Tinciones Especiales Para Histologia

7/25/2019 Tinciones Especiales Para Histologia

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TCNICA DELPAS (cido

Perydico Schiff

La tcnica de Schiff,es una tincin quese usa comnmente

en Histoqumica

Utiliza PAS, cidoperydico de Schiff,

es un coloranteincoloro pero que setorna rojo estable al

contacto con losgrupos aldehdos.

TECNICA

1 Desparafinar e hidratar (xilol y decrecientesalcoholes)

2 cido perydico 0.5 % 5 min.

3 Lavar en agua .

4 Reactivo de Schiff 15- 30 min.

5 Aclarar en 3 baos de agua sulfurosa 2 min.

6 Lavar en agua corriente.

7 Deshidratar, aclarar y montaje


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TINCIN DE GRAMMODIFICADA

BROWN- BRENN

Es un tipo de tincin que se utilizapara demostrar gram-negativas y

gram-positivos en el tejido

reactivos que seutiliza

Cristal Violeta al 1%Lugol

AcetonaFucsina bsica al 0,25cido Pcrico Acetona

Tecnica

Desparafinar e hidratar al agua destilada

Tincin de Cristal Violeta por 1 minuto

Lavar en agua corriente

Aplicar lugol por 1 minuto

Lavar agua corriente

Decolorar con alcohol-Acetona (saca el e xceso del coloranteCristal Violeta)

Lavar en agua corriente

Tincin con Fucsina bsica durante 3 minutos.

Lavar en agua corriente, y secar levemente la muestra.

Pasar rpidamente por 2 baos de acetona.

Pasar a la mezcla de cido Pcrico solucin acetona al 0,1%hasta que aparezca un color rosado-amarillo en la muestra.

Pasar por 2 cambios de acetona


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Desparafinar e hidratarlos cortes

cido peridico 5%, 10min

Lavar con aguadestilada

Fucsina fenicada, 15 minDecolorar en alcoholcido al 50%

Lavar con aguadestilada

Hematoxilina, 10 minCarbonato de litio,

azulamientoDeshidratar, aclarar ymontar preparaciones

ResultadosBAAR: rojo. Ncleos:

azul semiamarillo.

TECNICA

TINCIN DEZIEHL-

NEELSEN

es una tcnica de tincindiferencial rpida y

econmica, usada parala identificacin de

bacterias cido-alcoholresistentes (BAAR) en

cortes de tejido enparafina.

Fucsina fenicada:0,5 g .fucsina bsica

50 ml agua destilada5 ml etanol absoluto

28,5 g.. cristales defenol derretidos

Alcohol cido 1%:AcidoClorhdrico1ml.Alcohol

ABS99ml.Hematoxilina Acido

peridico al 5 %


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TCNICA DE GRIMELIUS

Tcnica:1.-Desparafinar

hidratar.2.-Solucin de Plata

58 a 60C3Hrs.3.-Lavar en Agua.

4.-Solucin deHidroquinona 40 a 45C1:30Hrs.

5.-Lavar en Agua.6.-Deshidratar, Aclarar

y Montar.

Resultados:Grnulos Argirofilos

(formaciones deproteina ) pardo,

Dorado o Negros..

Impregnacin:Solucin de Plata 1%:

Nitrato de Plata al 1 %...4ml.Buffer de Acetato(0.2mol)10ml.

Agua Bidestilada86ml

Reduccin:

Solucin de H idroquinona.

Hidroquinona1gr. Sulfatode Sodio5gr. AguaBidestilada100ml.

Se utilizanprincipalmente para la

identificacin de lasclulas neuroendocrinas ysus tumores, tambin parala demostracin de fibrasde reticulina, melanina y

calcio
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TECNICADEL ROJO

CONGO

Es considerada como latcnica ms fiable y

prctica para detectaramiloide y tambin se usapara teir preparaciones

microscpicas,especialmente en tinciones

para el citoplasma ylos eritrocitos

Resultados: Elamiloide se tieen rojo claro, y

brilla con luzpolarizada

TECNICA

1.- Cortes por congelacin 10micras.

2.- Colocarlos en solucin de Rojocongo al 1% en agua,- 30 min.

3.- Poner en carbonato de Litio (asaturacin en agua)---15 seg.4.- Lavar en alcohol de 80, hasta

que no arrastre mas colorante.5.- Lavar en agua corriente 15 min.

6.- Teir con hematoxilina.7.- Lavar en agua, deshidratar,

aclarar y montar.


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XILENO: 2x10minALCOHOL AL 100%: 2x5minALCOHOL AL 96%: 2x5min

LAVAR CON AGUA CORRIENTE

PERMANGANATO POTASICO AL 1%: 2minAGUA DESTILADA: 5min

ACIDO OXALICO AL 5%: Hasta que se decoloreLAVAR CON AGUA DESTILADA

ALUMBRE FERRICO AMONIO AL 2%: 2minAGUA DESTILADA: 5min

SOLUCION DE PLATA AMONIACAL: 3minLAVAR CON AGUA DESTILADA RAPIDAMENTE

FORMOL AL 10%: 3minLAVAR CON AGUA DESTILADA

CLORURO DE ORO AL 1/500: 10minLAVAR CON AGUA DESTILADA

HIPOSULFITO SODICO AL 5%: 1min

LAVAR CON AGUA DESTILADAPASAR POR AGUA CORRIENTE

ALCOHOL AL 96%: 2x5minALCOHOL AL 100%: 2x5min

XILENO Y MONTAR

TECNICA

Consisten en fibras muy finas de colgeno tipoIII, muy extendidas en el tejido conectivo.

Las membranas basales secompone principalmente decolgeno tipo IV y laminina.

Demuestran tanto las

fibras reticulares comomaterial de lamembrana basal.

Se trata de una tcnica de impregnacinargntica que utiliza como base fuerte el

hidrxido potsico y como agente reductor elformol. 1- Fijacin: formalina al 10%. 2- Cortes:en parafina, congelacin o en celoidina. 2 - 4

Tinciones deretculo


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Etanol de 50, 70, 80, 90, 96y 100

Hematoxilina frrica de WeigertVerde luzAgua destilada

COMPONENTES

Tincintricrmica de

MassonSe utilizan en combinacin con varios

colorantes aninicos

NCLEOCITOPLASMA

Evaluacin del tipo y cantidadde material extracelular

C O L G E N O

2x10 min en xileno para desparafinar2x10 min en etanol 10010 min en etanol 9610 min en etanol 8010 min en etanol 505 min en agua destilada5 min en Hematoxilina frrica de Weigert (10 min si el colorante lleva ms de 5 das hecho)5 min en agua corriente para diferenciacin.3 min lavado en agua destilada5 min en fucsina-escarlata.2 min lavado en agua destilada15 min en cido fosfomolbdico al 5% en agua destilada.10 min en verde luz al 2 % (puede ser sustituido por azul de anilina).Unos segundos en agua destilada.3 min de diferenciacin con cido actico al 1% en agua destiladaDeshidratado rpido, unos segundos, en etanol de graduacin creciente: 80, 96 y 1002x10 min en xilenoMontaje

TECNICA


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Hematoxilina alcohlicaHematoxilina ------------------------------------10 gr.A lcohol96 -------------------------------------100 ml

Cloruro frrico al 10 %:Cloruro frrico ----------------------------------10 gr.

A gua destilada ----------------------------------100 ml

Yoduro potsico al 10 %:Y oduro potsico --------------------------------10 gr.

Ag ua destilada ----------------------------------100 mlSolucin de Picrofucsina

Fucsina cida a l 1 % ----------------------------1.3 ml -cido pcrico a saturacin ---------------------- 9.7 ml

PREPARACIN

Sim embargo la tincin de Gieson Verthoeff-van (VVG) es la ms popular porque es rpida

Ambas tcnicas se suelen establecer en el contexto tricrmico.

Ncleos celulares se tien de marrn a negro

Las tcnicas tipo Weiger son bastantes especficas para la elastina, y sonconsideradas por muchos como el mtodo de eleccin para la demostracin de

estas fibras extracelulares

HidratarHematoxilina deVerhieff por 30

minutosLavar

Cloruro frrico al1% una pasadaPicrofucsina una

pasadaDeshidratar conalcohol al 50%Aclarar con xilol

Montar

PROCEDIMIENTO

TINCIN PARA FIBRASELSTICAS

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