Trabajo Inextenso Lima

8/17/2019 Trabajo Inextenso Lima

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Efecto del Sorbato de Potasio A diferentes concentraciones y tiempo de exposición sobre el ciclocelular y el material genético en meristemos radiculares de Allium cepa L. “Cebolla”

Effect of Potassium Sorbate at different concentrations and exposure time on the cell cycle and thegenetic material in root meristems of Allium cepa L “onion”

Joselyne Quispe a, José Saldaña a, Tony Verde a, Shirley Valderrama a

.a Universidad Nacional de Trujillo

Resumen

Con el propósio de deerminar el e!eco del Sor"ao de #oasio so"re el ciclo celular en merisemosradiculares de Allium cepa L. $ce"olla% se esa"lecieron res &rupos e'perimenales (ue se e'pusieron a lassoluciones de Sor"ao de #oasio en concenraciones de ).*, + y &-/ por 0, 1 y 2 horas cada una y un&rupo conrol. ue&o se reali3ó la respeciva coloración en 4rce5na acéica al 6 de acuerdo a la écnica deTjio y evan, o"serv7ndose con el microscopio compueso un oal de +*)) células merisem7icas en cadauno de los raamienos. os resulados aplicando raamieno después de 2 horas de e'posición a laconcenración de &- mosraron una disminución del 5ndice mióico de ++.0 6, mienras (ue seincremenó el 5ndice pro!7sico en 8*.*1 6. Se produjeron am"ién aleraciones como rupurascromosómicas, puenes ana!7sicos y células "inucleadas. as prue"as y an7lisis de varian3a, mosrarondi!erencias si&ni!icaivas enre los di!erenes raamienos, con!irmado mediane la prue"a de comparaciónm9liple de promedios de :uncan. Se evidencia un pro"a"le e!eco &enoó'ico en el maerial &enéico por elSor"ao de #oasio y una aleración en el ciclo celular de los merisemos de A. cepa L./ as5 mismo, secomprue"a la !unción de "iosensor de A. cepa L. en el esudio de susancias (ue puedan a!ecar el ciclocelular.

Descriptores: Allium cepa, Sor"ao de #oasio, ;ndice upuras cromosómicas, Células "inucleadas.

Abstract

?n order o deermine he e!!ec o! #oassium Sor"ae on he cell cycle in roo merisems o! Allium cepa .@onion@ se hree e'perimenal &roups Aere e'posed o soluions o! #oassium Sor"ae a concenraions o! ).*, + and & - , !or 0, 1 and 2 hours each and a conrol &roup. aer he respecive color in 6 =ceic orceinaccordin& o he echni(ue o! Tjio and evan, o"served Aih he compound microscope a oal o! +*))merisemaic cells in each o! he reamens. The appropriae reamen resuls a!er 2 hours o! e'posure o heconcenraion o! & - shoAed a decrease in mioic inde' o! ++.06, Ahile i increased he rae a 8*.*16prophasic inde'. There Aere also aleraions as chromosome "reaBs, anaphasic "rid&es and "inucleaed cells.The ess and analysis o! variance shoAed si&ni!ican di!!erences "eAeen he di!!eren reamens, ascon!irmed "y muliple comparison es o! :uncan avera&es. ? shoAs a pro"a"le &enoo'ic e!!ec in he &eneicmaerial "y #oassium Sor"ae and an aleraion in he cell cycle o! merisems o! A. cepa L., liBeAise, is !ound"iosensor !uncion o! A. cepa L. in he sudy o! su"sances ha may a!!ec he cell cycle.

Keywords: Allium cepa, #oassium Sor"ae,


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conservane ideal para varios producosalimenicios EFEGF.

Dl Sor"ao de #oasio, deiene el crecimienomicro"iano al inhi"ir a las deshidro&enasasinvolucradas en la o'idación de 7cidos &rasos/ocasionando la acumulación de 7cidos &rasos Hinsaurados (ue son producos inermedios en elmea"olismo lip5dico EIFE*F. 4ro mecanismo deacción esa asociado a los do"les enlaces (ue

posee, los cuales iner!ieren con la acividadcaal5ica de las en3imas responsa"les delcrecimieno micro"iano conviriéndose de esamanera en un e!ica3 !un&icida E0FE1F.

Dl conservane es ipi!icado como@&eneralmene reconocido como se&uro@ para lasalud K>=SL/ sin em"ar&o, dado su car7cer ari!icial, pro"a"lemene ineracciona (u5micamenecon oros componenes presenes en los alimenosE2F, as5 en la conservación de las carnesprocesadas, donde es ha"iual el uso de sor"aoscomo a&ene animicóico y de nirios conraClostridium botulinum, se ha compro"ado (ue aldi!undir al inerior del alimeno, reacciona con losnirios &enerando 7cido eilnirólico DN=L, deposi"le e!eco cancer5&eno en el hom"re E2FE8F.

Ds ese senido, es de inerés invesi&ar ele!eco del Sor"ao de #oasio en la división celular de maerial "ioló&ico sensi"le como el ejidomerisem7ico de los 7pices de las raicillas de Allium cepa L., el cual por su simplicidad demanejo, el &ran amaño de sus células y por larespuesa de su maerial &enéico a la presencia

de cioó'icos poenciales es usado en el esudiode la din7mica celular, consiuyendo un sisema invitro ideal para esudiar el e!eco de los producos(u5micos (ue puedan a!ecar el ciclo celular E+)F.#or eso se uili3a como "iomonior para deerminar los di!erenes e!ecos ocasionados por (u5micos E++FE+FE+GF.

Cuando las células del ejido merisemaicode A. cepa L. se encuenran en e(uili"rioproli!eraivo, la duración de cada uno de losper5odos del ciclo celular permanece consane/ deesa !orma, el n9mero de células (ue es7n en una

!ase deerminada es am"ién consane yproporcional a la duración H en iempo H de lamisma/ pero cuando se lleva a ca"o en presenciade susancias ó'icas, la división celular de losmerisemos radiculares puede inhi"irse, ya seareardando el proceso de miosis o desruyendo lascélulas +*. Dse ipo de aleraciones &eneralmeneimpide el crecimieno normal de la ra53 y por ano,su elon&ación E+IF.

Dl ciclo celular es re&ulado por la ineraccióndel complejo ciclina H Binasa dependiene de ciclinaC:ML (ue implica adem7s procesos de

ranscripción y !ormación de proe5nas (ueinervienen direcamene como elemenosre&ulaorios o inerac9an con oros a&enes medioam"ienales para re&ular cada uno de los evenos(ue !orman pare del proceso en su conjuno.

a presencia de susancias animióicas,cioó'icas y &enoó'icas pueden inducir aleraciones cromosómicas (ue son el resulado dede!iciencias en los mecanismos de conrol celular yde reparación en el =:N, (ue se pueden e'presar a lo lar&o del ciclo celular y provocar una &ranvariedad de e!ecos so"re el maerial &enéico delas células e'puesas a a&enes !5sico o (u5micos/por lo (ue, se considera (ue el iempo de

e'posición es un !acor imporane en la inducciónde a"erraciones cromosómicas. Si las aleracionesno a!ecan la vida de los or&anismos, es posi"le(ue los individuos (ue se encuenran e'puesas aales a&enes por moivos de ra"ajo u ocupación,puedan presenar en!ermedades &enéicas,aleraciones en sus células &erminales con elries&o de ser ransmiidas a la descendencia E+GFE+*FE+0FE+1F.

= odo eso, al ensayar en A. cepa L. el e!ecode al&unos a&enes (u5micos y !5sicos, (ue puedencausar daño a nivel de su ciclo celular, se podr5acole&ir (ue dichos a&enes endr5an el poencial de&enerar un e!eco ó'ico en los procesos dedivisión celular en células eucarioas de orosindividuos, de"ido a la universalidad del códi&o&enéico E+2F.

#or lo ano, el o"jeivo del presene esudio!ue el de deerminar el e!eco del Sor"ao de#oasio a ).* &-, + &- y &- y iempos dee'posición de 0, 1 y 2 horas so"re el 5ndicemióico, 5ndice de !ases y maerial &enéico enmerisemos radiculares de A. cepa L. var. >oja

=re(uipeña.E!PER"E#$A%Selección y preparación del material biológico&

acores de e'clusiónO Solamene seseleccionaron los "ul"os en !orma de perilla, color rojo, consisencia dura, peso enre 0) y 1)&. y sinma&ulladuras ni podredum"res.

:e dicho maerial se esco&ieronaleaoriamene + "ul"os de ce"olla, a los cualesse les separaron las ca7!ilas secas y se limpiaroncuidadosamene el disco radicular eliminando

odas las raicillas secas sin dañar a dicho disco.

Acondicionamiento del material biológico yselección de bulbos E+8FE)F.

?mplemenación de los sisemasO os "ul"osde A. cepa L., se colocaron en vasos descara"lesde +)) ml con a&ua poa"le procurando manener sumer&idos solo el disco radicular/ los sisemas!ueron permanenemene aireados con una "om"aa ra3ón de +) P ) ml. - min. Dl a&ua !ue renovadadiariamene i&. +L.


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Selección de "ul"osO :espués de 1 horas deemer&encia de las raicillas, se seleccionaron los"ul"os con mayor canidad de raicillas de lon&iudpromedio de a G cm., a !in de ase&urar la

presencia de células con una cinéica mióicaconsane.

'ise(o experimental para la Exposición de lasraicillas E+F.

os "ul"os seleccionados, !ueron a&ruparonpor elección al a3ar para con!ormar los di!erenesraamienos se&9n concenraciones y iempos dee'posición. Dl &rupo conrol se manuvo en a&uapoa"le y los oros !ueron e'pueso a solucionesacuosas de Sor"ao de #oasio en concenracionesde ).*, + y &-/ por 0, 1 y 2 horas, el diseño !ueoalmene aleaori3ado. Se reali3aron res

repeiciones por raamieno, considerando (uecada "ul"o de ce"olla represena a un sisemae'perimenal y (ue cada raicilla es una unidade'perimenal Ta"la +L. os indicadores del e!ecoocasionado por el Sor"ao de #oasio sonOvariaciones en los porcenajes de 5ndices mióicos,de !ases y presencia de aleraciones en el maerial&enéico/ ales e!ecos !ueron comparados con elraamieno conrol.

$abla )& 'ise(o experimental para laexposición de las raicillas

$iempoConcentración

A* A) A+

,* =) ) =+ ) = ),) =) + =+ + = +,+ =) =+ = ,- =) G =+ G = G

A*. D'posición a 0 horas ,* . =&ua poa"leA). D'posición a 1 horas ,). Concenración de ).* &-A+. D'posición a 2 horas ,+. Concenración de + &-

,-. Concenración de &-

/btención de las raicillas:e acuerdo al sisema de iempo e'posición

creciene después de las seis horas de e'posiciónse seccionaron al a3ar dos raicillas de cada "ul"o,las cuales previamene se lavaron con a&ua

poa"le, para raspasarla a la solución !ijadora deCarnoys.

ue&o los "ul"os !ueron reornados a cadauna de sus respecivas soluciones para reali3ar elmismo procedimieno a las siee y ocho horas dee'posición si&uienes.

Coloración0 /btención y /bser1ación depreparados citológicos EFEGF.

as ra5ces !ueron reiradas de la solución!ijadora de Carnoys, y se lavaron res veces ena&ua poa"le para reirar los resos del !ijador.ue&o se procedió a secarlas con papel oalla paraeliminar los resos de a&ua de la super!icie.#oseriormene !ueron deposiadas so"re una lunade reloj para su respeciva coloración en 4rce5naacéica al 6 de acuerdo a la écnica r7pida deTjio y evan.

inalmene las células !ueron o"servadas enel microscopio compueso a I)) y +)))'.

An2lisis citológico y e1aluación del efecto EFEGF

Se hi3o un recueno de +*)) célulasmerisem7icas de cada uno de los raamienos,para esa"lecer el 5ndice mióico y de !ases, se&9nlas !ormulas correspondienes y la presencia de!i&uras mióicas anormales.

Para determinar el indice mitotico

100 x NTC

NCM IM =

?


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=l evaluar los ;ndices ?h+I.I0±

).)*0

I2.1)±).)G0

+I.1I±).)*)

+).)0±).)1

0.*)±).)1

$+. *&@g=% >?h

+G.81±).)02

*G.)+±).)G+

+G.G±).)10

8.0)± ).)I*

I.)1±).)1+

$-. )g=% > ?h+G.I8±

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0*.)G±).+)*

++.11±).)82

2.*2± ).)I+

+I.0±).)2*

$. +g=% > ?h++.18±

).)G2

08.1*±).)*

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8.82± ).)G

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+G.I0±).)I)

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++.18±).)8G

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).)1)

2I.81±).+1G

*.2± ).)2G

G.*G± ).)1)

1.G± ).+)I

$. +g=% > Bh++.*1±

).)1)

21.I)±).)10

I.I8± ).)8+

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+.+± ).)I*

$)+. +g=% >h

++.0±).+8

8*.*1±).)II

.)0± ).)12

+.G± ).)10

).8± ).)G+

$abla +& $ratamientos y Promedios de los 8ndice"itótico 9:; e 8ndice de 3ases 9:; en meristemos

radiculares de Allium cepa L.


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a disminución en el ?=, esar5a ocurriendode"ido a (ue el aumeno del n9mero de células enpro!ase &eneró una disminución en mea!ase y por ende una disminución en ana!ase. #or oro lado, elSor"ao de #oasio acuar5a inhi"iendo la acividadcaal5ica de las cohesinas,


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Dl Sor"ao de #oasio alera el maerial&enéico en células merisem7icas de A. cepa L.ocasionando, unión de cromosomas !ra&menados,puenes ana!7sicos y !ormación de células"inucleadas.

AgradecimientoDn &eneral (uisiera a&radecer a odas y

cada una de las personas (ue han vivido conmi&o

la reali3ación de ese ra"ajo de invesi&ación, y(ue no necesio nom"rar por(ue ano ellas comoyo sa"emos (ue desde los m7s pro!undo de micora3ón les a&rade3co el ha"erme "rindado odo elapoyo, cola"oración, 7nimo y so"re odo cariño yamisad.

RE3ERE#CAS ,,%/RA3CAS

E+F No"oa, C #ress, ?nc./ oca >aon/ US=/ +828.EGF Valle Ve&a, #edro/ ucas lorenino, ernardo/ To'icolo&5a de =limenos/


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E*F Spie&el, ./ Teor5a y #ro"lema de #ro"a"ilidades y Dsad5sicas/ Serie de compendios ShaAn/Ddi../ Kon37les lonop ./ ?nducción de puenes cromosómicos permanenes enmerisemos de Allium cepa/ >D?4/ +88*/ +* +y LO8H+1p.

E++F elran, >./ Kon3ales, . D!eco cioó'ico del her"icida ,I :icloro!eno'iaceico so"re merisemos de Allium cepa y Vicia FabaF >e"iol/ +881/ +1+ y LO +* P +p.

E+F Kon37les, C. J./ D!eco anirreparador de la ca!e5na so"re el daño cromosómico inducido por ,I P:sal amina en merisemos de Allium cepa L./ Tesis de "achiller en Ciencias iolo&icas/ UniversidadNacional de Trujillo, #er9./ +88I.

E+GF 4iniano Karc5a, o"les Casillo, ./ uj7n Vel7s(ue3, ev. Salud de los Tra"ajadores/ Uru&uay/ ))0/+I +L.

E+2F Silva, J./ Drdmann ./ enri(ues, J./ Kenéica o'icoló&ica/ #oro =le&re/ #rimera edición/ Ddiorial

=lcance/ ))G/ I p.E+8F =ndrioli, N./ Xul!!, =./


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EGF es/ )))/ 28O GG0H GIp.

EGIF Casro, >./ >am5re3, V./ Cuenca, #./ ./ Ciolo&ia e isolo&5a Ve&eal y =nimal/ Tercera Ddicion/ mail. yoselyn+0))Zhomail.com
mailto:[email protected]:[email protected]

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