ecuatoriana.

16

La brucelosis bovina, esta difundida en todo el continente americano, con prevalencias de más

del 5% en países como: Argentina, Venezuela, México, Chile, únicamente ha sido controlada en

Uruguay, país en el cual se estima que le prevalencia es inferior al 0,5% (Samartino, et al 2003).

2.2 DEFINICIÓN.

Es una enfermedad infecto-contagiosa, epizoótica y panzoótica, (Merck, 2007) caracterizada por

causar trastornos inflamatorios, septicemia y lesiones degenerativas y sépticas en los órganos

reproductores, con un curso crónico, que ataca a varias especies de animales domésticos y

silvestres.

Generalmente en los bovinos se conoce como el aborto epizoótico bovino porque clínicamente su

signo típico es el aborto en la segunda mitad de la gestación y su agente causal es B abortus que

también se presenta en ovinos; la Brucelosis Bovina es una enfermedad infecciosa limitante del

desarrollo ganadero por lo que se encuentra ubicada en la lista B de enfermedades transmisibles

que se consideran importantes desde el punto de vista socio-económico y/o sanitario a nivel

nacional y cuyas repercusiones en el comercio internacional de animales y productos de origen

animal son considerables (OIE, 2003).

2.3 DISTRIBUCIÓN GEOGRAFICA.

Figura 1. Distribución mundial de la Brucelosis bovina ( Fuente WAHID - OIE )

17

La brucelosis se encuentra en todo el mundo (Figura 1) pero está controlada en la mayoría de los

países desarrollados. La enfermedad clínica todavía es común en el Medio Oriente, Asia, África,

América Central y del Sur, Cuenca Mediterránea y el Caribe; Las especies de Brucella varían en

su distribución geográfica, B. abortus se encuentra en todo el mundo, en las regiones ganaderas

con excepción de Japón, Canadá, algunos países europeos, Australia, Nueva Zelanda e Israel,

donde ha sido.

La erradicación de los rodeos domésticos es casi completa en EE. UU. B. abortus permanece en

huéspedes de la fauna silvestre en algunas regiones, como el Área Mayor de Yellowstone de

América del Norte. B. melitensis es particularmente común en el Mediterráneo, además se

presenta en el medio Oriente y Asia Central, alrededor del Golfo Pérsico (también conocido

como Golfo Arábigo) y en algunos países de América Central; Se ha informado la presencia de

este organismo en África e India, aunque no parece ser endémico en el norte de Europa, América

del Norte (excepto México), sureste de Asia, Australia o Nueva Zelanda. B. ovis probablemente

se presenta en la mayoría de las regiones de cría de ovejas del mundo; también se ha informada

en Australia, Nueva Zelanda, América del Norte y del Sur, Sudáfrica y muchos países de Europa

(Iowa State University, 2009).

En la provincia de El Oro según investigaciones realizadas se encuentra en los cantones: Chilla,

Atahualpa, Zaruma, Piñas, Balsas, Marcabelí, Pasaje, El Guabo, Santa Rosa y Arenillas; en el

Cantón Portovelo la incidencia ha sido negativa (Cajamarca y Salinas, 1999).

2.4 ETIOLOGÍA.

Esta infección es producida por bacterias del género Brucella (abortus, melitensis, suis, canis,

ovis, etc.). En los bovinos y ovinos es la especie B abortus.En las cabras el agente causal es B.

Melitensis que también infecta al humano. En los cerdos es B. Suis, en los caninos B canis, en los

mamíferos marinos es B maris, en los roedores B neotomae (Suárez et al, 2001).

18

Para Cano y Camacho (2010), se han identificado 4 biotipos de este agente: 1, 2, 3 y 4, siendo el

biotipo 1 el responsable del 85% de la infecciones; La Brucella abortus es la que afecta

principalmente al ganado bovino.

En los humanos (Suárez et al, 2001), la brucelosis puede ser producida por B. abortus, B.

melitensis, B. suis biotipos 1-4 y a veces por, B. canis o Brucella de mamíferos marinos.

2.5 MORFOLOGÍA Y TINCIÓN DE LA BACTERIA.

El género Brucella está formado por bacterias gran negativas, que se observan al microscopio

como cocos, bacilos de 0,5 a 0,7 µm de diámetro y de 0,5 a 1,5 µm de largo, intracelulares

facultativos, inmóviles y aerobios, no forman esporas (Agurto y Fernández 2013).

Estos cocobacilos no esporulados, a capsulados, carentes de pilis o flagelos, poseen una envoltura

celular característica: la membrana externa (ME), la membrana interna y un espacio periplásmico

intermedio; En el periplasma hay proteínas y un gel glucopeptídico denominado peptidoglicano

(PG) responsable de la forma e integridad osmótica de la bacteria, el citoplasma es rico en ADN,

ARN, y proteínas citosólicas, algunas de ellas importantes desde el punto de vista del diagnóstico

(Estein, 2006).

Según Salinas y Cajamarca (1999), las brucellas no se logran teñir por el método Gram, más bien

se tiñen con soluciones corrientes de anilina, entre los métodos de tinción selectivos cabe destacar

los llamados: Koster en 1936, que encontraron ser muy prácticos.

2.6 PATOGENIA.

La Brucella abortus tiene predilección por el útero grávido, ubre, testículos, glándulas accesorias,

linfonodos y cápsulas articulares; así como por diferentes tipos celulares (fagocitos, polimorfo

nucleares y mononucleares), de esta manera se establece la infección en tracto reproductor,

glándula mamaria y sistema retículo-endotelial Después de la infección el agente se localiza

19

inicialmente en linfonodos regionales donde produce hiperplasia linfoide y respuesta

inflamatoria aguda, después se propaga a otros tejidos linfoides, hígado y pulmones, y en

animales gestantes a útero y glándula mamaria; La infección congénita en becerros recién nacidos

se da como resultado de la infección en útero (Agurto y Fernández, 2013).

Durante la diseminación en el organismo, las bacterias que se localizan extracelularmente están

expuestas a los mecanismos normales de defensa antibacterianos del hospedero donde quedan

atrapados y mueren dentro del sistema retículo-endotelial (Cano y Camacho 2010).

2.7 RESPUESTA INMUNE.

El ingreso de brúcella en el organismo induce la activación de los mecanismos de defensa que se

inician con la participación de algunos componentes de la inmunidad innata como el

complemento (C), los neutrófilos y los macrófagos (Soria y col., 2013).

Los macrófagos juegan un rol central en la respuesta inmune frente a Brucella, ya que actúan

como células fagocíticas profesionales y como células presentadoras de antígenos procesados sus

compartimentos intracelulares para su presentación en el contexto del Complejo Mayor de

Histocompatibilidad (MHC) a los linfocitos T, promoviendo de esta manera la respuesta inmune

adaptativa (UCC, 2006). En este sentido, se ha encontrado que el LPS de Brucella interfiere con

la vía de presentación de antígenos por MHC clase II; las funciones bactericidas de los

macrófagos frente a Brucella se encuentran centradas en la actividad de las especies reactivas de

oxígeno y las especies reactivas de nitrógeno, las cuales son inducidas por IFN-γ y el factor de

necrosis tumoral alfa (TNF-α) (UCC, 2006).

Los receptores Toll-like (TLR) presentes en las células fagocíticas, juegan un rol importante en el

inicio de la respuesta inmune innata. Estos receptores reconocen productos microbianos

uniéndose directamente a ellos e inducen señales intracelulares que activan factores de

transcripción (como NF-kB) que modulan la producción de citoquinas; Estos receptores pueden

ser activados por diversos productos microbianos; el receptor Toll-like 4 (TLR4) es activado por

20

LPS, el TLR9 por ADN bacteriano, el TLR2 por productos de la pared celular de bacterias Gram

positivas y TLR5 por flagelina (UCC, 2006).

Los neutrófilos están implicados en el desarrollo de una defensa temprana frente a una infección

por Brucella mediante la fagocitosis y posterior destrucción del microorganismo; En primer

lugar, los neutrófilos son atraídos al sitio de la infección por estímulos químicos originados o

derivados del microorganismo, para posteriormente fagocitar la bacteria, preferentemente

opsonizada (UCC, 2006); una vez que el patógeno es fagocitado, se desarrolla una serie de

mecanismos destructivos en el neutrófilo, con el fin de eliminar la bacteria, mediante el aumento

del consumo de oxígeno que lleva a la aparición del radical peróxido de hidrógeno y otros

radicales derivados del oxígeno, junto con la activación de la enzima mieloperoxidasa y la fusión

del lisosoma con los fagosomas que contienen la bacteria, liberándose hidrolasa ácida,

glicosidasa, proteasa y lipasa.

Sin embargo, la bacteria ingerida puede sobrevivir al mecanismo destructivo de los fagocitos,

gracias a moléculas de bajo peso molecular que inhiben el sistema antibacteriano

mieloperoxidasa-peróxido de hidrógeno-haluro; por ello, aunque los neutrófilos son las primeras

células relacionadas con la eliminación de patógenos extraños, ellos son considerados de baja

eficiencia contra Brucella, ya que esta bacteria puede crecer y sobrevivir en su interior y además

es diseminada a través de estos leucocitos a órganos y diferentes localizaciones, desarrollándose

una infección persistente (UCC, 2006).

Uno de los primeros eventos que ocurren después de la entrada de la Brucella al organismo es la

activación del complemento por la vía alterna; sin embargo, se ha demostrado que esta vía es

incapaz de eliminar la cepa virulenta de Brucella abortus. Por lo tanto, la lisis de Brucella estaría

mediada principalmente por la vía clásica del complemento, la cual es dependiente de anticuerpos

(UCC, 2006).

Los linfocitos también son impactados por distintos antígenos de Brucella, las proteínas de las

bacterias son procesadas dentro de la célula presentadora de antígenos y sus péptidos asociados o

moléculas, el Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH) clase I y II son presentados a los

21

LTH CD4+ y LT citotóxicos (LTC) CD8+, estos últimos son capaces de lisar macrófagos y otras

células infectadas con brúcela (Soria y col., 2013).

2.8 MEDIOS DE CULTIVO.

Se han cultivado algunas cepas en medios definidos que contienen aminoácidos, vitaminas, sales

y glucosas mientras que la B, abortus, requiere 5 a 10 de CO2 para crecer, en tanto que las otras

tres especies crecen en aire; Las brucellas utilizan carbohidratos, pero no

producen ácidos ni gas en cantidades suficientes para su clasificación. Las cuatros especies que

infectan a los seres humanos producen catalga y óxidos a Muchas de ellas producen los nitratos a

nitritos. Las brúcelas son moderadamente sensibles al calor y a la acidez (OIE, 2004).

Crecen perfectamente en medio de agar sangre, se refieren medios especiales, tales como difusión

de hígado, triptosa y agar brucella y se incuban en 370C, necesitando una Atmosfera de CO2 de

un 10%, después de 2 a 4 días de incubación aparecen colonias convexas, pequeñas, lisas, de

color traslúcido y luego con la edad se hacen castañas (López, sin fecha).

2.9 RESISTENCIA BACTERIANA.

Las especies de Brucella mueren fácilmente con el uso de los desinfectantes comunes, como las

soluciones de hipoclorito, etanol al 70%, isopropanol, yodoforos, desinfectantes fenólicos,

formaldehído, glutaraldehído y xileno; sin embargo, la materia orgánica y las bajas temperaturas

disminuyen la eficacia de los desinfectantes.

Los desinfectantes que destruyen la Brucella sobre las superficies contaminadas con 2,5% de

hipoclorito de sodio, 2-3% de sosa cáustica, 20% de suspensión fresca de cal viva (hidróxido de

calcio) o 2% de solución formaldehído (todos probados durante 1 hora). Sobre la piel

contaminada se puede utilizar etanol, isopropanol, yodóforos, sustitutos de fenoles o soluciones

diluidas de hipoclorito.

22

Se puede utilizar la autoclave (calor húmedo de 121°C durante al menos 15 minutos) para

destruir las especies de Brucella en los equipos contaminados según datos de la I.S.U (2009),

estos organismos también pueden ser inactivados por medio de calor seco (160-170 °C durante al

menos 1 hora). En el caso de los líquidos, es generalmente efectivo realizar un hervor durante 10

minutos. Se ha informado que el xileno (1 ml/litro) y la cianamida de calcio (20 kg/m3)

desinfectan el estiércol líquido después de 2 a 4 semanas; Se ha informado que la Brucella

permanece en el helado durante semanas y en la manteca durante meses, este organismo

sobrevive durante períodos de tiempo muy cortos en la carne, a menos que esté congelada donde

puede sobrevivir por años (I.S.U, 2009).

2.10 FUENTES DE INFECCIÓN.

La fuente primaria de infección está representada por las hembras grávidas que, al abortar o parir,

expulsan grandes cantidades de Brucellas con el feto, el líquido amniótico y las membranas

fetales; También pueden difundir la enfermedad las hembras que, poco después de abortar,

eliminan Brucellas con la secreción vaginal, y vacas que al parecer sanas, segregan leche que

contienen Brucellas, en menor grado pueden contribuir a la contaminación del campo las

materias fecales de terneros que se alimentan de leche contaminada, ya que no todas las Brucellas

se destruyen en el tracto digestivo (Soria y col., 2013).

Los toros sin infección no la contraen por cubrir a vacas infectadas, pero sí la tienen, pueden

infectar a éstas, aunque muy raras veces. En las demás especies, ocurre en forma similar (Beer,

1981).

Las secundinas más importantes desde el punto de vista práctico lo constituyen las membranas

fetales, el líquido amniótico y el feto infectado, pues contienen cantidades enormes de Brucella y

pueden infectar fuertemente la cama y el suelo de los establos, el pienso y hasta en algunas

circunstancias de mala higiene y cuidado, el agua de bebida. A la infección de los establos puede

contribuir también la leche, pues, aproximadamente la mitad de las vacas infectadas, después de

23

abortar o parir, eliminan Brucella con la leche durante semanas, meses y años (Rodríguez y col.,

2005).

2.11 MODO DE TRANSMISIÓN.

La Brucella abortus puede transmitirse por vía oral, conjuntival, aérea, cutánea, venérea,

alimentos y potreros contaminados, agua contaminada, secreciones, fetos abortados, neonatos

infectados, materiales o equipos ginecológicos contaminados, etc (Cano y Camacho et al, 2010).

La propagación dentro del hato ocurre de manera horizontal o vertical:

2.11.1 Transmisión Horizontal.

Ocurre por contaminación directa, esto es por la libre convivencia entre animales sanos y

enfermos, dentro de la cual puede ocurrir la infección inter especie (Cano y Camacho et al,

2010).

2.11.2 Transmisión Vertical.

Según Cano y Camacho (2010), es provocada por la infección dentro del útero, situación que

constituye uno de los principales problemas en los planes de erradicación de esta enfermedad, ya

que si el producto se infecta dentro del primer tercio de gestación y no es abortado, los epítopos

de la bacteria serán reconocidos como propios por el sistema inmune provocando que las pruebas

diagnósticas convencionales sean incapaces de identificarlos, por lo que este individuo jugará el

papel de portador asintomático.

2.12 SIGNOS CLÍNICOS.

Se ha demostrado que el período de incubación es extremadamente variable e inversamente

proporcional al desarrollo del feto; Cuanto más adelantada está la preñez, más corto es el período

de incubación de la Brucella (Calle et al, 2009).

24

La especial afinidad que estas bacterias tienen por el endometrio grávido y por la placenta fetal

de bovinos hace que estas bacterias también proliferen extensamente en trofoblastos de la

placenta que rodean al feto, lo que condiciona que la principal manifestación clínica de la

infección aguda en los animales sea el aborto durante el último tercio de la gestación o el

nacimiento de animales prematuros poco viables (Rivers et al., 2006).

Se sabe que un porcentaje de las vacas y vaquillonas que se infectan durante la primera gestación

abortan; si la infección es reciente pueden abortar hasta el 40% de estos animales, mientras que si

los animales conviven con la infección durante 2 años este síntoma es menos evidente y las

gestaciones posteriores normalmente se llevan a término; Otros signos clínicos clásicos en las

hembras son la retención de placenta, metritis e infertilidad (OPS/OMS, 1986).

Las hembras no preñadas no muestran signos clínicos y cuando se infectan con anterioridad a la

concepción generalmente no abortan (Acha y Szyfres, 1992).

La infección en los terneros es de una duración limitada, en contraste con las vacas, en las cuales

la infección de las glándulas mamarias y los ganglios linfáticos asociados persiste durante

muchos años. El microorganismo puede ser excretado de manera intermitente en la leche (Rivers

et al, 2006).

En los machos, los órganos afectados incluyen las vesículas seminales, los testículos y epidídimo

produciendo inflamaciones. Cuando la enfermedad se presenta, uno o ambos testículos pueden

aumentar de tamaño, con disminución de la libido, lo que puede ocasionar una infertilidad

temporal o permanente, según Acha y Szyfres (2003), a veces puede haber una atrofia testicular

debido a adherencias y fibrosis o abscesos en testículos y epidídimo (Rivers et al., 2006).

Otro síntoma común es la presencia de higromas, particularmente en las articulaciones de las

patas, se puede manifestar artritis después de infecciones prolongadas; Los signos sistémicos

normalmente no aparecen en infecciones no complicadas, y las muertes son raras, salvo en el feto

y el recién nacido en general las hembras con infecciones pero no gestantes no presentan

síntomas (Soria y col., 2013)

25

2.13 ALTERACIONES ANATOMOPATOLÓGICOS.

Para Agurto y Fernández (2013), las vacas gestantes se encuentra placentitis necrosante y

endometritis ulcerativa, reacciones inflamatorias en tejidos fetales abortados, en rara ocasión se

realiza la necropsia en animales adultos; Los hallazgos en fetos incluyen: presencia de líquido

serohemorrágico, en cavidades y sub epidermis, así como bronconeumonía acompañada de

congestión, exudado fibrinoso e infiltración celular.

En machos las vesículas seminales y el epidídimo pueden estar engrosados con áreas de

inflamación intersticial crónica y necrosis del epitelio tubular de las vesículas. El epidídimo

presenta granulomas con infiltración de células linfoides, plasmáticas y epitelios que rodean a las

células gigantes, algunos granulomas se calcifican. Las membranas basales de muchos túbulos

quedan engrosadas con la evidencia ocasional de la supresión de espermatogénesis; En varios

órganos fetales se observan lesiones granulomatosas y necrosis focal, así como leptomeningitis

granulomatosa, la placenta presenta edema (Merck, 2007).

Según Cano y Camacho (2010), histológicamente la enfermedad se caracteriza por infiltración

leucocitaria, y en glándula mamaria observamos mastitis intersticial difusa leve con acumulación

de linfocitos y células plasmáticas.

2.14 DIAGNÓSTICO.

2.14.1 DIAGNÓSTICO CLÍNICO.

La existencia de un aborto infeccioso puede determinarse como la simple observación, pero como

puede ser causada por agentes distintos a Brucella abortus, no es posible estar seguros de que

este microorganismo sea la causa de la infección, si no se recurre a los exámenes bacteriológicos

y serológicos (Hagan, 1970).

26

2.14.2 DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO.

La identificación bacteriológica de Brucella es un complemento necesario de los métodos

inmunológicos, y resulta indispensable en lo que se refiere a la evaluación acertada del status

epidemiológico del ganado o de los grupos humanos la identificación de las Brucella spp, ha

progresado sobremanera gracias a la utilización de una serie de bacteriófagos estudiados en

diversos países; Ello ha permitido realizar identificaciones correctas incluso en laboratorios no

especializados, la información brindada por la tipificación o la puesta en evidencia de

determinadas características particulares permite conocer y rastrear el origen de la infección para

ello las descargas vaginales, el calostro, el feto y la placenta contienen una gran cantidad de

Brucella en los animales infectados que permite realizar certeramente estos diagnósticos (OIE,

2004).

2.14.3 DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO.

Resulta muy difícil el diagnóstico de la causa del aborto y la orquitis en un animal aislado o un

grupo de bovinos debido a la multiplicidad de las causas que pueden intervenir; para el

diagnóstico seguro, se deberá recurrir al laboratorio (Manrrique et al., 2004).

Para Samartino (2003), las lesiones causadas por la infección, como las localizadas más raras de

la enfermedad (inflamaciones de la conjuntiva, vainas tendinosas y bolsas mucosas) y las

inflamaciones de los testículos y epidídimos, únicamente pueden identificarse con exactitud

mediante un examen de laboratorio.

Entre las pruebas de Diagnóstico serológico que podemos realizar tenemos las siguientes:

Prueba de anillo en leche.

Prueba de Fijación de Complemento.

Prueba de Card Test (Rosa de Bengala).

PCR.

Prueba de Inmunodifusión Radial.

Prueba de ELISA (Samartino, 2003).

27

2.14 TRATAMIENTO.

En el tratamiento de esta enfermedad no se realiza terapéutica alguna: han fracasado el intento de

eliminar la infección, en los ensayos hasta el momento no se ha logrado resultados satisfactorios,

más bien, todos los esfuerzos deben estar orientados hacia un plan adecuado de control para la

eliminación de reactores positivos, vacunación preventiva con la Cepa 19 y medidas sanitarias

que rompan la cadena de abortos (Merck y Col, 2007).

2.15 CONTROL Y PROFILAXIS.

Entre otras medidas aconsejables figura la educación sanitaria tratando de llevar conocimiento al

público, principalmente en el medio rural, posibles focos de infección y las vías más frecuentes

de contagio; El personal que atiende los animales, debe ser capaz de reconocer un aborto

inminente, en un rebaño infectado, todas las pariciones deben considerarse como posibles fuentes

de infección y los productos no vivos deben ser incinerados, si es factible, o bien enterrarlos a

gran profundidad (OMS/OPS, 1986).

Como medida preventiva la higiene juega un papel importante, que incluye el aislamiento o

sacrificio de los animales infectados, la incineración de la placenta y fetos abortados; y la

desinfección de áreas o regiones contaminadas. Tienen importancia particular, que las vacas

infectadas sean aisladas durante el parto; Los animales nuevos al ingresar a la granja, deben ser

sometidos a las pruebas correspondientes (Suarez et al., 2001)

Al medio indemne estará prohibida, la compra de hembras adultas o en estado de gestación; el

ganado será renovado a partir de los nacimientos locales o de jóvenes terneras provenientes de

hatos sanos o de edades inferiores a un año, las vacas recién introducidas, que se encuentran en

estado de preñez avanzada, deberán mantenerse aisladas hasta después del parto o del aborto

(Acha et al, 1991).

28

El gluconato de cloromixina, es un antiséptico eficaz contra Br. Abortus, por lo que se

recomienda para el lavado de brazos y manos de personas, que atienden a los animales y de los

veterinarios que tienen contacto con materiales y tejidos contaminados; Para la desinfección de

instalaciones se recomienda la solución de cloramida al 5%, o soda cáustica al 8%— 10%. La

ropa se desinfecta en una Solución de 2% de cloramida o de una solución al 3% de jabón fenólico

y luego se hace el lavado (Blood, 1992; Achá, 1991).

La Brucelosis bovina puede controlarse con un programa de vacunación eficaz, o bien erradicar

los animales usando un programa de prueba y sacrificio; Para el control de la Brucelosis Bovina

en áreas enzóticas con alta prevalencia, se recomienda vacunar con cepa B19, disminuye

marcadamente la incidencia del aborto, pero no disminuye con ello el nivel de infección a una

tasa correspondiente, aún con el programa de vacunación generalizada habrá focos de infección

que se perpetúan indefinidamente la erradicación total es una de las alternativas de control

mediante la vacunación (Acha et al., 1992).

2.16 IMPORTANCIA EN LA SALUD PÚBLICA.

Según (Rodríguez et al., 2005) La brucelosis es una zoonosis y el ser humano adquiere la

enfermedad por contacto directo con un animal infectado por motivos profesionales o de ocio, o

por consumo de alimentos procedentes de dichos animales; El contagio de humano a humano es

muy infrecuente pero se ha demostrado por transfusión sanguínea, transplante de médula ósea y

sexual, la infección neonatal puede adquirirse por vía transplacentaria o durante el parto y

después del nacimiento por la leche materna.

Es una enfermedad sistémica que se manifiesta con expresividad muy variable, puede presentar

una clínica aguda o sintomatología, inespecífica y heterogénea: Ésta comienza al menos dos

semanas después del contagio y en ocasiones puede ser difícil su diagnóstico, los principales

hallazgos clínicos son fiebre, artralgias y hepatoesplenomegalia, las brucellas son capaces de

sobrevivir y multiplicarse en las células del sistema retículo endotelial, esto explica que la

enfermedad tienda a presentar una evolución clínica larga con posibles recaídas los casos

29

infantiles de brucelosis ocurren principalmente en la edad escolar, es muy infrecuente en niños de

menos de un año y en esta edad debemos pensar en otras vías de contagio: congénita, transfusión

de sangre, en el período neonatal o lactancia materna (OIE, 2004).

2.17 ESTUDIOS REALIZADOS SOBRE BRUCELOSIS BOVINA EN LA

PROVINCIA DE EL ORO.

Tabla 1. En la provincia de El Oro han sido múltiples las investigaciones encaminadas a

determinar el índice de prevalencia de la Brucelosis (Biblioteca FCA, 2014).

Autor Año Cantón Prevalencia

(%)

Tipo de Prueba

Alvarado 1959 Zaruma 3,45 Hunddleso

Valdiviezo 1969 Machala 9,88 Ring- test

Nieto 1980 Sta. Rosa –Arenillas 16,00 Ring- test

Mera y Brito 1982 Sta. Rosa 15,50 Card-test

Arias 1982 Guabo 11,83 Card-test

Benalcazar y Zumba 1982 Pasaje 16,54 Card-test

Román y Jaramillo 1983 Arenillas – Huaquillas 1,76 Card-test

Romero L. y Romero C. 1984 Piñas 1,10 Card-test

Ruiz y Tandazo 1984 Zaruma 2,10 Card-test

1984 Portovelo 0,00 Card-test

Suárez 1997 Pasaje 0,66 Card-test

Araujo y Velepucha 1988 Piñas 1,20 Card-test

Macas 1998 Balsas 0,38 Card-test

1998 Marcabelí 0,50 Card-test

Nagua 1998 Chilla 0,22 Card-test

Pelaez y Yamunaqué 1998 Sta Rosa 9,46 Card-test

Granda 1998 Atahualpa 0,25 Card-test

Orobio 1998 Guabo 2,97 Card-test

Hurtado y Reyes 1998 Arenillas 1,76 Card-test

30

Medina 1998 Arenillas 3,85 Card-test

Cajamarca y Salinas 1999 Zaruma 0,57 Card-test

1999 Portovelo 0,00 Card-test

Ramón 2005 Pasaje 0,6 Card-test

Estos resultados muestran la tendencia a la reducción del índice de prevalencia de la Brucelosis

bovina en la Provincia de el Oro.

Cabe recalcar que en el cantón Piñas los estudios realizados por los egresados de la Facultad de

Ciencias Agropecuarias en sus tesis de grado muestran los índice de prevalencia se hallaban

entre el 1.10 % (Romero L. y Romero C.1984) y el 1.20 % (Araujo y Velepucha 1988).

En la búsqueda de datos en la actualidad AGROCALIDAD en conversación con los doctores

encargados de sanidad animal, nos supo manifestar que no hay un programa directamente de ellos

para un estudio o verificación de la enfermedad de brucelosis ya que por el elevado costo los

ganaderos pequeños no están en las condiciones económicas para hacer un muestreo de sus

animales y así tener datos exactos de los ganaderos de todos los cantones de la provincia en todo

el país, solo los ganaderos de elevada proporción lechera y con condiciones económicas solo

ellos han realizado los estudios de las mismas y así han sido reconocidos y se les ha otorgado el

nombramiento de animales sanos y libres de brucelosis y tuberculosis por Agrocalidad y Magap

para así obtener un precio más elevado de sus animales y derivados de los mismos.

31

3. MATERIALES Y MÉTODOS.

3.1. UBICACIÓN Y HERRAMIENTAS DE LA INVESTIGACIÓN.

La presente investigación se realizó en el cantón Piñas, provincia El Oro (Figura 2) es una

provincia del Ecuador que forma parte de la Región Litoral. Tiene una extensión de 6.188 km² y

la superficie del cantón es de 616.90 Km2; Los límites del cantón, Piñas de la Provincia de El

Oro que se encuentra al suroeste de Ecuador. Limita con los cantones: Balsas, Marcabelí,

Arenillas, Sta. Rosa, Atahualpa, Zaruma, Portovelo pertenecientes a su misma provincia; y

además limita con la Provincia de Loja.

Sus coordenadas son las siguientes:

Coordenadas: 3° 40’ 41”S 79° 40’ 51”O

Latitud: 3° 40’ 41” S

Longitud: 79° 40’ 51” O

Altitud : 1014 msnm

Temperatura: 21.8 º C

Precipitación anual: 1,414 mm

Humedad relativa: 89.3%

Figura 2. Cantón Piñas, provincia de El Oro. (http://es.wikipedia.org/)

32

3.2 MATERIALES.

Antígeno Rosa de Bengala

Aglutinoscopio

Alcohol 90°

Aplicadores de vidrio

Agujas vacutainer

Algodón

Bolígrafos

Botas de caucho.

Centrífuga

Computadora

Cámara fotográfica

Gradillas

Guantes

Hojas de registro

Jeringas de 5 ml

Mandil

Pipetas de 10 ml

Tubos al vacío

Tubos vacutainer

Tubos capilares de 0,03 ml

Tablero

Toallas

3.3 EQUIPOS.

Refrigeradora.

Cooler o hielera.

Reloj

33

3.4 POBLACIÓN Y MUESTRA.

Para la presente investigación se consideró que la población bovina en el cantón Piñas es de

22.592 animales, según datos actualizados de AGROCALIDAD, para lo cual se estimó realizar la

investigación en un total de 378 animales (equivalente al 5% de la población) mediante la

fórmula:

𝑁𝑀 =𝑃. 𝑄. 𝑍2. 𝑁

(𝑁 − 1)𝑒2 + 𝑃. 𝑄. 𝑍2

𝑁𝑀 =(0,50)(0,50)(1,96)2(22592)

(22500 − 1)(0,05)2 + (0,50)(0,50)(1,96)2

𝑁𝑀 =(0,25)(3,84)(22592)

(22591)(0,0025) + (0,25)(3,84)

𝑁𝑀 =21688

56,47 + 0,96

𝑁𝑀 =21688

57,43

𝑁𝑀 = 377,64

NM = 378 animales.

Independientemente a que el cálculo de la muestra arroja un total de 378 animales, con el

objetivo de aumentar el margen de confiabilidad de los resultados, decidimos incrementa a 500 la

cantidad de animales diagnosticados.

3.5 METODOLOGÍA.

En la presente investigación se empleó la prueba de RB que permitiría identificar

individualmente a los animales enfermos; todas las pruebas fueron realizadas según protocolos

internacionales (OIE, 1996). De identificarse animal/es positivos, la finca debería ser declarada

positiva e incorporada al programa de control y erradicación de AGROCALIDAD. En el caso de

animales positivos se recomendaría su sacrificio sanitario.

34

El presente proyecto, de carácter no investigativo, aplicado, concreto y detallado, se desarrolló en

base a una metodología que incluyó la toma de muestras en fincas ubicadas en los diferentes

puntos cardinales del Cantón: norte, sur, este, oeste y en el centro tomándose una representación

porcentual en cada uno para así cubrir todas las parroquias del mismo. Los animales y la finca se

registraban en su respectivo modelo de control (ANEXO 1).

3.5.1 TOMA DE MUESTRAS.

En la toma de muestras, se consideraron las siguientes recomendaciones:

El material que se utilizó en la extracción de sangre (vacutainer) y envío de la muestra

(tubos, jeringas, etc.) debe estar seco y limpio; los restos de humedad y partículas de

suciedad provocan hemólisis; Para la separación del suero la muestra de sangre no debe

congelarse para evitar su hemolisis, lo cual no es recomendable que suceda (ANEXO 2).

Las muestras de sangre se extrajeron en tubos al vació sin anticoagulantes, por punción de

la arteria coccígea media de animales identificados (ANEXO 3).

Se identificaron los tubos rotulando siempre con claridad, escribiendo con marcador

indeleble y no con lápiz.

Inmediatamente después de haber obtenido la muestra de sangre, se colocó el tubo en

plano inclinado para aumentar la superficie de coagulación y formar el “pico de

flauta” que permitió la separación más rápida del suero. Los tubos fueron colocados a la

sombra, en un lugar fijo no sometido a temperaturas extremas ni movimientos bruscos.

Se trasvasó el suero con pipeta o por decantación en las mejores condiciones de seguridad

e higiene posible evitando la hemólisis.

Se llevaron al laboratorio cantidades representativas de suero, para comprobación de

mismas y se adjunta la hoja de datos del predio (ANEXO 6).

No se transportaron muestras de sangre en medios de transporte públicos.

35

3.5.2 PROCESAMIENTO DE LA MUESTRAS.

El procedimiento para esta prueba es el siguiente:

Mantener a temperatura ambiente el antígeno RB y las muestras de suero.

Se utilizó un tubo capilar de 0,03 ml y con el auxilio de un bulbo de caucho, se tomará la

muestra de suero con la precaución de no transferir células sanguíneas. Se utiliza siempre

un tubo capilar para cada muestra (ANEXO 8).

Se depositó la muestra de suero en forma de lágrima en la placa de diagnóstico de Brewer.

Se procedió a aplicar dos gotas (0,03 ml) de la suspensión del antígeno sostenido en

forma vertical en una área adyacente al suero no sobre el suero. Antes de su aplicación, el

frasco con el antígeno debe ser agitado para su homogenización (ANEXO 9).

Se mezcló el suero con antígeno dispersando el líquido en el área completa del círculo.

Se debe utilizar un agitador para cada muestra.

Marcar el tiempo por 5 minutos.

Levantar la tarjeta y realizar movimientos rotatorios de adelante hacia atrás por el lapso

de 10 a 12 segundos, para su homogenización.

La lectura de la tarjeta, en estado húmedo, se realizó a los 5 minutos tomados a partir de

que se comenzó a mezclar ya que después de este tiempo la lectura no sería válida. Este es

un tiempo límite óptimo en el que se da un espacio para la observación de ciertas

aglutininas que se revelan lentamente y que de otra manera se pueden omitir, además de

que se pueden presentar reacciones no específicas (ANEXO 10).

La lectura se realizó haciendo incidir una luz directa en la tarjeta, para una mayor claridad

del resultado de la lectura y el diagnóstico se informa como positivo o negativo en

función a que en las reacciones positivas se presentan grumos de aglutinación que pueden

ser grandes o pequeños mientras que en las negativas estos están ausentes ( ANEXO 12).

36

El 10% de las muestras fueron refrigeradas para su transporte al Laboratorio de Microbiología de

la Facultad de Ciencias Agropecuarias en donde se les realizó prueba de comprobación con

empleo de otro reactivo Rosa de Bengala bajo la supervisión del Dr. Luis Hurtado, profesor de la

Carrera de Medicina Veterinaria y Zootecnia (ANEXO 11).

3. 𝟔. 𝟑 ANÁLISIS ESTADÍSTICO.

Para realizar el análisis estadístico se utilizó una estadística descriptiva de histogramas, cuadros y

figuras, el índice de prevalencia se calculó mediante el empleo de la siguiente fórmula:

Índice de Prevalencia =Número de animales positivos

Número de animales investigados∗ 100

3.6.3.1 VARIABLES.

Edad: Hembras de 6 meses en adelante y machos de 2 años y medio en adelante.

Sexo: Se toman las muestras tanto a hembras como a machos reproductores.

Raza: Todas las razas existentes en la zona.

37

4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN.

4.1. INDICE DE PREVALENCIA DE BRUCELOSIS BOVINA EN EL

CANTÓN PIÑAS.

El presente trabajo de tesis, se lo realizo mediante un muestreo a cinco sectores del Cantón Piñas

(Figura 3): Norte, Sur, Este, Oeste y Centro, de esta manera tratamos de representar

significativamente todo el territorio cantonal según la distribución de la población bovina. De los

500 animales muestreados (Tabla 2), todos resultaron negativos a la prueba Card-test o Rosa de

Bengala, para un índice de prevalencia del 0%. Estos resultados indican un mejor manejo

sanitario y zootécnico de los ganaderos lo que ha permitido avances importantes en la producción

bovina aunque debemos reconocer el desconocimiento de esta enfermedad por la mayoría de los

ganaderos.

Figura 3. Ubicación de los sectores muestreadas en el Cantón.

38

TABLA 2. Total de animales muestreados por punto cardinal.

En vista a que nuestros resultados arrojaron un índice de prevalencia del 0%, se determinó

realizar pruebas de comprobación (Card-Test) al 10 % de las muestras en forma aleatoria, al azar,

en el Laboratorio de Microbiología de la Facultad de Ciencias Agropecuarias ratificándose la

negatividad de las mismas (ANEXOS 10 – 11 – 12).

De acuerdo con los resultados negativos ante la prueba de diagnóstico Card-Test en los animales

muestreados en el cantón Piñas, elaboramos las siguientes ilustraciones relacionadas con las

variables lugar de procedencia o sectores muestreados (Tabla 2), siendo el sector Sur el de mayor

población bovina en el muestreo con 140 animales, seguido del sector Este con 120.

Analizando la base muestreada del presente trabajo, fueron los sectores: Sur representando un

28% de la población estudiada, seguido del sector Este con un 24% (Gráfico 1)

Los resultados del presente trabajo, 0 % de índice de prevalencia para el cantón Piñas, muestran

una evolución epidemiológica favorable de la enfermedad si tomamos como referencia los

Sector

Número de

animales

Porcentaje del

total

Sur 140 28 %

Centro 60 12%

Oeste 100 20 %

Este 120 24 %

Norte 80 16 %

TOTAL 500 100%

39

resultados de Romero y Romero (1984), que reportaron un índice de prevalencia para este cantón

del 1,10% y lo reportado por Araujo y Velepucha (1988) que obtuvieron el 1,20%.

GRAFICO 1. Indice de prevalencia para el cantón Piñas

4.2. VARIABLE EDAD.

Como puede observarse a continuación con relación con la variable edad (Tabla 3), el grupo de

mayor participación fueron los animales adultos (300 bovinos), seguido de los jóvenes entre 1 y 2

años de edad (150 bovinos) y el último grupo animales muy jóvenes de 6 a 11 meses (50

bovinos).

Así mismo en expresiones porcentuales (Gráfico 2), fueron los bovinos Adultos que marcaron la

mayoría con un 60%, mientras que los jóvenes entre 1 a 2 años el 30%.

28,00%

12,00%20,00%

24,00%16,00%

100%

SUR CENTRO OESTE ESTE NORTE TOTAL

PORCENTAJE

40

Tabla 3. Clasificación por edad de los animales muestreados.

GRAFICO 2. Variable edad

10,00%

30,00%

60%

100%

0,00%

20,00%

40,00%

60,00%

80,00%

100,00%

120,00%

6 a 11 meses 1 a 2 años Adultos Total

Porcentajes

Edad Número de Animales Porcentaje

6 a 11 meses 50 10 %

1 a 2 años 150 30 %

Adultos 300 60 %

Total 500 100 %

41

4.3. VARIABLE SEXO.

Según el muestreo de los animales, analizando la variable sexo (Tabla 4), fueron las hembras las

que predominaron participando 450 animales y solo 50 bovinos machos.

Y de acuerdo al porcentaje (Gráfico 3) las hembras predominaron en su participación con un

90% frente al 10% de los machos.

Tabla 4. Variable Sexo.

GRAFICO 3. Variable Sexo.

90%

10%

100%

HEMBRAS MACHOS TOTAL

Porcentaje

Sexo Número de Animales Porcentaje

Hembras 450 90 %

Machos 50 10 %

Total 500 100%

42

4.4. VARIABLE RAZA.

En lo referente a la variable raza, (Tabla 5), los bovinos Mestizos, tuvieron mayor participación

con un total de 360 animales, seguido la raza Holstein y en tercer lugar tenemos la raza Brahman.

En valores porcentuales los bovinos Mestizos representaron un 72%, sobre la raza Holstein con

un 25% y la raza Brahman con el 3% (Gráfico4).

Razas Número de Animales Porcentaje

Brahman 15 3 %

Holstein 125 25 %

Mestizas 360 72%

Total 500 100%

Tabla 5. Razas de los animales muestreados.

GRAFICO 4. Variable raza

3,00%

25,00%

72,00%

100%

0,00%

20,00%

40,00%

60,00%

80,00%

100,00%

120,00%

Brahman Holstein Mestizas Total

Porcentaje

43

4.5. PRUEBAS DE COMPROBACIÓN.

Tomando en consideración la negatividad de los resultados, se decidió a realizar pruebas de

comprobación al 10% de las muestras seleccionadas en forma aleatoria (50) en el Laboratorio de

Microbiología de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Técnica de Machala

bajo la supervisión del Dr. Luis Hurtado Flores; estas pruebas confirmaron los resultados

negativos del trabajo de campo de esta investigación (ANEXOS 10 – 11 – 12).

44

5. CONCLUSIONES.

El índice de prevalencia de la Brucelosis bovina en el cantón Piñas es del 0%,

Los resultados no evidenciaron relación con las variables edad, raza y sexo teniendo como

base de muestra promedio, animales mestizos, del grupo adultos y la mayoría hembras

reproductoras.

45

6. RECOMENDACIONES.

Consolidar la labor de control y manejo sanitario por parte de los ganaderos en sus hatos

productivos para la correcta erradicación de esta enfermedad.

Respetar los planes de vacunación bovina establecido por AGROCALIDAD, donde

consta la aplicación de la vacuna Cepa 19 contra la Brucelosis Bovina en animales entre 3

a 7 meses de edad, en dosis única de 5ml por vía subcutánea y respetar las normas de

movilidad del ganado.

Ante problemas reproductivos como abortos e infertilidad, realizar pruebas de diagnóstico

de Brucelosis Bovina para garantizar la estabilidad sanitaria del hato y de los productos

que se ofertan a la población (carne, leche y sus derivados).

46

7. RESUMEN

Con el objetivo de determinar el índice de prevalencia de la Brucelosis bovina en el cantón Piñas,

de la Provincia de El Oro, se procedió a realizar la prueba de Rosa de Bengala (Card-Test) a 500

animales de diferentes edades, sexos y razas de 25 ganaderías de pequeños productores,

principalmente de leche. La base de muestra la constituyeron principalmente animales adultos,

hembras y de la raza Holstein. Los resultados muestran un 0% de índice de prevalencia en la

actualidad para la enfermedad lo que refleja una evolución positiva en relación con reportes

anteriores.

PALABRAS CLAVES

Índice de prevalencia – Brucelosis Bovina – Prueba Rosa de Bengala (CARD TEST) –

Cantón Piñas – Provincia de El Oro.

47

8. SUMMARY

In order to determine the prevalence rate of bovine brucellosis in canton Piñas de la Provincia de

el Oro, perform proceeded to test Rose Bengal (Card-Test) to 500 animals of different ages, sex

and races from 25 smallholder farms, especially dairy. The base shows constituted mainly adult

animals of the Holstein breed and females. The results show a 0% prevalence rate for the

currently disease reflecting a positive trend compared with previous reports.

KEYWORDS

Prevalence rate - Bovine Brucellosis - Rose Bengal test (CARD TEST) -Piñas Canton

- Province of El Oro.

48

9. BIBLIOGRAFÍA.

ACHA P. y B. SZYFRES. 1992. Zoonosis y Enfermedades Transmisibles comunes al

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Central del Ecuador.

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52

10. ANEXOS.

ANEXO 1. Modelo control.

ANEXO 2: Materiales

53

ANEXO 3: Recolección de muestras (punción y colocación del tubo).

ANEXO 4: Recolección de muestras (extracción de sangre).

54

ANEXO 5: Recolección de muestras (muestras recolectadas).

ANEXO 6: Análisis de muestras.

55

ANEXO 7: Muestra coagulada con presencia de suero y antígeno rosa de

bengala

ANEXO 8: Colocación del suero en cada una de las muestras y el antígeno en

el aglutinoscopio.

56

ANEXO 9: Lectura negativa de las muestras homogenizadas en el

aglutinoscopio

57

ANEXO 10: Comprobación de las muestras

ANEXO 11: Lectura de las muestra

58

ANEXO 12: Lectura negativa de las muestras